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Ciencia del suelo

Efecto de la aplicacin de agroqumicos en un cultivo de arroz


sobre los microorganismos del suelo
Effect of agrochemicals on soil microorganisms of a rice culture

Giovanni Chaves-Bedoya1*, Martha Lucia Ortz-Moreno2 y Luz Yineth Ortiz-Rojas3

1
Grupo de Investigacin PLANTAE, Departamento de Biologa. Facultad de Ciencias Bsicas. Universidad Francisco de Paula
Santander, San Jos de Ccuta, Colombia. 2Centro de Ciencias Biolgicas e da Sade, Universidade Federal de So Carlos, So
Carlos-SP, Brasil. 3Grupo de Investigacin PLANTAE. Departamento de Ciencias Agrcolas y Ciencias Pecuarias. Facultad de
Ciencias Agrarias y del Ambiente. Universidad Francisco de Paula Santander, San Jos de Ccuta, Colombia. * *Autor de
correspondencia gchavesbe@gmail.com

Rec.:30.05.12 Acep.: 26.08.13

Resumen
En un Oxisol de los Llanos Orientales de Colombia, en condiciones de campo se evalu el efecto de
la aplicacin de agroqumicos sobre los microorganismos presentes en un cultivo de arroz secano.
Los agroqumicos evaluados fueron Glifosato, Bispiribac, Azoxystrobin y Malatin, aplicados en do-
sis comerciales, en un diseo experimental de bloques con medidas repetidas. Para el recuento de
microorganismos se tomaron muestras compuestas de suelo rizosfrico usando la metodologa de
transectos. A partir de las muestras fueron realizados conteos microbianos empleando dilucin en
placa y los datos se analizaron empleando anlisis de varianza y prueba de comparaciones mltiples.
En los conteos se encontraron bacterias Gram (+), Gram (-), actinomicetos, y los grupos funcionales
fijadores de nitrgeno y solubilizadores de fsforo, junto con los hongos Trichoderma spp., Fusarium
spp. y Penicillium spp. Los hongos, los actinomicetos y los solubilizadores de fsforo fueron los mi-
croorganismos ms afectados por los agroqumicos, con reducciones en la abundancia. Las bacterias
presentaron comportamientos variables dependiendo del agroqumico y los fijadores de nitrgeno
fueron estimulados por los tratamientos. Estos resultados indican que los agroqumicos utilizados
en el estudio pueden impactar de diferente manera los microorganismos que se encargan de la des-
composicin de la materia orgnica.
Palabras clave: Agroqumicos, microorganismos, suelo, xenobiticos.

Abstract
This paper show an analysis of the effect of agrochemicals used in a rice crop on the abundance of Oxisol
soil microorganisms in the region of the Eastern Plains of Colombia, under field conditions. Evaluated
Agrochemicals were Glyphosate, Bispiribac, Azoxystrobin and Malathion, applied in commercial dos-
ages, in a block design with repeated measures. For the enumeration of microorganisms, soil samples
were taken from rhizospheric soil using the transects methodology. From the samples, microbial counts
were carried out using the method of dilution in plate and the data were analyzed using the Minitab
14 software using analysis of variance and test for multiple comparisons. In the counts bacteria Gram
(+), Gram (-), actinomycetes, and functional groups: nitrogen fixers, and phosphorus solubilizing,
together with the fungus, Trichoderma spp., Fusarium spp., and Penicillium spp. were found. In gen-
eral, fungi, actinomycetes and the phosphorus solubilizing microorganisms were more affected by the
agrochemicals with reductions in their abundance. Bacteria presented varying behaviors depending

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Efecto de la aplicacin de agroqumicos en un cultivo de arroz sobre los microorganismos del suelo

on the agrochemicaland the nitrogen fixers were stimulated by the treatments. These results indicate
that the chemicals may impact in different ways to the microorganisms that are responsible for the
decomposition of organic matter.
Key words: Agrochemicals, microorganisms, soil, Xenobiotics.

Introduccin Los pesticidas disminuyen la actividad


de enzimas del suelo y pueden influir en la
El suelo es un ecosistema vivo y dinmico,
mayora de las reacciones bioqumicas, entre
posee una amplia variedad de organismos
ellas: la mineralizacin de la M.O., la nitri-
que realizan mltiples funciones, entre ellas
ficacin, la denitrificacin, la amonificacin,
la degradacin de la materia orgnica (M.O.).
las reacciones redox, y la metanognesis
Por su parte, los organismos edficos son con-
(Hussain et al., 2009).
siderados una reserva viva de nutrientes, que
Entre las metodologas para determinar
es vital para el mantenimiento de la calidad
los efectos colaterales y residuales de los
del suelo. Los microorganismos permanecen
pesticidas en la microbiologa del suelo se
en contacto con el ambiente del suelo y son
encuentran la tasa de respiracin microbiana,
indicadores ideales de la contaminacin por
el recambio de M.O. la biomasa microbiana
sustancias xenobiticas como los agroqumi-
y las actividades microbianas como fijacin
cos (Atlas y Barthe, 2002).
de nitrgeno, nitrificacin, denitrificacin y
Las plagas y enfermedades reducen de actividad enzimtica (Chen et al., 2003; Cyco
manera significativa la produccin de los et al., 2010; Pozo et al., 1994).
cultivos. Para prevenir los efectos devasta- En los Llanos Orientales de Colombia, el
dores de estos organismos nocivos se em- arroz es uno de los principales cultivos y en
plean agroqumicos (fungicidas, herbicidas Colombia ocupa el segundo lugar por rea
e insecticidas) diseados para controlar sembrada (Gutirrez Alemn et al., 2011). La
los patgenos o enfermedades en los culti- actividad arrocera se caracteriza por el alto
vos comerciales. Estos productos son un uso de agroqumicos (Gutirrez Alemn et al.,
componente importante de la agricultura 2011), sin embargo no se conoce el efecto de
moderna, pero su empleo continuo puede estas prcticas sobre la microbiota del suelo;
ocasionar numerosos problemas e influir por tanto, el objetivo de este trabajo fue eva-
en los microorganismos benficos del suelo; luar el efecto de diversos agroqumicos sobre
entre aquellos se encuentran los fungicidas los microorganismos edficos en un Oxisol
que se emplean con ms frecuencia que otra cultivado con arroz secano en los Llanos
clase de agroqumicos en regiones tropicales Orientales de Colombia.
(Dardis y Walsh, 2000).
Los agroqumicos son fuente de carbono
Materiales y mtodos
y nitrgeno y se degradan principalmente por
la actividad microbiana. La entrada conti- Localizacin
nua de estos compuestos en el ecosistema El trabajo se realiz en un Oxisol franco ar-
del suelo puede afectar los microorganismos cilloso en un rea de 300 m2, en la vereda
y su actividad, lo que ocasiona modificacin Bella Suiza del municipio de Villavicencio,
de los procesos biolgicos esenciales para la Colombia. El ecosistema es sabana nativa y el
fertilidad y la productividad de los cultivos sitio experimental se encontraba a 0407.088
(Alvear et al., 2006; Cyco et al., 2010). La N 07330.313 O, a 348 m.s.n.m. y una tem-
persistencia y dispersin de estos compuestos peratura promedio de 27 C. La precipita-
en el suelo depende de las propiedades fsico- cin anual es de 1807.7 mm con 112 das de
qumicas del agroqumico, de las caracters- lluvia y una humedad relativa de 75%. Los
ticas del suelo y las condiciones climticas muestreos de suelo para anlisis se tomaron
(Caldiz et al., 2007; Hernndez-Soriano et al., entre abril y agosto de 2009. Al comienzo del
2007; Sawunyama y Bailey, 2001). ensayo se tom una muestra de 500g de suelo

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para el anlisis de las propiedades fsico- dextrosa-agar; las bacterias Gram(-) en agar
qumicas (Atlas y Barthe, 2002). MacConkey y las Gram(+) y los fijadores de
nitrgeno segn la metodologa propuesta por
Fase de campo Matsumoto et al. (2005). Para determinar los
El manejo del cultivo de arroz secano se hizo solubilizadores de fsforo se emple el medio
de forma convencional, tal como lo realizan Picovskaya (Nautiyal, 1999). Los conteos de
los productores de la regin. El lote original microorganismos fueron analizados con el
de sabana nativa fue dividido en 30 bloques software estadstico Minitab 14 empleando
de 100 m2. La preparacin del suelo consis- anlisis de varianza (ANOVA) y la prueba de
ti en arado con cincel rgido y rastrillo para comparacin mltiple de Dunnett (P < 0.05).
la siembra del cultivo. Un mes ms tarde se
aplic una dosis equivalente de Glifosato a Resultados y discusin
razn de 2.5 lt/ha como herbicida pre-emer-
gente (tratamiento 1 -T1) y 12 das despus Caractersticas del suelo
se realiz la siembra a voleo de la semilla de Los resultados de los anlisis fsico-qumicos
arroz secano variedad Progreso. Veinte das del suelo mostraron que los valores (cmol/kg)
despus de la germinacin se aplic herbicida de Ca (8.3), Mg (2.3), K (1.2) y CICE (18.7) son
Bispiribac (0.4 lt/ha) como selectivo pose- altos, por lo que este suelo es atpico para
mergente (tratamiento 2 -T2) para malezas los Oxisoles que predominan en los Llanos
gramneas de hoja angosta. Cuarenta das Orientales de Colombia. No obstante el pH
despus de la germinacin se aplic el fungi- (4.38), el Al (4.8 cmol/kg), la M.O. (2.1%), el
cida Azoxystrobin a razn de 0.5 lt/ha (tra- P (10 mg/kg), el Fe (256 mg/kg) y el Mn (45
tamiento 3 -T3) para el manejo de hongos en mg/kg) se encuentran dentro de los valores
el cultivo. Finalmente, 65 das despus de la para este tipo de suelo (Rippstein et al., 2001;
germinacin, se aplic el insecticida Malatin Varela et al., 2009).
en dosis de 1.5 lt/ha (tratamiento 4 -T4). Las
aplicaciones de la secuencia de agroqumicos Poblacin de microorganismos
se consider como tratamiento fijo para las En el suelo testigo, las bacterias Gram (+)
parcelas bloques, por tanto el diseo experi- presentaron una poblacin de 2.0 0.5x106
mental fue de medidas repetidas con bloques UFC/g de suelo y las Gram (-) de 2.5 0.5x106
completamente aleatorizados. UFC/g. El recuento de actinomicetos fue de
1.5 1.3x 105UFC/g. Los fijadores de nitrgeno
Microbiologa de suelos y anlisis de datos de 2.75 0.25x104UFC/g. Los solubilizadores
Para el conteo de microorganismos en el suelo de fsforo 8.75 0.25x105UFC/g. Los hongos
se tomaron cinco muestras compuestas de ms frecuentes fueron Penicillium, Fusarium
500 g a una profundidad entre 0 y 20 cm y Trichoderma con 5.25 0.25x103UFC/g,
usando la metodologa de transectos en cada 2.5 0.5x103UFC/g y 1.5 0.5x103UFC/g,
parcela bloque. Los muestreos iniciales se respectivamente. El recuento de micelios
hicieron antes de la aplicacin de los agro- estriles fue de 8.5 0.5x103UFC/g. Estos
qumicos y 3 das despus de la aplicacin de valores son ms altos que los encontrados
cada producto; las muestras fueron conser- por Sierra et al. (2009) y Varela et al. (2009)
vadas en bolsas plsticas refrigeradas (4 6 para suelos cultivados y naturales, respecti-
C) y llevadas al Laboratorio de Microbiologa vamente. Los conteos de los microorganismos
de la Fundacin de Asesoras para el Sector fueron altos hongos totales = 6.3x102 UFC/g,
Rural (Fundases) y el Laboratorio de Suelos solubilizadores de fsforo = 3.1x104 UFC/g,
de la Facultad de Agronoma de la Universidad fijadores de nitrgeno 1 x 103 UFC/g lo cual
Nacional de Colombia sede Bogot. puede estar relacionado con la disponibilidad
La abundancia de los microorganismos de nutrientes en el suelo, no as con el conte-
fue medida por la tcnica de dilucin seriada nido de M.O. y el pH cido. El pH cido y los
(UFC/g suelo) en medios especficos para cada altos niveles de aluminio y hierro estimulan
grupo microbiano, as, los hongos en papa- las poblaciones de solubilizadores de fsforo

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Efecto de la aplicacin de agroqumicos en un cultivo de arroz sobre los microorganismos del suelo

y fijadores biolgicos de nitrgeno (Schloter al., 2002; Taniguchi et al., 2010; Watanabe
et al., 2003) (Cuadro 1). et al., 2003). En este estudio, los resultados
sugieren que el efecto del herbicida sobre los
Bacterias Gram(+) microorganismos del suelo es moderado, ya
Los resultados mostraron diferencias (P < que su aplicacin ocasion disminucin de
0.05) en la presencia de bacterias Gram(+) tres de los grupos evaluados, siendo ms
en el suelo con los diferentes tratamientos. significativo el efecto sobre los solubilizadores
De acuerdo con la prueba de comparacin de fsforo.
mltiple de Dunnett (Dunnett, 1980) estas
bacterias no fueron afectadas por la aplica- Bacterias Gram(-)
cin de Glifosato (T1) ni por Malatin (T4). El Los resultados de la prueba Dunnett mostra-
Bispiribac (T2) mostr efecto benfico sobre ron que el Azoxystrobin (T3) tuvo un efecto
los conteos de bacterias Gram(+), mientras negativo (P < 0.05) en la presencia de bacte-
que con el Azoxystrobin (T3) se observ un rias Gram(-) (Figura 1) .
efecto negativo sobre el conteo de estas bac- El producto es una estrobirulina que
terias (Figura 1). funciona inhibiendo la respiracin mitocon-
El Bispiribac (2.6-bis [(4.6-dimethoxy drial al unirse a los complejos del citocro-
2- pyrimidinyl) oxy] benzoato ) pertenece al mo-b; unin que inhibe la transferencia de
grupo del acido pyrimidinyl oxybenzoico, electrones de este citocromo al citocromo-c
compuesto que se aplica en el control pos- y la produccin de energa a travs de la
emergente de varias malezas. En el caso de fosforilacin oxidativa. Esta inhibicin de
arroz, el efecto de los herbicidas es indirecto produccin de ATP resulta en la muerte del
ya que el incremento del tamao del grano microorganismo (Barlett et al., 2002). El
ocurre en la medida que estos combaten las Azoxystrobin se emplea como fungicida foliar.
malezas. Los herbicidas como el Bispiribac Este tipo de fungicidas aplicados como spray
actan sobre la acetolactato sintasa inhibien- se acumulan en alta proporcin en el suelo
do el crecimiento por el bloqueo de la sntesis y bajo ciertas condiciones pueden reducir la
de aminoacidos (Osuna et al., 2002). En el diversidad de hongos en el suelo (Adetutu et
Sudeste de Asia y Amrica Latina se ha obser- al., 2008). No obstante algunos microorga-
vado que este tipo de herbicida tiene excelente nismos pueden usar los agroqumicos como
selectividad en el cultivo de arroz (Osuna et fuente de carbono (Radosevich et al., 1995),

Cuadro 1. Efectos de diferentes agroqumicos sobre microorganismos en un Oxisol de los Llanos Orientales de Colombia
cultivado con arroz secano.

Microorganismo/ Producto agroqumico


tratamiento
Glifosato Bispiribac Azoxystrobin Malatin

Gram + NE + - NE

Gram - NE NE - NE

Actinomicetos NE - - -

Fijadores N + NE ++ +

Solubilizadores P ---- ---- ---- -

Penicillium ----- - - NE

Fusarium ----- ----- ----- ++

Trichoderma NE + + -----

Micelios estriles - + +++ +

NE, sin efecto. Los smbolos (-) o (+) indican el nivel de inhibicin o efecto positivo de los pesticidas sobre los microorganis-
mos.

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Bacterias Gram positiva Bacterias Gram negativa Abundancia de actinomicetos

Abundancia de microorganismos Abundancia de microorganismos Abundancia de Penicillium


fijadores de nitrgeno solubilizadores de fsforo

Abundancia de Fusarium Abundancia de Trichoderma Abundancia de micelios estriles

Figura 1. Efecto de la aplicacin de agroqumicos en los microorganismos de un Oxisol cultivado con arroz en los Llanos Orientales
de Colombia. T0: control, T1: Glifosato, T2: Bispiribac, T3: Azoxystrobin, T4: Malatin.
Las barras indican desviacin estndar y las letras indican los grupos de significancia (P < 0.05) segn la prueba de
Dunnett.

lo que consecuentemente explicara el incre- blacin de estos microorganismos, lo cual no


mento de algunas poblaciones de microbios se observ con Glifosato (P < 0.05) (Figura 1).
despus de la aplicacin de herbicidas como
Bispiribac y el mismo Azoxystrobin, lo que Fijadores de nitrgeno y solubilizadores de
sugiere la capacidad de los microorganismos fsforo
presentes en el suelo para metabolizar este Los microorganismos fijadores de nitrgeno
tipo de producto. fueron estimulados por los tratamientos Gli-
fosato (T1), Malatin (T4) y en mayor medida
Actinomicetos por Azoxystrobin (T3) (P < 0.01) (Figura 1).
Los tratamientos Malatin, Azoxystrobin y Busse et al. (2001) encontraron que el Gli-
Bispiribac afectaron de forma negativa la po- fosato no tuvo efecto sobre las comunidades

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Efecto de la aplicacin de agroqumicos en un cultivo de arroz sobre los microorganismos del suelo

de microorganismos en suelos cultivados con cos, mostrando una reduccin altamente


pino. significativa cuando se aplic Glifosato,
No obstante, en el presente trabajo se Bispiribac, y Azoxystrobin y significativa
observaron efectos negativos de este herbicida cuando se aplic Malatin.
sobre la presencia de los microorganismos
solubilizadores de fsforo, al igual que en Referencias
los hongos Penicillium, Fusarium y en los
Adetutu, E. M.; Ball, A. S.; y Osborn, A. M. 2008.
micelios estriles, lo cual indica cierto grado
Azoxystrobin and soil interactions: degradation
de susceptibilidad de estos al Glifosato. En and impact on soil bacterial and fungal commu-
general, los tratamientos con agroqumicos nities. J. Appl. Microbiol. 105:1777 - 1790.
ocasionaron reducciones drsticas en los mi- Alvear, M. L.; Lopez, R.; Rosas, A.; y Espinoza, N.
croorganismos del suelo en cuanto al control 2006. Efecto de la aplicacin de herbicidas en
(P < 0.05%) (Figura 1). condiciones de campo sobre algunas actividades
biolgicas. Rev. Cien. Suelo y nutr. Veg. 6:64 - 76.
Penicillum, Fusarium y Trichoderma Atlas, R. y Barthe, R. 2002: Ecologia microbiana y
La poblacin de este hongo en el suelo fue microbiologia. Editorial Addison Wesley.
Barlett, D. W.; Clough, J. M.; Godwin, A. R.; Hall, A.
eliminada por Glifosato (T1) y reducida de
A.; Hamer, M.; y Parr-Dobrzanski, B. 2002. The
manera drstica por Bispiribac (T2) y Azoxys- strobilurin fungicides. Pest Manag. Sci 58:647
trobin (T3), mientras que el Malatin (T4) no - 662.
tuvo efecto significativo en este tipo de hongo Busse, M. D.; Ratcliffe, A. W.; Shestak, C. J.; y
(Figura 1). Powers, R. F. 2001. Glyphosate toxicity and the
Fusarium fue eliminado por la aplicacin effects of long term control on soil microbial com-
de Glifosato (T1), Bispiribac (T2) y Azoxys- munities. Soil Biol. Biochem. 33:1777 - 1789.
trobin (T3), mientras que con Malatin (T4) Caldiz, D. O.; Rolon, D. A.; DI Rico, J.; y Andreu, A. B.
present un leve aumento (5 x 103 UFC/g vs. 2007. Performance of dimethomorph + mancozeb
3 x 103 UFC/g (P < 0.05) (Figura 1). applied to seed potatoes in early management of
Los conteos de Trichoderma indicaron late blight (Phytophthora infestans). Potato Res.
50:59 - 70.
que el Malatin elimin este hongo, mientras
Chen, S. K.; Edwards, C. A.; y Subller, S. 2003. The
que el Bispiribac (T2) y el Azoxystrobin (T3) influence of two agricultural biostimulants on
tuvieron un efecto positivo en su abundancia nitrogen transformations, microbial activity and
y el Glifosato no lo afect (Figura 1). plant growth in soil microcosms. Soil Biol. Bioch.
La abundancia de los micelios estriles 35:9 - 19.
vari (P < 0.01) entre tratamientos (Figura Cyco, M.; Piotrowska-Seget, Z.; y Kozdrj, J. 2010.
1). Los tratamientos Bispiribac (T2), Azoxys- Responses of indigenous microorganisms to a fun-
trobin (T3) y Malatin (T4) favorecieron un gicidal mixture of mancozeb and dimethomorph
aumento, mientras que el Glifosato (T1) tuvo added to sandy soil. Intern. Biodeter. Biodegrad.
un efecto negativo. 64:316 - 323.
Dardis, J. y Walsh, E. J. 2000. Studies on the effec-
tiveness of metconazole in controlling Fusarium
Conclusin head blight caused by Fusarium culmorum in
En este estudio, la respuesta de los mi- spring wheat (Triticum aestivum L). Cereal Res.
croorganismos presentes en un Oxisol Comm. 28:443 - 448.
Dunnett, C. W. 1980. Pairwise multiple comparisons
de los Llanos Orientales de Colombia a
in the unequal variance case. J. Am. Stat. Assoc.
la aplicacin de agroqumicos en dosis
75:796 - 800.
comerciales fue variable y dependiente Gutirrez Alemn, N.; Barn Valbuena, J.; Roa Prie-
del tipo de producto. Algunos de ellos to, J.; Castro Medina, G. E.; Mendoza, G.; y Lennis
mostraron capacidad para metabolizar Vargas, D. A. 2011. Dinmica del sector arrocero
un producto, mientras que el mismo pro- de los Llanos Orientales de Colombia. Federacin
ducto ocasion efectos negativos en otros Nacional de Arroceros, Fedearroz. Bogot, D.C.
microorganismos. Los microorganismos Hernndez-Soriano, M. C.; Mingorance, M. D.; y
solubilizadores de fsforo fueron los ms Pea, A. 2007. Interaction of pesticides with a
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