UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS. DEPARTAMENTO DE QUMICA

CURSO: QUMICA ANALITICA LABORATORIO

INFORME DE PRCTICA N 2

Ttulo:
Volumetra cido-base/ Determinacin del Nitrgeno orgnico por Mtodo Kjeldahl

ALUMNO CDIGO FIRMA

Facultad y especialidad: Pesquera / Agronoma

Profesor:Juan Carlos Palma Prctica

Horario de prctica: 11 am 1 pm

Grupo de teora y de laboratorio:

A/A*

Fecha del Experimento:

5 de septiembre del 2017

Fecha del Informe:

12 de septiembre del 2017

LA MOLINA - LIMA - PER

3. MATERIALES
3.1 INFRAESTRUCTURA/ MATERIALES/ REACTIVOS/ EQUIPOS

Infraestructura del laboratorio.- El laboratorio de qumica cuenta con suministros de

energa elctrica, agua potable, desage y extintor deCO2.
01 bureta calibrada de 25 ml.
02 Matraz Erlenmeyer de 125 ml.
02 Vaso de precipitado de 50 o 100ml.
Pizeta con agua destilada, pipeta volumtrica de 5 ml, fiola volumtrica de 50 ml.
Probeta graduada de 15 ml, bombilla de succin, 2 balones de digestin kjeldahl 100
ml.

REACTIVOS:

Muestra orgnica
Catalizador (mezcla de 100g K2SO4 ms 0.25g CuSO4)
cido sulfrico concentrado
Hidrxido de sodio 0.1088 M estandarizado
cido sulfrico 0.0498 M estandarizado

EQUIPOS:

Balanza analtica.
Equipo de digestin en campana extractora para captura gases emitidos.
Equipo de destilacin Kjeldahl.

3.2 Buenas prcticas de laboratorio:

La prctica debe ser desarrollada siguiendo los pasos del manual de Buenas Prcticas
de Laboratorio.
El trabajo del laboratorio demanda orden y concentracin para asegurar exactitud y
precisin en los resultados.

3.3 De gestin ambiental:

Aplicar los lineamientos del Manual de Gestin de Residuos de Laboratorio.

Manejar las instrucciones de tratamiento y disposicin de residuos slidos, efluentes
y/o emisiones en reas de trabajo. Estipulado en los elementos de la norma ISO 14001.

3.4 Gestin de Seguridad y Salud Ocupacional:

Identificacin/ investigacin de peligros y Evaluacin de Riesgos, Factores de Riesgos:

Fsicos, Qumicos, Biolgicos, Psicosociales, Ergonmicos. Referente a los elementos de
la norma OSHA 18001.

METODOLOGA
DIGESTION PARA PASAR N-ORGANICO A N-NH4+

Pesar la muestra y el papel en la balanza analtica, previamente a envolverlo y errarlo

cuantitativamentee introducirlo en el baln de digestin.
Aadir 1g de catalizador.
Agregar 2.5 ml H2SO4 concentrado.
Llevar aproximadamente 2 horas el digestor (hasta solucin incolora).
Retirar del digestor, dejar enfriar y pasar a la siguiente etapa.

PARA LA CAPTURA DEL AMONIACO ARRASTRADO POREL FLUJO DE VAPOR DE AGUA

Alistar el matraz de Erlenmeyer de 125 ml ( vendra ser el REACTOR 2)

Tomar en una pipeta cilndrica 25 ml de solucin de H2SO4 0.0498 M estandarizado y
vierta al matraz.
Agregar 5 o 6 gotas de fenolftalena y debe dejar incolora.

PARA GENERAR FLUJO DE VAPOR DE AGUA ALISTAR EL QUIPO DE DESTILACION

Preguntar al profesor sus dudas por los factores de peligros que tendra si no hacen
casa las BPL.
Identificar las partes del equipo de destilacin.
Verificar el funcionamiento de todas las llaves de paso y dejar abiertas.
Llenar 2/3 de volumen del baln con agua para hervir y ubicar al destilador.
Encender la plancha de calentamiento a 100C.
Asegurar la refrigeracin que circule la entrada y salida del agua del grifo.

PARA ALCALINIZAR EL N-NH4+ Y PASAR A N-NH3(g) Y ARRASTRARLO CON FLUJO DE VAPOR DE

AGUA Y ATRAPARLO EN CIDO

Alistar en una probeta 5ml de NaOH concentrado 20M

Alistar una probeta con 5 ml de agua destilada
Agregar agua al baln del digestor de la muestra para mejorar la fluidez
Verificar la llave de pasos que se encuentren cerradas.
Trasvasar la muestra a la cmara de reaccin y agregar 5 o 6 gotas de fenolftalena de
manera que la solucin se torne roja.
Enjugar y trasvasar a la cmara dos veces con un poco de agua destilada.
Colocar el matraz Erlenmeyer con el cido Sulfrico al extremo del refrigerante de
modo que se quede sumergido.
Colocar la plancha de calentamiento y una vez empiece la destilacin, destilar por 5
minutos.
Destilar hasta que la solucin quede incolora (por el exceso de HSO4), y si estuviera
roja o rosado , el cido fue insuficiente y, por lo tanto se pierde la muestra y se anula
el ensayo.
Verificar con una cinta de indicador pH impregnado con fenolftalena. Se deja caer una
gota del destilado y si torna rojo es por an hay Nitrgeno y se debe dejar 2 minutos
ms, hasta que no cambie de olor la cinta.

PARA FINALIZAR EL ARRASTRE POR DESTILACION

 Retirar en matraz Erlenmeyer.
Colocar una vaso de precipitado debajo del refrigerante para decepcionar el agua que
destila.
Desenchufe la plancha de calentamiento.
Usando un trapo, retirar la plancha de calentamiento, con ello se generar presin
inversa con lo que se expulsa el residuo lquido del REACTOR 1 hacia la cmara de
desechos.

TITULACION

Alistar la bureta limpia y seca, con su respectivo soporte universal.

Separar en un vaso de precipitado pequeo con NaOH 0.1088M estandarizado, llenar y
enrazar la bureta.
Titular gota a gota la solucin hasta que se torne rosado.

4. RESULTADOS

TABLA DE LA DETERMINACION DE NITROGENO ORGANICO

KAIHUA
A Peso de la muestra en g 0.5641
B Volumen de H2SO4, ml tomado 25
para captura del NH3
C Molaridad de H2SO4, 0.0498
estandarizada (cuatro
decimales)
D Volumen de NaOH en ml 18
gastado en la titulacin
E Molaridad del NsOH 0.1088
estandarizado (cuatro
decimales)
F Factor estequiomtrico de 2:1
NaOH a H2SO4
2BaOH+H2SO4Na2SO4+2H2O
G Factor estequiomtrico de 1:2
H2SO4 a NH3
2NH3+H2SO4(NH4)2SO4
H Milimoles de H2SO4 que 0.0005
reaccion con el NH3
I Milimoles de amoniaco NH3 0.1743x10^-3
equivalente
J Milimoles de N equivalente 0.12201 x10^-3
K W en g de nitrgeno 1.70814 x10^-3
L % N (p/p) 1.3193
M % Protenas (p/p) 8.25

% N = (VxMH2SO4 TOTAL VxMNaOHXFE=0.5 EXCESO) X FE= 2 X 0.014X 100

 W de muestra

% N = (25x0.0498 18x0.1088x0.5) x 2 x 0.014x 100

0.5641

% N = 1.3193

% Protenas de la muestra = %N x 6.25

% Protenas de la muestra = 1.3193 x 6.25

% Protenas de la muestra = 8.25

TABLA DEL GRUPO DE LABORATORIO Y EVALUACION ESTADISTICA

MESA LADO MUESTRA % N ORGANICO % PROTENAS

1 AyB KAIHUA 1.3193 8.25
2 AyB QUINUA 0.2540 1.59
3 AyB KAIHUA 0.9364 5.85
4 AyB QUINUA 0.8542 5.34

CALCULOS ESTADISTICOS DEL % N-ORGANICO: Uso de confianza de 95%.

X =Promedio grupal= (1.3193+0.2540+0.9364+0.8542)/4 =0.841

()2 0.583
S= Desviacin estndar Absoluta = 1
= 3
= 0.441

RS = Desviacin estndar relativa = Sx100/X = 0.441x100/0.841 = 52.44 % = 0.5244

Lmites de confianza: = 0.05

L.I. =X- t (1-/2; n- 1)

=0.841- 3.182x0.2205 = 0.1394

L.S. = X + t (1-/2; n- 1) x = 0.841 + 3.182x 0.2205 = 1.5426

Datos atpicos:
1.31930.9364
Q exp = |1.31930.2540| = 0.3594

Q tab. = N; = 4; 0.95 = 0.829

Qexp< Q tab 0.3594 < 0.829 No hay datos Atpicos

ENTRADA SALIDA
-KAIHUA -AGUA, CO2, NOx, SO
DIGESTIN VA HUMEDAD
-H2SO4 -(NH4)2SO4

-CATALIZADOR

-NaOH, AGUA, FENOL- ALCALINIZACIN, ARRASTRE POR -NH3, Na2SO, H2O,

VAPOR DE AGUA
FTALENA, CALOR. NH4OH.

-H2SO4 ESTANDARIZADO - NH3, 42, H2O.

- NH4OH (ac) RECOGER EL N-ORGANICO

-NaOH (BASE FUERTE) TITULACIN - Na+, 42 , H2O.

-H2SO4 (ACIDO FUERTE) (VOLUMETRIA)

PRODUCTO

% N ORGANICO EN FORMA DE NH3

DISCUSION
Al final del experimento se obtuvo un porcentaje de Nitrgeno total de 1.3193 % lo que
multiplicado con el factor de conversin de 6.25 daba un total de protenas de 8.25%.

Esto evidentemente es menos de lo normal ya que el porcentaje de Protenas debera estar

entre 13.9 a 16.8 segn las tablas tericas. Entonces haciendo una recapitulacin del
experimento se puede suponer que hubo un fallo en alguno de los tres procesos para la
determinacin de protena o que se haya perdido parte de la muestra para la determinacin
del analito deseado.

Es posible que durante el primer paso del proceso que fue el de la digestin se utiliz mucha
agua destilada para remover los residuos de muestra que se encontraban en el cuello del
baln lo que pudo afectar al final el resultado de toda la operacin.

Comparndola con otras mesas su porcentaje de nitrgeno es muy bajo ya que la quinua y la
kaihua, su rango de valores son 15 A 15.8 y 13.9 A 16.8, respectivamente.

5. CONCLUSION

Se puede concluir que el porcentaje de nitrgeno orgnico de la quinua y kaihua, obtenido en

el ensayo y, luego multiplicado por el factor de conversin nos da el porcentaje de protenas;
no est dentro de los valores establecido para el consumo diario de los humanos.

Por lo tanto se cometi un error bruto o tal vez un error sistemtico.

6. RECOMENDACIN

COMPOSICIN QUMICA DE LOS ALIMENTOS

http://www.fao.org/docrep/v7180s/v7180s05.htm

PROPIEDADES NUTRICIONALES

http://www.infoalimentacion.com/pescado/propiedades_nutricionales_pescado.htm

7. REFERENIAS BIBLIOGRAFICAS

8. ANEXOS

9. CUESTIONARIO
9.1. Cul es el ttulo, propsito he hiptesis de la practica 2?

Ttulo: Determinacin del nitrgeno orgnico por el Mtodo Kjeldahl.

Propsito: Determinar la concentracin de nitrgeno amoniacal de los compuestos orgnicos e

inorgnicos, por las tcnicas de volumetra cido base por retrovaloracin titulando con
NaOH estandarizado y aplicando las leyes estequiometrias.

Hiptesis: La concentracin de amoniaco, una base de Bronsted y Lowry porque acepta iones
H+ formando amonio NH4+, puede determinarse desprendindolo o arrastrndolo como gas
NH con vapor de agua en una reaccin cido base usando la tcnica de la retrovaloracin o
valoracin inversa y aplicando las leyes de la estequiometria

9.2 Como demuestra que el resultado reportado por usted es confiable?

Porque segu paso a paso lo que indicaba la gua, teniendo todo los materiales y equipos.
Incluyendo el asesoramiento del profesor.

9.3 Como demuestra usted que trabajo de manera segura?

Porque utilic guantes de nitrilo, recipientes volumtricos para trasvasar los reactivos, un
trapo para tomar el baln del destilador caliente, tambin porque me percate que el sistema
funcionara en buenas condiciones.

9.4 Cmo demuestra usted que el impacto ambiental de su actividad en el laboratorio fue
mnimo?

Porque los desechos lquidos fueron botados por un balde y por el lavadero .

9.5 Investigue el fundamento analtico para la determinacin de protenas por cada uno de los
siguientes mtodos:

Mtodo de Biuret.- si una solucin fuertemente alcalina (CuSO4 ) se aade una

solucin de protena se forma un complejo entre el ion cprico y los enlaces
peptdicos, con aparicin de una coloracin de violeta-purpura, que presenta una
mxima de absorcin a 540 nm.
Mtodo de Lowry.- Dependen de la concentracin de tirosina y triptfano de la
muestra. Consiste en dos reacciones: Reaccin de Biuret y Reaccin de Folin, Este
ltimo tiene caracterstica de los grupos OH reductores de los aminocidos tirosina y
triptfano que, junto con los complejos Cu+2 , reducen el reactivo de Folin generando
un color azul. Est sujeto a muchas interferencias. Se utiliza fundamentalmente en
orina.
Mtodo del cido Bicinconnico (BCA).- Se basa en que las protenas reducen los iones
cpricos del reactivo BCA a iones cuprosos en medio bsico. Cambio de color del verde
(BCA) al morado. * protena + Cu+2 Cu+1
** Cu +1 + BCA BCA-Cu+1
Mtodo de absorcin UV a 280 nm.- originada fundamentalmente por los anillos
aromticos de triptfano y tirosina.
 Mtodo de adhesin de colorante.- Tambin llamado Mtodos de unin a colorantes;
para semicuantificar la concentracin de protenas en orina se utilizan tiras reactivas.
Mtodo de Bradfort.- Se basa en la unin del reactivo Comassieblue G250 a las
protenas en medio cido. Reconoce los aa arginina, fenilalanina, triptfano y prolina.
Origina color azul intenso A=595nm
Mtodo de la Ninhidrina.- es un poderoso agente reactivo comn para observar
(Castro, J. 1990) las bandas de separacin de aminocidos por cromatografa o
electroforesis, tambin es utilizada con fines cuantitativos para la determinacin de
aminocidos2 Reacciona con todos los aminocidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4
y 8, dando una coloracin que vara de azul a violeta intenso. Este producto colorido
(llamado prpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloracin producida
por la ninhidrina es independiente de la coloracin original del aminocido.
Esta prueba es positiva tanto para protenas como para aminocidos. En aquellos
casos donde no da positiva la prueba de Biuret, da positiva la de ninhidrina, e indica
que no hay protenas pero s hay aminocidos libres.de un ph 4 y 8.
Es una de las reacciones ms sensibles para identificar aminocidos en general, ya que
detecta una parte de aminocido en 1 500 000 partes de agua. Aminocidos y muchas
aminas primarias dan un color violeta caracterstico. La prolina da coloracin amarilla.
Por su sensibilidad esta reaccin se emplea para valoracin cuantitativa de
aminocidos por colorimetra. La valoracin de aminocidos en orina, por ejemplo,
tiene importancia en medicina ya que en algunas enfermedades como hepatopatias,
infecciones agudas o diabetes mellitus en las que se presente hiperaminoacidemia,
estas se ven acompaadas por aminoaciduria paralela. Algunas enfermedades
metabolicascongenitas dan lugar a la eliminacin anormal de algunos aminocidos en
la orina (p ej fenilcetonuria).
Mtodo turbidimtrico.- mide la disminucin de la luz transmitida a travs de una
suspensin de partculas utilizando para ello un espectrofotmetro (detector en la
misma direccin del haz de luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones
concentradas (para que haya una buena disminucin de la luz transmitida) ej.
determinacin de protenas totales en suero, LCR u orina (haciendo que las protenas
precipiten con TCA o cido sulfosaliclico). Como tambin mide la turbidez resultante
de la precipitacin de las protenas.

9.6 Un determinado cereal contiene 16% de protenas. Calcular el peso del cereal que se
tomara como muestra para que al analizar con el mtodo de Kjeldahl del cido brico se
utilice 50ml de HCl 0.025 M, (factor de conversin = 5.7)
% Protenas = %N x 5.7

16% = %N x 5.7

%N= 2.807%

%N = (VXMHCl TOTAL VXMH3BO3XFE=1) X FE=1 X 0.014x 100

W de muestra

W de muestra = (50x 0.025 36x 0.025x1)x1x0.014x100/0.02807

W de muestra =17.4563 gramos de cereal.