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DO RN
CAMPUS CURRAIS NOVOS
INTRODUO
Existem vrias condies em que conveniente quantificar a populao
microbiana de uma determinada amostra. Na anlise da eficincia de agentes
antimicrobianos ou a eficcia de prticas higinico-sanitrias comum determinar a
populao sobrevivente ao tratamento. Tambm, em determinadas condies clnicas,
como em infeces do trato urinrio, quando o nmero de um determinado organismo
superior a 100 mil/ml considera-se que esse organismo o agente da infeco. Tambm
comum empregar tcnicas para quantificar a populao de microrganismos da gua e
alimentos para avaliar a qualidade microbiolgica dos mesmos.
Os microrganismos podem ser quantificados de forma direta, contando-se
microscopicamente o nmero de clulas presentes num determinado material ou
superfcie, ou indiretamente, efetuando-se anlises da turbidez, determinao do peso
seco, concentrao de substncias qumicas (protenas, pesquisa de determinada enzima
ou produto final de uma via metablica, DNA, RNA) ou atravs da contagem do
nmero de microrganismos viveis utilizando um meio de cultura apropriado. Essa
possibilidade permite que se avalie a quantidade de microrganismos na gua, em
alimentos como leite, carnes, vegetais, superfcies, ar ou at mesmo em culturas puras.
Para efetuar a contagem total de bactrias numa determinada suspenso da
amostra faz-se diluies decimais seriadas da amostra e inocula-se, usualmente, pela
tcnica de pour plate ou disseminao com ala de Drigalsky (Spread Plate), em
meios de cultura apropriados. Aps o perodo de incubao em condies de
temperatura e atmosfera adequadas faz-se a contagem do nmero de colnias. preciso,
no entanto, tomar determinadas medidas para evitar interpretaes errneas, tais como
perodo em que colhida a amostra, transporte apropriado, tempo transcorrido entre a
coleta e a anlise, dentre outros. Nesse mtodo conveniente preparar as amostras no
mais curto intervalo de tempo para evitar a multiplicao dos microrganismos. Por ser
este ltimo mtodo o mais empregado na rotina o que demonstraremos na prtica.
MATERIAL E MTODOS