1
Universidad Central. Corts Carlos Alejandro, Larrotta Casallas Mnica Natalia, Murcia Alvarado
Fabian. Procesos de identificacin, separacin y cuantificacin de estructuras y compuestos relacionados
con la fotosntesis.
1
PROCESOS DE IDENTIFICACIN,
SEPARACIN Y CUANTIFICACIN
DE ESTRUCTURAS Y COMPUESTOS
RELACIONADOS CON LA
FOTOSNTESIS
Corts Carlos. Larrotta Natalia y Murcia Fabian.
ccortesc5@ucentral.edu.co,
mlarrottac1@ucentral.edu.co,fmurciaa@ucentral.edu.co
Universidad Central
Resumen: En el presente artculo desarrollaremos el
laboratorio donde se realizaron tres procedimientos,
primero la descomposicin de la clorofila utilizando
mtodos cromatogrficos simples; luego se
demostr que la Luz y el CO2 son factores
limitantes a la hora de hablar de la fotosntesis, y
por ltimo se realiz la observacin en la
distribucin del almidn en una hoja de geranio,
este ltimo procedimiento se hizo distingui con la
ayuda del microscopio.
Palabras Clave Intensidad de Luz, Onda de Luz
Almidn, Clorofila,Temperatura.
I. INTRODUCCIN
La fotosntesis es el proceso mediante el cual se
producen sustancias orgnicas a partir de dixido de
carbono y agua en presencia de clorofila, captadora
de energa solar. Este proceso se describi por los
cientficos hace ms de 200 aos.
Esto, se realiza en las hojas y en los tallos verdes
de la planta, en unas estructuras especiales de las
clulas vegetales: los cloroplastos. Estos organelos
contienen la clorofila, un pigmento verde que es
sensible a la energa luminosa y la usa de manera
eficiente para poner en marcha la fotosntesis.
Para demostrar el proceso de la fotosntesis,
dentro de la prctica de laboratorio se desarrollaron
1
diferentes mtodos los cuales nos permitieron ver
cmo la luz y el CO2 son factores limitantes,
dependiendo de los diferentes procesos a los cuales
sometimos las hojas que utilizamos en el
laboratorio, en este caso, las hojas de espinaca,
hojas de geranio y ptalos de geranio.
Los procesos utilizados en el laboratorio fueron
tres, la cromatografa de reparto en la cual se us
papel filtro, acetona al 10% y disolvente, con cada
una de las hojas y los ptalos. El segundo proceso,
fue poner pequeos crculos de espinaca en agua
destilada con bicarbonato, para determinar cmo el
CO2 interacta en la fotosntesis. El tercer proceso
determina la distribucin del almidn-cloroplastos a
travs de diferentes pasos que, nos permiten
determinar cmo se distribuyen los grnulos de
almidn a lo largo de la hoja.
De acuerdo a lo anterior, nos permite ver cmo
con diferentes procesos se puede determinar como
es la fotosntesis, en base a la observacin detallada
de la cromatografa, la observacin por microscopio
y por medio del proceso de la luz.
II. METODOLOGA
Para la realizacin del laboratorio se tuvieron en
cuenta una serie de materiales que fueron dos
Beakers de 200ml, una caja de Petri, una jeringa un
sacabocado o perforadora un macerador y mortero,
papel filtro, un bombillo de 100 watts, y por ltimo
un microscopio. Se nos pidi las hojas de geranio
que debamos traer envueltas en papel peridico
durante un dia en la oscuridad, para colocarlas en
alcohol hirviendo esto para que las hojas se
volvieran permeables al lugol luego nos las
devolvi despus de una hora, pasndolas a una caja
Petri aadimos gotas de lugol para la observacin
de la distribucin del almidn, se recort una
pequea porcin de la hoja para que con ayuda del
microscopio observaremos dicha distribucin.
 2
Universidad Central. Corts Carlos Alejandro, Larrotta Casallas Mnica Natalia, Murcia Alvarado
Fabian. Procesos de identificacin, separacin y cuantificacin de estructuras y compuestos relacionados
con la fotosntesis.

Despus sacamos nuestros materiales biolgicos,

los cuales eran: dos hojas de espinaca fresca,
servilletas absorbentes, una rama de geranio con
hojas y flores, de las cuales habamos tomado, dos
hojas del geranio y separado 4 de ellas del mismo
tamao. Entonces tomamos la hoja de papel filtro y
con un lpiz realizamos una lnea recta a dos cm
aproximadamente del borde, ubicamos despus tres
puntos separados entre s por 2.5 cm; en el primer
punto se puso la maceracin con acetona al 10% de
las hojas de espinaca.

Despus tomamos los ptalos de geranio y (Hojas de geranio, hervidas en alcohol)

repetimos el procedimiento anterior, y por ltimo la
combinacin de las dos dejando una pequea III. RESULTADOS
muestra de la maceracin de ellas en el papel filtro
que se demarco por lneas.

En seguida pusimos disolvente en el beaker,

poniendo el papel filtro con las muestras y
vigilamos por 10 minutos la migracin de los
pigmentos. Luego tomamos un sacabocados
sacando 20 crculos pequeos de igual dimetro de
las hojas de espinaca, tomamos 100 ml de agua
destilada con bicarbonato y le colocamos dos
circulitos de espinaca. el resto de sus circulitos los
pusimos en la jeringa, luego tomamos con ella
algunos ml de la solucin carbonatada y se pusieron
al borde con el objetivo de generar un vaco y que
las hojas quedaran sin aire. Cuando los circulitos (papel filtro-proceso de cromatografa)
quedaron sin aire, los colocamos en la solucin de Se puede observar que en la primera lnea donde es
bicarbonato, retirando los crculos que no evacuaron el extracto de las hojas de espinaca la migracin de
el aire. los pigmentos a simple vista fue mayor con un radio
Al instante pusimos el beaker tapado con una de migracin de rf=4.2cm/6.6cm=0.63cm a
caja Petri con agua, para evitar que se sobre comparacin con la segunda lnea que es la de solo
calentara el beaker al estar debajo de la lmpara. Se ptalos de geranio que no tuvo migracin es decir
midieron las burbujas de oxgeno que salieron de su su radio de migracin rf=0 cm y la tercera lnea que
sistema por aproximadamente 10 minutos. es de la combinacin de ptalos de geranio y hojas
de espinaca donde es notorio que tuvo una menor
migracin de los pigmentos con un radio de
migracin menor al primero y mayor al segundo
 3
Universidad Central. Corts Carlos Alejandro, Larrotta Casallas Mnica Natalia, Murcia Alvarado
Fabian. Procesos de identificacin, separacin y cuantificacin de estructuras y compuestos relacionados
con la fotosntesis.

rf=2.7cm/6.6cm=0.40cm.

Comparando con datos sobre los rangos de

absorbancia de estos pigmentos que son para el
verde 520-565 nm y para el violeta 380-430 nm, en
relacin a esto los datos obtenidos en nuestro
laboratorio concuerda con la absorbancia de estos
pigmentos concluyendo que se hizo el
procedimiento de cromatografa de manera exitosa.

(Hoja de espinaca a la luz)

Despus de dejar por una hora la hoja en alcohol
hirviendo para hacer que esta se hiciera
impermeable al lugol, las hojas se volvieron
traslcidas; luego de esto se le aplica lugol y se
espera 5 min para ver si hay algn cambio y
efectivamente retoma un color amarillo oscuro en
algunas partes de la hoja, se toma una pequea
muestra de esta hoja se coloca en el vidrio de
(proceso de fotosntesis)
muestra con la laminilla y a travs del microscopio
Se observa como despus tomar las muestras de las
se observa la distribucin de almidn y un alto
hojas de espinaca y de hacer el procedimiento de
nmero de grnulos de almidn que estn presentes
vaco en la jeringa para quitarles el aire a las
en la muestra.
pequeas muestras de hoja de espinaca estas quedan
en la parte inferior de la solucin, pero despus de
un tiempo al colocar el bombillo sobre la solucin
estas muestras van realizando de nuevo la fase de
fotosntesis y expulsando oxgeno generando que
regresen de nuevo a la parte superior de la solucin
ya que comienzan a flotar con ayuda del oxgeno
realizado en la fotosntesis.

(Hoja de espinaca en la oscuridad)

Se deja por un tiempo de una hora la hoja en
alcohol hirviendo para hacer que esta se hiciera
impermeable al lugol,las hojas se volvieron

Universidad Central. Corts Carlos Alejandro, Larrotta Casallas Mnica Natalia, Murcia Alvarado
Fabian. Procesos de identificacin, separacin y cuantificacin de estructuras y compuestos relacionados
con la fotosntesis.
traslcidas; luego de esto se le aplica lugol y se
espera 5 min para ver si hay algn cambio y
efectivamente retoma un color amarillo oscuro en
algunas partes de la hoja, luego se toma una
pequea muestra de esta hoja, se coloca en el vidrio
de muestra con la laminilla y a travs del
microscopio se observa la distribucin de almidn y
un nmero determinado de grnulos de almidn que
estn presentes en la muestra, siendo en esta menor
que en la primera muestra de la hoja de espinaca
dejada a la luz.
IV. DISCUSIN
Dentro de los resultados obtenidos en el
laboratorio se puede decir que:
En la cromatografa los resultados obtenidos fueron
de acuerdo a la migracin del pigmento de las hojas
de espinaca, de los ptalos y las hojas con ptalos,
las hojas de espinaca obtuvieron la mayor
migracin, los ptalos no tuvieron migracin y la
combinacin de ptalos con hojas obtuvo una
menor a la de las hojas de espinaca. Todos estos
resultados comparados con los datos tericos tienen
coherencia, as que se puede decir que obtuvimos
una cromatografa exitosa.
En la segunda parte del laboratorio, en donde se
observa el proceso de la fotosintesis a travs de los
circulos de hojas de espinaca, podemos decir que el
proceso fue exitoso aunque algo demorado, debido
a que en primer el lugar el proceso de vaco en la
jeringa se tuvo que realizar dos veces, ya que los
crculos no quedaron sin oxgeno en el primer
intento. En el segundo intento los crculos quedaron
sin oxgeno, de esta manera se iban al fondo del
agua destilada con bicarbonato, despus de cinco
minutos al ponerlo debajo del bombillo pudimos
comprobar el proceso de la fotosintesis, ya que los
crculos comenzaban a flotar nuevamente.
4
Para la tercera y ltima parte, con la hojas de
geranios hervidas en alcochol, pudimos observar
por medio del microscopio los grnulos de almidn
y la diferencia entre una hoja que se encontraba a la
luz y otra en la oscuridad, as que para demostrar
esto, la hoja que se encontraba en la luz tena un
color amarillo oscuro a lo largo de la hoja, el
nmero de grnulos de almidn es alto. Para la otra
hoja, obtuvimos que la distribucin de grnulos de
almidn es menor a la anterior hoja.
A partir de lo anteriormente mencionado, pudimos
comprobar los factores limitantes de la fotosintesis
como lo son la luz y el CO2, en relacin a los
resultados obtenidos, ya que en la primera parte se
demostr que a partir de la migracin de los
pigmentos el proceso que los cloroplastos realizan
en las hojas y ptalos de la planta; la demostracin
de cmo estos factores limitantes intervienen en la
fotosintesis fue en la segunda parte del experimento
en la cual se observ que el CO2 y la luz cambiaron
las condiciones de los circuitos de hojas de
espinaca, ya que sin CO2 y sin luz estos no flotaban
y se encontraban en el fondo del beaker pero con la
presencia de la luz el proceso de la fotosintesis se
evidencio, ya que los crculos empezaron a flotar
despus de un tiempo, y por ltimo, pudimos ver
que el nmero de los grnulos de almidn
cambiaba de acuerdo a las condiciones de la luz en
la que la hoja se encontraba previamente a ser
hervida.
V. REFERENCIAS
[1] Alberts, B y Johnson A. 2002. Biologa
Molecular de la Clula. 5ta edicin. Editorial
Omega.
[2] Curtis, H y Barnes, N S. 1993. Biologa. 5ta
edicin. Editorial mdica. Panamericana S.A.
[3] Lodish et al. 2005. Biologa celular y
molecular. Mdica Panamericana.