Objetivos

Llevar a cabo la identificacin del principio activo del paracetamol en una forma
farmacutica comercial slida, mediante el tiempo de retencin obtenido en HPLC.

Determinar la concentracin del principio activo presente en la forma farmacutica

proporcionada, para lo cual se utilizarn las reas bajo la curva obtenidas con la sustancia
de referencia y muestra.

Resultados

Rplica tR rea bajo la curva

Estndar a)
b)
Muestra 1 a)
b)
Muestra 2 a)
b)

Clculo para determinar concentracin de paracetamol en muestra estndar

Clculo del porcentaje y la concentracin de paracetamol (porcentaje en muestras 1 y 2,

utilizando el rea promedio)

Eficiencia

Anlisis de resultados

Antes de comenzar la prctica, es necesario realizar un corrimiento de una muestra estndar

previo a la realizacin con la muestra problema, esto con la finalidad de que se corrobore que el
analito en cuestin, en efecto es el que se desea analizar.

Cuestionario

1.- Defina los siguientes trminos:

Volumen de elusin: Volumen total de eluyente que fluye por el sistema durante el tiempo de
retencin.
Volumen de columna: Volumen mximo que fluye en la columna, caracterizado por el volumen de
retencin y el volumen muerto o intersticial de columna.
Tiempo muerto (t0 o tm): Tiempo necesario para que una especie no retenida pase a tras de la
columna.
Tiempo de retencin (tr): Tiempo necesario para que una sustancia se eluya en el sistema, es
decir, el tiempo entre la inyeccin en una columna cromatogrfica y la llegada a un pico de analito
al detector.
Tiempo de retencin relativo: Razn entre los tiempos de retencin corregidos del componente
considerado (i), y de otro (p) que se toma como patrn de referencia.
Lnea base: Parte del registro que corresponde a la fase mvil pura (gas portador)
Resolucin: Separacin entre dos bandas cromatogrficas (R).
Eficiencia: Medida del grado de ensanchamiento de una banda cromatogrfica, se suele expresar
en trminos de altura H, de los platos o del nmero N de platos tericos. En la medida en que la
distribucin del analito dentro de la banda gaussiana, la altura de los platos est dada por la
varianza dividida entre la longitud de la columna del empacado.

2.- Proporcione ejemplos de otros 3 frmacos que puedan determinarse por HPLC.

1. Nevirapina (inhibidor de la transcriptasa reversa no nucleotdico, antirretroviral)

2. Amprenavir (Inhibidor competitivo de la proteasa del VIH-1)
3. Indinavir (Inhibidor de la proteasa ,antirretroviral)

3.- Qu sensibilidad de deteccin puede alcanzar este mtodo? El mtodo puede alcanzar
sensibilidades desde los microgramos hasta los picogramos, dependiendo del detector que se
utilice, por ejemplo; detector UV: 10-6 10-10 g. Detector IR: 10-6 g.

4.- Qu contaminante puede encontrarse presente en Paracetamol (acetaminofn)

materia prima como producto de degradacin? 4-cloroacetanilida y 4-aminofenol.
5.- Por qu se requieren disolventes de alta pureza grado HPLC, en cromatografa de
lquidos de alta resolucin? Los solventes usados para preparar la fase mvil o la fase mvil ya
preparada deben desgasificarse (grado HPLC) en un bao de ultrasonido por 10 a 15 minutos para
prevenir la formacin de gas que afectara la estabilidad de la columna. Tambin pueden
desgasificarse utilizando vaco y burbujeando helio.

6.- Qu se entiende por un sistema isocrtico y uno en gradiente? En HPLC, para una
fase estacionaria concreta, la naturaleza de la fase mvil es el factor clave en la
separacin. Puede trabajarse en dos modalidades:
Isocrtica: La composicin de la fase mvil permanece constante durante la separacin.
En gradiente: La composicin se va modificando durante la separacin. Para trabajar en
esta modalidad el cromatgrafo debe disponer de un sistema de programacin de
gradiente, que permita la mezcla reproducible de disolventes en distintas proporciones
durante la separacin cromatografca.
Referencias
http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica%20ambienta
l/Tema6.pdf

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf