Aplicacin de tincin acido-alcohol Resistente, para la identificacin de Micobacterium

Teberculosis en esputo

El esputo es una materia procedente de los pulmones y de los bronquios que se obtiene a
travs de tos profunda. Esta secrecin con apariencia de moco puede llegar a infectarse,
contener clulas anormales que pueden llevar al diagnstico de afecciones del tracto
respiratorio inferior. Conociendo las principales bacterias nativas de la orofaringe y las
patgenas del tracto respiratorio procesaremos la muestra de tal manera que nos permita la
identificacin de los microorganismo que pueda contener, haciendo uso de tinciones.

Tincin de Ziehl-Neelsen

Materiales:

Alcohol acido (Etanol 95% HCL 3%)

Fuccina fenicada
Azul de metileno
Mechero Bunsen
Agua destilada

Materiales biolgicos:

Esputo.

Procedimiento:

1. Tomar una parte del esputo, ubicarlo en la lmina porta objeto y realizar el frotis
correspondiente con la muestra biolgica (esputo de posible paciente con
tuberculosis).
2. Fijar el frotis con la ayuda de la llama del mechero bunsen.
3. Aplicar la FUCSINA FENICADA, a la muestra en un periodo de 3-5 min.
4. Pasado el tiempo indicado, realizar el flameado TRES HUMOS (haciendo uso del
mechero bunsen), esto ayudara a disolver las ceras formadas en la muestra.
5. Decolorar con alcohol acido, logrado quitar el colorante inicial.
6. Aplicar coloracin Azul de metileno, este servir de contraste en el proceso de
observacin.
7. Lavar, secar y observar al microscopio.

Se observarn al microscopio mediante el objetivo 100X y con aceite de inmersin.

Resultados:

Los bacilos tuberculosos se observan como filamentos o bastones finos, ligeramente

curvados de color fucsia. Se deben examinar sistemticamente 100 campos
microscpicos y contar el n de bacilos cido-alcohol resistentes (BAAR) identificados
en cada uno. Para no repetir campos microscpicos, se deben recorrer las
preparaciones en lneas rectas.