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Biblioteca Digital - Direccin de Sistemas de Informtica y Comunicacin

NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

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EFECTO DE UNA CREMA A BASE DE TELA DE ARAA

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Loxosceles laeta SOBRE LESIONES DRMICAS INDUCIDAS
EN Mus musculus var. Swiss. BI
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TESIS II
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PARA OPTAR EL GRADO ACADMICO


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DE
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BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUMICA


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AUTORAS: HORNA PINEDO PAOLA ELIANA


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INTI RODRGUEZ DIANA PAULA

ASESORA: Q.F. CARMEN ROSA SILVA CORREA

TRUJILLO - PER
2016

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DEDICATORIA

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A nuestros padres, por la semilla de

superacin que han sembrado en


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nosotras, por su apoyo emocional y


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sobre todo espiritual que cimientan la base


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de nuestro desarrollo
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profesional y personal.
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AGRADECIMIENTO

A Dios

por mostrarnos da a da que con humildad,

paciencia y sabidura todo es posible.

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A nuestra familia, por su comprensin

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y estmulo constante, adems de

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su apoyo incondicional a lo largo

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de nuestra carrera. BI
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A nuestra asesora Carmen Silva y


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a nuestro maestro Lizardo Cruzado,


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quienes nos brindaron su valiosa y


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desinteresada orientacin y gua


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para el desarrollo de esta investigacin.


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A todos nuestros amigos y maestros

quienes siempre nos han apoyado

desde el inicio de esta investigacin

hasta su culminacin;

siempre de forma altruista y solidaria.

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NDICE

RESUMEN 51

ABSTRACT 7

I.- MARCO TERICO 8

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II.- DISEO DE CONTRASTACIN 12

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III.- RESULTADOS 20

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IV.- DISCUSIN 27
IA
AC

V.- CONCLUSIONES 30
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VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 31


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ANEXOS 34
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B LI
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JURADO DICTAMINADOR

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Mg. Jos Lizardo Cruzado Razco

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Presidente

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Dr. Roberto Osmundo Ybaez Julca


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Miembro
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Mg. Carmen Rosa Silva Correa


Miembro

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PRESENTACIN

SEORES MIEMBROS DEL JURADO

Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de la Facultad de Farmacia y


Bioqumica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra honorable
consideracin y elevado criterio el presente Informe de Tesis II, titulado: Efecto de una
Crema a base de Tela de Araa Loxosceles laeta sobre Lesiones Drmicas inducidas en

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Mus musculus var Swiss.

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Es propicia la oportunidad para evidenciar nuestro ms sincero reconocimiento a

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nuestra Alma Mater y toda su plana docente que la conforma, que con su capacidad,

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buena voluntad y enseanzas que imparten da a da contribuyen positivamente a
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nuestra formacin profesional.
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Seores miembros del jurado, dejamos a vuestra consideracin la calificacin del


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presente trabajo.
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Las autoras.
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RESUMEN

Esta investigacin se desarroll con el objeto de demostrar el efecto cicatrizante


de una crema a base de tela de araa Loxosceles laeta sobre lesiones drmicas inducidas
en Mus musculus var Swiss. Los animales de experimentacin se dividieron en 3 grupos
al azar, conformados por 10 especmenes cada uno, a los cuales se les indujo lesiones
drmicas. Al grupo testigo no se le aplic tratamiento alguno, mientras que, a los grupos
problema: I y II se le aplic la crema formulada a base de tela de araa al 0,05 % y 0,1
%; P/P respectivamente, en la maana, tarde y noche durante 6 das. Diariamente se
realiz el control fotogrfico y la medicin de las lesiones drmicas. Al finalizar la

A
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experiencia se determin que existe diferencia estadsticamente significativa entre el

IM
grupo testigo y grupos problema, y entre los grupos problema I y II (p<0.05). El anlisis

U
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histopatolgico de los grupos determin que existe una intensa reepitelizacin entre los

O
grupos problema I y II en comparacin con la discreta reepitelizacin e intensa
BI
Y
proliferacin fibroblstica del grupo testigo. Se concluye que las cremas a base de tela
IA

de araa Loxosceles laeta poseen efecto cicatrizante sobre lesiones drmicas inducidas
AC

en Mus musculus var Swiss. La crema elaborada a base de tela de araa Loxosceles laeta
M

al 0,1% P/P posee mayor efecto.


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PALABRAS CLAVE: Lesiones drmicas, cicatrizacin, crema, tela de araa, Loxosceles


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ABSTRACT

This research was conducted in order to demonstrate the healing effect of a cream
made of fabric spider Loxosceles laeta in skin lesions induced in Mus musculus var
Swiss. Experimental animals were divided into 3 groups randomly, formed by 10
specimens each, which were induced skin lesions. The control group will not be applied
any treatment, while the problem groups I and II was applied cream formulated with
cobweb 0.05% and 0.1%; P / P respectively in the morning, afternoon and evening for 6
days. Daily photographic control and measurement of dermal lesions was conducted.
After the experience is determined that there is statistically significant difference

A
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between the control group and group problem, and the problem between I and II (p

IM
<0.05) groups. Histopathological analysis of groups determined that there is intense

U
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reepithelialization problem between groups I and II compared to the discrete

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BI
reepithelialization and intense fibroblastic proliferation control group. We conclude that
Y
based creams spider Loxosceles laeta have healing effect on skin lesions induced in
IA

Mus musculus var Swiss. The cream produced from fabric spider Loxosceles laeta 0.1%
AC

P / P has more effect.


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KEYWORDS: Skin lesions, cicatrization, cream, web spider, Loxosceles.


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I.- MARCO TERICO

La piel es un rgano de proteccin flexible y elstico, recubre toda la


superficie del cuerpo y representa aproximadamente el 5% del peso corporal.
Desempea un papel importante en la regulacin trmica, en la deteccin de los
estmulos exteriores y en la excrecin de materiales de desecho y toxinas 1,2,3.

Se encuentra constituida estructuralmente por tres capas diferenciadas:


Epidermis (epitelio), Dermis (matriz de tejido conectivo) e Hipodermis (tejido

A
adiposo), incluidas dentro de estos tres estratos se encuentran algunas estructuras

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importantes como son los anexos cutneos: glndulas sudorparas, ecrinas y

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apocrinas, folculos pilosos y glndulas sebceas; adems contiene vasos

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sanguneos, vasos linfticos, nervios y estructuras nerviosas especializadas 1,2,4.

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La piel al ser un rgano externo que recubre todo el cuerpo est expuesto a
IA
AC

una serie de daos, como lesiones cutneas o heridas, las cuales se pueden clasificar
M

segn la capa afectada. Las heridas superficiales afectan solo la epidermis, las de
R

profundidad parcial afectan la dermis y las de profundidad total llegan hasta el


FA

tejido subcutneo 1,4,5.


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A

Al tratarse de una lesin cutnea, ocasionada accidentalmente, cualquier


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persona es sensible a padecerla, no existiendo una poblacin diana especfica. Es


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conveniente tener en cuenta, que tanto en la infancia como en la vejez son


B LI

poblaciones con caractersticas especiales a la hora de enfrentarse a este tipo de


BI

accidentes 6,7.

La cicatrizacin es el proceso por el cual se lleva a cabo la reparacin de


heridas dando como resultado final la formacin de un tejido cicatrizal; incluye tres
fases (inflamatoria, proliferativa y de reparacin) las cuales se presentan en una
forma secuencial, abarcando problemas de tiempo especfico; adems tienen
elementos celulares y agentes extracelulares que las caracterizan 1,5,7.

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En muchas ocasiones el dar una solucin adecuada para la cicatrizacin de


heridas se ve limitado ya sea por razones econmicas o por falta de accesibilidad a
medicamentos. Algunos de los tratamientos convencionales, como el uso de
corticosteroides y antimicrobianos, principales medicamentos para el tratamiento de
las heridas, han sido muy eficaces, no obstante, tambin han causado diversos
efectos secundarios, entre los que podemos encontrar supresin adrenal, reacciones
alrgicas, metahemoglobinemias, hemlisis, etc., por lo cual ha sido necesario
recurrir a otro tipo de terapias 7,8.

A
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Adems de existir tratamientos convencionales, en la actualidad las personas

IM
recurren a tratamientos alternativos con la finalidad de que se lleve adecuadamente

U
la reparacin de las heridas en las personas que lo requieren. Entre los tratamientos

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alternativos se encuentran: la electroestimulacin, hidroterapia, bioingeniera de la
BI
piel, rayos lser, oxgeno hiperbrico, diodos de emisin de luz, terapia de presin
Y
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negativa, y la medicina tradicional a travs de plantas medicinales, entre otros,


AC

como el uso popular de tela de araa sobre heridas 7,9.


M
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FA

Las telas de araa son estructuras altamente especializadas, surgidas como


E

resultado de ms de 400 millones de aos de presin evolutiva sobre las especies


D

que las construyen. En algunos lugares, no solo en nuestro pas la tela de araa es
A
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usada comnmente en la curacin de heridas como un eficiente tapn de


TE

hemorragias adems de atribursele una posible propiedad antimicrobiana


O
LI

contribuyendo al proceso de cicatrizacin. Se encuentra compuesta de protenas


B
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tales como la espidrona I y espidrona II que tendran la finalidad de llevar a cabo


este proceso 9,10,11,12.

Un estudio realizado en Lima por Snchez L, Flores D. el ao 2005, el cual


tuvo como objetivo: Demostrar la actividad cicatrizante de una crema formulada
con extracto de seda de araa Scytodes sp en heridas inciso inducidas en ratas, tuvo
como resultado: que el tiempo promedio de cicatrizacin para los grupos A (crema
evanescente), grupo B (crema a base de seda de araa Scytodes sp) y grupo C
(crema colagenasa), fueron 12,9; 9,75 y 12,91 das, respectivamente, presentndose
diferencias significativas estadsticamente entre el grupo tratado con la crema de

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seda de araa y los grupos controles. El estudio concluy que la crema elaborada
del extracto de seda de araa demostr una mejor actividad cicatrizante 13.

Otro estudio realizado en Mxico por Flores S. et al. En el ao 2009, en el


cul se elabor una pomada cicatrizante a base de tela de araa; se obtuvieron como
resultados: que a los grupos de ratones que se les aplic la pomada diariamente
durante un periodo de 15 das (0,05 mg y 0,15 mg respectivamente) se pudo
observar un periodo de cicatrizacin de 15 y 7 das respectivamente. El estudio
concluy que la tela de araa result ser efectiva para favorecer la cicatrizacin por
primera intencin. As como tambin se observ una cicatrizacin proporcional a la

A
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cantidad de activo en la pomada 14.

IM
U
En la actualidad las virtudes teraputicas de las araas y sus sedas han sido

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O
reconocidas y apreciadas por lo que es necesaria la bsqueda de nuevos productos
BI
que nos permitan facilitar el uso de sta en el campo se la salud. Es necesario
Y
IA

realizar ms investigaciones sobre el efecto cicatrizante que se le atribuye a la tela


AC

de araa con el objeto de poder sintetizar nuevos medicamentos en base a las


M

sustancias que le otorgan dicha propiedad y que sean accesibles a la poblacin


R
FA

9,10,12
.
E
D

Considerando los componentes de la tela de araa y las propiedades que se


A
C

le atribuyen en su uso tradicional, adems de la escaza informacin cientfica que


TE

avale dicha propiedad se pretende realizar este trabajo de investigacin evaluando


O
LI

el efecto de una crema a base de tela de araa Loxosceles laeta sobre lesiones
B
BI

drmicas inducidas en Mus musculus var. Swis para comprobar su efecto


cicatrizante y para fijar las bases cientficas de posteriores investigaciones y
aplicaciones en el campo de la salud.

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Frente a ello se plantea el siguiente problema:

Cul es el efecto de una crema a base de tela de araa Loxosceles laeta


sobre lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var. Swis?

En respuesta al problema se plantea la hiptesis:

Las cremas a base de tela de araa Loxosceles laeta poseen efecto


cicatrizante sobre lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var. Swis.

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II.- DISEO DE CONTRASTACIN

2.1. MATERIALES

2.1.1 Material Biolgico:

- 30 especmenes Mus musculus var. Swiss adultos, machos,


seleccionados al azar, con pesos promedio de 18g 24g y de 27 - 34
das de edad, aparentemente sanos; adquiridos en el Centro Nacional
de Productos Biolgicos del Instituto Nacional de Salud. Los
especmenes fueron alojados durante la experimentacin en el Bioterio

A
IC
de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional

IM
de Trujillo y alimentados con dieta estndar y agua ad libitum.

U
- 80 araas de la especie Loxosceles laeta, capturadas en reas urbano-

Q
O
marginales de los distritos: Trujillo, El Porvenir y Laredo de la
BI
Y
provincia de Trujillo; todas aparentemente adultas y sanas.
IA
AC

2.1.2 Material de vidrio:


M
R

- 02 Vasos de precipitacin 150 mL


FA

- 02 Varillas de vidrio
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- 01 Probeta graduada 20 mL
A
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- 03 Pipetas 10 mL, 5 mL, 1 mL


TE
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2.1.3 Soluciones y Reactivos:


B
BI

- 5 L de Agua destilada
- 1 L Solucin Salina Fisiolgica
- 1 L de Alcohol yodado 70%
- 1L Alcohol etlico 70%
- 1 L Formol 40%
- 1 L Cloroformo
- 250 g Propilenglicol
- 50 g Cera lanette

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2.1.4 Insumos mdicos/cosmticos:

- Lidocana Clorhidrato 2% crema x 10 g


- Depil crema depilatoria x 150 g

2.1.5 Material estril:

- 30 Bisturs
- 100 Frascos estriles de boca ancha con tapa
- 02 Frascos de polietileno, boca ancha con tapa
- 02 Frascos estriles de vidrio, con tapa

A
IC
- 01 Caja de guantes quirrgicos estriles N 7

IM
- 01 Caja de mascarillas

U
Q
- 30 g Algodn hidroflico

O
- 100 Hisopos estriles
BI
Y
- 01 Pinza de metal estril
IA

- 01 Estuche de diseccin
AC
M
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2.1.6 Equipos de laboratorio:


FA

- Estereoscopio
E
D

- Cocina elctrica.
A
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- Balanza Analtica OHAUSS


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2.2. TCNICAS Y MTODOS

2.2.1. Localizacin de las araas:

Se realiz la localizacin de las araas en las zonas urbano-


marginales de los distritos: Trujillo, El Porvenir y Laredo de la
provincia de Trujillo; todas aparentemente adultas y sanas. sta
operacin se inici con la bsqueda en lugares oscuros de zonas
poco habitadas, paredones, debajo de piedras y troncos secos,
debajo de cuadros, muebles y objetos acumulados con poco

A
IC
movimiento y sin utilizar 9.

IM
U
Q
O
2.2.2. Captura de las araas:
BI
Y
Se utilizaron frascos estriles de boca ancha y una esptula de
IA
AC

madera para introducir los arcnidos dentro de frascos, a las tapas


de los frascos previamente se les hizo pequeos agujeros para
M
R

permitir el paso del aire 9.


FA
E
D
A

2.2.3. Identificacin taxonmica de las araas:


C
TE

La identificacin taxonmica de las araas se realiz con la


O
LI

participacin de los docentes de la ctedra de Toxicologa de la


B
BI

Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional de


Trujillo, mediante observacin estereoscpica, visualizndose la
ubicacin de los tres pares de ojos, as como de una pequea
tincin en el cefalotrax que asemeja a un violn invertido, rasgos
caractersticos de las araas de la especie Loxosceles laeta, aquellas
araas que no presentaron stos rasgos caractersticos fueron
separadas y devueltas a su hbitat natural 9.

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2.2.4. Crianza de las araas y produccin de la tela:

Una vez identificadas, las araas fueron colocadas individualmente


dentro de frascos estriles. Los frascos fueron sellados con tapas
previamente agujereadas para permitir el ingreso de aire 9,12.

2.2.5. Recoleccin de la tela de araa:

Las araas en cautiverio produjeron tela durante 3 semanas, para


retirar la tela de araa se emple una pinza metlica, previamente

A
desinfectada con alcohol al 70% y se procedi a recolectar la tela,

IC
IM
la cual fue almacenada en un frasco de vidrio estril con tapa, se

U
rotul y conserv hasta su uso 9,12.

Q
O
2.2.6. Preparacin de las cremas cicatrizantes:
BI
Y
IA
AC

Formulacin: Para un total de 30 g


M
R
FA

Componentes Crema Crema


(g) 0,05 % 0,1 %
E
D
A

Tela de araa 0,015 0,030


C
TE

Cera Lanette 4 4
O

Propilenglicol 3 3
B LI

Agua destilada (c.s.p.) 22.99 22,97


BI

Tcnica operatoria:

Se siguieron los pasos siguientes para la elaboracin de todas las


cremas y segn la concentracin se utiliz la cantidad de insumos
referida en el cuadro anterior.

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En un vaso de precipitacin de 150 mL se procedi a mezclar la


cera lanette y el agua destilada a fuego lento. Se agit hasta
completa fundicin de la cera. Se procedi a retirar del fuego la
mezcla fundida y se mantuvo en constante agitacin.

En otro recipiente se mezcl Propilenglicol y la tela de araa


hasta su disolucin.

El preparado anterior se verti en el primer recipiente y se


continu agitando constantemente hasta enfriarse y formarse una

A
IC
pasta de aspecto homogneo. Finalmente se envas y rotul, y se

IM
guard a temperatura ambiente hasta su uso.

U
Q
O
Los preparados galnicos se elaboraron en el Laboratorio de
BI
Toxicologa de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la
Y
IA

Universidad Nacional de Trujillo, cumpliendo con las Buenas


AC

Prcticas de Manufactura de Productos Galnicos y Recursos


M

Teraputicos Naturales 29.


R
FA
E

2.2.7. Control de Calidad de las cremas a base de tela de araa


D
A
C

Se realiz el control de calidad de todas las cremas preparadas a


TE

base de tela de araa, considerando los siguientes aspectos:


O
B LI

Descripcin de las caractersticas fsicas


BI

Determinacin de pH
Ensayo microbiolgico.

Los ensayos de control de calidad se hicieron en el Laboratorio de


Farmacia de INASSA (International Analytic Service S.A.),
Laboratorio perteneciente a la Red de Laboratorios Oficiales de
Control de Calidad de Medicamentos del Sector Salud,
cumpliendo con las Normas de Buenas Prcticas de Laboratorio.

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2.2.8. Distribucin de los animales de experimentacin:

La distribucin de los animales de experimentacin se hizo en 4


grupos, siguiendo el criterio del azar:

GRUPO TESTIGO: 10 especmenes de Mus musculus var.


Swiss a los que se les realiz las lesiones drmicas y no se les
aplic ningn tratamiento.

GRUPO PROBLEMA I: 10 especmenes de Mus musculus


var. Swiss a los que se les realiz las lesiones drmicas y se les

A
IC
administr la crema a base de tela de araa al 0,05% P/P tres

IM
veces al da (7am/3pm/11pm), durante 6 das. Se aplic la

U
Q
crema con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la

O
lesin drmica.
BI
Y
GRUPO PROBLEMA II: 10 especmenes de Mus musculus
IA
AC

var. Swiss a los que se les realiz las lesiones drmicas y se les
M

administr la crema a base de tela de araa al 0,1 % P/P tres


R
FA

veces al da (7am/3pm/11pm), durante 6 das. Se aplic la


crema con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la
E
D

lesin drmica.
A
C
TE

2.2.9. Preparacin de los animales de experimentacin:


O
B LI
BI

Los animales fueron acondicionados en su nuevo ambiente por 1


semana.

24 horas previo a la induccin de las lesiones drmicas se procedi


a realizar la depilacin de la zona dorsal de los especmenes, lo que
constituy la zona de trabajo empleando crema depilatoria Depil
para piel sensible, se coloc la crema depilatoria por un periodo de
5 minutos y se retir con ayuda de algodn. Este procedimiento se
realiz un da antes para descartar la aparicin de alguna reaccin
alrgica 15,16.

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2.2.10. Induccin de lesiones drmicas en los animales de


experimentacin:

Modelo experimental: Modelo in vivo de lesin inducida por


incisin en Mus musculus.

Previo a la induccin de las lesiones se desinfect la zona de


trabajo con alcohol yodado y se aplic anestsico en crema:
Lidocana al 2%, va tpica. Se procedi a realizar el corte
perpendicularmente al eje longitudinal del ratn con bistur, de
aproximadamente 1 cm de largo por 2 mm de profundidad16.

A
IC
IM
2.2.11. Administracin del tratamiento

U
Q
O
La aplicacin de los tratamientos se realiz tres veces al da
BI
(7am/3pm/11pm), durante un perodo de 6 das. Se aplicaron las
Y
IA

cremas con un hisopo en cantidad suficiente para cubrir la lesin


AC

drmica.
M
R
FA

2.2.12. Evaluacin del efecto cicatrizante:


E

Se observ el tiempo de cicatrizacin de las heridas y se realizaron


D
A

los controles fotogrficos respectivos durante todo el perodo


C
TE

experimental. Se tomaron diariamente las medidas de la longitud


O

craneocaudal de las lesiones, haciendo uso de una regla


LI

milimetrada, obtenindose un promedio de la longitud de las


B
BI

lesiones cada da y por grupo de estudio durante el tiempo de


experimentacin 14,15.

2.2.13. Examen Histopatolgico:

Los animales fueron sacrificados posteriormente a la observacin


de la cicatrizacin del primer grupo. Los ratones fueron colocados
en una campana de vidrio, donde se introdujo una torunda de
algodn embebido en 1mL de cloroformo, luego se sell con la

18

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tapa. Se obtuvieron las muestras de piel realizando un corte de 1,5


cm de largo y 1 cm de ancho alrededor de la cicatriz. Estas
muestras fueron conservadas en frascos estriles con formol diluido
al 10% para su anlisis histopatolgico. Con estas muestras se
realizaron las observaciones microscpicas y se evaluaron los
diferentes tratamientos administrados para determinar el ms
efectivo 16.

2.2.14. Anlisis estadstico de los resultados:

A
IC
Los resultados de las mediciones de las lesiones, fueron expresados

IM
como promedio y desviacin estndar, y analizados

U
Q
estadsticamente tomando como parmetro central la media

O
aritmtica.
BI
Y
IA

El efecto cicatrizante de la crema a base de tela de araa Loxosceles


AC

laeta en Mus musculus var. Swiss fue analizado empleando


M
R

ANOVA y posteriormente la prueba HSD de Tukey. Para inferir en


FA

base a los resultados se consider un nivel de significancia de 0,05.


E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

19

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III.- RESULTADOS

Tabla 1. Tamao promedio de las lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var
Swiss. durante el tiempo de experimentacin.

Tamao promedio de lesiones drmicas (cm)


GRUPOS
DA 1 DA 2 DA 3 DA 4 DA 5 DA 6

TESTIGO 1.1250 + 0.1602 1.1250 + 0.1602 1.1250 + 0.1602 1.0500 + 0.1472 1.0000 + 0.1211 0.9000 + 0.0753

PROBLEMA I
1.0500 + 0.1225 1.0500 + 0.1225 0.8833 + 0.0753 0.7667 + 0.0516 0.4833 + 0.0753 0.3667 + 0.0516
(0.05%)

A
IC
PROBLEMA II
1.0833 + 0.1941 1.0500 + 0.1517 0.9833 + 0.1472 0.8500 + 0.1517 0.4833 + 0.0983 0.0833 + 0.0983

IM
(0.1%)

U
Q
+ Los valores expresan el promedio DSM de n = 10 ratones; p<0,05

O
BI
Y
1.2000
IA
AC

1.0000
M
R
Tamao de Herida (cm)

FA

0.8000
E
D

0.6000 TESTIGO
A
C

PROBLEMA I
TE

0.4000 PROBLEMA II
O
B LI

0.2000
BI

0.0000
0 1 2 3 4 5 6 7
Tiempo (das)

Figura 1. Tamao promedio de las lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var
Swiss. durante el tiempo de experimentacin.

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DAS PROBLEMA PROBLEMA


TESTIGO
I II

A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
3
IA
AC
M
R
FA
E
D

4
A
C
TE
O
B LI
BI

Figura 2. Evolucin de las lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var Swiss.
durante el periodo experimental

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Tabla 2. Variacin del tamao promedio de las lesiones drmicas inducidas en Mus
musculus var. Swiss durante los das de experimentacin.

DAS F Probabilidad

DA 1 0.250000000 0.936513435

DA 2 0.481481481 0.787210026

DA 3 3.849162011 0.008192466

DA 4 5.671875000 0.000850755

DA 5 20.73782772 0.00000000636895033

A
IC
DA 6 62.11111111 0.00000000000000646

IM
U
Nivel de confianza de 95% y Nivel de significancia de 5% (p<0,05).

Q
O
BI
Y
IA
AC

Tabla 3. Variacin Honestamente Significativa (prueba HSD de Tukey) de las lesiones


M

drmicas inducidas en Mus musculus var. Swiss a partir del tercer da de


R

experimentacin.
FA
E
D

DA 3 DA 4 DA 5 DA 6
A

VALOR HSD 0.175058456 0.209351733 0.213802219 0.175546765


C
TE
O

Resultados P1-T=0.2000 P1-T=0.2500 P1-T=0.4833 P1-T=0.5167


B LI

P2-T=-0.4833 P2-T=0.8000
BI

P2-P1=0.2833

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c
d

A
a

IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA
AC

c
M

b
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI

Figura 3. Corte Histopatolgico de piel de Mus musculus var. Swiss.


BI

Grupo Testigo. Tincin Hematoxilina-Eosina. 10X


a. Tejido de granulacin b. Proliferacin fibroblstica c. Inflamacin crnica
y aguda con moderada cantidad de vasos nuevos d. Escasa reepitelizacin.

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A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA
AC
M
R

b
FA
E
D
A
C
TE
O
LI

Figura 4. Corte Histopatolgico de piel de Mus musculus var. Swiss.


B

Grupo Problema I (Crema 0.05%). Tincin Hematoxilina-Eosina. 10X


BI

a. Reepitelizacin b. Fibras colgenas

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A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA

a
AC
M
R

b
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

Figura 5. Corte Histopatolgico de piel de Mus musculus var. Swiss.


Grupo Problema II (Crema 0.1%). Tincin Hematoxilina-Eosina. 10X
a. Mayor Reepitelizacin b. Mayor Fibras colgenas

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Tabla 4. Anlisis de Control de Calidad de las cremas elaboradas a base de tela de


araa Loxosceles laeta.

CREMA CREMA
ENSAYO
0,05 % 0,1 %

Crema homognea de Crema homognea de


Caractersticas Fsicas color blanco a color blanco a
(Organolpticas) ligeramente griscea, ligeramente griscea,
con olor caracterstico. con olor caracterstico.

pH 7,41 7,45

A
Microbiolgico:

IC
Mesfilos aerobios. < 103 UFC < 103 UFC

IM
Hongos y Levaduras < 102 UFC < 102 UFC

U
Patgenos Ausente Ausente

Q
O
BI
Y
IA
AC
M
R
FA
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A
C
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O
B LI
BI

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IV.- DISCUSIN

En la tabla 1, se muestran las medidas promedio (en centmetros) de las lesiones


drmicas inducidas en los grupos de estudio. Se observa que en el grupo problema I, la
disminucin de la longitud de las lesiones se presenta al tercer da (de 1,0500 a 0,8833
cm) y en el grupo problema II a partir del segundo da (1,0833 a 1,050 cm), en
comparacin con el grupo testigo, que muestra diminucin de medidas a partir del
cuarto da (de 1,1250 a 1,0500 cm). Al finalizar la experiencia (sexto da) las medidas
de las lesiones fueron mucho menores para los grupos problema II y problema I (0,0833
y 0,3637 respectivamente) en comparacin con el grupo testigo (0,9000 y 0,9333 cm).

A
IC
IM
En la Figura 1, se compara el tamao de las lesiones en los grupos de estudio con

U
respecto a los das de tratamiento, se puede afirmar que, al sexto da el menor tamao de

Q
O
las lesiones se present en el grupo problema I y II tratados con crema a base de tela de
BI
araa en comparacin con el grupo testigo que no fue tratado con crema a base de tela
Y
IA

de araa.
AC
M

Se puede visualizar en la Fig. 2, de forma macroscpica, la evolucin de las


R
FA

lesiones drmicas durante los das tratamiento, observndose que al sexto da, en el
E

grupo problema II el cierre completo de la herida mientras que en el grupo problema I


D

es prcticamente completo, en comparacin con el grupo testigo que presenta herida


A
C

abierta an al mismo da de finalizada la experiencia. Se observa tambin una mejor


TE

apariencia de la piel en los grupos tratados con crema de tela de araa a diferencia del
O
LI

grupo control que no recibe tratamiento con esta crema.


B
BI

El Anlisis de Varianza (ANOVA) mostrada en la Tabla 2, demuestra que existe


diferencia estadsticamente significativa los das 3, 4, 5 y 6 en al menos un grupo de
estudio, con 95% de confianza (p<0,05); en contraste con los das: 1 y 2 de la
experiencia.

Para determinar en qu grupos de estudio a partir del tercer da existe mayor


diferencia significativa, se utiliz la prueba HSD de Tukey. Los resultados se resumen
en la Tabla 3, donde se muestran los grupos en los que hubo una diferencia
honestamente significativa desde el tercer al sexto da en el que finaliz el tratamiento.

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Los grupos Problema I y II presentan mayor diferencia significativa a partir del


tercer da con respecto al grupo Testigo. Esto hace referencia a que los grupos de
estudio que fueron tratados con las cremas hechas a base de tela de araa Loxosceles
laeta, obtuvieron mejores resultados, promoviendo de forma ms rpida el proceso de
cicatrizacin, adems de observarse una mejor apariencia de la cicatriz, segn Fig. 2.
Estos hallazgos muestran gran similitud a los reportes hechos por Snchez L. y Flores
S., los cuales evidencian el beneficio del uso de productos cicatrizantes hechos a base de
tela de araa en los procesos de cicatrizacin de heridas pero no mencionan hallazgos en
cuanto a una mejor apariencia de stas 13,14.

A
IC
IM
Las virtudes teraputicas de las araas y sus sedas han sido reconocidas y

U
apreciadas desde la antigedad, y muchas de ellas sin sustento cientfico. La tela de

Q
O
araa se ha utilizado como hemosttica, astringente, febrfuga e incluso como
BI
ansioltica. Se conoce por uso tradicional que la tela de araa se emplea comnmente en
Y
IA

la curacin de heridas como un eficiente tapn de hemorragias adems de atribursele


AC

una posible propiedad antimicrobiana contribuyendo al proceso de cicatrizacin. La


M

especie de la araa del presente estudio posee una tela de consistencia algodonosa de
R
FA

color blanco ligeramente griscea y de apariencia desordenada que le sirve de refugio y


para atrapar a sus presas 23,24.
E
D
A
C

La composicin qumica elemental de la tela de araa, como en el resto de


TE

biomolculas orgnicas, consiste fundamentalmente en carbono (C), hidrgeno (H),


O
LI

oxgeno (O) y nitrgeno (N). Aunque la composicin qumica vara de una especie a
B
BI

otra e incluso dentro de la misma especie en funcin de la finalidad de la tela, la


proporcin mayoritaria de aminocidos la comprenden: la glicina (~10-40%),
la alanina (~18-30%) y diferentes proporciones de prolina (~0-20%), segn la especie,
as como proporciones variadas de otros aminocidos como serina, glutamina y tirosina,
siempre segn el tipo de seda y la especie. Tambin aparecen trazas de glcidos, lpidos,
compuestos inicos y algunos pigmentos. Los aminocidos se unen entre s
mediante enlaces peptdicos, formando cadenas proteicas o protenas. Las protenas que
forman la tela de araa se denominan espidronas (spidroins en lengua inglesa, derivado
de spider, araa). Se han identificado en las telas de araa al menos dos clases de
espidronas diferenciadas que se denominan espidrona-1 y espidrona-2 25,26,27.

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Por lo tanto, el efecto cicatrizante que se le atribuye a la tela de araa


posiblemente se deba a la accin de la protena Espidrona, la cual promovera el
proceso rpido de cicatrizacin de las heridas, adems se le atribuye una propiedad
bactericida, la cual se debera a que la tela de araa se encuentra recubierta con hongos
que contienen antibiticos para evitar que otros microorganismos se coman la tela rica
en protenas. Las protenas presentes en la tela de araa y la accin bactericida
promoveran un mejor proceso de cicatrizacin 24.

En la figura 4 y 5, correspondiente a la observacin microscpica del corte

A
IC
histopatolgico de piel del grupo problema I y II se observa reepitelizacin intensa y

IM
fibras colgenas abundantes. Mientras que, en la Fig. 3 se observa inflamacin aguda y

U
crnica, tejido de granulacin y proliferacin fibroblstica intensa, moderada formacin

Q
O
de vasos sanguneos y discreta reepitelizacin y fibras colgenas correspondiente a la
observacin microscpica del corte histopatolgico de piel del grupo testigo.BI
Y
IA
AC

La protena espidrona de la tela de araa, es cada vez ms estudiada en


M

aplicaciones biomdicas, dada su biocompatibilidad, biodegradabilidad y propiedades


R
FA

mecnicas que combinan peso ligero, alta resistencia y notable dureza y elasticidad,
E

adems de propiedades trmicas que les permiten ser procesadas en un amplio intervalo
D

de temperaturas. En la actualidad, la tela de araa puede ser un componente esencial en


A
C

ingeniera de tejidos y en la fabricacin de microcpsulas para administrar frmacos.


TE

Las virtudes teraputicas de las araas y sus sedas han sido reconocidas, en Veterinaria
O
LI

y Farmacia y son muy prometedoras 24,28.


B
BI

Por todo lo anteriormente expuesto se determina que las cremas formuladas a


base de tela de araa poseen efecto cicatrizante, promoviendo el proceso de
cicatrizacin rpida de las heridas; siendo la crema que present mayor efectividad,
aquella elaborada a base de tela de araa Loxosceles laeta al 0,1% P/P.

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V.- CONCLUSIONES

1. Las cremas a base de tela de araa Loxosceles laeta poseen efecto cicatrizante sobre
lesiones drmicas inducidas en Mus musculus var Swiss.

2. La crema a base de tela de araa Loxosceles laeta al 0,1 % P/P posee mayor efecto
en el proceso de cicatrizacin.

A
IC
IM
U
Q
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BI
Y
IA
AC
M
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

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Artculo en lnea. [Acceso: Enero 2016]. Disponible en:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/cybertesis/4275/1/Pastor _ys.pdf.
29. Ministerio de Salud. Direccin General de Medicamentos Insumos y Drogas.
Manual de Buenas Prcticas de Manufactura de Productos Galnicos y Recursos
Teraputicos Naturales. 2010. Lima-Per.

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A
IC
IM
U
Q
O
BI
ANEXOS
Y
IA
AC
M
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

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ANEXO 1

CERTIFICADO SANITARIO DE LOS ANIMALES DE EXPERIMENTACIN

A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA
AC
M
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

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ANEXO 2

CERTIFICADO DE ANLISIS DE CONTROL DE CALIDAD DE LAS


CARACTERSTICAS FSICAS Y pH DE LA CREMA ELABORADA A BASE DE
TELA DE ARAA Loxosceles laeta 0,05 % P/P.

A
IC
IM
U
Q
O
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Y
IA
AC
M
R
FA
E
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A
C
TE
O
B LI
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ANEXO 3

CERTIFICADO DE ANLISIS DE CONTROL DE CALIDAD DE LAS


CARACTERSTICAS FSICAS Y pH DE LA CREMA ELABORADA A BASE DE
TELA DE ARAA Loxosceles laeta 0,1 % P/P.

A
IC
IM
U
Q
O
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Y
IA
AC
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B LI
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ANEXO 4

CERTIFICADO DE ANLISIS MICROBIOLGICO DE LA CREMA ELABORADA


A BASE DE TELA DE ARAA Loxosceles laeta 0,05 % P/P.

A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA
AC
M
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
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ANEXO 5

CERTIFICADO DE ANLISIS MICROBIOLGICO DE LA CREMA ELABORADA


A BASE DE TELA DE ARAA Loxosceles laeta 0,1 % P/P.

A
IC
IM
U
Q
O
BI
Y
IA
AC
M
R
FA
E
D
A
C
TE
O
B LI
BI

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