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HISTRIA DA MICROBIOLOGIA

Anton van Leeuwenhoek, em 1674, quando olhava atravs de suas lentes de


microscpio cuidadosamente posicionadas sobre uma gota de gua, descobriu um
mundo de milhes de minsculos animaliculos
Otto Mller ampliou os estudos de van Leeuwenhoek e organizou as bactrias
em gneros e espcies de acordo com os mtodos de classificao de Carolus Linnaeus.
Este foi o comeo da classificao taxonmica dos micrbios.
Friedrich Henle props os critrios para provar que os microrganismos eram
responsveis por causar doenas em seres humanos (a teoria do germe como causador
de doena). Robert Koch e Louis Pasteur confirmaram esta teoria nas dcadas de 1870 e
1880.
A era da quimioterapia comeou em 1910, quando o qumico alemo Paul
Ehrlich descobriu o primeiro agente antibacteriano, um composto eficaz contra a
espiroqueta causadora da sfilis.
A descoberta da penicilina por Alexander Fleming ocorreu em 1928, e foi
seguida pela descoberta da sulfonamida em 1935 por Gerhard Domagk, e pela
descoberta da estreptomicina por Selman Waksman em 1943.

Os micrbios podem ser divididos em 4 grupos gerais: os vrus, as bactrias, os


fungos e os parasitas, cada um apresentando o seu prprio grau de complexidade.

VRUS

Uma partcula vrica = virio= tem uma ou mais molculas de DNA e RNA
includas numa proteo proteica. Esta tambm pode ter outras camadas de
carbohidratos, lpidos e protenas.

Podem existir numa fase extracelular (so viries com poucas enzimas, no se
conseguindo reproduzir fora das clulas vivas) ou numa fase intracelular (com cidos
nucleicos que se replicam e induzem no metabolismo do hospedeiro a capacidade de
sntese de componentes vricos).

ESTRUTURA DO VRUS

Tamanho dos viries:

10 a 300 nm de dimetro

- Nucleocpside com cido nucleico (DNA ou RNA) ancorado a um material


proteico chamado cpside (serve para o empacotamento, proteo do cido nucleico,
transporte do cido nucleico, d especificidade para a adsoro) .

Tipos de cpsides:

Icosadricas parecem esfricas, sendo a forma mais eficiente para entrar num
determinado espao. Tm uma protena de ligao e um nucleocapsdeo.

Bastonete ou Helicoidal so tubos com protenas nas paredes.


Pode ainda existir o esfrico, que possui um invlucro lipdico.

Os vrus tambm podem ter um envelope camada membranosa a rodear a


nucleocpside e ainda caudas.

CIDOS NUCLEICOS

- DNA de cadeia simples fagos

- DNA de cadeia dupla vrus bacterianos

- DNA de cadeia circular

- RNA de cadeia simples plantas e fagos

- RNA de cadeia dupla

ESTRUTURA DO BACTERIFAGO

- so vrus que afetam organismos unicelulares tais como


bactrias

Podem ter DNA ou RNA, sendo os mais conhecidos os de DNA de cadeia dupla.

Dentro deste grupo podemos encontrar:

- Fagos isosadricos sem cauda

- Vrus com caudas contrcteis

- Vrus com caudas no contrcteis

- Fagos filamentosos
CICLO LTICO

Reproduo de fagos com DNA de cadeia dupla

Este ciclo culmina com a lise e libertao de viries.

1. Adsoro reconhecimento e fixao do vrus clula


2. Penetrao insero do genoma viral no interior da clula hospedeira
a. Direta apenas o material gentico do vrus entra, enquanto que a sua
parte proteica fica no exterior
b. Fuso do envelope viral membrana celular, onde o capsdeo se rompe
e o genoma invade a clula
c. Endocitose os recetores qumicos da membrana celular promovem a
fixao do vrus e depois este englobado pelas invaginaes da mesma
3. Sntese o vrus comea a determinar as atividades metablicas da clula e as
enzimas passam a ser empregues na produo de partculas virais
4. Replicao do cido nucleico viral
5. Sntese de capsmeros
6. Montagem produo de componentes do vrus com posterior organizao para
poderem formar novos microrganismos
7. Libertao os vrus formados produzem uma enzima viral = lisozima = que
causa a rutura da clula hospedeira (lise celular). Os vrus libertam-se e infetam
as clulas vizinhas, recomeando o ciclo

FAGO LAMBDA

Parasita a bactria E. coli.


Introduz o seu DNA na bactria e este vai incorporar-se no genoma do hospedeiro.

Durante o ciclo ltico h:

- replicao do DNA viral

- sntese do capsdeo e montagem da partcula viral

- lise celular

- libertao de novos fagos

Durante o ciclo lisognico:

- O fago insere o seu material gentico no genoma bacteriano

- H replicao e diviso celular com posterior crescimento

- No ocorre lise celular

INFEO DE UMA CLULA ANIMAL POR VRUS

As fases associadas so:

1. Adsoro coliso do virio com o recetor da membrana plasmtica


(glicoprotenas)
2. Penetrao entrada na clula hospedeira com remoo do seu capsdeo e
libertao do seu cido nucleico viral
a. Replicao dos cidos nucleicos do vrus
i. Sntese e montagem dos capsdeos virais
ii. Libertao dos vrus maduros
b. Transformao das clulas normais em clulas tumorais
c. Libertao lenta do vrus sem morte celular Infeo Persistente
d. Os vrus no danificam a clula Infeo Latente

VRUS E CANCRO

1. Vrus Epstein-Barr Herpesvrus (DNA)


a. Linfoma de Burritt a pessoa deve ter tido malria para o desenvolver e
um tumor maligno da mandbula e abdmen
b. Carcinoma nasofarngeo
2. Hepatite B hepadnaviridae (DNA)
a. Carcinoma hepatocelular, pode ser integrado no genoma humano
3. Herpes vrus 8
a. Sarcoma de Kaposi
4. Papiloma
a. Cancro cervical e da pele
5. Retrovrus
a. Leucemia

Um vrus tumoral (DNA) infeta a clula hospedeira e vai integrar o seu genoma

- Transcrio

- Formao do mRNA tumoral

- Translao

- Formao de clulas cancerosas

RETROVRUS
1. Transmisso migrao at ao local onde vai infetar
2. Adsoro
3. Injeo
4. Eclipse e retrotranscrio replicam o RNA viral por transcrio reversa, onde a
molcula de DNA de cadeia dupla gerada a partir do RNA por ao da enzima
transcriptase reversa.
5. Encapsulao e gemulao
6. Libertao ciclo ltico ou lisognico

INFEO HIV

Progresso da infeo

1. Infeo primria (aumento de TCD4+) ou infeo HIV aguda


2. Latncia clnica (diminuio de TCD4+)
3. Infees oportunsticas
4. Morte

O vrus do HIV tem:

- Bicamada lipdica

- Protenas estruturais internas (gag) formam a cpside viral

- Transcriptase reversa e integrase (pol) junto do RNA e so responsveis pela sntese


de DNA viral e pela integrao no DNA da clula hospedeira aps a infeo

- Protenas do envelope (env) ajudam na entrada dos viries na clula hospedeira

VRUS INFLUENZA
A superfcie surge coberta por hemaglutininas (protenas responsveis pela entrada do
vrus no hospedeiro) e por neuraminidase (protenas que permitem a libertao dos
novos vrus). Tem um genoma de RNA com 8 segmentos, um envelope onde esto as
protenas e tem RNA polimerase.

REPLICAO

Inicia-se quando uma partcula viral entra em contacto com a clula alvo.

A ligao entre o vrus e a clula possvel devido afinidade que a hemaglutinina


possui com uma mucoprotena que contm resduos de cido silico. Esta ligao pode
ser anulada pela neuraminidase prevenindo que a partcula viral se ligue a clulas
inadequadas.
A ligao da hemaglutinina aos recetores vai induzir a entrada do vrus na clula por
endocitose mediada por recetores, formando um endossoma. Estes vo ser acidificados
no citoplasma, levando clivagem da hemaglutinina.

Todos os segmentos vo para o ncleo onde vo ser transcritos pela RNA


polimerase. O RNA viral copiado em mRNAs virais. Estes vo para o citoplasma e
vo ser traduzidos pelos ribossomas do retculo endoplasmtico e sofrem maturao
(glicosilao) no Complexo de Golgi.

H um empacotamento que termina com a incorporao (Budding) da


membrana plasmtica que ao fechar liberta os vires recm-sintetizados.

Existem vrios anticorpos que so administrados para minimizar a ao destes


vrus, no entanto, estes podem sofrer uma mutao que leva alterao da razo entre a
neuraminidase e a hemaglutinina. Esta altero diminui a eficcia do anticorpo.

OUTROS AGENTES INFECCIOSOS

VIRIDES

Tm um RNA de cadeia simples e circular, no codificam protenas, no possuem


envelope e so dependentes do hospedeiro.

Induzem doenas em plantas.

PRIES

um agente infeccioso formado por protenas.

No tem cidos nucleicos e so responsveis por encefalopatias espongiformes


transmissveis numa grande variedade de mamferos. As doenas no tm cura
conhecida e so fatais.

p.e. scrapies nas ovelhas, doena de Creutzfeldt-Jakob.

BACTRIAS

As bactrias apresentam uma estrutura relativamente simples. Elas so


organismos procariticas organismos simples, unicelulares que no apresentam
membrana nuclear, mitocndria, complexo de Golgi, ou retculo endoplasmtico que
se reproduzem por diviso assexuada. A parede celular bacteriana complexa, podendo
ser: uma parede celular com uma camada espessa de peptidioglicano, nas bactrias
Gram positivas, e uma parede celular com uma camada fina de peptidioglicano e uma
membrana externa sobreposta nas bactrias Gram negativas.
Algumas bactrias no apresentam a parede celular e compensam esta falta
sobrevivendo somente no interior da clula hospedeira ou num ambiente hipertnico.
O tamanho (1 a 20 m ou maior), a forma (esferas, bastes, espirais) e o arranjo
espacial (clulas isoladas, cadeias, aglomerados) das clulas so usados para a
classificao preliminar das bactrias, e as propriedades fenotpicas e genotpicas
formam a base para a classificao definitiva.
A doena pode resultar do efeito txico de produtos bacterianos (p. ex. toxinas)
ou quando a bactria invade stios anatmicos que so normalmente estreis.
Devido degradao do peptidoglicano, a colorao de Gram no um teste
utilizvel para bactrias em privao, ou seja, metabolicamente no ativas (p. ex.,
culturas velhas ou em fase estacionria) ou tratadas por antibiticos. Entre as bactrias
que no podem ser classificadas pela colorao de Gram incluem-se as micobactrias,
que tm uma camada externa lipdica e so diferenciadas por colorao de lcool-
acidorresistncia, e os micoplasmas que so desprovidos de peptidoglicano.

Algumas bactrias de polissacardeos ou protenas chamadas de cpsulas,


tambm chamada de glicoclice. Estes no so necessrios para o crescimento
bacteriano, mas so muito importantes para a sobrevivncia no interior do hospedeiro.
A cpsula antignica e antifagoctica sendo um importante fator de virulncia A
cpsula tambm pode atuar como uma barreira para molculas hidroflicas txicas,
como os detergentes e pode promover a aderncia a outras bactrias ou a superfcies de
tecidos do hospedeiro.
Algumas bactrias podem produzir um biofilme polissacardico sob certas
condies que estabelece uma comunidade bacteriana e as protege de antibiticos e de
mecanismos de defesa do hospedeiro. Outro exemplo de biofilme a placa dentria
produzida por Streptococcus mutans.
Os flagelos so estruturas propulsoras semelhantes a cordas compostas por
subunidades de protenas (flagelina) enroladas em hlice que so ancoradas na
membrana basal atravs de estruturas em gancho e do corpo basal e so orientadas por
potenciais de membrana. As espcies bacterianas podem ter um ou vrios flagelos em
suas superfcies que podem estar ancorados em diferentes partes da clula. Os flagelos
promovem mobilidade bactria, permitindo que a clula se mova (quimiotaxia) em
direo a nutrientes e se afaste de venenos. As fmbrias (pili) (do latim franja) so
estruturas semelhantes a pelos na superfcie externa da bactria; so compostos por
subunidades de protenas (pilina). As fmbrias podem ser diferenciadas dos flagelos por
serem menores em dimetro e comumente no tm estrutura enrolada. As fmbrias
promovem a adeso a outras bactrias ou ao hospedeiro (nomes alternativos so
adesinas, lectinas, evasinas e agressinas). Como um fator de adeso (adesina) a fmbria
um importante fator de virulncia para a colonizao e infeo do trato urinrio por E.
coli, Neisseria gonorrhoeae e por outras bactrias. As extremidades das fmbrias podem
conter protenas (lectinas) que se ligam a acares especficos (p. ex., manose). Pili F
(pili sexual) liga-se a outras bactrias e um tubo para a transferncia de grandes
segmentos de cromossoma bacteriano entre bactrias. Estes pili so codificados por
plasmdio (F).

A exigncia mnima para o crescimento uma fonte de carbono e nitrognio,


uma fonte de energia, gua e vrios ies. O ferro to importante que muitas bactrias
secretam protenas especializadas (siderforos) para concentrar ferro a partir de
solues diludas e, por outro lado, nossos organismos sequestram ferro para reduzir sua
disponibilidade, como um meio de proteo.
O oxignio (gs O2), embora seja essencial para o hospedeiro humano,
realmente um veneno para muitas bactrias. Tais bactrias so consideradas anaerbias
obrigatrias. Outros organismos como Mycobacterium tuberculosis, que causam a
tuberculose, exigem a presena de oxignio molecular para seu metabolismo e
crescimento e so considerados aerbios obrigatrios. A maioria das bactrias, no
entanto, cresce tanto na presena como ausncia de oxignio. Estas bactrias so
denominadas anaerbias facultativas. As bactrias que dependem exclusivamente de
substncias qumicas inorgnicas como suas fontes de energia e de carbono (CO2) so
consideradas autotrficas (litotrficas), enquanto muitas bactrias e animais que exigem
fontes de carbono orgnicas so considerados heterotrficos (organotrficos).
O processo de quebra de substrato e converso em energia utilizvel conhecido
como catabolismo. A energia produzida pode, ento, ser utilizada na sntese de
componentes celulares (parede celular, protenas, cidos graxos e cidos nucleicos), um
processo conhecido como anabolismo. Estes dois processos, em conjunto, que so
interrelacionados e estreitamente integrados, so considerados como o metabolismo
intermedirio.
As bactrias utilizam trs principais vias de catabolismo da glicose. A mais
comum entre estas a glicoltica ou via de Embden-Mey erhof-Parnas (EMP), atravs
das quais h converso de glicose em piruvato. Estas reaes que ocorrem tanto em
condies aerbicas quanto anaerbicas comeam com a ativao da glicose para a
formao de glicose-6-fosfato. Esta reao, assim como a terceira reao da srie, na
qual a frutose-6-fosfato convertida em frutose-1,6-difosfato, exige 1 mol de ATP por
mol de glicose e representa um investimento inicial das reservas de energia da clula.
Na presena de oxignio, o cido pirvico produzido pela gliclise e a partir do
metabolismo de outros substratos pode ser completamente oxidado (queima controlada)
a gua e CO2, utilizando o ciclo de cidos tricarboxlicos (ATC), que resulta na
produo de energia adicional.

FUNGOS

So organismos eucariticos, heterotrficos e geralmente multicelulares.


Podemos encontr-los nas superfcies dos alimentos, formando colnias
algodonosas (semelhantes a algodo) e coloridas.
So formados por filamentos microscpicos e ramificados hifas. Um conjunto
destas forma um miclio.
Os fungos so quimio-organo-heterotrficos, porque precisam de matria orgnica
proveniente dos alimentos, para obterem os seus nutrientes.
A maioria vive no solo, alimentando-se de cadveres de animais, plantas e outros
seres vivos. Como este seu comportamento causa o apodrecimento de muitos materiais,
so chamados de saprofgicos.
Algumas espcies so parasitas, outras vivem em associaes com outros
microrganismos, trocando benefcios.
Na sua parede celular, existem substncias quitinosas (quitina e celulose) e clulas
com organelos membranares (mitocndrias, Complexo de Golgi, vacolo).
H clulas mveis em todos os estdios do ciclo de vida.
A reserva energtica feita sob a forma de glicognio. Crescem melhor em
ambientes onde o pH muito cido e quase todos possuem a forma aerbia. Algumas
leveduras so anaerbias facultativas outras anaerbias obrigatrias.
So resistentes presso osmtica.
Necessitam de uma quantidade menor de azoto que as bactrias, para crescerem o
mesmo e conseguem metabolizar glcidos complexos.

Podem ser:
Decompositores: obtm os alimentos por decomposio da matria orgnica,
podendo atuar como saprfagos.
Parasitas: quando se alimentam de substncias retiradas do corpo de organismos
vivos, nos quais se instalam, prejudicando-os.
Mutualsticos: relao em que ambos se beneficiam. Alguns vivem associados a
razes de plantas, formando micorrizas (p.e. lquenes clula alga + hifa de um fungo).
Elas absorvem gua do solo, degradam a matria orgnica e absorvem os nutrientes
libertados, transferindo parte deles para a planta, que cresce mais sadia. Esta cede ao
fungo acares e aminocidos.
Predadores: fungos mais especializados, capturando nemtodes e usando-os como
alimento.

Tipos de Reproduo:

1) Assexuada
Corresponde fase imperfeita ou anamrfica dos fungos.
- Fragmentao do miclio, gemulao, cissiparidade, produo de esporos
assexuais e sexuais.
Tipos de esporoso sexuais:
- Ascomicetes
- Basidiomicetes
- Zigomicetes bolor do po
-Deuteromicetes fungos imperfeitos: hifas
septadas, no tm esporos sexuais. (P de atleta: Aspergillus, Penicillium)
- No existe a fuso de ncleos, apenas muitas mitoses

2) Sexuada
Corresponde fase perfeita ou teleomrfica dos fungos.
Aumenta a variabilidade gentica.
H 3 processos:
Plasmogamia fuso de protoplasmas devido anastomose de 2 clulas
Cariogamia fuso de 2 ncleos haplides (n) e compatveis formando um
ncleo diplide (2n)
Meiose ncleo 2n sofre diviso reducional aps a cariogamia para formar
ncleos n
Diversidade Morfolgica:
1) Unicelulares leveduras
Clulas ovais ou esfricas ( 1 10 m)
Reproduo por brotamento ou cissiparidade
Crescimento mais rpido, formando colnias cremosas ou membranosas
No possuem hifas areas
Nalgumas condies as clulas em reproduo mantm-se ligadas clula
me (pseudo-hifas)

2) Filamentosos bolores
Multicelulares com estruturas tubulares (hifas com 2 10 m) que formam
o miclio.
Hifas contnuas (cenocticas ou asseptadas) ou com divises transversais
(hifas septadas).
Esporos sexuados em zigsporos.
P.e. Mucor, Rhizopus

3) Dimrficos ( depende da temperatura de crescimento)


Nalgumas condies tm uma fase leveduriforme (37C, alta tenso de
CO2) fazendo uma reproduo por gemulao, noutras tm uma fase
filamentosa (25C)produzindo hifas areas e vegetativas.

Basidiomicetes (cogumelos)
- Considerada a classe dos fungos superiores tal como os ascomicetes;
- A estrutura somtica miceliana;
- Miclio bem desenvolvido, as hifas podem agregar-se e formar
cordes rizomorfas.
- O miclio septado com septos dolispricos (no existe continuidade
protoplasmtica ao longo de todo o miclio);
- Existem espcies com estrutura somtica leveduriforme;
- O ciclo assexual leva produo de condios, artrsporos ou
basidisporos.
- O ciclo sexual conduz formao de uma clula onde ocorre a fuso
de dois ncleos haplides cariogamia - e a meiose com formao de basidisporos,
em geral em numero de 4, que ficam exteriores clula;
- Ausncia de diferenciao de rgos sexuais. A plasmogamia ocorre
entre hifas vegetativas;
- Podem ser saprbios ou parasitas. A maior parte so parasitas de
plantas;
- Grande importncia econmica (ex: cogumelos): espcies
comestveis, espcies parasitas de rvores em p e de madeiras.
Ex: Agaricus campestris.
Puccinia graminis (fungo das videiras).

Deuteromycetes
- Tambm so fungos superiores, no se conhece o ciclo sexual;
- Recebem a designao especfica baseada na sua forma assexual,
principalmente pelo tipo de condios que formam.
Ex: Algumas espcies de Penicillium e Aspergillus, Candida albicans.

Ascomycetes:
- So os chamados fungos de bolsa. Tm as hifas septadas, esporos
sexuais em ascsporos.
- P.e. Neurospora, Saccharomyces

Fungos como alimentos Das espcies comestveis, algumas dificilmente se


confundem com as txicas. Outras so facilmente confundveis.

Fungos em alimentos
- A aco dos fungos nos alimentos principalmente fermentadora.
- As espcies utilizadas, ou as variedades, dependem do tipo de aco
pretendida dos microrganismos e do sabor que se pretenda dar ao alimento.
- Outros alimentos em cuja preparao intervm fungos:
Sake aguardente de arroz;
Shyu molho de soja.

Toxicidade dos fungos


- Os princpios txicos produzidos so de natureza diversa, conforme a espcie:
alcalides, resinas, pptidos.
- As espcies mais perigosas so amanitas (suas toxinas so ciclopptidos)

Fungos e metabolitos txicos


- H imensos fungos que produzem micotoxinas.

Fungos como agentes patognicos


- A maior parte existe na natureza como saprfito.

Penicillium Miclio ramificado. Esporos do colorao cultura.

Aspergillus Agentes de contaminao. Miclio eleva-se do substrato.

Ciclo de vida Fungo


Ciclo de vida Rhizopus

Ciclo de vida Ascomycota


Ciclo de vida Basidiomycota

Ciclo de Vida Saccharomyces cerevisiae


PARASITAS

Os parasitas so os micrbios mais complexos. Embora todos os parasitas sejam


classificados como eucariticos, alguns so unicelulares e outros multicelulares
Eles variam em tamanho desde protozorios minsculos medindo de 1 a 2 m
em dimetro (o tamanho de muitas bactrias) a tnias que podem medir mais de 10
metros de comprimento e artrpodes.
Os seus ciclos de vida so igualmente complexos, com alguns parasitas a
estabelecer uma relao permanente com os seres humanos e outros passando por uma
srie de estgios de desenvolvimento at se tornarem hospedeiros animais.

Todos os seres formados por clulas eucariticas so mais complexos e maiores. O seu
genoma maior e possuem mecanismos mais elaborados de regulao da expresso
gnica.

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