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Profa. Dra. Maria Luiza B.

Sousa Atta
Faculdade de Farmcia da UFBA
Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas
Laboratrio de Pesquisa em Imunologia - LAPIM
Hipersensibilidade
 Sintomas ou sinais clnicos iniciados por exposio a
um estmulo definido, em dose tolerada por pessoas
sadias.
 WAO (World Allergy Organization), 2004
Hipersensibilidade
 Classificao de Coombs e Gell (1963)
 hipersensibilidade tipo I (imediata)
 hipersensibilidade tipo II (citolticas, citotxicas e
estimuladoras)
 hipersensibilidade tipo III (complexos imunes)
 hipersensibilidade tipo IV (tardia, de imunidade celular)
Hipersensibilidade

Alrgicos

IgE-mediados No-IgE-mediados

No-Atpicos Atpicos Clulas T

Insetos Eosinfilos

Helmintos IgG-mediados

Drogas Outros

Outros

No-alrgicos
Johansson et al., ACI International, 2002
Atopia x Alergia
 Atopia
Tendncia pessoal e/ou familiar, geralmente na
infncia ou adolescncia, para tornar-se sensibilizado e
produzir anticorpos IgE em resposta a exposies
normais para alrgenos, geralmente protenas. Como
consequncia estas pessoas podem desenvolver sintomas
tpicos de asma, rinoconjuntivite, ou eczema/dermatite.
 Alergia
Reao de hipersensibilidade iniciada por
mecanismos imunolgicos especficos.
WAO, 2004.
Fatores que influenciam na atopia
Classificao das doenas alrgicas
 Asma alrgica mediada por IgE.
 Rinite alrgica mediada por IgE.
 Conjuntivite alrgica mediada por IgE.
 Eczema atpico.
 Urticria alrgica.
 Alergia alimentar mediada por IgE.
 Alergia a droga mediada por IgE.
 Alergia a saliva ou veneno de insetos.
 Anafilaxia alrgica mediada por IgE.
WAO, 2004.
A Imunoglobulina E (IgE)

Sousa-Atta,MLB. LAPIM/FFAR
IgE
Propriedades da IgE
 Anticorpo presente na resposta imune Th2
 Peso molecular em torno de 187 kDa
 Termolbil
 Baixa concentrao no soro
 Vida mdia de apenas 48 h no sangue
 Possui receptores de diferentes afinidades sobre clulas
onde se fixa por semanas
 Presente em altas concentraes nas helmintases e
algumas protozooses
 No tem capacidade aglutinante nem ativa Complemento
Receptor de alta afinidade FcRI

Clulas: Mastcitos (tecidos) e Basfilos (sangue)


Mecanismo imune da alergia mediada por IgE
Re-exposio ao alrgeno
1o. Contato com
alrgeno
Ag

Ag Ag
CAP

Apresentao
do alrgeno IgE

Mastcito
LTh2

Citocinas
Ag
Mediadores
IL-4 bioativos
IL-10
IL-13
LB

Alergia
Hipersensibilidade tipo I

Ppula + eritema, leitura em 15 20 minutos


Principais fontes de alrgenos
 caros (D. pteronyssinus, D. Farinae, B. tropicalis)
 Plens
 Plos e epitlios de animais domsticos (gato,
cachorro)
 Fungos (A. alternata, Aspergillus, C. albicans)
 Alimentos (frutos do mar, peixe, nozes, castanhas,
amendoim, ovo, leite, trigo e soja)
 Ltex
 Medicamentos (antibiticos, analgsicos e anestsicos)
Dermatophagoides pteronyssinus
(Der p 1)
Identificao, purificao e isolamento
de alrgenos

www.thermoscientific.com/phadia
Principais caractersticas dos alrgenos
 Antgenos T-dependentes
 Protenas (glicoprotenas)
 Bons imungenos
 Podem ser enzimas proteolticas
 Baixo peso molecular
 Alta solubilidade
 Estabilidade
 Quando haptenos, ligam-se s protenas do organismo
para induzir a resposta imune de IgE
Diagnstico da Alergia
Diagnstico clnico

Testes cutneos

Dosagem de IgE

IgE especfica

Mediadores da inflamao alrgica

Pesquisa de alrgenos ambientais


Provas cutneas
Princpio dos testes alrgicos cutneos
Mastcitos da pele sensibilizados com IgE

Reconhecimento imune do alrgeno


aplicado na derme

Liberao de mediadores
(ex. histamina)

Vasopermeabilidade Vasodilatao, Eritema


Ppula
Prick-Test ou Teste de Puntura
Multitest para alergia
Aspectos relacionados aos testes cutneos para alergia
 Dependem de uma reao  Maior especificidade que os
imune mediada por IgE testes in vitro
fixada nos mastcitos da  Leitura imediata
pele e da integridade
 Baixo custo
funcional destas clulas
 Melhor experincia da
 Interferncia de
clnica mdica
medicamentos e
dermografismo  Resultados no
comparveis quando
 Necessidade de alrgenos
avaliados alrgenos de
bem padronizados devido
diferentes procedncias por
a possibilidade de reaes
diferentes formas de
cruzadas
puntura
 Riscos de reaes adversas
para o paciente
Imunoensaios
Principais testes
 Nvel de IgE srica
 Pesquisa de anticorpos IgE antialrgenos
 Dosagem de mediadores da inflamao alrgica
 Pesquisa e quantificao de alrgenos ambientais
Dosagem de IgE
 MTODO
 Imunoensaio de captura
 (ELISA, ELFA, FIA e CLIA)
Dosagem de IgE por imunoensaio de captura
Fase slida

Ac anti-IgE marcado

IgE
Anti-IgE
IgE srica
 VALORES REFERENCIAIS
 Variam de acordo com a idade e populao avaliada
 Adultos: < 150 UI/mL
 Interferncias de doenas parasitrias
 COMENTRIOS
 Boa reprodutibilidade
 Falta de especificidade diagnstica devido ao aumento
de IgE nas doenas parasitrias, autoimunes e em casos
de mieloma e imunodeficincia
Indicaes clnicas para dosagem de
IgE srica
 Aspergilose bronco-pulmonar (ABPA)
 Avaliao da dermatite atpica
 Imunodeficincia
 Mieloma
 Identificao de risco de desenvolvimento de alergia
 Avaliao dos testes para anticorpos IgE
Imunoensaios para anticorpos IgE
 Finalidade
 Diagnstico laboratorial das alergias
 Estudos epidemiolgicos
 Controle de qualidade na produo de alrgenos
 Imunoensaios comerciais para anticorpos IgE
 ImmunoCAP (EAST, fluorimetria)
 IMMULITE (CLIA)
 Outros
Diferenas entre os imunoensaios
comerciais para anticorpos IgE
 Desenho do teste
 Tipo de alrgeno (purificado ou recombinante)
 Alrgenos disponveis
 Quantificao dos resultados obtidos
 Sensibilidade
 Especificidade
Imunoensaios para anticorpos IgE
 PRINCIPAIS ELEMENTOS
 Qualidade dos alrgenos
 Forma de deteco
 Sistema de calibrao
 Complexidade operacional
 Custo/benefcio
Pesquisa de anticorpos IgE atravs de ensaio
indireto
Fase slida

IgE

alrgeno
Anti-IgE marcado
Pesquisa de anticorpos IgE atravs de ensaio de
captura
Fase slida

IgE

Anti-IgE
Alrgeno
Fatores que interferem na especificidade dos
imunoensaios para anticorpos IgE
 Reconhecimento antignico
(alrgenos maiores e alrgenos menores)
 Natureza qumica do antgeno
 Reao cruzada
(anticorpos de baixa afinidade, eptopos glicosilados)
 Co-sensibilizao
(alergia a antgenos com estruturas comuns)
 Qualidade do alrgeno
(pureza, antigenicidade, concentrao e estabilidade)
Principais aspectos dos testes para
anticorpos IgE
 Possibilidade de falsas reaes positivas
 Resultados positivos com testes cutneos negativos
 Significado clnico dos resultados obtidos
 Resultados mais demorados
 Alto custo e baixo aproveitamento dos kits
Indicaes clnicas dos imunoensaios
para anticorpos IgE
 Diagnstico de alergia em pacientes com testes cutneos
indeterminados
 Dermografismo
 Impossibilidade de suspenso da terapia com anti-
histamnicos ou beta-bloqueadores
 Possibilidade de reaes adversas durante o teste
cutneo
 Diagnstico complementar da ABPA
 Substituio dos testes de provocao no diagnstico da
alergia alimentar
 Pacientes idosos ou crianas muito novas
 Necessidade de resultados quantitativos
Paralelismo entre IgE total e anticorpos
IgE

(Dolen, Allergy 2003)


Ttulos de anticorpos IgE 10 kU/L nos testes in vitro
com alrgenos apresentam boa correlao com a clnica

(Malandain, Imuno-analyse & Biologie spcialise 2003)


A propabilidade de alergia se correlaciona de forma
positiva com os ttulos de anticorpos IgE in vitro

(Ahlstedt, Clin Exp Allergy 2002)


Dosagem da liberao imune de
histamina de basfilos
 Indicao clnica:
 Avaliao do estado alrgico
 Demonstrao de anticorpos IgE
 Substituto dos testes in vitro para ac IgE
 Controle de qualidade de alrgenos
 Alternativa para o teste de pele
 Material: leuccitos lavados ou basfilos isolados
 Tcnica usada: imunoensaio competitivo
Novos testes
 Imunocromatografia
 Citometria de fluxo
Pesquisa de alrgenos ambientais
Identificao e quantificao de alrgenos
no ar e em amostras de poeira domstica
 Mtodos:
 Anlise morfolgica
 Cultivo de caros e fungos
 Imunoensaios qualitativos e quantitativos de
extratos salinos de poeira usando anticorpos
monoclonais
Tratamento das alergias
 Medidas preventivas.
 Uso de anti-histamnicos e imunossupressores.
 Imunoterapia alrgeno-especfica.
 Imunoterapia com anticorpos anti-IgE: Xolair.
 Asma grave
 Ambiente hospitalar
 Alto custo
Bibligrafia:
 IMUNOLOGIA CLNICA NA PRTICA MDICA.
Editor: Jlio C. Voltarelli, - So Paulo : Editora
Atheneu, 2009.
 DIAGNSTICO E TRATAMENTO DAS DOENAS
IMUNOLGICAS. GELLER M, SCHEINBERG M
(Eds). 1 Ed. Elsevier, So Paulo, 2005.
 DIAGNSTICO LABORATORIAL DAS PRINCIPAIS
DOENAS INFECCIOSAS E AUTO-IMUNES.
FERREIRA W & VILA SLM (Eds) 2 Ed, Guanabara-
Koogan, Rio de Janeiro, 2001.