Problemas anlisis cuantitativo

Prof. Araceli Pea Alvarez

Septiembre 2017

Problema 2

Se requiere determinar por cromatografa de gases el contenido de etanol en una

muestra farmacutica lquida que contiene una mezcla de sulfas. Para realizar el
anlisis se prepararon las siguientes disoluciones.

Preparacin de estndares:

Estndar interno (EI): se transfiere una alcuota de 5.0 mL de acetonitrilo a un

matraz aforado de 250 mL y se lleva a la marca del aforo con agua.

Disolucin patrn de etanol (DP): se transfiere una alcuota de 5.0 mL de etanol

(99.8%) a un matraz aforado de 250 mL y se lleva a la marca del aforo con agua.

Disolucin estndar (DE): se transfiere una alcuota de 10 mL de la disolucin

patrn de etanol (DP) y 10 mL de la disolucin de estndar interno (EI) y se llevan
al aforo de 100 mL con agua.

Muestra:

Se transfiere una alcuota de 40 mL de la muestra a un matraz aforado de 100 mL,

se adicionan 10 mL de la disolucin de estndar interno (EI), se centrifuga (si hay
residuos se filtra) y se lleva a la marca de aforo con agua.
Los anlisis de la disolucin estndar y la muestra se realizaron por triplicado
inyectndose 1.0 L en el cromatgrafo de gases.

Condiciones cromatogrficas
Horno Isotrmico 60C
split/splitless: split 30:1; 150 C
Inyector
vol. Inyeccin: 1 L
Capilar de slice fundida
Carbowax(fase polar). 30 m x 0.25 mm
Columna x 0.25 m
Flujo H2: 1 mL/min
Detector Ionizacin de llama:150C

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Resultados experimentales:

Disolucin estndar

rea de EtOH rea EI

87,153 86,290
81,210 78,844
86,500 84,804

Muestra farmacutica

rea de EtOH rea EI

20,418 85,190
24,512 102,133
19,820 82,928

a) Calcula el contenido de etanol en la muestra, expresa el resultado en % v/v.

b) La concentracin mxima permitida de alcohol en este tipo de frmacos es de 5

% v/v, con base en el resultado obtenido Hay indicios de que el producto cumple
la norma?

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Problema 6

Los lupinos son plantas con un alto contenido de alcaloides, compuestos que se
sabe perjudican la salud. Los alcaloides encontrados comnmente en este tipo de
plantas son espartena, lupanina, citisina, 3-OH-lupanina y 13-OH-lupanina.

El colorn es una variedad de lupino y se desea conocer el contenido de estos

alcaloides para determinar si puede ser utilizado como alimento para el ganado.

Para realizar el anlisis por cromatografa de gases se prepar la siguiente

disolucin estndar:

Preparacin de disoluciones:

Disolucin estndar (DE): se pesaron 0.757 mg de espartena, 0.5 mg de citisina,

3.42 mg de lupanina, O.22 mg de 3-OH-lupanina, 0.215 mg de 13-OH-lupanina y
0.500 mg de cafena, que se utiliz como estndar interno (EI), se disolvieron y se
llevaron al aforo de 5.0 mL con metanol. El anlisis se realiz por triplicado
inyectando 1 L de esta disolucin en el cromatgrafo de gases.

Preparacin de la Muestra problema:

Un gramo de harina de colorn se extrajo con 10 mL de cido tricloroactico al 5%

a temperatura ambiente durante 1 min, se centrifug y se separ el sobrenadante,
esta operacin se realiz dos veces ms; los extractos se juntaron y se agreg 1.0
mL de NaOH para neutralizar. Se extrajeron nuevamente con 2 porciones de 10
mL de CH2Cl2 y lo extrado se evapor a sequedad.
El residuo con los alcaloides se disolvi en 4.0 mL de metanol y despus de
cerciorarse que el extracto no contena cafena (prueba colorimtrica) se
adicionaron 0.500 mg de cafena (EI). Finalmente se ajust el volumen a 5.0 mL
con metanol. Se inyect 1.0 L de esta disolucin por triplicado en el cromatgrafo
de gases.

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 Condiciones cromatogrficas
150 C durante 0.5 min,
incrementando 20C/min hasta 200 C
Horno
por 15 min, incrementando 5 C/min
hasta 240 C durante 15 min
split/splitless: splitless1 min.
Inyector temp: 240 C
vol. inyeccin: 1 L
Columna capilar de slice fundida OV-1
(fase no polar). 25 m x 0.25 mm x
Columna 0.25m
Flujo H2: 1 mL/min
Detector Ionizacin de llama:300C

Resultados experimentales:

Cromatograma 1. Disolucin estndar de alcaloides

Disolucin estndar de alcaloides

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No. de pico Alcaloide tr(min) reas
1 2 3
1 Espartena 6.20 690,515 584,481 587,884
2 Cafena 6.80 244,120 207,082 209,090
3 Citosina 13.40 619,612 599,045 569,910
4 Lupanina 20.40 2,948,813 2,527,575 2,516,182
5 3-OH-lupanina 23.50 138,221 123,711 121,251
6 13-OH- 28.60 162,242 146,096 142,558
lupanina

Cromatograma 2. Muestra de colorn (L. exaltatus)

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 Tiempos de retencin y reas de la muestra de colorn

No. De pico tr(min) reas

1 2 3
1 6.20 145,848 175,345 147,997
2 6.80 220,097 245,890 237,698
3 17.50 189,340 214,836 198,532
4 18.60 143,214 163,689 145,290
5 20.31 2,191,599 2,573,631 2,263,740
6 21.00 145,960 167,583 154,369
7 23.47 147,762 175,634 159,083

De acuerdo a los resultados experimentales responde:

a) Qu alcaloides estn presentes en la muestra?

b) Qu factores de respuesta se obtienen para cada uno de los alcaloides

identificados?

c) Qu concentracin se obtiene de cada uno de los alcaloides presentes en

el colorn en mg/g de muestra?

d) Cul es el contenido total de alcaloides por 100 g de colorn?

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Problema 8

Se quiere determinar la distribucin de alcoholes en mezcal y su concentracin

relativa por normalizacin de reas.

Preparacin de la muestra:

Se vierten 2.0 mL de mezcal en un vial de 8.0 mL al cul se le adicionan 0.5 g de

cido silcico; se agita vigorosamente en vrtex durante 2 min. Se deja separar las
fases. La fase lquida es transferida a un matraz aforado de 5.0 mL mientras que a
la fase slida se le adicionan 1.5 mL de acetona. Se agita nuevamente durante 2
min. Y se deja separar las fases. La fase lquida se junta con la anterior en el
matraz aforado de 5.0 mL. Se repite nuevamente la operacin de lavado con
acetona. La fase lquida se lleva al aforo con acetona y se inyecta 1.0 L de esta
disolucin.

Condiciones cromatogrficas
40 C durante 10 min, incrementando
Horno
10C/min hasta 240 C durante 1 min
split/splitless: split 30:1.
Inyector temp: 240 C
vol. inyeccin: 1 L
Columna capilar de slice fundida
Carbowax (fase polar). 30 m x 0.32 mm
Columna x 0.25m
Flujo H2:1 mL/min
Detector Ionizacin de llama:250C

Informacin experimental:
En el cromatograma obtenido del anlisis del mezcal se indicanlas seales que
corresponden a la acetona y al acetato de etilo.

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Resultados experimentales:

Cromatograma 1. Extracto de Mezcal

reas obtenidas de los compuestos analizados en el extracto de mezcal

reas
Pico Compuesto 1 2 3
1 Acetona 3,568,263 3,958,428 3,725,892
2 Acetato de etilo 300,364 293,722 270,821
Nonanol 154,264 163,405 146,662
Alcohol benclico 37,519 38,971 34,766
Etanol 3,417,384 3,539,710 3,274,528
Alcohol Amlico 0 0 0
Feniletanol 12,231 13,084 11,726
Butanol 0 0 0
Alcohol Isoamilico 474,225 494,192 446,721
Hexanol 45,866 48,451 44,430
Propanol 106,710 109,274 99,385
Isobutanol 168,896 174,293 157,479
Metanol 365,134 350,714 334,699
7 No identificado 11,563 12,019 10,693
9 No identificado 5,235 5,982 4,857
11 No identificado 36,539 37,391 35,632
12 No identificado 9,752 10,384 9,137

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a) Indica el orden de elucin de los compuestos presentes en el extracto de
mezcal.Seala que criterio seguiste y porqu es apropiado.

b) Determina por normalizacin de reas la concentracin relativa de los

alcoholes identificados.

c) Indica el alcohol que se encuentra presente en menor proporcin en el

mezcal.

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Problema 15

Se requiere determinar el % de etanol en dos muestras de gel antibacterial para

manos, para lo cual se realiz un anlisis cromatogrfico tomando una porcin del
vapor sobrenadante de la muestra (HS, por sus siglas en ingls), bajo las
siguientes condiciones.

Preparacin de disoluciones:

Disolucin patrn (DP): se tomaron 0.7 mL de etanol y se llevaron a 10 mL con

H2O.

Estndar interno (EI): se utiliz una disolucin de propanol de 60 mg/mL en H2O.

Disolucin estndar (DE): se tom 1.0 mL de disolucin patrn y 1.0 mL de

estndar interno, se llevaron a un volumen final de 10 mL con H 2O y se trat de la
misma manera que la muestra.

Preparacin de muestra:

Se pes la muestra (Tabla) y adicion 1.0 mL de estndar interno, se llevaron al

aforo de 10 mL con H2O, la disolucin se introdujo en un vial que se sell
hermticamente y se dej equilibrar a 68C durante 2 min, pasado este tiempo con
una jeringa se tomaron 200 L del vapor sobrenadante y se inyectaron en el
cromatgrafo, cada muestra se analiz por triplicado.

Condiciones cromatogrficas
80 C durante 1.3 min, incrementando
Horno
20C/min hasta 130 C durante 5 min
split/splitless: split 30:1.
Inyector temp: 200 C
vol. inyeccin: 1 L
Columna Capilar de slice SP 1000
Columna (fase polar). 30 m x 0.32 mm x 0.25m
Flujo H2:1 mL/min
Detector Ionizacin de llama:200C

Informacin experimental

Caractersticas qumicas del etanol estndar:

Pureza: 99.8%
Densidad: 0.78 g/mL

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Resultados experimentales:

Peso de gel antibacterial analizado

Muestra 1 Peso (mg) Muestra 2 Peso (mg)

1a 135.72 2a 116.75
1b 123.26 2b 156.35
1c 150.28 2c 204.00

reas de la disolucin estndar

Disolucin rea EtOH rea EI

Estndar 1,105.81 1,606.98

reas de las muestras de gel antibacterial analizado

Disolucin rea EtOH rea EI

M1a 738.26 680.62
M1b 1,085.65 1,067.70
M1c 519.11 441.33
M2a 529.35 583.11
M2b 1,119.06 905.54
M2c 488.67 320.83

a) Calcula el % en peso de etanol en cada muestra.

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Problema 24

Se requiere determinar la concentracin de Piroxicam e Ibuprofeno (anti-

inflamatorios) en tabletas. Para ello se realiz un anlisis por HPLC, bajo las
siguientes condiciones cromatogrficas.

Ibuprofeno Piroxicam

Condiciones cromatogficas
Columna Hypersil (Fase inversa)
Longitud: 150 mm
Dimetro interno: 4.6 mm
Tamao de partcula: 5 m
Temp. Ambiente
Flujo: 1 mL min-1
Fase mvil A: 0.1% cido frmico
B: Acetonitrilo
Gradiente 55-100%B en 5 min
Detector UV-VIS = 220nm
Volumen de inyeccin Bucle (Loop): 10 L

Las tabletas tienen un peso promedio de 600 mg y 250 mg decada principio activo
por tableta. Para la determinacin se prepar una disolucin estndar de 1.0
mg/mL
(0.1% cido frmico: acetonitrilo)de cada uno de los principios activos, se tom
una alcuota de 1 mL y se afor a 2.0 mL. De esta disolucin se inyectaron 10 l al
cromatgrafo.
Para la muestra se pesaron 100 mg de muestra y se extrajeron totalmente los
principios activos llevndose a un volumen final de 100 ml, de aqu se tom una
alcuota de 1.0 mL y se afor a 2.0 mL. De esta disolucin se inyectaron 10 L al
cromatgrafo.

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 rea Piroxicam rea Ibuprofeno
Estndar 673446 346638
Estndar 673333 347894
Estndar 692999 346663
Muestra* 328878 168394
*rea promedio n=3

Cul es el contenido de Piroxicam e Ibuprofeno por tableta? De acuerdo con lo

especificado en la farmacopea la tableta debe contener de cada principio activo
250 mg 5%, se aceptan o se rechazan las tabletas?

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