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Antgenos de superficie

Gram positiva Gram negativa

http://iescarin.educa.aragon.es/depart/biogeo/varios/BiologiaCurtis/Seccion%205/5%20-%20Capitulo%2027.htm
Bacterias Gram positivas
Glicopolmeros de Pared Celular (CWGs)

Choline-binding proteins (CBPs) in S. pneumoniae,


Slayer proteins (S-LPs) in B. anthracis

Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)


Glicopolmeros anclados a
la pared celular (P-CWGs)

Estn conectados a la
pared celular por enlaces
fosfodiester entre el cido
N-acetilmurmico y una
unin especial formada
por N-acetilglucosamina y
N-acetilmanosamina
Glicopolmeros anclados a la
membrana citoplasmtica
(M-CWGs)

Non-glycosyl residues: A, dalanine; C, choline; M, mycolic acid; P, phosphate; S, succinate;


Y, pyruvate. Glycosyl residues: AAT-Gal, 2acetamido4-amino2,4,6-trideoxyd-galactose;
Ara, arabinose; Gal, galactose; GalNAc, N-acetylgalactosamine; Glc, glucose;
GlcA, glucuronic acid; Gro, glycerol; Ins, inositol; Man, mannose;
ManNAc, N-acetylmannosamine; Rha, rhamnose; Rto, ribitol.
Glicopolmeros de
pared Celular
(CWGs)
Zwitterinicos. Cargas por la
presencia de los grupos P- y
Alanina+. WTA y LTA.
Aninicos. Cargas negativas
por la presencia de otros
componentes aninicos (ej.
cido urnico).
Sin carga. Descritos en
actinomicetos. Muchos de
estos polmeros son
ramificados y contienen
manosa arabinosa y/o
galactosa.
Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)
Las mutantes individuales no
manifiestan cambios en
condiciones de laboratorio.
Funciones
Podran repeler sustancias
(antagnicas) cargadas o
impedir su accin.
Anclaje y mantenimiento
de las envolturas (ej. cpsula).
CWGs cargados podran
mantener el gradiente de
protones.
TA tienen afinidad a cationes
divalentes. Podran ser un
almacenaje de Mg2+.
Divisin celular.
Receptores.
Reconocimiento y colonizacin.
Microorganismo-Hospedero.
Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)
Bacterias Gram negativas
Membrana externa

Nature Reviews Microbiology 13, 605619 (2015)


Figure 1: The composition of the Gram-negative cell envelope.
The cell envelope of Gram-negative bacteria consists of two membranes, the
outer membrane and the cytoplasmic membrane. The cytoplasmic
membrane is composed of a phospholipid bilayer, whereas the outer
membrane comprises an interior leaflet of phospholipids and an exterior
leaflet of lipopolysaccharide (LPS); LPS is composed of lipid A, the core
oligosaccharide and O antigen. In between the two membranes is the
periplasmic space, which contains the peptidoglycan (PG) layer and
periplasmic proteins. The PG layer comprises long polymers of the repeating
disaccharideN-acetylglucosamineN-acetylmuramic acid (NAGNAM) that
are linked via peptide bridges: both traditional 43 (D-Alameso-
diaminopimelic acid (mDAP)) crosslinks and non-traditional 33 (mDAP
mDAP) crosslinks. Envelope proteins can be soluble (periplasmic; orange and
red spheres), transmembrane proteins (pink ovals and cyan cylinder) or
anchored into the leaflet of either membrane via covalently attached lipid
appendages (lipoproteins; green and blue ovals). Envelope stability comes
from various crosslinks: the covalent crosslinking of Braun's lipoprotein (Lpp) in
the outer membrane with the PG; the non-covalent interactions between the
PG and the porin outer-membrane protein A (OmpA); and the non-covalent
interactions between the PG and the TolPal (peptidoglycan-associated
lipoprotein) complex, which is composed of TolA, TolB, TolQ, TolR and Pal, and
spans the envelope from the cytoplasmic membrane across the periplasm to
the outer membrane.
Nature Reviews Microbiology 13, 605619 (2015)
Antgenos de
membrana
externa

Essentials of Glycobiology, 2nd edition


Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2009.
Lipopolisacridos

Lpido A
Core
Antgeno O

En E. coli, existen
aproximadamente 106
molculas de LPS por
clula, esto constituye
el 75% del rea de la
ME.
LPS
Regin I. Antgeno O

Unidades repetidas de
azcares, la alteracin de la
estructura da un cambio en
la especificidad
inmunolgica.
LPS
Regin II. Core
Core externo, presenta
una alta moderada
variabilidad.
Core interno, tiene una
variabiliadad estructural
muy baja entre organismos
del mismo gnero, no as
con otros Gram negativos.
Azcar octosa. cido 2-
ceto-3-desoxioctulosnico
(KDO) es componente
constante en muchas
bacterias Gram negativas.
LPS
Regin III. Lpido A
Formada por unidades de
un disacrido de D-
glucosamina con los grupos
hidroxilo sustituidos por los
azcares del core o por
cidos grasos.
Los cidos grasos son de
cadena larga como larico,
misrstico y palmtico. El ms
comn es el cido -
hidroximirstico.

El lpido A, une al resto de la cadena con la membrana externa, no hay


un mecanismo exacto, pero se supone que este anclaje esta asociado
a Protenas de Membrana Externa (OMPs), particularmente con OmpA.
Sntesis de LPS

1-2 La enzima glicosiltranasferasasa adiciona los residuos de azcar


a un acarreador lipdico (undecaprenol-P) para formar el polmero.
3-4 El antgeno O sisntetizado es transportado a travs de la MI por
un transportador ABC.
5 El antgeno O es ligado al Lpido A-Core por una reaccin que
involucra una ligasa.
http://www.uoguelph.ca/~cwhitfie/lps_o_antigens.html
Lpido A. Endotoxina
Endotoxinas
El LPS constituye la endotoxina de las
bacterias Gram-negativas. La funcin
como endotoxina se debe a la
regin del lpido A. Sus propiedades
como endotoxina estn en el origen
de muchos sntomas patolgicos
propiciados por patgenos Gram
negativos:

Pirogenicidad (induccin de fiebre)


Hipotensin.
En casos graves, choque letal, por fallo
cardaco.
Actividad necrtica de tejidos.
Pero igualmente, tiene efectos benficos: estimula una serie de
mecanismos defensivos del hospedador, incluyendo la
activacin del complemento, que puede ocasionar la lisis de la
bacteria, mejora las propiedades de los fagocitos, etc.
Antgenos
de E. coli
Deteccin de antgenos
Aglutinacin
Deteccin de antgenos
Precipitacin
Deteccin de antgenos
Inmunofluorescencia directa

Inmunofluorescencia indirecta (deteccin/anticuerpos)


Reacciones
febriles
Mtodo de aglutinacin
en placa

Estudio Resultado Valor de referencia


Tfico O 1:80 Negativo
Tfico H Negativo Negativo
Paratfico A Negativo Negativo
Paratfico H Negativo Negativo
Brucela A Negativo Negativo
Proteus OX 19 Negativo Negativo
Deteccin de
antgenos
Enzyme-Linked
Immunosorbent
Assay (ELISA)
Deteccin de antgenos
Ejemplo hGC (hormona
Gonadotrofina Corinica)
Deteccin de antgenos
En el caso de algunas
pruebas de embarazo,
ests detectan la
cantidad de antgeno
presente (hGC) y se
relacionan con las
semanas de gestacin

http://www.clearblue.com/es/pruebas-de-
embarazo-clearblue-funcionamiento.php
Protenas de membrana externa
Protena Funciones
OmpA Estabilizacin de la membrana externa y receptor
del fago Tull, conjugacin y colicinas K y L.
Lipoprotena En conjuncin con OmpA estabiliza la clula.
Omp B (porina) Canal de difusin de varios metabolitos incluyendo
maltosa.
LamB (maltoporina) Porina especfica de para maltosa y maltodextrina;
receptor del bacterifago .
OmpC (porina) Canal de difusin de pequeas molculas; receptor
de los fagos TuIb y T4.
OmpF (porina) Canal de difusin de pequeas molculas; receptor
de los fagos TuIb y T2.
OmpT Proteasa.
PhoE (protena E) Canales de difusin anin-selectiva inducido bajo
limitacin de fosfato.
Protenas de membrana externa
Protena Funciones
Protena P Canales de difusin anin-
selectiva en Pseudomonas
aeruginosa inducido bajo
limitacin de fosfato.
TolA Mantenimiento de la integridad
de la ME; actividad de colicina
grupo A.
TonA Siderforo de ferricromo,
receptor de los fagos T1, T5, 80 y
colicina M. Receptor de colicina

TonB Siderforo, transportador de


vitamina B12 extracellular side
Tsx Canal especfico para periplasmic side
nuclesidos, receptor del fago T
y colicina K http://opm.phar.umich.edu/
Lipoprotenas
Mutantes de lpp y ompA
forman estructuras esfricas y
son susceptibles a algunos
antibiticos

OmpA

Algunas LPP pueden extenderse hacia el medio extracelular como


LbpB y TbpB que son componentes del receptor de lactoferrina y
transferrina en Neisseria meningitidis
Porinas
Son OMPs que facilitan la entrada de diversas sustancias a la
clula como vitaminas, fierro, maltosa, entre otras. OmpC y
OmpF son porinas que permiten el transporte de molculas
hidroflicas de menos de 700.
OmpF y OmpC son estructuralmente similares y en funciones
pero sus genes ompF y ompC son regulados en direcciones
opuestas por la osmolaridad del medio de crecimiento.

OmpC OmpF
Porinas
PhoE. Fosfoporina de E. coli.
OmpF. Tiene un canal de hacia
el espacio periplasmico y tres
canales hacia el exterior. E. coli.
Protena P. Un solo canal con
filtro(s) con tres lisinas cargas
PhoE positivamente (anin-selectivo)

OprP