BIOSEGURIDAD EN EL DIAGNOSTICO PARASITOLOGICO

Es necesario determinar el riesgo de un patgeno, de modo que pueda asignarse a un

grupo de riesgo. Se puede llevar a cabo una evaluacin posterior del riesgo basada en
el trabajo propuesto para determinar el nivel de contencin adecuado. Para determinar
el riesgo que plantea un patgeno particular para el hombre y para los animales es
necesario conocer si la infeccin por dicho microorganismo puede provocar una
enfermedad clnica y/o la mortalidad en humanos y animales, y adems si es
susceptible de fcil diseminacin de modo que pueda causar la enfermedad en
general a la poblacin humana y/o animal.

Existen requisitos adicionales aplicables a la contencin de los patgenos de animales

y a la prevencin de la extensin de sus infecciones a los animales. Para determinar
estos riesgos hay que conocer los aspectos epidemiolgicos del microorganismo y
otras propiedades, tales como su capacidad de infectar a los humanos y los animales,
su estabilidad en el medio, su capacidad de infectar por diferentes rutas de exposicin,
y su sensibilidad a tratamientos especficos o a la profilaxis. Es relativamente sencillo
disponer de esta informacin cuando se trabaja con un patgeno conocido, pero el
problema es mucho ms complicado cuando un laboratorio de diagnstico recibe
material clnico que puede estar infectado con diversos patgenos desconocidos,
algunos de los cuales pueden ser extremadamente peligrosos para la salud humana o
representan una amenaza importante para la poblacin animal.

Algunos de los aspectos a tener en cuenta a la hora de evaluar el riesgo son:

1. Conocimiento de la existencia de una infeccin humana y animal por el

microorganismo, o por microorganismos relacionados de caractersticas similares,
cualquier historia que lo relacione con una infeccin adquirida en el laboratorio, la
dosis infectiva y la gravedad de la enfermedad, y, finalmente, la produccin de toxinas
o sustancias alergnicas.

2. El volumen del cultivo que se maneja y la concentracin del microorganismo que

probablemente est presente (algunos procedimientos como la produccin de
antgenos o de vacunas, que requieren grandes cantidades de microorganismos,
entraan normalmente ms riesgos que las tcnicas con las que se intenta el
aislamiento del microorganismo).

3. El origen de la muestra, ya que, por ejemplo, es probable que las muestras

procedentes de animales silvestres contengan patgenos humanos o animales de un
tipo no encontrado normalmente.

4. La historia del aislamiento que se est procesando. Los patgenos en aislamiento

primario o durante los pases iniciales en cultivo son a menudo ms peligrosos que los
patgenos con un nivel de pases en cultivo ms elevado. En algunos casos, en
cambio, la patogenicidad puede aumentar por pases o subcultivos en diferentes
medios nutritivos.

5. Se debe tener en cuenta de forma especial la posibilidad de formacin de aerosoles

cuando se manejan muestras lquidas o, por ejemplo, durante las fases de trituracin,
homogeneizacin y centrifugacin.
6. La amenaza que el microorganismo pueda representar en animales de abasto o de
compaa o para la vida salvaje, independientemente de la que represente para el
personal del laboratorio. Se necesitan precauciones adicionales para el manejo y el
almacenamiento de agentes transmisores de enfermedades animales que provengan
del extranjero.

7. El estado fsico de los empleados. Por ejemplo, en caso de embarazo,

inmunodeficiencia o alergia, pueden requerirse precauciones especiales. En
ocasiones, se debe excluir a algunos individuos de ciertos tipos de trabajo que puedan
resultar especialmente peligrosos para ellos.

8. Se puede producir un elevado nivel de riesgo cuando algunos agentes, se inoculan

en animales. A fin de evaluar tal inoculacin, debera valorarse el riesgo que entraa y
tener en cuenta los siguientes factores:

i) La especie hospedadora en contraposicin a la especie inoculada.

ii) La cepa/el tratamiento y la concentracin del inculo.
iii) La ruta de la inoculacin.
iv) El tipo de alojamiento de los animales.
v) Tipos de recogida de muestras durante el experimento.

9. Algunos parsitos necesitan transmitirse por medio de vectores especficos o

requieren hospedadores intermediarios para completar sus ciclos de vida antes de
poder infectar a los animales y causar la enfermedad. En pases donde no existen
tales vectores u hospedadores intermediarios, o donde el clima o los factores
ambientales no propician su supervivencia, el agente patgeno representa un riesgo
menor para los animales que en pases donde tales vectores u hospedadores
intermediarios se dan de forma natural o pueden sobrevivir.

Antes de tomar las muestras, debe tenerse en cuenta el fin para el que se solicitan.
Dicho fin determinar el tipo y nmero de muestras necesarias para obtener resultados
vlidos. Siempre que se maneje material biolgico de animales vivos o muertos, debe
tenerse en cuenta el riesgo de contraer una enfermedad zoontica y, por lo tanto,
deben tomarse precauciones para evitar la infeccin humana. En caso de exmenes
post mrtem deben realizarse bajo las ms estrictas condiciones de asepsia posibles.
Hay que procurar evitar la contaminacin ambiental o el riesgo de que la enfermedad
se propague a travs de insectos o fomites. Debe organizarse la forma apropiada y
segura de deshacerse de animales y tejidos.

Se requieren bastante habilidad y cuidado para decidir qu muestras son apropiadas

para enviar al laboratorio. Las muestras recogidas deben ser representativas de la
enfermedad que se est investigando y de las lesiones observadas. Tambin debe
considerarse la fase de la enfermedad y el desarrollo de las lesiones, as como el tipo
de prueba/s que se van a utilizar.

REQUISITOS PARA TRABAJAR CON AGENTES INFECCIOSOS

El personal debe estar bien entrenado y plenamente al corriente de cualquier riesgo

para la salud asociado con su trabajo, as como de los procedimientos para informar
de cualquier incidente o accidente. Tambin se debera suministrar al personal una
tarjeta mdica con indicacin de los patgenos a los que puede estar expuesto. En
algunos casos, el personal puede ser vacunado de modo especial para suministrarle
proteccin adicional. Tal informacin resulta til en la prctica mdica en caso de que
se presente una enfermedad. Se recomienda la realizacin de exmenes mdicos
peridicos de los empleados y la realizacin de pruebas a los que trabajen con
microorganismos que causan enfermedades graves en humanos. Existe mucha
informacin sobre contencin de patgenos y se pueden construir sofisticados
aparatos y edificios enteros para controlar los microorganismos ms peligrosos segn
lo requieran las directrices, normas y regulaciones de cada pas.

Requisitos esenciales para todos los trabajos de laboratorio. Las necesidades

esenciales de cualquier trabajo con agentes infecciosos, por muy inocuos que puedan
ser, son las siguientes:

1. El laboratorio debe ser fcil de limpiar, con superficies impermeables al agua y

resistentes a los agentes qumicos. Deben tener una pila de lavado de manos y una
ducha de emergencia, incluyendo tambin un lavador de ojos en cada laboratorio para
los peligros de tipo qumico y de otro tipo que pueden estar presentes. Deben
establecerse procedimientos para una limpieza y desinfeccin frecuentes durante el
tiempo de trabajo y al finalizar el mismo.

2. Debe restringirse el acceso del personal al rea de trabajo. Cuando existe un riesgo
elevado de la presencia de patgenos, se precisan medidas adecuadas, como el
control electrnico de acceso.

3. En el laboratorio se debe utilizar ropa adecuada de proteccin, incluyendo batas y

vestimenta de laboratorio con mangas, zapatos cerrados, guantes desechables,
mscaras, gafas protectoras, caretas y respiradores oronasales que se deben quitar al
abandonar el laboratorio

4. La puerta del laboratorio debe cerrarse cuando hay trabajo en curso y debe existir
ventilacin por extraccin del aire de la habitacin. (Cuando se usan cabinas de
bioproteccin se debe tener cuidado en equilibrar los sistemas de ventilacin).

5. No se pueden guardar ni consumir alimentos o bebidas en el laboratorio (tales como

goma de mascar, caramelos, pastillas para la garganta y pastillas contra la tos).

6. No se debe fumar ni aplicarse cosmticos en el laboratorio.

7. No se debe pipetear con la boca.

8. Debe tenerse cuidado en reducir al mnimo la produccin de aerosoles.

9. Deberan implementarse planes de respuesta de emergencia para el caso de

derramamiento de materiales biopeligrosos (peligrosos para el hombre o los animales).
Entre los elementos de ese plan deben figurar desinfectantes efectivos para limpiar los
vertidos, descarte y descontaminacin de la ropa de proteccin contaminada, lavado
de manos y limpieza y desinfeccin de las mesas de trabajo.

10. Debe guardarse de forma segura el material de vidrio usado y cualquier otro
material de laboratorio contaminado. Los materiales de desecho deben transportarse
en contenedores resistentes a prueba de escapes. La basura debe esterilizarse en
autoclave, incinerarse o descontaminarse de algn otro modo antes de su evacuacin.
El material reutilizable debe descontaminarse por medios adecuados.

11. Nunca se eliminar material infeccioso por las pilas o fregaderos de laboratorio ni
ningn otro tipo de drenaje similar.

12. Cualquier incidente o accidente debe ser registrado y comunicado al oficial de

seguridad.

Nivel de contencin de patgenos del Grupo 2,

Adems de los puntos indicados anteriormente, se deben de utilizar cabinas

microbiolgicas de seguridad Clase I, II y III cuando exista la posibilidad de que se
generen aerosoles o cuando se manejen grandes cantidades de cultivo o exista una
necesidad real de proteger el producto biolgico.
Es necesaria la colocacin de seales en las puertas de entrada para indicar el peligro
existente y el nombre y nmero de telfono de las personas responsables.
Deberan colocarse dentro del laboratorio indicaciones de emergencia para advertir al
personal sobre los procedimientos a seguir en caso de vertidos de un patgeno o
cuando haya que evacuar el laboratorio debido a un fuego u otra emergencia.

Nivel de contencin de patgenos del Grupo 3,

Es aconsejable que el laboratorio est emplazado de forma aislada y slo se permita

la entrada a personal con cualificacin de nivel 3 debidamente entrenado. Se necesita
una adecuada sealizacin en todas las puertas de entrada, indicando los peligros
presentes y el nombre y nmero de telfono de la persona o personas responsables.

Dentro del laboratorio deben colocarse indicaciones de emergencia en las que se

indiquen al personal los procedimientos a seguir en caso de vertidos del patgeno o
ante la necesidad de evacuar el laboratorio a causa del fuego, el laboratorio debe estar
bajo presin negativa y deben vigilarse las presiones diferenciales; debe desarrollarse
un procedimiento que active una alarma en caso de exista un problema y debe haber
personal que responda a dicha alarma.

Se necesita un sistema de ventilacin que extraiga el aire del laboratorio mediante un

filtro de aire particulado de alta eficacia (filtros HEPA). Los filtros HEPA deben ser
revisados regularmente (normalmente cada ao); esto incluye los filtros HEPA en las
cabinas de bioprooteccin y en los conductos de salida de las habitaciones y equipo.
Debe poder cerrarse completamente el laboratorio para la fumigacin y este debe
tener una entrada con bloqueo de aire. Es necesario tratar los lquidos efluentes en
funcin del patgeno. Deben utilizarse cabinas biolgicas de Clase I, II o III cuando el
proceso a realizar pueda generar un aerosol. Adems, puede ser necesario que el
personal se duche a la salida del laboratorio y que dicho personal vista ropa especial
de laboratorio que se deja en el mismo cuando se abandona el edificio.

Nivel de contencin de patgenos del Grupo 4,

Se exigen las precauciones ms estrictas, incluyendo un sistema de acceso al edificio

a travs de compartimentos estancos y el mantenimiento del edificio bajo presin
negativa. El aire que penetra en el laboratorio debe ser filtrado a travs de un filtro
HEPA sencillo, y debe extraerse el aire a travs de un filtro HEPA doble en series.
Todo el trabajo realizado con material infectivo debe hacerse en cabinas de tipo II o III
junto con el uso de trajes de trabajo de una pieza con presin positiva.

Todas las aguas residuales del laboratorio, los efluentes normales y los de salida del
autoclave deben tratarse por medios adecuados para asegurar la destruccin de todo
el material infeccioso antes de que alcance el sistema de alcantarillado fuera del
laboratorio.
El personal debe ducharse y cambiarse de ropa antes de salir del edificio. Tambin
son aplicables otras precauciones descritas para el Grupo 3. En la actualidad, el uso
de trajes de una pieza con presin positiva es una norma internacionalmente aceptada
para lograr una contencin de nivel 4.

CABINAS DE SEGURIDAD MICROBIOLGICA

Se utilizan para los diferentes niveles de contencin, segn se ha descrito en la anterior

seccin C. Son de tres tipos:
Clase I: cabinas de apertura frontal diseadas de modo especial para suministrar proteccin al
operador y al medio ambiente, sin proteger el producto.
Clase II: cabinas de apertura frontal, a veces llamadas cabinas de flujo laminar recirculante.
Estn destinadas fundamentalmente a dar proteccin al operador, al producto, y al medio
ambiente.
Clase III: cabinas cerradas, con acceso frontal mediante guantes, que proporcionan el mayor
grado de contencin mediante separacin completa del trabajador y del trabajo realizado.
Algunas cabinas tienen extrable la parte frontal con los guantes y se conocen como cabinas de
clase III/I, es decir, se pueden utilizar de ambos modos.

Antes de tomar las muestras, debe tenerse en cuenta el fin para el que se solicitan. Dicho fin
determinar el tipo y nmero de muestras necesarias para obtener resultados vlidos. Siempre
que se maneje material biolgico de animales vivos o muertos, debe tenerse en cuenta el
riesgo de contraer una enfermedad zoontica y, por lo tanto, deben tomarse precauciones
para evitar la infeccin humana. En caso de exmenes post mrtem deben realizarse bajo las
ms estrictas condiciones de asepsia posibles. Hay que procurar evitar la contaminacin
ambiental o el riesgo de que la enfermedad se propague a travs de insectos o fomites. Debe
organizarse la forma apropiada y segura de deshacerse de animales y tejidos.

Se requieren bastante habilidad y cuidado para decidir qu muestras son apropiadas para
enviar al laboratorio. Las muestras recogidas deben ser representativas de la enfermedad que
se est investigando y de las lesiones observadas. Tambin debe considerarse la fase de la
enfermedad y el desarrollo de las lesiones, as como el tipo de prueba/s que se van a utilizar.

MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
Trabajar en un laboratorio aumenta el riesgo de enfermar por la exposicin a los agentes
biolgicos, sea a travs de accidentes con agujas o materiales cortopunzantes contaminados,
aerosoles, manejo de material contaminado o por falta de vacunacin.
El personal involucrado en los diferentes procesos para el diagnstico debe aplicar las medidas
de bioseguridad
Se deben controlar las medias necesarias aplicables a: El personal. La vestimenta. Los
ambientes. La obtencin de muestras. El envo de muestras al laboratorio. Los casos de
accidentes. El laboratorio.

MEDIDAS DE PROTECCION
Lavarse las manos cada vez que sea necesario. Los objetos afilados y punzantes deben
manejarse con sumo cuidado. Desinfectar, esterilizar o descartar adecuadamente los
instrumentos despus de usarlos. . Usar guantes cada vez que maneje sangre o productos de
sangre as como mascarilla, bata de proteccin, anteojos de proteccin, segn los
requerimientos de cada procedimiento. Cubrir cualquier corte o abrasin de las manos con
adhesivos. Cuidar de punzarse con cualquier instrumento agudo que haya estado en contacto
con sangre. Nunca utilizar lancetas o agujas ms de una vez. Cualquier material contaminado
con sangre, deber ser colocado en un envase con cloro o hipoclorito de sodio al 1%, y luego
para mayor seguridad disponer su entierro o incineracin.

Evaluacin de riesgos biolgicos

Derrames en la recepcin de muestras

Pueden ser frecuentes, casi siempre por envases mal cerrados. Es imprescindible trabajar con
guantes y cerca de una estacin de seguridad. De preferencia todo material debe ser
manejado en una CSB, todas las muestras que llegan al laboratorio son tericamente de
diagnstico desconocido. Los derrames tambin se pueden producir en los laboratorios, en
todo caso de exposicin con material biolgico seguir las recomendaciones

Ruptura en la centrfuga de tubos con material infeccioso

Frente a estas situaciones se exige siempre la presencia de un representante del CB. En

ocasiones se puede detectar el accidente antes de abrir la centrfuga, si se ha estado presente
durante el proceso de centrifugacin, por el cambio de ruido en el funcionamiento de la
mquina. Como esto no siempre sucede, debe existir un entrenamiento para cuando se
observe el accidente al abrir la centrfuga:

- Cerrar la centrfuga y hacer salir inmediatamente a todo el personal prescindible del rea.

- El personal encargado del manejo de este problema debe protegerse con gafas, guantes, y
ropa protectora.

- Cubrir el material derramado con algodn embebido en desinfectante, debe asegurarse que
la centrfuga quede desinfectada y mantener la centrfuga cerrada durante 30 minutos.

- Luego abrir la centrfuga muy suavemente, colocar todas las muestras no rotas en una
gradilla o recipiente hermtico (bolsa de color rojo) y llevarlas a una CSB para manipularlas all.
- Limpiar, sacar los restos con guantes adecuados e introducirlos en bolsas de color rojo.

- Desinfectar la centrfuga. - Limpiar la cuba con alcohol etlico al 70%