INTRODUCCIN

Antiguamente se realizaban transfusiones, siendo de estas que la mayora de las veces iban mal y
se producan la muerte de las personas por hemolisis o aglutinacin. Es una prueba
inmunohematolgica cuyo principio es la hemaglutinacin y su objetivo es evitarla destruccin
intravascular o la aglutinacin de los hemates en un receptor. Esta es una de las pruebas ms
importantes efectuadas en un servicio de transfusin. Se conforma por variosprocedimientos con
el fin de garantizar a nuestros receptores una mejor calidad en transfusiones

Se tiene que garantizar que los hemates a transfundir sean ABO compatibles con el receptor y al
mismo tiempo detectar anticuerpos en el plasma del receptor que se encuentren dirigidoscontra
antgenos presentes en hemates del donador.

El Du, es un alelo de D, muy importante pero irregular. No existe suero anti-Du especfico. Algunas
sangres Du deben esta caracterstica al hecho de que el factor D normal heredado, de uno de los
padres, est enmascarado por el factor C de un cromosoma aparejado dCe (r) heredado de otro
progenitor: este tipo se conoce como Du por interaccin gentica. El otro tipo Du hereditario
puede atribuirse a transmisin de un D debilitado.

Los glbulos de algunos sujetos Du pueden ser aglutinados directamente por casi todos los sueros
anti D, estos casos se denominanDu de titulo elevado. Otras sangres Du son aglutinados
solamente por unos cuantos sueros anti D; son los Du de ttulo bajo. Lo importante respecto a
los glbulos Du, especialmente la variedad titulo bajo, es que probablemente parecern Rho.
Negativos al ser mezclados con anti D. Solamente podrn reconocerse mediante:

1) Modificacin enzimtica previa, o sea, ficnizacin

2) Exposicin previa al suero anti D incompleto y luego prueba de Coombs. Los glbulos Du
dan una prueba de Coombs positiva en estas circunstancias. Se recomienda el segundo
mtodo.
Prueba cruzada mayor

MATERIAL NECESARIO

Material para lavado y dilucin de hemates (Suspensin de hemates)

Tubos de ensayo
Pipetas Pasteur
Suero
Albmina
Solucin salina fisiolgica
Suero de Coombs
Centrifuga
Bao maria

Desarrollo de la prctica
1. En un tubo de hemlisis depositamos 1 gota de hemates del donante y dos gotas de
plasma del receptor.
2. Agitar suavemente y dejar incubar la mezcla a T ambiente durante 5 min.
3. Centrifugar a 2500 r.p.m durante 1 min.
4. Re suspender y observar la aglutinacin.
5. Observar si hay aglutinacin aglutina el tubo "I" = Incompatible no aglutina el tubo
"C" = Compatible
6. Aadir a la mezcla anterior: 2 gotas de albmina
7. Mezclar bien e incubar a 37C durante 30 min.
8. Centrifugar a 2500 r.p.m durante 1 min.
9. Re suspender y observar la aglutinacin.( no hay aglutinacin)
10. Realizar 3 lavados con ssf (2ml) de la mezcla para eliminar los Ac que no se hayan
fijado a los hemates.
11. Aadir 2 gotas de AGH y mezclar
12. Centrifugar a 2500 r.p.m durante 1 min.
13. Re suspender y observar la aglutinacin.

Resultados
La prueba nos dio compatible, la sangre del dnate es de grupo O y el suero del
receptor es tambin de grupo O.
1
Variante DU

Material y equipo

1 gradilla

4 tubos 10 x 75

2 pipetas pasteur con bulbo

1 Centrifuga Sarofuge

1 bao maria a 370c

Suero Anti-D

Suero de Coombs

Albmina bovina al 22%

Solucin salina en pizeta

MUESTRA
Muestra problema y muestra control

Desarrollo de la prctica
1. En un tubo de hemlisis colocamos una gota de suero anti-D y otra gota de suspensin
de hemates al 5 %.( si no hay aglutinacin seguimos)
2. 2. Mezclamos con cuidado e incubamos en el bao de agua a 37 C durante 30-45
minutos.( si no aglutina seguimos)
3. Despus, lavamos los hemates en solucin salina tres veces consecutivas a 1.000
r.p.m durante 1 minuto y decantamos el sobrenadante.
4. Sobre el sedimento del tubo de hemlisis aadimos una gota de suero de Coombs con
otra pipeta Pasteur de vidrio y mezclamos suavemente.
5. Por ltimo, centrifugamos el tubo a 1.000 r.p.m durante 1 minuto.

Resultados
Si hay aglutinacin, el resultado es positivo. Indica que en la membrana de los hemates hay
antgeno Du, y se clasifica la sangre como Rh positivo variante Du.

En el caso de no existir aglutinacin, se clasificar la sangre como Rh negativo.

La muestra sali Rh -
Conclusiones
En la prueba cruzada mayor se enfrenta suero del receptor con hemates del donante.
La prueba se debe realizar en medio salino y albuminoideo porque queremos saber si se
produce aglutinacin en alguno de los tres medios para descartar la transfusin si se
produce aglutinacin en alguno de ellos.
la prueba cruzada menorsSe realiza cuando se transfunde una gran cantidad de plasma, ya
que en este caso, la presencia de anticuerpos en la sangre del donante puede ser
peligrosa.
El suero antiglobulina de Coombs pone de manifiesto anticuerpos que se hayan quedado
fijados a la membrana eritrocitaria.
En la sangre del paciente buscamos la presencia del antgeno D dbil.
Si el control es positivo los resultados del anlisis nos dan que la sangre problema es Rh
positivo.
Bibliografa
http://deliamm96cuadernopracticashema14.blogspot.pe/2015/05/practica-prueba-
cruzada-mayor.html
http://guialaboratorioclinico.blogspot.pe/2014/12/factor-rh-y-factor-du.html
https://www.uv.mx/personal/bescobar/experiencias-educativas/manual-de-practicas-
de-inmunohematologia/
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2015/05/23/practica-no51-
prueba-cruzada-mayor/