Prcticas de Laboratorio de Bioqumica.

Practica No. 1. Introduccin al Laboratorio de Bioqumica

OBJETIVOS.-
Adquirir conocimientos tericos y prcticos sobre los aspectos bsicos del trabajo en el
laboratorio de Bioqumica.

Seleccionar los materiales y equipos necesarios para realizar un experimento sencillo

en un laboratorio de Bioqumica.

Adquirir destreza en el manejo de pipetas volumtricas, graduadas y automticas.

Reglas de Seguridad en el Laboratorio de Bioqumica

La manipulacin inapropiada de sustancias, materiales y equipos que se encuentran en el

laboratorio, representa peligro tanto a la salud de las personas, como a la integridad de las
instalaciones y equipo de trabajo. Es por ello que se deben obedecer las Reglas de Seguridad
que se relacionan a continuacin. Estas reglas se clasifican en los siguientes grupos:

1. Sustancias qumicas
2. Material biolgico y animales de laboratorio
3. Material de vidrio
4. Equipo elctrico e instalaciones de gas
5. Orden y limpieza

1. Sustancias qumicas.

-Antes de utilizar una sustancia, verifique que se trate del reactivo correcto y que tiene la
concentracin requerida.
-Evite el contacto o exposicin innecesaria con sustancias qumicas, utilice el equipo de
proteccin adecuado y disponible: mandil, lentes, guantes, campana extractora, etc.
-No pipetee sustancias qumicas directamente.
-Evite inhalar productos qumicos y sus vapores.
-Trabaje y mantenga bajo la campana los reactivos corrosivos o voltiles.
-Los solventes deben manejarse lejos del fuego u otras fuentes de calor. Emplee bao Mara
para calentarlos.
-Para diluir los cidos, estos deben verterse lentamente en el agua, agitando cuidadosamente.
-No vierta agua directamente sobre el cido porque provocar salpicaduras
-No deje sobre la mesa tapones de frascos de cidos u otras sustancias corrosivas, porque se
pueden contaminar o dejar residuos corrosivos que podran causar quemaduras.

2. Material biolgico y animales de laboratorio

-Para el manejo de estos materiales protjase adecuadamente segn sea el caso usando
guantes, cubre boca, etc.
-Para la manipulacin y el sacrificio de los animales de experimentacin siga las indicaciones
del profesor.
-Maneje cuidadosamente las muestras biolgicas (sangre, orina, saliva, etc.) para evitar
contaminaciones de personas y materiales.
-Todo el material biolgico, equipos y de desecho (muestras biolgicas, algodn, gasas,
guantes, jeringas, etc.) debern ser incinerados adecuadamente, para lo cual, deber usted
seguir las instrucciones del profesor.
3. Material de vidrio

-Debe examinar todo el material de vidrio antes de utilizarlo, para detectar la existencia de
grietas o roturas. En el caso de que encuentre material defectuoso, reprtelo de inmediato al
encargado del laboratorio para que se lo cambie.
-No use el material de vidrio en mal estado.
-Use pinzas, franela o guantes de asbesto para transportar o mover recipientes de vidrio
calientes.
-Nunca deje material roto para ser lavado, reprtelo y trelo a la basura. .
-Al calentar recipientes de vidrio, use llama suave al principio del calentamiento.
-Limpie inmediatamente los materiales que goteen o se derramen.
-En caso de lquidos txicos derramados, protjase adecuadamente y ventile el rea.

4. Equipos elctricos e instalaciones de gas.

-No utilice los equipos elctricos defectuosos.

-Verifique que los enchufes y conexiones estn en buenas condiciones. En caso de que existan
cables en mal estado, reprtelos inmediatamente.
-Maneje el equipo elctrico y sus conexiones con las manos secas y cercirese que el piso se
encuentra seco.
-Mantenga seco el espacio alrededor del equipo elctrico.
-Antes de encender el mechero, revise que tanto ste como la manguera se encuentren en
buen estado, verifique que est adecuadamente conectado a la tubera de gas y retire todo
material inflamable cercano.
-En caso de accidente, retrese inmediatamente y cierre la llave de paso que se encuentra bajo
cada mesa.

5. Orden y limpieza

-Una vez verificado el buen estado del material de vidrio, lvelo para asegurar su limpieza.
-Mantenga siempre limpia y en orden su rea de trabajo.
-Cuando requiera volver a llenar sus frascos reactivos, transfiera del frasco de almacenamiento
la cantidad necesaria a travs de un vaso de precipitado, no devuelva el sobrante al envase
original, busque otro frasco reactivo y vierta el sobrante.
-Nunca emplee pipetas para efectuar este procedimiento.

Sistema Internacional de Unidades (SI)

En la Conferencia General de Pesas y Medidas, celebrada en 1960 en la ciudad de Pars, se
acept como sistema internacional el propuesto a principios del siglo XIX por el italiano
GIORGI.

En 1977 la OMS recomend la utilizacin del SISTEMA INTERNACIONAL DE UNIDADES (SI)

para poder expresar los resultados emitidos, realizar las conversiones pertinentes y as
optimizar la estandarizacin en los resultados.

El Sistema Internacional de Medidas, es un sistema decimal, lo que significa que los mltiplos
y submltiplos de la unidad bsica se obtienen multiplicando o dividiendo por potencia de diez.

Actualmente el SI est formado por ocho unidades bsicas: Metro (m), Kilogramo (Kg), Amperio
(A), Segundo (s), Kelvin (K), Candela (cd), Mol (M) y Katal (Kat), correspondientes a las
medidas de longitud, masa, corriente elctrica, tiempo, temperatura, intensidad luminosa,
cantidad de sustancia y cantidad cataltica, respectivamente. .

En el empleo del SI en el laboratorio debemos tener en cuenta que cuando trabajamos con
sustancias de pesos moleculares conocidos sus concentraciones deben expresarse en mol/l o
submltiplos. Por el contrario cuando los pesos moleculares sean desconocidos la
concentracin debe expresarse como masa/l (la forma tradicional de expresin generalmente
mg/dl)
Algunas unidades que no estn includas dentro del SI debido a su uso ampliamente difundido
se han mantenido y entre ellas tenemos el volumen expresado en litro (l), el tiempo expresado
en das (d), horas (h) o minutos (min)

Las unidades de capacidad son equivalentes a las de volumen y se emplean con mucho ms
frecuencia en el laboratorio. Las equivalencias ms importantes son las siguientes:

VOLUMEN CAPACIDAD

Metro Cbico (m3) Kilolitro (kl)

Decmetro Cbico ( dm3) Litro (l)

Centmetro Cbico (cm3) Mililitro (ml)

Milmetro Cbico (mm3) Microlitro (ul)

Actualmente en el laboratorio podemos encontrar una variedad de instrumentos de distintos

tipos de material: vidrio, plstico y porcelana, entre otros. Ninguno de ellos cumple todas las
exigencias del laboratorio por lo que la eleccin que va a depender de la aplicacin que se le
va a dar y tipo de producto a utilizar.

MATERIALES DE VIDRIO.

Los materiales de vidrio se caracterizan por tener gran resistencia qumica frente al agua,
cidos y bases, superior a lo que ofrece el plstico, adems, presentan mayor estabilidad y
transparencia. En el laboratorio se utilizan vidrios que se caracterizan por su resistencia
mecnica y su estabilidad trmica.

MATERIALES DE PLASTICO

Desde hace algunos aos el material de plstico se est utilizando con gran aceptacin en los
laboratorios, pueden ser de uso mltiple (probeta, matraces, vasos de precipitacin) o
descartables (puntas de pipetas, caja petri, cubetas de espectrofotmetro). Las ventajas del
plstico frente al vidrio son su resistencia a la rotura y bajo peso, la mayor parte de estos
utensilios plsticos utilizados en el laboratorio estn hechos de monmeros orgnicos
polimerizados.

MATERIALES DE PORCELANA

Se utilizan en menor escala y bsicamente cuando se requieren materiales que resistan altas
temperaturas. Como ejemplo podemos citar los crisoles y los morteros. Para evitar
adherencias de partculas a sus paredes, estos son instrumentos vidriados totalmente o en su
parte interna

CRISTALERIA DE LABORATORIO

Pipetas volumtricas, pipetas graduadas terminales y no terminales, probetas, buretas, vasos

de precipitacin, balones, erlenmeyers, tubos de ensayo, matraz, matraz aforado, vidrio reloj,
micropipetas,

MEDICION DE VOLMENES

Conviene llamar la atencin al hecho de que la cristalera y las soluciones usados en

volumetra deben emplearse a la temperatura ambiente cuando se haga la medida, puesto que
la mayor parte de las soluciones acuosas aumentan 0,02% en volumen por cada grado
centgrado de elevacin de la temperatura por encima de la de ambiente (20C)

En el laboratorio se emplean recipientes de vidrio que miden el volumen de lquido deseado.

Entre los ms importantes se encuentran: probetas, copas, buretas, cuentagotas, Erlenmeyers
pipetas volumtricas, pipetas graduadas, vasos de precipitacin y matraces
La unidad de volumen ms empleada es el cm3 o cc que es el volumen que ocupa un cubo que
tiene un centmetro de lado y equivale a la capacidad de un mililitro.

Aforo y graduacin: Se denomina aforado a un recipiente cuando una sola seal de enrase
marca la capacidad del aparato y graduado si tiene varias divisiones que permiten revisar la
medida conveniente en cada caso.

En general los matraces y pipetas volumtricas deben ser aforados, mientras que las probetas,
vasos, buretas y pipetas serolgicas, son graduados.

Errores en la medicin de volmenes: Dos son las causas de error ms en las medidas de
volumen de un lquido:

1. La superficie del nivel de una sustancia, especialmente en buretas, pipetas, y

probetas, no es plana sino en forma de menisco. El menisco es tanto ms acusado
cuando ms estrecho es el tubo, por lo que la lectura debe hacerse tangencialmente a
la curva del menisco.
2. El error de paralelaje se logra minimizar colocando la probeta, bureta o pipeta
completamente vertical y observando el menisco de enrase a la altura de los ojos.

EQUIPOS DE LABORATORIO

En esta prctica se mostrarn algunos equipos utilizados en el laboratorio de Bioqumica, as

como su utilidad. Entre ellos: centrfugas, pHmetro, espectrofotmetro y bao termostatado.

Para conocimiento de los estudiantes

El alumno debe utilizar la bata de laboratorio (mandil) durante la prctica.

El profesor evaluar durante la prctica la preparacin previa del estudiante.

Adicionalmente, se realizar una evaluacin escrita al finalizar la prctica.

Bibliografa

Rivas, MJ. 2003. Introduccin al trabajo de laboratorio. Mxico, D.F.: Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza, UNAM.

Rodrguez, JC. y col. 2010. Prcticas de Bioqumica. Espaa, Cantabria: Facultad de Medicina,
Universidad de Cantabria, UC.

Arteaga, MA. y col. 2014. Manual de Bioqumica. Ecuador, Manab: Universidad Tcnica de
Manab, UTM.