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NOTA PRVIA 621

Fenologia e prospeco fitoqumica do jaborandi (Pilocarpus microphyllus Stapf ex


Holmes)

OLIVEIRA, C.S.A.1; LAMEIRA, O.A.2*; RIBEIRO, F.N.S.2; ROCHA, T.T.2; ASSIS, R.M.A. DE2
1
Universidade Federal Rural da Amaznia, UFRA, Av. Presidente Tancredo Neves, 2501, Bairro: Terra Firme,
CEP: 66.077-830, Belm/PA. 2Embrapa Amaznia Oriental, Laboratrio de Biotecnologia/ Horto de Plantas
Medicinais CEP:66095-100, Belm/PA; *Autor para correspondncia: osmar.lameira@embrapa.br

RESUMO: O estudo fenolgico tem como finalidade determinar o ritmo sazonal dos eventos
do ciclo de vida da planta, como florao e frutificao. Estes eventos so determinados por
uma srie de fatores, como: alternncia de perodos chuvosos ou no chuvosos, intensidade da
radiao solar, entre outros. A fitoqumica tem por objetivos conhecer os constituintes qumicos
de espcies vegetais ou avaliar sua presena. O presente trabalho teve como objetivo realizar
a caracterizao fenolgica e a prospeco fitoqumica de folhas de jaborandi. A rea de
estudo para a avaliao do material vegetal foi o Banco Ativo de Germoplasma de Jaborandi da
Embrapa Amaznia Oriental, situada no municpio de Belm-PA. Os acessos escolhidos foram:
Merck, cultivado a pleno sol e sombra; Japons e Bonal 4, cultivados a pleno sol. Os registros
foram realizados diariamente por um perodo de 28 meses correspondendo a agosto de 2010 a
dezembro de 2012, de cinco plantas/acesso e organizados para demonstrao mensal, atravs
de fichas com a numerao respectiva das plantas, com registro de presena ou ausncia das
fenofases, florao e frutificao. A determinao do peso seco das amostras coletadas dos
acessos foi realizada no Laboratrio de Agroindstria da Embrapa Amaznia Oriental, onde,
aps a triagem e remoo das impurezas, as folhas foram cortadas, pesadas, colocadas em
bandejas de inox e secas em estufa com circulao mecnica (FANEM 320-SE), temperatura
de 45 C por 120 h. Em seguida, as amostras foram pesadas, trituradas e acondicionadas em
sacos plsticos devidamente identificados e guardados sob refrigerao temperatura de 10
C at o uso. Os extratos das plantas foram preparados utilizando-se 100 g de folhas secas de
cada acesso, triturados e submetidos extrao hidroalcolica (etanol 80%) em banho-maria
sob refluxo, por aproximadamente 4 horas. Os extratos foram armazenados protegidos da luz
na geladeira at o momento das anlises. Foi analisada a presena das seguintes classes
de substncias qumicas: cidos orgnicos, acares redutores, polissacardeos, protenas e
aminocidos, taninos, catequinas, flavonoides, glicosdeos cardacos, lactonas sesquiterpnicas,
azulenos, carotenoides, esteroides e triterpenoides, depsdeos e depsidonas, derivados da
cumarina, saponina espumdica, alcaloides, purinas, antraquinonas. Os resultados obtidos
demonstraram que a espcie Pilocarpus microphyllus apresentou florao durante o ano todo
e frutificao em onze meses, e a prospeco fitoqumica revelou a presena de 11 classes
de constituintes qumicos.

Palavras-chave: florao, frutificao, constituintes qumicos.

ABSTRACT: Phenology and phytochemical prospection of Jaborandi (Pilocarpus


microphyllus Stapf ex Holmes). Phenological studies aim to determine the seasonal rhythm of
the plant life cycle events, as flowering and fruiting. These events are determined by different
factors, such as: alternating periods of rainy or dryer seasons, solar radiation intensity, among
others. Phytochemistry aims to identify the chemical constituents of plant species or to evaluate
their presence. This study aimed the phenological characterization and the phytochemical
prospection of jaborandi leaves. The chosen study area for the plant material assessment was
the Active Germplasm Bank of Jaborandi in the Embrapa Eastern Amazon, located in the city
of Belm, PA, Brazil. The chosen accessions were the following: Merck, grown in full sun and
in shade; Japanese and Bonal 4, both grown in full sun. Records were taken on a daily basis
for a period of 28 months (August of 2010 to December of 2012), from five plants/accession,

Recebido para publicao em 06/08/2015


Aceito para publicao em 22/08/2016 10.1590/1983-084X/15_159

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.18, n.2, supl. I, p.621-627, 2016.
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and arranged for monthly demonstrations by record sheets containing the corresponding plant
numeration and the presence or absence of flowering and fruiting phenophases. The dry weight
of the samples collected from the accessions was measured at the Laboratory of Agribusiness
of Embrapa Eastern Amazon, where, after the sorting and removal of impurities, the leaves were
cut, weighed, placed in stainless steel trays, and dried in forced air circulation oven (FANEM
320 UP) at a 45C for 120h. Then, the samples were weighed, crushed, and placed in plastic
bags properly identified and stored under refrigeration at a temperature of 10C until the use.
The plant extracts were prepared using 100g of dried leaves from each accession, crushed,
and subjected to hydroalcoholic extraction (80% ethanol) with water bath heating under reflux
for approximately 4 hours. The extracts were stored protected from light in a refrigerator until
the analysis. We analyzed the presence of the following classes of chemical substances:
organic acids, reducing sugars, polysaccharides, proteins and amino acids, tannins, catechins,
flavonoids, cardiac glycosides, sesquiterpene lactones, azulenes, carotenoids, steroids and
triterpernoids, depsides and depsidones, coumarin derivatives, foam saponin, alkaloids, purines,
anthraquinones. Our results showed that the flowering of Pilocarpus microphyllus occurred
throughout the year and fruiting occurred in eleven months, and the phytochemical prospection
revealed the presence of 11 classes of chemical constituents.

Keywords: flowering, fruiting, chemical constituents.

INTRODUO
O estudo fenolgico tem como finalidade um indicador de grupos de metablitos secundrios
determinar o ritmo sazonal dos eventos do ciclo de relevantes espcie em estudo (Falkenberg et al.
vida, como florao e frutificao. Estes eventos 2010).
so determinados por uma srie de fatores, como Em 1992, foi estabelecido um Banco Ativo
alternncia entre perodos chuvosos e no chuvosos de Germoplasma na Embrapa Amaznia Oriental
e intensidade da radiao solar, entre outros (Silva, em Belm, PA, visando sua conservao e
1998). utilizao em programas de melhoramento gentico.
De acordo com Dea Neves & Morellato Entretanto, pouco foi feito para se avaliar este
(2004), para que o cultivo e o manejo das espcies germoplasma, o que impede o que impede, tanto
vegetais sejam conduzidos de forma adequada, a organizao do banco, como o incio de (Moura,
essencial o entendimento da dinmica dos et al. 2005).
ecossistemas onde essas espcies tm origem Dentre os trabalhos de sazonalidade
e desenvolvimento, sendo o estudo fenolgico encontrados na literatura sobre jaborandi, Abreu
uma ferramenta essencial para tal finalidade. et al. (2007) estudaram o perfil de alcaloides
Alm de permitir a compreenso da dinmica das presentes em Pilocarpus microphyllus em diferentes
comunidades vegetais, o registro das caractersticas estaes e partes da planta e Taveira et al. (2003),
fenolgicas de grande importncia por servir como verificaram a variao sazonal no leo essencial
indicador das respostas das plantas s condies de jaborandi. Quanto aos aspectos fenolgicos da
climticas e edficas de determinada rea (Fournier, espcie, podemos citar os trabalhos preliminares
1974). de Rocha et al. (2011) que estudaram o perodo de
A organizao biolgica dos sistemas florao e frutificao de jaborandi no Banco Ativo
tropicais e sua evoluo podem ser bem de Germoplasma da Embrapa Amaznia Oriental.
compreendidas atravs da anlise fenolgica Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi
de comunidades. A periodicidade nos padres realizar a caracterizao fenolgica e a prospeco
reprodutivos e vegetativos das plantas reflete a fitoqumica de folhas de jaborandi.
distribuio anual e a disponibilidade de tipos
especficos de recursos (Frankie et al.1974).
Informaes sobre a fenologia das espcies MATERIAL E MTODOS
amaznicas so ainda insuficientes e fragmentadas,
e os dados existentes dizem respeito, principalmente, As coletas foram realizadas no perodo
quelas espcies de interesse ou potencial de agosto de 2010 a dezembro de 2012. A rea
econmico. de estudo para a avaliao fenolgica do material
A fitoqumica tem por objetivos conhecer vegetal foi o Banco Ativo de Germoplasma de
os constituintes qumicos de espcies vegetais ou Jaborandi, instalado no horto de plantas medicinais
avaliar sua presena, em estudos preliminares, da Embrapa Amaznia Oriental, situada no municpio

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de Belm-PA, localizado a 1 27 21 S de latitude esteroidese triterpernoides, depsdeos e depsidonas,


e 48 3014 W de longitude, com altitude de 10 m derivados da cumarina, saponina espumdica,
e temperatura mdia anual de 30C. alcaloides, purinas, antraquinonas. Os reagentes
Os registros foram coletados de quatro utilizados para os testes foram os mesmos citados
acessos (Merck cultivado a pleno sol e sombra por Harborne (1984), Matos (1997) e Falkenberg
natural, Japons e Bonal 4 cultivados a pleno et al. (2010).
sol) diariamente por um perodo de 28 meses,
correspondendo a agosto de 2010 a dezembro de
2012, de cinco plantas/acesso e organizados para RESULTADOS E DISCUSSO
demonstrao mensal, atravs de fichas com a
numerao respectiva das plantas, com registro No sistema de cultivo a pleno sol do acesso
de presena ou ausncia das fenofases, florao Merck ocorreu florao e frutificao em todos os
e frutificao. O acesso Merck procedente do meses do perodo avaliado de agosto de 2010
municpio de Barra do Corda-MA e Japons e a dezembro de 2012 (Figura 1). Nos meses de
Bonal 4, do municpio de Moj-PA. Esses acessos fevereiro, maio e novembro ocorreram as maiores
apresentam teor de pilocarpina acima de 0,60%, mdias de frequncias de nmero de dias (21 dias)
valor mnimo para ser considerado na seleo de de florao e frutificao, favorecendo a coleta de
um germoplasma (EMBRAPA, 1996). sementes para a produo de mudas. Entretanto,
O perodo de florao incluiu desde a o nmero de dias para a coleta de folhas visando
formao dos botes at o final do perodo de antese a anlise fitoqumica foi reduzido, haja visto que
das flores, e o de frutificao desde a formao a coleta de folhas para a anlise fitoqumica deve
visvel dos frutos at sua queda. Os registros das ser realizada, preferencialmente, quando os ramos
fenofases dos indivduos foram observados sem da planta no esto em fase reprodutiva, devido
levar em considerao os fatores edficos e biticos. ao fato da taxa de concentrao dos metablitos
A anlise fitoqumica das amostras secundrios se encontrar mais alta (Lameira &
provenientes do acesso Merck cultivado a pleno Amorim, 2008). O menor nmero de dias de florao
sol e sombra foi realizada no Laboratrio de e frutificao foi registrado no ms de julho com 7
Agroindstria da Embrapa Amaznia Oriental. As dias, nos 2 anos consecutivos, o que favoreceu a
folhas foram coletadas no ms de julho pela parte coleta de folhas para anlise fitoqumica, reduzindo,
da manh de ramos e em dias em que no estavam no entanto, o nmero de dias para coleta de
em perodo frtil conforme Lameira & Amorim (2008). sementes visando a produo de mudas (Figura 1).
Aps a triagem e remoo das impurezas, as folhas No acesso Merck cultivado a sombra
foram cortadas, pesadas, colocadas em bandejas (Figura 2), a florao no perodo avaliado ocorreu em
de inox e secas em estufa com circulao mecnica todos os meses do ano, sendo a maior frequncia
(FANEM 320-SE), a temperatura de 45 C por 120 h. registrada no ms de setembro, com 20 dias e,
Em seguida, as amostras foram pesadas, trituradas nos meses de fevereiro a maio e agosto e outubro,
em moinho de faca e acondicionadas em sacos frequncias de 19 dias. Os menores nmeros
plsticos, devidamente identificadas e armazenadas de dias foram registradas nos meses de julho e
sob, refrigerao a temperatura de 10 C at o uso. dezembro, com 8 e 7 dias, respectivamente, nos 2
Os extratos das plantas foram preparados anos. A frutificao ocorreu em todos os meses do
utilizando-se 100 g de folhas secas de cada acesso, ano, exceto no ms de janeiro. O maior nmero de
trituradas e submetidas a extrao hidroalcolica dias observado ocorreu nos meses de fevereiro,
(etanol 80%) em banho-maria sob refluxo por maio, setembro e novembro, com 21 dias. No ms
aproximadamente, 4 horas. O material foi, ento, de julho, ocorreu o menor nmero, com 8 dias de
filtrado a vcuo e concentrado em evaporador frutificao. As menores frequncias de dias em
rotatrio (Buch El 131 Sibata) a 150 rpm sob presso que ocorrem as fenofases favoreceria a coleta de
reduzida a 45, acoplado a bomba de vcuo (AAKer). material vegetal para anlise fitoqumica conforme
A seguir, foram armazenados protegidos da luz na Lameira & Amorim (2008), porm prejudicaria a
geladeira at o momento das anlises (Matos, 1997). coleta de sementes para multiplicao da espcie.
Os extratos foram submetidos a anlise No acesso Bonal 4 (Figura 3) a florao
fitoqumica, segundo metodologia dos protocolos ocorreu em todos os meses do ano, sendo
descritos por Matos (1997). Foi analisada a registrados 21 dias nos meses de janeiro, fevereiro,
presena das seguintes classes de substncias maro e maio, e 22 dias no ms de novembro.
qumicas: cidos orgnicos, acares redutores, Quanto a frutificao esta no ocorreu somente no
polissacardeos, protenas e aminocidos, taninos, ms de abril. No ms de novembro foi registrado o
catequinas, flavonoides, glicosdeos cardacos, maior nmero de dias, com 22 dias, e, em fevereiro e
lactonas sesquiterpnicas, azulenos, carotenoides, maio, 21 dias. O menor nmero de dias de florao e

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FIGURA 1. Mdia de dias de florao e frutificao do acesso Merck cultivado a pleno sol, no perodo de agosto
de 2010 a dezembro de 2012.

FIGURA 2. Mdia de dias de florao e frutificao do acesso Merck cultivado sombra, no perodo de agosto
de 2010 a dezembro de 2012.

FIGURA 3. Mdia de dias de florao e frutificao do acesso Bonal 4 cultivado a pleno sol, no perodo de
agosto de 2010 a dezembro de 2012.

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FIGURA 4. Mdia de dias de florao e frutificao do acesso Japons cultivado a pleno sol, no perodo de
agosto de 2010 a dezembro de 2012.

frutificao ocorreu no ms de julho, com 7 dias. Nos pesquisa. Os estudos fenolgicos realizados esto
meses de janeiro, maro, abril, junho e setembro, de acordo com Arajo (1970) e Bencke & Morellato
o nmero de dias com florao foram maiores que (2002).
o de frutificao. Atravs de estudos fenolgicos, torna-
Para o acesso Japons (Figura 4), a se possvel conhecer a poca de reproduo, a
florao e frutificao ocorreu em todos os meses deciduidade e o ciclo de crescimento vegetativo
do ano. Nos meses de fevereiro e maio, foram das plantas, parmetros que podem ser utilizados
registrados 21 dias de florao e nos meses de para o manejo adequado da flora (Ribeiro & Castro,
abril, setembro e outubro, 20 dias. Na frutificao, os 1986). O conhecimento da fenologia importante
maiores registros ocorreram nos meses de janeiro, para poder ajudar no planejamento do manejo do
maio e setembro, com 21 dias, e nos meses de plantio (Falco et al. 2000).
fevereiro, abril e outubro, 20 dias. O menor registro De acordo com Silva (1998), um dos passos
para florao e frutificao ocorreu no ms de julho, iniciais mais importantes para o conhecimento e
com 7 dias, coincidindo com o incio do perodo utilizao das espcies vegetais o estudo da sua
menos chuvoso na rea de estudo. biologia, em particular o da fenologia. Nesse sentido,
Os resultados de fenologia obtidos neste de fundamental importncia o conhecimento do
trabalho demonstraram que a espcie Pilocarpus perodo de florao e frutificao dessas espcies
microphyllus, independente do acesso e do sistema para a identificao do perodo mais apropriado
de cultivo, apresentou florao durante todo o ano para a colheita dos materiais a serem utilizados na
e frutificao em at onze meses, facilitando o agroindstria e na fitoqumica.
processo de colheita de sementes para a produo Muniz (2008) afirma que h um perodo
de mudas e regenerao de novas plantas, grande de florao de abril a julho, com pico em
bem como o manejo da espcie. Entretanto, os novembro/dezembro em rvores da Amaznia
resultados obtidos demonstraram que a coleta de Maranhense, justificado pelo incio da estao
material vegetal, principalmente as folhas para chuvosa. Arajo (1970) considera que a florao
anlise fitoqumica e uso, deve ser bem planejada, e a frutificao ocorrem, na maioria dos casos, na
porque, no perodo de florao e frutificao, dependncia da distribuio das chuvas durante o
as substncias ativas se deslocam para os ano, embora o efeito da regularidade ou severidade
rgos de reproduo, proporcionando uma maior das estaes seca ou chuvosa sobre as plantas
concentrao das mesmas (Lameira & Amorim, permanea desconhecido (Newstrom et al. 1994).
2008). Assim, as folhas coletadas poderiam estar Isso no ocorreu no presente trabalho com o
com concentrao muito baixa dessas substncias, jaborandi, pois, independente do acesso, do sistema
o que, consequentemente, prejudicaria o uso dessa de cultivo e do perodo de chuvas (maior perodo de
parte do vegetal. ocorrncia no municpio de Belm - PA de janeiro
Na caracterizao da fenologia do jaborandi a junho e menor perodo de ocorrncia de julho a
conduzida por Rocha et. al (2011) por um perodo de dezembro), a florao ocorreu em todos os meses
17 meses e no mesmo local do presente trabalho, os do ano e a frutificao em onze meses.
resultados obtidos foram similares aos da presente A prospeco fitoqumica realizada nas

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TABELA 1. Prospeco fitoqumica de folhas de jaborandi (P. microphyllus), do acesso Merck, cultivado a pleno
sol e sombra.
Prospeco Fitoqumica Folhas (Cultivo a pleno sol) Folhas (Cultivo sombra)
cidos orgnicos N N
Acares redutores 1 P N
Acares redutores 2 N N
Polissacardeos N N
Protenas e aminocidos 1 P P
Taninos P P
Catequinas N N
Derivados da cumarina N N
Esteroides P P
Saponina espumdica N P
Alcaloides 1 P P
Alcaloides 2 P P
Alcaloides 3 P P
Alcaloides 4 P P
Purinas N N
Antraquinonas 1 N N
Antraquinonas 2 N N
Depsdios e depsidonas P P
P = positivo; N = negativo.

folhas de jaborandi do acesso Merck, cultivado a foi realizada neste trabalho por essa informao
pleno sol e sombra visando identificar a influncia j existir dentro do BAG jaborandi da Embrapa
do sistema de cultivo, revelou a presena de Amaznia Oriental, tendo sido realizado pela
11 classes de constituintes qumicos: acares Japan International Cooperation Agency - JICA
redutores, protenas e aminocidos, taninos, (EMBRAPA, 1996), tendo sido determinado que
azuleno, carotenoides, esteroides, triperpenoides, 86,6% dos acessos apresentam teor de pilocarpina
depsdeos, depsidonas, saponina espumdica e acima de 0,60%.
alcaloides 1, 2, 3 e 4. Dentre esses, foi observada Em concluso, os acessos estudados
a presena de acares redutores no cultivo a pleno do Banco Ativo de Germoplasma de Jaborandi
sol e ausncia no cultivo sombra, bem como da Embrapa Amaznia Oriental apresentam
a presena de saponina espumdica no cultivo florao em todos os meses do ano e frutificao
sombreado e sua ausncia no cultivo a pleno sol, durante onze meses. Na prospeco fitoqumica
nicas diferenas qualitativas identificadas sob a realizada nas folhas de jaborandi, 11 classes so
influncia dos sistemas de cultivos, no afetando identificadas independentes do sistema de cultivo
a classe dos alcaloides, uma das substncias mais realizado, a pleno sol ou sombra. Dentre essas,
importantes do jaborandi (Tabela 1). nove classes so comuns aos dois sistemas e duas
As anlises de prospeco fitoqumica de delas, acares redutores e saponina espumdica,
plantas medicinais so mtodos laboratoriais, que exclusivas do sistema de cultivo a pleno sol e do
tm por objetivo detectar as classes de constituintes cultivo sombra, respectivamente.
qumicos presentes na parte da planta usada na
medicina popular (Paracampo, 2009).
A natureza qumica do vegetal determinada REFERNCIAS
pela presena ou no de determinadas substncias,
tais como os alcaloides e, dentre estes, destaca-se, ABREU, I. N. et al. Characterization of the variation in the
no jaborandi, a pilocarpina, seu principal constituinte imidazole alkaloid profile of Pilocarpus microphyllus in
qumico (Lameira & Amorim, 2008). Nesse sentido, diferente seasons and parts of the plant by electrospray
ionization mass spectrometry fingerprinting and
a determinao deste alcaloide de fundamental
identification of novel alkaloids by tandem mass
importncia para os programas de melhoramento spectrometry. Rapid Communication in Mass
gentico. A determinao do teor de pilocarpina no

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