FUNDAMENTOS DA ESPECTROFOTOMETRIA

SUMRIO

INTRODUO AOS MTODOS ESPECTROMTRICOS

PROPRIEDADES GERAIS DA ONDA

PROPRIEDADES DA LUZ
PARMETROS DA ONDA
RELAO ENTRE FREQUNCIA E COMPRIMENTO DE ONDA
RELAO ENTRE ENERGIA E FREQUNCIA
ESPECTRO ELETROMAGNTICO
ABSORO MOLECULAR

ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA E VISVEL

LEI DE BEER-LAMBERT OU LEI DE BEER

DESVIOS DA LEI DE BEER
PRINCPIOS BSICOS E CARACTERSTICAS
INSTRUMENTAO
APLICAES

TCNICAS QUE UTILIZAM A DETECO UV-VISVEL

1
 INTRODUO AOS MTODOS ESPECTROMTRICOS

Abrangem um grupo de mtodos analticos baseados na espectroscopia atmica e

molecular

Espectroscopia: um termo geral para a cincia que estuda a interao dos diferentes tipos de
radiao com a matria.

Espectrometria e os mtodos espectromtricos: referem-se s medidas das intensidades das

radiaes usando transdutores fotoeltricos ou outros tipos de dispositivos eletrnicos.

Estudar de forma geral a(s) interao(es) da(s) onda(s) eletromagntica(s) com espcies
atmicas e moleculares.

Apresentar descrio dos diferentes tipos de mtodos espectromtricos empregados pelos

qumicos para identificao e determinao dos elementos presentes nas vrias formas de
matria.

Espectroscopia molecular: espectrometria de absoro molecular no ultravioleta / visvel

Espectroscopia atmica: espectrometria de emisso atmica; espectrometria de absoro

atmica

2
 ONDA

COMPRIMENTO DE ONDA
FREQUNCIA
VELOCIDADE
AMPLITUDE

Vcuo Meio suporte

RADIAO
ELETROMAGNTICA SOM

LUZ
3
 PROPRIEDADES DA LUZ

MODELO ONDULATRIO MODELO DE PARTCULAS

A radiao eletromagntica encarada

Falha na considerao de fenmenos
como um feixe de partculas discretas,
associados com a absoro e emisso
ou pacotes de ondas de energia, chamados
de energia radiante
ftons, nos quais E

Essas duas formas de viso da radiao

so complementares

DUALIDADE PARTCULA-ONDA

Aplica-se tambm ao comportamento de feixes de eltrons,

prtons e outras partculas elementares e est completamente
racionalizada pela mecnica ondulatria 4
 Para muitas aplicaes, a radiao eletromagntica convenientemente representada como um
campo eltrico e um campo magntico, que se propaga em fase, oscilando senoidalmente,
perpendiculares entre si e a direo de propagao

Somente a componente eltrica da radiao ser considerada pelo fato do campo eltrico ser
responsvel pela maioria dos fenmenos de interesse, incluindo transmisso, reflexo, refrao e
absoro.

Campo eltrico

Campo magntico

5
 PARMETROS DA ONDA

Amplitude (A) : o comprimento do vetor campo eltrico em torno do mximo da onda

Perodo (P): o tempo em segundos requerido para a passagem de sucessivos mximos ou mnimos
atravs de um ponto fixo no espao. A unidade expressa em s.

Freqncia (): o nmero de oscilaes completas que a onda faz a cada segundo (ciclos por segundo).
igual A 1/P e a unidade o segundo recproco (s-1). Uma oscilao por segundo tambm chamada de Hertz
(Hz).

Comprimento de onda (): a distncia linear entre quaisquer dois pontos equivalentes sobre sucessivas
ondas (metro por ciclo). (Ex: sucessivos mximos ou mnimos). A unidade expressa em nanmetros (nm).
6
 RELAO ENTRE FREQUNCIA E COMPRIMENTO DE ONDA

O Produto da freqncia em ciclos por segundo pelo comprimento de onda em metros por ciclo resulta na velocidade de
propagao em vi em metros por segundo

Vi = i (1)
A freqncia de um feixe determinada pela fonte e permanece constante.
A velocidade da luz representada pelo smbolo c (2.998 x 108 m/s no vcuo).
A velocidade da radiao depende sobretudo do meio atravs do qual ela passa.
No vcuo a velocidade da radiao independente do comprimento de onda e ela mxima.
Em um meio que no seja o vcuo, a velocidade da luz c/n, onde n o ndice de refrao do meio.

7
 RELAO ENTRE ENERGIA E FREQUNCIA

Em relao a energia, mais conveniente pensar na luz como partculas chamadas ftons. Cada fton
transporta a energia e, dada por:

E = h (2)
Onde h a constante de Planck (=6.626 x 10-34 J.s).
A equao estabelece que a energia proporcional a freqncia. Combinando a equao (1) e (2):

hc
E= = hc

Onde = (-1) chamado de nmero de onda (m-1 ou cm-1)

A energia inversamente proporcional ao comprimento de onda e diretamente proporcional ao nmero

de onda.

Ex.: A luz vermelha tem comprimento de onda maior do que a luz azul, ou seja, menos energtica que
a luz azul.
8
ESPECTRO ELETROMAGNTICO

9
 ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA E VISVEL

Princpios bsicos e caractersticas

FONTE DE SOLUO
INFORMAO
RADIAO CONTENDO DETECO
ANALTICA
MONOCROMTICA ANALITO

A espectrofotometria ultravioleta e visvel um dos mtodos analticos mais usados nas

determinaes analticas e diversas reas.

aplicada tanto para determinao de compostos inorgnicos como para compostos orgnicos.

A sensibilidade do mtodo est entre 10-4 a 10-5 mol.L-1, sensibilidade esta que, com avanos
tecnolgicos dos espectrofotmetros atuais, pode alcanar 10-6 a 10-7 mol.L-1.

A absoro da radiao visvel e ultravioleta depende, em primeiro lugar, do nmero e do arranjo dos
eltrons nas molculas ou ons absorventes. Como conseqncia, o pico de absoro pode ser
correlacionado com o tipo de ligao que existe na espcie que est sendo estudada.

uma ferramenta valiosa para a identificao de grupos funcionais na molcula.

Extremamente til para a determinao quantitativa de compostos contendo grupos absorventes ou

cromforos.
10
 LEI DE BEER - LAMBERT OU LEI DE BEER

Quando a luz absorvida por uma amostra, a energia radiante do feixe de luz diminui.

Quando o feixe de luz, com energia radiante P0 atinge uma amostra confinada em um recipiente
transparente de comprimento b, a energia radiante do feixe que sai do outro lado da amostra P.
Alguma quantidade de luz pode ser absorvida pela amostra, de forma que P P0

soluo de
concentrao c

Transmitncia: a frao de radiao incidente transmitida pelo meio

P P
T = %T = 100
P0 P0
11
 Imagine a luz de energia radiante P passando por uma camada de espessura infinitesimal de uma soluo cuja
espessura dx

A diminuio da energia dP e proporcional energia incidente P, concentrao das espcies absorventes

c e espessura da seo dx

dP Pcdx dP = Pcdx
Onde (seo de transversal de captura) uma constante de proporcionalidade e o sinal negativo indica uma
diminuio em P quando x aumenta. Os limites de integrao so P = P0 em x = 0 e P = P em x = b.

dP P dP b
= cdx = c dx ln P ( ln P0 ) = cb
P P0 P 0

P
ln 0 = cb
P
como ln z = (ln 10)(log z )
P P
ln 10 log 0 = cb log 0 = bc A = abc ou A = bc 12
P P ln 10
 MAGNITUDE DAS ABSORTIVIDADES MOLARES

A magnitude de depende da seo transversal de captura da espcie e da probabilidade de ocorrncia

de uma transio de absoro de energia.

= 8,7 x 10-19 PA

P probabilidade de transio.
A rea da seo transversal do alvo em centmetros quadrados.

A rea para molculas orgnicas tpicas tem sido estimada a partir de estudos de difrao de eltrons e de
raio x como sendo de 10-15 cm2, enquanto os valores de P variam de 0.1 a 1.

Bandas de absoro intensa (max = 104 a 105)

Bandas de baixa intensidade (max < 103), caracterstico das chamadas transies proibidas, com P < 0.01.

13
 P P0
T= e A = log = log T
P0 P

Notas:

A lei de Lambert-Beer considera a radiao incidente como monocromtica, os centros absorventes absor-
vendo independentemente um dos outros e a absoro ocorrendo em um volume de seo transversal unifor-
me. Portanto, A lei de Beer aplicvel a mais de uma espcie absorvente, desde que no haja interao
entre as diferentes espcies absorventes, pois as absorvncias so aditivas.

A lei de Beer no se aplica a solues com concentraes elevadas (>10-2 mol.L-1).

14
 Para radiao monocromtica, a absorvncia diretamente proporcional ao caminho tico b
atravs do meio e a concentrao c das espcies absorventes. Estas relaes so dadas por:

A = abc
Onde:
a uma constante de proporcionalidade chamada de absortividade (L g-1cm-1);
b o recipiente (cubeta) freqentemente em centmetros.
c em gramas por litro.

Quando a concentrao expressa em mol por litro e o caminho tico em centmetros, a

absortividade chamada de absortividade molar e representada por (psilon). Logo, como b
expresso em centmetros e c em mol por litro, tem unidade de L mol-1cm-1:

A=bc

A grandeza simplesmente um coeficiente de proporcionalidade entre a absorvncia e o produto

bc. Quanto maior a absortividade molar, maior a absorvncia. A absortividade molar caracterstica
de uma substncia que nos indica a quantidade de luz absorvida num determinado comprimento de
onda. Portanto, a equao anterior pode ser reescrita como:

A=bc

uma vez que A e dependem do comprimento de onda da luz.

15
 DESVIOS DA LEI DE BEER

Quanto a a natureza os desvios podem ser considerados como desvios reais e desvios aparentes.

Desvios reais: so desvios verdadeiros que limitam a aplicao da lei de Beer a sistemas possveis de
sofrerem tais distores.

Desvios aparentes: so relacionados s limitaes do instrumento usado para a medida da absorvncia

e tambm a fenmenos qumicos que podem ocorrer nas solues a serem medidas.

16
Causas de desvios reais

a) Variao do ndice de refrao com a concentrao

Certas molculas orgnicas complexas, como a eosina e o azul de metileno, so suscetveis a esse
tipo de alterao. A correo para este efeito pode ser efetivada utilizando-se a expresso
.n/(n2+2)2 em lugar de na equao A = bc, onde n o ndice de refrao da soluo.
Raramente este efeito ocorre em solues com concentraes inferiores a 0.01 mol.L-1.

b) Interao dos centros absorventes

Em altas concentraes, as partculas do soluto ficam to prximas que a distribuio de suas cargas
e a capacidade para absorver as radiaes de um determinado comprimento de onda se alteram.
Essa alterao pode ocorrer tambm em concentraes baixas da espcie absorvente, mas na
presena de altas concentraes de outras espcies, particularmente eletrlitos, pois pode ocorrer
uma interao eletrosttica.

17
As causas de desvios aparentes podem ser fsicas e qumicas

Podem ter origem na qualidade dos instrumentos utilizados nas medidas de absorvncia.

Causas fsicas

a) Falta de monocromaticidade da radiao

A aplicao da lei de Beer pressupe uma radiao monocromtica. Na prtica, entretanto, somente
alguns espectrofotmetros de alta qualidade so capazes de selecionar faixas espectrais de 1 nm de
largura. A grande maioria dos espectrofotmetros consideram faixas espectrais de 2, 5 ou 8 nm de
largura e os colormetros, que so dotados de filtros, isolam faixas espectrais mais largas ainda (30 a
50 nm). Quanto mais larga a faixa espectral selecionada, mais facilmente se evidencia esse tipo de
desvio.

A falta de monocromaticidade da radiao causa desvios negativos e constitui a causa de desvio

mais importante causada pelo instrumento
18
b) Resposta no linear da fotoclula

A fotoclula deve ser sensvel a pequenas intensidades de energia radiante que atravessam as
solues. A fotoclula deve produzir uma resposta eltrica diretamente proporcional intensidade
luminosa que incide na fotoclula. Quando isto no acontece por uma sria de fatores relacionados
com a potencialidade, fadiga e a qualidade das fotoclulas, ocorrer um desvio negativo da lei de
Beer.

c) Flutuaes da fonte

As flutuaes da intensidade luminosa procedente da fonte de radiao causam alteraes nas

medidas porque a transmitncia uma relao entre a radiao incidente P0 e a radiao que
atravessa a soluo P. Quando uma dessas se altera, a transmitncia tambm se altera e, como
conseqncia, a absorvncia alterada, o que ocasionar medidas incorretas. Esta alterao fcil
de ser eliminada, tendo-se o cuidado de usar um estabilizador de corrente.

Causas qumicas

a) Associaes moleculares

Fenmenos da associao molecular pode ser por causa da interao das molculas absorventes
entre si ou com o solvente. A polimerizao um exemplo quando as molculas monmeras
absorvem em comprimentos de onda diferente do comprimento de onda que absorvem as molculas
polmeras.

19
 Determinao de molculas monomricas Determinao de molculas polimricas

b) Deslocamento de equilbrios

Para explicar o efeito do deslocamento de equilbrio na obedincia da lei de Beer, o exemplo mais citado
o do equilbrio das solues aquosas de cromato (CrO42-, = 372) e dicromato (Cr2O72-, = 348 nm).

Cr2O72- + H2O 2HCrO4- 2H+ + 2CrO42-

20
 INSTRUMENTAO

Seletor de
Fonte de
radiao comprimento compartimento P0 Sistema P Dispositivo de
amostra / padro processamento
de onda detector de dados

b
1- Fontes de radiao

Lmpadas de deutrio ou hidrognio: um espectro contnuo na regio do ultravioleta produzido pela excitao de deutrio
ou hidrognio a baixa presso.
Lmpadas de filamento de tungstnio: A mais comum fonte de radiao visvel a lmpada de tungstnio.

2- Seletor de comprimento de ondas

Filtros de absoro
Filtro de interferncia
Cunhas de interferncia
Monocromadores (prisma ou rede de difrao)

3- Reservatrio de amostras

Clulas ou cubetas.
Regio do visvel : vidro, plstico,quartzo ou slica fundida.
Regio do ultravioleta: quartzo ou slica fundida.

4- Sistema de deteco

Fototubos, tubos fotomultiplicadores ou fotodiodos.

21
5- Sistema de controle, aquisio e processamento de dados
 SELETORES DE COMPRIMENTO DE ONDA

Para a maioria das anlises espectroscpicas, necessria radiao constituda de um grupo estreito de comprimentos
de onda, limitado e contnuo chamado banda.

Banda efetiva: a largura da banda da radiao transmitida em unidades de comprimento de onda em torno da meia
altura.

Uma largura de uma banda estreita aumenta a sensibilidade de mediadas de absorbncia e pode fornecer
seletividade.

freqentemente um requisito, do ponto de vista da obteno de uma relao linear entre o sinal ptico e a concentrao.

22
Filtro de interferncia

Utilizam interferncia ptica para fornecer bandas estreitas de radiao. Consiste de um dieltrico transparente (em geral
fluoreto de clcio ou fluoreto de magnsio) que ocupa o espao entre dois filmes metlicos semitransparentes.
Esto disponveis filtros com picos de transmitncia em toda a regio ultravioleta e visvel, e at cerca de 14 m no
infravermelho.
Normalmente, as larguras de banda efetiva so cerca de 1.5% do comprimento de onda do pico de transmitncia.

Filtro de absoro

So geralmente mais baratos que os filtros de interferncia, tm sido muito utilizados para seleo de bandas na regio do
visvel.
O tipo mais comum consiste de vidro colorido, ou de um corante suspenso em gelatina e disposto entre duas placas de
vidro. O primeiro tem a vantagem de maior estabilidade trmica.
Tm largura de banda efetivas que variam de 30 a 250 nm.

23
 Cor obsorvida
Cor observada
(cor complementar)

24
 MONOCROMADOR

Rede de difrao Prisma

Espectro visvel da luz de uma lmpada difratada por uma grade de difrao e por um prisma
25
 Um espectro de absoro um grfico mostrando como absorvncia ou a absortividade molar
variam com o comprimento de onda

A parte de uma molcula responsvel pela absoro de luz chamada de cromforo.

Qualquer substncia que absorve a luz visvel parece colorida quando a luz branca transmitida
por ela ou refletida a partir dela. A luz branca definida como radiao policromtica, pois contm
todas as cores do espectro do visvel.
. 26
CLULAS OU CUBETAS

27
FOTOTUBO

28
TUBOS FOTOMULTIPLICADORES

29
FOTODIODOS

30
31
ESQUEMA DE INSTRUMENTAO

Mono-feixe

32
Duplo feixe, com feixe separado no espao

33
Duplo feixe, com feixe separado no tempo
 ABSORO MOLECULAR

Emolecular = Eeletrnica + Evibracional + Erotacional

Emolecular : a energia total da molcula.

Eeletrnica : a energia eletrnica da molcula resultante dos eltrons e suas ligaes.
Evibracional : a energia resultante das vibraes inter-atmicas presentes nas espcies moleculares.
Erotacional : deve-se aos vrios movimentos rotacionais. 34
 ESPCIES QUE ABSORVEM

Espcies que absorvem contm eltrons , e n, incluindo molculas

orgnicas e ons.

A absoro de comprimentos de onda longos da radiao do ultravioleta e

visvel restrita e limitada a um nmero de grupos funcionais chamados
CROMFOROS, que contm eltrons de valncia com energia de excitao
relativamente baixas.

Os eltrons que contribuem para a absoro de uma molcula orgnica so:

- Aqueles que participam diretamente na formao entre tomos e desta

maneira associa-se a mais de um tomo.

- Eltrons anti-ligantes ou desemparelhados que esto em grande parte

localizados em torno de tomos como oxignio, halognios, enxofre e
nitrognio.

35
Transio * (abaixo de 150 nm)

Eltrons em um orbital ligante de uma molcula excitado para o orbital anti-ligante correspondente pela
absoro de radiao. A molcula descrita como sendo estado excitado , *.

Transio n * ( 140 a 2520 L cm-1 mol-1; 150 e 250 nm)

Compostos saturados contendo tomos com pares de eltrons desemparelhados (eltrons no ligantes) so
capazes de transio n *.

Transio (200 a 700 nm)

n * ( 10 a 1000 L cm-1 mol-1)
* ( 1000 a 10000 L cm-1 mol-1; 150 e 250 nm)

A maioria das aplicaes espectroscpicas para compostos orgnicos so baseados, sobretudo, em transies
de eltrons n ou para o estado * pelo fato da energia requerida para este processo propiciar a presena de
picos capazes de absorver em uma regio espectral experimental conveniente (200 a 700 nm).

Ambas transies requerem a presena de grupo funcional insaturado para prover orbital .

Estritamente falando, a estes centros insaturados absorventes que o termo cromforo se aplica.

36
NVEIS DE ENERGIA ELETRNICA MOLECULAR

37
 CARACTERSTICAS ASSOCIADAS A TRANSIO

Amostras que absorvem significativamente na regio visvel so sempre coradas, porque a cor resulta da
absoro de uma banda de freqncia de luz branca.

Compostos totalmente saturados no mostram absoro na regio visvel / ultravioleta.

Compostos que possuem dupla ligao absorvem fortemente no ultravioleta remoto.

Os compostos que possuem ligaes simples e duplas alternadamente, chamadas ligaes conjugadas,
produzem absoro em comprimentos de onda maiores. Quanto mais extenso for o sistema conjugado, mais
longo sero os comprimentos de onda absorvidos, podendo chegar a regio do visvel.

O sistema conjugado de um composto chamado cromforo. Os comprimentos de onda de mxima

absoro de um composto permitem identificar o cromforo que ele contm.

Os metais de transio tm orbital d incompleto e usualmente apresentam banda de absoro na regio

visvel e ultravioleta do espetro.

Auxocromismo: por definio, um auxocrmo um grupo funcional que por si s no absorve na regio
ultravioleta, mas tem o efeito de deslocar picos do cromforo para comprimentos de ondas maiores, bem como
aumentar suas intensidades.

Os deslocamentos dos comprimentos de onda so classificados como :

Batocrmicos: deslocamento para o vermelho ou deslocamento para comprimentos de onda mais longo.
Hipsocrmicos: deslocamento para o azul ou deslocamento para comprimentos de onda mais curto.

Quanto a intensidade de absoro:

Efeito hipercrmico:aumento da intensidade de absoro
Efeito hipocrmico: decrscimo da intensidade de absoro 38
CROMFOROS

39
EFEITO DE MULTICROMFOROS

40
41
 ABSORO DE ONS INORGNICOS

Absoro de ons inorgnicos

Um nmero de ons inorgnicos exibem picos de absoro na regio do ultravioleta, conseqncia da

transio n*.

Exemplos encluem os seguintes ons: nitrato (313 nm), carbonato (217 nm), nitrito (360 e 280 nm), azida
(230 nm), tritiocarbonato (500 nm).

Absoro envolvendo eltrons d e f

Absoro pelos ons lantandeos e actindeos.

Absoro dos elementos da primeira e segunda srie de metais de transio.

Absoro por transferncia de carga

Para propostas analticas as espcies que exibem absoro por transferncia de carga so de particular
importncia pelo fato de possurem alta absortividade molar (max > 10000).

Estes complexos proporcionam um meio altamente sensvel para a deteco e determinao dessas es-
pcies que absorvem.

Muitos complexos inorgnicos exibem absoro por transferncia de carga e por isso so chamados com-
plexos por transferncia de carga.(Ex: complexo de tiocianato com ferro III)

42
 APLICAO DA ABSORO MOLECULAR PARA ANLISE QUALITATIVAS

Espectrofotometria no ultravioleta e visvel tem aplicao um tanto limitada para anlises qualitativas pelo fato
do nmero de absores mximas e mnimas serem relativamente escassas.
PORTANTO, A IDENTIFICAO INEQUVOCA FREQENTEMENTE IMPOSSVEL.

Deteco de grupos funcionais

Embora no ocorra identificao inequvoca de um composto orgnico, contudo, o espectro de absoro na

regio do visvel e ultravioleta, amplamente utilizado para detectar a presena de certos grupos funcionais que
atuam como cromforos.

Uma banda fraca de absoro na regio de 280 a 290 nm, a qual deslocada para curtos comprimentos de
onda com o aumento da polaridade do solvente, um forte indcio de grupo carbonil.

Uma banda fraca de absoro em torno de 260 nm com indicaes de finas estruturas vibracionais constitui
evidncia da existncia de um anel aromtico.

43
APLICAO DA ABSORO MOLECULAR PARA ANLISE QUANTITATIVA

Escopo

Estima-se que, apenas no campo da sade, 95% de todas as

determinaes quantitativas sejam feitas por espectrofotometria ultravioleta /
visvel e este nmero representa mais de 3 milhes de testes dirios feitos
nos Estados Unidos.

Aplicaes a espcies absorventes

Aplicaes a espcies no-absorventes

44
 DETALHES DE PROCEDIMENTOS

Etapas em uma anlise fotomtrica ou espectrofotomtrica

Seleo de comprimento de onda

Variveis que influenciam a absorbncia

- Natureza do solvente, pH da soluo, temperatura, concentrao de eletrlito e presena de substncias

interferentes.

Limpeza e manuseio de clulas ou cubetas

Determinao da relao entre absorbncia e concentrao

- Curva de calibrao externa

- Curva de calibrao com superposio de matriz
- Curva de calibrao por adio de padro
- Curva de calibrao por padronizao interna

45
MTODOS DE REGISTRO GRFICO DE DADOS

46
 SOLVENTES

Efeito do solvente no espectro de absoro do

Acetaldedo.

47
ANLISE DE MISTURA

Quando existe mais de uma espcie

absorvente em soluo, o
espectrofotmetro associa a soma de
todas as espcies. Existem dois
casos de anlise de mistura:

a) Existe superposio significativa

entre os espectros dos dois
componentes puros em todas as
regies.

b) Existem regies nas quais cada

componente apresenta a
contribuio principal.

48
 O fator preponderante que permite A = M b [M]+ N b [N]
analisar as misturas que cada
comprimento de onda a absorvncia de
A = M b [M]+ N b [N]
uma soluo (contendo espcies M, N,
Z....) a soma das absorvncias de cada
espcie.

Absorvncia de uma mistura : A = i b [ki ]

Onde:

- ki representa as espcies M, N, Z, ....;

- i a absortividade molar de cada espcie

no comprimento de onda em questo;

- b o comprimento da clula.

Nota: os valores de se aplicam a cada espcie em cada comprimento de onda. As absortividades

molares de M e N em cada comprimento de onda devem ser medidas em experimentos separados.
49
Uma mistura dos compostos X e Y numa clula de 1,0 cm apresentou absorvncia
de 0,957 em 272 nm e 0,559 em 327 nm. Encontre as concentraes na mistura.

R: [X]=4,43x10-5 mol/L e [Y]= 5,95x10-5 mol/L

(mol-1.L .cm-1)
(nm) X Y
272 16440 3870
327 3990 6420

50
 PONTOS ISOSBSTICOS

Freqentemente, uma espcie absorvente, X, convertida em outra espcie absorvente, Y, durante o curso
de uma reao qumica. Se os espectros X puro e Y puro cruzam um com outro em algum comprimento de onda,
ento todos os espectros gravados durante essa reao qumica cruzaro no mesmo ponto, chamado ponto isos-
bstico.
A observao do ponto isosbsticos durante uma reao qumica uma boa prova de que apenas as duas es-
pcies principais esto presentes.

A465 = (HIn)465 b [HIn]+(In-)465 b [In-]

(HIn)465 = (In)465 = 465

A465 = 465 b ([HIn]+ [In-])

Um ponto isosbstico aparece quando:

x = y e [x]+[y] constante 51
 TITULAO ESPECTROFOTOMTRICA

Medidas fotomtricas ou espectrofotomtricas podem ser empregadas de modo vantajoso para localizar
o ponto de equivalncia de uma titulao quando o analito, o reagente ou o produto absorvem radiao. Al-
ternativamente, um indicador que absorva pode propiciar a mudana de absorvncia necessria para locali-
zao do ponto de equivalncia.

Curva de titulao espectrofotomtrica um grfico de absorvncia, corrigida pela mudana de volume, em

funo do volume de titulante.

As titulaes fotomtricas freqentemente fornecem resultados mais exatos que uma anlise fotomtrica direta,
pois os dados de vrias medidas so empregados para determinar o ponto final.

A presena de outras espcies absorventes podem no interferir, uma vez que apenas a variao na absor-
vncia est sendo medida.

O ponto final fotomtrico tem a vantagem sobre outros tipos usados comumente pelo fato de que os dados
experimentais so medidos bem distante da regio do ponto de equivalncia.

As reaes de titulao no precisam ter constantes de equilbrio to favorveis como aquelas necessrias
para uma titulao que depende de observaes prximas ao ponto de equivalncia. Pela mesma razo, solues
mais diludas podem ser tituladas.

52
CURVAS TPICAS DE TITULAO ESPECTROFOTOMTRICA

53
 Bureta

Bcher

Barra magntica

Agitador magntico
Correo da absorvncia pelas
variaes de volume

(V + v) / V

V = volume original da soluo

v = volume de titulante adicionado

54
 TCNICAS QUE UTILIZAM A DETECO UV-VISVEL

ANLISE POR INJEO EM FLUXO (FIA)

CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ATA EFICINCIA (HPLC)

ELETROFORESE CAPILAR (CE)

55