Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
1. OBJETIVOS
1.1 Demostrar el efecto o influencia del pH sobre la velocidad de reaccin de la
amilasa.
1.2 Demostrar el efecto o influencia de la temperatura sobre la velocidad de
reaccin de la amilasa.
2. INTRODUCCION
Respecto al pH, las enzimas requieren, para actuar con mxima eficiencia, una
determinada concentracin de iones hidrogeno en el medio, por tanto, cada enzima tiene
un pH ptimo de accin. El efecto del pH se explica por la accin de la concentracin
de protones en la disociacin de distintos grupos del sustrato y en especial de la enzima,
que participan tanto en la unin enzima-sustrato y en el mecanismo cataltico mismo,
como en el mantenimiento de la determinada conformacin de la enzima. A valores de
pH por encima o por debajo del pH optimo, disminuye la actividad enzimtica por lo
que, generalmente se describe una curva en forma de campana.
Respecto a la temperatura, al igual que el pH, existe un rango, algunas veces muy
pequeo, donde es mxima la actividad enzimtica, que est determinado por la
magnitud de las variaciones de la velocidad inicial en funcin de la temperatura del
medio, lo que significa que la velocidad inicial de reaccin aumentar con la
temperatura hasta que se haga prcticamente imposible de medir debido a una
activacin. La mayora de las enzimas son completamente inactivadas por encima de los
70 C.
Las molculas deben poseer cierta energa de activacin para que puedan reaccionar y
las enzimas actan disminuyendo la energa de activacin, permitiendo que la reaccin
avance rpidamente. Se puede determinar fcilmente el efecto de la temperatura,
PRCTICA N2
DEMOSTRACION DEL EFECTO DEL pH Y Pgina: 2 de 8
LA TEMPERATURASOBRE LA VELOCIDAD
DE LA REACCIN ENZIMTICA
Para estudiar el efecto de estos factores sobre una reaccin enzimtica, se debe trabajar
en condiciones de operacin bien determinadas. Los otros paramentos o factores, deben
permanecer constante respecto al factor determinante. Para ello se trabajar como
sustrato almidn y se determinara las variaciones del almidn segn procedimiento de
identificacin y cuantificacin de sustrato residual, utilizando solucin iodada.
3. MATERIAL METODOS
3.1 Material Biolgico :
Amilasa
3.2 Materiales:
Pipetas
Tubos de ensayos
Bao mara
Cocina elctrica
Balanza
3.3 reactivos
Solucin buffer acetato.
Solucin buffer fosfato.
Solucin buffer carbonato.
Solucin de almidn al 1%.
Solucin de enzima al 1%.
Solucin NaCl 0.1M
HCl 0.05 M
Solucin Iodada
Sol. Cprico alcalino
4. PROCEDIMIENTO:
SISTEMA (Tubos)
COMPONENTES Y PROCESO
Blanco 1 2 3
Soluc. HCl 0.5N 4.0 4.0 4.0 4.0
Agua destilada 0.5 - - -
De los tubo 1-3 parte A - 0.5 0.5 0.5
Solucion Iodada 0.5 0.5 0.5 0.5
SISTEMA (Tubos)
COMPONENTES Y PROCESO
Blanco 1 Blanco 2 1 2 3
Soluc. HCl 0.5N 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0
Agua destilada 0.5 - - - -
Soluc. Almidn 1% - 0.5 - - -
De los tubo 1-3 parte A - - 0.5 0.5 0.5
Solucion Iodada 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
5. RESULTADOS:
PRCTICA N2
DEMOSTRACION DEL EFECTO DEL pH Y Pgina: 6 de 8
LA TEMPERATURASOBRE LA VELOCIDAD
DE LA REACCIN ENZIMTICA
6. DISCUSIONES:
PRCTICA N2
DEMOSTRACION DEL EFECTO DEL pH Y Pgina: 7 de 8
LA TEMPERATURASOBRE LA VELOCIDAD
DE LA REACCIN ENZIMTICA
7. CONCLUSIONES
8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA N2
DEMOSTRACION DEL EFECTO DEL pH Y Pgina: 8 de 8
LA TEMPERATURASOBRE LA VELOCIDAD
DE LA REACCIN ENZIMTICA
CUESTIONARIO: