abstrak

Sejumlah besar tanaman, yang telah digunakan sebagai makanan dan rempah-rempah di Thailand,
diselidiki karena aktivitas antioksidan mereka oleh menggunakan metode bleaching b-carotene. Isi
bahan kimia tanaman, seperti vitamin C, vitamin E, karotenoid, tanin, dan total fenolat, juga
ditentukan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan tertinggi ditemukan pada
tanaman inang obor, diikuti oleh Piper sarmentosum dan Mentha arvensis. G. inodorum juga
mengandung jumlah vitamin E tertinggi, dan M. arvensis mengandung jumlah total xanthophyll
tertinggi. Korelasi antara kandungan kimia masing - masing tanaman dan Indeks antioksidan diamati.
Hasilnya menunjukkan bahwa bahan kimia seperti vitamin C, vitamin E, karotenoid, dan senyawa
fenolik adalah kontributor aktivitas antioksidan pada tanaman.? 2004 Elsevier Ltd. Semua hak
dilindungi undang-undang.

introduction

Kemerosotan oksidatif dari makanan yang mengandung lipida bertanggung jawab untuk bau busuk
dan rasa selama pengolahan dan penyimpanan, sehingga menurunkan kualitas gizi dan keamanan
makanan akibat pembentukannya senyawa sekunder yang berpotensi beracun (Zainol, Abd-Hamid,
Yusof, & Muse, 2003). Apalagi pada manusia, Oksidasi lipid juga dianggap menginduksi fisiologis
obstruksi, menyebabkan penuaan sel dan karsinogenesis (Lampart-Szczapa, Korczak, Nogala-
Kalucka, & Zawirska-Wojtasiak, 2003). Jumlah yang besar Studi eksperimental menunjukkan bahwa
oksidasi lipid. Produk yang disebut radikal bebas, bisa membahayakan sel sehat, membuat molekul
berbahaya, dan berkontribusi pada degeneratif proses yang terkait dengan penuaan dan penyakit,
mis. kanker, penyakit kardiovaskular, dan gangguan neurodegeneratif, seperti penyakit Alzheimer
(Croft, 1999; Lemberkovics, Czinner, Szentmiha'lyi, Bala'zs, & Szo Ke, 2002; Sami, 1995; Shon, Kim,
& Sung, 2003). Antioksidannya sekarang dikenal memainkan peran penting dalam perlindungan
terhadap gangguan yang disebabkan oleh kerusakan oksidan. Istilah '' antioksidan 'mengacu pada
senyawa yang bisa menunda atau menghambat oksidasi lipid atau molekul lainnya dengan
menghambat inisiasi atau propagasi oksidatif reaksi berantai (Velioglu, Mazza, Gao, & Oomah, 1998),
dan dengan demikian dapat mencegah atau memperbaiki Kerusakan dilakukan pada sel tubuh oleh
oksigen. Mereka bertindak dalam satu atau beberapa cara berikut: mengurangi agen, pemulung
radikal bebas, kompleks kompleks pro-oksidan logam, dan peminat oksigen singlet (Hudson, 1990).

Baru-baru ini, ada minat yang cukup besar Menemukan antioksidan alami dari bahan tanaman untuk
diganti yang sintetis Zat antioksidan alami adalah dianggap aman karena terjadi pada makanan
nabati, dan dipandang lebih diminati daripada rekan sintetis mereka. Data dari kedua laporan ilmiah
dan laboratorium Studi menunjukkan bahwa tanaman mengandung berbagai macam zat disebut ''
bahan kimia tanaman '' atau '' fitokimia '' yang memiliki aktivitas antioksidan (Pratt, 1992). Alam
Antioksidan terjadi pada semua tanaman yang lebih tinggi, dan di semua bagian dari tanaman (kayu,
kulit kayu, batang, polong, daun, buah, akar, bunga, serbuk sari, dan biji-bijian). Senyawa khas Yang
menunjukkan aktivitas antioksidan meliputi vitamin, karotenoid, dan senyawa fenolik. Oleh karena
itu, rekomendasi telah dibuat untuk meningkatkan asupan harian buah dan sayuran, yang kaya
nutrisi iniyang menurunkan risiko masalah kesehatan kronis yang terkait dengan penyakit yang
disebutkan di atas (Klipstein-Grobuschet al., 2000; Moeller, Jacques, & Blumberg, 2000; Morriset al.,
1998; Slattery et al., 2000).
Senyawa antioksidan dari tanaman yang lebih tinggi memilikitelah ditunjukkan, percobaan in vitro,
untuk melindungi melawan kerusakan oksidasi dengan cara menghambat atau memadamkan radikal
bebas dan spesies oksigen reaktif. Peran Senyawa ini sebagai antioksidan potensial bisa disimpulkan
dengan kemiripannya dengan antioksidan sintetis, terkait struktur (Larson, 1988). Vitamin C telah
diusulkan, untuk waktu yang lama, sebagai antioksidan biologis. Ditemukan sebagai pemecah rantai
untuk pemecah rantai radikal peroksi dan juga berperan sebagai sinergis dengan vitamin E, karena
vitamin C dapat menyumbangkan atom hidrogen ke radikal fenolat yang berasal dari vitamin E,
sehingga beregenerasi aktivitasnya. Vitamin E adalah salah satu peminat terbaik untuk oksigen
singlet, dan bisa bertindak sebagai antioksidan pemecah rantai. Selanjutnya oksigen singlet sangat
kuat dipadamkan oleh karotenoid, terutama b-karoten. Dalam kasus senyawa fenolik, kemampuan
fenolat untuk bertindak sebagai antioksidan tergantung pada sifat redoks kelompok hidroksil fenolik
mereka, yang memungkinkan mereka bertindak agen pereduksi, antioksidan penyumbang hidrogen,
oksigen quenchers (Rice-Evans & Miller, 1996).

Dalam penelitian ini, kami mengumpulkan 43 jenis tanaman yang dapat dimakan dari delapan
keluarga yang banyak dikonsumsi Thailand, dan menganalisa aktivitas antioksidan methanolik
Ekstrak disiapkan dari tanaman ini. Isi dari enam senyawa antioksidan, termasuk vitamin C, vitamin
E, karoten total, total xantofil, tanin, dan total fenolat, juga diselidiki di tanaman.

2. Bahan dan metode

2.1. Bahan tanaman

Spesies tanaman yang digunakan dibeli dari lokal pasar di Chiang Mai, Thailand, pada bulan Juni-
Oktober 2000. Mereka diidentifikasi secara botani di Biologi Departemen Chiang Mai University.
Ilmiah nama tanaman yang digunakan dalam penelitian ini diberikan pada Tabel 1. Tanaman
dibersihkan dan dipotong potongan kecil sebelum dikeringkan dalam oven udara panas di 50 C.
Semua sampel, setelah pengeringan, memiliki kandungan air di bawah 10%. Mereka digiling menjadi
bubuk halus di a blender mekanik dan disimpan pada suhu kamar sebelumnya untuk ekstraksi
Tanaman kering digunakan untuk analisis aktivitas antioksidan, vitamin C, vitamin E, karotenoid,
tanin dan senyawa fenolik.

.2. Penentuan aktivitas antioksidan

Tanaman kering direndam semalam dengan metanol di suhu kamar di termos. Setiap labu berisi 0,5

g sampel dalam 10 ml metanol. Ekstraknya disaring melalui kertas saring Whatman No. 42, dan
residunya dicuci dengan metanol panas. Residu yang tidak larut dibuang Filtrat diuapkan dalam air
Mandi di 40 C sampai volume akhir 1 ml. Aktivitas antioksidan ditentukan dengan mengukur
oksidasi ditambah dari karoten dan asam linoleat, seperti yang dijelaskan oleh Hammerschmidt dan
Pratt (1978). Satu ml larutan b-karoten dalam kloroform (1 mg / 10 ml) disaring ke dalam labu, yang
mengandung asam linoleat dan Tween 40. Setelah dipecat dari kloroform pada pemandian air pada
suhu 50 C, 50 ml air suling (yang digelapkan oleh udara Pompa selama 1 jam) ditambahkan ke labu
dengan kuat berputar-putar. Lima ml aliquot dari emulsi ini ditempatkan Pada tabung reaksi yang
mengandung 0,2 ml ekstrak. Sampel dibaca terhadap blank berisi emulsi minus karoten Sebuah
pembacaan di 470 nm diambil segera (t = 0) dan kemudian pada interval 15 menit selama 105 menit
Tingkat pemutihan b-karoten adalah ditentukan oleh perbedaan absorbansi spektral membaca
antara membaca awal dan terakhir pemutihan yang pada dasarnya tetap linier dibagi dengan waktu.
Itu Indeks antioksidan adalah rasio tingkat pemutihan kontrol (sistem tanpa penambahan uji
senyawa) ke tingkat pemutihan saat senyawa uji berada di sistem.

2.3. Penentuan kadar vitamin C

Kandungan vitamin C pada tanaman sudah ditentukan dengan prosedur spektrofotometri Bajaj dan
Kaur (1981). Massa bahan kering yang dikenal (0,5 g) diekstraksi dalam semalam dengan 10 ml
oksalat larutan asam-EDTA pada suhu kamar. Itu ekstrak disaring melalui kertas saring. Sebuah 2,5
ml aliquot Kemudian ditransfer ke volumetrik 25 ml labu. Kemudian, reagen lainnya (2,5 ml asam
oksalat- Solusi EDTA, 0,5 ml asam asetat metafosfat larutan asam, 0,1 ml larutan asam sulfat, dan 2
ml reagen amonium molibdat) ditambahkan. Setelah itu, pelarutnya disesuaikan dengan volume 25
ml dengan air suling. Kompleks biru molibdenum, yang dibentuk oleh reduksi amonium molibdat
dengan asam askorbat (vitamin C) adalah mengukur absorbansi setelah 15 menit pada 760 nm. Itu
Kandungan vitamin C kemudian ditentukan dengan cara merujuk ke grafik kalibrasi, dengan
menggunakan larutan asam askorbat sebagai solusi standar.

2.4. Penentuan kadar vitamin E

Bahan tanaman kering (0,5 g) direndam dalam 20 mletanol selama 30 menit dalam rendaman air
pada suhu 85 C. Solusinya dibiarkan dingin lalu disaring menjadi pemisah corong. Heptane (10 ml)
ditambahkan, dan solusinya terguncang selama 5 menit. Kemudian, 20 ml natrium sulfat 1,25%
ditambahkan dan solusinya terguncang lagi selama 2 min, dan dibiarkan terpisah menjadi beberapa
lapisan. Total tocopherols ditentukan oleh reaksi dengan ion tembaga dan kompleksasi dengan 2.20-
biquinoline (cuproine) menurut untuk Contreras-Guzma'n dan Strong (1982). Volume 0,5 ml a-
tocopherol dalam etanol diproses di cara yang sama seperti contoh, dan digunakan sebagai standar.

2.5. Penentuan kadar karotenoid

Bahan tanaman kering (0,5 g) diekstraksi dengan 30 ml heksana pada suhu kamar, dengan
saponifikasi panas, seperti yang dijelaskan oleh Helrich (1990). Isolasi karoten dan xantofil dalam
ekstrak sampel kering dilakukan dengan kromatografi kolom. Untuk ini Kondisinya, Hyflo Super-Cel
digunakan sebagai stasioner fase, dan larutan, heksana-aseton (9: 1 v / v) dan heksana-aseton-
metanol (8: 1: 1 v / v / v) digunakan sebagai a fase gerak untuk pemisahan karoten dan xantofil,
masing-masing. Isi karoten dan xantofil ditentukan dengan mengukur absorbansi masing masing 436
dan 474 nm.

2.6. Penentuan kadar tanin

Bahan tanaman kering (0,5 g) diekstraksi dengan 300 ml dari dietil eter selama 20 jam pada suhu
kamar. Residu direbus selama 2 jam dengan 100 ml air suling, dan lalu dibiarkan dingin, dan disaring.
Ekstraknya disesuaikan dengan volume 100 ml dalam labu volumetrik. Kandungan tanin dalam
ekstrak ditentukan Secara kolorim menggunakan pereaksi Folin-Denis, dan oleh mengukur
absorbansi kompleks biru pada 760 nm, menggunakan larutan asam tannat sebagai larutan standar,
seperti yang dijelaskan oleh Helrich (1990).
2.7 Ekstraksi total fenolat dilakukan

menurut Naczk, Wanasundara, dan Shahidi (1992) dengan sedikit modifikasi. Satu gramme dari
tanaman kering Bahan diekstraksi tiga kali dengan 20 ml aseton- metanol-air (7: 7: 6 v / v / v) pada
suhu kamar. Ekstrak disentrifugasi pada 6000 rpm selama 10 menit. Setelah sentrifugasi, gabungan
supernatan itu dianalisis untuk total fenolat menurut Hammerschmidt dan Pratt (1978) dengan
beberapa modifikasi. Prosedur terdiri dari menggabungkan 1 ml larutan uji dengan 10 ml air
deionisasi dan 2 ml reagen Folin-Denis. Setelah 5 menit, 2 ml natrium karbonat jenuh larutan
ditambahkan, dan campuran diinkubasi selama 1 jam pada suhu kamar. Penyerapan itu kemudian
diukur pada 640 nm Larutan Pyrocatechol digunakan sebagai standar untuk penentuan fenolat total
konten.

2.8. Analisis statistik

Nilai rata-rata dan standar deviasi (S.D.) dihitung dari hasil. Salah satu cara analisis varians (ANOVA)
diterapkan untuk membandingkan nilai rata-rata. Nilai P <0,05 dianggap signifikan. Korelasi koefisien
(R), untuk menentukan hubungan antara dua variabel (antara indeks antioksidan dan Kandungan
senyawa antioksidan pada tanaman) juga dihitung dengan menggunakan Statistical Package for
Social Program Ilmu Pengetahuan (SPSS).

3. Hasil dan Pembahasan

Aktivitas antioksidan tanaman terutama disumbangkan oleh senyawa aktif yang ada di dalamnya.
Didalam belajar, aktivitas antioksidan dan kandungan aktif senyawa dari 43 tanaman yang dapat
dimakan milik delapan keluarga ditentukan. Hasilnya dirangkum dalam Tabel 2. Ditemukan bahwa
ekstrak metanol dari semua tanaman menunjukkan aktivitas antioksidan. Aktivitas yang lebih kuat
ditunjukkan dengan indeks antioksidan yang lebih tinggi. Perbedaan yang signifikan (P <0,05)
ditemukan pada indeks antioksidan dari tanaman yang diuji Ekstrak metanol dari daunnya Gymnema
inodorum menunjukkan tingkat antioksidan tertinggi aktivitas dengan indeks 14,8, diikuti oleh Piper
sarmentosum (13) dan Mentha arvensis (10.9). Tanaman G. inodorum dan P. sarmentosum adalah
tumbuhan asli di Asia Tenggara. Mereka digunakan sebagai makanan dan obat tradisional di
Thailand. Daun dari G. inodorum telah dikenal efektif untuk beberapa penyakit, termasuk diabetes
mellitus, arthritis rematik, dan asam urat. Beberapa penelitian tentang aktivitas farmakologis dari
ekstrak G. inodorum telah diselidiki secara ilmiah. Telah dilaporkan bahwa ekstrak G. inodorum
menghambat kenaikan kadar gula darah mengganggu proses penyerapan glukosa usus (Shimizu et
al., 2001; Shimizu et al., 1997). Tanaman P. sarmentosum adalah salah satu tanaman obat yang
dimilikinya aktivitas antimalaria (Rahman, Furuta, Kojima, Takane, & Mohd, 1999), dan aktivitas
pemblokiran neuromuskular (Ridtitid, Rattanaprom, Thaina, Chittrakarn, & Sunbhanich, 1998).
Rebusan air seluruh tanaman Spesies ini juga telah biasa digunakan untuk mengobati penderita
diabetes. Telah dilaporkan bahwa airnya Ekstrak P. sarmentosum memiliki efek hipoglikemik tikus
(Peungvicha et al., 1998). Antibakteri dan antijamur kegiatan telah diteliti di pabrik M. arvensis (Imai
et al., 2001; Kishore, Mishra, & Chansouria, 1993). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ketiganya
Tanaman bisa dijadikan sumber potensial antioksidan alami, dengan aplikasi farmasi mereka.

Senyawa khas yang memiliki aktivitas antioksidan telah ditandai sebagai vitamin C, vitamin E,
karotenoid dan senyawa fenolik. Itu masuk akal menyelidiki tingkat total mereka di tanaman yang
diuji. Penting perbedaan (P <0,05) ditemukan pada semua ini jumlah. Kandungan vitamin C tanaman
bervariasi dari 0,98 sampai 48,5 mg%. Jumlah tertinggi ditemukan dalam ekstrak Leucaena
leucocephala. Konten yang tinggi vitamin C juga hadir di Cassia siamea dan Macropanax dispermus
Korelasi antara vitamin Kandungan C dan indeks antioksidan hanya ditemukan di tanaman keluarga
Piperaceae (R = 0,99) dan Zingiberaceae (R = 0,63). Kandungan vitamin E (mg%) berkisar dari 0,0011
sampai 0,0301. Jumlah tertinggi adalah ditemukan pada ekstrak G. inodorum dan M. arvensis.
Sebuah korelasi antara kandungan vitamin E dan Indeks antioksidan diamati pada beberapa keluarga
(Asclepiadaceae, R = 0,87; Cucurbitaceae, R = 0,90; Labiatae, R = 0,69; Leguminosae, R = 0,39; dan
Piperaceae, R = 0,96), menunjukkan bahwa vitamin E cenderung berkontribusi terhadap aktivitas
antioxiant tanaman ini.

Mengenai kandungan karotenoid (mg%), total karoten bervariasi dari 0,63 sampai 12,8, dan total
xantofil bervariasi dari 0,52 sampai 26,5. Jumlah terendah Kedua karotenoid ditemukan di Pueraria
mirifica, sementara Centella asiatica dan M. arvensis terkandung paling tinggi jumlah total karoten
dan total xantofil, masing-masing. Dalam penelitian ini, korelasi antara kandungan total karoten dan
indeks antioksidan ditemukan di Cucurbitaceae (R = 0,87), Piperaceae (R = 0,99) dan Umbelliferae (R
= 0,46). Namun, itu dapat diamati bahwa jumlah total xanthophylls Pada tanaman menunjukkan
adanya korelasi dengan antioksidan indeks di banyak keluarga (Araliaceae, R = 0,98; Cucurbitaceae, R
= 0,56; Leguminosae, R = 0,41; Piperaceae, R = 0,98; Umbelliferae, R = 0,77).

Di antara senyawa fenolik (mg%), tanin berkisar dari 1,18 sampai 484, dan total fenolat dari 15,8
menjadi 1924. Tanaman Caesalpinia mimosoides memamerkan jumlah tertinggi dari kedua tanin dan
fenolat total, sedangkan jumlah terendah kedua senyawa diamati di ekstrak P. mirifica. Sebuah
korelasi antara kandungan tanin dan indeks antioksidan hanya ditemukan di keluarga Araliaceae dan
Piperaceae (R = 0,72 dan 0,99, masing-masing). Sebuah korelasi antara kandungan total fenolat dan
Indeks antioksidan ditemukan di beberapa keluarga (Asclepiadaceae, R = 0,94; Piperaceae, R = 0,99;
Umbelliferae, R = 0,57).

Dari Tabel 2, dengan menggunakan koefisien korelasi, Terungkap bahwa vitamin E dan xanthophyll
total memiliki hubungan dengan indeks antioksidan dalam lima dari delapan keluarga yang diuji
dalam penelitian ini. Namun, vitamin C, karoten total, tanin, dan fenolat total juga menunjukkan
hubungan dengan indeks antioksidan pada beberapa orang keluarga.

Beberapa tinjauan komprehensif tentang literatur tentang antioksidan alami baru-baru ini muncul.
Banyak data yang dipublikasikan menyoroti peran potensial dari komponen fenolik buah, sayuran,
minuman, dan biji-bijian, yang dapat bertindak sebagai antioksidan (Ancos, Gonza'les, & Pilar Cano,
2000; Miliauskas, Venskutonis, & van Beek, 2004; Miranda et al., 2000; Zainol et al., 2003; Zielinski &
Kozlowska, 2000). Namun, hasil dalam penelitian ini menunjukkan bahwa tanaman yang
mengandung sejumlah vitamin atau karoten tinggi, juga memiliki aktivitas antioksidan tingkat tinggi.
Hasil ini sesuai dengan yang ada dalam literatur yang telah diterbitkan sebelumnya. Larson (1988)
melaporkan peran banyak senyawa lain sebagai antioksidan potensial tanaman yang lebih tinggi
(misalnya vitamin C dan E, karotenoid, turunan klorofil, alkaloid, flavonoid, asam fenolik dan fenol
lainnya). Temuan serupa dilaporkan oleh Rice-Evans dan Miller (1996), yang menentukan potensi
antioksidan relatif vitamin, karotenoid, dan fenolat dalam berbagai jenis buah dan sayuran.
Javanmardi, Stushnoff, Locke, dan Vivanco (2003) juga menemukan bahwa antioksidannya Aktivitas
ekstrak tumbuhan tidak terbatas pada fenolat. Aktivitas ini mungkin juga berasal dari metabolit
sekunder antioksidan lainnya, seperti minyak atsiri, karotenoid dan vitamin.
4. Kesimpulan

Studi tersebut menunjukkan bahwa ada perbedaan isi dari senyawa antioksidan tanaman umumnya

dikonsumsi di Thailand Beberapa tanaman bisa dipertimbangkan sebagai sumber antioksidan alami
sejak itu Ekstrak mereka ditemukan memiliki antioxitant tinggi aktivitas. Aktivitas tertinggi terdeteksi
pada G. inodorum, diikuti oleh P. sarmentosum dan M. arvensis, masing-masing. Inspeksi
mengungkapkan bahwa kandungan vitamin C, vitamin E, karoten total, total xantofil, tanin dan total
fenolat pada tanaman uji berkorelasi dengan Indeks antioksidan. Hasilnya menunjukkan bahwa
antioksidan aktivitas tanaman ini dapat dikaitkan dengan komponen kimia yang ada, terutama
vitamin E dan xanthophylls.