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4 AUTHORS, INCLUDING:
Jos Vega-Baudrit
National University of Costa Rica
96 PUBLICATIONS 200 CITATIONS
SEE PROFILE
RESUMEN Abstract
1 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: krami-
rez@una.ac.cr
2 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: osca-
rr13@gmail.com
3 Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: pat.alv.
ag@gmail.com
4 Laboratorio Nacional de Nanotecnologa, LANOTEC-CeNAT, Costa Rica.
Laboratorio de Polmeros POLIUNA. Universidad Nacional, Ap. 86-3000, Heredia, Costa Rica. e-mail: jve-
gab@hotmail.com
Recibido el 20 de setiembre de 2011 - Aceptado el 15 de octubre de 2011 - Corregido el 1 de noviembre de 2011
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karla ramrez a., scar rojas c., patricia alvarado A. y jos vega-B.
Estos desechos estn constituidos por la cs- plean cidos concentrados y los que utilizan
cara, el corazn y slidos centrifugados en la cidos diluidos. Si se utilizan cidos con-
produccin del jugo (IPGRI 2001). centrados se opera a baja temperatura, ob-
tenindose altos rendimientos de hidrlisis
El Laboratorio de Polmeros de la Universi- (superiores al 90% de la glucosa potencial).
dad Nacional (POLIUNA) ha desarrollado Sin embargo este es un proceso que presen-
varias lneas de investigacin orientadas al ta la desventaja de no ser rentable, debido a
aprovechamiento de este tipo de desechos. la gran cantidad de cido que se utiliza y lo
As por ejemplo, se han realizado estudios en costoso de su recuperacin. Esto sin tomar en
la obtencin de acetato de celulosa a partir cuenta la necesidad de una posterior etapa de
de fibra de pia (Sibaja et al., 1986) y ms neutralizacin para que el producto pueda ser
recientemente, en la utilizacin del rastrojo fermentado (Oliva, 2003).
de pia como refuerzo de una resina polister
comercial (Quesadaet al., 2005). Como parte Al utilizar cidos diluidos la principal ven-
de esta lnea de investigacin se ejecut un taja que se tiene es el relativo bajo consumo
proyecto, con el aporte del CONICIT, el cual de cidos, sin embargo, se deben emplear al-
consiste en la utilizacin de los desechos de tas temperaturas para alcanzar rendimientos
cscara de pia para la produccin biotecno- aceptables de conversin (Oliva 2003). En la
lgica de xilitol, con el fin de aprovechar al hidrlisis con cido diluido, se obtiene una
mximo el componente hemicelulsico de la fraccin lquida que contiene principalmente
cscara de pia, para la obtencin de xilosa xilosa (alrededor de un 50 a un 70% de peso
que posteriormente ser empleada como ma- en peso), (Aguilar et al., 2002).
teria prima para la produccin de xilitol por
medios fermentativos. Diseo experimental de la hidrlisis de
cscara de pia
Hidrlisis de los desechos de la cscara de
pia De acuerdo con la literatura existen diversos
estudios relacionados con el aprovechamien-
Las plantas almacenan la energa solar en for- to de varios residuos agroindustriales para la
ma de hidratos de carbono, los cuales pueden obtencin de xilosa por medio de un trata-
ser posteriormente utilizados en la fabricacin miento con cido diluido.
de diferentes productos con un alto valor agre-
gado, y siguen diferentes etapas, dentro de las Investigadores en el campo de la hidrlisis
cuales se encuentra la hidrlisis, que es un establecen condiciones similares de proceso,
proceso de transformacin en medio acuoso, porque en la mayora de los casos se utiliza
de las molculas complejas en azcares sim- como catalizador HCl o H2SO4 en concentra-
ples mediante reactivos qumicos. Durante ciones que varan entre el 2 y el 6% v/v y en
esta reaccin qumica, los cidos empleados un rango de temperatura entre 100-128 C,
actan como catalizadores, y transforman las con lo cual se acelera la produccin de los
cadenas de polisacridos en sustancias ms azcares hemicelulsicos por la relativa alta
simples. Para esta reaccin se han empleado energa de activacin en la fase slido-lqui-
gran cantidad de cidos como el sulfuroso, do del medio de reaccin.
clorhdrico, sulfrico, fosfrico y ntrico, pero
a escala industrial slo se han empleado el sul- Sin embargo, a altas temperaturas parte de la
frico y el clorhdrico (Oliva, 2003). xilosa obtenida puede ser degradada rpida-
mente y la celulosa de la regin amorfa pue-
A nivel industrial los procesos de hidrlisis de producir glucosa. Una buena seleccin de
cida se agrupan en dos tipos: los que em- temperatura y tiempos de reaccin resultan
en una alta produccin de azcares, princi- represin catablica sobre las enzimas xilosa
palmente xilosa. Estudios realizados por reductasa y xilitol deshidrogenasa que son de
Aguilar (2002), demuestran que en el caso de vital importancia en la bioconversin xilosa-
la hidrlisis a temperaturas mayores de 98 C xilitol (Martnez et al., 2002).
se presenta un decaimiento en la produccin
de xilosa (Aguilar et al., 2002), por lo tanto, Por el contrario, si la concentracin de glu-
para efectos de este estudio se decidi em- cosa presente en el medio es baja y tambin
plear esta temperatura. hay presencia de cido actico, la glucosa
contribuye a minimizar el efecto txico cau-
Compuestos secundarios generados du- sado por el cido durante el metabolismo de
rante la hidrlisis la xilosa (Martnez et al., 2002).
donde [Aco] representa la concentracin ini- 2.4 Determinacin del porcentaje de solu-
cial de cido actico obtenida por regresin bilidad en agua caliente
al graficar la concentracin del cido en fun- Al igual que para la determinacin del ma-
cin del tiempo. terial soluble en agua fra, el porcentaje de
solubilidad en agua caliente se determin por
METODOLOGA el mtodo ASTM D1110-56.
4.2 Determinacin de xilosa, glucosa, ci- incluyendo el modelo que el operador desee
do actico y furfural en las muestras hi- emplear. Con el fin de dar valides a los da-
drolizadas tos obtenidos mediante el ajuste se utiliza el
Tanto la inyeccin de las muestras del hi- valor de r.
drolizado como la confeccin de las curvas
de calibracin se realiz bajo las siguientes 4.6 Modelos cinticos
condiciones: Los modelos generalizados para todos los
productos pueden obtenerse correlacionando
Cuadro 1. Metodologa utilizada para los parmetros cinticos por medio de la si-
la cuantificacin y caracterizacin del guiente ecuacin:
hidrolizado
Kj = koCan(10)
Producto
Donde j es un integrador en el rango de 2 a
Xilosa y cido
Condicin
Glucosa Actico
Furfural 6, ko y n son parmetros de regresin y Ca
es la concentracin de cido expresado como
CH3CN/ % v/v. Por medio de anlisis de regresin no
Fase Mvil 0,1% H3PO4
H2O 1:8
lineal se pueden obtener los parmetros cin-
Flujo (mL/ ticos y las constantes.
0,5 1
min)
UV-vis Estos datos cinticos se optimizaron utili-
UV-vis
Detector IR (280 zando los criterios de maximizacin de la
(210 nm)
nm) concentracin de xilosa y minimizacin de
Temperatu-
30 la concentracin de los productos inhibido-
ra ( C) res. Para la optimizacin de los parmetros
cinticos, se utiliz la herramienta Solver
4.5 Determinacin de los parmetros ci- de Microsoft Excel (Microsoft Office Ex-
nticos de la hidrlisis de cscara de pia cel, 2003).
con H2SO4 98 C
Para obtener los parmetros cinticos de hi- RESULTADOS Y DISCUSIN
drlisis de los desechos de cscara de pia se
utiliz el programa de ajuste de curvas Curve Caracterizacin de la cscara de pia
Expert 1.3 el cual abarca un amplio nmero
de modelos de regresin, tanto lineales como La cscara de pia est constituida por una
no lineales. gran variedad de compuestos qumicos, los
cuales son caractersticos segn la variedad,
El modelado de datos puede ser realizado por el grado de madurez de la fruta, y las con-
varias tcnicas como la interpolacin y la re- diciones de cultivo (clima, altitud, zonas de
gresin. La interpolacin garantiza que la cur- cultivo), los cuales pueden afectar el com-
va pasar por cada punto de datos. La regresin portamiento del sustrato (cscara de pia) al
es una funcin arbitraria que reduce al mnimo ser sometido a una reaccin de hidrlisis.
la divergencia entre los datos y el modelo.
En el cuadro 2, se muestran los resultados
En este acercamiento, los parmetros son promedio obtenidos para la caracterizacin
ajustados al modelo hasta que la funcin de la cscara de pia variedad MD2, cada
sea adecuada. Por medio de este programa anlisis se realiz por triplicado.
los valores de x y y pueden ser mode-
lados utilizando alrededor de 30 modelos o
De manera comparativa, los resultados obte- bibliografa consultada, otros sustratos con-
nidos en la caracterizacin de esta variedad tienen un menor contenido de xilano y se ob-
de pia son mucho mayores que los obteni- tienen buenos resultados con ellos.
dos por Sibaja et al. 1988, a excepcin de la
lignina, sin embargo, se debe tomar en cuen- Hidrlisis de cscara de pia
ta que la variedad utilizada en el estudio de
Sibaja (1988), fue Champaka. En la hidrlisis de cscara de pia la degrada-
cin de la hemicelulosa es un proceso gradual,
Cuadro 2. Composicin de la cscara de durante el cual largas cadenas de polmero son
pia seca y molida variedad MD2. degradadas a oligosacridos y finalmente a
Ensayo Resultado monosacridos. (Sanchez et al., 2004).
Humedad 7,46 % ( 0,01)
Las figuras 3, 4 y 5 muestran los resulta-
Cenizas 4,25 % ( 0,01) dos de la hidrlisis. La figura 3 muestra la
Solubilidad agua fra 29,32 % ( 0,01) dependencia con el tiempo de la formacin
de xilosa, glucosa, cido actico y furfural
Solubilidad agua ca- 30,93 % ( 0,01)
durante la hidrlisis con H2SO4 al 2% v/v a
liente
98 C. Se observa que conforme avanza el
Solubilidad ci- 24,74 % ( 0,02) tiempo de reaccin se da una mayor forma-
clohexano-etanol cin de xilosa que de los otros compuestos.
Lignina 9,05 % ( 0,02) La concentracin de los azcares aumenta
-celulosa 41,19 % ( 0,01) progresivamente en los tiempos iniciales de
reaccin, hasta obtener valores alrededor de
Holocelulosa 65,61 % ( 0,01) los 24,2 g/L para la xilosa a los 250 minu-
Xilano 28,40 g/L ( 0,04) tos, esta concentracin representa un 85,2%
del xilano potencial en el desecho de cscara
El material soluble en agua fra y caliente es de pia. Por su parte, la glucosa a los 250
producto de la presencia de taninos, gomas, minutos alcanza los 2,31 g/L, mientras que
colorantes y azcares y en el caso del agua los productos de descomposicin aumentan
caliente, tambin se da la presencia de almi- hasta los 0,36 g/L para el furfural y los 7,9
dones. Por su parte, el porcentaje de extrac- g/L para el cido actico a los 300 minutos.
tos solubles en ciclohexano-etanol determina
el contenido de grasas, ceras, resinas, aceites Figura 3. Dependencia de la formacin
y taninos (Sibaja et al., 1988). de xilosa, glucosa, furfural y cido actico
durante la hidrlisis con H2SO4 al 2% v/v a
El porcentaje de holocelulosa presente en la 98 C con respecto al tiempo.
cscara de pia es significativamente favora-
ble, debido a que sta representa la suma del
contenido de -celulosa y hemicelulosa; a su
vez, la ltima es la base para este trabajo, ya
que est constituida mayormente de xilosa,
que es el producto final que se desea obtener
en mayor proporcin despus de la hidrlisis
(Aguilar et al., 2002).
Para el caso de la glucosa, cido actico y ms de que cada molcula de celulosa est
furfural, la concentracin aumenta propor- unida por enlaces de hidrgeno, y forman
cional a la concentracin de H2SO4, sin em- gran proporcin de fracciones de celulosa
bargo este no es tan marcado como para la cristalina y poca cantidad de segmentos de
xilosa. A partir de los 100 minutos el aumen- celulosa amorfa (que es ms susceptible a ser
to en la concentracin de cada uno de estos hidrolizada).
productos de hidrlisis es menor. La concen-
tracin casi constante que se obtiene en cada La resistencia de la celulosa tambin se pue-
uno de los productos de hidrlisis para las de basar en el hecho de que la combinacin
tres concentraciones de cido evidencia que de la hemicelulosa y la lignina provee un tipo
a partir de ese tiempo, no existe dentro del de capa protectora alrededor de la celulosa,
sustrato material susceptible a la hidrlisis quedebe ser removida antes, para que se pue-
bajo las condiciones empleadas. da dar una hidrlisis en la celulosa.
Segn Aguilar et al. 2002, aunque el cido En el caso de la lignina, esta solo puede ser
actico es el producto mayormente produci- degradada por algunos organismos, forman-
do despus de la xilosa, se considera que la do productos de alto valor agregado como
concentracin obtenida es aceptable para que por ejemplo cidos orgnicos y fenoles (Ha-
no inhiba la sntesis enzimtica del xilitol. melinck et al., 2003). Esto significa que bajo
El cido actico se produce por la hidrlisis las condiciones utilizadas durante la hidrli-
de los grupos acetilos enlazados a los mo- sis, la lignina se mantiene intacta y como la
nmeros hemicelulsicos. La concentracin celulosa tampoco reacciona, se presenta un
de cido actico que afecta el crecimiento residuo slido que puede ser empleado para
de los microorganismos que producen xilitol la produccin de soluciones de glucosa, para
no est muy claro, pues segn Aguilar otros la produccin de pulpa de papel y en condi-
autores reportan que 10 g/L de cido actico ciones adecuadas el residuo se puede separar
impide el crecimiento del microorganismo y utilizar para la obtencin de varios produc-
empleado (Pichiastipitis), pero utilizando tos qumicos y farmacuticos; por su parte el
Saccharomycescerevisiae la presencia de una producto de hidrlisis puede ser posterior-
concentracin de 9-10 g/L de cido actico mente utilizado para obtener xilitol (Mart-
realza el crecimiento y la productividad de la nez et al., 2002).
bacteria. (Aguilar et al., 2002).
En el cuadro 3 se presenta la mayor con-
Tomando como referencia a Aguilar (2002), centracin de xilosa y sus correspondientes
la formacin de furfural es casi insignifican- productos de degradacin obtenidos bajo las
te en todos los casos de hidrlisis, lo cual es condiciones de hidrlisis utilizadas en este
positivo para los fines posteriores, debido a trabajo. Comparando estos resultados con
que como ya se dijo este inhibe la produccin los obtenidos por otros autores, se puede ob-
enzimtica del xilitol. servar que al hidrolizar la cscara de pia se
obtiene una menor cantidad de productos se-
La poca produccin de glucosa, que se ob- cundarios como el furfural y la glucosa y una
serva claramente en las figuras 3, 4 y 5, con- mayor proporcin de xilosa, lo cual refuerza
firma la no ruptura de las molculas de celu- que las condiciones de hidrlisis utilizadas,
losa. Para que este proceso se lleve a cabo son las apropiadas, adems de que la cscara
se necesitan condiciones ms fuertes que las de pia es un sustrato adecuado para obtener
necesarias para la hidrlisis de la hemicelu- este tipo de compuesto.
losa, debido a que los enlaces de esta ltima
son ms dbiles que los de la celulosa, ade-
Por su parte, como era de esperar, la constan- k4 (min-1) 0,00033 0,00022 0,00137
te de formacin de glucosa k3 y la de forma-
[Fo] 3,169 10,382 3,226
cin de cido actico k5 incrementan en pro-
porcin a la concentracin de cido, mientras r 0,9705 0,9907 0,9917
que la formacin de furfural (k4) no presenta cido ac-
el mismo comportamiento, al aumentar exce- tico
sivamente en la hidrlisis con H2SO4 al 6%
y disminuir con cido al 4%, esto conlleva a k5 (min-1) 0,081 0,089 0,09
dudar sobre la validez del punto al 4% pues- [Aco] 6,899 7,684 8,567
to que el potencial de furfural (Fo) obtenido
por regresin es muy alto y no concuerda con r 0,9384 0,9696 0,9114
los valores obtenidos para la hidrlisis con
H2SO4 al 2 y 6%, sin embargo posiblemente El coeficiente de correlacin r es altamente
esto se deba a la complejidad de la matriz. significativo en todos los casos, inclusive su-
perior a los estudios realizados con anterio- Cuadro 6. Modelos generalizados para la
ridad con otras matrices (Eken-Saraoluet prediccin de los parmetros cinticos de la
al., 1997, Aguilar et al., 2002, Herrera et al., hidrlisis con H2SO4 diluido de cscara de
2003), donde se aceptan valores de hasta 0,86 pia a 98 C
asumindolo como una buena correlacin,
debido a lo complejo de la matriz polimrica Producto Modelo generali- r
donde hay mucha variedad de compuestos zado
que pueden interferir durante la hidrlisis y
una gran heterogeneidad en el medio de re- Generacin k1=0,00649Ca1,18
accin al estar el sustrato en fase slida y el xilosa (11) 0,9998
cataltico en fase lquida. Esto indica que los Degrada- k2=0,00074Ca -0,07
(13) 0,9873
Los parmetros cinticos mostrados en el
Furfural k4=0,00008Ca 1,48
cuadro 5 pueden ser correlacionados con la
(14) 0,9801
concentracin de cido por medio de la ecua-
cin 10 y se obtiene un modelo generalizado cido k5=0,07624Ca 0,1
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