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PREPARACION DE MEDIOS Y

SIEMBRA

I. MATERIALES Y MTODOS:

MATERIALES
Placas petri
Tubos de ensayo
Arroz
Agua destilada
Agar sabouraud
Gradillas
Pipetas
Asa drigalsky
Mecheros
Autoclave
Matraz
Algodn y pabilo
Cocina elctrica
Solucin salina fisiolgica (ssf)

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METODOS
Se prepar Agar Sabouraud de la siguiente manera:

1L ______ 65g

0.5L _____ X

x= 9.75g

Se verti 150 ml de agua destilada a un matraz.


Se agreg 9.75g de Agar Sabouraud.
Se tap con algodn y se amarr con pabilo.
Se llev a ebullicin la solucin mediante la cocina elctrica, para
homogenizar la muestra.
Se llev al autoclave, se dej calentar hasta que salga vapor de las
vlvulas en un tiempo de 20 a 30 minutos, se cerr las vlvulas,
se regulo el tiempo y temperatura y se prendi el botn del
calentador.
Se retir la muestra de Agar Sabouraud del autoclave.
Se dej enfriar por media hora.
Se verti en 4 placas Petri la solucin, mediante una pipeta
previamente esterilizada, hacindose por duplicado.
Se agreg diferentes diluciones a10 2 , 10 3 , 10 4 , 10 5 . de
solucin salina conteniendo 10g de arroz, (0.1 ml a cada placa)
Se hizo la siembra por superficie mediante la esptula Drigalski,
previamente a alcohol.
Las placas sembradas se mantuvieron a temperatura ambiente
durante 1 semana.
Pasado la semana observamos los resultados de cada uno de las
placas.

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II. RESULTADOS

Tabla n 1: datos obtenidos en la prctica

MEDIO DE CULTIVO Agar Sabouraud (9.75g)

SOLUCIN SALINA FISIOLOGICA 90ml

MUESTRA Arroz

CANTIDAD PREPARADA 150 ml

PH DE LA SOLUCIN 6

Se uso el autoclave
CONDICIONES DE ESTERILIZACIN Temperatura: 121 C
Tiempo: 15 a 20 min
Se uso la estufa
Temperatura:
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
ambiente 30C
Tiempo: 1 semana

Siembra por estra con el aza


TIPO DE SIEMBRA
drigalsky.

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FIGURA N1: SOLUCIN DE
AGAR SABOURAUD

FIGURA N2:
DIFERENTES
SOLUCIONES DE
SOLUCIN SALINA CON
ARROZ

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FIGURA N3: SOLUCIN SABOURAUD EN PLACAS

FIGURA N4: CRECIMIENTO MICROBIANOS EN PLACAS PETRI

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FIGURA N5: CRECIMIENTO MICROBIANOS CON DILUCION A 10-2

FIGURA N6: CRECIMIENTO MICROBIANOS CON DILUCION 10-3

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FIGURA N7: CRECIMIENTO MICROBIANOS CON DILUCION 10-4

FIGURA N9: CRECIMIENTO MICROBIANOS CON DILUCION 10-5

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Se observaron colonias de texturas
algodonosas y terrosas de color
negro, plomo, blanco y verde, con
el borde ms plido casi blanco.
Algunos bordes eran irregulares,
otros regulares con formas
convexas y cncavas.

Tambin se observaron
microorganismo que no tenan
porque aparecer.

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III. DISCUSIONES
La siembra en placas Petri nos permite cultivar microorganismos gracias a que contiene
los nutrientes necesarios para su desarrollo. El crecimiento de los microorganismos se
manifiesta de formas diferentes dependiendo de la tcnica utilizada para su siembra y
del tipo de medio en el que se realiz dicha siembra, de esta forma es posible obtener
caractersticas morfolgicas distintas cuando se realizan siembras de una misma muestra
en diferentes medios de cultivo o viceversa. Las descripciones de colonias en placas de
Agar incluirn tamao, forma, color. Pueden obtenerse tambin datos semejantes de los
medios de cultivos en medios inclinado de Agar. Estas caractersticas del crecimiento
con frecuencia son tpicas de ciertas especies, aunque como en el caso de la morfologa,
aparecen a veces variaciones temporales en distintas condiciones de cultivo. (Carpenter,
1969)

Hernndez (2003) nos dice que se ha desarrollado una serie de tcnicas microbiolgicas
para aislar microorganismo y obtener cultivos puros. Una de ellas es la siembra en
placas de Petri por rayado la cual fue utilizada por nosotros. Esta tcnica nos hubiera
servido siempre y cuando se hubieran seguido las indicaciones correctas. Nosotros
obtuvimos malos resultados; en la placa aparecieron microorganismo que no tenan
porque aparecer. Esto se debi a que trabajaron muchas personas en la prctica, y as
ms rpido se contaminaron las soluciones, adems para que no haya contaminacin,
los tubos y pipetas tenan que estar cerca a los mecheros, pero en realidad no se realiz
as.

Si se hubiera realizado la prctica como es, con mucho cuidado hubiramos obtenido
muy buenos resultados; hubieras visto diferentes caractersticas de las colonias y saber
que microorganismos aparecieron en la siembra. Entre las principales caractersticas de
las bacterias figuran su tamao, su forma, su estructura y tipo de agrupacin. Estas
caractersticas constituyen la morfologa de la clula bacteriana y la definen en un grupo
taxonmico. (Pelczar, 1977)

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IV. CONCLUSIONES

El crecimiento bacteriano realizado en la siembra en placas por estra no fue


claramente observable
El crecimiento microbiano obtenido en la siembra por puncin manifiesta la
existencia de microorganismos aerobios.
En la siembra por puncin y estra se desarrollo un tipo de crecimiento filiforme.
El desarrollo de colonias formadas a partir de las diluciones seriadas presentan
caractersticas que difieren en forma, borde, elevacin, superficie y estructura
interna, lo cual es notablemente influenciado por las concentraciones de carga
microbiana del medio en el cual dichas colonias se desarrollan.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
CARPENTER, Philip. 1969. Microbiologa. 2da Edicin. Editorial
Interamericana, S.H. Mxico.
HERNANDEZ, A. 2003. Microbiologa industrial. Primera edicin. Editorial
EUNED. San Jos, Costa Rica.
PELCZAR. 1990. Microbiologa. 2da Edicin. Editorial. Mc Graw-Hill. Mxico.

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