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2017
UNIVERSIDAD PRIVADA ARZOBISPO LOAYZA
INDICE
Introduccin4
Laboratorio...................5-12
Amortiguadoras. 13-16
Anexos..27
BIOQUIMICA 2
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BIOQUIMICA 3
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INTRODUCCION
En esta guia de laboratorio, pretende que los estudiantes tomen contacto con el
laboratorio de bioqumica y para cada procedimiento se aplique el reglamento y las
normas generales de bioseguridad. Se le describir el material de laboratorio y se har
especial hincapi en la importancia del correcto uso de las unidades de masa, volumen y
concentracin, as como del cuidado, correcta utilizacin y limpieza del material utilizado
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PRACTICA 1
BIOSEGURIDAD Y RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS
1-INTRODUCCIN:
El Laboratorio de Qumica es un lugar donde se desarrollan las prcticas elegidas por el docente
para confirmar y reafirmar los conocimientos tericos impartidos en el aula.
Por lo tanto el estudiante deber acatar el reglamento del Laboratorio y estar atento a las
explicaciones del docente.
Cada una de las reacciones efectuadas debe dominarse no slo en la parte prctica, sino en el
conocimiento de sus productos finales, ya que con esto se pueden tomar decisiones para
conservar la limpieza del aire, el agua y el suelo, tratando de utilizar hasta donde sea posible,
procesos tecnolgicos no contaminantes y en caso contrario dominar las tcnicas adecuadas
para el manejo de residuos txicos peligrosos.
2-OBJETIVOS
Genera y registra datos e informacin a partir de la experiencia de cada instrumento utilizado en
las prcticas de Laboratorio.
Trabaja con cautela y normar el comportamiento en el Laboratorio por las exigencias de la
Seguridad personal y del grupo
Para reducir riesgos a la salud o a la integridad corporal, deben acatarse reglas de seguridad, por
lo general sencillas, cuando se realiza trabajo prctico de laboratorio. A menudo se dice que los
accidentes no ocurren por s solos, son provocados!. Las causas son generalmente por
ignorancia, por cansancio, por descuido, por uso de equipo y materiales defectuosos o
deteriorados, ms an por voluntad propia de tomar riesgos o por realizar bromas sin evaluar las
consecuencias de las mismas.
Para minimizar riesgos y prevenir accidentes es preciso conocer sus causas y estar alerta de
reconocer situaciones de riesgo susceptibles de desencadenar accidentes que no solo pueden
afectar al alumno, sino a todos los que trabajan en el laboratorio.
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EXPERIENCIA:
Desconocimiento de las formas de manejar las sustancias qumicas (reactivos), los materiales
y el equipo con el que se trabaja.
Imprudencia en el manejo de equipo, reactivos y materiales.
Descuido o falta de precaucin al efectuar las prcticas.
Portar bata de algodn (blanca) de talla apropiada con mangas largas y abotonadas durante
todo el tiempo que se trabaje en el laboratorio.
Portar lentes de seguridad para proporcionar proteccin en los ojos.
Mascarilla y guantes para evitar contaminarse con sustancias txicas.
Zapato de piso normal o tenis
MATERIAL DE VIDRIO
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Los pedazos de vidrio roto, particularmente los de pequeo tamao nunca deben recogerse con
la mano. Debe usarse cepillo o recogedor y una aspiradora.
Conocer las propiedades fsicas, qumicas y toxicolgicas de los reactivos qumicos con los que
se va a trabajar.
Nunca deben tomarse alimentos ni tampoco se debe fumar en el laboratorio esto reduce el
riesgo de ingestin o inhalacin accidental de las sustancias qumicas.
No deben probarse sustancias qumicas o disoluciones ni tampoco inhalar vapores sobre todo
si no se tiene informacin sobre las sustancias.
Es necesario limpiar inmediatamente cualquier sustancia tirada o lquido derramado. Los
cidos y bases derramados deben neutralizarse con bicarbonato de sodio antes de limpiar el
rea afectada. Para efectuar la limpieza deben usarse guantes de plstico.
La transferencia de lquidos que emiten vapores txicos o corrosivos como el HCl y HNO3 o
NH4OH deben efectuarse bajo la campana.
Las reacciones qumicas que desprenden vapores o que involucran disolventes voltiles,
inflamables o txicas tambin deben realizarse bajo la campana.
La transferencia de volmenes precisos de soluciones debe efectuarse con pipetas
volumtricas previstas de una perilla de succin o de una propipeta. Nunca debe pipetearse por
aspiracin directa con la boca.
Las diluciones de cidos concentrados siempre deben efectuarse aadiendo el cido
concentrado al agua y nunca a la inversa.
Las soluciones que se preparan, siempre deben etiquetarse correctamente en el momento de
su preparacin.
Antes de utilizar solventes inflamables (alcohol, ter, acetona, etc.) es preciso verificar que no
se encuentren mecheros encendidos en la cercana.
En caso de que alguna sustancia qumica entre en contacto con la piel (manos, cara y sobre
todo con los ojos), debe lavarse la zona afectada con abundante agua durante 15 minutos por
lo menos.
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NaOH, KOH, NH4OH Los hidrxidos de Sodio y Potasio slidos y las soluciones
concentradas de NH4OH pueden lesionar la piel y las
mucosas.
Na2O2, BaO2, H2O2 Los perxidos de Sodio y Bario pueden causar incendio o
explosin al humedecerse en contacto con papel y materiales
orgnicos. El perxido de Hidrgeno se descompone con
violencia en agua y oxgeno. En contacto con la piel puede
causar ampollas.
El perxido de Hidrgeno o agua oxigenada que se emplea
como antisptico es una solucin muy diluida que no es
peligrosa si se manipula en forma adecuada.
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3-MATERIALES DE LABORATORIO
PIPETA: .
TUBO DE ENSAYO: .
VASO DE PRECIPITADOS: .
ESPTULA: .
MATRAZ ERLENMEYER: .
PROBETA: .
CAJA DE PETRI. .
PIPETA. .
4-PROCEDIMIENTO
Llegue a conclusiones generales en base a lo expuesto por cada uno de los equipos.
5-RESULATDOS
6-CUESTIONARIO
1.- Explica las medidas de bioseguridad en el laboratorio.
3.- Grafica o dibuja cada uno de los procedimientos utilizados en la prctica de laboratorio.
7- EVALUACIN
Mencione cuales son las reglas de Seguridad dentro de un laboratorio?
Cmo recomendaras que estas reglas fueran reconocidas y recordadas por las personas
que realizan trabajos incluyndote a ti?
Cul es tu opinin acerca del uso de ropa adecuada y proteccin a los ojos dentro del
laboratorio?
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PRACTICA 2
DETERMINACION DEL PH Y PREPARACION DE SOLUCIONES
AMORTIGUADORAS
1-INTRODUCCION
El pH: Los bioqumicos usan el pH para indicar de forma precisa la acidez o basicidad de una
sustancia. Normalmente oscila entre los valores de 0 (ms cido) y 14 (ms bsico).
INDICADOR DE pH: Los indicadores son colorantes orgnicos, que cambian de color segn estn
en presencia de una sustancia cida, o bsica.
Figura 1. Escala de colores que toma el extracto de la col morada: en presencia de cidos (1-6) y bases (8-14).
Los cidos y bases son los dos tipos de sustancias ms comunes en el laboratorio y en el mundo
Cotidiano. A finales del siglo XIX, Arrhenius formul la primera definicin:
CIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+). BASE: Toda sustancia capaz de ceder oxhidrilos
(OH-).
En 1923 Brnsted-Lowry, propusieron una definicin ms amplia:
CIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+).BASE: Toda sustancia capaz de aceptar protones
(H+).
Considerando que el agua, H2O es el solvente por excelencia y puede actuar como aceptor o dador de
H+. La reaccin de autoionizacin correspondiente es: H2O + H2O H3O+ + OH
Una manera de evaluar la acidez de una sustancia es por el conocimiento de la [H+], pero suelen ser
cantidades muy pequeas y poco cmodas de manejar, una medida ms prctica, es la basada en la
definicin de pH del qumico Dans Soren Sorensen en 1909, cuando realizaba un trabajo para el control
de calidad de la elaboracin de la cerveza y es usada actualmente en todos los mbitos de la Ciencia,
+
medicina e ingeniera. pH = -log [H ]
Se establece una escala de acidez o escala de pH, en base al producto inico del H2O a 25 C, (Kw= 1x
10-14 ), que vara en el intervalo 0 y 14. Soluciones cidas tienen ms H +, por ello pH< 7. Las
soluciones bsicas tienen ms OH-, el pH >7 y en las soluciones neutras [H+] = [OH-], pH = 7
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2-OBJETIVOS
3- MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serolgica 2mL y 5mL
4. Bagueta
5. Esptula
6. Beacker 250mL
7. Balanza analtica
8. Trpode
9. Rejilla de asbesto
10. Pinza de madera
Reactivos:
1. Sol. de NaOH 0,01M
2. Sol. de HCl 0,01M
3. Sol. de CH3COOH 0,01M
4. Sol. de NH4OH 0,1 M
5. Sol. de NH4Cl 0,1 M
4- PROCEDIMENTO
EXPERIMENTO 1: Determinacin de pH de diferentes sustancias usando Papel
indicador:
a-Tomar una muestra de cada sustancia (Limn, Vinagre, Refresco-frutio preparado, Leche,
Crema dental, Jugo de naranja, jugo de toronja, Agua expuesta al aire con 3 das de
anticipacin, leche de magnesia, limpiador domstico, clorox, champ, jabn lquido, agua
oxigenada, alcohol, crema de manos, perfume, desodorante, jabn de loza, jabn de tocador),
si es lquida con un gotero, si es slida, humedecerla un poco con agua en un plato
desechable, usando la microesptula.
b-Tomar pedacitos de papel indicador (recortar con tijeras limpias y no tocar con los dedos ni
los guantes sucios ni hmedos) con las pinzas el depilador, y colocar sobre la muestra por
uno de los extremos el papel y registrar la coloracin que arroja cada muestra, registrar datos
en una tabla. Compararlos con las tablas de pH llevadas a clase (laminadas)
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NaOH 0,01 M
HCl 0,01 M
CH3COOH 0,1 M
NH4OH 0,1 M
NH4Cl 0,1 M
5- RESULTADOS
Registrar los resultados en una tabla siguiente:
Vinagre
Refresco
Leche
Sailiva
Crema Dental
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6-CONCLUSIONES
7-CUESTIONARIO
1-Explique por qu es importante conocer el pH de las sustancias que utilizamos en
nuestro hogar.
2-Consulte otros tipos de indicadores y su rango de coloracin en medio cido y
bsico y dibuje la escala para cada uno.
3-Realice las ecuaciones qumicas para cada una de las experiencias realizadas
4-cul es la importancia del sistema buffer en el organismo
8- REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
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PRCTICA N 3
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
1-INTRODUCCION
Los carbohidratos, glcidos o azcares constituyen una de las ms importantes clases de
molculas constituyentes de los organismos. Los carbohidratos son los compuestos orgnicos
ms abundantes de la biosfera y a su vez los ms diversos. Normalmente se los encuentra en
las partes estructurales de los vegetales y tambin en los tejidos animales, como glucosa o
glucgeno. Estos sirven como fuente de energa para todas las actividades celulares vitales.
Son complejos terciarios en los cuales el hidrgeno y el oxgeno estn en igual proporcin que
el agua. Los ms comunes son los sacridos, los cuales se dividen tambin en monosacridos
o azcares simples, disacridos y polisacridos. Los carbohidratos son derivados aldehdicos o
cetnicos de alcoholes polioxidrilados y por lo tanto tienen las propiedades caractersticas de
esos grupos como son la formacin de oxina e hidrazonas. Existen diferentes tipos de
reacciones qumicas que sirven para determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos
(monosacridos, disacridos y polisacridos)
La glucosa se usa mucho como alimento y como agente edulcorante, industrialmente se fabrica
en grandes cantidades por hidrlisis de almidn. La frmula estructural de la sacarosa no tiene
grupos hidroxilos glucsidos libres, ni contiene grupo aldehdico libre ni potencial, ya que las
dos unidades de monosacridos estn unidos por los hidroxilos glucsidicos, ello trae como
consecuencia que la sacarosa no presente mutarrotacin, no sea reductora y no forme
osazona.
2-OBJETIVOS
1. Realiza las reacciones de caracterizacin de azucares
2. Explica y describe qumicamente las reacciones
3- MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIALES
Tubos de ensayo (18) Gradilla Pinza para tubo de ensayo Pipetas (3 de 1mL, 2 de 5mL)
Vaso de precipitado (2 de 50mL) Vidrio de reloj Trpode Mechero Bunsen o de alcohol
Esptula Agitador de vidrio Rejilla con asbesto Agua destilada
REACTIVOS
Reactivo de Fehling A y B Reactivo De Lugol Reactivo de Seliwanoff Reactivo de
Molish Reactivo de Bial HCl concentrado y diludo Bicarbonato. Sacarosa (azcar
comn) Fructosa (refresco) Lactosa (leche) Almidn (harina). Galactosa, xilosa,
ribosa, maltosa.
4- PROCEDIMEINTO
.4.1. Experiencia: REACCIN DE FEHLING
Tomar la muestra que se quiera analizar (aproximadamente 3 mL) Aadir 1 mL de
Fehling A y 1 mL de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte
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6- CONCLUSIONES:
Escribe tus conclusions sobre la prctica.
7- CUESTIONARIO
1-Por qu razn LOS CARBOHIDRATOS tienen diferentes resultados con los reactivos?
Explique.
2-Los polisacridos y monosacridos utilizan un mismo reactivo? Qu cambios se observa
con cada una de stas molculas? Explique.
3-Explique las propiedades de cada uno de los reactivos utilizados en la prctica de
laboratorio.
4- Realice las ecuaciones qumicas para cada una de las experiencias realizadas
5-Indique otros mtodos cualitativos para identificacin de glucosa y sacarosa
8-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
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PRCTICA N 4
RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
1-INTRODUCION
Aminocidos: En la estructura general de los aminocidos se observa que tienen en
comn un tomo de carbono central (alfa) al que estn unidos covalentemente un
cido carboxlico, un grupo amino y un tomo de hidrgeno. Adems de ello, al tomo
de carbono alfa se une una cadena lateral, designada R, que es diferente para cada
uno de los 20 aminocidos comunes.
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2- OBJETIVOS:
3- MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta 2mL y 5mL
4. Becker 250mL y 500mL
5. Esptula
6. Bagueta
Reactivos:
1. HCl Q.P
2. Hidrxido de sodio 40%, 10%
3. Sol. Sulfato de amonio 75%
4. Acetona
5. Sol. Albumina 1%
6. Sol. De ferrocinaruro de potasio
7. Fenilalanina Q.P
8. Tiroxina Q.P
9. Triptofano Q.P
10. cido sulfrico Q.P
11. Rvo. De Biuret
12. Rvo. De ninhidrina
4- PROCEDIMIENTO
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B. Determinacin de protenas:
Reaccin de Biuret:
5- RESULTADOS
Se determin el anlisis cualitativo de aminocidos de la albmina
6-CONCLUSIONES
7- CUESTIONARIO
1. Realice las ecuaciones qumicas de cada una de las experiencias
2. Indique otras tcnicas por las cuales se pueda identificar aminocidos o protenas
8-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
1. Lock de Ugaz O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el estudio de productos
Naturales
2. Dominnguez, X. A. Mtodos de Investigacin Fitoqumica. Editorial Limusa, Mxico
D.F. 1973
3. Gibaja O. S. Gua para el anlisis de los compuestos del carbono Lima Per 1977
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PRACTICA N 5
5.2. Competencia.
Determina colesterol en el suero sanguneo. Concientiza el riesgo
que genera concentraciones elevadas de colesterol (ateroma) o bajas
(afeccin heptica o tiroidea).
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5.3.2. Reactivos.
5.3.3. Procedimiento.
a. En una gradilla disponer tres tubos de prueba de 13 x 100mm,
rotularlos
con P (problema), S (Standard) y B (blanco) luego proceder como
sigue
b. Reposo x 20 minutos.
REACTIVOS P S B
Agua destilada - - 10 ul
5.5. Cuestionario.
a. Describa como se realiza la biosntesis del colesterol.
b. Qu ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?
c. Mencione cuatro mtodos para la determinacin de colesterol en
sangre, indicando cul? de ellos es el ms exacto y por qu. y
Porqu?
d. Mencione lo requisitos indispensables que debe observar una
persona, para que su determinacin de colesterol sea real.
e. Explicite la biosntesis de colesterol a partir de la ingesta de
carbohidratos.
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PRACTICA N 6
5.2. Competencia.
Determina colesterol en el suero sanguneo. Concientiza el riesgo que
genera concentraciones elevadas de colesterol (ateroma) o bajas (afeccin
heptica o tiroidea).
5.3.2. Reactivos.
Tampon fodfsto 0.1 M pH 6.5
Almidon 1%
HCl 0.5N
Agua destilada
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5.3.3. Procedimiento.
1 2 3
Colocar nuevamente los tubos en bao mara y sacar alcuotas de 0.5 mL. de cada
uno de los tubos
a los 5, 10, 15 y 20 minutos, y adicionarlos a los tubos previamente preparados que
contienen 2.0 mL
de cido clorhdrico 0.05 N, de acuerdo al siguiente esquema:
Tubo N 1 2 3
5.4. Resultados.
Se determin la accin enzimtica sobre el almidon
5.5. Cuestionario.
Describa como se realiza la hidrolisis del almidn mediante la enzima.
Qu ocurre cuando hay deficiencia de esta enzima?
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ANEXOS
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