AISLAMIENTO DE PSICROFILOS

GUIA EXPERIMENTAL
AISLAMIENTO DE PSICROFILOS
GUIA EXPERIMENTAL OBJETIVO
INTRODUCCION:

Los microorganismos psicrfilos tambin son conocidos como

crifilos, prefieren activamente las temperaturas bajas, y crecen en
medios fros casi tan rpido como los microorganismos ordinarios lo
Aislar colonias
hacen en medios clidos. De ah se suele inferir que poseen tipos de psicrofilos
especiales de enzimas que realmente funcionan ms de prisa a para su estudio
temperaturas bajas que los correspondientes a los microorganismos
normales, pero estas enzimas son ms fcilmente destruidas por el
calor, lo que puede explicar por qu estos psicrfilos mueren si la
temperatura sube por encima de 20. Estos microorganismos tienen
membranas celulares de una composicin de grasa especial, de
manera que son relativamente fluidas a temperaturas cercanas al
punto de congelacin, pero estas se vuelven demasiado fluidas, y
empiezan a fundirse, a temperatura que la mayora de Poder
microorganismos prefieren. determinar las
Los trabajos ms recientes sobre psicrfilos, en cuanto a aislamiento caractersticas
son realizados en ambientes muy fros, por lo general bajo cero, los de las colonias
ambientes acuticos, incluyendo el fondo del mar (-1 C a 4 C), el
rtico y los hbitats marinos de la Antrtida (agua de mar y
de psicrofilos si
sedimentos cerca de -1 C y el hielo marino, donde los fluidos se llegan a
internos permanezcan en estado lquido a -35 C en invierno), el encontrar en
hielo glaciar, lagos (hasta -5 C). El aislamiento de microorganismos
las placas
a partir de muestras naturales se realiza, en la mayora de los casos,
mediante la produccin de colonias aisladas en cultivos slidos. El
crecimiento explosivo de los microorganismos permite producir un
gran nmero de ellos a partir de una nica clula inicial de forma
que, tras un periodo de incubacin en las condiciones ambientales
adecuadas, se produce una colonia observable a simple vista y
formada por individuos iguales.

Como regla general, es mejor utilizar una serie de medios diferentes

cuando se hacen aislamientos primarios y siempre se debe incluir
algunos medios diluidos, que se podrn complementar con bajas
concentraciones de extracto de levadura (0.01- 0,001%) para
garantizar que la vitamina y el cofactor cumplan los requisitos para
los organismos exigentes. No hay medios que son especficos para
los diferentes grupos de microorganismos psicrfilos En cuanto a la
temperatura de incubacin, es mejor que las placas y cultivos
lquidos de aislamientos primarios de bacterias, estn por debajo de
5C. Para las levaduras, hongos y algas, temperaturas tan bajas
como 10C son probablemente suficientes. Las placas deben ser
incubadas durante al menos 2 semanas, mientras ms tiempo se
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incuben las placas es la mejor, porque, aunque la mayora de microorganismos psicrfilos forma
colonias visibles dentro de 1 mes a 5C, algunos microorganismos crecen ms lentamente.

MATERIALES:

Plate count agar

Pipetas
Agua peptonada
Balanza
Placas Petri
Propipetas
Filete de pescado congelado

PROCEDIMIENTO

Tomar 10g de filete de pescado congelado y

triturarla con 90ml de agua peptona , dejar que
se sedimente la mezcla

Con la ayuda de una pipeta y propipeta sacar

10ml de la mezcla y realizar disoluciones de 10-
1,10-2 y 10-3

Poner 1mL de cada disolucin decimal en placas

de Petri

Aadir 15 mL de medio de cultivo (Plate count

agar) distribuyndolo bien en las placas

Incubar la serie de placas a 20C por un

periodo de 3 dias

Despus de la incubacin se puede estudiar

las colonias de psicrofilos en la placa donde
se puede hallar el recuento de UFC
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