YESIKA JULIANA HERNANDEZ VILLAMIZAR

INFORME BIQUIMICA 2156450

INFORME LABORATORIO UNIDAD 1

DESNATURALIZACION DE PROTEINAS

06 DE AGOSTO DEL 2016

OBGETIVOS GENERALES

Observar e identificar los procesos de desnaturalizacin por calor,

desnaturalizacin por pH extremos, desnaturalizacin por metales pesados y
precipitacin por reactivos cidos.
Determinar los fenmenos de desnaturalizacin que se presentan en la
albmina, con los respectivos reactivos

FUNDAMENTO TEORICO

DESNATURALIZACIN DE LAS PROTENAS

La conformacin de una protena basada en sus estructuras secundarias y

terciarias la hace muy frgil.

Las protenas sufren un proceso conocido como desnaturalizacin, en la cual se

altera la disposicin espacial de las cadenas polipeptdicas dentro de la molcula y
transformndose la estructura tpica de ella, en otra ms desordenada (Lehninger,
1985). Esta modificacin no va acompaada por la ruptura de los enlaces
peptdicos implicados en la estructura primaria (Fig. 1).

Muchas molculas proteicas slo retienen su actividad biolgica dentro de una

fluctuacin muy limitada de temperatura y de pH. La exposicin de las protenas
globulares a pH extremos o a temperaturas muy altas les hace experimentar un
cambio conocido, como ya se dijo: la desnaturalizacin.

Los efectos de la desnaturalizacin son numerosos y entre ellos se. pueden

destacar:

1. descenso de la solubilidad, resultado del desbloqueo de grupos hidrfobos.

2. alteracin en la capacidad de retencin de agua.
3. prdida de la actividad biolgica (enzimas, hormonas).
4. aumento de la sensibilidad al ataque de proteasas, debido al desbloqueo de los
enlaces peptdicos correspondientes a los sitios de accin especfica de las
proteasas
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Figura 1
PROTENA NATIVA Y DESNATURALIZADA

5. aumento de la viscosidad intrnseca.

6. su capacidad de cristalizar.

La desnaturalizacin puede ser reversible o irreversible, pero cuando se rompen

los enlaces bisulfuros que contribuyen a la conformacin de las protenas, este
proceso es normalmente irreversible.

Bajo ciertas circunstancias puede ser o no reversible; esto ltimo ocurre,

generalmente cuando las condiciones de desnaturalizacin no han sido
demasiado drsticas, ni el tiempo necesario. En algunas ocasiones el proceso de
desnaturalizacin puede ocasionar otras estructuras diferentes a la de la protena
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nativa, al establecer interreacciones y enlaces entre regiones de aminocidos
diferentes a los originales.

MATERIALES Y REACTIVOS

1Embudo de vidrio Tubos de ensayo

1 Probeta de 25 ml. 1 Probeta de 10 ml.

1 Cpsula de porcelana 1 Vaso de 10 ml.

1 Vaso de 250 ml. HCl 10%

1 Mechero 1 Esptula

1 Pipeta de 5 ml. 1 Trpode

1 Placa de calentamiento 1 Frasco lavador

1 Churrusco NaOH 10%

HNO3 concentrado Sulfato de Cobre 10%

cido tricloroactico 10% Acido Pcrico 10%

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PROCEDIMIENTO

Desnaturalizacin por calor

Todas las protenas sufren desnaturalizacin cuando la temperatura sobrepasa los
35ogrados centgrados. La alteracin es total al llegar a los 80o C, con coagulacin,
en el caso de la albmina de huevo.La ilustracin del proceso, usted puede verla
en el siguiente esquema:

Tubo 1. Tubo 2. Tubo 3.

Agregar 2-3 ml de solucin Agregar 2-3 ml de solucin Agregar 2-3 ml de solucin
de albmina o casena de albmina o casena de albmina o casena

Agregar 5 gotas de HCl al 10% Agregar 5 gotas NaOH al 10% Agregar 5 gotas de H2O

Observar a temperatura ambiente

Colocar los tubos en un bao de agua hirviendo,

durante 10 minutos y observar

Enfriar y observar cada uno

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Desnaturalizacin por pH extremos

La ilustracin del proceso, usted puede verla en el siguiente esquema:

Tubo Agregar lentamente por las paredes del tubo

Agregar 2-3 ml de solucin 2 ml de Acido Ntrico concentrado hasta
de albmina o casena que se forme 2 fases.

Agitar, mezclar, observar. y Anotar

Desnaturalizacin por metales pesados

Cuando las protenas estn a un pH mnimo de 7; estn generalmente cargadas

negativamente. Si se adicionan metales cargados positivamente, neutraliza la
carga y la protena precipita. La ilustracin del proceso, usted puede verla en la
siguiente esquema:

Tubo
Agregar 2 ml de solucin de Agregar 5 gotas de solucin
albmina o casena de Sulfato de Cobre

Aadir un exceso de 2 gotas de

Sulfato de Cobre
Agitar y observar
Agitar y Observar.
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Precipitacin por reactivos cidos.

Algunas sustancias cidas poseen cargas negativas que neutralizan las cargas
positivas de las protenas al formarse sales insolubles. La ilustracin del proceso,
usted puede verla en el siguiente esquema:

Tubo 1 Agregar 2 ml de solucin de Tubo 2 Agregar 2 ml de solucin de

albmina o casena albmina o casena

Agregar 5 gotas Agregar 5 gotas de Acido pcrico

DeAcidoTricloroactico

Observar

Aadir a cada tubo 5 gotas de NaOH

Observar en cada tubo

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RESULTADOS PRESENTADOS EN TABLAS

PRACTICA DESNATURALIZACION DE CALOR

SUSTANCIAS REACTIVOS OBSERVACIONES

3 ml de casena Acido clorhdrico al 10 % A temperatura ambiente

no reacciono.
Cuando se puso a hervir
se formaron unos
filamentos pequeos.

3 ml de casena NaoH al 10 % A temperatura ambiente

no reacciono.
Cuando se puso a hervir
se formaron unos
filamentos pequeos.

3 ml de casena H20 A temperatura ambiente

no reacciono.
Cuando se puso a hervir
se formaron unos
filamentos pequeos.

PRACTICA DE DESNATURALIZACION POR PH EXTREMO

REACTIVOS OBSERVACION TUBO 1

Casena + A temperatura ambiente

acidontrico hasta reaccion rpidamente
que forme dos fases formando dos capaz y se
torno un humo.

PRACTICA DE DESNATURALIZACION POR METALES PESADOS

REACTIVOS OBSERVACION
TUBO1

Casena +sulfato A temperatura

ambiente reacciono y
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de cobre torno un color azul
oscuro.

Casena + exceso Mantuvo el color azul

de sulfato de cobre oscuro no hubieron
cambios.

PRACTICA DE PRESIPITACION POR REACTIVOS ACIDOS

REACTIVOS OBSERVACION
TUBO 1

Casena + Al mezclasen las

acidotridoroacetico sustancias se
divide en dos
fases.
Casena+ No se altera la
acidotridoroacetico+ reaccin pero si la
NaoH agitamos cambia
de tonalidad.

REACTIVOS OBSERVACION
TUBO 2

Casena + acido Al mezclar las

pcrico sustancias se divide
en dos fases.

No se altera la
Casena+ acido reaccin.
pcrico+ NaoH
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DISCUSIN DE RESULTADOS

1. Desnaturalizacin por calor: se cogieron tres tubos de ensayo y se les

agrego casena. Despus al primero se le agrego HCL, al segundo NaoH y
al tercero H2O a temperatura ambiente no reaccionarontena un color
transparente y cuando se pusieron a hervir despus de 10 minutos tuvieron
un color amarilloso y vimos unos filamentos blancos y a eso se le llama la
desnaturalizacin.
2. Desnaturalizacin por pH extremos: en un tubo de ensayo y adicionamos
3 ml de casena, despus lentamente por las paredes del tubo 2 ml de
acido ntrico formando dos fases, la primera es amarilla y la segunda
transparente aceitosa y se formo humo que blanco que suba por el tubo y
al tocar el tubo estaba caliente.
Al mezclar la sustancia se formo una sola fase de color amarilla.
3. Desnaturalizacin por metales pesados: en un tubo de ensayo y se
adiciono 2 ml de casena, despus se le agrego 5 gotas de sulfato de cobre
despus agitamos y se formo un color azul oscuro. volvimos a agregar 2
gotas de sulfato de cobre y no cambio el color.
4. Precipitacin por reactivos cidos: se cogieron dos tubos de ensayo, en
el primero se adiciono 2 ml de casena y cinco gotas de acidotridoroacetico
formndose dos capas la de abajo transparente, la de arriba un naranja; en
el segundo se agrego 2 ml de casena y 5 gotas de acido pcrico la de abajo
tranparente y la de arriba una lnea de color naranja tostado. Despus a
cada tubo se le agrego 5 gotas de NaoH y no cambio la reacciono.

CONCLUCIONES

En esta prctica hicimos reacciones para saber cmo se desnaturalizan las

protenas y fue satisfactoria la prctica.
La primera practica la realizamos como se deba pero hubo un error el cual
la practica nos fue muy difcil de desifrar pero lo logramos teniendo
paciencia.
Gracias a esa prctica obtuve nuevos conocimientos e interactu con mis
compaeros con buenas ideas.
Con mis compaeros cada uno tenamos un rol en la prctica y cada uno lo
desempeamos muy bien y logramos lo que se quera.
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CUESTIONARIO

1. C u l e s l a d e f i n i c i n d e p r o t e n a ?

a) Son polmeros constituidos por la unin mediante enlaces qumicos de

unidadesmenores denominadas nucletidos.

b) Son biomolecular orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno

ygeneralmente tambin oxgeno; pero en porcentajes ms bajos.

c) Son polmeros formados por la unin, mediante enlaces peptdicos, de

unidadesde menor masa molecular denominadas aminocidos.

d) Ninguna de las citadas anteriormente.

2. Qu tipo de funcin realiza el colgeno y en que consiste?

a) Defensiva; es un anticoagulante de la sangre.

b) Reserva; utilizado como nutriente durante el desarrollo embrionario.

c) Movimiento; utilizado durante la contraccin muscular

d) Estructural; mantiene unidos tejidos animales y forma tendones y matriz

dehuesos y cartlagos.

3. Cul de las siguientes protenas realiza una funcin de tipo

hormonal que consisteen disminuir el nivel de glucosa en la sangre?

a) Insulina

b) Queratina.

c) Dineina.

d) Ovoalbmina.

4. La estructura de un aminocido esta formada por:

a) Un carbono unido a un hidrgeno, un grupo cetona y un grupo amino.

b) Un carbono unido a un hidrgeno, un radical, un grupo amino y otro

grupocarboxilo.

c) Un carbono unido a un radical y un grupo carboxilo.

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d) Un nico hidrgeno unido a un grupo aldehido.

5. Los aminocidos que poseen ms de un grupo amino en su

estructura como lahistidina, la arginina o la lisina pertenecen al grupo
de:

a) Aminocidos polares cidos.

b) Aminocidos apolares o hidrfobos.

c) Aminocidos polares no ionizables o hidroflicos.

d) Aminocidos polares bsicos.

6. Indica cuantos aminocidos esenciales poseen los adultos y

responde adems a lasiguiente cuestin, los aminocidos esenciales
son aquellos que:

a) El cuerpo humano puede fabricar con mucha mayor facilidad que los dems,
enadultos son 12.

b) El cuerpo humano no puede fabricar ni sintetizar y debe obtener a travs de

laingestin de ciertos alimentos. En adultos son 8.

c) Poseen una estructura totalmente diferente a los dems aminocidos,

condiferentes grupos y enlaces, de ah el nombre de aminocidos esenciales.
Enadultos son 15.

d) Todas las afirmaciones anteriores son falsas. Ningn aminocido

es esencialpara el ser humano

7. La estructura secundaria de una protena es:

a) La representacin tridimensional o disposicin de la estructura primaria en

elespacio.

b) La secuencia de aminocidos que componen la cadena poli peptdica y el

ordenen que dichos aminocidos se encuentran.

c) La disposicin espacial de un poli pptido al plegarse sobre s

misma adoptandouna forma espacial y caractersticas determinadas.

d) Unin mediante enlaces dbiles (no covalentes) de varias cadenaspoli

peptdicas con estructura terciaria, idnticas o no, para formar un
complejoproteico.
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8. Existe una forma en la estructura terciaria que poseen las protenas que
realizanfuncin estructural, de proteccin o ambas, son insolubles en
agua y disolucionessalinas (beta-queratina, colgeno...), dicha forma es:

a) Fibrosa o filamentosa.

b) Globular.

c) Rectilnea.

d) Ninguna de ellas.

9. La cromatina, ribosomas, histonas y protaminas de eucariotas son

ejemplos deprotenas pertenecientes a un grupo denominado:

a) Fosfoprotenas.

b) Glicoprotenas.

c) Lipoprotenas.

d) Nucleoprotenas.

10. El concepto de desnaturalizacin de una protena quiere decir que:

a) Las diferencias existentes entre protenas con la misma funcin son muchas
enespecies alejadas evolutivamente.

b) Se produce la prdida de todas las estructuras de orden superior (secundaria,

terciaria y cuaternaria) quedando la protena reducida a un polmero
con estructuraprimaria.

c) Las protenas debido a su gran tamao, forma disoluciones coloidales

aldisolverse.

d) Al ionizarse los radicales R se establecen puentes de hidrgeno

con molculasde agua. La protena que recubierta por molculas de agua que
impide la unin deotras protenas, que provocaran su precipitacin.