Instituto Universitario de la Polica Federal Argentina

Facultad de Ciencias de la Criminalstica

Estudio de manchas de sangre

Introduccin:

Antes de comenzar a desarrollar el tema de la investigacin de manchas de

sangre; se hace necesario describir las caractersticas de la misma, funciones en el
organismo y sistema en donde efecta dichas funciones.

La sangre podra definirse de manera simple, como un tejido lquido,

qumicamente como una suspensin celular en un medio acuoso salino. Tomando esta
ltima definicin recordemos que una suspensin en qumica es un sistema heterogneo y
como tal presentar ms de una fase. Efectivamente los elementos celulares, slidos,
estn suspendidos en un medio lquido, que denominamos plasma, en el cual tambin
estn normalmente disueltos diversos solutos, como electrolitos, protenas, hidratos de
carbono, lpidos, etc.

La funcin de este tejido es la de transportar, tanto el oxgeno como el anhdrido

carbnico, productos relacionados con la respiracin de cada una de las clulas de un
organismo vivo, como tambin, los elementos nutrientes y los productos de catabolismo
de la funcin metablica de las mismas. Esta funcin puede efectuarse mediante la
utilizacin del aparato circulatorio, el cual es un sistema cerrado por el que circula la
sangre constituido por los vasos sanguneos e impulsada por una bomba aspirante y
propelente, que es el corazn.

Este aparato est distribuido por toda la anatoma mediante arterias, venas y
capilares de modo de poder abastecer a todas y cada una de las clulas de la
anatoma.

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Referencias anatomo-histolgicas

En la sangre bsicamente tenemos tres tipos de clulas, los glbulos rojos o

hemates, los glbulos blancos o leucocitos y las plaquetas.

Los glbulos rojos o hemates son clulas anucleadas, de forma cilndrica

bicncava de aproximadamente 7 u de dimetro. En su interior contienen una solucin
concentrada, aproximadamente al 30 %, de una protena denominada hemoglobina y que
es la responsable del transporte e intercambio gaseoso ya mencionado.

El oxigeno en los pulmones se combina con el grupo hemo de la protena, que

contiene un tomo de Fe, formndose la oxihemoglobina, dicho oxgeno es liberado en
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los tejidos a nivel celular, intercambiando por el C02 producto de la respiracin celular,
formndose ahora la carboxihemoglobina, la cual, ahora circular nuevamente hasta los
pulmones, en donde se producir un nuevo intercambio de los gases para regenerarse la
oxihemoglobina ya mencionada. Este intercambio gaseoso se produce simplemente por
accin de la presin parcial de los gases, siendo a nivel pulmonar, mayor la de O2 y a
nivel tisular, mayor la de C02, y por la ley de accin de masas es posible tal intercambio.

Como ya se menciono la segunda importante funcin de la sangre es la aportar los

elementos nutrientes y ayudar a trasladar los productos metablicos hasta los rganos de
eliminacin.

Un ser humano tiene aproximadamente 15 g de Hb (Hemoglobina) por cada 100

ml de sangre. Por supuesto que estos valores son sumamente variables segn, sexo, edad
y situacin. , estando disminuidos sensiblemente, en casos de anemia, e incrementado en
individuos con importante actividad fsica.

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La volemia, es decir el volumen total de sangre en un humano, es

aproximadamente el 7 % del peso total. Por lo tanto en un sujeto de 70 Kg, la volemia
ser aproximadamente de 5 litros.

La concentracin de glbulos rojos oscila entre 4 y 5 millones/mm 3, valores

tambin bastante variables segn sexo, edad y condicin. Por ej. En una mujer
embarazada es frecuente una disminucin de alrededor de un 15 %, lo cual es fisiolgico
debido a su estado de gestacin. Tambin el organismo puede modificar sustancialmente
tal valor segn las condiciones de vida. Es tpico el ejemplo de una
persona radicada a importante altura sobre el nivel del mar, por ej. la ciudad de La Paz
(Bolivia), que tendr aumentado considerablemente tal concentracin a raz del menor
tenor de oxgeno en el aire que respira y que el organismo trata de compensar con tal
aumento. Esa misma persona, si se radicara a nivel del mar, paulatinamente disminuira
su nivel globular.

Los glbulos blancos o leucocitos, tienen ncleo y citoplasma y los podemos

dividir segn el aspecto del ncleo en polinucleados y mononucleados; corresponden a
los primeros, los neutrfilos, eosinfilos y basfilos y a los segundos linfocitos y
monocitos. La dimensin del dimetro de los linfocitos es un poco menor que la de los
hemates, alrededor de 5 u, mientras los restantes son mayores, aproximadamente 10 u.

Se los diferencia claramente en preparados que se denominan frotis o extendidos,

que consiste en depositar una gota de sangre fresca sobre un extremo de un portaobjetos y
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apoyando sobre la misma otro portaobjetos con una inclinacin adecuada, realizar un
desplazamiento suave y constante de manera de generar una lamina fina de material, el
cual se fija al secarse y se colorean con un colorante apropiado. El ms comn se
denomina May Grunwald-Giemsa y observados al microscopio, por las distintas
caractersticas morfolgicas y tintoriales e incluso sus nombres estn relacionados con
las modificaciones que ejercen sobre el colorante por sus distintos pH.

La concentracin leucocitaria en un individuo normal vara de 5000 a 8000 /

mm3, teniendo una distribucin que podramos establecer as:

Neutrfilos 60 70 %
Eosinfilos 2 - 4 %
Basfilos 0-2%
Linfocitos 25 - 35 %
Monocitos 4 - 8 %

Reitero que estos valores pueden modificarse bastante y se deben tomar solo como
referencia.

En ciertas circunstancias la concentracin puede incrementarse sustancialmente,

fundamentalmente como respuesta a una agresin bacteriana, es tpico en casos de
infecciones dentales, intestinales o vesicales. Del mismo modo como la primera defensa
ante el agresor bacteriano est constituida por los neutrfilos l % de los mismos tambin
se ver sustancialmente incrementado en estas situaciones.

Los linfocitos tienen respuesta ante las agresiones virsicas, por ejemplo en la
mononucleosis infecciosa se observa un notable aumento de su participacin, que llega
incluso a invertir la proporcin detallada ms arriba. Generalmente acompaados por
los monocitos.

Los eosinfilos se incrementan durante un proceso alrgico o una parasitosis, y su

proporcin puede aumentar considerablemente hasta valores del orden del 20 %.

Las plaquetas son pequeas clulas, que se encuentran en el orden de 200.000 a

300.000 /mm3 y cuya funcin es la de producir obturaciones en las pequeas lesiones que
pueden sufrir los vasos por los que circula la sangre, de manera de anular pequeas
hemorragias que podran producirse. Cuando por alguna patologa dicha concentracin
se modifica, pueden producirse alteraciones importantes, pues una disminucin ira
acompaada de la aparicin de hematomas, prpura, y un incremento puede producir
obstrucciones en el flujo de los pequeos vasos con las complicaciones de modificar o
impedir el normal reflujo sanguneo.

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Finalmente el medio dispersante, al que hemos denominado plasma, es una

solucin acuosa que contiene sales, lpidos, hidratos de carbono, protenas y tambin
numerosas sustancias metablicas, hormonales, etc. que son fabricadas o absorbidas y
modificadas, fundamentalmente en el hgado y que deben ser transportadas a travs de la
anatoma de un ser vivo. Como veremos ms adelante la concentracin salina es crtica y
un existe un complejo sistema regulatorio para su conservacin.

Este complejo sistema, en estado lquido debe circular por todo el organismo a
travs de lo que denominamos aparato circulatorio para poder alcanzar todas y cada una
de las zonas en un proceso permanente de irrigacin por el cual se realizan los
mecanismos respiratorios y metablicos ya mencionados.

Dicho aparato circulatorio consiste en un circuito cerrado, con una bomba

impulsora que es el corazn, constituido por tejido muscular con caractersticas
particulares, tanto que tiene estructura de msculo estriado, por su resistencia y potencia,
pero funciona de manera autnoma es decir involuntaria y permanente como los
denominados msculos lisos.

El corazn esta dividido por un tabique central en dos partes, a su vez

conformadas cada una por dos cavidades, la superior se denomina aurcula y la inferior
ventrculo, las cuales estn conectadas por una vlvulas de caractersticas particulares
dado que debe evitar el reflujo sanguneo. La vlvula que conecta la aurcula y el
ventrculo derecho, se denomina tricspide, la que conecta la aurcula y el ventrculo
izquierdo, mitral. La sangre entra al corazn por

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las aurculas y luego de pasar por un proceso de sstole auricular y distole ventricular,
pasa al ventrculo, por una posterior sstole de este ltimo es repartida por todo el
organismo.

La sangre llega al corazn proveniente del organismo por un sistema de conductos

que se denominan venas, siendo las ms importantes por su caudal y proximidad la
denominada cava que desemboca en la aurcula derecha, de all por el proceso ya
mencionado pasa al ventrculo del mismo lado y por una arteria llamada pulmonar, se
denomina as por salir del corazn a pesar de conducir sangre venosa, se conecta con el
pulmn, en donde se produce la oxigenacin, de dicho rgano retorna a la aurcula
izquierda, ahora por la vena pulmonar, por entrar al corazn a pesar de traer sangre
oxigenada, luego pasa al ventrculo izquierdo y de all a travs de un sistema de
conductos denominados arterias se reparte por toda la anatoma, la primera de ellas es la
aorta.

El aparato circulatorio esta entonces constituido por una serie de conductos que
se van subdividiendo y que se denominan arterias, por donde circula la sangre impulsada
por el corazn que en el mbito de los distintos tejidos forman una fina trama capilar
para permitir el intercambio de gases y nutrientes mencionados y luego retorna por un
sistema de conductos que se denominan venas. La frecuencia del latido cardaco es del
orden de 60-70 por minuto en un individuo en reposo, dicho ritmo aumenta
considerablemente con la actividad fsica.

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La sangre puede ser extrada del organismo por puncin venosa, cuando se la
acondiciona en un recipiente, cualquiera sea su calidad, se produce un cambio en su
estado de agregacin pasando a fase slida, dicho proceso se denomina coagulacin y
normalmente no sucede mientras se encuentra dentro del aparato circulatorio.

En el complejo mecanismo de coagulacin participan numerosos factores, uno de

ellos es el catin Ca++ ,(Factor IV), sustrayndolo del medio se inhibe la coagulacin.
Esto puede hacerse con sustancias complejantes del calcio, tales como el citrato de sodio,
oxalato de sodio, Edta di sdico, todos ellos fijan calcio y actan como anticoagulantes
in Vitro para permitir estudiar la sangre en su estado normal, por ejemplo para poder
hacer un recuento globular, o tambin para utilizarla en transfusiones, pues el mecanismo
de coagulacin es irreversible y por consiguiente en numerosos casos debe evitarse que
suceda.

Asimismo tambin cuando se trabaja con sangre es necesario tener en cuenta la

concentracin salina, es por ello que los mecanismos de hidratacin en medicina se
efectan con soluciones de una concentracin dada, que se denomina isotnica, tal el
caso de la denominada solucin fisiolgica (ClNa al 8.5 g/l en agua), la solucin de
Ringer y la solucion glucosada al 5%.

Sucede que la membrana del glbulo rojo funciona como membrana osmtica es
decir deja pasar agua del lado ms diluido hacia el ms concentrado. De modo que si
pusiramos glbulos rojos en agua destilada, paulatinamente se producira el pasaje de
agua hacia adentro de la clula hasta provocar el estallido de la misma, que
denominamos lisis. Si por el contrario colocamos glbulos rojos en una solucin muy
concentrada se producir la salida de agua desde el interior hasta que se produce el
vaciado de los glbulos, quedando solamente las membranas y por supuesto
desapareciendo como clulas.

En funcin de lo expuesto vemos que si lo que interesa es conservar la forma y

caractersticas de la sangre, no solo es necesario el anticoagulante sino tambin la
concentracin salina para mantener el volumen real de las clulas. En relacin con esto,
un parmetro que se mide habitualmente en anlisis clnicos es el volumen globular o
hematocrito, que constituye l % del volumen de la sangre que est constituido por los
glbulos, relacionado con el volumen total de la sangre. El mismo se establece por
centrifugacin de modo de separar las clulas suspendidas por decantacin quedando un
sobrenadante lquido constituido por el plasma. El valor normal de este parmetro oscila
en 40-45 % y por supuesto que para establecerlo de manera coherente se deben respetar
los volmenes originales de los glbulos rojos.

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Referencias inmunolgicas

El organismo tiene un sistema de respuesta a la presencia de protenas extraas

que recibe el nombre de mecanismo inmunolgico. Todos hemos escuchado referencias a
estos fenmenos que se denominan de rechazo en relacin por ejemplo con los
trasplantes de rganos. Sucede que las protenas y en general los polipptidos, tienen una
caracterstica fundamental en su composicin que le otorga lo que denominamos funcin
antignica, que provoca la respuesta de este sistema inmunolgico cuando se encuentran
presentes. A esta condicin se la denomina funcin antignica. Es decir, se denomina
capacidad antignica a la caracterstica de provocar generacin de anticuerpos por la
presencia del agente antignico. Vulgarmente se denomina antgeno al agente generador
y anticuerpo al producto formado por el sistema inmunolgico.

El concepto de inmunidad

En la lucha por la existencia, los organismos estn expuestos a una legin de

invasores que son los microorganismos: virus, bacterias, protozoos, hongos o sustancias
qumicas producidas por ellos.

Para impedir los efectos nocivos de ellos, los animales han desarrollado a lo largo
de la evolucin una serie de mecanismos de defensa, y de ellos el ms sofisticado es el
sistema inmunitario.

1. Defensas inespecficas
o Barreras externas
Piel
Mucosas
Secreciones

o Clulas fagocitarias
Micrfagos
Macrfagos

2. Defensas especficas
o La respuesta humoral
Antgeno y anticuerpo
La reaccin antgeno-anticuerpo

o La respuesta celular
Tipos de clulas del sistema
Mecanismo de accin
Comunicacin entre las clulas del sistema

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Defensas inespecficas
Dentro de este apartado, se incluyen aquellas defensas del organismo, cuya respuesta es
la misma, con independencia del tipo de microorganismo que intenta colonizarnos o de sustancia
extraa que pueda afectarnos.

Barreras externas: Para invadir el cuerpo de los animales, los microorganismos deben atravesar su
piel o bien penetrar por alguno de sus orificios naturales. La piel de los mamferos es una barrera
mecnica gracias a su grosor, al proceso de queratinizacin y a la descamacin de las capas
externas.

Adems la secrecin de las glndulas sebceas y el sudor determinan la existencia de un pH

cido. Por aadido, la flora bacteriana de la piel impide el asentamiento y desarrollo de otros
microbios que se depositan sobre ella.

En las aberturas naturales, como boca, ano, vas respiratorias, urogenitales y digestivas,
las barreras defensivas son las secreciones mucosas que recubren los epitelios
.
En la saliva, en la secrecin lacrimal y en la secrecin nasal, existe una enzima, la
lisozima; en el esperma la espermina, ambas con funcin bactericida. La secrecin cida del epitelio
vaginal y conducto urogenital, y de los conductos digestivos, forman un ambiente desfavorable para
el desarrollo de microorganismos. En las mucosas respiratorias, los microbios y las partculas
extraas quedan atrapados en el mucus y son eliminados mediante el movimiento ciliar de las clulas
epiteliales, por la tos y el estornudo.

La piel y todas estas secreciones reciben el nombre de barreras defensivas primarias.

Clulas fagocitarias
Los fagocitos son clulas con capacidad fagocitaria, que pueden destruir sustancias
extraas y clulas envejecidas, a las que engloban con sus pseudpodos para luego digerirlas en el
citoplasma.

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1. Los neutrfilos, denominados micrfagos, son los ms abundantes y los que presentan
mayor actividad fagocitaria. Acuden al lugar de la infeccin atravesando la pared de los capilares
sanguneos (diapdesis), para llegar a los tejidos y fagocitar a los grmenes patgenos.
Los neutrfilos realizan un proceso de heterofagia que les causa la muerte, como expresa
De Duve (La clula viva, Ed. Labor)" Los leucocitos estn creados de tal manera que slo una vez
en la vida les est permitido comer opparamente. Se fabrican en la mdula sea, y de ella salen,
cargados de enzimas lisosmicas y de otras armas mortferas, en busca de enemigos. Cuando los
encuentran, devoran tantos como pueden. Poco despus mueren a consecuencia de esta jugarreta
de la seleccin natural, que les lleva a cometer semejante acto de gula, fatal para ellos; pero
destinado a un bien superior, el de todo el organismo."

El resultado de esta batalla origina el pus, que no es ms que el montn de cadveres de

bacterias y fagocitos.

2. Los macrfagos, procedentes de los monocitos de la sangre, emigran a los distintos tejidos
recibiendo diversos nombres. La reserva de macrfagos constituye el sistema retculo endotelial
(S.R.E.), interviene en la defensa, destruccin de clulas viejas y regeneracin de los tejidos.

Se trata de un conjunto de clulas, que en cierto modo, dirigen la complicada red de

procesos encaminados a eliminar la infeccin y regenerar los tejidos daados, para ello liberan
interleukinas 1, que se comportan como un mensajero inmunitario y ejerce su accin sobre la
totalidad del organismo.

Defensas especficas
Las defensas especficas se basan en el reconocimiento de los
determinantes antignicos localizados en la superficie del germen patgeno o en
las toxinas producidas por stos. Una vez que el sistema inmunitario reconoce la
naturaleza del antgeno, lanza contra l dos tipos de respuestas, que actan de
modo secuencial:
La respuesta humoral, basada en la sntesis de anticuerpos.
La respuesta celular, mediada por linfocitos T y por los linfocitos B que destruyen los
microorganismos portadores de dicho antgeno, y las clulas propias si estn infectadas por ellos.

La respuesta humoral.
En el plasma sanguneo, se encuentran un tipo particular de globulinas que tienen la
capacidad de de reaccionar especficamente con las partculas extraas (antgenos), anulando su
posible efecto patgeno. Se las denomina genricamente inmunoglobulinas o anticuerpos.

Antgeno y anticuerpo

Se denomina antgeno a cualquier sustancia extraa que, introducida en el

interior de un organismo, provoque una respuesta inmunitaria, estimulando la
produccin de anticuerpos.

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Los anticuerpos son protenas

pertenecientes al grupo de las gama-
globulinas o inmunoglobulinas,
constituidas por la asociacin de cuatro
cadenas polipeptdicas unidas entre s
mediante puentes di-sulfuro, dos cadenas
se denominan pesadas y las otras dos
ligeras. A su vez, cada una de las
cadenas ligeras y pesadas, incluye una
regin variable, cuya secuencia de
aminocidos es peculiar de cada
anticuerpo, y una regin constante, con
la misma secuencia en todos los
anticuerpos.
La reaccin antgeno-anticuerpo.

La unin antgeno-anticuerpo es especfica, cada anticuerpo reconoce y se une a un

determinado antgeno. Esta unin se realiza por medio de uniones intermoleculares entre el
antgeno y la zona del anticuerpo, y da lugar al complejo antgeno-anticuerpo segn el modelo
llave-cerradura.
Las reacciones antgeno-anticuerpo tienen diversas consecuencias y existen varios tipos
de reacciones:

En este caso el
antgeno se encuentra
disuelto, y al unirse
los anticuerpos a los
antgenos se forman
unos macro-complejos
moleculares,
formndose como una
red tridimensional
que debido a su
tamao precipita.

En las reacciones de
aglutinacin, un anticuerpo
puede unirse a la vez a dos
antgenos, as-mismo cada
antgeno puede unirse a varios
anticuerpos y formar un
entramado de complejos
antgeno-anticuerpo.

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Si el antgeno es
una sustancia txica, la unin
con el anticuerpo provoca su
neutralizacin, de modo que no
puede ejercer su efecto txico.

Reaccin de
Opsonizacion

El anticuerpo puede recubrir

al antgeno para que sea
reconocido por los fagocitos,
esta reaccin se llama
opsonizacin, y es como si
los antgenos fueran ms
"sabrosos" para ser
fagocitados.

1. Respuesta celular
1. Tipos de clulas del sistema.
Las clulas plasmticas se forman en la mdula roja de los huesos y tras un proceso de
diferenciacin, pasan a la sangre. Uno de estos tipos de clulas son los linfocitos. Algunos adquieren
sus propiedades en la misma mdula sea: son los linfocitos B. Otros van a especializarse al timo, una
glndula situada entre la trquea y el esternn: son los linfocitos T.

FORMACIN MADURACIN ALMACENAMIENTO DISTRIBUCIN

rganos primarios rganos secundarios

M. sea:
Medula sea Circulatorio
linfocitos B rganos linfticos, bazo,
amgdalas, apndice, p.
Timo: Peyer
Timo Linftico
linfocitos T

Finalizado el proceso de especializacin, los linfocitos B y T pasan a los ganglios,

al bazo y a los dems rganos linfticos y algunos de ellos se incorporan a la corriente
sangunea, donde permanecen a la espera de entrar en contacto con los antgenos.

2. Mecanismo de accin.
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Cuando se detecta la presencia de un antgeno, un macrfago lo fagocita y lo

transporta a los ganglios linfticos. All presenta fragmentos del antgeno a los linfocitos T,
que produce la formacin de linfocitos T cito-txicos, que pueden destruir directamente las
clulas infectadas, y de linfocitos T auxiliares, que facilitan el desarrollo de los linfocitos
B.

Los linfocitos T citotxicos presentan en su superficie unas molculas receptoras

semejantes a los anticuerpos, mediante las cuales se unen especficamente a los antgenos de la
membrana de las clulas. El linfocito inyecta sus enzimas en el interior de la clula y provoca su
degradacin. Este tipo de linfocitos es el responsable del rechazo en los trasplantes de tejidos.

Los linfocitos B se activan ante la presencia del antgeno y se encargan de elaborar un

anticuerpo especfico. Sin embargo, no empiezan a producir este anticuerpo hasta que no reciben
la "seal" de los linfocitos T auxiliares. Finalmente, superada la infeccin, otro tipo de linfocitos T
supresores se encargan de detener las reacciones inmunitarias.

3. Comunicacin entre las clulas del sistema

Ante la presencia del antgeno, los linfocitos T auxiliares responden segregando una serie
de mediadores, las interleucinas o interleukinas que activan otros glbulos blancos (macrfagos y
linfocitos).

Las mejor conocidas son las interleucinas 1 y 2 (IL-1, IL-2 en el esquema). La interleucina
1 acta como mediador soluble en el proceso de inflamacin y como factor de crecimiento y
diferenciacin de las clulas B. La interleucina 2 es el factor de crecimiento y diferenciacin de
las clulas T.
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Algunos ejemplos de la actividad del mecanismo inmunolgico

Todos conocemos las caractersticas de las denominadas vacunas, tienen la propiedad de

generar defensas para una determinada enfermedad, sarampin, poliomielitis, tuberculosis, etc.
En general el mecanismo consiste en inocular el agente infectante en condiciones atenuadas, de
modo que si bien no puede generar la enfermedad tiene su capacidad antignica intacta para
generar las defensas adecuadas, anticuerpos, los cuales podrn defender al organismo si se
plantea la invasin por el agente infectante real. Por supuesto esta generacin es paulatina, y es
por ello que la vacunacin no puede efectuarse cuando ya comenz la enfermedad, sino que debe
aplicarse preventivamente, de modo que haya tiempo para elaborar los anticuerpos.

Otro ejemplo que sirve para entender esta situacin, es el caso del nacimiento de un bebe
Rh positivo a partir de una madre que sea Rh negativo. El factor Rh es una protena, que como
veremos mas adelante, puede estar presente o no en la pared del glbulo rojo, cuando lo est, se
trata de un sujeto Rh positivo, de lo contrario se tratar de un sujeto Rh negativo. En el caso
planteado, el feto lo tiene, y por consiguiente durante el embarazo, por tener funcin antignica
va sensibilizando el mecanismo inmunolgico de la madre, que por no tenerlo, lo reconoce y
comienza a reaccionar. Sin embargo, raramente el nivel de anticuerpos generado es alto durante
un primer embarazo y por lo tanto es probable que no haya demasiados problemas.

Si sucede un segundo embarazo con las mismas caractersticas, el mecanismo

inmunolgico de la madre est sensibilizado y rpidamente alcanzar el nivel de anticuerpos una
tasa alta, que comenzar a afectar los glbulos rojos del feto y como consecuencia provocar su
destruccin. A eso se debe la necesidad de cambiar la sangre del bebe. Sucede que sus glbulos
rojos estn profundamente deteriorados y lisados parcial o totalmente, por lo tanto, cuando se
produce el nacimiento y la necesidad de autonoma respiratoria, la incapacidad es manifiesta y a
ello se debe la necesidad de transfusin inmediata.

En algunos casos las lesiones se evidencian simplemente por la ictericia del recin
nacido, en donde el efecto no ha sido tan profundo pero la hemoglobina liberada por los glbulos
rojos daados se ha transformado en bilirrubina la que es responsable de dicha ictericia.

Nuevamente verificamos que el sistema inmunolgico funciona ante un factor con

propiedades antignicas, pero sin una respuesta inmediata sino paulatina.

Volviendo al tema de la sangre todos conocemos la existencia de diversos tipos de sangre,

en el sistema ms comn el ABO, conocemos la existencia de grupos sanguneos diferentes: A, B,
AB y O, ello es debido a la presencia y o ausencias de dos antgenos, A y B en la membrana de los
glbulos rojos, as los del grupo A, lo son por tener en su membrana el antgeno A, los del grupo
B, el antgeno B, los del grupo AB, tendrn el antgeno A y el B y los de grupo O (mal denominado
grupo 0) se denominan as por no tener ninguno de los dos.

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Cuando comenz a experimentarse con transfusiones de sangre, pudieron

verificarse situaciones contradictorias, pues en algunos casos se obtenan resultados
positivos con espectaculares mejoras y en otros casos el paciente empeoraba
manifiestamente y llegaba hasta la muerte rpidamente.

Posteriormente y con la clasificacin de la sangre por grupos pudo explicarse

dichas contradicciones, no obstante no se justificaba la rapidez de la respuesta obtenida.
Esto se explic cuando se estableci que en el plasma sanguneo podan pre-existir
anticuerpos anti A y anti B, los cuales eran responsables de la inmediata respuesta a la
presencia antignica.

Por consiguiente de acuerdo al Sistema ABO la sangre contiene segn su tipo la

siguiente composicin antignica:

Tipo A Antgeno A Anticuerpo anti B

Tipo B Antgeno B Anticuerpo anti A
Tipo AB Antgeno AB No tiene anticuerpos
Tipo O No tiene antgenos Anticuerpos anti A y anti B

En funcin del cuadro precedente es simple advertir que no pueden suministrarse

glbulos con caracterstica antignica incompatible con los anticuerpos presentes en el
receptor. De ese modo podremos concluir que los glbulos O, por carecer de antgenos
sern compatibles con todos los receptores sean del grupo que sean. (Es por ello su
denominacin de dador universal). Los glbulos AB solo sern tiles para receptores del
mismo grupo, pues los mismos no tienen anticuerpos mientras que en cualquiera de los
otros existen anticuerpos y por consiguiente sern rechazados. El mismo razonamiento
puede hacerse para los glbulos A y B, verificndose que sern tiles para sus
respectivos grupos. Es destacable el hecho de que un receptor AB por no tener
anticuerpos podr recibir sangre de cualquier grupo.

Este concepto de estructura inmunolgica es fundamental para entender con

claridad todos los mtodos que veremos para establecer el grupo sanguino de una
mancha de sangre, de modo que se sugiere se preste particular atencin a su correcta
comprensin.

Determinacin de Grupo y factor Rh en sangre fresca.

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Denominamos sangre fresca a sangre recientemente extrada por puncin venosa

y anticoagulada. Seguramente habrn visto en alguna ocasin que se ofrece efectuar la
determinacin del grupo sanguneo punzando el pulpejo del dedo y luego aplicar una
gota de sangre sobre una tarjeta de plstico, el mtodo funciona pero para mayor
seguridad numerosos laboratorios efectan la determinacin con sangre obtenida por
puncin venosa.

Como ya mencionamos para evitar la coagulacin de la sangre una vez extrada

es necesario utilizar un complejante del calcio, es nuestro caso utilizaremos EDTA di
sdico, de modo de mantener la forma de las clulas y evitar el mecanismo de la
coagulacin. El mtodo consiste en colocar en un tubo adecuado que contenga II gotas
del anticoagulante mencionado en solucin al 3 %, 2 ml de sangre recientemente
extrada, y agitar suavemente para lograr la mezcla intima de sangre y solucin
anticoagulante.

Con el material as obtenido se practica el anlisis confrontando sobre una placa

de vidrio limpia y seca, que presenta 3 crculos bien delimitados, una gota de la sangre
homogeneizada con una gota de Suero Anti A, otra con suero Anti B y una tercera con
suero Anti D (o anti Rh), previa ambientacin a temperatura ambiente. Una vez
depositadas ambas gotas en cada crculo, se procede al mezclado de ambas con un palillo
observndose si aparece o no, aglutinacin en cada caso, la misma se manifiesta por la
formacin de grumos ms o menos importantes.

Debemos tener en cuenta que estamos confrontando los anticuerpos presentes en

los sueros Anti respectivos con los antgenos eventualmente presentes en la sangre
investigada. Por consiguiente segn los resultados obtenidos tipificaremos la sangre
problema.

En el siguiente cuadro se puede verificar las distintas variantes de resultados

posibles.

Suero anti A Suero anti B Suero anti D (Rh) Grupo Sanguneo

Positivo Positivo Positivo AB Rh positivo
Positivo Negativo Positivo A Rh positivo
Negativo Positivo Positivo B Rh positivo
Negativo Negativo Positivo O Rh positivo

Como sabemos los distintos sueros aportan los anticuerpos respectivos y un

resultado positivo indica que en los glbulos se estableci la presencia de los antgenos
respectivos, en funcin de ello es el resultado que se escribe en la columna Grupo
sanguneo.

Los sueros tipificadores se obtienen mediante la inoculacin reiterada de glbulos

rojos lavador A o B, respectivamente, a animales de experimentacin, habitualmente
carneros o caballos. Los glbulos rojos lavados se obtienen a partir de sangre
anticoagulada de sujetos A o B, en las que por centrifugacin, se procede a separar los
elementos celulares del plasma, el cual se decanta y es reemplazado 2 3 veces con
solucin fisiolgica, de modo de eliminar todas las protenas contenidas en el plasma,
quedando finalmente una suspensin en solucin fisiolgica de hemates portadores de
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Prof. Dr. Palacios, Carlos A.
 Instituto Universitario de la Polica Federal Argentina
Facultad de Ciencias de la Criminalstica

los respectivos antgenos que sern los responsables de la generacin de los respectivos
anticuerpos por parte del sistema inmunolgico del animal de experimentacin.

La inoculacin sucesiva estimula la produccin de anticuerpos y cuando se

alcanza un ttulo (concentracin) apropiada, se procede a extraer sangre al animal,
permitiendo su coagulacin y obtenindose as un suero con elevada concentracin de
anticuerpos anti A o anti B segn el caso.

Estos sueros se producen de manera comercial de modo que el acceso a los

mismos es sencillo.

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