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FACULTAD DE INGENIERA
QUMICA
TITULO:
ASIGNATURA:
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
DOCENTE:
CARMEN CARREO FARFN
ALUMNA:
INTRODUCCIN
La utilizacin masiva de combustibles fsiles genera anualmente 2 800 millones de toneladas de
dixido de carbono de los 76 000 millones de toneladas existentes en la atmsfera. El dixido de
carbono junto con otros gases como el dixido nitroso, metano, clorofluorocarbonados,
compuestos halogenados y vapor de agua constituyen el grupo de gases invernadero que
absorben la radiacin reflejada provocando el calentamiento global de la atmsfera y cambiando
dramticamente el clima del planeta. Adicionalmente a los cambios climticos globales el uso
masivo del petrleo como fuente de energa y como materia prima ha generado la contaminacin
ambiental que ocasiona el deterioro progresivo de la calidad del ambiente y constituye una
amenaza real a la salud pblica as como es responsable de la extincin de gran cantidad de
especies animales y vegetales.
El principal origen del crudo y productos del petrleo tales como benceno, tolueno, xileno (BTX) e
hidrocarburos aromticos polinucleares (PAHs) liberados al ambiente son las prdidas de los
tanques de almacenamiento, los vertidos y accidentes durante su transporte. Una de las
herramientas para combatir la contaminacin ambiental generada por derrames de petrleo es la
biodegradacin del petrleo o ruptura de los compuestos complejos a compuestos simples y
menos txicos. Durante los ltimos aos el inters por la bsqueda de microorganismos con
capacidad degradativa de petrleo como bacterias, mohos y levaduras se ha incrementado con
miras a utilizarlos en la recuperacin microbiana de los suelos y cuerpos de agua contaminados
con petrleo. La biorremediacin o utilizacin de microorganismos como las bacterias que
metabolizan petrleo como fuente de carbono y energa, constituye una alternativa saludable
frente al deterioro progresivo de la calidad del ambiente por el derramamiento de crudos,
permitiendo la biodegradacin de los hidrocarburos y recuperacin de los suelos contaminados.
OBJETIVOS
METODOLOGA
1.-Muestra
Para la obtencin del inculo, cultivar cada bacteria nativa en 10 mL de caldo nutritivo, a 30 C
durante 24 horas. Posteriormente, centrifugar el caldo nutritivo (3500 rpm) durante 10 minutos,
eliminar el sobrenadante, lavar el sedimento con solucin salina esterilizada (0,87 %, p/v) y
estandarizar la concentracin celular con el tubo 3 del nefelmetro de Mc Farland (9 x 108 cel.
Ml -1). A continuacin, de cada una de las suspensiones bacterianas previamente estandarizadas
tomar 1 mL e inocularlo por triplicado en tubos de prueba de 16 x 150 mm con 10 mL de caldo
Bushnell Haas con indicador prpura de bromocresol y 0,1 mL de petrleo Diesel. Considerar un
tubo con caldo de cultivo no inoculado como testigo. Incubar a 30 C hasta por 10 das, con
agitacin manual, diariamente por 10 minutos y en simultneo investigar el viraje del indicador del
lila al amarillo, que se interpretar como positivo para la utilizacin del petrleo como fuente de
carbono y energa.
De cada uno de los inculos bacterianos previamente estandarizados tomar 1 mL e inocular por
triplicado en tubos de prueba de 16 x 150 mm con 10 mL de caldo extracto de levadura ms 0,2
mL de etanol. Considerar un tubo con caldo de cultivo no inoculado como testigo. Incubar a 30 C,
durante 3 das con agitacin manual, diaria por 10 minutos y en simultneo investigar la presencia
de burbujas y turbidez del medio de cultivo. A continuacin, verter el caldo cultivado en tubos y
centrifugarlos (3500 rpm) durante 10 minutos. Despus, tomar 1 mL de cada sobrenadante y llevar
a tubos de prueba con 9 mL de caldo extracto de levadura etanol ms 0,2 mL de petrleo Diesel.
Tapar hermticamente (tapa rosca) y agitar manualmente durante 1 minuto hasta lograr una
emulsin.
Posteriormente, con un tubo blanco conteniendo caldo extracto de levadura etanol ms 0,2 mL
de petrleo Diesel (testigo) calibrar a cero el espectrofotmetro digital de luz visible, 335 - 1000
nm, y leer la absorbancia de cada una de las muestras a 540 nm. Despus, realizar la conversin de
la absorbancia a unidades de actividad emulsificante por mililitro, considerando 0,826 de
absorbancia como una Unidad de Actividad Emulsificante por mililitro, UAE mL-1.
1.4.- Eficiencia de la biorremediacin de suelo contaminado con petrleo por tres bacterias
nativas seleccionadas:
Inocular las tres bacterias en terrarios con suelo contaminado con petrleo, donde se determinar
la eficiencia de la biorremediacin usando las tecnologas de bioestimulacin y bioaumentacin.
Colectar suelo contaminado con petrleo, homogenizar sobre una manta de polietileno y tamizar
a travs de una malla metlica de 15 mm de dimetro.
Obtener el inculo de cada bacteria nativa por el mtodo de siembra a gran escala, trabajando con
un inculo madre, intermedio y definitivo. Cultivar las bacterias nativas seleccionadas en 3 mL de
caldo nutritivo, a 30 C durante 24 horas. A continuacin, obtener un paquete celular y
estandarizar su concentracin con el tubo 3 del nefelmetro de Mc Farland, obteniendo una
suspensin bacteriana con 9,0 x108 cel. mL-1.
Por ejemplo para la propagacin, inocular 0,6 mL de la suspensin bacteriana en 5,4 mL de caldo
Bushnell Haas con 5 % de petrleo Diesel, incubndolos a 30 C por 24 horas, constituyendo el
inculo madre. Inocular ste en 54 mL de caldo Bushnell Haas con petrleo Diesel incubndose a
30 C por 24 horas para constituir el inculo intermedio e inocular a su vez, ste en 540 mL del
mismo caldo Bushnell Haas, incubado en las mismas condiciones y constituyendo el inculo
definitivo en una cantidad de 600 mL. para 30 bandejas. Luego tomar una muestra representativa
de 1 kg de suelo para determinar el contenido de Hidrocarburos Totales de Petrleo (TPH) y
realizar la caracterizacin fsico qumica en el laboratorio de suelos A continuacin, distribuir el
suelo contaminado en bandejas de plstico o terrarios, de 40 x 28 cm con un rea de 0,11 m2, a
razn de 4 kg por unidad.
En los consorcios se inocularon 80 mL de cada una de las cinco bacterias seleccionadas por
requerir el menor tiempo en la utilizacin del petrleo (T11), 80 mL de cada una de las cinco
bacterias con el mayor nmero de UAE (T12) y 40 mL de cada una de las diez bacterias nativas
seleccionadas (T13). El testigo con nitrgeno y fsforo no fue inoculado y a su vez el testigo
absoluto no fue ni bioestimulado ni bioaumentado. Inmediatamente despus de la inoculacin, el
contenido de los terrarios se mezcl durante 5 minutos y a continuacin stos se ubicaron bajo un
rea techada de 5 x 6 m. Se realizaron riegos , interdiarios con agua de pozo, durante los primeros
60 das y dos veces por semana los ltimos 30 das y despus de cada riego el contenido de los
terrarios fue removido durante 5 minutos.
Para la determinacin de la humedad obtener el peso de un crisol limpio y seco (Pb), pesar en ste
5 g de suelo (Pshb), y despus secarlos en horno a 105 C hasta obtener peso constante.
Finalmente pesar el crisol con la muestra de suelo seco (Pssb). Determinar la humedad al inicio del
ensayo y despus del riego correspondiente, interdiario durante los 60 primeros das y dos veces
por semana durante los ltimos 30 das.
(Pssb - Pb)
- Anlisis microbiolgico
Considerar como positivo el viraje del indicador prpura de bromocresol del lila al amarillo y
realizar el clculo correspondiente.
- Bioensayo de fitotoxicidad
Para determinar el efecto de las sustancias presentes en los suelos biorremediados sobre el ndice
de germinacin, realizar un bioensayo de fitotoxicidad. De cada tratamiento tomar una muestra
representativa de 10 g de suelo y realizar una dilucin 1/5, tomando 10 g de suelo con 50 mL de
agua destilada esterilizada. A continuacin, colocar 20 semillas de lechuga var. GREAT LAKES,
distribuidas por duplicado sobre un papel filtro circular depositado sobre la base de placas de Petri
previamente esterilizadas y verter sobre ellas 6 mL de la dilucin de suelo biorremediado.
Tapar las placas de Petri y cubrir con papel kraft durante 120 horas, a temperatura ambiente.
Incluir un control negativo, donde las diluciones de suelo sern reemplazadas por agua destilada
esterilizada y dos controles positivos, en donde se depositarn las diluciones de suelo de los
tratamientos testigo con N - P y testigo absoluto. Despus de 120 horas contar las semillas
germinadas y medir la longitud de las radculas emergidas. Calcular el porcentaje de germinacin
relativo, (PGR), el crecimiento relativo de radcula (CRR) y el ndice de germinacin (IG).
E = Si Sf x 100
Si
Dnde:
Realizar las pruebas correspondientes para determinar el gnero y especie de las bacterias
degradadoras de petrleo.
5. BIBLIOGRAFIA
Tapia, I., (2002) Capacidad degradativa del petrleo de hongos aislados de agua de mar-Litoral del
Puerto Eten. Enero-Mayo, 2002. Tesis de Licenciatura. Lambayeque, Universidad Nacional Pedro
Ruiz Gallo.
Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo
FACULTAD DE INGENIERA QUMICA E INDUSTRIA
ALIMENTARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA
FACULTAD DE INGENIERA
QUMICA
TITULO:
ASIGNATURA:
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
DOCENTE:
CARMEN CARREO FARFN
ALUMNA:
INTRODUCCIN
Southern Per Copper Corporation, Sucursal del Per (SPCC) es una empresa dedicada a la
actividad minero metalrgico. SPCC es titular de los derechos mineros y de las concesiones
mineras y de beneficio de la Unidad de Produccin de Toquepala (UP Toquepala), donde
actualmente realiza la explotacin de las reservas minerales constituidas por sulfuros primarios y
secundarios, siendo el mtodo de explotacin el de tajo abierto. SPCC inici sus operaciones en la
UP Toquepala en el ao 1959 y durante las ltimas dcadas, ha desarrollado cambios tecnolgicos
que han permitido ampliar su capacidad de procesamiento de mineral y adecuarse a las exigencias
de las nuevas normas de proteccin ambiental.
QU ES LIXIVIACIN?
La lixiviacin es un proceso por el cual se extrae uno o varios solutos de un slido, mediante la
utilizacin de un disolvente lquido. Ambas fases entran en contacto ntimo y el soluto o los
solutos pueden difundirse desde el slido a la fase lquida, lo que produce una separacin de los
componentes originales del slido.
Algunos ejemplos son:
La UP Toquepala se encuentra ubicada al Sur del Per, en el distrito de Ilabaya, provincia Jorge
Basadre y regin Tacna, aproximadamente a 150 km, va carretera, de la ciudad de Tacna. Las
coordenadas aproximadas en UTM (WGS 84) de la ubicacin del proyecto son: 19S 328 600 E y 8
092 500 N.
1.-MINA
2. PLANTA CONCENTRADORA
Recuperacin del agua de proceso mediante un uso eficiente y trabajando en circuito cerrado
3. SISTEMA DE LIXIVIACIN
Transporte de la solucin impregnada de cobre (Pregnant Leach Solution - PLS) por gravedad
mediante una lnea de transferencia de Cuajone a Toquepala, a travs de 4 tneles y con una
longitud aproximada de 30.5 km.
Sistema de represas de coleccin del PLS en las quebradas Huanaquera, Toquepala, Totoral y
Cimarrona, todas estas represas se encuentran ubicadas dentro de la UP Toquepala.
Sistema de conduccin de PLS por bombeo hacia un reservorio de abastecimiento para la planta
ESDE donde se mezclan el PLS procedente de Cuajone y el PLS de Toquepala, este reservorio se
ubica dentro de la UP Toquepala.
4.-PLANTA ESDE
La Planta ESDE se ubica a 3.5 km en lnea recta al Sur del tajo de la UP Toquepala. Est
conformada por las siguientes etapas de produccin:
Extraccin por Solventes (ES): En este proceso se transfiere selectivamente el cobre del PLS a una
solucin orgnica. El PLS entra en contacto con la solucin orgnica que contiene la sustancia
extractante activa en el mezclador. La mezcla pasa al sedimentador, donde se separan las fases
acuosas (PLS descargado) y orgnica. El PLS descargado (refino) regresa a los depsitos de mineral
lixiviable para continuar la lixiviacin y la solucin orgnica pasa a la etapa de re-extraccin. En la
etapa de re-extraccin o agotamiento (Stripping) se realiza el proceso inverso, el cobre de la
solucin orgnica se transfiere a una solucin electroltica desgastada (Spent).
Cuenta con tres (03) depsitos de material lixiviable, los cuales se describen a continuacin:
Depsito de material lixiviable Sur.- A diciembre de 2010, este depsito contiene ms de 237.7
millones de toneladas mtricas de mineral de baja ley, compuesto bsicamente de sulfuros
primarios y secundarios de cobre, con un contenido de cobre promedio aproximado de 0.162% de
cobre.
Cuenta con tres (03) depsitos de desmonte los cuales se ubican adyacentes a la zona del tajo de
la mina, los depsitos de desmonte utilizados son los siguientes: depsito de desmonte Norte,
depsito de desmonte Este y depsito de desmonte Noroeste.
En el Mapa GN-04 se muestra la ubicacin de los componentes actuales del Sector Toquepala.
PROCESO DE LIXIVIACIN
El mineral extrado del tajo Toquepala ser transportado por medio de volquetes de 240, 320 y
400 toneladas cortas de capacidad hasta el rea de chancado primario ubicado en el sector
denominado Mirador, a una distancia de 750 m del tajo.
Para las operaciones del chancado primario se agregar una segunda chancadora primaria para
alcanzar el nuevo tonelaje de 120 000 TMPD de mineral a ser procesado. El mineral que se
procesar en la nueva chancadora primaria se transportar por el sistema de faja transportadora a
la pila de intermedios de 80 000 TM desde donde se alimentar a la planta de chancado
secundario. En el Mapa GN-09 se presenta los detalles de la chancadora primaria, y en el Mapa
GN-07 Arreglo General del Proyecto, se muestra el trazo de la faja transportadora.
El rea de chancado secundario recibir el mineral en una tolva de regulacin con una capacidad
de 1 317 TM , la carga fresca que ingresa a la tolva de regulacin es de 3 330 TMPH con una
utilizacin de 75%, la configuracin es en circuito cerrado con una carga circulante de 100%, con
dos Chancadoras MP 1 250 (o modelo equivalente), la tolva de regulacin alimenta dos zarandas
de clasificacin secundaria tipo multipendiente (banana), el sobre tamao alimenta dos
chancadoras secundarias, el bajo tamao cae a una faja que lleva el mineral hacia el circuito de
chancado terciario. El tamao de partcula como descarga del chancado secundario alcanza un P80
de 38 mm, granulometra de alimentacin a chancado terciario. En las tolvas y chancadoras se
considera un sistema colector de polvos tipo mangas.
El rea de chancado terciario posee una tolva de regulacin cubierta (tolva alimentacin HPGR)
cuya capacidad viva es de 20 000 TM, la carga fresca que ingresa a la tolva de regulacin es de 2
780 TMPH con una utilizacin de 90%, la configuracin es en circuito cerrado con una carga
circulante de 100%, la tolva de regulacin posee 4 bocas de descarga que alimentan a dos rodillos
High Pressure Grinding Rolls (HPGR) de 24/17, la granulometra de alimentacin tiene un P80 de
38 mm, la descarga de estos es llevada hacia una tolva de regulacin cubierta (tolva alimentacin
molienda) con una capacidad viva de 20 000 TM esta tolva est habilitada con ocho descargas, que
alimentan a cuatro zarandas vibratorias multingulo de doble bandeja, el sobre tamao regresa
por una faja como carga circulante al circuito cerrado y el bajo tamao (P80 de 3.5 mm) descarga
por gravedad al cajn del molino. En la clasificacin y chancadoras se considera un sistema
colector de polvos tipo mangas. 3.8.3.3 MOLIENDA La planta de molienda considera dos molinos
de bolas de 24 x 41. La carga fresca que ingresa al circuito es de 2 780 TMPH. Cada molino cuenta
con su cajn de bombeo con una bomba, que impulsa la pulpa hasta una batera de 14 ciclones
que operan en circuito cerrado con el molino. Los ciclones entregan a flotacin un producto con
un tamao P80 de 180 micrones y las partculas que no alcanzan dicho valor saldrn por la
descarga de los ciclones como carga circulante del sistema de molienda. 3.8.3.4 FLOTACIN
COLECTIVA
Esta planta permite concentrar el cobre y molibdeno contenido en el mineral, obteniendo al final
del proceso un concentrado de cobre/molibdeno.
Circuito de Flotacin Colectiva de Limpieza: Este circuito considera dos etapas de limpieza en
serie, ambas etapas estn compuestas con celdas mecnicas convencionales El objeto de este
circuito es limpiar y mejorar la ley de los concentrados de cobre y molibdeno. El producto de este
circuito es enviado a un espesador que alimenta la planta de molibdeno y la cola de este circuito
va a la flotacin de repaso o agotativa (Scavenger).
Circuito de Flotacin Agotativa (Scavenger): Este circuito recupera el cobre y molibdeno que no
flot en la primera limpieza para mejorar la recuperacin. Estar compuesto con celdas mecnicas
convencionales. El cobre recuperado en este circuito regresa a la primera limpieza y la cola va al
espesador de relaves. La planta de flotacin colectiva permitir mejorar la concentracin de los
valores de cobre y molibdeno de la pulpa mineralizada, obtenindose al final del proceso un
concentrado colectivo con altas concentraciones.