Manipulacin del ADN

La ingeniera gentica es la rama de la ciencia que se ocupa de la manipulacin de ADN de

organismos vivos, lo que permite una infinidad de aplicaciones como la creacin de nuevas
especies, corregir defectos genticos y la fabricacin de numerosos compuestos qumicos
que de otra forma seran imposibles de conseguir.

Los seres humanos, sin saberlo, han mezclado molculas de ADN de distintos orgenes
desde tiempos remotos. Las distintas variedades de animales domsticos, como las
razas de perros o de ganado vacuno, o las variedades de cereales o de frutales, han
sido mantenidas y multiplicadas en condiciones muy diferentes a las que se dan en la
naturaleza, a veces como fruto del intercambio gentico entre variedades que se
encontraban originalmente tan alejadas que es imposible que se hubieran
recombinado de una forma natural. Se trata de una primera forma de manipulacin
gentica, aunque muy primitiva y azarosa.

PCR (Reaccin en Cadena de la Polimerasa)

La reaccin en cadena de la polimerasa es una tcnica que fue desarrollada por Kary
Mullis a mediados de los aos 80. Con esta metodologa se pueden producir en el
laboratorio mltiples copias de un fragmento de ADN especfico, incluso en presencia
de millones de otras molculas de ADN. Como su nombre indica, se basa en la
actividad de la enzima ADN polimerasa que es capaz de fabricar una cadena de ADN
complementaria a otra ya existente. Sus nicos requerimientos son que existan
nucletidos en el medio que son la materia base para fabricar el ADN (los nucletidos
de adenina, timina, citosina y guanina), y una pequea cadena de ADN que pueda
unirse a la molcula que queremos copiar para que sirva como cebadora.

La reaccin en cadena de la polimerasa se desarrolla en tres pasos. El primero es la

separacin de las dos cadenas que forman la molcula de ADN que se quiere
amplificar, para lo cual se debe calentar el ADN a altas temperaturas que pueden ser
prximas a la ebullicin. Cada una de estas cadenas actuar como molde para fabricar
su complementaria. A continuacin se baja la temperatura para conseguir que cada
cebador se una a su regin especfica dentro de la cadena de ADN. El ltimo paso
consiste en la generacin de la cadena de ADN complementaria por accin de la ADN
polimerasa. El problema con el que se encontraron los cientficos que idearon esta
tcnica es que es preciso aumentar la temperatura de la mezcla de reaccin hasta
valores por encima de los 70C para que las dos cadenas de ADN se separen. A estas
temperaturas tan elevadas la ADN polimerasa se inactivaba y era preciso aadirla de
nuevo en cada ciclo. Esto fue as hasta que se descubri la bacteria Thermus aquaticus
que vive en aguas termales y cuya ADN polimerasa (Taq polimerasa) es capaz de
trabajar a temperaturas superiores a los 70C. De esta manera slo hay que aadir la
enzima al inicio del proceso de reaccin y llevar a cabo tantos ciclos como sea
necesario. Cada una de las molculas de ADN hijas pueden volver a entrar en el
proceso y servir como molde para fabricar ms copias. As tras 20 ciclos de reaccin
se puede obtener hasta 1 milln de copias de una molcula de ADN.

Aplicaciones de esta tcnica

Medicina:
Permite reconocer la especie que provoca un determinado cuadro infeccioso,
ya sea en una persona enferma o para detectar infecciones en la sangre de
donantes.
Permite acortar el tiempo necesario para diagnosticar enfermedades
hereditarias presentes en el genoma.
Paleontologa y Antropologa:
Permite recuperar las escasas cantidades de ADN que aun no se han
degradado. De esta forma, se hace posible el reconocimiento de cadveres y
fsiles y la obtencin de grandes cantidades de ADN para estudios posteriores.
Ciencias forenses:
Se emplea esta tcnica para establecer la relacin de parentesco entre dos
personas para obtener pruebas a partir de muestras de saliva o semen dejadas
en la escena de un crimen.