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Obtencin de xilosa a partir de


desechos lignocelulsicos de la
produccin y proceso industrial de la
pia (Ananascomusus)

ARTICLE JUNE 2012

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4 AUTHORS, INCLUDING:

Jos Vega-Baudrit
National University of Costa Rica
96 PUBLICATIONS 200 CITATIONS

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Available from: Jos Vega-Baudrit


Retrieved on: 14 March 2016
UNICIENCIA 26
pp. 75-89
2012

OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS


LIGNOCELULSICOS DE LA PRODUCCIN Y
PROCESO INDUSTRIAL DE LA PIA (Ananascomusus)

XYLOSE FROM LIGNOCELLULOSIC WASTE IN THE


PRODUCTION AND INDUSTRIAL PROCESSING OF
PINNEAPLE (Ananascomusus)
Karla Ramrez Amador1
scar Rojas Carrillo2
Patricia Alvarado Aguilar3
Jos Vega-Baudrit4

RESUMEN Abstract

Los desechos lignocelulsicos de la produccin Lignocellulosicwaste from the pineapple produc-


de pia son una materia prima muy til para la tion is a raw material useful for the xylose pro-
produccin de xilosa por medio de hidrlisis, que duction by hydrolysis and it can be converted to
a su vez, puede convertirse a xilitol. El objetivo xylitol. The objective of this work was to study
de este trabajo fue estudiar la hidrlisis de la cs- the hydrolysis of pineapple peel with sulfuric acid
cara de pia con concentracin de cido sulfri- at variable concentration (2-6%), reaction time
co y tiempo de reaccin variable (2-6% y 0-350 (0-350 min) and temperature at 98 C. The con-
min respectivamente) y temperatura de 98C. Se centration of xylose, glucose and degradation pro-
determin la concentracin de xilosa, glucosa y ducts as acetic acid and furfural was determined.
los productos de degradacin como cido actico Optimal conditions found for hydrolysis were 6%
y furfural. Las condiciones ptimas encontradas H2SO4 at 98 C for 83 min which yield was 26,9
para la hidrlisis fueron 6% H2SO4 a 98 C por g xylose/L, 2,61 g glucose/L, 7,71 g acetic acid/L
83 min con un rendimiento de 26,9 g xilosa/L, and 0,29 g furfural/L.
2,61 g glucosa/L, 7,71 g cido cetico/L y 0,29 g
furfural/L. Keywords: agricultural residues, sugar, xylose,
hydrolysis.
Palabras clave: desechos agrcolas, azcar, xilo-
sa, hidrlisis

1 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: krami-
rez@una.ac.cr
2 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: osca-
rr13@gmail.com
3 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: pat.alv.
ag@gmail.com
4 Laboratorio Nacional de Nanotecnologa, LANOTEC-CeNAT, Costa Rica.
Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: jve-
gab@hotmail.com
Recibido el 20 de setiembre de 2011 - Aceptado el 15 de octubre de 2011 - Corregido el 1 de noviembre de 2011

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karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

INTRODUCCIN ampliamente encontrada en la naturaleza y


obtenida por hidrlisis cida o enzimtica de
Debido a los diferentes problemas de salud la fraccin hemicelulsica de los materiales
que involucra para algunas personas el con- lignocelulsicos. La estructura de este azcar
sumo de sacarosa en su dieta diaria, en los se muestra en la figura 2.
ltimos aos se han elaborado algunos susti-
tutos de este compuesto, llamados edulcoran- Figura 2. Estructura molecular de la D-
tes, los cuales tienen muchas ventajas. xilosa. (Fengelet al.1984)

Un tipo de edulcorante es el xilitol, el cual,


es un polialcohol natural de cinco tomos de
carbono, que se encuentra en algunas plantas,
levaduras, hongos, lquenes, frutas y vegeta-
les, pero en muy pequeas cantidades (meno-
res a los 900 mg/100 g), lo cual provoca que
su extraccin sea un proceso poco rentable
(Mussatto et al., 2002). Su frmula estructu-
ral (C5H12O5), se presenta en la figura 1.
Los materiales lignocelulsicos se encuen-
Figura 1. Estructura qumica de la molcula tran constituidos de tres componentes prin-
de xilitol (Lima et al., 2003) cipales: celulosa, hemicelulosa y lignina. La
celulosa, es el principal polmero natural,
cuyas cadenas se encuentran altamente or-
denadas y rodeadas en una matriz por la he-
micelulosa y la lignina. La hemicelulosa est
constituida principalmente de azcares, que
pueden ser fcilmente obtenidos por medio
de hidrlisis cida. Por su parte, la lignina
es un polmero aromtico que forma parte de
los tejidos de sostn de los vegetales.
Su consumo se ha incrementado en los l-
timos aos debido, entre otras cosas, a que En Costa Rica, la produccin de xilosa se
tiene un poder edulcorante parecido al de presenta como una buena alternativa, por-
la sacarosa, siendo utilizado principalmente que utiliza como materia prima los desechos
por las personas diabticas, con la ventaja de agroindustriales contribuyendo a minimi-
ser anticariognico y adems tener un sabor zar los problemas ambientales. Entre estos
agradable an despus de haber sido ingeri- desechos tenemos los de la pia, los cuales,
do (Carvalho et al., 2003). Es usado en el debido al incremento en su produccin y al
rea clnica porque es muy bien asimilado en contenido en hemicelulosa podran ser una
infusiones posciruga por los pacientes con alternativa para la produccin de este azcar.
dificultad de metabolizar la sacarosa, mejora A nivel nacional, la mayor parte de la pro-
las propiedades bioqumicas de los huesos en duccin de esta fruta es consumida como
caso de osteoporosis y previene la otitis agu- fruta fresca. Sin embargo, el comercio mun-
da (Carvalho et al., 2003) dial constituye mayormente productos proce-
sados, ya sea enlatados, como jalea o como
El xilitol comercial es obtenido por procesos jugo, lo cual provoca que durante el proceso
qumicos que consisten en la hidrogenacin de preparacin, se d una gran generacin de
cataltica de la D-xilosa; esta a su vez es desechos y present problemas ambientales.

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OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

Estos desechos estn constituidos por la cs- plean cidos concentrados y los que utilizan
cara, el corazn y slidos centrifugados en la cidos diluidos. Si se utilizan cidos con-
produccin del jugo (IPGRI 2001). centrados se opera a baja temperatura, ob-
tenindose altos rendimientos de hidrlisis
El Laboratorio de Polmeros de la Universi- (superiores al 90% de la glucosa potencial).
dad Nacional (POLIUNA) ha desarrollado Sin embargo este es un proceso que presen-
varias lneas de investigacin orientadas al ta la desventaja de no ser rentable, debido a
aprovechamiento de este tipo de desechos. la gran cantidad de cido que se utiliza y lo
As por ejemplo, se han realizado estudios en costoso de su recuperacin. Esto sin tomar en
la obtencin de acetato de celulosa a partir cuenta la necesidad de una posterior etapa de
de fibra de pia (Sibaja et al., 1986) y ms neutralizacin para que el producto pueda ser
recientemente, en la utilizacin del rastrojo fermentado (Oliva, 2003).
de pia como refuerzo de una resina polister
comercial (Quesadaet al., 2005). Como parte Al utilizar cidos diluidos la principal ven-
de esta lnea de investigacin se ejecut un taja que se tiene es el relativo bajo consumo
proyecto, con el aporte del CONICIT, el cual de cidos, sin embargo, se deben emplear al-
consiste en la utilizacin de los desechos de tas temperaturas para alcanzar rendimientos
cscara de pia para la produccin biotecno- aceptables de conversin (Oliva 2003). En la
lgica de xilitol, con el fin de aprovechar al hidrlisis con cido diluido, se obtiene una
mximo el componente hemicelulsico de la fraccin lquida que contiene principalmente
cscara de pia, para la obtencin de xilosa xilosa (alrededor de un 50 a un 70% de peso
que posteriormente ser empleada como ma- en peso), (Aguilar et al., 2002).
teria prima para la produccin de xilitol por
medios fermentativos. Diseo experimental de la hidrlisis de
cscara de pia
Hidrlisis de los desechos de la cscara de
pia De acuerdo con la literatura existen diversos
estudios relacionados con el aprovechamien-
Las plantas almacenan la energa solar en for- to de varios residuos agroindustriales para la
ma de hidratos de carbono, los cuales pueden obtencin de xilosa por medio de un trata-
ser posteriormente utilizados en la fabricacin miento con cido diluido.
de diferentes productos con un alto valor agre-
gado, y siguen diferentes etapas, dentro de las Investigadores en el campo de la hidrlisis
cuales se encuentra la hidrlisis, que es un establecen condiciones similares de proceso,
proceso de transformacin en medio acuoso, porque en la mayora de los casos se utiliza
de las molculas complejas en azcares sim- como catalizador HCl o H2SO4 en concentra-
ples mediante reactivos qumicos. Durante ciones que varan entre el 2 y el 6% v/v y en
esta reaccin qumica, los cidos empleados un rango de temperatura entre 100-128 C,
actan como catalizadores, y transforman las con lo cual se acelera la produccin de los
cadenas de polisacridos en sustancias ms azcares hemicelulsicos por la relativa alta
simples. Para esta reaccin se han empleado energa de activacin en la fase slido-lqui-
gran cantidad de cidos como el sulfuroso, do del medio de reaccin.
clorhdrico, sulfrico, fosfrico y ntrico, pero
a escala industrial slo se han empleado el sul- Sin embargo, a altas temperaturas parte de la
frico y el clorhdrico (Oliva, 2003). xilosa obtenida puede ser degradada rpida-
mente y la celulosa de la regin amorfa pue-
A nivel industrial los procesos de hidrlisis de producir glucosa. Una buena seleccin de
cida se agrupan en dos tipos: los que em- temperatura y tiempos de reaccin resultan

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karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

en una alta produccin de azcares, princi- represin catablica sobre las enzimas xilosa
palmente xilosa. Estudios realizados por reductasa y xilitol deshidrogenasa que son de
Aguilar (2002), demuestran que en el caso de vital importancia en la bioconversin xilosa-
la hidrlisis a temperaturas mayores de 98 C xilitol (Martnez et al., 2002).
se presenta un decaimiento en la produccin
de xilosa (Aguilar et al., 2002), por lo tanto, Por el contrario, si la concentracin de glu-
para efectos de este estudio se decidi em- cosa presente en el medio es baja y tambin
plear esta temperatura. hay presencia de cido actico, la glucosa
contribuye a minimizar el efecto txico cau-
Compuestos secundarios generados du- sado por el cido durante el metabolismo de
rante la hidrlisis la xilosa (Martnez et al., 2002).

Durante la hidrlisis del material lignocelu- Cintica qumica de la hidrlisis de csca-


lsico no solo se obtienen los azcares pro- ra de pia
venientes del rompimiento de las macromo-
lculas sino que tambin debido a las altas El principal objetivo al estudiar la cintica
temperaturas y condiciones cidas en las de cualquier reaccin qumica es determinar
que se desarrolla el proceso, se originan una experimentalmente la rapidez de una reac-
serie de compuestos secundarios que pue- cin y su dependencia de parmetros tales
den actuar como inhibidores potenciales de como concentracin, temperatura y cataliza-
la posterior fermentacin. La naturaleza y la dores (Chang, 1986); sin embargo, para este
concentracin de estos compuestos depen- trabajo fue tambin muy importante definir
de del tipo de materia prima y de las condi- los valores de las variables que optimicen el
ciones del proceso (temperatura y tiempo) proceso, y obtiene una mayor concentracin
(Oliva, 2003). de xilosa, con una menor produccin de in-
hibidores (glucosa, cido actico y furfural).
El furfural ejerce un efecto daino debido Los datos bsicos en cintica qumica son las
a que al ser un aldehdo, es un compuesto concentraciones de los reactivos y productos
qumicamente reactivo que puede formar a diferentes tiempos. El mtodo que se usa
compuestos con molculas biolgicas como para controlar las concentraciones, depende
lpidos, protenas y cidos nucleicos, produ- de las sustancias implicadas y de la rapidez
ciendo una disminucin en la eficiencia de con la que cambian. Los datos pueden ser
los microorganismos de fermentacin (Oli- obtenidos mediante un anlisis en tiempo
va, 2003). real, analizando la composicin del sistema
mientras transcurre la reaccin, ya sea sepa-
La presencia de cido actico a relativas al- rando una pequea muestra o controlando la
tas concentraciones inhibe el crecimiento del totalidad. La rapidez de reaccin es sensible
microorganismo que produce el xilitol y por a la temperatura, por lo que la temperatura
lo tanto podra impedir o prevenir un siguien- de la mezcla de reaccin, debe mantenerse
te paso de fermentacin debido a que puede constante (Atkins 1991).
introducirse en las membranas celulares y
disminuir el pH intracelular afectando el me- Tanto el grado de hidrlisis, como la rapidez
tabolismo de los microorganismos. (Aguilar del proceso dependen de diferentes variables
et al., 2002). dentro de las cuales se encuentra la concen-
tracin de la biomasa, el tipo de materia or-
Adems, la produccin de xilitol, se puede gnica y el tamao de partcula (Aguilar et
ver afectada por la presencia de altas concen- al., 2002).
traciones de glucosa porque esta provoca una

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OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

Para el caso de la reaccin de hidrlisis en dY = -k1[Y] (3)


cido diluido de la cscara de pia, los es- dt
tudios cinticos se realizaron principalmen-
te para ver la variacin con el tiempo de los dX = k1[Y] k2[X] (4)
mayores productos generados y optimizar el dt
proceso de hidrlisis con el fin de obtener la
mayor concentracin de xilosa, con el menor donde:
grado de inhibidores. [Y]= concentracin xilano (g/L)
[X]= concentracin xilosa (g/L)
Los estudios previos en este tipo de procesos k1= constante de velocidad de formacin xi-
presentan varios modelos cinticos para des- losa
cribir la reaccin, sin embargo estos modelos k2=constante de velocidad de descomposi-
y parmetros cinticos son muy especficos cin xilosa
para sustratos y condiciones limitadas de re-
accin (Eken-Saraoluet al., 1997), esto de- Con base en este modelo de reaccin y resol-
bido a la heterogeneidad de la estructura qu- viendo las ecuaciones diferenciales se obtie-
mica y fsica de la hemicelulosa, que vara de ne la siguiente ecuacin de primer orden(5)
un material biomsico a otro (Ladish 1989). que expresa la concentracin de xilosa [X] en
funcin del tiempo (t):
Por lo tanto es comn utilizar modelos sim-
plificados para determinar la cintica de hi- [X] = k1[Yo] (e-k1 t e-k2 t) + [Xo]e-k2 t (5)
drlisis de materiales lignocelulsicos en k2-k1
los cuales se propone un modelo donde se
usan reacciones homogneas irreversibles
Las concentraciones iniciales de xilano y xi-
de pseudo primer orden. El primer modelo
losa se definen en el tiempo cero como [Yo]
usado satisfactoriamente fue propuesto por
y [Xo] respectivamente. Para simplificar el
Saeman(1945) donde:
modelo, se asume que [Xo] es cero y se obtie-
k1 k2 ne la siguiente ecuacin:
Celulosa Glucosa
[X] = k1[Yo] (e-k1 t e-k2 t) (6)
k2-k1
Este modelo se propuso para la hidrlisis con
H2SO4 de madera de abeto. Sin embargo, el
modelo puede ser aplicado para reacciones La concentracin potencial de xilosa [X]
de hidrlisis de fracciones hemicelulsicas presente en el material lignocelulsico co-
como se muestra a continuacin: rresponde a la conversin estequiomtrica de
los pentosanos. Al ajustar los datos experi-
k1 k2 Productos de mentales al modelo descrito en la ecuacin 6
Xilano (Y) Xilosa (X) descomposicin se obtienen los valores de k y k .
1 2
(2)
Un modelo similar se puede usar para des-
Donde k1 es la constante de rapidez de reac- cribir el incremento de la concentracin de
cin de la xilosa producida (min-1) y k2 es la glucosa, pero en este caso la reaccin de
constante de rapidez de descomposicin de descomposicin se considera insignificante
xilosa(min-1). La variacin de los compo- y el modelo se simplifica como se muestra a
nentes, basada en la reaccin (2) se muestra continuacin:
mediante las ecuaciones diferenciales 3 y 4:

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k3 1. Preparacin de la cscara de pia


Glucano Glucosa (7) La variedad de pia utilizada fue la MD2.
[G] = [Go] * (1-e-k3 t) (8) Esta fue molida con una picadora para cs-
ped y secada en secadores solares durante
Donde [Go] es la concentracin potencial de tres semanas. El material seco fue nueva-
glucosa la cual se obtiene al ajustar los datos mente molido en un molino de martillos y
experimentales con el modelo de la ecuacin posteriormente se tamiz para obtener la
8. muestra en diferentes tamaos de partcula
(en mallas con nmero de criba 40, 60 y 80.
Para el caso de la concentracin de furfural,
se puede obtener un modelo similar al de la 2. Caracterizacin qumica del sustrato
glucosa, donde k4 representa la constante de
formacin de furfural (min-1) y [Fo] la con- 2.1. Determinacin del porcentaje de hu-
centracin potencial de furfural: medad
Para la determinacin del porcentaje de hu-
[F] = [Fo] * (1-e-k4 t) (9) medad, se aplic el mtodo ASTM D1102-
56.
El modelo del cido actico se puede obtener
a partir de la siguiente ecuacin: 2.2 Determinacin del porcentaje de ce-
nizas
k3 Para la determinacin del porcentaje de ce-
Grupos acetilos cido actico (10) nizas, se utiliz el mtodo ASTM D1102-56.

A partir de la ecuacin 10 se puede expre- 2.3 Determinacin del porcentaje de solu-


sar la concentracin de cido actico [Ac] en bilidad en agua fra
funcin del tiempo: Para la determinacin del porcentaje de ma-
terial soluble en agua fra se aplic el mtodo
[Ac] = [Aco] * (1-e-k5 t) (11) ASTM D1110-56.

donde [Aco] representa la concentracin ini- 2.4 Determinacin del porcentaje de solu-
cial de cido actico obtenida por regresin bilidad en agua caliente
al graficar la concentracin del cido en fun- Al igual que para la determinacin del ma-
cin del tiempo. terial soluble en agua fra, el porcentaje de
solubilidad en agua caliente se determin por
METODOLOGA el mtodo ASTM D1110-56.

En este trabajo se realiz la caracterizacin 2.5 Porcentaje de solubilidad en ciclohexa-


fsica y qumica de los desechos de cscara no-etanol
de pia mediante la determinacin del con- Se realiz bajo la norma ASTM D-1107-56
tenido de humedad, cenizas, solubilidad en adaptado por el Laboratorio de Polmeros
agua fra y caliente, extractos en ciclohexa- de la Universidad Nacional, sustituyendo el
no-etanol, -celulosa, holocelulosa, lignina y benceno con ciclohexano.
xilano. Adems, se realiz la hidrlisis de la
cscara de pia pretratada con cido diluido 2.6 Determinacin del porcentaje de ligni-
y se determinaron los valores de los parme- na
tros cinticos de dicha hidrlisis. El contenido de lignina en el material seco,
se determin mediante la norma ASTM
D1106-56.

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OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

2.7 Determinacin del porcentaje de holo- 2.9.2 Determinacin de pentosanos


celulosa El contenido de pentosanos en la cscara de
El porcentaje de holocelulosa se calcul me- pia se determin mediante el mtodo TAPPI
diante el mtodo ASTM D1104-56 modifica- 223 cm-84.
do por Pereira (1995), para sto se coloc en
erlenmeyer3 g de muestra y se agreg 120 3.Hidrlisis de la cscara de pia con ci-
mL de agua destilada. Se tap cada uno con do sulfrico
erlenmeyer invertidos de 50 mL. Se colo-
c en bao mara con agitacin constante y Como referencia se utiliz el mtodo descrito
cuando se alcanz 70 C, se aadi 1 mL de por Aguilar et al. (2002), para lo cual se pes
cido actico glacial y 2,5 g de clorito de so- 1 g de la muestra de cscara de pia seca,
dio y se calent y agit durante 1 h. Se repiti molida y retenida en una malla de 60 en tu-
la adicin de clorito de sodio y cido actico bos de ensayo. Se le agreg 10 mL de cido
una vez ms. Se filtr el material y se lav sulfrico al 2, 4 y 6% v/v y se coloc en un
con 1,5 L de agua. bao de aceite tapado con tapones de hule
provistos de un tubo de vidrio como reflujo.
2.8 Determinacin del porcentaje de Al alcanzar los 98 C se sacaron los tubos en
-celulosa cada uno de los siguientes tiempos: 20, 40,
La cantidad de -celulosa, se determin me- 60, 80, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300 y
diante el mtodo ASTM D1103-60. 350 minutos. El experimento se realiz por
triplicado para cada tiempo de reaccin.
2.9 Determinacin de pentosanos
Primeramente, se prepar el reactivo de orci- Finalizado el tiempo, cada muestra fue colo-
nol y el etanol libre de aldehdos. El reactivo cada en un bao de hielo, posteriormente se
de orcinol se prepar disolviendo 0,400 gor- filtraron las muestras y se tom del lquido
cinol y 0,500 g de cloruro de hierro (III) en 2,5 mL los cuales se diluyeron en balones
1 L de cido clorhdrico 11 M y se guard en aforados de 25 mL con agua tridestilada, se
refrigeracin. Este se utiliz para poder de- filtr cada muestra con filtro de membrana
tectar los productos en el espectofotmetro. y se inyect en el cromatgrafo lquido de
El etanol se disolvi durante 1 h con NaOH alta resolucin.
en una proporcin del 10%.
4.Caracterizacin y cuantificacin de las
2.9.1 Preparacin de la curva de calibra- muestras hidrolizadas mediante Cromato-
cin grafa Lquida de Alta Resolucin (HPLC)
Se sec la xilosa durante 2 h en una estufa
a 60 C y se pesaron varias muestras en el 4.1 Purificacin de furfural
rango de 10 a 100 mg, cada una se coloc El furfural usado se debi destilar para eli-
en un baln de fondo plano y se realiz la minar residuos y contaminantes del lquido.
destilacin. Se midi la absorbancia de los Se coloc 250 mL de furfural impuro en un
destilados a 630 nm, usando un blanco con baln de 250 mL y se coloc en un sistema
5 mL de HCl 3,85 M. Los miligramos de de destilacin, se calent en un bao con agua
xilano en el espcimen se calcularon de la hasta los 70 C aproximadamente durante 5 h.
siguiente forma: El destilado se recogi en un baln de fondo
plano. Para establecer el grado de pureza del
mg xilano= xilosa (mg) x 0,88 (Ec. 10) destilado, se determin el punto de ebullicin
mediante el mtodo semimicro y el ndice de
Nota: 0,88 corresponde a la relacin de pe- refraccin descritos por Calvo (2004).
sos moleculares entre la xilosa (132 g/mol) y
el xilano (150 g/mol)
UNICIENCIA 26, 2012 81
karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

4.2 Determinacin de xilosa, glucosa, ci- incluyendo el modelo que el operador desee
do actico y furfural en las muestras hi- emplear. Con el fin de dar valides a los da-
drolizadas tos obtenidos mediante el ajuste se utiliza el
Tanto la inyeccin de las muestras del hi- valor de r.
drolizado como la confeccin de las curvas
de calibracin se realiz bajo las siguientes 4.6 Modelos cinticos
condiciones: Los modelos generalizados para todos los
productos pueden obtenerse correlacionando
Cuadro 1. Metodologa utilizada para los parmetros cinticos por medio de la si-
la cuantificacin y caracterizacin del guiente ecuacin:
hidrolizado
Kj = koCan(10)
Producto
Donde j es un integrador en el rango de 2 a
Xilosa y cido
Condicin
Glucosa Actico
Furfural 6, ko y n son parmetros de regresin y Ca
es la concentracin de cido expresado como
CH3CN/ % v/v. Por medio de anlisis de regresin no
Fase Mvil 0,1% H3PO4
H2O 1:8
lineal se pueden obtener los parmetros cin-
Flujo (mL/ ticos y las constantes.
0,5 1
min)
UV-vis Estos datos cinticos se optimizaron utili-
UV-vis
Detector IR (280 zando los criterios de maximizacin de la
(210 nm)
nm) concentracin de xilosa y minimizacin de
Temperatu-
30 la concentracin de los productos inhibido-
ra ( C) res. Para la optimizacin de los parmetros
cinticos, se utiliz la herramienta Solver
4.5 Determinacin de los parmetros ci- de Microsoft Excel (Microsoft Office Ex-
nticos de la hidrlisis de cscara de pia cel, 2003).
con H2SO4 98 C
Para obtener los parmetros cinticos de hi- RESULTADOS Y DISCUSIN
drlisis de los desechos de cscara de pia se
utiliz el programa de ajuste de curvas Curve Caracterizacin de la cscara de pia
Expert 1.3 el cual abarca un amplio nmero
de modelos de regresin, tanto lineales como La cscara de pia est constituida por una
no lineales. gran variedad de compuestos qumicos, los
cuales son caractersticos segn la variedad,
El modelado de datos puede ser realizado por el grado de madurez de la fruta, y las con-
varias tcnicas como la interpolacin y la re- diciones de cultivo (clima, altitud, zonas de
gresin. La interpolacin garantiza que la cur- cultivo), los cuales pueden afectar el com-
va pasar por cada punto de datos. La regresin portamiento del sustrato (cscara de pia) al
es una funcin arbitraria que reduce al mnimo ser sometido a una reaccin de hidrlisis.
la divergencia entre los datos y el modelo.
En el cuadro 2, se muestran los resultados
En este acercamiento, los parmetros son promedio obtenidos para la caracterizacin
ajustados al modelo hasta que la funcin de la cscara de pia variedad MD2, cada
sea adecuada. Por medio de este programa anlisis se realiz por triplicado.
los valores de x y y pueden ser mode-
lados utilizando alrededor de 30 modelos o

82 UNICIENCIA 26, 2012


OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

De manera comparativa, los resultados obte- bibliografa consultada, otros sustratos con-
nidos en la caracterizacin de esta variedad tienen un menor contenido de xilano y se ob-
de pia son mucho mayores que los obteni- tienen buenos resultados con ellos.
dos por Sibaja et al. 1988, a excepcin de la
lignina, sin embargo, se debe tomar en cuen- Hidrlisis de cscara de pia
ta que la variedad utilizada en el estudio de
Sibaja (1988), fue Champaka. En la hidrlisis de cscara de pia la degrada-
cin de la hemicelulosa es un proceso gradual,
Cuadro 2. Composicin de la cscara de durante el cual largas cadenas de polmero son
pia seca y molida variedad MD2. degradadas a oligosacridos y finalmente a
Ensayo Resultado monosacridos. (Sanchez et al., 2004).
Humedad 7,46 % ( 0,01)
Las figuras 3, 4 y 5 muestran los resulta-
Cenizas 4,25 % ( 0,01) dos de la hidrlisis. La figura 3 muestra la
Solubilidad agua fra 29,32 % ( 0,01) dependencia con el tiempo de la formacin
de xilosa, glucosa, cido actico y furfural
Solubilidad agua ca- 30,93 % ( 0,01)
durante la hidrlisis con H2SO4 al 2% v/v a
liente
98 C. Se observa que conforme avanza el
Solubilidad ci- 24,74 % ( 0,02) tiempo de reaccin se da una mayor forma-
clohexano-etanol cin de xilosa que de los otros compuestos.
Lignina 9,05 % ( 0,02) La concentracin de los azcares aumenta
-celulosa 41,19 % ( 0,01) progresivamente en los tiempos iniciales de
reaccin, hasta obtener valores alrededor de
Holocelulosa 65,61 % ( 0,01) los 24,2 g/L para la xilosa a los 250 minu-
Xilano 28,40 g/L ( 0,04) tos, esta concentracin representa un 85,2%
del xilano potencial en el desecho de cscara
El material soluble en agua fra y caliente es de pia. Por su parte, la glucosa a los 250
producto de la presencia de taninos, gomas, minutos alcanza los 2,31 g/L, mientras que
colorantes y azcares y en el caso del agua los productos de descomposicin aumentan
caliente, tambin se da la presencia de almi- hasta los 0,36 g/L para el furfural y los 7,9
dones. Por su parte, el porcentaje de extrac- g/L para el cido actico a los 300 minutos.
tos solubles en ciclohexano-etanol determina
el contenido de grasas, ceras, resinas, aceites Figura 3. Dependencia de la formacin
y taninos (Sibaja et al., 1988). de xilosa, glucosa, furfural y cido actico
durante la hidrlisis con H2SO4 al 2% v/v a
El porcentaje de holocelulosa presente en la 98 C con respecto al tiempo.
cscara de pia es significativamente favora-
ble, debido a que sta representa la suma del
contenido de -celulosa y hemicelulosa; a su
vez, la ltima es la base para este trabajo, ya
que est constituida mayormente de xilosa,
que es el producto final que se desea obtener
en mayor proporcin despus de la hidrlisis
(Aguilar et al., 2002).

El alto contenido de xilano indica que la cs-


cara de pia, es un adecuado sustrato para la
produccin de xilosa, debido a que segn la

UNICIENCIA 26, 2012 83


karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

co. Tal como se observ en los grficos an-


La figura 4 muestra la formacin de los pro- teriores el incremento de la concentracin de
ductos caracterizados con respecto al tiempo H2SO4 trae consigo el aumento en la concen-
durante la hidrlisis con H2SO4 al 4% v/v a tracin de los productos de descomposicin.
98 C. A los 100 minutos se obtuvo una con-
centracin de aproximadamente 24,5 g/L, la Figura 5.Dependencia de la formacin de
cual representa un 86,3% del xilano presente xilosa, glucosa, furfural y cido actico
en la cscara de pia. La mayor concentracin durante la hidrlisis con H2SO4 al 6% v/v a
de glucosa se obtiene a los 350 minutos, y al- 98 C con respecto al tiempo.
canzo 3,6 g/L, mientras que los productos de
descomposicin se mantienen en valores me-
nores a los 0,79 g/L para el furfural y los 7,9
g/L para el cido actico a los 350 minutos.
Como era de esperar al aumentar la concentra-
cin de H2SO4 en la reaccin de hidrlisis, se
presenta un ligero incremento en las concen-
traciones de los productos de descomposicin.

Figura 4. Dependencia de la formacin


de xilosa, glucosa, furfural y cido actico
durante la hidrlisis con H2SO4 al 4% v/v a
98 C con respecto al tiempo.

Comparando los grficos con respecto a la


dependencia de la formacin de xilosa con
la concentracin de cido, se observa que al
hidrolizar con H2SO4 al 2% v/v, la produc-
cin inicial de xilosa es menor que con las
otras concentraciones de cido, sin embargo
aproximadamente a partir de los 100 minu-
tos la concentracin de xilosa producida se
mantuvo en un rango muy similar, llegando
a ser prcticamente constante. Durante la hi-
drlisis con H2SO4 al 4% v/v se obtiene gran
cantidad de xilosa desde los 20 minutos de
reaccin, pero esta permanece constante a
partir de los 100 minutos; por su parte la con-
La figura 5 muestra la concentracin de xi- centracin de xilosa al hidrolizar con cido al
losa formada durante la hidrlisis con H2SO4 6% v/v se mantiene prcticamente constante
al 6% v/v a 98 C, esta se mantiene prctica- desde el principio de la reaccin.
mente constante a partir de los 80 minutos,
donde se alcanz 24,7 g/L (87,0% del xilano Es importante mencionar que la concentra-
potencial en la cscara de pia), para el caso cin de todos los productos de reaccin se
de la glucosa el mximo valor alcanzado fue mantiene constante a partir de cierto tiempo
de 4,75 g/L a los 350 minutos, mientras que para los tres porcentajes de cido empleado
los productos de descomposicin en este en la hidrlisis, pero no se presenta alguna
mismo tiempo slo alcanzan el 1,15 g/L para disminucin en las curvas lo cual demuestra
el furfural y los 8,13 g/L para el cido acti- que ni la xilosa ni los subproductos se des-
componen bajo las condiciones utilizadas.
84 UNICIENCIA 26, 2012
OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

Para el caso de la glucosa, cido actico y ms de que cada molcula de celulosa est
furfural, la concentracin aumenta propor- unida por enlaces de hidrgeno, y forman
cional a la concentracin de H2SO4, sin em- gran proporcin de fracciones de celulosa
bargo este no es tan marcado como para la cristalina y poca cantidad de segmentos de
xilosa. A partir de los 100 minutos el aumen- celulosa amorfa (que es ms susceptible a ser
to en la concentracin de cada uno de estos hidrolizada).
productos de hidrlisis es menor. La concen-
tracin casi constante que se obtiene en cada La resistencia de la celulosa tambin se pue-
uno de los productos de hidrlisis para las de basar en el hecho de que la combinacin
tres concentraciones de cido evidencia que de la hemicelulosa y la lignina provee un tipo
a partir de ese tiempo, no existe dentro del de capa protectora alrededor de la celulosa,
sustrato material susceptible a la hidrlisis quedebe ser removida antes, para que se pue-
bajo las condiciones empleadas. da dar una hidrlisis en la celulosa.

Segn Aguilar et al. 2002, aunque el cido En el caso de la lignina, esta solo puede ser
actico es el producto mayormente produci- degradada por algunos organismos, forman-
do despus de la xilosa, se considera que la do productos de alto valor agregado como
concentracin obtenida es aceptable para que por ejemplo cidos orgnicos y fenoles (Ha-
no inhiba la sntesis enzimtica del xilitol. melinck et al., 2003). Esto significa que bajo
El cido actico se produce por la hidrlisis las condiciones utilizadas durante la hidrli-
de los grupos acetilos enlazados a los mo- sis, la lignina se mantiene intacta y como la
nmeros hemicelulsicos. La concentracin celulosa tampoco reacciona, se presenta un
de cido actico que afecta el crecimiento residuo slido que puede ser empleado para
de los microorganismos que producen xilitol la produccin de soluciones de glucosa, para
no est muy claro, pues segn Aguilar otros la produccin de pulpa de papel y en condi-
autores reportan que 10 g/L de cido actico ciones adecuadas el residuo se puede separar
impide el crecimiento del microorganismo y utilizar para la obtencin de varios produc-
empleado (Pichiastipitis), pero utilizando tos qumicos y farmacuticos; por su parte el
Saccharomycescerevisiae la presencia de una producto de hidrlisis puede ser posterior-
concentracin de 9-10 g/L de cido actico mente utilizado para obtener xilitol (Mart-
realza el crecimiento y la productividad de la nez et al., 2002).
bacteria. (Aguilar et al., 2002).
En el cuadro 3 se presenta la mayor con-
Tomando como referencia a Aguilar (2002), centracin de xilosa y sus correspondientes
la formacin de furfural es casi insignifican- productos de degradacin obtenidos bajo las
te en todos los casos de hidrlisis, lo cual es condiciones de hidrlisis utilizadas en este
positivo para los fines posteriores, debido a trabajo. Comparando estos resultados con
que como ya se dijo este inhibe la produccin los obtenidos por otros autores, se puede ob-
enzimtica del xilitol. servar que al hidrolizar la cscara de pia se
obtiene una menor cantidad de productos se-
La poca produccin de glucosa, que se ob- cundarios como el furfural y la glucosa y una
serva claramente en las figuras 3, 4 y 5, con- mayor proporcin de xilosa, lo cual refuerza
firma la no ruptura de las molculas de celu- que las condiciones de hidrlisis utilizadas,
losa. Para que este proceso se lleve a cabo son las apropiadas, adems de que la cscara
se necesitan condiciones ms fuertes que las de pia es un sustrato adecuado para obtener
necesarias para la hidrlisis de la hemicelu- este tipo de compuesto.
losa, debido a que los enlaces de esta ltima
son ms dbiles que los de la celulosa, ade-

UNICIENCIA 26, 2012 85


karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

Cuadro 3. Composicin del hidrolizado hemicelulsico de cscara de pia

% H2SO4 Xilosa(g/L) Glucosa cido acti- Furfural


(g/L) co (g/L) (g/L)
2 24,27 2,57 7,91 0,36
4 25,60 3,59 8,70 0,79
6 24,97 4,75 8,10 1,15

Modelo cintico de la concentracin de Cuadro 5. Parmetros cinticos de los
xilosa productos de hidrlisis con H2SO4 diluido de
cscara de pia a 98 C.
Por medio de anlisis de regresin no lineal
se determinaron los parmetros cinticos que 2% 4% 6%
se muestran en el cuadro 4 y los resultados Modelo
H2SO4 H2SO4 H2SO4
fueron evaluados estadsticamente por medio
del coeficiente de ajuste estadstico r para de- Xilosa
terminar la valides del modelo. k1 (min-1) 0,015 0,033 0,054
Comparando los valores de k1 y k2, las reac- k2 (min-1) 0,00071 0,00065 0,00066
ciones de formacin de xilosa (representadas
r 0,9876 0,9729 0,9701
con k1) tienden a ser ms favorables con el
aumento de la concentracin de cido, con Glucosa
respecto a las reacciones de descomposicin
de xilosa (representado con k2). Como k1 k2 k3 (min-1) 0,0068 0,013 0,016
cuando se obtiene la conversin mxima de [Go] 2,721 3,497 4,358
xilano a xilosa, la formacin de productos de
degradacin puede ser minimizada rpida- r 0,9915 0,9908 0,9746
mente (Ladish 1989). Furfural

Por su parte, como era de esperar, la constan- k4 (min-1) 0,00033 0,00022 0,00137
te de formacin de glucosa k3 y la de forma-
[Fo] 3,169 10,382 3,226
cin de cido actico k5 incrementan en pro-
porcin a la concentracin de cido, mientras r 0,9705 0,9907 0,9917
que la formacin de furfural (k4) no presenta cido ac-
el mismo comportamiento, al aumentar exce- tico
sivamente en la hidrlisis con H2SO4 al 6%
y disminuir con cido al 4%, esto conlleva a k5 (min-1) 0,081 0,089 0,09
dudar sobre la validez del punto al 4% pues- [Aco] 6,899 7,684 8,567
to que el potencial de furfural (Fo) obtenido
por regresin es muy alto y no concuerda con r 0,9384 0,9696 0,9114
los valores obtenidos para la hidrlisis con
H2SO4 al 2 y 6%, sin embargo posiblemente El coeficiente de correlacin r es altamente
esto se deba a la complejidad de la matriz. significativo en todos los casos, inclusive su-

86 UNICIENCIA 26, 2012


OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

perior a los estudios realizados con anterio- Cuadro 6. Modelos generalizados para la
ridad con otras matrices (Eken-Saraoluet prediccin de los parmetros cinticos de la
al., 1997, Aguilar et al., 2002, Herrera et al., hidrlisis con H2SO4 diluido de cscara de
2003), donde se aceptan valores de hasta 0,86 pia a 98 C
asumindolo como una buena correlacin,
debido a lo complejo de la matriz polimrica Producto Modelo generali- r
donde hay mucha variedad de compuestos zado
que pueden interferir durante la hidrlisis y
una gran heterogeneidad en el medio de re- Generacin k1=0,00649Ca1,18
accin al estar el sustrato en fase slida y el xilosa (11) 0,9998
cataltico en fase lquida. Esto indica que los Degrada- k2=0,00074Ca -0,07

datos se ajustan adecuadamente a los mode- cin xilosa (12) 0,8683


los seleccionados. Glucosa k3=0,00438Ca 0,73

(13) 0,9873
Los parmetros cinticos mostrados en el
Furfural k4=0,00008Ca 1,48
cuadro 5 pueden ser correlacionados con la
(14) 0,9801
concentracin de cido por medio de la ecua-
cin 10 y se obtiene un modelo generalizado cido k5=0,07624Ca 0,1

para las tres concentraciones (cuadro 6), el actico (15) 0,9593


cual se utiliza posteriormente para encontrar
el punto ptimo. Es importante recordar que el objetivo prin-
cipal de la optimizacin fue obtener una alta
De igual manera, se puede predecir la con- concentracin de xilosa, con una baja con-
centracin de glucosa mediante un modelo centracin de inhibidores (furfural y cido
generalizado correlacionndola con la con- actico) y de glucosa con el fin de que el pos-
centracin de cido por medio de la ecuacin terior paso de fermentacin sea ms eficiente.
13. Las ecuaciones 14 y 15 muestran las mis- Tomndolo en cuenta, se realiz una optimi-
mas correlaciones para el caso del furfural zacin general usando los modelos anteriores
y del cido actico respectivamente. Estos donde se obtuvo las mejores condiciones de
modelos cinticos son vlidos dentro del ran- hidrlisis con una mayor concentracin de
go estudiado. xilosa. Estos datos se muestran en cuadro 7.

Cuadro 7. Condiciones ptimas obtenidas con la herramienta Solver de la hoja de clculo


Excel de Microsoft

[H2SO4] Tiempo [Xilosa] [Glucosa] [cido acti- [Furfural]


(% v/v) (min) (g/L) (g/L) co] (g/L) (g/L)
2 217 24,37 2,80 7,72 0,15
4 120 26,21 2,69 7,72 0,23
6 83 26,90 2,61 7,71 0,29

UNICIENCIA 26, 2012 87


karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.

Como se observa, al utilizar una concentra- los microorganismos de fermentacin segn


cin de cido sulfrico del 2% v/v la mayor la literatura estudiada (Aguilar et al., 2002).
concentracin de xilosa se obtiene a los 217
minutos (24,37 g/L), mientras que al 4% v/v CONCLUSIONES
se obtiene un mximo de 26,21 g/L a los 120
minutos y al 6% v/v se consigue casi la mis- Los desechos de cscara de pia son residuos
ma cantidad (26,9 g/L), pero en un tiempo potenciales para la obtencin de xilosa bajo
mucho menor de 83 minutos. En cuanto a la condiciones sencillas de hidrlisis.
concentracin de glucosa y cido actico la
concentracin mnima obtenida fue casi la El alto contenido de xilano como fuente de
misma en todos los casos, mientras que la xilosa proporciona un mayor valor agrega-
cantidad de furfural aument conforme in- do a este tipo de materiales lignocelulsi-
crement la concentracin de cido. cos producto del procesamiento industrial
de la pia.
Tomando en cuenta estos resultados y con
base en la concentracin potencial de xila- La mxima produccin de xilosa durante la
no (Yo) la cual corresponde a 28,40 g/L, se hidrlisis cida a 98 C alcanza valores alre-
observa que durante la hidrlisis con H2SO4 dedor del 95% del xilano potencial.
al 2% v/v la mxima cantidad de xilosa pro-
ducida con una mnima concentracin de Las condiciones ptimas para obtener una
productos secundarios corresponde al 86% mayor produccin de xilosa con menor con-
de Yo, mientras que con H2SO4 al 4% v/v se centracin de inhibidores bajo las condicio-
alcanz el 92%; para el caso de la hidrli- nes estudiadas son: H2SO4 al 6% v/v, tiempo
sis con cido al 6% v/v el aumento fue muy de reaccin 83 minutos, temperatura 98 C de
poco alcanzando casi el 95%. Esto demuestra acuerdo al modelo cintico utilizado.
la efectividad de las condiciones de la hidr-
lisis cida, adems, indica que la cscara de La presencia de glucosa en pequeas canti-
pia es un sustrato muy adecuado para la ob- dades es un indicador de que la reaccin de
tencin de xilosa. hidrlisis cida bajo las condiciones experi-
mentales se lleva a cabo mayoritariamente
Con base en los datos obtenidos en el cuadro sobre la hemicelulosa.
5 se puede concluir que las mejores condicio-
nes de hidrlisis de desechos de cscara de Los altos valores de k1 en comparacin con
pia con H2SO4 a 98 C bajo las condiciones la k2 indican que las reacciones de formacin
estudiadas son las siguientes: concentracin de xilosa son ms favorables que las de des-
de H2SO4 de 6% v/v y un tiempo de reaccin composicin.
de 83 minutos.
BIBLIOGRAFA
Esto porque a pesar de que al hidrolizar con
H2SO4 al 4% v/v se obtiene casi la misma Aguilar, R., Ramrez, J., Garrote, G., Vzquez, M. (2002).
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tidad muy baja que no afectara la accin de

88 UNICIENCIA 26, 2012


OBTENCIN DE XILOSA A PARTIR DE DESECHOS LIGNOCELULSICOS DE LA ...

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