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Ciclo: I Ciclo.
Tacna Per
2014
UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN TACNANUEVOS TIEMPOS,
NUEVOS LDERES, NUEVAS PERSPECTIVAS
PRCTICA NRO. 2
MICROSCOPA
1. OBJETIVOS:
1. Conocer e identificar las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas
funciones.
2. Aprender a manejar
2. FUNDAMENTO TERICO:
El microscopio es un instrumento ptico que aumenta la imagen de los objetos. En los ltimos tres
siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biolgicas y se ha convertido en el
instrumento bsico para abrir nuevas fronteras en la biologa.
Antoni Van Leeuwenhoek, Hans y Zacharias Jansen fueron tres holandeses que contribuyeron
significativamente al desarrollo de la microscopa a principios del siglo XVII. Leeuwenhoek fue uno
de los primeros en dejar constancia de sus observaciones, describiendo bacterias, protozoarios,
glbulos rojos y espermatozoides.
3. MATERIALES:
Portaobjetos
Microscopio Cubreobjetos
compuesto
Compuesto
Papel delgado
con letras
impresas
Papel milimetrado
4. PROCEDIMIENTO:
1. Ocular: Lente situado cerca del ojo del observador. Consta de un sistema de lentes planas
convexas, dispuestas en un tubo cilndrico de metal, con un diafragma intermedio, ambos lentes
presentan las caras planas hacia el ojo del observador y las caras convexas hacia el objeto. La lente
que va cerca del ojo, de observador se denomina Ocular propiamente dicho y la lente inferior se le
conoce como lente de campo o colectora, el cual recibe la imagen ya formada por el ovejito, siendo
una imagen luminosa y corregida de aberraciones. En la parte lateral o superior del tubo cilndrico
lleva una n numeracin (4X, 5X, 10X, 15X, Etc.), que indica el nmero de aumentos del ocular. El
ocular de la imagen virtual y derecha, y se forma a la altura del diafragma.
2. Objetivos: Un objetivo est constituido por un tubo metlico cilndrico, que lleva en su interior un
sistema de lentes destinados a dar una imagen real e invertida del objeto. La lente de la parte
inferior se denomina Lente Frontal. En la parte lateral del tubo metlico, lleva inscrita una
numeracin (4X, 10X, 40X, 60X, 95X, 100X, Etc.), que indica el nmero de aumentos propios del
objetivo, y la apertura numrica (AN), es decir, la capacidad de reunin de la luz del objetivo, siendo
de 0,30 para el objetivo de 10X, de 0,65 para el de 40X y de 1,30 para el de 100X.
Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de
las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se
examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de
inmersin.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que
producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos
datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromtico, su aumento 40
y su apertura numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de
objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
Escala de reproduccin: Relacin lineal que existe entre el tamao del objeto y su imagen,
por ejemplo, 4:1, 40:1, 65:1, Etc. (donde 1 representa el tamao del objeto y 4, 40,65
representa el aumento de imagen).
Poder definidor: Es la capacidad del objetivo de formar imgenes de contornos ntidos.
Lmite de resolucin: Es la menor distancia que debe existir entre dos objetos para que
puedan visualizarse por separado.
Poder de resolucin: Es la capacidad de mostrar la imagen en sus detalles ms finos. Est
en relacin inversa con el lmite de resolucin.
Poder de penetracin: Es la propiedad de permitir la observacin simultnea de varios
planos del preparado. Es inversamente proporcional a la escala de reproduccin o
aumento.
Distancia Frontal: Es la distancia de la lente frontal al preparado colocado en la platina,
cuando est enfocado. Disminuye cuando aumenta la escala de reproduccin del objetivo.
Pequeos aumento: entre 0,5cm y 3 cm.
Mediano aumento: entre 3 mm y 0,5 cm.
Gran aumento: entre 1 mm y 3 mm.
Inmersin: entre 0,8 mm y 1,20 mm.
Aumento Total: Debemos notar que el ocular tambin tiene un aumento, por lo tanto el
aumento total de la imagen que observamos es el producto entre el aumento del objetivo y
el del ocular. Ejemplo: si tenemos colocado el objetivo cuya escala de reproduccin es 40:1
y nuestro ocular tiene un aumento de 10X, entonces el aumento total ser 40x10=400.
Distancia Focal: Distancia entre el foco y el centro ptico de una lente o la superficie de un
espejo cncavo.
A. Espejo o lmpara de iluminacin: Tiene dos caras: una cncava y otra plana. Goza de
movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin
artificial, y la plana, para iluminacin natural (luz solar). Moderadamente se prescinde del espejo en
la fabricacin de microscopios, ya que estos traen incorporada una lmpara colocada en el eje del
microscopio. Dirige los rayos luminosos hacia el preparado.
D. Portafiltro: Es un dispositivo que permite colocar filtros de diferentes colores, los que facilitan la
observacin.
A. El pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de y
o bien es rectangular.
PIE
B. La columna o brazo: Llamada tambin asa o brazo, e una pieza colocada en la parte posterior del
aparato. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
BRAZO
C. La platina: Es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a
observar. Presenta un orificio en el eje ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a
la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser
giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
PLATINA
D. El tubo ptico: Tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente para evitar las molestias
que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
E. El revlver: Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al
girar el revlver, los objeticos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, la cual
se nota por el ruido de un pin que lo fija.
F. Carril: Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparacin con
movimiento ortogonal de adelante hacia atrs y de derecha a izquierda.
G. El tornillo macromtrico: Cuando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio,
deslizndose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el
enfoque rpido de la preparacin.
TORNILLO
MACROMTRICO
Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus
movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
TORNILLO
MICROMTRICO
Todo instrumento del que se exige extraordinaria precisin ptica y mecnica necesita
tambin ser cuidado con esmero.
Mientras no se utilice el microscopio, deber mantenrsele en una caja armario o cubrirse
por medio de la campana protectora de material plstico.
Cuando se va a utilizar el microscopio, se extrae de dnde lo tenemos guardado, tomndolo
por el brazo.
Se coloca sobre una mesa suficientemente amplia y slida evitando los movimientos
bruscos. Una vez hecho esto se sigue los siguientes pasos.
Segundo. Se debern girar los objetivos por medio del revlver, hasta colocar el ms
pequeo (panormico) directamente sobre la platina. No se debe girar el revlver
sujetando los objetivos, ya que esto produce que se vaya aflojando la rosca, con la siguiente
alteracin al momento de enfocar, por no mantenerse la distancia mecnica.
Sexto. Se gira entonces el tornillo micromtrico, hasta que se obtiene una imagen precisa.
Una vez hecho esto, se recorre toda la preparacin para su identificacin.
Octavo. Si se desea ver el microscopio con el objetivo de inmersin, se coloca entonces una
gota de aceite de cedro, se gira el revlver hasta colocar el objetivo de inmersin y se
procede a observar.
Noveno. Una vez terminada la observacin, se vuelve a girar el revlver hasta colocar el
objetivo panormico sobre la platina. Se apaga el microscopio. Se desciende un poco la
platina. Se retira la preparacin, y se procede a desconectar el microscopio y el
transformador.
6. MANEJO DE MICROSCOPIO:
6. A. Iluminacin:
Para realizar una buena observacin microscpica, lo primero que se debe tener es una
buena iluminacin y la observacin del campo microscpico. Para iluminar se procede de
la siguiente manera:
Verificar que el diafragma del condensador est abierto.
Utilizar el espejo cncavo o encender la lmpara y observar a travs del ocular que el
campo microscpico est totalmente iluminado.
Considerar al tubo ptico a uno o tres centmetros de la platina.
6. B. Preparacin de la muestra:
Utilizando las tijeras, recorte un trozo de papel de alrededor 3x3 mm que incluya una letra
e
Colocar la letra e en el centro de un portaobjeto agregando una gota de agua.
Luego colocar el cubreobjeto sobre la muestra.
Por ltimo, colocar el preparado sobre la platina.
6. C. Enfoque de la muestra:
Con ayuda del tornillo macromtrico, baje lentamente el tubo hasta que el extremo inferior
este aproximadamente a 1 mm de la muestra.
Observar a travs del ocular y eleve lentamente el tubo hasta que la letra se haga visible.
Cuando se observe la imagen, mover el tornillo micromtrico hasta obtener el mejor foco
posible. Un ajuste adicional del diafragma, en muchos casos, mejorar la claridad de la
imagen.
Compare la posicin de la imagen de la letra en el ocular con la posicin de la letra sobre el
portaobjeto.
Dibuje la letra observada. Indicar su posicin y calcular su tamao en nmero de aumentos.
-Puse la letra e sobre el portaobjetos y la puse en la platina, con un objetivo de 4X
observ una e invertida.
6. D. Cambio de objetivo:
-Con un objetivo de 10X, observ, con un rea de campo visual de: 2,83385 mm2 .
Colocar una gota de agua estancada en una laminilla portaobjetos y cubrir con una lmina
cubreobjeto.
Microscopio 1 Microscopio 2
1u X(u)
=
Mag f (M) Y(mm)
Por ejemplo:
Entonces:
1u X(u)
=
10 mm 0,2 mm
1u x 0,2 mm
X(u) =
10 mm
X(u) = 2 u
7. CUESTIONARIO:
La imagen real es aquella que se forma cuando tras pasar por el sistema ptico, los rayos de luz son
convergentes. Esta imagen no la podemos percibir directamente con nuestro sentido de la vista,
pero puede registrarse colocando una pantalla o una placa fotogrfica en el lugar donde convergen
los rayos.
La imagen virtual es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema ptico, los
rayos divergen. Para nuestro sentido de la vista los rayos parecen venir desde un punto por
el que no han pasado realmente. La imagen se percibe en el lugar donde convergen las
prolongaciones de esos rayos divergentes. Es el caso de la imagen formada por un espejo
plano, se ve como si estuviera dentro del espejo, no se puede formar encima de la pantalla
pero puede ser vista cuando se enfoca con los ojos.
La imagen virtual se forma en el sistema ptico del ojo, aqu se recoge los rayos que salen
divergentes del objeto y los hace converger en la retina. El ojo identifica la posicin que
ocupa un objeto en el lugar donde convergen las prolongaciones del haz de los rayos
divergentes que llegan. Estas prolongaciones no coinciden con la posicin real del objeto.
En este punto es donde se forma la imagen virtual del objeto.
7. D. Qu es distancia focal?
La distancia focal o longitud focal de una lente es la distancia entre el centro ptico de
la lente o plano nodal posterior y el foco (o punto focal) cuando enfocamos al infinito.
Para una lente positiva (convergente), la distancia focal es positiva. Se define como la
distancia desde el eje central de la lente hasta donde un haz de luz de rayos
paralelos colimado que atraviesa la lente se enfoca en un nico punto. Para una lente
negativa (divergente), la distancia focal es negativa. Se define como la distancia que hay
desde el eje central de la lente a un punto imaginario del cual parece emerger el haz de luz
colimado que pasa a travs de la lente.
Para un espejo con curvatura esfrica, la distancia focal es igual a la mitad del radio de
curvatura del espejo. La distancia focal es positiva para un espejo cncavo, y negativa para
un espejo convexo.
La distancia focal es igual a la distancia del radio, la frmula es F= R/2.
Qu es apertura numrica?
En ptica general, es un
nmero adimensional que
caracteriza el rango de ngulos
para los cuales el sistema
acepta luz.
En microscopa, la apertura numrica de un sistema ptico tal como una lente queda
definida por la siguiente ecuacin:
El poder de resolucin de un
microscopio define la capacidad
para diferenciar dos objetos
cuando miras un espcimen en
una muestra.
8. CONCLUSIONES:
Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los
rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sita cerca del objeto
que se quiere estudiar.
El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice que la imagen es real
porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La imagen es
observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta sencillamente como una lupa.
El ocular est situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace
divergir los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador parecen proceder de
una gran imagen invertida situada ms all del objetivo. Como los rayos luminosos no
pasan realmente por ese lugar, se dice que la imagen es virtual.
El microscopio es sin duda el elemento ms importante en cualquier laboratorio. Nos
permite, por ejemplo, ver clulas, microorganismos y bacterias, lo cual es imposible de
observar a simple vista.
Con el microscopio hemos descubierto infinidades de cosas que nos han ayudado a
evolucionar, por ejemplo: enfermedades que seran imposible de detectar sin la ayuda del
microscopio tambin hemos descubierto la cura para esas y muchas ms enfermedades
El microscopio ha sido una de las herramientas esenciales para el estudio de las ciencias de
la vida. Abri el ojo humano hacia una nueva dimensin.
9. BIBLIOGRAFA:
[03] http://es.wikipedia.org/wiki/microscopio
[04] http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo2_4.htm
[05] http://teleformacion.edu.aytolacoruna.es/ELVINAF2B8fb2/document/PAU_Fis_Es/PAUOptica
Es.pdf