DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA

INGENIERA EN BIOTECNOLOGA

PERFIL DEL PROYECTO INTEGRADOR

NIVEL: QUINTO

Comparacin de tres mtodos de extraccin del aceite esencial de la cascara de naranja

para determinar cul brinda un mejor rendimiento

Grupo 2
Tutor: Elena Mafla
GRUPO DE PROYECTO

APUNTE MICHELLE
CASTILLO FABRICIO
FLORES NATHALY

SANGOLQU- 2017
 NDICE.

1. Tema del proyecto 1

2. Ttulo del proyecto 1
3. Definicin del problema ... 1
4. Justificacin .. 1
5. Campo de investigacin 1
6. Sistema de objetivos . 2
7. Hiptesis ... 2
8. Marco terico ... 2
8.1 Antecedentes 2
8.2 Naranja . 4
8.2.1 Informacin nutricional ... 4
8.2.2 Produccin de naranja . 4
8.3 Procesamiento de los residuos slidos .. 5
8.3.1 Manejo de los residuos slidos en el distrito metropolitano de Quito
..... 5
8.3.2 Economa ........ 5
8.4 Aceites esenciales 6
8.4.1 Propiedades fsicas .. 6
8.4.2 Composicin qumica . 6
8.4.3 Usos .... 7
8.4.4 Composicin del aceite esencial de naranja .... 7
8.4.5 Uso del aceite esencial de naranja ... 7
8.4.6 Mtodos de extraccin . 7
8.4.6.1 Destilacin por arrastre por vapor ... 8
8.4.6.2 Destilacin al vaco ..... 8
8.4.6.3 Extraccin por solventes ...... 9
9. Metodologa.
9.1 Muestreo .....10
9.2 Extraccin del aceite esencial ......10
9.2.1 Destilacin por arrastre de vapor de agua a nivel de laboratorio .10
9.2.2 Destilacin al vaco ....10
9.2.3 Extraccin por solventes 11
 9.3 Anlisis de datos .........11
9.3.1 Cantidad de aceite obtenido ...11
9.3.2 ndice de fenoles ....12
9.3.3 Cromatografa de capa fina ....12
9.4 Anlisis estadstico ..........12
10. Resultados esperados ..12
11. Presupuesto .....13
12. Cronograma ....13
13. Bibliografa .....13

NDICE DE FIGURAS.
1. Figura 1. Equipo de destilacin a presin reducida ..11
2. Nonograma de presin de vapor-temperatura ......17

NDICE DE TABLAS.
1. Tabla 1. Grupos de los compuestos representados en los nonogramas .16
1. Tema del Proyecto.
Uso de desechos de naranja, para la extraccin de aceite esencial.

2. Ttulo del proyecto.

Comparacin de tres mtodos de extraccin del aceite esencial de la cascara de naranja
para determinar cul brinda un mejor rendimiento.

3. Definicin del Problema.

Existe una acumulacin excesiva de residuos de naranja, estos pueden ser utilizados para
la obtencin de un aceite esencial para que lo ocupe la industria farmacutica.

4. Justificacin.
Proteger el ambiente se ha convertido en un tema prioritario para todos los pases. Una
forma de hacerlo es aprovechar los subproductos agroindustriales para aumentar el
rendimiento econmico disminuyendo gastos en la gestin de residuos, utilizando todo lo
que se desechaba anteriormente para producir nueva materia prima. En Ecuador se ha
producido un incremento significativo de residuos, originado por la expansin
del mercado de los derivados de frutas como jugos, concentrados, nctares, pulpas
entre otros.

El mercado de los jugos de naranja se ha expandido por todo Ecuador, proceso que
conlleva a la produccin de cscaras, pulpa y semillas, volvindose una carga para el
ambiente. Para evitar que residuos de naranja se sigan acumulando se ha optado por un
mtodo de reutilizacin mediante la extraccin de aceites esenciales a partir de esos
residuos.

Con este proyecto se espera identificar el mtodo de extraccin ms eficaz que provea un
rendimiento ptimo de aceite para su posterior utilizacin en la industria farmacutica
donde se lo utiliza como antidepresivo, sedante, germicida, antioxidante, anticancergeno,
entre otros.

5. Campo de Investigacin.

o Lnea de Investigacin. Ecologa y Gestin de Recursos Naturales.

o Sublnea de Investigacin. - Aprovechamiento de productos secundarios.

1
6. Sistema de Objetivos.
Objetivo General: Comparar tres mtodos de extraccin del aceite esencial de la
cascara de naranja para determinar cul brinda un mejor rendimiento.

Objetivos Especficos:

Recolectar las cascaras usadas por los distribuidores de jugos de naranja.

Extraer el aceite esencial mediante arrastre de vapor.
Utilizar la destilacin al vaco como segundo mtodo de extraccin
Realizar la extraccin por solventes como tercer mtodo de extraccin.
Comparar el rendimiento obtenido por los tres mtodos de extraccin.

7. Hiptesis: El mejor mtodo de extraccin es mediante arrastre de vapor.

8. Marco terico.
8.1 Antecedentes.
En Colombia se realiz una investigacin de factibilidad para el uso de aceites
esenciales obtenidos principalmente de material vegetal y su uso en terapias (Duran
2015). El anlisis se realiz entre los aos 2009 y 2014 con un nfasis en el aceite
proveniente de la naranja. Los datos obtenidos a partir de fuentes estadsticas en donde
se analiz la produccin de naranja y el porcentaje que estas son destinadas a la
extraccin de su aceite mostr que en Colombia la produccin de naranja con fines
industriales es muy escasa, pero se presenta una viabilidad para aumentar la
produccin para la elaboracin de aceites esenciales. Esto permite mostrar que en
pases de Latinoamrica la produccin de naranja solo se enfoca en la exportacin y
en el consumo interno es utilizado mayormente en bebidas o refrescos. Se pretende
dirigir una parte de la produccin de la naranja con el fin de obtener aceite esencial
en la produccin ecuatoriana.

Se estudi la comparacin de dos mtodos de extraccin de aceite esencial de

naranja por arrastre de vapor y extraccin por solventes. La extraccin por arrastre de
vapor es ms eficaz que la extraccin por solventes, debido a que los componentes
presentes en la cascara de naranja son insolubles lo que les permite establecer varias
fases y tener una fcil destilacin, adems en la extraccin por solventes al utilizar
qumicos se produce contaminacin del aceite extrado (Garca 2009).

2
8.2 Naranja.
La naranja es una fruta ctrica comestible obtenida del naranjo dulce (Citrus
sinensis), del naranjo amargo (Citrus aurantium) y de naranjos de otras variedades
o hbridos, antiguos hbridos asiticos originarios de India, Vietnam o el sureste de
China. Es un hesperidio carnoso de cscara ms o menos gruesa y endurecida, y su
pulpa est formada tpicamente por once gajos u hollejos llenos de jugo, el cual
contiene mucha vitamina C, flavonoides y aceites esenciales. Se cultiva como un
antiguo rbol ornamental y para obtener fragancias de sus frutos (Feferacion Espaola
de Nutricin, 2010).

8.2.1 Informacin nutricional.

La naranja posee abundancia de vitamina C, cido flico y minerales como el
potasio, el magnesio y calcio. Contiene cantidades apreciables de beta-caroteno
responsable de su color tpico, conocido por sus propiedades antioxidantes y con
actividad provitamnica A. Adems, tiene cidos mlico, oxlico, tartrico, ctrico,
que potencia la accin de la vitamina C e importantes cantidades de los cidos
hidroxicinmicos, ferlico, cafico y p-cumrico, ordenados de mayor a menor en
funcin de su actividad antioxidante.

Las naranjas son ricas en flavonoides. Los ms conocidos son: hesperidina,

neoshesperidina, naringina, narirutina, tangeretina y nobiletina, a los cuales se les han
atribuido mltiples funciones. La fibra presente en la parte blanca entre la pulpa y la
corteza, es considerable y favorece el trnsito intestinal. En lo que se refiere al zumo,
ste apenas contiene fibra y tiene menores cantidades de vitaminas y minerales que la
naranja entera. (Sierra, s.f.; Feferacion Espaola de Nutricin, 2010; infosiap, s.f.;
Pozo, vila, Ruiz, Valero, & Varela, 2009).

8.2.2 Produccin de naranja.

La produccin de ctricos principalmente la naranja ocupa el cuarto lugar en la
produccin nacional, la misma que ha sido comercializada dentro los Cantones de las
Provincias productoras y se ha expandido a diferentes partes del pas (Das, 2013). El
consumo de naranjas ecuatorianas est limitado a nueve meses ya que durante los
otros tres llega la fruta peruana o colombiana, porque las plantas nacionales ya
cuentan con bastantes aos.

3
 Siendo una fruta con grandes propiedades nutricionales, en el pas hay apenas
19.486 hectreas plantadas que producen no ms de 42.000 toneladas cada ao, el
65,56 % concentrado en una provincia: Bolvar, la mayora en el cantn Caluma (El
Productor, 2015).

8.3 Procesamiento de los residuos slidos.

8.3.1 Manejo de los residuos slidos en el distrito metropolitano de Quito.

La gestin de los residuos slidos urbanos es el conjunto de operaciones que se
realizan con ellos, desde que son generados hasta la ltima fase de su tratamiento. Un
residuo slido es cualquier material sobrante de los procesos de consumo, utilizacin,
y produccin, cuyas caractersticas no permiten que se lo utilice nuevamente porque
ha perdido valor para quien lo gener (DMQ, 2009).

8.3.2 Economa
En Ecuador se generan 3.600 toneladas de basura y solo en Quito se genera 1800
toneladas. Un 77% de los hogares elimina la basura a travs de carros recolectores y
el restante 23% la elimina de diversas formas, as por ejemplo la arroja a terrenos
baldos o quebradas, la quema, la entierra, la deposita en ros acequias o canales.

Solo el 28% de los residuos son dispuestos en rellenos sanitarios, sitios

inicialmente controlados que con el tiempo y por falta de estabilidad administrativa y
financiera, por lo general, terminan convirtindose en botaderos a cielo abierto.

El 72% de los residuos restante es dispuesto en botaderos a cielo abierto

(quebradas, ros, terrenos baldos, entre otros), que provocan inconvenientes como
taponamiento de cauces de agua y alcantarillados, generacin de deslaves,
proliferacin de insectos y roedores; que traen consigo problemas ambientales y de
salud a la poblacin (Ministerio del Ambiente, 2017).

Aproximadamente el 65% de los residuos que se producen diariamente

corresponden a residuos orgnicos y 35% inorgnicos, generados en un 70% por
hogares y 30% por industrias y comercio. Sin embargo, estos valores han sufrido un
cambio en la actualidad ya que la produccin de cascaras de naranja por las pequeas
empresas ha ido en aumento (Telgrafo, 2010).

4
8.4 Aceites esenciales.

Un aceite esencial es un lquido aromtico de aspecto fluido o espeso y de color

variable segn de las plantas que se extraiga. Son segregadas por clulas
especializadas por que se pueden obtener a partir de hojas, flor, tallo, raz, o semilla.
Se define como los productos obtenidos a partir de un material vegetal, bien por
arrastre con vapor, bien por procedimientos mecnicos a partir del epicarpio de los
Citrus, o bien por destilacin seca. El aceite esencial se separa posteriormente de la
fase acuosa por procedimientos fsicos en los dos primeros modos de obtencin;
puede sufrir tratamientos fsicos que no originen cambios significativos en su
composicin (Aulton, 2004).

8.4.1 Propiedades fsicas.

o Los aceites esenciales son voltiles y son lquidos a temperatura ambiente.

o Recin destilados son incoloros o ligeramente amarillos.
o Su densidad es inferior a la del agua (la esencia de sasafrs o de clavo constituyen
excepciones).
o Casi siempre dotados de poder rotatorio, tienen un ndice de refraccin elevado.
o Son solubles en alcoholes y en disolventes orgnicos habituales, como ter o
cloroformo, y alcohol de alta gradacin.
o Son liposolubles y muy poco solubles en agua, pero son arrastrables por el vapor
de agua (Ortuo, 2000).

8.4.2 Usos

Segn HEVEA (2015), los aceites esenciales tienen muchas propiedades

medicinales y se los aplica en diferentes mbitos.

Industria Alimentaria: Se utilizan como condimento. Los aceites ms

empleados por esta industria son el Cilantro, Naranja y Menta. Tambin son
utilizados en la preparacin de bebidas alcohlicas y no alcohlicas,
especialmente refrescos.
Industria Farmacutica: Se usan en cremas dentales, analgsicos e inhalantes
para descongestionar las vas respiratorias. Son utilizados en la fabricacin de
neutralizantes de sabor desagradable de muchos medicamentos.

5
8.4.3 Composicin del aceite esencial de Naranja.
El aceite esencial de naranja contiene varias propiedades qumicas tales como
-pineno, citronelal, linalol, neral, geranial, sabineno, mirceno, siendo el compuesto
ms importante el limoneno o D-limoneno. Esta sustancia qumica puede ser utilizada
como un reemplazo a la acetona, tolueno, teres de glicol, fluorados y agentes
organoclorados cuando se usa como un solvente directo (Mercola, 2017).

8.4.4 Uso del aceite esencial de Naranja.

El aceite de naranja tiene propiedades antiinflamatorias, antispticas,
antidepresivas, antiespasmdicas y diurticas. Ayuda a tratar problemas erctiles,
impotencia y disminucin de la libido. El aceite tambin puede sanar las heridas, evita
cualquier infeccin sptica o mictica mientras que desinfecta la lesin, adems puede
ayudar a curar la inflacin en el cuerpo al reducir el dolor y la irritacin. Ayuda a
aliviar la ansiedad, ira y depresin (Mercola, 2017).

8.4.5 Mtodos de extraccin.

Previo a realizar la extraccin del aceite esencial se debe hacer una extrusin de
la materia a ser utilizada. Este proceso comprende en la compresin de cascaras o del
rapado de cascaras y es utilizado frecuentemente para la extraccin de aceites
esenciales de ctricos (Contreras & Ruiz, 2012). En algunos de los equipos en los que
se realiza este procedimiento, sale la esencia ya liberada, mientras que en otros se
obtienen raspaduras las cuales son comprimidas (SENA, s.f.).

La extraccin del aceite, se clasifican en varias etapas:

1) Laceracin de la epidermis y de las celdas que contienen la esencia.

2) Generacin en la cscara de reas con presin mayor que sus circundantes a travs
de las cuales el aceite fluye al exterior.
3) Abrasin de la cscara, con la formacin de pequeas partculas de la raspadura.
4) La extraccin del aceite se realiza sobre la fruta entera o sobre la cscara y
en ambos procesos se puede realizar un proceso manual o mecnico.

6
 8.4.5.1 Destilacin por arrastre por vapor.

Es el proceso ms comn para extraer aceites esenciales, ms no es aplicable a

flores ni a materiales que se apelmazan. En esta tcnica se aprovecha la propiedad que
tienen las molculas de agua en estado de vapor de asociarse con molculas de aceite.
La extraccin se efecta cuando el vapor de agua entra en contacto con el material
vegetal y libera la esencia, para luego ser condensada. Con el fin de asegurar una
mayor superficie de contacto y exposicin de las glndulas de aceite, se requiere picar
el material segn su consistencia (Peredo, Palou, & Lpez, 2009; SENA, s.f.; Cerutti
& Neumayer, 2004).

8.4.5.2 Destilacin al vaco.

Se han diseado sistemas para aislar constituyentes del aceite esencial, el cual se
basa en sus diferentes puntos de ebullicin. La mayor ventaja de este mtodo, es la
mnima probabilidad de descomposicin de los aceites esenciales y formacin de
compuestos no deseados, debido a las bajas temperaturas de trabajo.

Son clsicos los casos de la separacin de hidrocarburos terpnicos del aceite

esencial de ctricos por destilacin fraccionada al vaco.

En general, para el procesamiento de los aceites esenciales se podrn aplicar las

distintas operaciones unitarias conocidas en la ingeniera qumica para la separacin
de mezclas y soluciones. Estas se pueden clasificar en operaciones mecnicas y
operaciones difusionales (Treybal 1980). Las primeras se basan en la separacin
mecnica de los componentes de la mezcla en tanto que la caracterstica de las
segundas es la transferencia de masa por fenmenos de difusin y de interfase.

Debido a que durante el fraccionamiento de aceites esenciales debe evitarse la

elevacin de la temperatura hasta valores muy altos, la operacin se efecta
necesariamente a bajas presiones. En columnas que funcionan en estas condiciones,
la cada de presin se transforma en un parmetro importante ya que puede su valor
ser significativo frente al de la presin de trabajo. Para este tipo de operacin las
columnas empacadas ofrecen ventajas considerables frente a las de platos. La cada
de presin y la retencin de lquido son en general menores, disminuyendo el riesgo
de descomposicin de los compuestos trmicamente sensibles.

7
 8.4.5.3 Extraccin por solventes.

Debe seleccionarse un solvente conveniente de tal forma que ofrezca el

mejor balance de varias caractersticas deseables: alto lmite de saturacin y
selectividad respecto al soluto por extraer, capacidad para producir el material
extrado con una calidad no alterada por el disolvente, estabilidad qumica en las
condiciones del proceso, baja viscosidad, baja presin de vapor, baja toxicidad
e inflamabilidad, baja densidad, baja tensin superficial, facilidad y economa de
recuperacin de la corriente de extracto y bajo costo (Dahlstrom et al., 1999).

La extraccin con solventes, como el nombre sugiere, es el proceso de extraer el

aceite de los materiales conteniendo aceite por medio del solventes (Peredo, Palou, &
Lopez, 2009) orgnicos voltiles como alcohol, cloroformo, entre otros (Gonzalez,
2004). La funcin del solvente es solubilizar la esencia adems de solubilizar y extraer
sustancias tales como grasas y ceras, obteniendose un extracto impuro.

Los disolventes son utilizados a nivel de laboratorio frecuente mente debido a sus
costos y riesgos de explosin o incendio (Peredo, Palou, & Lopez, 2009).

Los disolventes derivados del petrleo como ter dietlico, ciclo hexano, hexano,
acetato de metilo, propanol, etc. son txicos al inhalarlos y al contacto con la piel. Los
extractos obtenidos mediante este mtodo suelen ser ms oscuros ya que arrastran
algunos pigmentos. Sin embargo, el disolvente ms utilizado es el hexano siendo este
el que produce aceite ms puro y utilizado en grandes producciones (Ponce, 2009).

En general los aceites esenciales con el disolvente se filtran y se deja evaporar a

presin atmosfrica o a vaco. Los restos de disolvente deben separarse a temperatura
baja para obtener un aceite puro (Peredo, Palou, & Lopez, 2009).

9. Metodologa.
9.1 Revisin bibliogrfica.
El desarrollo de la investigacin se iniciar con bsqueda de fuentes bibliogrficas, de
mtodos de extraccin de aceites esenciales, el estudio de componentes de la naranja
ecuatoriana (Citrus sinensis), fuentes de produccin de la naranja en el ecuador y el
manejo de desechos.

8
 9.2 Muestreo
Se tomar muestras procedentes de los desechos, de la venta de jugos de naranjas, stas
se pedirn directamente a los vendedores o se ira a una serie de mercados de Quito con
el fin de obtener materia constante y evitar el escaseo de las cascaras.

9.3 Procesamiento de la muestra

Se tomarn 200 gr de cascaras de naranja para cada extraccin, estas se trozarn
manualmente con un cuchillo dejando pedazos los ms pequeos posibles. Las
cascaras que no se vayan a ocupar en el momento de la extraccin del aceite se
guardaran para su almacenamiento en fundas plsticas, para guardarlas en un
refrigerador.

9.4 Extraccin del aceite esencial.

Los 3 procesos de extraccin se realizarn en los laboratorios de docencia en la

Universidad de las Fuerzas Armadas - ESPE, en donde disponen de los 3 equipos de
destilacin a utilizar.

9.4.1 Destilacin por arrastre de vapor de agua a nivel de laboratorio

Se armar el alambique y luego se proceder a destilar la materia vegetal durante
unas 4 horas, teniendo el control de la temperatura. Despus de finalizada la
destilacin, se procede a separar el aceite esencial del condensador, haciendo uso de
sulfato de sodio anhidro para secar el agua, y luego introducir la mezcla que se
obtienen dentro de un rota vapor, que es un evaporador al vaco para obtener solamente
el aceite puro. Se ensambla el alambique como se muestra en la siguiente figura:

9
9.4.2 Destilacin al vaco.
Se utilizar la tcnica descrita por Castillo y Mendoza (2012).

La extraccin por destilacin al vaco se realizar colocando 200 g de cascar de

naranja previamente secada y una barra magntica en un baln, con la ayuda de un
embudo de vidrio. El baln estar sobre la plancha de calentamiento con agitador
magntico y sujetado por unas pinzas, una vez que el baln este perfectamente
sujetado se coloca la T de destilacin y el refrigerante (Figura 1), posteriormente se
colocar la T de vaco al final del refrigerante y a continuacin se pondr la segunda
T de destilacin soportndolos con una pinza colocando los balones sujetados con una
liga con la ayuda de la pinza de tres dedos. Finalmente se colocar el portatermmetro
en la primera T de destilacin junto con el termmetro.

Teniendo todo como se muestra en la Figura 1 se abrir la llave de vaco poco a

poco para que se regule la presin dentro del sistema y se dejar durante 5-10 minutos
para que el baln se caliente con la muestra y no haya ninguna proyeccin brusca, se
debe agitar utilizando una barra magntica antes de calentar el sistema. Se anotarn
los volmenes y temperaturas de destilacin de cada fraccin destilada al variar la
temperatura cada 10C.

Al finalizar se debe localizar en anexos en la Tabla 1 el grupo al que pertenece la

sustancia que se destil, y en el nomograma (Anexo 2), la presin a la que destil la
fraccin principal.

Figura 1. Equipo de destilacin a presin reducida.

9.4.3 Extraccin por solventes.

10
Segn la tcnica utilizada por Cceres, Mejas, & Rodriguez, 2011; Gonzalez, 2004; Rios,
y otros, 2006; Peredo, Palou, & Lopez, 2009.

Se tomar 1kg de materia prima, se secarn mediante una estufa y posteriormente sern
molidas. Se tomarn de la materia seca muestras de 200 g, las cuales se colocarn en un
cartucho de extraccin, el disolvente orgnico, hexano, se colocar en un matraz redondo
en un volumen de 150mL. El sistema se calentar con plancha hasta que se genere vapores
que extraigan el aceite soluble. En el mismo recipiente que contiene el solvente se
obtendr el aceite condensado disuelto, producto del proceso.

9.3 Anlisis de datos.

9.3.1 Cantidad de aceite obtenido.

Se obtendr una relacin a partir del peso de materia prima y la cantidad de aceite
obtenido por los tres procesos de destilacin: arrastre de vapor, destilacin al vaco y
extraccin con solventes. Cada procedimiento de extraccin se realizar 3 veces, por lo
que se obtendrn nueve cantidades para la relacin peso vs cantidad de aceite.

9.3.2 ndice de fenoles

El contenido fenlico total se determinar con el reactivo de Folin-Ciocalteu segn

Naranjo (2017), para esto se debe colocar 0,5 mL del aceite con metanol en un
Erlenmeyer, dejndolo reposar durante 15 minutos.
El contenido total de fenoles ser estimado como equivalentes de cido glico. Para
realizar la curva de calibracin, se debe preparar una solucin madre de 0.5 g por cada
100 mL de cido glico y se debe preparar los estndares de calibracin de 1, 2, 3, 5, 7,
10 mg/L cido glico.
Parar la preparacin de los estndares se proceder de la siguiente manera: Se tomar
0,1mL de cada uno de los estndares preparados, o en caso del blanco 0,1 mL de metOH
(para diferentes concentraciones, tomar 1, 2, 3, 5, 7, 10 mL y aforar a 100 mL con H20).
A cada uno de los tubos se debe adicionar 1,5 mL de reactivo de Folin- Ciocalteu (al 10%
en agua), 1,4 mL de Bicarbonato de sodio (solucin 7,5 %), se agita y se deja en bao
mara por 15 min a 45C o 30 minutos a temperatura ambiente. Se vuelve a agitar y se
deja reposar por 5 min, para leer las absorbancias en un espectrofotmetro a 765 nm. Las
absorbancias de los estndares se deben leer desde el ms diluido hasta el ms
concentrado.

11
Para realizar el anlisis cuantitativo de la muestra se debe coger una una alcuota de
0,1mL del extracto, el cual ser transferido a un tubo de ensayo en el que se adicionar
1,5 mL de reactivo de Folin- Ciocalteu, 1,4 mL de solucin de bicarbonato de sodio
(Na2CO3) al 7,5 %, la mezcla se agitar y se dejar reposar durante 15 minutos a 45C o
30 minutos a temperatura ambiente. Se determinar la absorbancia a 765 nm y se
comparar con la curva de calibracin realizada usando como solucin estndar el cido
glico.

9.3.3 Cromatografa de capa fina (CCF).

La cromatografa de capa fina tiene dos fases: estacionaria y mvil. La fase estacionaria
est formada por una capa fina absorbente de materiales como Slica Gel unida a un
soporte formado por placa de vidrio. La fase mvil est hecha por el eluyente adecuado
para separar los componentes del aceite esencial: Tolueno: Acetato de etilo (93:7), que se
mueve por capilaridad a travs de la capa absorbente de la fase estacionaria (Naranjo,
2017).

Para realizar la cromatografa de capa fina, se marcar la placa a 2 cm del inicio, aqu es
donde se colocar gotas de la muestra separadas por 1,5cm; la placa se introducir en una
cubeta que contenga el eluyente durante 20 minutos, sin que este tope la lnea en donde
se coloc las muestras. Los componentes de la muestra una vez separado se observan en
forma de manchas distribuidas a lo largo de la placa. Si la visualizacin de las manchas
no se puede realizar a simple vista es necesario utilizar una de las propiedades de los
aceites esenciales que es la absorcin de luz ultravioleta (254nm) sobre la placa del
cromatograma. La movilidad relativa o Rf, ser la relacin entre la distancia recorrida por
la mancha de un compuesto, dividida por la distancia recorrida por el frente de solvente
al momento de sacar la placa del solvente. En un sistema de CCF bien caracterizado, las
sustancias pueden identificarse comparando los valores de Rf con los de estndares, que
se han analizado previamente, durante la cromatografa o utilizando datos bibliogrficos
(Naranjo, 2017).
Los datos bibliogrficos para realizar la comparacin de los Rf son los siguientes:

Rf Terico Compuesto
Rf1 0.1-0.3 Alcoholes terpnicos
Rf2 0.1-0.3 Alcoholes terpnicos

12
 Rf3 0.1-0.3 Alcoholes terpnicos
Rf4 ~0.30 Linalol
Rf5 ~0,45 Citral
Rf6 0.5-0.6 Aldehidos terpenicos
Rf7 ~0.6071 Cariofileno
Rf8 ~0.7253 Nerol
Rf9 ~0.8061 Geraniol, Citronelal
Rf10 ~0.9109 Limoneno

9.4 Anlisis estadstico.

El objetivo del presente trabajo reside comparar entre los distintos mtodos de extraccin
e identificar el mtodo ms adecuado que permita generar un mayor rendimiento del
aceite esencial de naranja, para ello se utilizara un diseo experimental completamente
aleatorizado de un solo factor con a=3 niveles y cada uno de ellos con n=3 rplicas. Las
9 corridas se desarrollarn de manera aleatoria.

9.4.1 Tratamientos.
Los tratamientos o niveles a aplicar en el desarrollo del experimento constan de 3 mtodos
de extraccin de aceites esenciales lo cuales son:

Tratamiento 1: Destilacin por arrastre de vapor

Tratamiento 2: Destilacin al vaco

Tratamiento 3: Extraccin por solventes.

9.4.2 Unidad experimental.

La eficacia de los mtodos de extraccin en cuanto al rendimiento que producen se medir
al aplicar los tres tratamientos en muestras de cascaras de naranja. Tras la
experimentacin el ndice de fenoles permitir cuantificar el rendimiento de cada mtodo
preestablecido.

En la tabla 2 se observa el diseo utilizado, en el cual el nmero de corridas se aleatorizada

para la obtencin de respuestas sin alteraciones.

Tabla 1. Diseo experimental para la comparacin entre mtodos de extraccin

13
 Mtodo de Nmero de corridas experimentales
extraccin
Tratamiento 1 1 2 3
Tratamiento 2 4 5 6
Tratamiento 3 7 8 9

9.4.3 Anlisis ANOVA.

Para llevar a cabo el anlisis de los resultados, se efectuar una tabla ANOVA de un factor
para comparar la cantidad de aceite obtenido por los tres mtodos, en caso de existir
diferencia entre ellos se efectuar un contraste entre los tratamientos mediante el modelo
de la diferencia significativa mnima (LSD) de Fisher.

Debido la cromatografa de capa fina generan datos cualitativos, nicamente se

comparar la presencia de los compuestos en cada uno de los 3 mtodos de extraccin.

10. Resultados esperados.

Se recoger 10 kg de cascaras de naranja de los distribuidores de jugo iformales
que se encuentran en las ciudades de Quito y Sangolqu o de mercados de dichas
ciudades.
Se usarn 220 gramos en un total de 5 repeticiones por cada mtodo con el fin de
obtener resultados estadsticos confiables.
Se espera que al utilizar el proceso de destilacin por arrastre de vapor se obtendr
una mayor cantidad de aceite esencial que los otros dos mtodos: destilacin al
vaco y extraccin por solventes.
El proceso de extraccin mediante solventes producir un aceite esencial puro con
todos sus componentes qumicos inalterados, por lo que presenta mayor cantidad
de compuestos que los dems tratamientos, pero no un mejor rendimiento.
Mediante el proceso de extraccin al vaco el aceite esencial tendr una mezcla de
componentes no deseados
Los indicies de fenoles por el mtodo Folin- Ciocalteu, calcula una concetracion
menor o igual 5 mg/L indicando una calidad muy cercana a la de un aceite
comercial.
La cromatografa de capa fina por los tres mtodos se observar recorrido similar

14
 debido a que se analiza componente y no cantidad ni calidad, en cada test se
apreciar que se tiene un mayor recorrido del compuesto limoneno debido a que
es el que existe en mayor porcentaje en el aceite esencial.

11. Presupuesto.

No Actividad Costo ($)

1 Transporte 20.00
2 Compra de cascaras 40.00
de naranja
3 4 vasos de 20.00
precipitacin 500 ml
4 1000 ml ciclo hexano 60.00
5 250 mL del reactivo 20.00
comercial Folin
Ciocalteu
6 100 gr carbonato de 20.00
sodio
7 Programa estadstico 20.00
spss
8 1 Kit de cromatografa 60.00
de capa fina
9 Gastos de 60.00
alimentacin
10 Gastos de vestimenta 50.00
de proteccin
TOTAL 370.00

15
12. Cronograma.

1
1
13. Bibliografa.

Albarracin, G., & Gallo, S. (2003). Comparacion de dods metodos de estracion de

aceite esencial utilizando Pipper aduncum procedente de la zona caferea.
Colombia: UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA.
Cano, T. e. (2001). OBTENCIN Y CARACTERIZACIN DEL ACEITE ESENCIAL
DE TOMILLO CULTIVADO EN GUATEMALA, UTILIZADO EN
DIVERSIDAD DE PRODUCTOS FITOFARMACUTICOS. UNIVERSIDAD
DE SAN CARLOS DE GUATEMALA, 10-16.
Castillo, N., & Mendoza, J. (2012). Manual de prcticas para el laboratorio de qumica
orgnica I. Mxico: Universidad nacional autnoma de Mxico.
Cern, I., & Cardona, C. (2011). Evaluacin del proceso integral para la obtencin de
aceite esencial y pectina a partir de cascara de naranja. (Vol. III).
Cerpa, M. (2007). Hidrodestilacin de aceites esenciales: modelado y caracterizacin.
Valladolid: Universidad de Valladolid.
Cerutti, M., & Neumayer, F. (2004). Introduccin a la obtencin de aceite esencial de
limn. Argentina: Universidad del Centro Educativo Latinoamericano.
Contreras, E., & Ruiz, J. (2012). Estudio comparativo de los mestodos de ecxtraccion
para el aceite esencial presente en la cascara de pomelo. Cartagena:
Universidad de Cartagena.
Das, M. (2013). PRODUCCIN, COMERCIALIZACIN Y RENTABILIDAD DE LA
NARANJA (CITRUS AURANTIUM) Y SU RELACIN CON LA ECONOMA
DEL CANTN LA MAN Y SU ZONA DE INFLUENCIA, AO 2011. La Man:
UNIVERSIDAD TCNICA DE COTOPAXI .
DMQ. (2009). Atlas ambiental del distrito metropolitano de Quito. Quito.
El Productor. (20 de Abril de 2015). Ecuador: Un agrio futuro es el que se vislumbra
para las naranjas. El Productor.
Feferacion Espaola de Nutricin. (2010). Naranja. Madrid: Feferacion Espaola de
Nutricin.
Gonzalez, A. (2004). Obtencion de aceites esenciales y extractos etanolicos de plantas
del amazonas. Colombia: Universidad Nacional de Colombia.
Hardenburg, E. (1998). Almacenamiento comercial de frutas, legumbres y existencias
de floristeras y viveros. IICA, 55-57.
Hernndez, J. (2011). Aditivos Alimentarios. Universidad Autnoma de Madrid, 5-12.
HEVEA. (2015). Aceites esenciales. Laboratorios HEVEA.
infosiap. (s.f.). Naranja. Obtenido de infosiap:
http://infosiap.siap.gob.mx/images/stories/infogramas/100602-reporte-
naranja.pdf
Jcome, E. (12 de MAyo de 2016). 600 vendedores de jugo de naranja; el nuevo total
del censo realizado en Quito. El comercio.
Lpez, T. (2006). Tomillo Propiedades facmacolgicas e indicaciones teraputicas.
Fitoterapia, 2.
Makkar, H., Blmmel, M., Borowy, N., & Becker, K. (1993). Gravimetric
determination of tannins and their correlations with chemical and protein
precipitation methods.
Marqus, D. (2015). Composicin qumica de los aceites esenciales de Lavanda y
Tomillo. Determinacin de la actividad fngica. Universidad Politcnica de
Valencia, 22.
1
Mercola, J. (2017). Aceite de naranja: una dulce recompensa para su cuerpo. Estados
Unidos.
Ministerio del Ambiente. (2017). Programa PNGIDS Ecuador. Quito.
Naranjo, B. (2017). Extraccion y cuantificacion de fenoles por un metodo analitico.
Sangolqu.
Peredo, H., Palou, E., & Lopez, A. (2009). Aceites esenciales: metodos de extraccion.
Temas Selectos de Ingenieria de Alimentos, 24-32.
Peredo, H., Palou, E., & Lpez, A. (2009). Aceites esenciales: mtodos de extraccin.
Temas selectos de Ingenieria en alimentos, 24-32.
Ponce, F. (2009). Tecnologia de acietes y grasas. La Merced: Universidad NAcional
Daniel Alcides Carrion.
Pozo, S., vila, J., Ruiz, E., Valero, T., & Varela, G. (2009). Valor Nutricional de las
Naranjas y Clementinas. Madrid: Federacion Espaola de la Nutricin.
Obtenido de copal.
Rodrguez, E. (2011). NATURAL ANTIMICROBIAL AGENT USE IN THE
PRESERVATION OF FRUITS AND VEGETABLES. Ra Ximhai, 156-157.
Rozze, G. (2006). Aditivos Alimentarios. Food Today, 6.
SENA. (s.f.). Introduccion a la industria de los aceites esenciales de plantas
medicinales y aromaticas. Bogota: naturAEsn.
Sierra, A. (s.f.). La Naranja la Reina del Invierno. Crdoba: Colegio oficial de
Farmacuticos de Crdoba.
Tecnicoagrcola. (19 de 06 de 2012). Enfermedades o patogenos mas importartes en
postcosecha de ctricos. Obtenido de Tecnicoagrcola.es:
http://www.tecnicoagricola.es/etiqueta/phytophthora-citrophthora/
Telgrafo. (2010). La contaminacin por desechos slidos. Quito.
Vidal, C. (04 de 08 de 2008). Microbiologa de frutas. Obtenido de MICLOFLORA DE
LAS VERDURAS FRESCAS: http://vdalmicrofrutas.blogspot.com/
Villada, J. (2010). Conservadores qumicos utilizados en la industria alimentaria.
Universidad autnoma agraria Antonio Narro, 8-12.
Zekaria, D. (2017). Los aceites esenciales una alternativa a los antimicrobianos.
Laboratorios calier, 1-6.

2
14. Anexos.
Tabla 1. Grupos de los compuestos representados en los nonogramas.

3
Anexo 2. Nonograma de presin de vapor-temperatura