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Boletn chileno de parasitologa

versin impresa ISSN 0365-9402

Bol. chil. parasitol. v.55 n.3-4 Santiago jul. 2000


http://dx.doi.org/10.4067/S0365-94022000000300012

Frecuencia de anticuerpos
anti Toxoplasma gondii en gatos de la
ciudad
de Valdivia, Chile.
Francisca Ovalle1, Alejandro Garca2, Jorge Thibauth3 y Myriam
Lorca2

1) Facultad de Ciencas Veterinarias y Pecuarias, Universidad Autral


de Chile. 2) Programa de Parasitologa, ICBM, Facultad de Medicina,
Universidad de Chile. 3) Departamento de Inmunologa, Facultad de
Ciencias Veterinarias y Pecuarias, Universidad Austral de Chile.

Abstract

Frequency of anti-Toxoplasma gondii antibodies in cats from


Valdivia city, Chile

Toxoplasmosis is a parasitic zoonosis. The importance of the cat as


related to this parasitose lies in the fact that it is not only the definite
host of the parasite, but responsible for its dissemination through
the release of oocysts, which subsequently infect both humans and
other animals.

The objective of this study was to determine the serological


prevalence of Toxoplasma gondii in the feline population of the
city of Valdivia (Chile) and to establish the possible epidemiological
implications of this prevalence. With these goals in mind the
technique of indirect immunofluorescence was implemented to
detect anti- T. gondii species - specific IgG. Blood samples from 97
cats (selected using a directed sampling process) from different
sectors of Valdivia were collected. The sample included 46 males
and 51 females of different ages, Positive and negative control sera
obtained from de United States were used to verify the results,
observed by UV microscopy. The anti-feline IgG antibody was used
as directed by the manufecturer (Sigma).

Of the 97 selected cats, 32 were found to be positive with a titre


higher than 1:4, a prevalence of 33.0%. The number of infected
males as compared to the number of infected females was found to
be statiscally insignificant, using the chi-square analysis with p less
than 0.1. In contrast, a definite correlation between age and
seropositivity was found; infection levels were higher in older
animals.

These results are consistent with those obtained in different studies


on this topic that have been performed in different parts of the
world. However, they would seem to be in conflict with other, similar
studies that have been done recently in Chile; this may be due to
the fact that the cats selected for this study were exposed to
different climatic conditions than those examined in previous works.

In conclusion, it has been determined that in Valdivia exist cats


infected by T. gondii, which indicate the presence of the necessary
epidemiological conditions for the persistence of this parasitic cycle
and the source of infection for humans and other animals.

Palabras clave (Key words): toxoplasmosis; infeccin en gatos


(cats infection); diagnstico (diagnosis); prevalencia (prevalence).

INTRODUCCION

La toxoplasmosis es una de las zoonosis parasitarias de importancia


para el hombre, en la cual el gato tiene especial relevancia en la
transmisin del agente infeccioso, el Toxoplasma gondii (Dubey,
1995).

En la dcada de los sesenta Hutchinson y col. (1969) sealan las


implicancias del gato en el ciclo biolgico de desarrollo del parsito
y su relacin con el hombre y el resto de los animales.

La toxoplasmosis es una enfermedad histoparasitaria cosmopolita,


capaz de producir alteraciones de grado variable en distintos tejidos.
Es importante establecer la diferencia entre infeccin y enfermedad
ya que las infecciones ocurren en forma subclnica o asintomtica y
solo en forma ocasional se produce la enfermedad, lo que es
frecuente de observar en personas o animales jvenes,
inmunocomprometidos y durante la preez (Gorman, 1992).

El diagnstico de la infeccin por T. gondii en el hospedero


definitivo puede practicarse a travs del examen
coproparasitolgico. Los ooquistes de T. gondii son
morfolgicamente similares a los de otros coccidios parsitos, por
esto debe inocularse el material sospechoso en ratones para
observar las lesiones caractersticas y aislarlo. Esto implica un alto
riesgo para el manipulador por el manejo de este material biolgico
(Gomez, 1996). Los exmenes directos en general son de bajo
rendimiento, es por ello que los mtodos indirectos de eleccin
corresponden a la deteccin de anticuerpos sricos. El uso de la
serologa en el gato tiene el mismo valor diagnstico que en el
hombre.

Las tcnicas serolgicas ms utilizadas son las reacciones de Sabin-


Feldman (S-F), hemaglutinacin indirecta (HAI),
inmunoflurescencia indirecta (IFI) y ELISA. La Tcnica de S-F tiene
una sensibilidad de 99% y una especificidad de 100% (Stagno y
Thiermann, 1970). El inconveniente de la tcnica es la exigencia de
trabajar con ratones y parsitos vivos. La tcnica de IFI tiene alta
sensibilidad (99%) y especificida (100%).

La situacin epidemiolgica especialmente en lo que se refiere a la


infeccin animal en Chile es relativamente conocida, pero Valdivia
constituye una de las excepciones. Existen antecedentes de cuadros
clnicos en el hombre, pero hay poca informacin relacionada con
los animales, especialmente el gato. Debido a estos antecedentes,
se ha considerado importante conocer la relevancia de la
toxoplasmosis en este animal como contaminante del medio
ambiente local y correlacionar los resultados obtenidos con
antecedentes de edad, sexo y condicin clinica de los animales
estudiados.

MATERIAL Y METODOS

Se investig la presencia de anticuerpos anti-


Toxoplasma gondii en gatos de la ciudad de Valdivia. Para la
seleccin de la poblacin se realiz un muestreo dirigido. La
seleccin incluy animales sanos y enfermos que llegaron al hospital
de pequeos animales de la Universidad Austral de Chile y a una
clnica veterinaria particular, adems de animales de distintos
sectores de Valdivia muestreados en sus casas.

Se recolectaron muestras de sangre venosa (vena ceflica o


yugular) de un volumen de 1-2 ml. aproximadamente. Estas se
dejaron coagular y posteriormente se centrifugaron para obtener el
suero, el que fue almacenado en tubos a -20 C hasta su anlisis.
Adems se recolect informacin referente al gato, cuando fue
prosible; datos como nombre, raza, edad, sexo, y un examen clnico
general para determinar el estado de salud.

En los sueros se determimin la presencia de inmunoglubilinas


isotipo G (IgG) especficas anti-T. gondii. El mtodo utilizado fue la
reaccin de IFI debido a que es considerada la tcnica de eleccin y
equivalente a la de Sabin-Feldman para el diagnstico de
toxoplasmosis. El antgeno de T. gondii fue obtenido de exudado
peritoneal de ratn, despus de traspasos sucesivos por inoculacin
intraperitoneal de la cepa Santiago del parsito. Posteriormente fue
filtrado de restos celulares del hospedero y fijados en buffer formol
al 2%, lavados en buffer fosfato y fijados a un portaobjeto. Se
mantuvieron congelados hasta su utilizacin.

Con el fin de estandarizar previamente la tcnica se utilizaron sueros


controles de gatos, tanto positivos como negativos donados
gentilmente por el laboratorio de referencia del Dr. Dubey en
Estados Unidos.

La reaccin fue practicada de acuerdo a la metdica clsica realizada


en nuestro laboratorio (Lorca y col., 1982) y usando como segundo
anticuerpo un suero anti-IgG de gato, conjugado con isotiocianato
de fluoresceina elaborado comercialmente por el laboratorio Sigma,
USA. La lectura se efectu bajo microscopio de luz U.V. incidente
Leitz Orthoplan, Alemania

RESULTADOS

De un total de 97 gatos muestreados y analizados mediante la


prueba de IFI, 32 resultaron positivos a la presencia de IgG
especfica anti-T. gondii, lo que corresponde a una prevalencia de
33,0% (Tabla I).

TABLA I

Resultados serolgicos obtenidos mediante IFI para toxoplasmosis,


segn edad y sexo en 97 gatos de
Valdivia, Chile.

Edad Machos Hembras Total


(Aos) N Positivos N Positivas N exami- Positivos
exami- exami-
nados nadas nados
N % N % N %

0-1 22 5 22,7 17 03 17,7 39 08 20,5


2-4 28 8 40,0 27 10 37,0 47 18 38,3
0>5 04 1 25,0 07 05 71,4 11 06 54,6
Total 46 140 30,4 51 18 35,3 97 32 33,0

*Resultados estadsticamente significativos. p<: 0.001


La prevalencia en machos alcanz a 30,4 y a 35,3% en hembras,
no aprecindose diferencias estadsticamente significativas. De
acuerdo a los resultados obtenidos segn edad y sexo y adems
los resultados en cada grupo etreo, la prevalencia oscil entre
20,5 y 54,6%, observndose una correlacin estadstica con la
edad.

En la Tabla II se pueden observar las manifestaciones clnicas que


se constataron en 16 de los 97 gatos muestreados; 9 de los gatos
presentaron manifestaciones clnicas asociadas a serologa positiva.

TABLA II
Asociacin entre seropositividad y manifestaciones clnicas
encontradas en 16 de los 97 gatos
muestreados para T. gondii en Valdivia.

Manifestaciones Total Resultado serolgico


Clnicas

Negativo Positivo

Diarrea 6 6 -
Neumonia 3 - 3
Compromiso 3 - 3
general*
Lesiones oculares 2 - 2
Anemia 2 1 1

Total 160 7 9

*Se entiende por compromiso general a la presencia simultnea de diversas afecciones que no involucran
un mismo agente etiolgico.

En la Tabla III se observan los resultados ordenados segn ttulo


serolgico y el estado de salud del gato, as se puede observar el
porcentaje de enfermos en cada grupo, aprecindose que el 56,3%
de los animales con manifestaciones clnicas presenta serologa
positiva y el 43,8% asociada a ttulos serolgicos elevados.

TABLA III
Resultados serolgicos obtenidos mediante IFI para
toxoplasmosis en 97 gatos de Valdivia, Chile, segn
ttulo y estado de salud.

Resultado (Ttulo) IFI Estado de salud

Nmero % Enfermo %

Negativo-1/4 65 67,00 7 10,8


1/16 07 7,2 2 28,6
1/64 06 6,2 - -
1/256 12 12,40 5 41,7
1/512-1/1000 03 3,1 1 33,3
1/2000-1/4000 04 4,1 1 25,0

Total 97 33,00 160 16,5

DISCUSION

En estudios sobre toxoplasmosis realizados en diferentes pases, se


ha determinado que la infeccin por este parsito es muy frecuente
en diferentes especies. Sin embargo, los resultados obtenidos no
siempre son comparables, debido a factores como el tamao de la
muestra y el mtodo utilizado (Pereira, 1985).

El test de referencia para toxoplasmosis es el originalmete descrito


por Sabin y Feldman (1948), pero es dificultoso de hacer, ya que
presenta serias limitaciones prcticas para su manipulador (Cordero
Del Campilo, 1975) y en algunas ocasiones sus resultados presentan
problemas debido a factores propios del suero en estudio como
hemlisis, infeccin secundaria, etc.

Los resultados presentados por IFI son comparables a los obtenidos


mediante SF (Dubey y col., 1995). Debido a que esta tcnica es muy
sensible, especfica, relativamente fcil de realizar, con costos no
tan elevados y adems que se contaba con sueros controles y
reactivos altamente estanderizados por laboratorio de referencia, se
escogi a la IFI como la tcnica a utilizar.

De acuerdo a los resultados (Tabla I) el 33,0% de la poblacin


muestreada result positivo. Esta cifra es menor al 59,3%
demostrado por Lorca y col. (1982) previamente en Chile y al
54,6% encontrado por Schenone y col. (1987), pero si lo
comparamos con otros estudios realizados en distintas partes del
mundo, resulta ser intermedio ya que la prevalencia detectada vara
entre 14 y 78,1%. En el archipilago de Juan Fernndez se detect
el 85,1% de gatos positivos con el mtodo de HAI (Stutzin y col.,
1989).

La diferencia detectada en Chile puede deberse a las poblaciones


estudiadas y sus procedencias. El presente estudio proviene de una
zona del sur del pas, donde las condiciones climticas podran no
favorecer directamente el desarrollo de los ooquistes en el medio
ambiente (altas precipitaciones y temperatura templada) ya que T.
gondii adems de humedad y oxgeno necesita temperatura de 20-
22 C promedio para volverse infectante (Atas, 1998.)

An as y con diferencias climticas diversas, en general, los


resultados en distintas partes del mundo indican prevalencias
variables en gatos, como es el caso de la ciudad de Panam, donde
se detect un 45,6% (Frenkel y col., 1995) y en Estados Unidos un
50% (Dubey, 1976) lo cual ms que nada indicara diferencias en
las metodologas empleadas. Cabe destacar que en el presnte
estudio, al igual que todos los realizados en el extranjero
concuerdan en que la infeccin va asociada a la variable edad debido
a que a mayor edad existe mayor exposicin a la contaminacin
fecal (Tabla I).

Al analizar los resultados de gatos de distinto sexo, no encontramos


diferencias estadsticamente significativas. De 46 machos
analizados, 14 resultaron positivos (30,4%) mientras que en el caso
de las hembras, de 51 analizadas 18 resultaron positivas (35,3%)
(Tabla I). A diferencia de los resultados obtenidos en este
estudio, Jones y col. (1957)citan una predominancia de los machos
infectados, pero sin valor estadstico, al revisar los resultados de
distintos trabajos, no se detectan diferencias estadsticas entre
machos y hembras (Behimer y col., 1973; Deeb y col., 1985).

En la Tabla II podemos ver las manifestaciones clnicas que fueron


observadas en este estudio. De los siete animales negativos que
presentaron manifestaciones clnicas seis de ellos presentaron
diarrea de origen no determinado, lo cual podra deberse a una
infeccin por T. gondii reciente, razn por la que los anticuerpos no
son an detectables (Greene, 1993), o bien, tener otro origen.

Encontramos dos gatos que presentaron una lesin ocular unilateral


que caus prdida parcial de la visin, pero no fue posible
determinar el origen, esto es importante de recordar porque se han
detectado anticuerpos contra este parsito en el 80% de los gatos
con uveitis (Dubey y col., 1995).

Posiblemente el compromiso general que presentaron tres gatos y


que se evidenci como mltiples lesiones de distinto origen (tia,
conjuntivitis, imptigo, neumonia, etc.) podra deberse a una baja
de defensas y en este caso se producira una reactivacin del cuadro
de toxoplasmosis, lo que ha sido sugerido en varios estudios por la
presencia de un aumento en los anticuerpos circulantes (Lindsay y
col., 1997). Ultimamente se ha descubierto que la presencia de
enfermedades que deprimen el sistema inmune (FIV, leucemia) no
inducen la reeliminacin de ooquistes en animales que presentan el
parsito enquistado, a diferencia de la utilizacin prolongada o en
altas dosis de corticoides. S ocurre un aumento en el ttulo de
anticuerpos este induce a pensar en una reactivacin del cuadro.
(Lindsay y col., 1997). En este trabajo no encontramos relacin
estadstica entre el ttulo serolgico y el estado de salud del gato.

De los 32 animales que resultaron positivos, nueve presentaron


manifestaciones clnicas, todos ellos presentaron serologa
considerada como ttulos medianos y altos. La mayor parte de las
manifestaciones fueron las comunmente descritas en cuadros de
toxoplasmosis crnica como neumonia y lesiones oculares diversas
(Lindsay y col., 1997) (Tabla II) aunque no puede determinarse el
verdadero origen de estos cuadros.

Llama la atencin en la Tabla III que en el grupo de animales con


ttulo 1:256 se encuentra el mayor porcentaje de enfermos por
diversas causas (41,7%). Algunas de las manifestaciones clnicas
que fueron detectadas en los gatos muestreados pueden hacer
sospechar de lesiones causadas por toxoplasmosis, como neumonia,
lesiones oculares y diarrea. Cabe destacar que en el grupo de gatos
negativos (65) slo el 10,8% presentaba

signologa relacionable con toxoplasmosis lo cual adems de indicar


la vaga signologa de esta enfermedad, indicara que un gran
nmero estara expuesto a infectarse en una poca futura y por lo
tanto se transformaran en grandes diseminadores de la infeccin
(Etheredge y col., 1995), hecho de gran importancia para la
infeccin humana.

La prevalencia serolgica en personas de la zona sur del pas (X a


XII Regiones) alcanza el 46,5%, siendo el promedio nacional de
36,9% segn una encuesta realizada entre 1982 y 1994 (Contreras
y col., 1996). Esto podra relacionarse con la prevalencia detectada
en gatos (33,0%), ya que existen estudios que indican cierta
relacin entre la densidad de gatos y su prevalencia con la
prevalencia encontrada en el hombre (Acha y Szyfres, 1977).

Como conclusin es importante hacer notar que este tipo de estudio


debera ampliarse a diferentes zonas del pas, con el fin de contribuir
por una parte al conocimiento de la epidemiologa de la
toxoplasmosis en Chile, como tambin desde el punto de vista
clnico animal conocer las repercuciones que la infeccin
por Toxoplasma gondii tiene en el hospedero definitivo y las
prdidas que puede producir en la produccin animal.

Agradecimientos.- Los autores agradecen la gentileza del Dr. J.P.


Dubey en otorgarnos los sueros controles que resultaron
indispesables en la estandarizacin del mtodo utilizado. Este
trabajo fue financiado en parte por la Network SIDA/ SAREC y la
Agencia Internacional de Energia Atomica, IAEA.

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