UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE QUMICA E INGENIERA QUMICA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL

GUA DE LABORATORIO DE ANLISIS INSTRUMENTAL

ELABORADO POR:

Mg. Ing. ANAYA MELNDEZ, Fernando

Qum. LENGUA CALLE, Rosa Laura

PROFESORES DE LABORATORIO:

Qum. ALVAREZ BAUTISTA JENNY

Qum. BECERRA VSQUEZ ELVIRA
Qum. LENGUA CALLE, ROSA LAURA
Qum. RODRIGUEZ BEST ANGLICA

II SEMESTRE - 2017

1
 SUMILLA

En el presente laboratorio se desarrollarn prcticas en las diferentes

tcnicas del Anlisis Instrumental: electromtricas, pticas y
cromatogrficas, explicando en cada caso su utilidad y fundamento.

I. OBJETIVOS
Generales:
Conocer en detalle los alcances de las tcnicas Instrumentales a utilizar en el
anlisis, poniendo nfasis en su fundamento, descripcin del instrumento y
aplicacin.

Especficos:
Lograr que el estudiante aprenda los principios sobre los cuales se basan los
mtodos del anlisis instrumental.
Mostrar el diseo y los principios de los instrumentos usados y su funcin.
Estudiar la aplicacin analtica experimental en el Laboratorio para facilitar la
comprensin prctica.

II. PROGRAMA DEL CURSO

1 Semana 04/09/17 Introduccin a los mtodos pticos.

2 Semana - 11/09/17 Espectrofotometra - Visible

Determinacin espectrofotomtrica de manganeso
en acero.

3a Semana - 18/09/17 Espectrofotometra - Ultravioleta.

Anlisis de nitratos en agua

4a Semana 25/09/17 Espectrometra Infrarroja (FTIR).

Interpretacin de espectros.

5a Semana 02/10/17 Espectrofotometra de Absorcin Atmica.

Determinacin de hierro en jarabe antianmico.

6a Semana 09/10/17 PRIMER EXAMEN.

7a Semana 16/10/17 Espectroscopia de Emisin Atmica.

Determinacin de Potasio en agua.

8a Semana 23/10/17 Cromatografa de Gases

2
 Determinacin de metanol en bebidas alcohlicas

9 a Semana-30/10-3/11/17 Introduccin a los mtodos electromtricos.

10a Semana -06/11/17 Medida del PH (electrodo de ion selectivo)

a) Calibracin del instrumento empleado en la experiencia
b) Estandarizacin de solucin de NaOH con biftalato de potasio.
c) Titulacin potenciomtrica de cido dbil con base fuerte
(Determinacin acidez en vino)

11a Semana -13/11/17 Anlisis potenciomtrico

a) Estandarizacin potenciomtrica de soluciones de K2Cr2O7
b) Determinacin potenciomtrica de hierro en jarabe, por
Dicromatometria.

12a Semana -20/11/17 SEGUNDO EXAMEN

13a Semana- 27/11/16 Sustentacin de trabajo semestral y Entrega de Notas.

III. METODOLOGIA
El curso se realizar mediante exposiciones dirigidas por el profesor, de
los fundamentos tericos, previo conocimiento del instrumento a utilizar,
antes del trabajo experimental. Posteriormente el alumno preparar el
informe correspondiente.

IV. SISTEMA DE EVALUACIN

Los alumnos entregarn los informes de cada experimento de aplicacin

del mtodo instrumental estudiado.

Los informes debern contener lo siguiente:

1. Fundamento del mtodo de anlisis.
2. Descripcin de la tcnica empleada.
3. Reacciones qumicas importantes.
4. Descripcin detallada de los instrumentos o aparatos usados.
5. Clculos detallados. Tabla de Resultados y tratamiento estadstico.
6. Grficos de los experimentos
7. Discusin del mtodo empleado.
8. Discusin de resultados obtenidos.
9. Conclusiones.
10. Recomendaciones.
11. Bibliografa (Autor, titulo, edicin, editorial, ao).
12. Anexos (Informacin adicional necesaria).

Los informes se presentaran en forma individual la semana siguiente

despus de haber concluido la prctica, escritos con letra legible o en
computadora, segn lo que disponga el profesor.

Nota Laboratorio=Prom.Informes+1Examen+2Examen+SustentacinTrabajo
4

3
 La asistencia a las prcticas es obligatoria.

Nota: Los alumnos que:

1) Aprobaron el Laboratorio, en semestres anteriores, solicitar la
convalidacin de su nota en la coordinacin. Los desaprobados solicitar
las notas de informes y de sustentacin de trabajo a quien fue su profesor
de laboratorio.

2) Rompan material, cancelar a ms tardar la semana siguiente, de lo

contrario se retendr su carn universitario, se informar a la coordinacin
y al SUM.

V. BIBLIOGRAFA
1. Harris Daniel, Quantitative Chemical Analysis, 9 Edicin, Ed. Reviews,
2015.
2. Harris Daniel, Solution Manual for Quantitative Chemical Analysis, 9
Edicin, Ed. Reviews 2015.
3. Palo, Fundamentos de Cromatografa, 1 Edicin. Ed. Dextra, Espaa. 2015.
4. Harris Daniel C., Anlisis Qumico Cuantitativo, 3 Edicin, Ed. Revert,
2007.
5. Skoog D., West D.M. y Crouch S.R. Fundamentos de Qumica Analtica, 8
Edicin, Ed. Thomson, Madrid, 2004.
6. Owen Tony, Fundamentos de la Espectroscopia UV-Visible Moderna,
Copyright Agilent. 2000.
7. Skoog D., Douglas A. Cengage Learning, Principios de Anlisis
Instrumental. cop. 2008 / McGraw-Hill, D.L. 2000.
8. Skoog D. Holler. Nieman T. Principios de Anlisis Instrumental. 5 Ed. Mc.
Graw Hill. Espaa 2001
9. Rubinson J.F. y Rubinson K.A., Qumica Analtica Contempornea, 1
Edicin, Ed. Pearson Education, Mjico, 2000.
10. Valcarcel M. Principios de Qumica Analtica, 1 Edicin, Ed. Springer,
1999.
11. Williard H., Merrit J. Mtodos Instrumental de Anlisis. Editorial
interamericano, Mjico D.F., 1991.
12. Skoog D. Leray J. Anlisis Instrumental. Ed.Mc. Graw Hill, Mxico 1994
13. Skoog D. West D. Analisis Instrumental Edit. Mc. Graw Hill Mxico 1992.
14. Alpizar J. Albertus F., Fundamentos de los Mtodos Electroqumicos de
Anlisis Edit. Enpes. La Habana 1980.
15. Vogel A. Qumica Analtica Cuantitativa Vol. II Edit., Kapeluz Buenos Aires
1960.
16. Ayres G. Anlisis Qumico Cuantitativo Editorial Iberoamericana, Mxico
1992.
17. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. Ed. Iberoamericana. Mxico 1992.
18. Sandell E. Colorimetric Determination of traces of metals. Interscience
Publisher. USA 1965.
19. AOAC. Official Methods of Analysis 15th Fed. USA. 1990.
20. ASTM American Standards of Testing Materials, 1999.

4
 FUNDAMENTO TERICO DE LAS PRCTICA N 1 Y N 2
ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCIN MOLECULAR
ULTRAVIOLETA VISIBLE

Fundamento

La espectrofotometra de absorcin molecular ultravioleta visible, comnmente

llamada espectrofotometra UV-VIS, tiene una larga y continua historia en el
campo de la qumica analtica. Esta tcnica est basada en la medicin de
absorcin de radiacin U.V. o visible por determinadas molculas.

La radiacin correspondiente a estas regiones del espectro electromagntico

provoca transiciones electrnicas a longitudes de ondas caractersticas de la
estructura molecular de un compuesto.

RADIACIN ELECTROMAGNTICA (R.E.M.)

La radiacin electromagntica es un tipo de energa que se transmite por el

espacio a enormes velocidades. Muchas de las propiedades de la R.E. se explican
convenientemente mediante la teora ondulatoria clsica con parmetros como
velocidad, frecuencia, longitud de onda y amplitud. En contraste con otros
fenmenos ondulatorios, como el sonido, la R.E. no requiere un medio de
transporte para su transmisin, por lo tanto se transmite fcilmente en el vaco.

La teora ondulatoria para la R.E. no explica completamente los fenmenos

asociados con la absorcin o la emisin de energa radiante, para estos procesos
es necesario considerar la energa radiante como un flujo de partculas discretas
de energa llamados fotones o cuantos.

Estos dos conceptos se complementan muy bien (dualidad, onda partcula) y se

aplican tanto al flujo de electrones como al de otras partculas elementales .

h.c
E h.

ABSORCIN DE LA RADIACIN

Al pasar R.E.M. por una capa transparente de un slido, lquido o gas, pueden
eliminarse selectivamente ciertas frecuencias como consecuencia del proceso
llamado absorcin. En este caso la E.R. se transfiere a los tomos o molculas
que constituyen la muestra, como resultado de ello estas partculas pasan del
estado de menor energa a estados de mayor energa o estados excitados.

5
ABSORCIN MOLECULAR

La absorcin por molculas poliatmicas, es un proceso considerablemente ms

complejo que la absorcin atmica, ya que el nmero de estados de energa est
muy aumentado. Aqu la energa total de una molcula est dada por:

E = E electrnica + E vibracional + E rotacional

Para cada estado de energa electrnica de la molcula hay normalmente varios
estados vibratorios posibles y a su vez, para cada uno de stos existen
numerosos estados rotatorios. Como consecuencia el nmero de posibles
niveles de energa de una molcula es mucho mayor que el de una partcula
atmica. Es por ello que los espectros de absorcin aparecen como anchas
bandas.

Espectro de absorcin

Tanto las molculas como los tomos tienen un nmero limitado de niveles o
estados energticos cuantizados.

Para que se produzca absorcin de radiacin, la energa del fotn excitante

(incidente) debe igualar a la diferencia de energa entre el estado fundamental y
uno de los estados excitados de la especie absorbente. Estas diferencias de
energa (E) son nicas, por lo tanto permiten caracterizar los constituyentes de
una muestra.

Para este objeto se obtiene experimentalmente una representacin grfica de la

variacin de la absorbancia en funcin de la longitud de onda.

Espectros de absorcin molecular caractersticos

6
Medidas cuantitativas de la radiacin - Ley de Beer

La siguiente figura esquematiza el fenmeno de absorcin, aqu un haz de

radiacin monocromtico, pasa a travs de una capa de solucin de b cm de
espesor y que contiene una especie molecular absorbente de concentracin c.

Fenmeno de absorcin

Como consecuencia de las interacciones entre los fotones y las partculas

absorbentes, la potencia del haz disminuye de Po a P. Por lo tanto la
Transmitancia T de la solucin es la fraccin de radiacin incidente transmitido
(o no absorbida) por la solucin segn:

Segn la Ley de Beer, entonces, la absorcin A estar determinada por:

A = abC A = bC

Donde: A = Absorbancia
a = Absortividad = Absortividad molar
b = Espesor de la celda o paso de luz (cm)
C = Concentracin (g/L)
C= Concentracin (moles/ litro)

La Ley de Beer se cumple igualmente en soluciones que contienen ms de una

especie absorbente, siempre que no haya interaccin entre dichas especies. Por
tanto, para un sistema multicomponente la relacin ser:

7
 AT = A1+A2++An
AT = 1bc1 + 2bc2 ++ nbcn

Espectros de absorcin mezcla componentes

Limitaciones a la aplicabilidad de la Ley de Beer

Se observan frecuentemente desviaciones de la proporcionalidad entre A y c

(cuando b es constante). Algunas de estas desviaciones son importantes y
representan limitaciones reales de la ley. Estas son de tipo:

qumico;
instrumental.

La Ley de Beer es slo aplicable a soluciones en las que las interacciones

dependientes de la concentracin de las molculas o iones son mnimas.
Concentraciones altas alteran las absortividades molares y por lo tanto
conducen a una relacin no lineal entre A y c.

a) Desviaciones qumicas

Cuando las especies absorbentes experimentan asociacin, disociacin o

reaccin con el solvente originan productos con caractersticas absorbentes
distintas de las del analito.

8
Un ejemplo tpico se observa con soluciones de dicromato potsico no
amortiguadas, en las que existen los siguientes equilibrios:

Cr2O7-2 + H2O 2HCrO4 2H+ + 2CrO4-2

A casi todas las longitudes de onda los valores de del ion dicromato y las dos
especies de cromato son muy diferentes.

b) Desviaciones instrumentales
El requisito bsico para el cumplimiento de la Ley de Beer es
que la radiacin incidente sea monocromtica. Dependiendo de
Radiacin las caractersticas tecnolgicas del sistema ptico del
policromtica: instrumento ser ms o menos accesible poder utilizar en
forma prctica una radiacin limitada a una sola longitud de
onda.
La radiacin dispersa suele diferir considerablemente en
Radiacin longitud de onda con respecto a la radiacin principal; adems
dispersa: puede alcanzar el detector sin haber pasado a travs de la
muestra.

ABSORCIN DE RADIACIN ULTRAVIOLETA Y VISIBLE

La absorcin de radiacin ultravioleta y visible por una especie M, puede

considerarse como un proceso en dos etapas, la primera de las cuales
corresponde a la excitacin segn:

M + h. M*

Donde M* representa la partcula atmica o molecular en su estado electrnico

excitado que se produce como resultado de la absorcin del fotn h v. Este
estado excitado tiene un breve tiempo de existencia (10-8 a 10-9 s) y desaparece a
travs de algunos de los diferentes procesos de relajacin (calor).

M* => M + calor

La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible, se produce por lo general como

consecuencia de la excitacin de los electrones de enlace; debido a esto, la
longitud de onda de los picos de absorcin se puede correlacionar con los tipos
de enlace existentes en la especie que se estudia.

Aplicacin analtica

Identificacin proximal de los grupos funcionales en una molcula.

Mtodo bastante selectivo para el anlisis cuantitativo de compuestos
cuyos enlaces producen absorcin.

9
Especies absorbentes

Conviene considerar tres tipos de transiciones electrnicas que permiten

explicar por qu algunas especies pueden absorber energa radiante.

Estos tres tipos son:

Los electrones , y .
Los electrones d y f.
Los electrones de transferencia de carga.

a) Especies qumicas absorbentes que contienen electrones , y

La absorcin de radiacin ultravioleta y visible (200800nm) se restringe a un

nmero limitado de grupos funcionales, llamados cromforos, que contienen
electrones de valencia con energas de excitacin relativamente bajos. (Ver tabla)

10
 Transiciones electrnicas entre orbitales , , y .

Transicin (nm) (L mol4cm-1) Ejemplo

* <200 - Hidrocarburos saturados
* 200500 104 Alquenos, alquinos aromticos
* 160260 102 103 H2O, CH3OH, CH3Cl
* 250600 10 103 Carbonilos, nitro, nitrato, carbonilo.
Caractersticas de transiciones electrnicas entre orbitales , y

mx (nm) para los ligandos indicados

Aumento de fuerza del campo de unin
Ion central 6CI 6H2O 6NH3 3en(1) 6CN-
Cr (III) 736 573 462 456 380
Co (III) - 538 435 428 294
Co (II) - 1345 980 909 -
Ni (II) 1370 1279 925 863 -
Cu (II) - 794 663 610 -

Efecto de los ligandos sobre los mximos de absorcin asociados con

transiciones d-d
(1) en = etilendiamina, un ligando bidentado.

b) Absorcin en la que participan los electrones d y f

Iones de los metales de transicin

Serie de los lantnidos y actnidos

Los iones y complejos de los 18 elementos de las dos primeras series de

transicin son coloreados en uno de sus estados de oxidacin o en todos ellos.
Dependiendo las caractersticas colorimtricas del complejo; del tipo de ligando
(agente complejante) y del estado de oxidacin.

c) Absorcin por transferencia de carga

Para fines analticos es el tipo ms importante de absorcin por especies

inorgnicas, debido a que las absortividades molares de los picos son muy
grandes ( < 105). Esta es una particular caracterstica de los complejos
inorgnicos denominados tambin, complejos de transferencia de carga.
Ejemplos:

Hierro III- ion Tiocianato, Hierro II - (o-Fenantrolina), Ion triyoduro I3-

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 REGIONES ESPECTRALES:
Ultravioleta lejano : 10 200 nm
Ultravioleta cercano : 200 400 nm
Visible : 400 750 nm

Los espectros en el Ultravioleta y en el Visible son espectros electrnicos

y se emplean para la deteccin y la determinacin de elementos y ciertos
tipos de compuestos qumicos; notablemente de compuestos metlicos de
coordinacin y compuestos orgnicos no saturados, con dobles enlaces
conjugados.
En el anlisis qumico se hace uso tanto de la emisin como de la absorcin
de radiacin, pero los mtodos de absorcin suelen encontrar mayor
aplicacin.

TRMINOS EMPLEADOS EN LA ESPECTROFOTOMETRIA

ULTRAVIOLETA - VISIBLE
Cromforo: Absorcin electrnica por grupos insaturados covalentes
(C=O, NO2).
Auxcromo: Corresponde a grupos saturados con electrones no
enlazantes y unidos a grupos cromforos que alteran la longitud de
onda y la intensidad de la absorcin (OH, NH2, Cl).
Desplazamiento batocrmico: Cuando se desplaza el mximo de
absorcin a mayores longitudes de onda debido al efecto del
sustituyente o por efecto del solvente.
Desplazamiento Hipsocrmico: Cuando se desplaza el mximo de
absorcin a menores longitudes de onda debido al efecto del
sustituyente o por efecto del solvente.
Efecto hipercrmico: Existe un incremento en la intensidad de la
absorcin.
Efecto hipocrmico: Existe una disminucin en la intensidad de la
absorcin.
INSTRUMENTACIN

Los instrumentos que miden la absorcin selectiva de la radiacin en las

soluciones se conocen con los nombres de: colormetros, fotmetros y
espectrofotmetros.

Hoy en da es pertinente diferenciar los instrumentos segn su sistema de

deteccin: detectores simples (convencional) o detectores multicanal (arreglo
de diodo).

Algunos de los diseos bsicos de los instrumentos usados en la medicin de

la absorcin de Energa Radiante se ilustran en el siguiente esquema.
Diagrama de bloques de diferentes tipos de instrumentos de medicin de la
absorcin molecular

12
 Diagrama de bloques de diferentes tipos de instrumentos de medicin de
la absorcin molecular

ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO

Anlisis cualitativo

Las aplicaciones cualitativas no ofrecen una herramienta muy til, ya que con
estos espectros existe un nmero relativamente escaso de mximos y mnimos.
Sin embargo el anlisis cualitativo es una excelente herramienta cuando va
precedido de algn mtodo de separacin.

Anlisis cuantitativo

a) Aplicacin:

Compuestos
Aldehdos y cetonas
orgnicos:
Aromticos
Medicamentos y Drogas
Vitaminas, etc
Compuestos
(especies absorbentes)
inorgnicos:
Compuestos no absorbentes Derivatizacin

(Por ejemplo: formacin de complejos coloreados).

13
b) Principales caractersticas:

Alta sensibilidad.
Absortividades molares 105
Intervalos de concentracin 10-4 a 10-6M.
Selectividad: seleccin de la longitud de onda en la que el nico
componente absorbente de una muestra sea la sustancia que se determina.
Precisin y exactitud: dependiendo del nivel de concentracin es posible
lograr valores menores que 1% de error relativo.

Procedimiento para realizar el anlisis cuantitativo

a) Recopilacin de antecedentes:

Referencias bibliogrficas.
Mtodos normalizados.

b) Preparacin y/o tratamiento de la muestra:

Separacin del compuesto de inters (precipitacin, extraccin por

solvente, cromatografa, etc).
Derivatizacin, si es necesaria.

c) Seleccin de la longitud de onda de trabajo ( mx.):

Obtencin del espectro de absorcin:
En el espectro de un solo haz, se va alternando la medida de la
absorbancia entre el disolvente (blanco) y la solucin que contiene la
muestra en la medida que se va variando gradualmente la longitud de onda.
En el espectro de doble haz, la operacin descrita anteriormente es posible
hacerla automtica y simultneamente.

Para ello los instrumentos disponen de sistemas con microprocesador que

permiten una fcil y expedita obtencin de la informacin. Mediante estos
instrumentos es posible hacer barrido de longitudes de ondas en determinadas
zonas del espectro y a diferentes velocidades.
La excepcin a esto ltimo la proporcionan los espectrofotmetros de Arreglo de
Diodos ya que dada su configuracin es posible obtener el espectro de absorcin
en un amplio rango de longitudes de onda (200800 nm) en fraccin de segundos.

Una vez establecida la longitud de mx. (Mxima sensibilidad) se prepara la

curva de calibracin.

d) Seleccin del mtodo de estandarizacin adecuado.

CURVA DE CALIBRACIN

Preparar un set de soluciones de concentraciones crecientes del analito, en un

rango tal que se cumple la Ley de Beer.

No es conveniente suponer que para una determinada concentracin se cumple

la Ley de Beer y por ello utilizar un patrn nico como referencia .

Una vez obtenidos los distintos puntos (o niveles de calibracin) se debe

determinar la ecuacin de la recta mediante anlisis de regresin lineal (o ajuste
14
de la curva por mnimos cuadrados). Los instrumentos automatizados traen estas
funciones ya incorporadas en su sistema de clculo, lo cual permite obtener el
resultado final directamente. La ecuacin que relaciona la Absorbancia con la
concentracin ms comn es del tipo:

Y = Ax + B

donde: A = pendiente ()
B = intercepto

r es un parmetro estadstico que da cuenta de la calidad de la curva de

calibracin y se denomina coeficiente de regresin. En anlisis cuantitativo se
considera buena una curva cuando su valor de r es mayor que 0,99.

Para efectuar un anlisis cuantitativo en el Laboratorio se sigue los siguientes

pasos:
a) Obtencin mx. A partir de la grfica de Absorbancia vs. Longitud
de onda (nm).
b) Obtencin del rango ptimo de concentracin (Curva de RINGBOM).
Para ello preparamos una serie de soluciones de concentraciones
conocidas del analito, desde una muy diluida hasta una muy
concentrada. Luego se grafica 100 - %T vs Logaritmo de la
concentracin. Si se incluye un rango conveniente resulta siempre una
curva con forma de S; conocida como grfica o curva de RINGBOM. La
curva generalmente tiene una regin considerable en donde es casi
recta. La extensin de esta porcin recta indica directamente el rango
ptimo de concentracin para un anlisis fotomtrico particular.
c) Obtencin de la curva de trabajo o curva patrn.
Se prepara una serie de concentraciones de estndar correspondiente
al analito, los cuales deben estar dentro del rango ptimo de
concentracin. Finalmente graficar la Absorbancia vs. la Concentracin.
El BLANCO, deber contener todos los reactivos usados en la
preparacin de la muestra, sin la muestra. Sirve para llevar la lectura del
instrumento al 100% T 0 (cero) A.
Preparar la solucin muestra, determinar su Absorbancia y calcular su
concentracin usando el grfico de patrones.

RANGO PTIMO DEL EQUIPO

La curva de Lotho-Twyan relaciona el % de error contra el % de Transmitancia
de lectura.
De 0-20 %T y de 80 100% se tiene la misma posibilidad de error en la lectura,
obtenindose lecturas ptimas entre 20 80% T.
La exactitud mxima, se obtiene para una lectura de Transmitancia del 36,8%.

15
 PRCTICA N 1

ANLISIS POR ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE

DETERMINACIN DE MANGANESO EN ACERO
Mtodo del Peryodato

EQUIPOS Y MATERIALES

01 Balanza Analtica Digital

01 Espectrofotmetro visible GENESYS.
06 Celdas de vidrio o de plstico
05 Fiolas de 100 mL
01 Fiolas de 250 mL
01 Fiola de 25 mL
01 Pipeta volumtrica de 10 mL.
01 Pipeta volumtrica de 5 mL.
01 Pipeta volumtrica de 2 mL.
01 Pipeta volumtrica de 1mL.
06 Luna de reloj.
01 Esptula.
06 Vasos de 250 mL.
01 Probeta de 10 mL
01 Bagueta
05 Pizeta
01 Gradilla plastificada para celdas
05 Propipetas
01 Pinza para vasos
01 Portapipetas
Papel tisu

Reactivos

1) CoCl2. 6H2O.- 2,2000 g/ 100 mL en HCl 1%)

2) cido clorhdrico conc. P.a.
3) Mezcla de cidos: Mezclar en partes iguales cido ntrico (reactivo
controlado), cido fosfrico y agua (40 mL de cada uno).
4) Sal de Mohr (Fe(NH4)2(SO4)2.7H2O Q.P.
5) Peryodato de potasio (KIO4) Q.P.
6) MnSO4. H2O Q. P. MnSO4. 2H2O Q. P

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 Nombre Pictograma Riesgo Primeros auxilios

Inhalacin e Inhalacin:
(re HCl Ingestin: Ventilacin,
Irritacin al tracto suministrar oxgeno.
y respiratorio o Ingestin: Lavar la
y y digestivo, dao boca con abundante
HNO3 corrosivo con agua, no inducir al
(reactivos quemaduras. vmito.
controlados) Puede producir .
edema pulmonar.
CORROSIVOS

HNO3
Contacto con piel Contacto con ojos y
y ojos:Severas piel: Lavar con
CORROSIVO y irritaciones con abundante agua, por
COMBURENTE quemaduras que 20 a30, o ducharse,
pueden derivar en no aplicar ningn tipo
ceguera de sustancia.
Atencin mdica

A.-INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL ESPECTROFTMETRO GENESYS.

a) Encender el estabilizador, luego el equipo.

b) Esperar 2 minutos que el equipo verifique el programa.
c) Dejar que se estabilice el equipo por 30 minutos, antes de usarlo.
d) Oprimir el botn A/T/C, para seleccionar el modo: Absorbancia, %
Transmitancia o Concentracin.
e) Pulsar nm o nm para seleccionar la longitud de onda.
f) Limpiar la celda que contiene el blanco con papel tis, Insertarlo en el
portacelda, cerrar la puerta del compartimiento, ubicar la celda de forma que

17
 la luz (indicada por la flecha en el equipo) pase a travs de las paredes
claras. Oprimir 0Abs/100%T para configurar el blanco a 0 de A o 100 % T.
g) Retirar el blanco, limpiar la celda que contiene la muestra con papel tis e
insertar en el portaceldas, ubicarla como se indica en (f). La medicin de la
muestra aparece en la pantalla.
h) Retirar la muestra, seleccionar la nueva a trabajar, insertar el blanco en el
portaceldas, repetir (g) y (h).

Trazar la grfica de A o % T, en funcin de la .

B.- VERIFICACIN DE LA CALIBRACIN DE ESPECTROFOTMETRO CON CoCl2

EN HCl Al 1%

Procedimiento

Colocar la solucin de CoCl2 .6H2O preparado en HCl al 1% en una celda y la

solucin de HCl al 1% en la celda de referencia como BLANCO, secar las celdas
con papel tis y realizar lecturas de % T de la solucin de CoCl2.6H2O, en el
rango de entre 450 y 700 nm, variar la cada 10 nm de intervalo.

Regresar las soluciones empleadas a sus frascos originales.

Con estas lecturas trazar el grfico en papel milimetrado de % T vs. (Longitud
de onda) y el de Absorbancia vs. .
Determinar max del CoCl2.6H2O, el valor obtenido y la curva se comparan
con el catlogo del fabricante.

C. DETERMINACIN DEL MXIMO DEL KMnO4

Procedimiento

Obtener la curva de absorcin mxima con la solucin estndar 2 , usando el

Blanco para ajustar a 0 A. Efectuar las lecturas en el rango de 480 a 550 nm de
longitud de onda, variando la cada 10 nm de intervalo. Trazar la grfica de
Absorbancia o % T en funcin de la longitud de onda. Determinar la max del
KMnO4 y mantener el equipo con esta max .

D. DETERMINACIN CUANTITATIVA DE MANGANESO EN ACERO

Procedimiento
a) MUESTRA PROBLEMA.- Pesar 0,1200 g de la muestra de acero, pasarlo a
un vaso de 250 mL.
b) PREPARACIN DE PATRONES.- Pesar por cuadruplicado, 0,2000 gramos de
sal de Mohr y llevar cada uno de ellos a vasos de 250 mL.

18
c) SOLUCIN PATRN DE MANGANESO.- 200 ppm Mn (0,2 mg de manganeso
por mL).

Se disuelve 0,1540 g de MnSO4. H2O Q.P 0,1696 g MnSO4. 2H2O Q. P y se lleva

a enrase en fiola de 250 mL; homogenizar la solucin por inversin.
Seguidamente, a la muestra problema y a los patrones: Agregar 20 mL de la
mezcla de cidos a cada vaso. Tapar con las lunas de reloj y colocar sobre la
plancha elctrica. Llevar a ebullicin y retirar cuando todos los xidos de
nitrgeno hayan sido expulsados.

Para Ia muestra problema: Retirarla de la plancha, dejar enfriar por unos

minutos, lavar las lunas de reloj con chorro de agua destilada y diluir hasta unos
50 mL, cuidadosamente agregar 0,1000 gramos de KIO 4. Hervir por unos 3
minutos para oxidar el manganeso.
Enfriar la solucin y luego llevar a fiola de 100 mL hasta el enrase, homogenizar
la solucin por inversin.
Para Ios patrones: Retirarlos de la plancha y dejarlos enfriar por unos minutos,
lavar las lunas de reloj con un chorro de agua destilada, desde una pizeta,
dejndolo escurrir dentro de los vasos, agregar enseguida a tres de los cuatro
vasos con una pipeta volumtrica 2, 5, 10 mL respectivamente, de la solucin
patrn de Manganeso. Al que no se le agrega la solucin patrn de manganeso,
ser el BLANCO. Seguidamente diluir hasta cerca de 50 mL con agua destilada
y cuidadosamente agregar 0,1000 gramos de KIO4 en los cuatro vasos.
Hervir por unos 3 minutos, para oxidar el manganeso. Enfriar y llevar a fiola
de 100 mL, homogenizar la solucin por inversin.
Colocar en el Instrumento la Longitud de onda mxima hallada en la
EXPERIENCIA C.
En una gradilla llevar las celdas que deben contener las soluciones preparadas,
en el siguiente orden: Blanco, Patrn 1, Patrn 2, Patrn 3, Muestra.
Previamente, enjuagar las celdas con las soluciones respectivas antes de
proceder a las lecturas de las mismas.
Seguidamente proceder a la lectura, calibrando a 0 el aparato y enseguida llevar
a 100 % T con el Blanco. Luego continuar las lecturas de los patrones y despus
con las muestras.
Graficar la Curva de calibracin con los datos de Absorbancia vs. Concentracin
(mg Mn/L).
Con las absorbancias de las muestras y la curva de calibracin calcular el
contenido de Mn en el acero en % y ppm.

PRACTICA N2
19
 ANLISIS POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA
ANLISIS DE NITRATOS EN AGUAS

1. SELECCIN DE MTODO
La determinacin de nitrato (NO3-) es difcil debido a los procedimientos
relativamente complejos que se precisan, la elevada probabilidad de que
se hallen sustancias interferentes y los rangos limitados de concentracin
de las diferentes tcnicas.
Una tcnica con luz ultravioleta (UV) que mide la absorbancia de NO3- a 220
nm es adecuada para el estudio de aguas no contaminadas (con bajo
contenido en materias orgnicas).

2. ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Si se debe almacenar, consrvese a 4C hasta 24 horas; para perodos ms

largos, adase 2 mL de H2SO4 concentrado/ L y mantngase a 4C.
NOTA: Cuando se conserva una muestra con cido, no se puede
determinar NO3- y NO2- individualmente.

MTODO ESPECTROMTRICO ULTRAVIOLETA SELECTIVO (NO3-)

Fundamento

a) Principio: Utilizar esta tcnica solamente para seleccionar muestras con

bajo contenido en materia orgnica, es decir, aguas naturales no
contaminadas y suministros de agua potable. La curva de calibrado de
NO3- verifica la ley de Beer hasta los 11 mg N/L.
La medida de la absorcin UV a 220 nm hace posible la determinacin
rpida de NO3-. Dado que la materia orgnica disuelta puede absorber
tambin a 220 nm y NO3- no lo hace a 275 nm, se puede utilizar una
segunda medida a 275 nm para corregir el valor de NO 3-. Esta correccin
emprica depender de la naturaleza y concentracin de la materia
orgnica y puede variar de unas aguas a otras. En consecuencia, este
mtodo no es recomendable cuando se precise una correccin importante
para la absorbancia de la materia orgnica, aunque puede ser til para
controlar los niveles de NO3- en un sistema de aguas con un tipo
constante de materia orgnica. Los factores de correccin para la
absorbancia de materia orgnica se pueden establecer por el mtodo de
adiciones en combinacin con el anlisis del contenido original de NO3-
por otro mtodo. La filtracin de la muestra tiene por objeto eliminar
posibles interferencias de partculas suspendidas. La acidificacin con
HCl 1N sirve para impedir interferencias por concentraciones de hidrxido
o carbonato de hasta 1.000 mg de CaCO3/L. El cloruro no afecta a la
determinacin.
b) Interferencia: Interfieren la materia orgnica disuelta, los surfactantes,
NO2- y Cr6+. Pueden interferir varios iones inorgnicos, que no se
20
 encuentran normalmente en el agua natural, como clorito y clorato. Las
sustancias inorgnicas se pueden compensar con un anlisis
independiente de sus concentraciones y la preparacin de curvas de
correccin individuales.
EQUIPOS Y MATERIALES
1. Espectrofotmetro UV - Visible, Shimadzu 1700.
2. Celdas de cuarzo.
3. Balanza analtica.
4. Desecador de vidrio, con agente deshidratante.
5. Pipetas volumtricas de 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20 y 25 mL.
6. Fiolas de 50, 100, 500, 1000 mL.

REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analtico.
1) Agua exenta de nitrato.
2) KNO3 p.a.
3) Cloroformo, CHCl3. (reactivo controlado), para mantener la solucin patrn
de KNO3 por 6 meses.
4) HCl. (reactivo controlado)

Nombre Pictograma Riesgo Primeros auxilios

CHCl3 Inhalacin: Tos, Inhalacin:

(reactivo vrtigo, Ventilacin,
controlado) somnolencia, suministrar oxgeno.
nuseas, prdida Ingestin: Lavar la
de conocimiento. boca con abundante
Ingestin: Vmito, agua, no inducir al
dolor abdominal. vmito.
Contacto con piel y Contacto con ojos y
ojos: dolor, piel: Lavar con
enrojecimiento. abundante agua, por
varios minutos.
Atencin mdica.

Soluciones
1. Solucin patrn primario de nitrato (100 ppm NO3-N): Colocar en un crisol
de porcelana aproximadamente 0,3 g de KNO3 y secar en estufa a 105C
durante 24 horas. Retirar y enfriar en el desecador.
Pesar 0,1805 g de KNO3 disolver en agua, agregar 2 mL de CHCl3 y diluir
a 250 mL en fiola, enrazar y homogenizar la solucin por inversin; 1,00 mL
= 100 g NO3--N. Esta solucin es estable durante 6 meses.

2. Solucin patrn intermedia de nitrato (5 ppm NO3-_N): Diluir 5 mL de

solucin patrn primario de nitrato (1) con agua destilada, llevar a fiola de
100 mL, enrazar y homogenizar la solucin por inversin.

21
 3. Soluciones para la curva de calibracin: Preparar soluciones de
calibracin en el rango de 0,1- 0,2- 0,3- 0,4- 0,5 ppm de NO3-N,
diluyendo las alcuotas de solucin patrn 5 ppm NO3-N, antes de
enrazar a 50 mL, aadir 1 mL de HCl 1N, homogenizar la solucin por
inversin.

4. Solucin de cido clorhdrico, HCl 1N: Diluir 8,3 mL de HCl conc. en

agua destilada y enrazar en fiola de 100 mL, homogenizar la solucin
por inversin.

5. Blanco: En una fiola de 50 mL colocar aproximadamente 45 mL de

agua redestilada, aadir 1 mL de solucin de HCl 1N y luego completar
el volumen hasta el enrase, homogenizar la solucin por inversin.

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
Procedimiento
En una fiola de 50 mL, aadir 1 mL 2 mL 5 mL 10 mL, segn sea el
contenido de nitrato de la muestra transparente, filtrada si fuera preciso y
antes de enrazar, aadir 1 mL de la solucin de HCl 1N, mezclar bien y
completar a 50 mL con agua destilada, homogenizar la solucin por inversin.

Medida espectrofotomtrica: Leer la absorbancia o Transmitancia frente al

blanco reactivo en agua redestilada, ajustada a absorbancia cero.

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL ESPECTROFOTMETRO UV_

VISIBLE SHIMATZU 1700.

1) Retirar la bolsa de slice, del compartimiento de portaceldas del

espectrofotmetro UV. visible.
2) Encender el supresor de picos, el estabilizador, el espectrofotmetro
(botn lado izquierdo), levantar la pantalla del espectrofotmetro UV.
Visible, se completa la verificacin del instrumento (Inicio y Mode).
3) Encender la PC, el monitor. Presionar en el espectrofotmetro PC
CONTROL (F4) y cerrar la pantalla.
4) Ingresar al software UV PROBE, luego al modo SPECTRUM y presionar
CONNECT.
5) Ir a EDIT e introducir datos solicitados:
Wavelengh rang: Start: 350, End: 190. Scan: fast. Single: simple.
Parametros instruments: Absorbancia.
No modificar: Path lenght: 10 nm. Slit wicht:1.0 mm fixed.
Light source: 340,8
S/R Exchange.
Click en ACEPTAR.

6) Seleccionar BASELINE (rango: 190-350nm), aparece SLEWING

(esperar) y STOP (botn rojo), NO manipular el equipo hasta que
aparezca en pantalla inferior izquierda: max 0,00 Abs, al activarse
22
 los conos, presionar START, para iniciar corrida de la lnea base sobre
la escala de cero.
7) En cada compartimiento: muestra y referencia, colocar las celdas con
el Blanco (parte opaca de la celda, frente al operador) presionar
AUTOZERO, parpadea este cono y aparece max - 0,00 Abs.
8) DETERMINACIN DE max NO3-: colocar en compartimiento de
muestra (adelante), la celda con patrn intermedio. Si desea cambiar
lmites, llevar el cursor al grfico, click derecho, CUSTOMIZE, LIMITS:
introducir datos necesarios, ACEPTAR. Presionar START y se inicia el
barrido del espectro, se activa STOP (rojo), no manipular el equipo,
hasta que culmine grfico de la curva. En NEW DATA SET completar
los datos y presionar OK.
9) DETERMINAR la max EN LA CURVA: Presionar OPERATION, PEACK
PICK, aparece tabla, click en celda de DESCRIPTION a la altura de max
apropiado, anotar este valor, ir a celda de max apropiado, click
derecho, click en Propiedades, en PEAKS, activar Description y Down,
Cerrar.
10) Ir a FILE, SAVE AS, introducir datos solicitados y Guardar.
11) GRFICA DE LA CURVA DE CALIBRACIN: Seleccionar modo
PHOTOMETRIC. Crear mtodo presionando M. En nueva ventana,
seleccionar parmetros del mtodo.
Utilcese max obtenida en (9), luego CLOSE, FILE, SAVE AS,
completar datos y guardar.
12)Colocar en compartimiento de muestra (adelante), la celda con el
Blanco. En STANDAR TABLE (Active) registrar los valores de las
disoluciones preparadas. Ejemplo: Bk, std, 0,00, en las celdas SAMPLE;
TYPE CONC. Respectivamente, y as con cada patrn a analizar.
En SAMPLE TABLE ACTIVE, registrar datos de la(s) muestra(s), clic en
celda BK, luego en READ STD y YES ante la pregunta Quiere
continuar?
13)Colocar en compartimiento de muestra (adelante), la celda con el patrn
1, clic en celda correspondiente a P1, READ STD, continuar igual con
cada patrn. Luego colocar la celda con la(s) muestra(s) en el
compartimiento correspondiente y marcar READ UNK para realizar la
lectura.
14) Ir a GRAPH, introducir parmetros estadsticos, FILE, SAVE AS,
guardar.
15) Presionar DISCONECT, si desea, guarde informacin en un USB
nuevo.
16) Retirar celdas, presionar MODE (espectrofotmetro), apagar equipo,
estabilizador, monitor, supresor de picos y colocar la slice.

5. CLCULOS

Graficar la Curva de calibracin con los datos de Absorbancia vs.

Concentracin NO3--N (nitrato expresado como N) del patrn. Con las
absorbancias de las muestras y la curva de calibracin calcular el contenido de
NO3- en la muestra en ppm.

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24
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26
27
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29
30
31
32
 PRCTICA N 4

ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA

FUNDAMENTO

El mtodo de anlisis por absorcin atmica o espectrofotometra de

absorcin atmica, es un mtodo de anlisis cuantitativo que permite la
determinacin de la mayora de los elementos que pueden estar presentes en
una muestra en solucin.
La Absorcin Atmica se debe a las transiciones electrnicas en los orbitales
atmicos ms externos de los tomos o iones en fase gaseosa. Estas
transiciones estn cuantizadas y corresponden a la regin UV visible.

Esta espectroscopia no nos permite determinar estructuras porque rompe las

estructuras e ioniza el tomo.

El anlisis cuantitativo no depende del estado de oxidacin, en los tomos no

existen transiciones rotacionales ni vibracionales, por tanto se obtienen
espectros de lneas (lneas ms finas) a una determinada longitud de onda
caracterstica de cada elemento, debido a esto es vlido para anlisis
cualitativo. Tambin se puede utilizar para cuantitativo, porque la intensidad
de la radiacin est relacionada linealmente con la concentracin por la ley de
Lambert Beer.

En estos espectros aparece una radiacin continua o fondo doble debido a los
slidos incandescentes.

Tiene gran sensibilidad y fcil manejo, se puede utilizar para gran cantidad de
muestras lo que hace que sea una de las principales herramientas analticas
utilizada en la industria Qumica.

Especialmente tienen importancia porque hace posible las determinaciones a

muy bajas concentraciones, particularmente en el rango de las trazas; por
ejemplo, el anlisis de trazas de metales en diversos materiales incluyendo los
de alta pureza. Se pueden analizar concentraciones de ppm incluso de ppb.

Este mtodo est basado en la propiedad de los tomos, conocida desde los
primeros tiempos de la espectroscopia y que dice el tomo al estado libre o
atmico solo absorbe radiacin electromagntica que es capaz de emitir. Esta
radiacin emitida, formada de diversas longitudes de onda constituye lo que
se llama la radiacin caracterstica y da lugar al espectro caracterstico de los
tomos o espectro atmico del elemento en cuestin.
En la aplicacin analtica, los tomos de un metal en solucin, son vaporizados
para llevarlos al estado libre o atmico, situacin en la que absorben
fuertemente la radiacin caracterstica emitida por el mismo metal colocado en
una fuente apropiada de excitacin. Esta absorcin produce una disminucin
de la intensidad de radiacin emitida, la cual medida

33
 convenientemente permite determinar la concentracin del metal que se
analiza.

a. En la fuente de emisin el tomo excitado emite radiacin. El

electrn cae a su nivel del tomo emitiendo radiacin.
b. La radiacin emitida de cierta intensidad va a la fuente de
vaporizacin.
c. En la fuente de vaporizacin, el tomo al estado normal absorbe
la radiacin emitida segn su concentracin.
d. La radiacin no absorbida va hacia el detector.

Esto significa que para realizar el anlisis de algn elemento se requiere de una
lmpara de emisin por cada elemento a analizarse, as por ejemplo, si se va a
determinar sodio, se necesita una lmpara de sodio para la emisin de la
radiacin que ser absorbida por los tomos de sodio de la solucin problema;
si se va a determinar potasio en la misma muestra ser necesario cambiar la
lmpara de sodio por una de potasio y as sucesivamente.

INSTRUMENTACIN
COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN ATMICA

Fuente de luz.
ptica en la Unidad de Atomizacin.
Unidad de Atomizacin.
Monocromador.
Detector.
Unidad Convertidor de Respuesta.
Pantalla de presentacin de datos.

En la prctica todo instrumento por absorcin atmica requiere:

1) Una fuente apropiada que emite las longitudes de onda (radiacin
caracterstica) del elemento que se quiere determinar y del cual se selecciona
una sola longitud de onda, generalmente es una lmpara de descarga
especial que recibe el nombre de lmpara de ctodo hueco (HCL) y en otros
casos lmpara de descarga sin electrodos.

2) Una fuente adecuada para la vaporizacin de la solucin problema que

permite poner los tomos del metal que se quiere determinar en forma de
vapor atmico y generalmente es un sistema de pulverizacin acoplado a una
llama. La llama comn es la de acetileno- aire aunque hay otras de
temperatura ms alta que en algunos casos son necesarias.

3) Un sistema ptico, para la dispersin de la radiacin emitida y separacin de

la longitud elegida. Esta dispersin se realiza ya sea por prisma o por red de
difraccin.
4) Un sistema para la medida de la intensidad absorbida, el que se realiza por
un fotomultiplicador y el circuito electrnico correspondiente acoplado con
l.

34
5) Sistema de presentacin de los resultados, en la cual la intensidad
medida se expresa en trminos de absorcin. Esta absorcin por medio
de un grfico se relaciona con concentraciones conocidas, el que permite
determinar la concentracin del desconocido.

ESQUEMA DEL EQUIPO DE ESPECTROFOTMETRO

DE ABSORCIN ATMICA

APLICACIONES

La tcnica de Absorcin Atmica, es sencilla pero permite obtener resultados

de alta precisin. Debido a su gran sensibilidad tiene mucha importancia en la
determinacin de trazas de elementos metlicos. Actualmente es posible la
determinacin de trazas en concentracin de menos de 1ppb y se aplica a ms
de 50 elementos en diferentes tipos de muestra que hace que este mtodo sea
til en los diversos campos de la ciencia como: Agricultura, Minera, Textiles,
Alimentos, Petrleos, etc.

TCNICA DEL ANLISIS

Para las determinaciones cuantitativas se usan dos tcnicas:
1) La tcnica de la Curva de calibracin, es la ms comn y
2) La tcnica de Adicin de patrn.

TCNICA DE CURVA DE CALIBRACIN

Se prepara una serie de soluciones (por lo menos 3) de concentraciones
conocidas del elemento que se va a determinar, en las mismas condiciones
que se ha preparado la muestra y por lo menos con el mismo tipo de solvente.
35
Con las lecturas obtenidas en el instrumento se traza un grfico de
Absorbancia vs. Concentracin.
Se miden las muestras y las lecturas en valores de absorbancia se llevan al
grfico para hallar la concentracin.

2.0

1.60
A

1.20

0.8

0.4

0
0.4 0.8 1.20 1.60 2.0

TCNICA DE CURVA DE CALIBRACIN

TCNICA DE ADICIN DE PATRN

Se usa cuando no es posible reproducir en los patrones las condiciones en
que se encuentra la muestra. En este caso se prepara 4 soluciones que tenga
la misma cantidad de muestra y a tres de ellas se le agrega cantidades
conocidas pero diferentes del metal que se va a determinar, de manera que las
soluciones resultarn: x ppm, x+ 1 ppm, x + 2 ppm, x + 3 ppm, por ejemplo.
Se miden y se traza el grfico de Abs. vs. conc., por extrapolacin sobre el eje
de las x se encuentra la concentracin.

2.0

1.50
A

1.0

0.5

- 0.1 - 0.05 0 0.05 0.1 0.15 0.2

TCNICA DE ADICIN DE PATRN

36
 DETERMINACIN DE HIERRO EN JARABE ANTIANMICO

EQUIPOS Y MATERIALES

1. Espectrofotmetro de Absorcin Atmica Analyst 200, Perkin Elmer.

2. Lmpara de ctodo hueco de hierro.
3. Balanza analtica.
4. Pipetas volumtricas de 1, 3, 5 y 10 mL.
5. Fiolas de 25, 50, 100, 500 mL.

REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analtico.

1) Solucin Stock Madre : 1000 ppm Fe

2) Agua destilada.
3) HNO3 (reactivo controlado)

SOLUCIONES

1. Solucin Stock Madre: 1000 ppm Fe.

2. Solucin patrn intermedia de 100 ppm de Fe.- Diluir 10 mL de solucin
stock Madre de 1000 ppm Fe, con agua destilada y enrazar en fiola de 100
mL, homogenizar la solucin por inversin.
3. Soluciones para la curva de calibracin: Preparar soluciones de
calibracin en el rango de 2, 4, 6, 8, 10 ppm de Fe, diluir las alcuotas de
solucin patrn intermedia de 100 ppm de Fe, antes de enrazar en fiola de
50 mL, aadir 1 mL de HNO3 concentrado, homogenizar la solucin por
inversin.
4. Blanco: En una fiola de 50 mL colocar aproximadamente 45 mL de agua
destilada, aadir 1 mL de HNO3 concentrado y luego completar el volumen
hasta el enrase, homogenizar la solucin por inversin.

Procedimiento

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA

Tomar con pipeta volumtrica 5 mL de la muestra, llevar a fiola de 100 mL,

aadir 2 mL de HNO3 concentrado, enrazar con agua destilada, homogenizar
la disolucin por inversin.
Tomar con pipeta volumtrica 2 mL de la disolucin muestra anterior, llevar a
fiola de 50 mL, aadir 1 mL de HNO3 concentrado, enrazar con agua destilada,
homogenizar la disolucin por inversin.
37
INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO del ESPECTROFOTMETRO DE
ABSORCIN ATMICA ANALYST 200, PERKIN ELMER

1. Levantar la llave general, encender la compresora de aire, el baln de

acetileno, la campana extractora y el estabilizador.
2. Introducir en el equipo la lmpara de ctodo hueco apropiada.
3. Encender el espectrofotmetro: POWER (inferior, izquierda), escuchar
seal de conformidad, al ingresar Permitir Win Lab 32 control,
aceptar.
4. Encender monitor, CPU, Presionar NO enviar y Cancelar ante Per
Antivirus.
5. Ingresar a software WIN LAB 32, equipo chequea parmetros y luego
ir a WIN LAB 32 AA FLAME.
6. Ir a WORK SPACE, abrir MANUAL FILM Y ANALYST CONTROL.
7. Ir a METHOD, OPEN METHOD y en NEW METHOD indicar elemento a
analizar.
8. Ir a SPECTROMET seleccionar datos y en SIGNAL TYPE utilizar AA-
BG (Absorcin Atmica- Background)
9. Clic en SETING, READ PARAMETROS luego en SAMPLE y en ambos
corroborar datos.
10. En CALIBRATION, colocar en EQUATION: No forzar por Cero (no
lineal), clic en STD CONCENTRATION, completar con datos
solicitados y cerrar.
11. Guardar los datos del mtodo, presionando FILE, SAVE AS, anotar los
datos de mtodo en METHOD y OK.
12. Ir a SAMPLE INFO, verificar parmetros completar con datos
solicitados y cerrar.
13. Guardar los datos de la muestra con FILE, SAVE AS, anotar datos y
guardar.
14. Ir a LAMP, en nueva ventana verificar/seleccionar el elemento a
analizar, clic en ON /OFF, MEDIA ESCALA y en BACK GROUND y
cerrar.
15. Presionar CONTINNUOS GRAPHICS, esperar aparezca seal de la
lmpara, luego de algunos minutos presionar AUTOZERO. Si se desea
cambiar lmites, clic en APPLY y cerrar la ventana.
16. Colocar vaso con agua destilada en el capilar, prender la llama en ON,
colocar Blanco en el capilar, esperar drenar dos veces y clic en
ANALYZE BLANK, en pantalla inferior aparece resultado.
17. Colocar agua en capilar, drenar, luego colocar std 1, drenar y clic en
ANALYZED STD 1, esperar resultado. Repetir esta operacin con cada
estndar.
18. Colocar agua en capilar, drenar, luego colocar muestra, drenar y clic
en ANALYZED SAMPLE, esperar resultado.
19. Con el capilar agua destilada, dejar drenar por 15.
20. Ir a LAMP, apagar en OFF, apagar BACKGROUND, cerrar.
21. Despus de 15 apagar llama en OFF y cerrar. Aparece SHUTDOWN,
Puede guardar informacin en USB nuevo.
22. Apagar monitor, equipo, estabilizador. Dejar por 30 encendido la
campana extractora, luego cerrar llave del acetileno, la compresora,
bajar llave general.

38
NOTA

1) La preparacin de las muestras y patrones requieren la consulta del

libro de referencias Mtodos de Anlisis, en este libro se encuentra la
informacin para las condiciones elctricas de la lmpara de ctodo
hueco que se va a usar, las cuales se deben seguir rigurosamente.

Estas debern ser anotadas en el cuaderno de prcticas y se refieren a

la longitud de onda que se selecciona para el elemento que se va a
determinar, la corriente que deber tener el ctodo hueco, etc.

2) Tambin se obtiene la informacin como se prepara la muestra y los

patrones. Los patrones y las muestras debern estar completamente
listas al momento de operar el instrumento.

BIBLIOGRAFA

1. Mtodos Instrumentales de Anlisis.- Por H.H. Williard L.L. Merrit J.A. Dean
Nueva edicin revisada corregida y aumentada.

2. Traduccin de la cuarta edicin ingls. Ca. Editorial Continental S.S.

Mxico - Espaa.

3. Atomic-Absorcin Spectrofotometry, por W.T. Edwekk J.A.F. Gidley.

Pergamon Press, New York, 1961.

39
 PRCTICA N 5

ESPECTROFOTOMETRA DE EMISIN DE LLAMA

ANLISIS DE POTASIO EN AGUAS

FUNDAMENTO

a) Principio:
Se pueden determinar cantidades traza de potasio por espectrofotometra
de emisin de llama a una longitud de onda de 766,5 nm .Se pulveriza la
muestra en una llama de gas y la excitacin se realiza en condiciones
controladas y reproducibles. La lnea espectral se selecciona a 766,5 nm y
es aproximadamente proporcional a la concentracin del elemento. La curva
de calibracin puede ser lineal, pero muestra una tendencia a la
horizontalidad en concentraciones superiores.

b) Interferencia:
No hay interferentes significativos.

2.- INSTRUMENTAL
a) Espectrofotmetro de absorcin atmica en la modalidad de emisin de
llama.
b) Material de vidrio: Enjuguese todo el material de vidrio con HNO3 (1+15)
y a continuacin con varias porciones de agua destilada y desionizada.

3.- REACTIVOS
Con objeto de hacer mnima la adsorcin de potasio, conviene almacenar
todas las soluciones en botellas de plstico. Utilizar recipientes pequeos
para reducir la cantidad de elemento seco que puede quedar en las paredes
de la botella cuando se vierta la solucin.

1) Agua Destilada desionizada: Utilizar agua destilada desionizada para

preparar todos los reactivos y patrones de calibracin, as como para
disoluciones.
2) Solucin madre de potasio, 100 ppm K: Disolver 0,1908g de KCl
secados a 140C y diluir con agua hasta 1000 mL, homogenizar la
solucin por inversin; 1 mL=1 mg K
3) Solucin de potasio intermedia. 5 ppm K.- Diluir 5 mL de solucin
madre de potasio hasta 100 mL empleando agua destilada
desionizada, homogenizar la solucin por inversin; 1 mL=1 g K.

40
 PROCEDIMIENTO

I.- Tcnica de Curva de Calibracin

1) Muestra: Tomar con pipeta volumtrica 5 mL de la muestra de agua sin

gas, llevar a fiola de 100 mL y enrazar con agua destilada desionizada.

2) Patrones para la curva de calibracin: En seis fiolas de 50 mL,

adicionar a cada una, con pipeta volumtrica, 1, 2, 3, 4, 5, 10 mL de la
solucin intermedia de 5 ppm K, y enrazar. Las soluciones as
preparadas tendrn una concentracin de 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1,0 ppm
K respectivamente, sta ltima servir para fijar el lmite superior de
las lecturas.
3) Para el Blanco, enrazar con agua destila desionizada una fiola de 50
mL.
Seguidamente proceder a las lecturas, iniciando con el blanco, luego
los patrones y la(s) muestra (s).
Con la grfica de curva de patrones, calcular las ppm de K en la
muestra.

II.-Tcnica de Adicin de Patrones

1) Patrones para la curva de adicin de patrn: En cuatro fiolas de 50 mL,

adicionar a cada una, con pipeta volumtrica 10 mL de la muestra de
agua preparada en I (a), luego medir con pipeta volumtrica de la
solucin intermedia de 5 ppm K, volmenes de 0,0 ; 1,0 ; 2,0 ; 3,0 mL,
agregar respectivamente a cada fiola, enrazar, homogenizar la
solucin por inversin. Las soluciones as preparadas tendrn una
concentracin de 0; 0,1; 0,2; 0,3 ppm K respectivamente.
2) Seguidamente proceder a las lecturas, iniciando con el de
concentracin ms baja hasta la de mayor concentracin.
Con la grfica de adicin de patrones, calcular las ppm de K en la
muestra.

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO del ESPECTROFOTMETRO DE

ABSORCIN ATMICA ANALYST 200, PERKIN ELMER

1. Prender la llave general, compresora de aire, baln de acetileno,

campana extractora y estabilizador.
2. Encender el espectrofotmetro: POWER (inferior, izquierda), escuchar
seal de conformidad, aparece en la pantalla del equipo: Permitir Win
Lab 32 control.
3. Encender monitor, CPU, Ingresar a software WIN LAB 32, el equipo
chequea parmetros.

41
TCNICA: CURVA DE CALIBRACIN:

4. Ir a WORK SPACE, abrir MANUAL FILM.

5. Ir a METHOD, en NEW METHOD indicar elemento a analizar.
6. Ir a SPECTROMET seleccionar datos y en SIGNAL TYPE utilizar
Emisin.
7. Clic en SETING, READ PARAMETROS luego en SAMPLE y en ambos
corroborar datos.
8. En CALIBRATION, colocar en EQUATION: lineal con intercepto
calculado.
9. Clic en STD CONCENTRATION, completar los datos solicitados en la
columna ID (blanco, st. 1,., no colocar estndar de ms alta
concentracin) indicar concentracin de cada uno y cerrar.
10. FILE, SAVE AS, anotar el METHODO y OK.
11. Ir a SAMPLE INFO, verificar parmetros, completar los datos
solicitados en la columna ID, y cerrar.
12. FILE, SAVE AS, anotar datos en SAMPLE INFO y guardar.
13. Llenar 2(*) vasos con agua destilada, 1 y 2. Colocar el capilar, en el
primero, encender la llama en ON, luego el segundo, y a continuacin
el Blanco en el capilar, esperar drenar dos veces, en cada caso.
14. Presionar CONTINNUOS GRAPHICS, el equipo solicita el standard de
ms alta concentracin. Aspirar esta solucin, drenar 2 veces y clic
en OK. Esperar que aparezca la seal de emisin de radiacin. Cuando
llega la curva al eje Y, colocar el vaso 1 con agua destilada, el vaso 2
y el blanco; esperar drenar dos veces en cada caso. Presionar
AUTOZERO. Si se desea cambiar lmites, clic en APPLY. Cerrar.
15. Aspirar el blanco y hacer clic en ANALYZE BLANK, esperar drenar dos
veces, en pantalla inferior aparece resultado.
16. Colocar std 1, drenar 2 veces y clic en ANALYZED STD 1, esperar
resultado. Repetir esta operacin con cada estndar (Excepto el
estndar de ms alta concentracin). Guardar los resultados.
17. Colocar vaso 1 con agua en capilar, enseguida el vaso 2, drenar, luego
colocar muestra, drenar 2 veces en cada caso y hacer clic en
ANALYZE SAMPLE, esperar resultado. Continuar con el resto de
muestras, por el mtodo de curva de calibracin.
18. Colocar el capilar en el agua destilada, dejar drenar por 10. Apagar
llama, ir a File, presionar Exit. Esperar el anuncio de SHUT DOWN y su
desactivacin.
19. Ingresar a WIN LAB 32.

TCNICA DE ADICIN DE PATRONES

20. Ir a WORK SPACE, abrir MANUAL FILM.

21. Ir a METHOD, en NEW METHOD indicar elemento y tcnica a analizar.
22. Ir a SPECTROMET seleccionar datos y en SIGNAL TYPE utilizar
Emisin.
23. Clic en SETING, READ PARAMETROS luego en SAMPLE y en ambos
corroborar datos.
24. En CALIBRATION, colocar en EQUATION: Mtodo de adicin.
Intercepto calculado.

42
 25. Clic en STD CONCENTRATION, completar los datos solicitados (solo
indicar estndares con sus concentraciones, ejemplo ap1 - 0 ppm) y
cerrar.
26. FILE, SAVE AS, en METHOD y CLICK EN OK.
27. Llenar 2(*) vasos con agua destilada, 1 y 2. Colocar el capilar, en el
primero, encender la llama en ON, luego el segundo, y a continuacin
el Blanco en el capilar, esperar drenar dos veces, en cada caso.
28. Presionar CONTINNUOS GRAPHICS, el equipo solicita el standard de
ms alta concentracin. Aspirar esta solucin, drenar 2 veces y clic
en OK. Esperar que aparezca la seal de emisin de radiacin. Cuando
llega la curva al eje Y, colocar el vaso 1 con agua destilada el vaso 2 y
el blanco; esperar drenar dos veces en cada caso. Presionar
AUTOZERO. Si se desea cambiar lmites, clic en APPLY. Cerrar.

29. Colocar std 1 (Adicin de patrones), drenar 2 veces y clic en

ANALYZED STD 1, esperar resultado. Repetir esta operacin con cada
estndar de adicin de patrn. Guardar los resultados.
30. Colocar el capilar en el agua destilada, dejar drenar por 15.
31. Apagar llama en OFF y cerrar. Aparece SHUTDOWN, esperar su
desactivacin.
32. Apagar monitor, equipo, estabilizador, desconectar. Dejar por 30
encendido la campana extractora, luego cerrar llave del acetileno, la
compresora, bajar llave general.

Nota (*): Se recomienda usar 2 vasos con agua destilada, para prevenir la
contaminacin del agua de lavados por el contenido de patrones y muestras
adherido a la parte externa del capilar.
El agua del vaso 1 sirve para lavar el capilar y la del vaso 2 se conserva limpia
y se usa a continuacin para asegurar la limpieza del sistema antes de pasar
la siguiente solucin.

6.-BIBLIOGRAFA

1. Gilbert, P.T.R.C. Hawes & A.O.Beckman 1950, Beckman flame

spectrophotometer, Anal Chem. 22:272.

2. West, P.W.Folse & D.Monngidmfry 1950 Application of flame

spectrophotometry in water analyses, Anal Chem.
22:267.

3. Collins C.G. & Polkinhorne 1952 .An investigation of anionic

interference in the determination of small quantities of potassium
and sodium with a new flame photometer. Anal Chem. 77:430

43
 PRCTICA N 6
CROMATOGRAFA DE GASES

1.- Introduccin.

En cromotografa de gases se incluyen todos los mtodos cromatogrficos en

los que la fase mvil es un gas (gas portador), y la fase estacionaria un lquido
(CGL) o un slido (CGS). Se desarrolla en una columna cerrada en la que se
encuentra retenida la fase estacionaria y por la que se hace pasar el gas portador,
la tcnica de separacin se realiza por elucin.
Iniciado el proceso cromatogrfico los componentes de la mezcla se distribuyen
entre la fase estacionaria y la fase mvil; la elucin tiene lugar mediante el paso
de un gas inerte a travs de la columna. La fase mvil no interacciona con el
analito y su nica misin es la de transportar la muestra.
La cromatografa gas-slido, tiene una fase estacionaria slida en la cual se
produce la retencin de los analitos debido a la adsorcin fsica sobre la
superficie del slido. Esta tcnica ha tenido una aplicacin limitada debido a la
tendencia de los picos de elucin a formar colas y a la retencin semipermanente
de gases activos sobre la fase estacionaria.
La cromatografa gas-lquido, se basa en la distribucin del analito entre una fase
mvil gaseosa y una fase estacionaria lquida inmovilizada sobre la superficie de
un slido inerte (soporte) o en las paredes interiores de la columna, si sta es
capilar.
La tcnica ha sido ampliamente desarrollada en los ltimos aos en el anlisis de
compuestos voltiles (punto de ebullicin inferior a 400oC). La limitacin se debe
a que las muestras se deben de introducir como gas en la entrada de la columna;
cuando son lquidas se volatilizan instantneamente en el puerto de inyeccin del
Cromatgrafo.
Martin y Synge, en 1941, definieron la tcnica y en 1955 aparece en el mercado el
primer cromatgrafo.

2.- Esquema de un cromatgrafo de gases

Las partes esenciales de un equipo cromatogrfico son:
Fuente de gas portador (botella a presin)
Sistema de regulacin de caudales (vlvula reguladora y manmetro)
Puerto termostatizado de inyeccin de las muestras.
Columna termostatizada, conteniendo la fase estacionaria, dentro de un
Horno.
Detector termostatizado, con amplificador de seal y registro grfico.
Caudalmetro de precisin.

44
 Diagrama de un cromatgrafo de gases.

El gas portador es un gas inerte, generalmente helio, nitrgeno o argn, de

elevado grado de pureza. El caudal del mismo que pasa por la columna, ha de ser
conocido y controlado.
El puerto de inyeccin, para introducir los solutos en la corriente de gas portador
y vaporizar las muestras cuando stas no son gaseosas. As, la temperatura del
puerto de inyeccin debe de ser superior a la del punto de ebullicin del
componente de la mezcla menos voltil.
Las columnas pueden ser con relleno, en las que la fase estacionaria lquida est
retenida sobre un slido inerte (soporte) y capilares o semicapilares, en las que
la fase estacionaria se fija sobre las paredes interiores del capilar. La temperatura
de la columna depende de los puntos de ebullicin de los componentes de la
mezcla.
El detector tiene por objeto medir la variacin de alguna propiedad fsica del gas
portador originada por la elucin de los compuestos. La temperatura del detector
ha de ser mayor o igual que la de columna para evitar la condensacin de algn
compuesto eluido
Registrador grfico o digital de la medicin del detector.
La separacin de los compuestos de una mezcla se realiza en las siguientes
etapas,
1.- Una vez elegida la columna y fase estacionaria, se ajustan las temperaturas
de la cmara de inyeccin, columna y detector, as como el caudal de gas

45
 portador. Cuando la seal del detector es constante (sin ruidos la lnea base)
se hace la inyeccin de la muestra.
2.- Las muestras se inyectan en cantidades inferiores a 1 l cuando son
lquidas y sobre 1 ml si son gaseosas; se introducen en la cmara de
inyeccin, donde se vaporizan, y son arrastradas hasta la cabeza de la
columna.
3.- Los componentes se fijan en una pequea zona de la columna; por
equilibrios sucesivos entre la fase mvil y la estacionaria, cada componente
se desplaza por la columna a velocidades diferentes.
4.- Finalmente, los solutos que salen de la columna, pasan al detector y se
obtiene el cromatograma.
Los parmetros que definen una separacin cromatogrfica gas-lquido son, tipo
de gas portador y caudal del mismo; columna y dimensiones de la misma; fase
estacionaria; tipo de detector; temperatura del puerto de inyeccin, de la columna
y del detector.

3.-Fase mvil

Ha de ser un gas inerte, que no interaccione con la fase estacionaria ni con el

analito, como el helio, el argn, el nitrgeno y el hidrgeno. La eleccin del gas
portador se hace, frecuentemente, en funcin del detector. El nitrgeno, helio y
hidrgeno suele utilizarse con los detectores de ionizacin de llama (FID). El
argn con el detector de captura electrnica (ECD). El helio e hidrgeno con el
detector de conductividad trmica (TCD), por su elevada conductividad; si bien
el hidrgeno es un fuerte reductor, lo que puede limitar su uso.
La velocidad de flujo se controla por medio de reguladores de presin,
manmetros y medidores de flujo. El rango de presiones vara entre de 0,7 a 3,5
kg/cm2 por encima de la presin ambiental, lo que proporciona una velocidad de
flujo desde 25 a 50 ml/min en las columnas de relleno y de 1 a 25 ml/min en las
columnas capilares. El caudal de gas portado se mide al final de la columna,
mediante un medidor de pompas de jabn.

4.-Sistema de inyeccin

La eficacia de la columna obliga a que la muestra sea de un tamao adecuado y

que se aplique instantneamente; inyecciones lentas o muestras de volumen
excesivo producen ensanchamientos de las bandas y disminuye la eficacia.
La muestra se introduce en el bloque de inyeccin con una microjeringa a travs
de una membrana de caucho o silicona (septum). La cmara de inyeccin es de
acero inoxidable o nquel con un sistema de calefaccin elctrico y un

46
aislamiento trmico que permita mantener una temperatura constante, 50C por
encima del punto de ebullicin del analito.

INYECTOR PARA CAPILARES

En las columnas de relleno, la cantidad de muestra lquida mxima es de 10 L;

en columnas capilares se utilizan muestras mucho ms pequeas, del orden de
10-3 L. El inyector para columnas capilares suele disponer de un sistema de
divisin de flujo (split/splitless) para que a la columna solamente pase una
pequea fraccin de la muestra, desechando el resto. Las muestras gaseosas se
inyectan mediante una vlvula automtica y en mayor cantidad.
Los requisitos que debe cumplir un sistema de inyeccin son producir bandas
iniciales lo ms estrechas posibles y no alterar la composicin de la mezcla que
llega a la columna.

5.-Tipos de columnas
Existen dos tipos de columnas, principalmente, de relleno y capilares o
semicapilares. Contiene la fase estacionaria y en ella tiene lugar la separacin
cromatogrfica.

47
Las columnas de relleno suelen ser de cobre, acero inoxidable, aluminio, vidrio y
tefln; con un dimetro interior entre 2 y 4 mm y una longitud entre 2 y 3 m. La
eficacia est en torno a 1.000-2.000 (platos tericos/m). Suelen emplearse para
muestras poco complejas, mximo 10 componentes.
La columna est rellena de un material slido (soporte), finamente dividido y
homogneo; recubierto, por una capa de 0,05-1 m de espesor, de fase
estacionaria lquida. Est configurada en forma helicoidal, con un dimetro de
unos 15 cm, para poder ser instalada en el horno termostatizado.
Las columnas capilares tienen un dimetro interior inferior a 1 mm (320-250 m)
y una longitud de 5 a 50 m. Suelen construirse con slice fundida que le dan gran
resistencia fsica y flexibilidad. Alcanzan una eficacia hasta de 4.000 (platos
tericos/m) y se usan para muestras complejas. La fase estacionaria se
depositada sobre las paredes interiores del tubo capilar.
Otro tipo de columnas capilares son con soporte recubierto, en la que la
superficie interna del capilar est recubierta de una capa de material de soporte
(tierras de diatomeas) de 30 m, lo que permiten una mayor cantidad de fase
estacionaria y por tanto de muestra.
Las columnas semicapilares tienen un dimetro interior de 530 m que admiten
cantidades de muestra similares a las columnas de relleno, y proporcionan mayor
eficacia que stas.
Una de las variables importantes en el desarrollo cromatogrfico, como se indic
con anterioridad, es la temperatura de la columna; temperatura ptima es funcin
de los puntos de ebullicin de los componentes de la muestra y del grado de
separacin deseado.
En muestras de parecidos puntos de ebullicin la temperatura ptima es
ligeramente superior al punto de ebullicin medio de los componentes de la
muestra. En el caso de muestras complejas, en la que los puntos de ebullicin de
los distintos componentes son muy diferentes, se recomienda emplear una
programacin de temperatura, aumentando sta continuamente a medida que
avanza la separacin. El aumento de la temperatura reduce los tiempos de
retencin.

6.-Fase estacionaria. Soporte slido

La fase estacionaria de una columna cromatogrfica ha de reunir una serie de

requisitos como,

* Baja volatilidad, su punto de ebullicin debe de ser por lo menos 100 oC

Superior a la temperatura mxima de operacin de la columna.
* Estabilidad trmica.
* Inercia qumica.
* Los valores del factor de capacidad (k) y del factor de selectividad () de los
analitos deben estar dentro de los intervalos aconsejados.

48
La separacin en cromatografa gas-lquido se debe a los diferentes coeficientes
de reparto del analito entre la fase mvil y la fase estacionaria y tiene que haber
un cierto grado de solubilidad de los compuestos con la fase estacionaria. Por
ello, una caracterstica muy importante de la fase estacionaria es la polaridad.
Siguiendo el principio de semejantes disuelven a semejantes los solutos se
retienen ms en las fases lquidas de polaridad parecida, lo que permiten obtener
mejores separaciones.
Las fases estacionarias compuestas de hidrocarburos y de dialquilsiloxanos son
poco polares, las compuestas por polister son muy polares. En cuanto a
posibles compuestos objeto de separacin, los alcoholes, cidos y aminas son
polares; los steres cetonas y aldehdos tienen polaridades intermedia; y son de
baja polaridad los hidrocarburos saturados.
Otro factor a tener en cuenta son los lmites de temperatura que puede soportar
la fase estacionaria, el lmite inferior ser el punto de fusin o temperatura a la
que la viscosidad de la fase lquida es muy elevada, lo que hara disminuir la
eficacia. El lmite superior es la temperatura a la que la presin de vapor de esta
fase sea 0,1 mm Hg (250oC inferior al punto de ebullicin) por encima de esta
temperatura se produce arrastre de la fase lquida, lo que lleva consigo efectos
en el detector (ruido, suciedad), interferencias con los solutos y en suma, deterioro
de la columna.
En una fase lquida cualquiera, una serie homloga se eluye segn orden
creciente de nmero de tomos de carbono. Si la fase es no polar, los solutos no
polares eluyen segn orden creciente de punto de ebullicin. En una fase polar
se retendrn ms los solutos polares que los no polares a igualdad de puntos de
ebullicin.
Otro aspecto a desarrollar, relacionado con la fase estacionaria, es el soporte
slido empleado en las columnas de relleno; el objetivo es el de proporcionar una
superficie elevada donde depositar la fase lquida en forma de pelcula muy fina
para proporcionar una mayor superficie de contacto entre fase mvil y fase
estacionaria.
Las caractersticas de los soportes slidos son, una elevada superficie especfica
(1m2/g); una superficie homognea; estabilidad trmica; geometra adecuada;
baja dispersin de tamao de las partculas, en torno a 150-250 m; dureza
mecnica; inercia qumica y naturaleza porosa.
Los soporte, ms generalizados, son los de slice como las tierras de diatomeas
o sintticos; de vidrio y de polifluorocarbonados (tefln). Los soportes de
diatomeas estn constituidos por residuos de algas unicelulares diatomceas
que se unen formando filamentos.
Hay unas 10.000 especies de diatomeas con esqueletos diferentes, pero parecida
estructura. Tienen una superficie especfica de 1 m2/g. El constituyente
mayoritario es de anhdrido silcico SiO2 (90%), tratado con un fundente alcalino
a 1.600oC , se obtiene el producto comercial conocido como Chromosorb W de
una superficie poco adsorbente por lo que es muy til para separar compuestos
polares. Otro soporte es el de polvo de ladrillo refractario conocido como

49
 Chromosorb P, C-22 y Sterchomel, tiene mayor resistencia mecnica y superficie
especfica que el anterior, pero es muy activo y no se puede utilizar con
compuestos polares.

Los soportes de silicatos en columnas de relleno y en las paredes interiores de

slice fundida, en las columnas capilares, provocan adsorciones no deseadas de
analitos polares, lo que da como resultado picos cromatogrficos distorsionados.
Se ha demostrado que este fenmeno se debe a los grupos silanol (-SiOH) que
se forman en la superficie de los silicatos debido a la humedad. El silanol tiene
gran afinidad por las molculas orgnicas polares. Este proceso puede
desactivarse por sililacin con dimetilclorosilano, Cl2Si(CH3)2, que elimina el H
del silanol formando ClH.

7.- Detectores

Un detector es todo dispositivo capaz de medir una propiedad fsica del gas
portador, la cual vara con la presencia de pequeas cantidades de analito; debe
reunir una serie de caractersticas,

Alta sensibilidad (relacin entre la respuesta del detector y la magnitud fsica

de la muestra detectada)
Buena estabilidad
Respuesta continua y reproducible a los cambios de concentracin del
compuesto
Respuestas adecuadas al mayor nmero posible de muestras
Tiempo de respuesta corto
Reactividad nula.

El detector ms comn es:

a) Detector de ionizacin de llama, es uno de los ms usados en cromatografa

de gases; el gas portador procedente de la columna se mezcla con hidrgeno
que sale por una tobera. En el extremo de sta, se aporta aire y forma una llama
que quema e ioniza los compuestos separados en la columna.
En la parte superior se encuentran dos electrodos entre los que se establece
una diferencia de potencial; el analito ionizado en la llama y ocasiona un paso
de corriente entre los electrodos. Los gases portadores que se utilizan son el
helio, nitrgeno e hidrgeno.
Este detector es insensible a grupos funcionales como carbonilo, alcohol,
halgenos y amina que originan en la llama pocos iones; lo mismo ocurre con
el He, Ar, Kr, Ne, Xe, O2, N2, CS2, H2S, SO2, NO, N2O, NH3, CO, CO2, H2O, CH4,

50
 SiHCl3, SiF4. Por otra parte, posee una elevada sensibilidad (10-13 g soluto/ml)
y es destructivo

Detector de ionizacin por llama de hidrgeno.

8.-Aplicaciones analticas
La aportacin analtica de la cromatografia de gases al anlisis qumico tiene dos
vertientes, la primera es su capacidad en la separacin de compuestos
(orgnicos, inorgnicos, bioqumicos, etc.). La segunda es emplear los tiempos
o volmenes de retencin para la identificacin cualitativa, mientras que el rea
de los picos proporciona informacin cuantitativa.

A. ANLISIS CUALITATIVO
El anlisis cualitativo se efecta comparando los tiempos de retencin o
volmenes de retencin de la nuestra problema, con los tiempos o volmenes
de retencin de un patrn.
Los tiempos de retencin se miden desde el punto de inyeccin de la muestra,
hasta la altura mxima de los picos.
Como parmetro cualitativo se encuentra el tiempo de retencin (tR) o el
volumen de retencin (VR); sin embargo, su dependencia de variables tales
como temperatura de la columna, velocidad de flujo y composicin de la fase

51
 estacionaria, le hace poco fiable. Pese a ello, si se observan tiempos de
retencin muy parecidos para un patrn (sustancia conocida) y una muestra
problema cuando cambian las condiciones de operacin, las probabilidades
de que ambas sean la misma sustancia aumentan.
Otro parmetro cualitativo es la retencin relativa que requiere un patrn
interno B que permite obtener un valor de que sirve como ndice para
identificar un compuesto A.

A = ((tr)B - tM ) / ((tr)A tM)

B. ANLISIS CUANTITATIVO
En el anlisis cuantitativo se mide el rea de los picos. Para determinar el rea
de los picos se debe hacer uso de la aproximacin triangular de la curva
gaussiana, midiendo la altura y dividiendo entre la mitad del ancho de la base.
Para los picos ms amplios debe determinarse el rea bajo la curva. Cuando
los picos son precisos y angostos, el error al medir solamente la altura, es
mnimo. En el anlisis cuantitativo existen varios factores importantes:
Introduccin de cantidad exacta de la muestra, exactitud al medir el rea de los
picos, factores de sensibilidad de cada compuesto, linealidad de los detectores
y columnas que dan picos bien resueltos.
MTODOS DE CALIBRACIN.- Existen varios mtodos de calibracin
citaremos algunos de ellos:
A. rea de Normalizacin.- Este mtodo es realmente un clculo del porcentaje
de rea, asumiendo que es igual al porcentaje del peso conocido.

A X x 100
A 1
% REA X

Donde AX = es el rea de X y el denominador es la suma de todas las reas,

siendo x el analito.
B. Estndar externo.- Este mtodo es usado preferentemente cuando se
conoce las cantidades del analito, se cromatografan, se miden las reas y
se plotea la curva de calibracin rea vs. Concentracin.
C. Estndar interno.- Este mtodo y el de adicin de estndar son
particularmente usados para tcnicas que no son tan reproducibles. El
mtodo de estndar interno no requiere la medida de volmenes exactos. El
estndar elegido para este mtodo no debe ser un componente de la muestra
y se agrega a cada muestra una cantidad conocida de este estndar.

52
 D. Mtodo de adicin de estndar.- El estndar tambin se aade a la muestra.
El principio de este mtodo es que el incremento adicional producido por la
adicin del estndar es proporcional a la cantidad de estndar aadido, y
este proporcionalmente puede ser usado en la determinacin de la
concentracin del analito en la muestra original. El estndar debe contener
al analito.
Procedimiento
A. ANLISIS CUALITATIVO:
Reactivos:1) Etanol absoluto
2) n-butanol
3) Metanol
Nombre Pictograma Riesgo auxilios

Inhalacin:
Inhalacin: Irrita Ventilacin,
vas suministrar
respiratorias oxgeno.
vrtigo, Ingestin: Lavar la
somnolencia, boca con
nuseas, abundante agua,
prdida de no inducir al
n- butanol conocimiento. vmito, ni
C4H9OH Ingestin: administrar nada
Vmito, dolor por la boca a la
abdominal. persona
Contacto con inconsciente.
piel y ojos: Contacto con ojos
riesgo ocular y piel: Lavar con
grave, dolor. abundante agua o
ducharse por
varios minutos.
Atencin mdica.

Inhalacin:
Inhalacin: Irrita Ventilacin,
vas suministrar
respiratorias oxgeno.
vrtigo, Ingestin: Lavar la
somnolencia, boca con
nuseas, abundante agua,
prdida de no inducir al
metanol conocimiento. vmito, ni
CH3OH Ingestin: administrar nada
Vmito, dolor por la boca a la
abdominal. persona
Contacto con inconsciente.
piel y ojos: Contacto con ojos
riesgo ocular y piel: Lavar con
grave, dolor. abundante agua
por varios
minutos o
ducharse.
Atencin mdica.

EQUIPO: Instrumento: Cromatgrafo de Gases AutoSystems XL Perkin

Elmer

53
 Columna Capilar: SPB - 608

Longitud: 30 m x 0,53 nm DI x 0,5 m

Fase mvil: N2
Detector: FID
Temperatura del Horno: 100 C
Temperatura del Detector: 200C
Temperatura del Inyector: 150C
Volumen de inyeccin: 0,1 L

1. Preparacin de soluciones:

Medir con pipeta 2 mL de etanol, butanol y acetona, colocar en una fiola

de 10 mL y enrasar con agua bidestilada.

2. Datos obtenidos:

Identificar los picos obtenidos al inyectar la mezcla de alcoholes.

Cromatograma Tiempo de retencin Solvente

(Tr)
Pico 1

Pico 2
Pico 3

ANLISIS CUANTITATIVO

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE METANOL EN BEBIDAS

ALCOHLICAS (PISCO) POR EL MTODO DEL PATRN INTERNO

Procedimiento
Mtodo: Adicin de estndar Interno (n-butanol)
Reactivos:
1. Etanol grado cromatogrfico ( = 0,7893)
2. Estndar interno: 386uL de n-butanol, llevar a fiola de 25 mL y
enrasar con etanol al 40%, homogenizar la solucin por
inversin.
3. Solucin stock: 127uL (127mL) de metanol, llevar a fiola de 100
mL y enrasar con etanol al 40% homogenizar la solucin por
inversin.

54
 Preparacin de estndares:

Estndar 1:
Medir 5 mL de la solucin stock y llevar a fiola de 50mL; antes de enrasar
aadir 800 L de solucin estndar interno, enrasar la fiola con etanol al
40% V/V, homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr 100 ppm de MeOH.

Estndar 2:
Medir 5 mL de la solucin stock y llevar a fiola de 25mL; antes de enrasar
aadir 400 L de solucin estndar interno; enrasar la fiola con etanol al
40%, homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr aproximadamente 200 ppm de MeOH.

Estndar 3:
Medir 10 mL de solucin stock en fiola de 25 mL; antes de enrasar aadir
400 L de solucin estndar interno; enrasar la fiola con etanol al 40%
homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr aproximadamente 400 ppm de MEOH.

Preparacin de la muestra:

En una fiola de 25 mL adicionar 20 mL de pisco, y en otra fiola 10 mL de

pisco, luego aadir 400 L de solucin estndar interno (n-butanol) a cada
fiola y enrasar con agua bidestilada homogenizar la solucin por inversin.

Preparacin de soluciones:

Sol.
Solucin Stock STD Interno Volumen % MeOH MeOH
(MeOH) (n-butanol) final (mL) (v/v) (mg/L)

Std1

Std2

Std3

Muestra

55
1. Parmetros Cromatogrficos:

Equipo: Cromatgrafo de Gases

Marca : Perkin-Elmer
Modelo: AutoSystem XL
Columna:
Gas Carrier:
Horno:
Temp. del Inyector:
Detector:
Volumen de inyeccin:

2. Datos obtenidos:

Solucin A MeOH A n-butanol A MeOH/ Conc.

( V.s) ( V.s) A n-BuOH MeOH
(mg/L)

Std1

Std2

Std3
Muestra

- Graficar A MeOH/A n-butanol vs. Conc. MeOH con los datos obtenidos
para los estndares.

- Realizar la regresin lineal para los mismos datos y obtener el

coeficiente de correlacin.

- Determinar el contenido de Metanol en mg/L y en %V/V MeOH

56
 PRCTICA N 7
TCNICAS ELECTROMTRICAS

ANLISIS POTENCIOMTRICO CON ELECTRODO DE Pt (INERTE)

Fundamento

El mtodo de titulacin potenciomtrica est basado en el cambio gradual del

potencial establecido entre dos electrodos sumergidos en una solucin, a la que
adiciona un titulante de concentracin conocida, que al reaccionar con la primera
va reduciendo la concentracin de sta y sufre una brusca variacin en presencia
de una ligero exceso de la solucin titulante, permitiendo por medio de esta
rpida variacin de potencial, determinar el punto de equivalencia.
Se usa un electrodo de potencial conocido y constante que es el de referencia
(Ag/AgCl.) y otro electrodo indicador Inerte (Pt), cuyo potencial vara durante la
titulacin. Este electrodo debe ser capaz de alcanzar un rpido equilibrio de su
potencial conforme se adicionan cantidades diferentes de titulante.
Cualquier cambio de la diferencia de potencial (EInd.- ERef.) entre los electrodos
se registra en un sistema de medida llamado potencimetro, se debe
exclusivamente al cambio en el electrodo indicador cuyo potencial E Ind. vara en
funcin de la concentracin del ion en la solucin, en completo acuerdo con la
ecuacin de Nernst, a medida que progresa la titulacin.

Al final, se hace un grfico considerando el potencial de la solucin ( EInd. - ERef.)

Contra el volumen de titulante.
El punto de la mxima variacin de la curva corresponde prcticamente al punto
de equivalencia.

VENTAJAS DEL MTODO

Es aplicable el mtodo, con ventaja, sobre el mtodo volumtrico clsico en:

1. Identificacin de impurezas en la muestra por titulacin volumtrica.

2. Normalizacin de:
a. Soluciones coloreadas.
b. Soluciones que no admiten la aplicacin de indicadores de coloracin.
c. Soluciones no acuosas.
3. Tiene mayor precisin y sensibilidad.
4. Admite la posibilidad de titular varias sustancias sucesivamente de las
contenidas en la misma solucin.

57
AMPLITUD DE APLICACIN

Es aplicable a titulaciones de neutralizacin, oxidacin - reduccin (REDOX),

precipitacin y formacin de complejos.
Los electrodos, tanto de referencia como indicador varan para cada caso (ver
referencias bibliogrficas).
Se aplicar el anlisis potenciomtrico en:
a) Normalizacin de soluciones
b) Anlisis de hierro en diferentes muestras.

Tratamiento de los datos Obtenidos

Los datos se obtienen por lecturas del instrumento, en voltios o milivoltios (o en

unidades de PH), despus de cada adicin sucesiva de titulante y las lecturas que
se obtienen se grafican contra el volumen de titulante, para dar una curva de
titulacin como se muestra:

Curva de valoracin potenciomtrica de E vs Volumen del titulante

Se debe determinar el punto de inflexin de la curva, con algn tipo de

inspeccin. Existe cierta inexactitud en este procedimiento.
La siguiente grfica muestra la pendiente de una curva de titulacin, es decir el
cambio de potencial con el cambio de volumen (E/V) contra el volumen del
titulante. La curva que resulta tiene un mximo en el punto de equivalencia. El
volumen en el punto de equivalencia se determina trazando una lnea vertical
desde este pico hasta el eje del volumen.

58
 Curva de valoracin potenciomtrica de E/V vs Volumen del titulante

En la grfica siguiente se muestra la segunda deriva del potencial respecto al

cambio de volumen vs el volumen del titulante 2 E/ V2, el punto final se localiza
trazando una lnea vertical desde el punto en el cual 2 E/V2 es cero, hasta el
eje del volumen.

Curva de valoracin potenciomtrica de 2 E/ V2 vs Volumen del titulante

59
 VmL
E mV E/V V mL 2 E/V2 V mL
titulante
0 E1
E2 E1 03
A VA
3 E2 30 2

B -A
M V A VB
E3 E2 36 VB V A VM
B VB 2
6 E3 6-3 2

VB V C
E4 E3 69 C-B VN
C VC N 2
9 E4 96 2 VC - V B

Ejemplo de lecturas de potencial del titulante

A.- ESTANDARIZACIN DE K2Cr2O7 0,1 N CON SAL DE MOHR

INSTRUMENTO:
Potencimetro Beckman 300.
Electrodo Mixto de Pt, Ag/AgCl.

Reactivos
1. Solucin de K2Cr2O7 0,1N.
2. . H2SO4 2N.- Verter el cido sobre el agua, enfriando el recipiente con
chorro de agua

Nombre Pictograma Riesgo Primeros auxilios

Inhalacin: Inhalacin: Ventilacin,
lesin grave de suministrar oxgeno,
vas atencin mdica inmediata.
respiratorias. Ingestin: beber abundante
H2SO4 Ingestin: agua, no inducir al vmito,
concent. dolor no proceder a pruebas de
(reactivo abdominal, neutralizacin, atencin
vmito, peligro mdica inmediata.
controlado) de perforacin. Contacto con piel: retirar
Contacto con inmediatamente ropa
piel: severas contaminada, lavar con
quemaduras abundante agua o ducharse
con por varios minutos,
malformacione impregnar algodn con
s Contacto con polietilenglicol 400.
ojos: riesgo Atencin mdica inmediata.
ocular grave, Contacto con ojos: Lavar
dolor, lesin de con abundante agua.
crnea. Atencin oftalmolgica
inmediata.

3. Sal de Mohr Fe(NH4)2(SO4)2. 6H2O.

4. Indicador difenilamina al 1%.

60
 Procedimiento
1) Verificar el funcionamiento adecuado del instrumento (ver manual).

2) Colocar en un beaker de 400 mL, 0,2500 g de sal de Mohr, disolver con 25

mL de H2SO4 2 N y llevar a volumen aproximado de 200 mL con agua
destilada. Calcular el volumen terico.
3) Colocar el vaso con la disolucin sobre el agitador magntico y regular la
velocidad de rotacin del magneto.
4) Introducir el electrodo en la solucin a titular, teniendo cuidado de no tocar
el magneto que est rotando, porque podra romper el electrodo que es muy
delicado (cuidado).

5) Realizar la lectura del potencial ( E ) en mV inicial de la solucin.

6) Iniciar la adicin de la solucin de K2Cr2O7 0,1 N desde una bureta

enrasada, al principio, el agregado puede hacerse de 2 mL cada vez,
realizando la lectura de potencial en cada adicin, cerca al volumen terico,
en unos 2 mL antes y despus del punto de equivalencia, el agregado debe
hacerse en porciones de 0,2 mL cada vez, realizando sus respectivas
lecturas de potencial.
A partir de este volumen, la adicin de K2Cr2O7, puede ser de 2 mL o ms
hasta llegar a potencial constante.

7) Realizar las titulaciones por triplicado.

8) Graficar las tres titulaciones en papel milimetrado.

E (ordenada) vs Volumen de K2Cr2O7 0,1N (abscisa).
E/ V (ordenada) vs Volumen K2Cr2O7 0,1N (abscisa).
2 E/ 2 (ordenada) vs Volumen K2Cr2O7 0,1N (abscisa).

9) Determinar el volumen en el punto de equivalencia.

10) Determinar el E en el punto de equivalencia.
11) Determinar el volumen promedio con las lecturas calculadas por c/u de las
grficas.
12) Calcular la concentracin del K2Cr2O7.
B. DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE HIERRO EN JARABE DE FeSO4 POR
TITULACIN CON K2Cr2O7 0,1N

Muestra: Jarabe de FeSO4

Procedimiento

1. Pipetear 10 mL de jarabe y transferirlo a un Beaker de 400 mL agregar 25 mL

de H2SO4 2 N y llevar a volumen aproximado de 200 mL con agua destilada.

2. Continuar igual que en el procedimiento anterior a partir de (3) hasta (9).

3. Calcular el contenido de Fe en el jarabe en mg Fe/ 5 mL jarabe.

61
 PRCTICA N 8
ANLISIS POTENCIOMTRICO CON ELECTRODO SELECTIVO DE
IONES
1. Introduccin
Mtodo potenciomtrico de anlisis es la medida de un potencial con el fin de
conocer la actividad (concentracin) de una sustancia en disolucin. El objetivo
de una medicin potenciomtrica es obtener informacin acerca de la
composicin de una disolucin mediante el potencial que aparece entre dos
electrodos. La medicin del potencial se determina bajo condiciones reversibles,
en forma termodinmica, y esto implica que se debe dejar pasar el tiempo
suficiente para llegar al equilibrio, extrayendo la mnima cantidad de intensidad,
para no influir sobre el equilibrio que se establece entre la membrana y la
disolucin muestra.

2. Principios bsicos
La tcnica conocida con el nombre de potenciometra directa, consiste en la
medida de la actividad (o concentracin) de una especie qumica, midiendo
directamente el potencial con el que est directamente relacionada, mediante una
conocida funcin logartmica conocida como ecuacin de Nernst.
E = E0 + 2,3 (RT/nF) log ai

E = Potencial medido (mV) E0 = Potencial de referencia (mV)

R = constante de los gases T = temperatura absoluta (K)

n = nmero de electrones transferidos F = constante de Faraday
ai = actividad inica

La actividad inica est relacionada con la concentracin por el factor de

actividad. ai = fi * ci

A temperatura constante, la ecuacin de Nernst puede escribirse:

E = E0 + S ai; donde S es la pendiente del electrodo.

De la ecuacin de Nernst se deduce que efectuando mediciones de potencial

respecto a un electrodo de referencia, puede conocerse la actividad y, por tanto,
la concentracin del ion en cuestin. La aplicacin ms conocida de las potencio-
metras directas es la utilizacin de lo que se conoce con el nombre de Electrodos
Selectivos de Iones (ISE).

62
Para obtener mediciones analticas vlidas en potenciometra, uno de los
electrodos deber ser de potencial constante y que no sufra cambios entre uno y
otro experimento. El electrodo que cumple esta condicin se conoce como
electrodo de referencia. Debido a la estabilidad del electrodo de referencia,
cualquier cambio en el potencial del sistema se deber a la contribucin del otro
electrodo, llamado electrodo indicador o de trabajo.
El potencial registrado es en realidad la suma de todos los potenciales
individuales, con su signo correspondiente, producidos por los electrodos,
indicadores y referencia. La modificacin del transporte de materia debido a la
presencia de la membrana puede dar lugar a diferencias de potencial
electrosttico; estos potenciales de membrana son funcin de la composicin de
las disoluciones y pueden por tanto relacionarse con las actividades de los iones
de las mismas.
Una de las principales ventajas de este tipo de electrodos es que pueden
construirse, en principio, para cualquier especie inica, aunque las dificultades
de la obtencin de un electrodo especfico provienen de las tcnicas que se
necesiten para su preparacin. Constituyen una herramienta importante para la
determinacin de iones, debido a la capacidad que tienen para obtener selectiva
y de forma continua la actividad de un ion en disolucin.

3. Instrumentacin
Los componentes que integran el sistema de medicin son:
El electrodo selectivo de iones.
El electrodo de referencia.
El equipo medidor, potencimetro.

3.1. El electrodo de referencia

Son aquellos que miden el mismo potencial cualquiera que sea la naturaleza
de la disolucin en que se introduzcan y por tanto dan una referencia a la
medida del electrodo indicador. Estn constituidos por un conductor metlico
en contacto con una sal poco soluble de su metal, y una disolucin de
composicin constante y alta concentracin llamado electrolito de referencia.
Su funcin es completar el circuito de medicin proporcionando un paso de
conductividad desde el electrodo sensible, a travs de la solucin problema
hasta el dispositivo de lectura, de modo que las cuatro partes formen un
circuito elctrico.
El electrolito de referencia contacta con la disolucin a analizar a travs del
diafragma, que es una pared porosa que permite una unin lquida. La unin
lquida permite un pequeo y constante flujo del electrolito de referencia a la
muestra. Donde se encuentran este electrolito y la disolucin de anlisis,
aparece un potencial de unin lquida que debe su origen a las diferentes
movilidades de los aniones y cationes.

63
Si los aniones y cationes del electrolito de referencia tienen distintas
movilidades, se difunden a diferentes velocidades a travs del diafragma. Esto
produce una separacin de carga local en el diafragma y por tanto una
diferencia de potencial.

Electrodo de referencia de Ag/AgCl

Este potencial depende del tipo, concentracin y temperatura del electrolito de

referencia.
Los electrodos de referencia ms utilizados son el de calomelanos (SCE) que
contiene Hg/Hg2Cl2/KCl saturado y el de Ag/AgCl.

El electrodo de referencia puede ser un electrodo individual o estar

incorporado al electrodo indicador (electrodo combinado).

3.2 El electrodo selectivo de iones.

Podemos decir que un electrodo selectivo de iones, consiste en una membrana

que responde ms o menos selectivamente a un ion determinado, y que est
en contacto, por una parte, con la disolucin del ion a determinar, y por otra,
generalmente, con una disolucin del mismo ion a una actividad fija, la cual
est a su vez en contacto con un electrodo de referencia apropiado.

64
Un electrodo selectivo es un dispositivo que responde a ciertas sustancias
(iones o gas disuelto) en solucin. Puede emplearse para medir el nivel de
sustancias de inters en presencia de otras sustancias disueltas. El primer
electrodo selectivo que se hizo fue el de pH, sensible a los iones de hidrgeno
y que se usa para medir los niveles de hidrgeno e hidrxido en solucin
acuosa.

3.2.1 Tipos de electrodos selectivos de iones

Los electrodos selectivos de iones, se pueden clasificar de acuerdo con el
estado fsico de la sustancia (compuesto electroactivo) que forma la membrana
del electrodo- La tabla 10.3 presenta una clasificacin de los tipos de
electrodos de membrana selectivos de iones (membrana slida y lquida) y la
tabla 10.4 algunos ejemplos de electrodos de membrana slida.

A. ELECTRODOS DE MEMBRANA CRISTALINA

1. Cristal nico
Ejemplo: LaF3 para F-

2. Policristalina o mezcla de cristales

Ejemplo: Ag2S para S2- y Ag+

B. ELECTRODOS DE MEMBRANA NO CRISTALINA

1. Vidrio.

Ejemplos: vidrios de silicato para Na+ y H+

2. Lquido
2+
Ejemplos: lquidos intercambiadores de iones para Ca y transportadores
+
neutros para K

3. Lquido inmovilizado en un polmero rgido

2+
Ejemplos: matriz de cloruro de polivinilo para Ca y NO-3

65
 ELECTRODOS COMERCIALES DE ESTADO SLIDO.

Ion analito Rango de conc., M Interferencias

- 0 -6
Br 10 5 x 10 rm: 8 x 10 CN ; 2 x 10-4 I-; 2 NH3; 400 Cl-; 3 x
-5 -
4 - 2-
10 OH ; mba: S
2+ -1 -7 2+ 2+ 2+ +
Cd 10 10 Fe y Pb pueden interferir. mba: Hg , Ag ,
2+
Cu
- 0 -5 -7 - -7 - -3 - -2
Cl 10 5 x 10 rm: 2 x 10 CN ; 5 x 10 I ; 3 x 10 Br ; 10
2- - 2-
S2O3 ; 0,12 NH3; 80 OH ; mba: S
2+ -1 -8 2+ 2+ - -
Cu 10 10 niveles elevados Fe , Cd , Br , Cl ; mba:
2+ +
Hg , Ag
- -2 -6 -1 - 3 - 6 - 2-
CN 10 10 rm: 10 I ; 5 x 10 Br ; 10 Cl ; mba: S
- -6 - -
F Sat - 10 0,1 M OH da interferencia < 10% cuando [F ]
-3
= 10 M
I- 100 5 x 10-8 rm: 0,4 CN-; 5 x 103 Br-; 105 S2O32-; 106 Cl-
2+ -1 -6 2+ + 2
Pb 10 10 mba: Hg , Ag , Cu
+ 2- 0 -7 + 2+ -7
Ag /S 10 10 Ag Hg debe ser menor que 10 M
0 -7 2-
10 10 S
SCN- 100 5 x 10-6 rm: 10-6 I-; 3 x 10-3 Br-; 7 x 10-3 CN-; 0,13
2- - - 2-
S2O3 ; 20 Cl ; 100 OH ; mba: S
rm: relacin mxima Cinterferente /Canalito para no interferencia
mba: debe estar ausente

ELECTRODOS DE MEMBRANA LQUIDA

Ion analito Rango de conc., M Interferencias

2+ o -7 -5 2+ -3 2+ + -3 2+ -
Ca 10 5 x 10 10 Pb ; 4x10 Hg , H ; 6x10 Sr ; 2x10
2 2+ -2 2+ -2 2+
Fe ; 4x10 Cu ; 5x10 Ni ; 0,2 NH ; 0,2
3
+ + + 2+ 2+
Na ; 0,3 Li ; 0,4 K ; 0,7 Ba ; 1,0 Zn ; 1,0
2+
Mg
- o -6 -7 - -6 - -5 - -4 -
NO 10 7 x 10 10 ClO ; 5x10 I ; 5x10 ClO ; 10 CN ;
3 4 3
-4 - -3 - -2 - -2 -
7x10 Br ; 10 HS ; 10 HCO ; 3x10 Cl ;
3
-2 - 2- 3- -
5x10 H PO , HPO , PO ; 0,2 OAc ; 0,6
2 4 4 4
- 2-
F ; 1,0 SO
4
- o -6 -3 - -2 - -2 - - -2
ClO 10 7 x 10 2x10 I ; 2x10 ClO ; 4x10 CN , Br ; 5x10
4 3
- - - 2- - -
NO NO ; 2 HCO , CO , Cl , H PO ,
2 3 3 3 2 4
2- 3- - - 2-
HPO , PO , OAc , F , SO
4 4 4
+ o -6 -4 + -3 + + -2 +
K 10 10 3x10 Cs ; 6x10 NH , Tl ; 10 H ; 1,0
4
+ + +
Ag ; 2,0 Li , Na
-3 -6 -5 2+ 2+ -4 2+ -4 2+
Dureza del agua 10 6 x 10 3x10 Cu , Zn ; 10 Ni ; 4x10 Sr ;
2+ 2+
-5 2+ -4 2+ -2 + +
(Ca +Mg ) 6x10 Fe ; 6x10 Ba ; 3x10 Na ; 0,1 K

66
3.2.2. Electrodo selectivo de vidrio
Se emplean para determinar pH y Na. Es un tipo de electrodo de membrana
slida no cristalina, pero se suele considerar como un tipo particular. Es el
primer tipo de electrodo selectivo que se desarroll. Consiste en un electrodo
de vidrio que al sumergirse en una disolucin, absorbe agua, de modo que se
forma una capa de hidratacin sobre su superficie. La superficie del electrodo
est construida a base de silicatos con modificadores inicos. Existen dos
grandes tipos:
Na2O-CaO-SiO2 (22:6:72) %

Li2O-Cs2O2-BaO-La2O3-SiO2 (28:2:4:3:63) %

La superficie interna de la membrana de vidrio, en contacto con la disolucin

interna de llenado, tambin se recubre de una capa de hidratacin. En la
interfase, los cationes monovalentes situados sobre el vidrio, normalmente
Na+ y Li+, entran en equilibrio de intercambio inico con los iones de la
muestra a determinar. Los iones a determinar tienden a difundirse a travs de
la capa hidratada hacia el vidrio seco, as mismo se produce un flujo de
cationes desde el vidrio seco para reponer aquellos que se disolvieron en la
parte externa hidratada.

Electrodo de pH

Ejemplo: Electrodo de pH Tiene un electrodo de referencia interna (Ag/AgCl)

sumergido en un tampn con sales de Cl- (pH=7) con una membrana de vidrio.
Al introducir el electrodo en una disolucin a analizar, hay un intercambio de
iones H+ y Na+. Dentro y fuera de la membrana tenemos diferentes
concentraciones de H+ y por tanto distinto intercambio, y esto origina la
diferencia de potencial referida al electrodo de referencia interno. Se mide el
potencial a i = 0 con un voltmetro de alta impedancia (pH-metro).

67
3. Variables que afectan a la medida

4.1. Temperatura
De la ecuacin de Nernst se deduce que el potencial desarrollado por el
sistema es directamente proporcional a la temperatura. Si se representan
distintas rectas de calibrado a distintas temperaturas, se observa que todas
stas se cruzan en un mismo punto, el punto isopotencial. Una de las normas
del anlisis con electrodos selectivos es que todos los patrones y muestras
han de analizarse a la misma temperatura.

4.2. Contaminacin
Hay sustancias que pueden formar depsitos insolubles en la superficie de la
membrana del electrodo, el cual evita el contacto entre sta y la muestra,
reduciendo la sensibilidad del electrodo. Las pelculas de aceite, los depsitos
de grasa y las protenas son un ejemplo, y la solucin es limpiar el electrodo
con HCl, o HNO3 durante media hora.

4.3. Envejecimiento
A medida que se va usando el electrodo, aumenta la resistencia de la
membrana y va perdiendo sensibilidad. Las causas son la prdida de iones de
la membrana, y la disminucin progresiva de la entropa, ambos efectos
acumulativos.

4.4. Potencial del electrodo de referencia

La funcin de ste es proporcional un potencial constante (E0) contra el que
poder medir los cambios en el electrodo sensible. Es muy importante la
eleccin correcta del electrolito interno.

4.5. Fuerza inica

La ecuacin de Nernst se cumple para disoluciones diluidas, en las que el
factor de actividad tiende a 1. El coeficiente de actividad depende de un nmero
de parmetros tales como la cantidad, tamao, carga y nmero de hidratacin
de los iones presentes, la temperatura y el disolvente. La fuerza inica I se
define como:

I = ci zi2

68
 Donde ci es la concentracin del ion y zi su carga.

Las soluciones con igual fuerza inica, idntica composicin de los iones
mayoritarios, la misma temperatura y disolvente tienen igual coeficiente de
actividad. Para la realizacin de las medidas, interesa obtener coeficientes de
actividad similares en patrones y muestras, lo que se consigue aadiendo una
sal concentrada no interferente, que es el tampn de ajuste de la fuerza inica,
al que se denomina ISA (Ionic strength adjustor).

4.6. pH de la muestra

Los iones H+ y los iones OH- pueden reaccionar con las especies de la muestra
y disminuir la cantidad de iones libres medidos por el electrodo, originando
errores en las medidas.

4.7. Interferencias
Una interferencia de electrodo es cualquier sustancia en una solucin
problema que pueda alterar el potencial medido por un electrodo selectivo de
iones (Ver tablas 10.5 y 10.6).

5. Aplicaciones analticas y ventajas

5.1. Aplicaciones

Los electrodos selectivos tienen aplicaciones en diversos campos:

* Medio ambiente: tierras, lodos, sedimentos, aguas.
* Biotecnologa: piscifactoras, cultivos marinos, cultivos hidropnicos.
* Alimentos y bebidas: lcteos, salsas, bebidas, carnes, conservas...
* Farmacia/cosmtica: geles y champs, desodorantes, cremas...
* Petroqumica y qumica general.

69
 ANLISIS POTENCIOMTRICO CON ELECTRODO ION SELECTIVO
(ELECTRODO DE VIDRIO)

Fundamento
El concepto de pH fue introducido al estudio de la Qumica Analtica por Sorensen
(1,909) y se defini como el logaritmo de la inversa de la concentracin de los
iones hidrgeno en la solucin.

pH = -log (H3 O+) = log 1/(H3 O+)

APLICACIN

A. ESTANDARIZACIN DE NaOH 0,1N CON BIFTALATO DE POTASIO

INSTRUMENTO: pH - METRO
INSTRUMENTO:
Potencimetro Beckman 300.
Electrodo Mixto de Vidrio, Ag/AgCl.

Reactivos

1. Solucin de NaOH 0,1 N.

2. Sal de Biftalato de Potasio.
3. Indicador Fenolftalena 0,1%.

Procedimiento

1) Verificar la calibracin del pH- metro.

2) Colocar en un vaso de 400 mL 0,2500 g de biftalato de potasio con cantidad

suficiente de agua para valorar la solucin. Calcular el volumen terico.

3) Agregar agua destilada a volumen aproximado de 200 mL. Agregar el

magneto en el vaso. Colocarlo sobre el agitador magntico y regular la
velocidad de rotacin del magneto hasta disolucin.

4) Introducir el electrodo en la solucin a titular, teniendo cuidado de no tocar

el magneto que est rotando, porque podra romper el electrodo que es muy
delicado (cuidado).

5) Realizar la lectura del pH inicial de la solucin.

6) Iniciar la adicin de la solucin de NaOH 0,1 N desde una bureta enrasada,

al principio, el agregado puede hacerse de 2 mL cada vez, realizando la
lectura de pH en cada adicin.

70
 Cercano al volumen terico en unos 2 mL el agregado debe hacerse en
porciones de 0,2 mL cada vez, realizando sus respectivas lecturas de pH,
hasta despus de 3 mL de haber pasado el volumen terico.

A partir de este volumen la adicin de NaOH se puede hacer de 2 mL o ms

hasta pH constante.

7) Realizar las titulaciones por triplicado.

8) Graficar las tres titulaciones en papel milimetrado:

pH (ordenada) vs Volumen de NaOH 0,1N (abscisa)

pH/V (ordenada) vs Volumen de NaOH 0,1N (abscisa)
2pH/V2 (ordenada) vs Volumen de NaOH 0,1N (abscisa)

9) Determinar el volumen en el punto de equivalencia.

10) Determinar el pH en el punto de equivalencia.

11) Determinar el volumen promedio.

12) Calcular la concentracin del NaOH

B. TITULACIONES DE CIDO DBIL CON BASE FUERTE.

DETERMINACIN DE LA ACIDEZ DE UN VINO COMERCIAL

(% CIDO TARTRICO).

Muestra: Vino tinto

cido Tartrico: H2C4H4O6, tiene un peso frmula igual a 150,09 g/mol y

reacciona con el NaOH:

C2H4O2(COOH)2 + 2NaOH C2H4O2(COONa)2 + 2H2O

Sus constantes cidas:

K1 = 9,2 x10-4
K2 = 4,3 x10-5

Procedimiento

Pesar una alcuota de 25 mL de la muestra, medida con pipeta volumtrica, en

un beaker de 50 mL.

1) Transferir a un vaso de 400 mL y efectuar el mismo procedimiento que en la

experiencia A, desde punto 3) hasta 9).
2) Calcular el % de cido tartrico en la muestra de vino.

71