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Universit dOran Es-Snia

Facult des Sciences

Dpartement de Chimie

MEMOIRE

Prsent par

Mr Abderrahmane Benmiloud
Pour obtenir le diplme de

Magister

Discipline : Chimie
Ecole Doctorale : S.P.R.S.M.
structure, proprit et ractivit des systmes molculaires
Option : Analyse et Ractivit molculaire

Synthse et sparation TLC chiral des


drivs imino-hespridine

Soutenu le : 06/05/2012 devant la commission dexamen :

Mme D. EL Abed Pr. Universit dOran Prsidente


Mr S. Hacini Pr. Universit dOran Examinateur
Mr A. Miloudi Pr. ENSET dOran Examinateur
Mr A. Cheriti Pr. Universit de Bchar Rapporteur
Mr N. Belboukhari M.C-A. Universit de Bchar Co-Rapporteur
Ddicace :

A la mmoire de ma trs chre mre.

A mon pre.

A ma trs chre femme.

A toute mes surs et frres, et leurs

enfants ..

A toute mes amis


Avant-propos

Le prsent travail de magistre cadre dans la formation de lcole doctorale de


Structure, Proprit, et Ractivit du Systme Molculaire luniversit DORAN ES
SENIA, je tien a remercier vivement Prof. Abdelghani, Kralafa, responsable de
lcole doctorale en lui tmoignant ma profonde gratitude.

Le travail exprimental a t ralis au laboratoire LPSO (Laboratoire de


Phytochimie et Synthse Organique) lUNIVERSITE DE BECHAR.

Je remerci infiniment Prof. Abdelkrim, Cheriti, Directeur du laboratoire


(LPSO) de mavoir accueilli dans son laboratoire et de diriger mes recherches.
Je tien adresser tous les remerciements a Mme Doniazade El abed et Mr Salih
Hacini Professeurs LUNIVERSITE DES SENIA ORAN pour mavoir fait
lhonneur daccepter de juger ce travail.
Mes remerciements vont galement Mr Abdellah Miloudi professeur
lENSET ORAN de faire partie de mon jury.
Jexprime mes sincres remerciements Mr Nasser Bleboukhari, maitre de
confrences lUNIVERSITE DE BECHAR, qui a suivi de prs mes travaux de
recherche. Il ma permis par ses critiques et ses jugements damliorer ce travail quil
trouve ici lexpression de ma profonde gratitude.
Je noublie pas de remercier tous mes collgues des laboratoires LPSO et LCF :
Adel, Kamal, Omar, Zohra, Abdeghani, Mohammed, Yousef . ; pour leurs
sympathies et leurs cooprations.
Enfin, je ne remercierai jamais assez ma chre femme, pour son soutien, son
rconfort de chaque instant et pour tous les moments que nous partageons
ensemble durant ces deux annes de mmoire.
:

( ) - 4 -
TLC .
) --( D ) +( D .
. 254

- 4 - ,:

Rsum :
Huit imino-4-hespridine drivs ont t synthtiss par condensation de lhespridine
(extrait de peau dorange) et plusieurs amines temprature ambiante avec de bons
rendements. Les diastroisomres de ces composs ont t facilement spars par
CCM sur gel de silice optiquement pur. En utilisant les slecteurs chiraux D (+)
saccharose et le D (-) manitol temprature et pression atmosphrique 254 nm.

Mots-cls : Chiralit ; Sparation ; diastroisomres; TLC chiral ; Imino-4-


hespridine, Slecteur Chiral.

Abstract:

Eight imino-4-hesperidin derivatives were synthesized by condensation of hesperidin


(from orange peel) and several amines at room temperature with good yields. The
diastereoisomers of these compounds were easily separated by TLC on silica gel
optically pure. Using chiral selectors D (+) sucrose and D (-) manitol at temperature and
atmospheric pressure in 254 nm.

Keywords: Chirality; Separation; diastereoisomers; chiral TLC; Imino-4-hesperidin,


chiral selector.
SOMMAIRE
Liste des schemas.. 1
Liste des tableaux et des figures ... 2
Liste des Abrviations, symboles et Units utilise.. 3
Introduction gnrale :.... 6
Chapitre (I) : Diffrent mthode de synthse des imines
I.1. Introduction : 8
I.2 Les ractions de formation des imine base de Schiff : 8
I.3 Application des complexes de base de schiff :. 9
I.4 Cas gnral de formation des imines :.. 10
I.5 Mcanisme de formation des imines :.. 10
I.5.1 Raction avec les amines primaires :.... 11
I.5.2 Raction avec l'hydroxylamine :.. 12
I.5.3 Raction avec les hydrazines :..................... 13
I.5.4 Raction avec la semicarbazide :......................... 15
I.5.5 Raction de Mannich :......... 15
I.5.6 Raction de Wolff-Kischner :......... 16
I.6 Ractivit des imines :.................. 16
I.7 Mthodes de synthse de quelque imine :. 17
I.7.1 Synthse de 2,4-dinitrophnylhydrazines:........................................ 17
I.7.2 Synthse dImino gossypols (Bases de Schiff) Dianilino-gossypol :... 17
I.7.3 Synthse des complexes en mtal de transition avec N, Ligand base de Schiff de
l'hydrazone O-Chlate :.. 18
I.7.4 Synthse des ligands originaux d'imine de di-2,2 pyridyl :..... 19
I.7.5 Synthses de Complexes de Schiff-Base (di-imines) :.................................. 19
I.8 Proprits des ractions de formation des imine : 19
I.9 Conclusion:....... 22
Rfrence :.. 23
Chapitre (II) : Chiralit et Methode De Sparation Chirale

II.1 Aperu historique :. 26


II.2 Chiralit :.. 26
II.2.1 Carbone asymtrique:... 27
II.2.2 Centre symtrique ttradrique:.... .. 28
II.2.3 Configuration R/S : 28
II.2.4 Configuration D/L : 29
II.2.5 Pouvoir rotatoire :.. 30
II.3 Chiralit et bioactivit :.. 30
II.4Mthodes de sparation chirale :.. 33
II.4.1 Cristallisation fractionne:.... 33
II.4.2 Chromatographie chirale:...... 33
II.5 Les principes de la sparation chirale :................... 35
II.5.1 Sparation indirect:.... 35
II.5.2 Sparation directe:..... 35
II.6 Sparation des nantiomres par chromatographie :.. 36
II.7 Conclusion : ....... 39
Rfrences : ........... 40
Chapitre (III): Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.1 Introduction:. 44
III.2 Extraction et purification de lhespridine : . 46
III.3 caractrisation de lhespridine : .. 47
a) Chromatographie sur couche mince :.. 47
b) Point de fusion:.. 47
c) Analyse par spectroscopie UV :. 47
d) Analyse par spectroscopie Infra Rouge : 47
III.4 synthse en gnrale des imino-4-hsperidine :... 48
III.5 Mcanisme ractionnel de synthse :................ 51
III.6 Caractristiques des imino-4-hespridines :... 51
III.6.1 N-phnyle-imine-4-hespridine:.. 52
III.6.2 Ethyle-imine-4-hespridine : .. 53
III.6.3 L-tryptophane-imine-4-hespridine: .. 54
III.6.4 Amine-2-thylne-imine-4-hespridine : 55
III.6.5 Ure-imine-4-hespridine : 56
III.6.6 Thior-imine-4-hespridine:... 57
III.6.7 Isobutul-imine-4-hespridine:. 58
III.6.8 3-chloroaniline-imine-4-hespridine : ........................ 59
III.7 Discussions: ...... 60
III-8 Conclusion:....... 61
Rfrences : ......... 62

Chapitre (IV) : Sparation TLC chiral Des Imino-Hespridines

IV.1 Introduction : ..................... 65


IV.2 Choix de slecteur chiral : ........ 65
IV.3 Mode opratoire:.. 66
IV.4 Calcule des paramtres de chiralit :... 67
a) Facteur de capacit:.. 67
b) Slectivit 68
c) Rsolution:.... 68
IV.5 Analyse par vido-densitomtre :.. 70
IV.6 Sparation par chromatographie sur couche mince bidimensionnelle :. 71
IV.7 Discussion :......................... 71
IV.8 Sparation quantitative des deux diastroisomres de P1 par CLC : 73
IV.9 Conclusion :................ 77
Rfrence :............... 78
Conclusion gnrale:...................... 80
Liste des schmas

Schma (I.1) La raction de formation des imines 8


Schma (I.2) La mthode de Coleman pour la synthse des complexes.. 9
Schma (I.3) Condensation des carbonyles avec des compose azote... 10
Schma (I.4) Mcanisme ractionnel gnral de formation des imines... 11
Schma (I.5) Le sens favorise dans la prparation de base de schiff 12
Schma (I.6) Les diastrioisomres de limine form... 12
Schma (I.7) Raction de prparation des oximes. 12
Schma (I.8) Raction de dgradation de Whl 13
Schma (I.9) Les diastroisomres doxime produise. 13
Schma (I.10) Raction de prparation des hydrazones. 13
Schma (I.11) Synthse de phnylhydrazone. 14
Schma (I.12) Synthse de (D)-mannose (chimie des sucres) 14
Schma (I.13) Synthse de semicarbazone. ... 15
Schma (I.14) Formation de lion imminium dans la raction de Mannich... 15
Schma (I.15) Raction de Wolff-Kischner 16
Schma (I.16) Alkylation dune amine secondaire. 16
Schma (I.17) Raction dEschweiler-Clark... 16
Schma (I.18) Raction de formation de 2,4- dinitrophenylhydrazine (2,4-DNPH)... 17
Schma (I.19) Synthse dImino gossypols... 17
Schma (I.20) Synthse de bas de Schiff de l'hydrazone 0-Chlate..... 18
Schma (I.21) Synthse d'imine de di-2,2 pyridyl.. 18
Schma (I.22) Synthse dun di-imine 19
Schma (I.23) Synthse des imines a laide dun Dean Stark..... 20
Schma (I.24) Raction dune amine avec un aldhyde aromatique.. 20
Schma (I.25) Mcanisme gnral dhydrolyse damine.. 21
Schma (I.26) Les diffrents groupements stables des imines 21
Schma (II.1) Carbone asymtrique de Le Bel et VantHoff .. 27
Schma (II.2) Exemples datomes asymtriques appartenant au groupe 14. 28
Schma (II.3) La position du groupement NH2 pour dfini les acides amin (D/L)... 30
Schma (II.4) Structure molculaire des deux nantiomres de THALIDOMIDE... 31
Schma (II.5) Structure molculaire des deux nantiomres de KETAMINE.. 32
Schma (II.6) Structure molculaire des deux nantiomres dethambutol... 32
Schma (II.7) Emplacement des liaisons hydrognes pour le BENOXAPROFENE 36
Schma (II.8) Interaction de liaisons hydrognes.. 36
Schma (II.9) Surface du gel de silice... 37
Schma (III.1) Structure dhespridines.. 39
Schma (III.2) Structure de quelque glycoside flavanone... 45
Schma (III.3) Schma ractionnel gnral. 49
Schma (III.4) Mcanisme ractionnel gnrale de synthse des imino-hespridine. 51
Schma (IV.1) technique du logiciel Sorbflil, utilise pour le produit P2 70
Schma (IV.2) Diastroisomres des imino-Hespridines.... 72
Schma (IV.3) La formation de liaison hydrogne entre limino-Hespridine et le Mannitol 73
Schma (IV.4) La forme la plus stable de la molcule P01. 74
Schma (IV.5) Les spectres des deux diastroisomres par IR de produit P1.. 76
Schma (IV.6) Structure de deux diastroisomres rcuprs. 77

Liste des tableaux

Tableau (II.1) Leffet de chiralit sur lactivit pharmacologique de quelque principe active
mdicament... 31

Tableau (III.1) Flavanones dans les diffrentes varits d'agrume........................... 46

Tableau (III.2) Quantits des amines utilisent.. 48

Tableau (III.3) Imino-hespridines obtenu .......................... 50

Tableau (III.4) bande caractristique en IR pour les imino-hespridine. 60

Tableau (IV.1) Proprit physico-chimique des slecteurs chirals... 66

Tableau (IV.2) Masse de slecteur chiral quivalant au nombre de mole dimine... 67

Tableau (IV.3) Les paramtres de chiralit des imino-hespridines avec les deux slecteurs.............. 69

Tableau (IV.4) Rsultats obtenu daprs le logiciel Sorbiflil .. 70

Tableau (IV.5) les valeurs de max pour les deux daistroisomiare de P1 par UV visible... 73

Liste des figures

Figure (II.1) Simulation de chiralit 27

Figure (II.2) Configuration R et S... 29

Figure (III.1) Mesure de facteur de rtention sur une plaque CCM......................... 47

Figure (IV.1) Plaque CCM bidimensionnelle de produit P2.. 71

Liste des Abrviations, symboles et Units utilise

CCE : Electro- Chromatographie Capillaire.


CCM : Chromatographie sur Couche Mince.
CCMHP : Chromatographie sur Couche Mince Haute Performance.
CD : Dichrosme Circulaire.
CE : Electrophorse Capillaire.
CG : Chromatographie en Phase Gazeuse.
CPS : Chromatographie en Phase Fluide Supercritique.
Glu: Glucose.
HPLC : Chromatographie en Phase Liquide Haute Performance.
HPTLC: Haute Performance Thin-Layer Chromatography.
HRf: Hundred retention frontal
OMe : Methoxy.
PSC: Phase Stationnaire Chirale.
Rf: rapport au Front.
TLC: Thin-Layer Chromatography.
UV : Ultra Violet.
: Longueur donde.
J : constante de couplage.
DMF : N,N-dimthylformamide.
IR : infrarouge.
MeOH : Mthanol.
DMSO : N,N-Dimethyl Sulfoxide
S % : Zones de pics en pourcentage.
H % : Hauteur de pics en pourcentage.
RMN : Rsonance magntique nuclaire.
Rut : Rutinose
Nhes : Nohespiredose

Pf : point de fusion.
C : degr Celsius.
KBr : bromure de potassium.
t : temps.

K : facteur de capacit.

tm : temps mort de la colonne.

ts : temps de rtention du solut.

HRf : pourcentage du facteur de rtention (Rf).

CLC : chromatographie liquide sur colonne.

Introduction gnrale
Introduction Gnrale

Introduction gnrale :

Ces dernires annes ont vu de rapides progrs dans l'hmisynthse, des produits
diversit structurale, avec des centres de chiralit. Ainsi la chiralit est devenue un sujet
majeur dans la synthse, la dcouverte et le dveloppement de principe actif des
mdicaments. Le dveloppement d'un nantiomre isol offre des avantages thoriques et
cliniques et deux stratgies sont possibles : soit le dvelopper initialement, soit sparer le
racmat en ses deux nantiomres.

C'est dans ces deux contextes que se situe notre travail dont le fond est dtudier la
sparation TLC chiral de huit molcules drives dhespridine par l'usage de deux
diffrent slecteurs chiraux D(-)-Mannitol, D(+)-saccharose. Ces drives sont synthtises
par condensation non catalytique de lhespridine (extraite de la peau dorange) et une
srie de huit amines primaires.

Le premier chapitre, aborde une tude bibliographique sur les diffrentes mthodes de
synthse des imines surtout par les amines primaires et la ractivit de ces imines.
Le deuxime chapitre a t consacr entirement aux diffrentes mthodes des
sparations chirales et leur domaine dutilisation.
La synthse des huit drives imino-4-hespridines et leurs identifications par les
techniques spectroscopiques UV, IR, RMN H1 est dcrite dans le troisime chapitre.
Enfin, le quatrime chapitre prsente la sparation chirale de deux produits obtenus
par TLC chirale avec deux slecteurs chiraux (D(+) saccharose et le D(-) Mannitol) ce
qui nous a permis ltude des facteurs qui affectent la sparation chirale.

Chapitre I
Mthodes de synthse des imines

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.1. Introduction :

Les imines connaissent actuellement un dveloppement considrable en chimie


thrapeutique et en chimie des polymres. La fonction imine est une fonction plus simple
de formule gnrale [R1,R2C=NR3]. Les premires synthses de ce type de composs
imine ont t ralises en 1864 par Schiff [1]. Ils sont obtenus par condensation d'une
amine primaire avec un aldhyde ou une ctone. cause de cette ractivit les imines sont
utilis pour dtecter la prsence dun groupement carbonyle dans un compose, et pour
former les drivs cristallins des compose carbonyls cest une application importante [2].
Cherchons dans la littrature les diffrents mthodes de synthse des imines a fin de choisir
une pour la synthse dune srie de drives iminio-hespridine.

I.2 Les ractions de formation des imine base de Schiff :


Les premires synthses de ce type de composs (imine) ont t ralises en 1864 par
schiff, C'est ainsi que ces composs ont pris ensuite leur nom (base de schiff). Ils sont
obtenus par condensation d'une amine primaire avec un aldhyde ou une ctone, comme le
montre le schma ractionnel suivant :

R1 R1

O R NH 2 N R H2O

R2 R2

Schma (I.1) : la raction de formation des imines

On note dans cette raction que l'limination de l'eau est ncessaire pour dplacer
l'quilibre vers la formation de la fonction imine, utilisant comme solvant l'thanol absolu
qui forme un mlange azotropique avec l'eau permettant le dplacement d'quilibre vers la
formation de l'eau et cette opration est appele autocatalyse.

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

Les ligands auxquels ils sont intresss plus particulirement pour la ralisation de notre
travail sont les bases complexes de schiff. Ces ligands sont obtenus par la condensation de
laldhyde salicylique ou ces drivs sur une diamine aromatique [3].
La premire synthse de ces complexes est faite par Coleman [4].

Z
Z
H O
n(H2 C) (CH 2)m (CH2)m
(CH2 )n

H 2N H 2N
OH N N

BOH/KOH
ref lux OH HO

n m z
2 2 NH
2 2 -S-
2 3 NH
3 3 NH
3 4 NH

Schma (I.2) : La mthode de Coleman pour la synthse des complexes

I.3 Application des complexes de base de schiff :

Grce leurs importances dans la vie humaine, les complexes sont exploits dans divers
domaines, parmi lesquels on cite leurs utilisations dans :
- Le traitement de quelques maladies (accumulation du cuivre dans le foie, le cerveau et
les reins ou certaines formes de cancer.
- Lactivit biologique (activit antifongique, antibactrienne).
- Dans le domaine d'optimisation le taux de dcharge des batteries ainsi leur capacit.
- Dans le domaine de la chimie analytique (titrage, prcipitation et sparation des
mtaux).
- loxydation catalytique des hydrocarbures qui sont diversifis suivant la nature de
fonction chimique des composs organiques, tel que loxydation des alcools, carboxylation
des halognures, oxydation des amines primaire, les phnols et les hydrocarbures. Ce qui

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

intressent plus particulirement la ralisation de notre travail sont les complexes de base
de schiff souvent utiliss dans lpoxydation des olfines, ce dernier qui est
particulirement attirant depuis plusieurs dcennies, dans le cadre de synthtiss des
composs chimiques difficilement raliss. Ce qui nous pousse trouver des meilleures
conditions pour raliser la catalyse [3].

I.4 Cas gnral de formation des imines :

Dune faon gnrale les imines rsulte dune condensation damine primaire avec un
carbonyle (Schma I.3) [5,13].

R1 R
R R2
1
+ H2O
R NH2 + N

O R2

R ractif Produit Remarques


H ammoniac imine non substitue produit non isolable
CnH2n+1 amine imine substitue produit isolable
NH2 hydrazine Hydrazone produit solide
NHph phnylhydrazine phnylhydrazone produit solide
OH hydroxylamine Oxime produit solide
NH-CO-NH2 semi-carbazide semi-carbazone produit solide

Schma(I.3) : condensation des carbonyles avec des compose azote.

I.4 Mcanisme de formation des imines :

Le mcanisme de synthse des imines est trs voisin de celui de la synthse des actals.
Ltape au cours de laquelle se manifeste la diffrence de ractivit entre les amines et les
alcools est la cinquime tape : une limination intramolculaire est prfre dans le cas
des amines, alors que cest une substitution nuclophile qui se produit avec les alcools [6]
(schma I.4).

10

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

H R2 R1 H
R1 (a) R1
(b)
OH + H O + R N O
R2 R2 H H H N
H R

(c)

R 2 R1 H
O + H
H N
R

(d)

R1 H R1 H
R1 (f ) (e) R2
H + N H2O + N O

R2 R H N H
R2 R
R

Schma(I.4) : Mcanisme ractionnel gnral de formation des imines [6].

a. Activation du caractre lectrophile du driv carbonyl par protonation de latome


doxygne.
b. Attaque nuclophile de lamine sur le driv carbonyl proton.
c. Dprotonation.
d. Protonation de latome doxygne.
e. Elimination intramolculaire deau.
f. Dprotonation de limine.

I.5.1 Raction avec les amines primaires :

Lorsque R est un groupe alkyle, le compos obtenu est une imine substitue. Dans ce cas,
l'quilibre est plutt en faveur des ractifs. La situation est diffrente quand la conjugaison
entre la double liaison et un doublet non liant port par R permet une stabilisation du
produit form (schma I.5) [7].

11

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

O R
H
N
H2O
N
R1 R2
H R
R1 R2

amine imine (base de schif f )

Schma (I.5) : le sens favorise dans la prparation de base de schiff.

C'est le cas pour les oximes, les hydrazones et leurs drivs. Notons que les composs
substitus prsentent l'isomrie Z o E (Schma I.6).

Ph Ph
N N

H3C H H3C H

imine E imine Z

Schma (I.6) : les diastrioisomres de limine form.

I.5.2 Raction avec l'hydroxylamine :

Les oximes sont obtenues par raction de l'hydroxylamine avec un compos carbonyl. Ce
sont des composs gnralement cristalliss temprature ordinaire (schma I.7), ce qui
permet de les purifier. Parmi les ractions intressantes des oximes, la dgradation de
Whl permet de diminuer d'un atome de carbone la chane carbone d'un ose. Dans la
premire tape, on forme l'oxime de l'ose par raction entre ce dernier et l'hydroxylamine
[7]. Par raction avec l'anhydride actique, l'oxime est dshydrate en nitrile. (Schma I.8)

O OH
H
N
H2O
N
R1 R2
H OH
R1 R2

hydroxylamine oxime

Schma (I.7) : raction de prparation des oximes.

12

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

H N OH
H O

CHOH + H2O
+ NH2OH
CHOH
R
R

Schma (I.8) : raction de dgradation de Whl.

Lorsque l'oxime existe sous deux formes diastroisomres Z et E, le groupe qui migre de
faon prfrentielle est celui situ en anti du groupe OH de l'oxime. (Schma I.9)

OH HO
N N

H3 C H H3 C H

oxime E oxime Z

Schma (I.9) : les diastroisomres doxime produise.

I.5.3 Raction avec les hydrazines :

Lhydrazine ragit avec les composs carbonyls pour donner des hydrazones (schma
I.10).

O NH 2
H
N
H2O
N
R1 R2
H NH2
R1 R2

hydrazine hydrazone

Schma (I.10) : raction de prparation dhydrazone.

La phnylhydrazine, prpare pour la premire fois par E. Fischer, a jou un rle trs
important dans le dveloppement de la chimie des sucres. Les drivs qu'elle forme avec

13

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

ceux-ci sont facilement cristallisables. Ils peuvent tre purifis et caractriss par leur point
de fusion (Schma I.11) [6].
Ph

N
O N H
H

N Ph H 2O
R1 R2
H N R1 R2

phnylhydrazine phnylhydrazone

Schma (I.11) : synthse de phnylhydrazone.

Le fait que la raction se limite deux atomes de carbone est d la stabilisation de


l'osazone par une liaison H intramolculaire, et compte tenu de la faon dont se droule la
transformation, le (D)-glucose, son pi-mre le (D)-mannose, mais aussi leur isomre
ctonique le (D)-fructose, conduisent la mme phnylosazone (Schma I.12) [6].

H O H N NHPh

H OH H OH

HO H HO H H2O
+ NHPh NH 2 +
H OH H OH

H OH H OH

CH 3 CH 3

(D)-glucose (D)-mannose

Schma (I.12) : synthse de (D)-mannose.

14

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.5.4 Raction avec la semicarbazide :

H
O N NH2
N N
H H HN 2
H2O
R1 R2 O
R1 R2
H O

semicarbazide semicarbazone

Schma (I.13) : synthse de semicarbazone.


Remarque :
- les oximes, hydrazones, semicarbazones, ... sont souvent des produits solides dont le
point de fusion permet souvent l'identification des aldhydes ou ctones de dpart.
- A noter au niveau de l'lectrophile : les aldhydes ragissent beaucoup plus vite que les
ctones [6].

I.5.5 Raction de Mannich :

La raction de Mannich est une raction de condensation entre un aldhyde non-ionisable,


une amine primaire ou secondaire et un compos carbonyl ionisable. Dans un premier
temps, un ion imminium est form par action de l'amine sur l'aldhyde non ionisable. Puis
cet ion subit l'addition de l'nol pour donner le produit appel base de Mannich . Aprs
alkylation de l'azote et limination en milieu basique, la base de Mannich peut tre
convertie en une ctone-,-thylnique (schma I.14) [8].

R H H R H
NH H OH
+ O N C +
R' R' H
H

R CH 3
R H CH 3 -H
N H2 C H 2C C
N C + H 2C C O
R'
R' H O H

Schma (I.14) : formation de lion imminium dans la raction de Mannich.

15

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.5.6 Raction de Wolff-Kischner (1912) :


Cest une rduction de ctones passant par lintermdiaire dune hydrazine (Schma I.15)
[9].

R1 N NH 2
NH2NH2
O R1 H2O

R2 R2

Schma (I.15) : raction de Wolff-Kischner.

I.6 Ractivit des imines :


Les rducteurs utiliss sont HCOOH, NaBH4, H2/Ni pour obtenir les imines (Schma I.16).

Me Me Me

H 2 /N i H
M eN H2 O C Me N C Me N CH

Me Me Me

Les amines secondaires peuvent galement tre alkyles de la faon suivante :


Me
H H
Me N Et + O CH N C H2/Ni
-H2O Et
H

Me

N CH2

Et

Schma (I.16) : alkylation dune amine secondaire.

La raction dEschweiler-Clark. Cest une mthylation des amines secondaire par le


mthanal en prsence dacide mthanoque comme rducteur (schma I.17).
O
H
H C
CH2 O CO2 H
N O H
N
-H2O N
H
CH 2 CH 3
Schma (I.17) : raction dEschweiler-Clark.
16

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.7 Mthodes de synthse de quelque imine :


I.7.1 Synthse de 2,4-dinitrophnylhydrazone :
Les 2,4-dinitrophenylhydrazone sont particulirement utilises ; elles se forment
facilement lors de la raction de la 2,4- dinitrophenylhydrazine (2,4-DNPH) avec un
compos carbonyle. Le fait quun compos inconnu ragit avec la 2,4DNPH et forme un
driv solide orange indique que cest un aldhyde ou ctone (schma I.18) [3] [10].

H 3C H3 C
H H
C O H 2N N NO2 C N N NO2

H 3C H3 C

O 2N O2 N

(2,4-dinitrophenyl)hydrazine 1-(2,4-dinitrophenyl)-2-(propan-2-ylidene)hydrazine

Schma (I.18) : raction de formation de 2,4- dinitrophenylhydrazone (2,4-DNPH).

I.7.2 Synthse dImino gossypols (Bases de Schiff) Dianilino-gossypol :


Le gossypol ragit rapidement avec deux molcules daniline pour former le
dianilinogossypol, ce produit est purifi facilement, et Clark a utilis cette raction pour
extraire le gossypol des graines de cotonnier. On obtient le gossypol par hydrolyse avec
lacide sulfurique concentr (schma I.19).

H O H NC6H5
HO OH

HO OH
R C6H5-NH2 R

HO OH

Schma (I.19) : Synthse dImino phnyle gossypols.

17

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.7.3 Synthse des complexes en mtal de transition avec N, Ligand base de Schiff de
l'hydrazone O-Chlate :

Le complexe l'hydrazone 0-Chlate de la base de Schiff ont driv de la


condensation de 2 hydroxy-5-chloro-4-methylacetophenone avec de l'hydrazide du
nitrobenzoyl 4 (schma I.20) [7].

Cl
O H3 C cetone
O
Cl
CH3 N
N
H 3C OH OH CH 3 H
Ethanol NO2
+ Cl
O H 3C
OH
NH 2
N N
H
N
O2 N OH CH3
enol NO 2

Schma (I.20) : synthse de bas de Schiff de l'hydrazone 0-Chlate.


I.7.4 Synthse des ligands originaux d'imine de di-2,2pyridyl :

Ractions de 2.2-la ctone de dipyridyl et 2.6 Di-isopropylaniline ou (di-2-


pyridylmethylene) l'aniline 2.4.6 le trimethylaniline en tolune ont eu les moyens les
imines correspondantes de di-2-pyridyl, 2.4.6 la ligne trimthylique de l'ani- (di-2-
pyridylmethylene) .Les composs peuvent tre manipuls et stocks en air pendant des
mois sans dcompos (Schma I.21) [10].
R=2,4,6-Me3C6H2(1)

RNH2 Toluene
+
ref lux
N N N N

O N
R

N N
(PhCN)2PdCl2
CH2Cl2 N
Pd

Schma (I.21) : synthse d'imine de di-2-pyridyl.

18

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.7.5 Synthses de Complexes de Schiff-Base (di-imine) :


phenyl-1,3-butanedione, 2 hydroxy-4-methoxybenzophenone, thylnediamine des
ractifs pour lobtention dun bi-imine (schma I.22) [10].

O
OH
O HO OCH3
1-phenyl-1,3-butanedione
H2 N
NH2 C N N C
ethylenediamine
O
H3 C

OH O
2-hydroxy-4-methoxybenzophenone

Schma (I.22) : synthse dun bi-imine.

I.8 Proprits des ractions de formation des imine :

a) La formulation des imine ncessite une catalyse acide, ainsi sans catalyse acide la
raction est trs lente, bien quelle puisse se produire dans certains cas (les oximes,
par exemple, se forment sans catalyse acide mais elles se forment beaucoup plus
vite avec une catalyse acide). Il est important de remarquer que lacide nest pas
ncessaire pour ltape daddition, en fait, la protonation de lamine rend cette
tape trs lente en milieu acide fort), mais il est ncessaire pour llimination de
leau dans la suite de la raction. La formation dimine est en ralit la plus rapide
pH 4-6 : aux pH infrieurs, une trop grande proportion de lamine est protone et la
vitesse de la premire tape est lente ; aux pH suprieurs, la concentration des
protons est trop faible pour permettre la proportion du groupe partant OH dans
ltape de dshydratation. La formation de limine ressemble une raction
biologique : elle est plus rapide au voisinage de la neutralit [11].
b) Les imine sont instables, par apport au compos carbonyl et lamine de dpart, et
depuis il exige llimination deau du mlange ractionnel (Schma I.23).

19

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

Me

O Me
N Ph
cat.H
H2O
Ph Me H 2N Ph benzne au ref lux
(Dean stark) Ph Me

Schma(I.23) : Synthse dune imine a laide dun Dean Stark.

c) Les imines se forment partir des aldhydes ou des ctones avec la plupart des
amines Primaires. En gnral, elles ne sont assez stables pour tre isoles que si le
C ou N de la double liaison de limine porte un substituant aromatique. Les imines
formes partir de lammoniac sont instables mais on peut les dtecter en solution
CH2=NH2, par exemple, se dcompose aux tempratures suprieures -80C,
mais PhCH=NH peut tre dtect par spectroscopie UV dans un mlange de
benzaldhyde et dammoniac dans le mthanol (Schma I.24) [12].

CHO
NH 2
NH2 H 2O

Schma (I.24) : raction dune amine avec un aldhyde aromatique.

d) Les imines sont facilement hydrolyses en carbonyle et amine par les acides aqueux
en fait, la plupart peuvent tre hydrolyse par leau sans catalyse acide ni basique
(Schma I.25) [12].

20

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

H2O
Ph
Ph Ph H
Ph Ph
O
H2N OH OH
NH NH2 H
H 2N H 3N
H H

Ph Ph

O O
H

Schma(I.25) : Mcanisme gnral dhydrolyse damine.

e) Les imines dont latome dazote porte un groupement lectrongatif sont en gnral
stable cest le cas des oximes, des hydrazones et des semicarbazones (Schma I.26)
[10].

oxime
OH
N

O NH2
O NH2
Ph
NH
NH H2 N NH
N semicarbazide N
ctone

semicarbazone
phenyl-
hydrazone

Schma(I.26) : Diffrents groupements stables des imines.

21

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

I.9 Conclusion :
Dans cette partie bibliographique on a essay de balayer plusieurs mthodes de synthse
des imines. Les critres qui ont t retenus pour lobtention des imines partir dune
ctone, sont les suivant :

9 Lutilisation dun catalyseur acide pour former limine, sans catalyse acide la
raction est trs lente.
9 Les imines sont instables par apport au compos carbonyl et lamine de dpart.

22

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

Rfrence:

[1] Strecker, A; Justus Liebigs ann. 1850, chem 75, 2745.

[2] Bruneton, J ; pharmacognosie, phytochimie et plantes mdicinales. La Voisier Tec Et


Doc, Paris. 2me Edition. 1993, p.268-277.

[3] Kheniche, A ; Synthese et caracterisation de ligands et complexes des manganese (ii)-


bases de schiff pentadentates du type n,n'-bis(3- minopropyle)salicyldiiminato tudes des
proprits electrocatalytiques de complexes de manganse en prsence d'oxygene
moleculaire . mmoire de magister universite mohamed boudiaf msila ; p137 ;p13,14
(consult sur internet le : 25/09/2011).

[4] Coleman, W Taylor; Inorg Chem Soc. 1977, p16, 1114.

[5] Asit K. Chakraborti, Srikant Bhagat Et Santosh Rudrawar ; perchlorate de magnsium


catalyseur efficace pour synthse des imines et des phenylhydrazones. aot 2004, p 45,17.

[6] Fensterbank L, Jullien L;Document Daccompagnement De Chimie Organique(2007) ;


Universit Pierre Et Marie Curie PCEM 1. 2007, P171, P109 La Science AParis.

[7] Vi Thuy Dao ; Le Gossypol Et Ses Nouveaux Drivs : Synthse Et Etude Dactivits
Biologiques. Thse Docteur Universit De Paris-Sud U.F.R Scientifique dOrsay.2002,
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[8] Francis A, Carey R, Sundberg J; Chimie Organique Avance: Ractions Et Synthses.


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[9] Yorke J, Dent C, Decken A, Aibing X; synthesis, characterization, and applications


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[10] Vittorio S, Ulrich L; On The Formation Of Imines In WaterA Comparison.
Tetrahedron letters vol 50; 2009 page 4663-4665.

23

Chapitre I Mthodes de synthse des imines

[11] Clyden G, Warren W ; Chimie Organique. Edition Jacquemont Paris ; Janvier 2003,
p1508 ; p349, 356.
[12] Arzallier J, Mesnil C, Brenon F ; Chimie Organique 2-Reactions Classes Preparation
Cours De Chimie. Edition Vaibert 63bd St-Germain ; Fvrier 1987 p 217, 218, 219,220.

[13] Krim A ; Synthse Et Caractrisation De Nouveaux Drves Htrocyclique En


Sries Imidazo[1,2-A] Pyridine, Prparation Et Etude De La Ractivit De Limidazo[1,2-
A] Pyridine 2- Et3-Carboxaldhyde ; Mmoire de magister ;Centre universitaire de
Bchar ; 2007.

24

Chapitre II
Chiralit et mthode de sparation
chirale
Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.1 Aperu historique :

La chiralit molculaire est une caractristique lmentaire du monde vivant [1]. Un grand
nombre de fonctions biologiques et physiques reposent sur la reconnaissance molculaire
gnre par la chiralit [2]. La configuration de ces entits molculaires reprsente la
disposition spatiale des atomes ou des groupes d'atomes [3]. Cette notion de configuration
dcoule directement de la strochimie [4]. Ce sont les progrs conjugus de la physique et de
la chimie qui ont conduit les scientifiques du XIXme sicle la notion de chiralit.

Tout commence en 1808, quand Malus dcouvre la polarisation de la lumire et que plus
tard, en 1825, Biot montre que lacide tartrique possde la proprit de dvier la lumire
polarise alors quun acide du mme type appel racmique est inactif (racemus : grappe de
raisin) [5]. La relation entre pouvoir rotatoire et dissymtrie molculaire est faite en 1848,
quand Pasteur explique pourquoi lacide paratartrique ne montre aucun pouvoir rotatoire, bien
quil ait la mme composition chimique que lacide tartrique. En examinant attentivement
cette espce (que lon appellerait aujourdhui mlange racmique), Pasteur dcouvre quelle
est compose de cristaux hmidriques aux facettes orientes soit droite, soit gauche, en
les triant la pince, Pasteur spare les deux nantiomres et dcouvre que lacide tartrique
naturel possde un jumeau, dont les solutions font tourner le plan de polarisation de la
lumire dans le sens oppos [5]. Il montre ainsi lexistence dune dissymtrie molculaire ,
en posant les bases de la strochimie molculaire, anticipant au pralable la notion de la
chiralit. Vingt cinq annes plus tard et plus prcisment, en 1874, Le Bel et VantHoff
introduisent la thorie du carbone ttradrique, crant le concept du carbone asymtrique [6].
Enfin, en 1898, le physicien Lord Kelvin donne le nom de chiralit la proprit qui
distingue les nantiomres dune mme molcule [5].

I.2 Chiralit et proprits:

Le mot chiralit vient du mot grec kheir qui signifie main. La chiralit peut tre donc
dfinie comme une caractristique structurale qui fait quune molcule est asymtrique et non
superposable son image dans un miroir, exactement limage de la main gauche et de la
main droite (Figure II.1) [7].

Le mlange quimolaire de deux nantiomres s'appelle mlange racmique. Linversion


dun unique centre chiral sur une molcule en possdant plusieurs donne un stroisomre
qui nest pas son image dans un miroir. Un tel stroisomre est dit diastroisomre et

26

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

linversion sappelle une pimrisation. Gnralement, les nantiomres dune molcule


chirale sont dsigns diffremment (-, +, l, d, S, R, L, D). Deux nantiomres font tourner le
plan de polarisation de la lumire en sens oppos lun de lautre. On les dsigne donc par (+)
ou (-) selon quils dvient le plan de polarisation de la lumire vers la droite (substance
dextrogyre (d)) ou vers la gauche (substance lvogyre (l)). [5]

Figure (II.1) : Simulation de chiralit [8].

II.2.1 Carbone asymtrique :

Cest en 1874 que la relation entre le phnomne dactivit optique et les structures
molculaires a t tabli. Indpendamment, J.H. vantHoff, ainsi que J.A. LeBel, dcouvrirent
que tous les composs optiquement actifs connus possdaient un carbone asymtrique. Ils
avancrent donc que larrangement spatial des groupes autour dun atome de carbone central
est ttradrique [9].

Exemples les plus simples est le bromochlorofluoromthane CHFClBr (Schma II.1). Le


carbone asymtrique, not communment C*, est un lment strogne binaire car il possde
deux structures nantiomres [10].

a a H H

c c Cl Cl
d d F Br Br F
b b

Schma (II.1) : Le carbone asymtrique de Le Bel et vantHoff .

27

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.2.2 Centres asymtriques ttradriques :

Atomes du groupe 14 :

Dans le groupe 14 de la classification priodique, on trouve la mme situation pour Si, Ge,
Sn, Pb, que pour le carbone (Schma II.2). Le premier exemple dorganosilane chiral a t
prpar par Sommer et Collaborateurs [11].

H Si

CH3
Ge H

C2 H5

[]D=+33.4 []D=+23.6

Schma (II.2): Exemples datomes asymtriques appartenant au groupe 14.

II.2.3 Configuration R/S :


Les rgles squentielles de Cahn-Ingold-Prelog permettent daffecter un ordre de priorit aux
substituant dun centre asymtrique et de lui attribuer ainsi une configuration absolue, note R
ou S. Pour une molcule possdant un seul centre asymtrique, lnantiomre de la molcule
de configuration absolue R (Rectus) est S (Sinister) et vice versa.
Dans le cas dun carbone asymtrique, les substituants sont classs dans un ordre squentiel
dcroissant : a>b>c>d, bas sur les numros atomique des atomes directement lis au centre
de chiralit (Figure II.2) [11].

28

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

Figure (II.2) : configurations R et S [8].


II.2.4 Configuration D et L :
Lorigine de la nomenclature D/L se trouve dans les travaux dEmil Hermann Fisher
(1852_1919), sur la reprsentation des molcules organiques dans lespace et en particulier
des sucres, ou glucides, quil tudie ds 1884. Pour llaboration de la nomenclature D/L, il se
base sur le pouvoir rotatoire du glycraldhyde ou 2,3-dihydroxypropanal, pour lequel un
nantiomre est lvogyre(-) et lautre dextrogyre(+). Il dcide arbitrairement que le
glycraldhyde dextrogyre porte le groupe OH droite [12].
Plus tard (vers 1951), des travaux exprimentaux montrent qu'il n'y a aucune corrlation entre
les configurations D et L, et les rotations (+) et (-). Le D-isomre ne doit pas avoir la rotation
(+), et pareillement le L-isomre ne doit pas avoir la rotation (-). Pour quelques composs D-
isomre est (+), et pour d'autres L-isomre peut tre (+). De mme, parce que certains nous
pouvons avoir L (-) et d'autres peuvent avoir D(-) [13].
Pour les acides amins, les sries D et L sont dtermines par la position de la fonction amine
porte par le carbone asymtrique (Schma II.3). Si le groupement NH2 est droite de la
chaine carbone il sagit dun acide amin de la srie D et inversement sil se trouve gauche,
il sagit dun acide amin de la srie L [14].

COOH COOH

H 2 N H H N H 2

R R
srie L srie D

Srie prsente chez lhomme srie frquente chez les microorganismes

Schma (II.3) : Position du groupement NH2 pour dfini les acides amin (D/L)

29

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.2.5 Pouvoir rotatoire :

La rotation optique est mise en vidence laide dun polarimtre. Un faisceau lumineux est
transform en un faisceau de lumire polarise plane: le faisceau lumineux oscille dans une seule
direction. Dans le polarimtre, cette lumire polarise passe ensuite travers une cellule de
longueur connue, dans laquelle est contenue une solution de la molcule analyser. Si la molcule
est optiquement active, le plan de la lumire polarise est dvi dun angle , enregistr par un
analyseur. Cet angle de dviation est appel pouvoir rotatoire de la molcule analyse. [14]

Figure II.3 : phnomne de mesure de pouvoir rotatoire (polarimtre) [15].

Le pouvoir rotatoire spcifique [] est dfini selon :

:valeur mesure au polarimtre

[]t = /C.L avec C : concentration en g/cm3

L : longueur de la cuve en dm

II.3 Chiralit et bioactivit :

Actuellement, les molcules bioactives utilises en pharmacie, l'agrochimie ou en cosmtique


sont de plus en plus dveloppes sous forme d'un unique nantiomre. Deux nantiomres
d'une molcule chirale possdent, de manire gnrale, des activits biologiques diffrentes.
Lexemple le plus flagrant tant celui o un nantiomre se rvle toxique pour l'organisme
alors que l'autre possde une activit bnfique. C'est pour ces raisons que 40% des
mdicaments mis sur le march en 2000 possdaient une molcule nantiopure comme
principe actif [18] (tableau II.1).
30

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

Tableau (II. 1) : leffet de chiralit sur lactivit pharmacologique de quelque principe actif
de mdicament.

Principe active Forme (S) Forme (R)

Barbiturique S Convulsivant Anesthsiant

Acide ascorbique vitamine C Inactif

Propranolol -bloquant 100fois moins puissant

Sulpiride problmes gastriques Anti dopamine

Ethambutol (S, S) antituberculeux (R, S) dcroit la vision

Pnicillamine Antiarthritique Toxique


Amphtamine Stimulant du systme nerveux 3 4 fois moins actif, induit des
central (SNC) psychoses paranodes

De plus, aujourdhui, la loi impose toute socit dsireuse de dvelopper un nouveau


principe actif sous forme racmique, de prouver l'activit des deux nantiomres ou bien de
montrer que l'nantiomre dit "indsirable" n'a pas d'effets secondaires. Parmi les plus tristes
exemples de lutilisation de mlanges racmiques, citons les cas de thalidomide, la ktamine
et lthambutol [13].

- La thalidomide est distribue en Allemagne en 1957 sous le nom de Contergan et

devient rapidement le sdatif et le calmant le plus apprci [13]. En 1960, on estime ~15000
ftus qui ont t touch par la thalidomide et qui sont presque tous ns avec des
malformations; et plus de la moiti de ces enfants n'a pas vcu plus d'une anne (schma II.4)
[16].

O O

N O O N
NH HN
O O O O

(S) tratogne (R) analgsique


Thalidomide
Schma (II.4) : Structure des deux nantiomres de THALIDOMIDE.

31

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

- La ktamine tait originellement destine tre utilise chez lhomme et chez lanimal

en tant quanesthsique. Du fait de ses effets hallucinognes chez lhomme, elle est devenue
rapidement un produit recherch pour usage illicite (Schma II.5).

NH HN

O Cl Ketamine Cl
O
(S)ansthsique (R) Hallucinogne

Schma (II.5) : Structure des deux nantiomres de KETAMINE.


- Lthambutol est un driv synthtique de lthylnediamine dont laction antibiotique

a t dcouverte en 1961. Lorsquil a t synthtis, diffrents isomres (dextro, lvo, mso,


racmique) ont t utiliss mais seul le driv dextrogyre a finalement t retenu. En effet, les
autres isomres ncessitent une posologie plus leve pour obtenir une efficacit semblable et
leur toxicit, notamment oculaire, est bien suprieure. Ceci explique la frquence des
accidents oculaires survenus au dbut de lutilisation de ce produit (Schma II.6) [17].

OH HO

H
N H
N
N N
H H

OH Ethambutol
HO
(S,S):anti-tuberculique (R,R): rend aveugle

Schma (II.6) : Structure des deux nantiomres dETHAMBUTOL.

Aujourdhui, environ la moiti des mdicaments mis sur le march contiennent au moins un
centre asymtrique. La majorit est employe sous forme diastroisomrique ou racmique.
Mais, depuis quelques annes, la commercialisation dun nantiomre pur, de prfrence au
mlange racmique, a pris un grand essor. Lindustrie pharmaceutique a montr au cours de
ces dernires annes un trs fort intrt pour la production et la commercialisation de
mdicaments nantiopurs la place des mlanges racmiques.

32

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.4 Mthodes de sparation chirale :

II.4.1 Cristallisation Fractionne :


La recristallisation fractionne a longtemps t la technique de choix pour prparer des
composs optiquement purs. Cette mthode est base sur des diffrences de comportement
thermodynamique des deux antipodes dun racmique : en prsence dun agent rsolvant
chiral, ils donnent des complexes ayant des solubilits distinctes. Elle prsente certains
inconvnients [18] :

9 Longue mettre en uvre.


9 Elle nest pas labri derreurs rsultant de vitesses de raction diffrentes.
9 La racmisation du ractif chiral ou de racmisation lors de ltape finale de libration
du ractif chiral.

C`est la mthode la plus commune de rsolution d`nantiomres ioniques, et elle est celle
labore par Pasteur. Deux nantiomres ont les mmes proprits physiques et chimiques
tant que le phnomne ou le ractif est achiral : ils ne peuvent pas en gnral tre spars.
En revanche, deux diastroisomres ont gnralement des proprits physiques diffrentes,
ce qui permet de les sparer par exemple par cristallisation fractionne.
Pour sparer un mlange de deux nantiomres, on peut les faire ragir, par une raction
renversable, avec un ractif chiral de configuration donne. Les diastroisomres du
mlange obtenu peuvent tre spars. Il sagit en suite de librer sparment chacun des
nantiomres. Le choix du ractif est important car toutes les tapes doivent avoir dexcellents
rendements, la recristallisation fractionne et la chromatographie.
II.4.2 Chromatographie chirale:

Les dveloppements des chromatographies ont permis la mise au point de techniques de plus
en plus performantes. Les proprits physico-chimiques de deux nantiomres sont identiques
sauf lorsquils sont placs dans un environnement dissymtrique. Ce dernier peut tre obtenu
par trois mthodes :

1. les nantiomres sont transforms chimiquement en diastroisomres et spars


ensuite avec des phases stationnaires et mobiles achirales.
2. un agent chiral est ajout la phase mobile dans laquelle vont se former des
complexes diastro-isomres labiles.

33

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

3. la sparation repose sur la formation de complexes diastro-isomres labiles entre


chaque nantiomre et la phase stationnaire chirale : la slectivit de la sparation
chirale est alors directement lie la diffrence de stabilit des complexes ainsi
forms [19].

Dans la chromatographie sur couche mince on peut utiliser une de trois techniques pour la
sparation des composs nantiomrique [20] :

1. Sparation directe en employant des phases stationnaires chirales, effectues par la


formation des complexes diastereomerique d'association.

- Chromatographie sur papier (cavits chirales).


- Technique dimpression molculaire.
- Chromatographie sur couche mince-plats d'amides d'acide acrylique.
- Plats sur couche mince de cellulose.
- Plats sur couche mince de cyclodextrine.
- Plats de chromatographie sur couche mince enduits des composs chiraux.
- Ligand-changer les plats de chromatographie sur couche mince.

2. Sparation des phases stationnaires ordinaires au moyen d'additifs chiraux dans l'luant, qui
forment complexes diastereomerique avec le substrat.

3. La sparation des phases stationnaires achiral par l'intermdiaire des drivs


diastereomerique a form par la raction de l'chantillon avec du ractif chiral.

Dernirement des mthodes telles que la chromatographie en phase gazeuse(CG),


Chromatographie en phase liquide haute performance(HPLC), chromatographie en phase
fluide supercritique(CPS), et la chromatographie sur couche mince(CCM) ont t dvelopps
en utilisant diffrents principes de sparation chirale. Plus rcemment, lectrophorse
capillaire(CE) et de l'lectro-chromatographie capillaire (CCE) se sont rvls de puissants
alternatives aux mthodes chromatographiques. Plusieurs principes de sparation utilise avec
succs en HPLC ont t transfrs au CE et CCE [21].

34

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II. Les principes de la sparation chirale :

Les sparations chromatographiques d'nantiomre peuvent tre effectues indirectement en


employant les ractifs chiraux de drivatisation pour former les drivs diastereomerique ou
directement utiliser les slecteurs chiraux, qui peuvent tre incorpors dans la phase
stationnaire ou la phase mobile [22].

II.5.1 Sparation indirecte :

Un large ventail des ractifs chiraux de drivatisation ont t dvelopps pour


chromatographie gazeuse, chromatographie liquide sous haute pression, et chromatographie
lectrophorse. Pour la Chromatographie liquide sous haute pression et la CE, les ractifs de
fluorescence sont d'intrt particulier en ce qui concerne augmenter la sensibilit de dtection
[23]. En outre, le ractif chiral de drivatisation doit tre optiquement pur, et on doit s'assurer
qu'aucune racmisation n'a lieu pendant la raction. D'une part, beaucoup de problmes ne
peuvent tre rsolus par des approches directes de sparation [24].
II.5.2 Sparation directe :

La manire la plus facile d'effectuer la sparation directe est d'ajouter un slecteur chiral la
phase mobile dans le cas de la chromatographie liquide sous haute pression, de la
chromatographie sur couche mince et de la CE. Cette approche simple donne de bons rsultats
dans beaucoup de cas, mais elle n'est pas toujours faisable et son cot est lev avec des
ractifs chers [25].

Plusieurs modles pour que les conditions obtiennent l'identification chirale ont t discutes.
Le modle le plus fiable est le modle trois points de contact, propos par Dalgliesh, qui
postule que trois interactions doivent entrer en vigueur et au moins l'un d'entre eux doit tre
stroslective [26].Ce modle peut tre appliqu la plupart des principes chiraux de
sparation.

Bas sur les proprits des liaisons hydrognes multiples plusieurs travaux ont t dvelopps
dans le domaine de la sparation chirale chromatographique ainsi des phases chirales de
chromatographie gazeuse bases sur les esters acides L-amins n-trifluoroactyliques et les
acides amins n-trifluoroactyliques ont t dvelopps [27]. De mme une phase de
chromatographie gazeuse base sur le diamide de valine lie aux polysiloxanes, a t
commercialise sous le nom de Chirasil-Val par Bayer. Plus tard plusieurs autres phases
chirales de chromatographie gazeuse ont t dveloppes, et des mcanismes d

35

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

emplacements de reprsentation des liaisons d'hydrognes pour le benoxaprofen ont t


proposes (schma II.7) [28].

Schma (II.7) : Emplacements des liaisons d'hydrognes pour le benoxaprofen.

Des phases de chromatographie liquide sous haute pression utilisent des amides d'acide amin
en tant que slecteurs chiraux ont t prpares. Dans les annes 70, le groupe Pirkle a
introduit le consepte de phase chirale de -donneur et de -accepteur, La capacit chirale
d'identification pour un large ventail des composs avec des groupes de -donateur en plus
des - interactions. Enfin, il a t constat que le diple empilant et les liaisons hydrogne
sont les interactions responsables de lidentification chirale [29] (Schma II.8).

Schma (II.8) : Interaction de liaisons hydrognes.

II.6 Sparation des nantiomres par chromatographie :

Des tudes intensives de divers polysaccharides, particulirement ceux des drivs de


cellulose, indiquent une corrlation entre leurs capacits chirales d'identification et leurs
proprits lectroniques et structurales ont tablie que l'identification chirale pour le benzoate
et le phenylcarbamate des drivs de la cellulose dpend considrablement du type et de la
position des substituant prsents au-dessus du groupe phnyle [30].

36

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

LHPLC peut tre employe pour sparer des nantiomres indirectement avec des ractifs
chiraux de drivation ou directement avec des phases stationnaires chirales ou des additifs
chiraux de phase mobile [31]. Cependant, la drivatisation reprsente une tape additionnelle
ce qui peut impliquer des ractions secondaires indsirables, formation des produits et de la
racmisation de dcomposition.

l'heure actuelle le gel de silice est l'adsorbant chromatographique le plus employ


couramment. La surface du gel de silice est recouverte de groupement Si-OH et Si-O-Si qui
peuvent prsenter une interaction avec les molcules de l`chantillon (schma II.9) [32].

Schma (II.9): Surface du gel de silice.


Les groupements les plus importants sont les radicaux hydroxyles, il en existe deux types [32,
33] :
Les hydroxyles libres (OH) dont le niveau d`nergie est d`environ 30 KJ/mole et les
hydroxyles ractifs dont l`nergie de liaison est de l`ordre de 55 KJ/mole. Ces derniers
radicaux forment des liaisons trs fortes qui peuvent provoquer l`adsorption
permanente de certains composants polaires de l`chantillon et qui adsorbent des
molcules d`eau sur le gel de silice. Cette double activit est souvent responsable d`un
largissement ou d`une division des pics et d`un manque de reproductibilit des
rsultats.
Les hydroxyles ractifs peuvent tre dsactives en utilisant une phase mobile
mlange contenant de l`eau ou, de prfrence, un alcool.
En fin nous rsumons dans le tableau qui suit les diffrentes phases utilise dans la
sparation chromatographique des nantiomres.

37

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

Tableau(II.2) : structure de quelque slecteur chiraux [34].

Nom
Slecteur chirale R nomenclature
commercial

R CH 3 Cellulose tris methoxoate Chiralcel OA


O
O Cellulose tris benzoate Chiralcel OJ
O
O
Cellulose tris 4-mthyl esters Chiralcel OB
O O CH 3
benzoate dthyle
R
R O
O
Cellulose esters Cellulose tris 4- Chiralcel OK
HC HC
ethylenephnylcianate

Cellulose tris Chiralcel OC


phnylcarbamate.
R
NH C H3

O Cellulose tris 3,5- Chiralcel OD


O dimthylphnylcarbamate
CH 3
O
O
Cellulose tri 4-chloro- Chiralcel OF
Cl
O O phnylcarbamate
NH
HN O R Cellulose tri 4-methyl - Chiralcel OG
O CH 3phnylcarbamate
R
Cl

Cellulose Cellulose tri 3,5- _


carbamates chlorophnylcarbamate
Cl3
Cellulose tri-4
cyclopentophnylcarbamate _

R amylose tris benzoate _


NH aromatiques
C H3
O amylose tris 3,5- Chiralpak AD
O
dimthylphnylcarbamate
O CH 3

Cl amylose tri 4- _
O O O chlorophnylcarbamate
NH
HN O O R H3 C
amylose tris (S)-1-
R Chiralpak AS
mthylphnylcarbamate

Amylose Amylose tri-4 _


carbamates cyclopentophnylcarbamate

38

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.8 Conclusion :

La sparation chirale est devenue une mthode prfre pour accder rapidement aux
composs nantiopure dans l'industrie pharmaceutique, en grande partie d la vitesse avec
laquelle une mthode chromatographique peut tre dveloppe et excute. L'utilisation de la
chromatographie TLC chiral pu rsolu diffrent problme de sparation observe
actuellement en chimie analytique. Ainsi la chromatographie sur couche mince et sur la
cellulose a t trs utilise dans ce contexte. Plus particulirement, depuis les annes 70 ou il
ya eut un dveloppement de phase chiral et dappareillage.

39

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

II.9 Rfrences :

[1] Sverine J, valuation des proprits striques et lectroniques,Synthse danalogues


et applications en catalyse asymtrique , thse De Doctorat de luniversit paris (VI),
Soutenue le 9 dcembre 2005 ; p1.

[2] Meierhemrich U.J, Amino acides and the asymetry of life, 2008; Springer.

[3] Maystre. D and Enoch. S, Perfect leneses made with left-handed materials, Alice
mirror; 2004, J.Opt.Soc.Am.122-131.

[4] Ward.T, chiral separations; 2002, anal, chem.74.

[5]Jonathan M. Synthse de nouvelles diphosphines et nouveaux phosphoramidites


dissymtriques chiraux par atropoisomrie tude de leurs proprits en catalyse
asymtrique , Thse de doctorat ; 5 novembre 2004, luniversit paris. p. 8,9.

[6] Sverine J. Synphos et Difluorphos : diphosphines chirales par atropoisomrie


valuation des proprits striques et lectroniques, Synthse danalogues et applications
en catalyse asymtrique Thse de doctorat ; 9 dcembre 2005, luniversit paris ; p. 2.

[7]Haroun M. Phases stationnaires chirales base de teicoplanine et damino-


glycosides pour la sparation dnantiomres dacides amins Thse de doctorat ;23 mai
2007, luniversit Joseph Fourier - Grenoble 1. Facult de Pharmacie ; p.17, 18.

[8]Amigoni S, Fensterbank H et Gaucher A, chimie organique Edition Belin France ;


septembre (2004), p.61, 62, 63,66.

[9] Pinault J.F. Travaux sur le dveloppement dun auxiliaire chiral applicable la phase
solide et permettant de crer des centres chiraux quaternaires thse pour lobtention du
grade matre s sciences par Jean-Franois Pinault Universit de Sherbrooke, Avril 2004,
Canada, p.3, 4,5.

[10] Krausz P, Benhaddou R, Granet R, Mini manuel de chimie organique ; 2008, Dunod.

[11] Satyajit D.S, Lutfun N; chemistry for pharmacy students; general, organic and natural
product chemistry; edition Wiley, 2007, England; Vol 43.

[12] Beesley T.E, Raymond P et Scott W; Chiral Chromatography Edition Wiley & Sons;
November (1998), England P.12, 13.

[13] Brnest L.E, Samuel H.W, strochimie des composes organiques Edition Tec & Doc,
Paris (1996), p. 58.59.62.64.1156.1160.

40

Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

[14]Madesclaire M. Stroisomrie Edition ellipses France (1987). P.17, 24, 28, 29, 41,
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[15] Gagnon J.M : sminaire de sherbrooke ; 2001, (Qubec) Canada hiver.

[16]Rathgeb X. Catalyse asymtrique l'aide de ligands phosphoramidites pour la


substitution d'olfines Thse de doctorat ; 1 octobre 2007, l'Universit de Genve p ,7.

[17] Dupont G, Duteil M et Bernard C.L ; cours de chimie organique Edition Mar Keting
(1986).p. 60.

[18] Rosset R, Caus M, Jadry A; chromatographie en phases liquides et supercritique; dition


MASSON; 1991, Vol 2.

[19] Timothy J. W; Chiral Separations. Analytical Chemistry; (2006), 78 (12): 3947-3956.

[20]Francotte E.R., Enantioselective chromatography as a powerful alternative for the


preparation of drugenantiomers, J. Chromatogr., 2001, 906, 379397.

[21] Gerald G* and Martin G.S, Chiral Separation by Chromatographic and


Electromigration Techniques. Biopharmaceutics & Drug Disposition (2001); 291336.

[22] Welch, C.J., Kress, M.H., Beconi, M. and Mathre, D.J., Studies on the racemisation of
a stereolabile5-aryl-thiazolidinedione, Chirality, 2003, 15(2), 143147.

[23] Lipkowitz, K. B. Atomistic modelling of enantioselection in chromatography. J.


Chromatogr (2001); A 906, 417442.

[24] Zhou Y, Luan P, Liu L, Sun ZP. Chiral derivatizingre agents for drug enantiomers
bearing hydroxyl-groups. JChromatogr B 1994; 659: 109126.

[25] Dalgliesh CE. The optical resolution of aromatic aminoacidson paper chromatograms. J
ChemSoc, 1952 ;137: 39403942.

[26]Rosset R, Caude M, Jardy A;Chromatographies en Phases Liquide et Supercritique;


edition MASSON; 1991, P 44, 46, 573, 575,576.

[27]Arnaud P; Chimie Physique; 4e edition DUNOD; 1998, p 171,172;174.

[28] Schurig V; Separation of enantiomers by gas chromatography. J. Chromatogr. (2001),


A 906, 275299.

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Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale

[29] Wolf, C., Spence, P. L., Pirkle, W. H., Cavender, D. M., and Derrico, E. M; Investigation
of capillary electrochromatography with brush-type chiral stationary phases. Electrophoresis
;( 2000), 21, 917924.

[30]Aboul-Enein H.Y, El-Awady M.I, Charles M. H and Paul J. N, Application of thin-layer


chromatography in enantiomericchiral analysis, Biomed. Chromatogr; (1999), 13: 531537.

[31]Gubitz G, Schmid M.G; Chiral Separation Principles, Illustrated edition, 2004, p 1

[32] Beesly T.E, Scott W, Chiral chromatography , John Wiley & Sons; (1998), Ltd.
England, 221-263.

[33] Claude G, Gille B ; le monde de chiralit ; actualit chimique ; 1995, Vol 7, p 14.

[34] Gbitz G and Schmid M.G Chiral Separations: Methods and Protocols Methods in
Molecular Biology, 2004, Vol. 243; Humana Press p174.

42

Chapitre III
Synthse et caractrisation des imino-
hespridines

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.1 Introduction :
Les substances naturelles issues des vgtaux ont des intrts multiples mis profit dans
lindustrie : en alimentation, en cosmtologie et en dermopharmacie. La Pharmacie utilise
encore une forte proportion de principe active de mdicaments dorigine vgtale et la
recherche trouve chez les plantes des molcules actives nouvelles, ou des matires premires
pour lhimisynthse [1]. Le but de cette phase de notre travail est de synthtiser une srie de
drives imino-4-hespridine. Ces derniers sont prpars par condensation des amines
primaires avec lhespridine (schma III.1).

HO
OH
OH
HO 1Rha
H3C O 3'
5Rha OC H3
O 2'
4'
8
6Glu 9 1'
5Glu O O 7 O 5'
1Glu 2 6'
HO
HO OH 6 3
5 10 4
OH O

Schma III.1 : Structure de lhespridine.

Il est bien connu que les flavonodes prsentent plusieurs intrts biologiques dont on citera :
- Les flavonodes sont des antioxydants puissants susceptibles dinhiber la
formation des radicaux libres et de sopposer loxydation des macromolcules,
cette activit dpend du nombre et de la disposition spatiale des groupes OH
phnoliques.

- Plusieurs tudes pidmiologiques ont suggr les effets bnfiques des agrumes
(riche en flavanones) contre de nombreuses maladies cardio-vasculaires et certains
cancers [2,3].

44

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Les agrumes sont une bonne source de composs phnoliques, en particulier les glycosides
flavanones comprennent essentiellement la naringine, hespridine, narirutine, et
nohespridine (Schma III.2), (tableau III.1) [4,5].

OH
OH
OCH3
O O
O O Rut
Rut

OH O
OH O

Hespridine Narirutine
OH
OCH3 OH

O O O O
Nhes Nhes

OH O OH O

Nohespridine Naringine

HO OH OH
HO OH
OH O
O O O
CH3
O CH3
O
OH OH
HO
OH
HO OH

Nhes : Nohespiredose Rut : Rutinose

Schma III.2 : Structure de quelque glycoside flavanone.

45

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Tableau III.1 : Flavanones dans les diffrentes varits d'agrume [6,7].

Type de citrus Nariritune Naringine hespridine Nohespridine


Pamplemousse 490 16 ,60 278 14

Pamplemousse rouge 334 13,87 0,27 0,42

Pamplemousse blanc 536 16,90 3,95 0,25


Citron 0,80 0,18 15,78 0,00
Sour orange 0,08 18,83 0,00 11,09
Orange douce 233 0,17 15,25 0,00
Mandarine 270 0,00 19,26 0,00

(*) Les masses des flavanones sont exprim en mg/100g.

III.2 Extraction et purification de lhespridine :


On sche les peaux dorange la nuance en les cartant dehors sur une table. On les coupe en
petit ; puis on prend une masse de 40 grs et on les met dans un extracteur de soxhlet. On
extraire la poudre avec un volume de 500 ml dune essence lgre (ther de ptrole bouillant a
40-50C) jusqu ce que le matriel siphonn soit sans couleur.
Apres que les peaux dorange aient t compltement dgraisses, on extraire la poudre
demeurant dans lextracteur de Soxhlet avec un volume de 300 ml mthanol jusqu ce que le
matriel siphonn soit sans couleur. On concentrer lextrait a pression rduite et on
recristalliser le rsidu sirupeux a laide de lacide actique aqueux. Le glycoside flavonode,
hespridine, spare dehors en tant quaiguilles beiges, Pf. 261-262C.
Il existe plusieurs mthodes pour lextraction de lhespridine utilisant lextraction reflux
[8], lUltrason [9], et le micro-onde [10] [11].
Les avantages de la mthode de soxhlet sont : La minimisation de consommation de solvant,
le contrle de slectivit, et moins de dgradation thermique [12].

46

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.3 Caractrisation de lhespridine :


Sur une plaque CCM (45cm) de gel de silice (phase stationnaire) on met une spot de
lextrait solubilise dans le mthanol et on immerge le tout dans une phase mobile
MeOH,DCM (8/2) et on mesure rapport de rtention Rf. (figure 1)

ds Rf = di /ds
di

Rf = 0.66
Figure III.1 : Analyse par ccm de lextrait de lhespridine.
a) Point de fusion :
Par des tubes capillaire dune appareille de type B-540 Bchi on a mesure le point de fusion
de lextrait pure.
Point de fusion = 264 C.
b) Analyse par spectroscopie UV :
En remarque sur le spectre enregistrer par le spectrophotomtre UV visible de type HEIOS
deux bandes dabsorption :
La bande (I) vers 276nm pour le dplacement lectronique ( *)
La bande (II) vers 300nm pour le dplacement lectronique (n *)
c) Analyse par spectroscopie Infra Rouge :
Le produit est caractris par le spectre enregistr sur un appareil spectrophotomtre IR a
transform de FOURIER (ANNEXE (A)) comme suite :
Une large bande vers (3317 3546) cm-1 indique lexistence des liaisons OH des glycosides
de lhespridine. Et des vibrations de valence de groupement CH2 et CH3 vers Une bande
intense entre 2847 et 2995 cm-1.
Vers 1650.99 cm-1 on remarque une forte absorption du a la vibration dlongation de la
fonction ctone (C=O).

47

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Des vibrations de valence des doubles liaisons aromatiques sont remarque vers1520 cm-1, et
sur lintervalle 1355 et 1470 cm-1 des vibrations de dformation des groupements OH, CH2 et
CH3 vers, et Entre 1118 et 1275cm-1 des vibrations de valence des groupements C-O sont
prsentes. En fin une bande caractristique de groupement CH2 absorbe vers 650 et720 cm-1.

III.4 synthse en gnrale des imino-4-hespridines :


Dans un ballon de 250ml, et aux conditions du laboratoire (pression et temprature ambiantes)
deux quantits quimolaire de (4.10-4 mol) dhespridine et de lamine primaire sont met en
raction (tableau III.2). Le droulement de la raction est suivi par chromatographie sur
couche mince durant 48 heures. La purification des produits est effectue par CLC.

Tableau (III.2) : quantits des amines utilise.


Ractif (amine) Formule brute Masse molaire (g /M) Quantit (mg)
Aniline C6H7N 93.13 37.2
Ethylamine C2H7N 47.07 18.8
L-Tryptophane C11H12N2O2 204 81.6

Ure CH4N2O 60.05 24.0


Thiour CH4N2S 76.12 30.4
Ethlndiamine C2H6N2 60 24.0
t-Butylamine C4H11N 73.12 29.2
3-Chloraniline C6H6NCl 127.6 51.0

48

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

OH OH
OCH 3 OCH 3
R
O O O O
Rut + N Rut + H2O
H H

OH O OH N
R

Amine R
Aniline C6H7
Ethylamine C2H5
L-Tryptophane C11H12NO2
Ure CH4NO
Thiour CH4NS
Ethlndiamine C2H6N
t-Butylamine C4H11
3-Chloraniline C6H6Cl

Schma (III.3) : Schma ractionnel gnral.

La condensation auto-catalytique des imino-4-hespridines par les amines primaires donne de


bonne rendement pour la srie des huit amines utilise a lexception des produits P6 et P7
(13.09 %, 5.26 %).La diminution du rendement de lisobutilimine-4-hespridine est
probablement due au gne strique des groupements mthylniques.
Lhtroatome du soufre dans le produit P6 a compliqu la substitution du groupement amine
avec la fonction ctone de lhespridine.
Les rsultats dobtention des drives imino-hespridines sont consigns sur le tableau (III.2).

49

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Tableau (III.3) : Imino-4-hespridines obtenus.


Amine Produit obtenus Rdt(%) Eluant ccm (v/v) Rf
OH
OCH3
NH 2 O O
R ut

65.47 MeOH 0.86


OH N

OH
OCH3

O O
Rut
Et NH 2 86.33 MeOH/DCM 0.80
OH N 7/3
Et

OH
OCH3
NH2
O O
Rut
CH 47.52 MeOH/DCM 0.88
COOH OH N 7/3
N HOOC
H N
H

OH
OCH 3

O O
35.71 MeOH/DCM 0.60
NH2 Rut
8/2
OH N
H2 N
NH 2
OH
OCH3
O O O
Rut
86.32 MeOH/DCM 0.88
H2 N NH 2 OH N 7/3
H 2N O

OH
OCH3
S
O O
Rut

H2 N NH 2
OH N
13.09 MeOH/DCM 0.77
H 2N S 5/7
OH
OCH3

Me O O
Rut

Me NH2 05.26 MeOH/DCM 0.86


OH N
7/3
Me
OH
OCH3
NH 2 O O
R ut

49.64 MeOH/CHCl3 0.67


OH N
5/5
Cl
Cl

50

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.5 Mcanisme ractionnel de synthse :


Le schma mcanistique de lobtention des imino-4-hespridines est ulistr sur le schma III.4

OH OH
OCH 3 OCH 3

O O O O
R ut R R ut + H O
2
+ N
H - H
OH O OH N
R

OH
OH
OCH 3
OCH 3

O O Rut O O
R ut
R
R N
N H
OH O
OH O H H H H

OH
OCH 3

O O
Rut
+ H
N R
OH O H
H

Schma (III.4) : Mcanisme ractionnel gnrale de la synthse des imino-4-hespridine

Le mcanisme de formation de la fonction imine en carbone (4) du cycle C de lhespridine


est initie par lattaque nuclophile de latome dazote sur le groupement ctone de la molcule
dHespridine, et suive par une protonation de latome doxygne, et finalement une
dprotonation de latome dazote forme de fonction imine et limine une molcule deau.

III.6 Caractristiques des imino-4-hespridines :

- Les rendements des produits obtenus, a t calcule a partir des produits finale purifie par
CLC.
- Les points de fusion sont mesure par une appareille de type B-540 Bchi.

- Les analyses UV en solution dans le mthanol (MeOH) sont mesure sur un


spectrophotomtre UV visible de type HEIOS.
- Les analyses IR sont effectues laide des pastilles de KBr dans un appareil IRTF.

51

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

- Les analyses RMN H sont effectue dans un appareil BRUKER a 400 MHz avec le
DMSO comme rfrence.
III.6.1 N-phnyle-imine-4-hespridine:
Cette imine est obtenu par condensation quimolaire pendant 48 heurs de 244 mg
dhespridine et 37.2mg daniline.

OH
OCH 3

NH 2 O O
Rut
+

OH O

OH
OCH 3

O O
Rut

OH N

Masse molaire : C34H39NO14, 685.67 g/M


Rendement : 65.47 %
Point de fusion : 260.4 C
UV max,MeOH nm: 295, 328
IR max,KBr cm-1: 3415 (O-H), 1645 (C=N), 1569 (C=C), 1000-1132 (C-O).

RMN H1 (400 MHz, DMSO) ppm: 7.10 7.00 (m, 5H,H-1,2,3,4,5), 6.90 (s, 1H,H-
2), 6.84 (d, J = 10.4 Hz, 2H,H-5,6), 6.54 (s, 1H,H-6), 6.37 (s, 1H,H-8), 5.80 (s, 1H,1Glu), 5.56
(s, 1H,H-2), 5.41 (d, J = 14.6 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.28 (s, 1H,OH-3Glu), 4.20 (s, 1H,H3),
4.11 (s, 1H,OH-2Glu), 3.93 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.69 (t, J = 7.3 Hz,
3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu
), 3.60 (s, 1H,H-2Rha), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.43 (dd, J = 25.4, 19.9 Hz,
4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 2.96 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-
4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-4Glu).

52

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.2 Ethyle-imine-4-hespridine :
La raction auto-catalytique dune quantit quimolaire de lthyle amine (18.8 mg) et (244
mg) hespridine produise limine correspondant :

OH
OCH 3

O O
Rut
Et NH 2 +

OH O

OH
OCH3

Rut O O

OH N
Et

Masse molaire : C30H39NO14, 637.63 g/M


Rendement : 65.47 %
Point de fusion : 260.5 C
UV max,MeOH nm : 277, 306
IR max,KBr cm-1 : 3426 (O-H), 1650 (C=N), 1574 (C=C), 1137-1061 (C-O).

RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm:8.65 (s, 1H,H-5), 7.31 7.21 (m, 5H,H-1a,b,2a,b,c),
6.90 (s, 1H,H-2), 6.84 (d, J = 10.4 Hz, 2H,H-5,6), 6.54 (s, 1H,H-6), 6.37 (s, 1H,H-8), 5.80 (s,
1H,1Glu), 5.56 (s, 1H,H-2), 5.41 (d, J = 14.6 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.28 (s, 1H,OH-3Glu), 4.20
(s, 1H,H3), 4.11 (s, 1H,OH-2Glu), 3.93 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.69 (t,
J = 7.3 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu), 3.60 (s, 1H,H-2Rha), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.43 (dd, J = 25.4,
19.9 Hz, 4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 2.96 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz,
2H,OH-4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-4Glu).

53

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.3 L-tryptophane-imine-4-hespridine:
Ce produit est prpar partir de Lhespridine (244 mg) et L-tryptophane (81.6 mg).

OH
OCH 3
H 2N
O O
Rut
HOOC
+
N
H OH O

OH
OCH 3

O O
Rut

OH N

HOOC

N
H

Masse molaire : C39H44N2O16, 796.27 g/M


Rendement : 47.52 %
Point de fusion : 261 C
UV max,MeOH nm : 295, 300
IR max,KBr cm-1 : 3431 (O-H), 1623 (C=N), 1500 (C=C), 1197-1093 (C-O).
RMN H1 (400 MHz, DMSO) ppm: 6.82 (s, 1H,H-8), 6.73 (d, J = 12.9 Hz, 2H,H-9,2),
6.11 (t, J = 8.5 Hz, 3H;H-5,6,4),5.80 (s, 1H,H-1Glu), 5.40 (s, 1H,H-2), 5.30 (s, 1H,H-1Rha),
4.60 (s, 1H,H-1), 3.98 (s, 1H,H-2Glu), 3.92 (s, 1H,H-3), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,b,c), 3.64
3.53 (m, 2H,H-4Rha,6Rha), 3.51 (s, 1H,OH-2Glu), 2.60 (s, 1H,H-3b), 2.50 (s, 1H,H-3a), 1.32
1.22 (m, 6H,H-5Rha a,b,c,OH-3Glu,2Rha,3Rha).

54

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.4 Amine-2-thylne-imine-4-hespridine :
Obtenu par raction de lhespridine (244 mg) et lEthylne Diamine (24 mg) pendant 48
heurs.

OH
OCH 3

O O
Rut
H2 N
+
NH2
OH O

OH
OC H3

O O
R ut

OH N

NH 2

Masse molaire : C29H38N2O14, 638.23 g/M


Rendement : 35.71 %
Point de fusion : 250 C
UV max,MeOH nm : 246, 300
IR max,KBr cm-1 : 3470 (O-H), 1645 (C=N), 1574 (C=C), 1132-1071 (C-O).

RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 8.16 (s, 1H,H-5), 6.91 (s, 1H,H-2), 6.48 (s, 1H,H-8),
5.79 (d, J= 14.5 Hz, 1H,1Glu), 5.39 (d, J = 11.9 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.31 (s, 1H,OH-3Glu),
4.20 (s, 1H,H3), 4.14 (s, 1H,OH-2Glu),4.02 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c),
3.69 (t, J = 7.4 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu
), 3.52 (s, 1H, H-3Glu), 3.42 (dd, J = 26.0, 19.9 Hz,
4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.20 (s, 1H ,H-3a), 2.98 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-
4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.07 (s, 1H,OH-4Glu).

55

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.5 Ure-imine-4-hespridine :
Ce produit est prpar partir de lhespridine (244 mg) et lUre (24 mg).

OH
OCH 3

O O
Rut
NH2
O +
NH2
OH O

OH
OC H3

O O
R ut

OH N NH 2

Masse molaire : C29H36N2O15, 652.21g/M


Rendement : 86.32 %
Point de fusion : 185 C
UV max,MeOH nm : 272, 300
IR max,KBr cm-1 : 3415 (O-H), 1629 (C=N), 1530 (C=C), 1126-1000 (C-O).

RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 8.23 (s, 1H,H-5), 6.89 6.78 (m, 3H,H-2,5,6), 6.67
(s, 1H,H-2), 6.43 (s, 1H,H-8), 5.40 (d, J = 0.9 Hz, 2H, 1Rha,OH-2Rha), 4.32 (s, 1H,Ha), 4.17
(s, 1H,Hb), 3.97 (s, 1H, OH-3Glu), 3.91 (s, 1H, 1H,H3), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c),
3.69 (t, J = 7.3 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu), 3.60 (s, 1H, H-2Glu), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.44 (t, J
= 5.3 Hz, 3H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu), 3.36 (s, 1H,OH-4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 3.01 (s, 1H,H-3b),
1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-4Rha,3Rha), 1.33 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-
4Glu).

56

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.6 Thiour-imine-4-hespridine:
Limine est obtenue partir de lhespridine (244 mg) et Thiour (30.4mg).

OH
OCH 3

O O
Rut
NH2
S +
NH2
OH O

OH
OC H3

O O
R ut

OH N NH 2

Masse molaire : C29H36N2O14S, 668.19g/M


Rendement : 13.09 %
Point de fusion : 138.5 C
UV max,MeOH nm : 280, 300
IR max,KBr cm-1 : 3393 (O-H), 1645 (C=N), 1519 (C=C), 1137-1055 (C-O).
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 8.23 (s, 1H,H-5), 6.89 6.78 (m, 3H,H-2,5,6), 6.67
(s, 1H,H-2), 6.43 (s, 1H,H-8), 5.40 (d, J = 0.9 Hz, 2H, 1Rha,OH-2Rha), 4.32 (s, 1H,Ha), 4.17
(s, 1H,Hb), 3.97 (s, 1H, OH-3Glu), 3.91 (s, 1H, 1H,H3), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c),
3.69 (t, J = 7.3 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu), 3.60 (s, 1H, H-2Glu), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.44 (t, J
= 5.3 Hz, 3H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu), 3.36 (s, 1H,OH-4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 3.01 (s, 1H,H-3b),
1.41 (d, J = 12.5 Hz, 2H,OH-4Rha,3Rha), 1.33 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-
4Glu).

57

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.7 Isobutul-imine-4-hespridine:
Ce produit est synthtis partir de lhespridine (244 mg) et Isobutulamine (29.2 mg).

OH
OCH 3

O O
Rut
CH 3
H 2N CH 3 +
CH 3
OH O

OH
OC H3

O O
R ut

CH 3
OH N
C H3
CH 3

Masse molaire : C32H43NO14, 665.27g/M


Rendement : 05.26 %
Point de fusion : 243 C
UV max,MeOH nm : 290, 300
IR max,KBr cm-1 : 3388 (O-H), 1650 (C=N), 1519 (C=C), 1137-1099 (C-O).

RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 6.82 6.79 (m, 2H,H-2,6), 6.74 (s, 1H,H-5), 6.39 (d,
J = 17.0 Hz, 2H,H-6,8), 5.80 (s, 1H,1Glu), 5.46 (s, 1H,H-2), 5.42 (d, J = 23.0 Hz, 2H,1Rha,OH-
2Rha), 4.82 (s, 1H,OH-3Glu), 3.96 (s, 1H, OH-2Glu), 3.84 3.80 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.76
3.68(m, 3H,OCH3-Ha,b,c), 3.57 (d, J = 14.2 Hz, 2H,H-4Glu,6Glu), 3.41 (d, J = 10.6 Hz, 2H,H-
7Glu,a,3Rha), 3.33 (s, 1H,H-4Rha), 2.57(s, 1H,H-3), 1.82 (s, 1H,OH-3Glu), 1.72 1.64 (m,
3H,OH-4Glu,2Glu,2Rha), 1.34 1.19 (m, 12H,3CH3-Ha,b,c,CH35Rha-Ha,b,c), 0.99 (s, 1H, OH-
4Glu).

58

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.6.8 Chloro-3-aniline-imine-4-hespridine :
Produit de la raction de lhespridine (244 mg) et 3-chloroaniline (51 mg) pendant 48 heurs.

OH
OCH 3
NH 2
O O
Rut
+
Cl
OH O

OH
OC H3

O O
R ut

OH N Cl

Masse molaire : C34H38ClNO14, 720,12 g/M


Rendement : 49.64 %
Point de fusion : 250.2 C
UV max,MeOH nm : 253, 300
IR max,KBr cm-1 : 3415 (O-H), 1650 (C=N), 1574 (C=C), 1132-1071 (C-O).

RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 7.42 (s, 1H,OH-5), 7.24 (dd, J = 21.4, 10.5 Hz, 4H,H-
2,4,5,6), 6.82 6.70 (m, 3H,H-2,6,5), 6.45 (s, 1H,H-8), 6.35 (s, 1H,H-6), 5.80 (s,
1H,H-2Glu), 5.50 (s, 1H,H-2Rha), 5.40 (s, 1H,H-2), 4.79 (s, 1H,OH-3), 3.83 3.79 (m,
3H,OCH3-Ha,b,c), 3.76 3.68 (m, 3H,H-5Rha,4Rha,6Rha), 3.42 (d, J = 1.4 Hz, 2H,H-6Glu,3Rha),
3.35 (s, 1H,H-4Rha), 3.01 (s, 1H,H-3b), 2.63 (s, 1H,H-3a), 1.93 (s, 1H,H-4Glu),1.79 (s, 1H,H-
3Glu), 1.31 1.20 (m, 4H,OH-4Rha,H-5Rha(a,b,c)), 1.05 (s, 1H, OH-4Glu).

59

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

III.7 Discussion :

Daprs les rsultats danalyse spectroscopique UV, lhespridine prsente une bande
maximal caractristique 276 nm (Bande I), et une autre vers 300 nm (Bande II).la
condensation de lhespridine par des amines primaire est caractris par les dplacements
bathochromes de la bande I avec (=19,01, 19, 4,14 nm) respectivement des imines (P1, P2,
P3, P6, P7). Les diamines P4, P5 et P8 montre des dplacements hypochromes sur la mme
bande (=30, 04, 23 nm). Seul les produits P1, P2 prsente des dplacements bathochromes
sur la bande II (=28,06 nm).

Les spectres IR des huit imino-hespridines prsentent quatre principales bandes


vibrationnelles 3300-3440 cm-1,1574-1645 cm-1,1520-1570 cm-1et 1100-1150 cm-1
correspondent respectivement : la liaison (O-H),la fonction imine (C=N), la double liaison
(C=C) aromatique et une liaison (C-O) (Tableau III.3).

Tableau III.4:bande caractristique en IR pour les imino-hespridine.

Produits IR max,KBr en cm-1

O-H C=N C=Caromatique C-O

P1 3415 1618 1569 1132

P2 3426 1574 1514 1137

P3 3431 1623 1560 1126

P4 3470 1645 1574 1132

P5 3415 1629 1565 1128

P6 3393 1645 1519 1181

P7 3388 1575 1519 1137

P8 3415 1574 1520 1132

60

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Lanalyse spectroscopique RMN H1 enregistre dans le DMSO pour la srie des huit imino-
hespridine indique :

- Un signal apparait vers (1.06-1.20 ppm), avec une intgration de 3H correspond aux
protons de groupement mthyle de rhamnose.
- Un multiplet entre (3.53-3.83 ppm) caractrise les protons de la partie rhamnose.
- Un signale de groupement mthoxyle sur la position 4 gale 3.73ppm.
- Autre multiplets entre (6.70-6.83ppm) correspond portons de cycle A, et un vers (6.77-
6.92 ppm) des protons aromatiques du cycle C.
- Un doublet 5.42 ppm, avec une intgration de 2H, confirme lexistence dun centre
chiral C-2 (ANNEXE-B-).

III-8 Conclusion:

La condensation non catalytique de lhespridine par des amines primaires est ralisable dans
les conditions normales de temprature et de pression, avec des bons rendements, sauf pour
les composes P6 (13.09 %) et P7 (5.26 %). Lidentification des produits synthtiss par les
mthodes spectroscopique UV, IR et RMN H1 confirme la prsence de la fonction imine pour
tous les produits.

Puisque les drivs imino-4-hespridines portent un centre chiral en position 2 du cycle C, ce


qui nous facilite la poursuite des travaux pour la sparation.

61

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

Rfrence :

[1] Bahorun, T. Substances naturelles activesla flore mauricienne, une source


dapprovisionnement potentielle ; universit de mauriceamas ; Food and agricultural research
council, rduit, mauritius 1997.

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flavonoids: Molecular structure, biological activity and nutritional properties: A review.
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62

Chapitre III Synthse et caractrisation des imino-hespridines

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thinned citrus unshiu fruits by microwave-assisted extraction (2010).

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polyphenols (flavanone glycosides) from orange (citrus sinensis L) peel; Food chemistry:
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(2006), Boca Raton, US, pp. 01-36.

63





Chapitre IV
Sparation TLC chiral des imino-
hespridines

Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

IV.1 Introduction :

La chromatographie en couche mince (CCM) sur gel de silice est trs utilise pour l'analyse
qualitative des flavonodes et les acides phnoliques [1]. Elle repose principalement sur des
phnomnes d'adsorption : la phase mobile est un luant, qui progresse le long d'une phase
stationnaire fixe sur une plaque de verre ou aluminium. Aprs que l'chantillon ait t dpos
sur la phase stationnaire, les substances migrent une vitesse qui dpend de leur nature et de
celle du solvant [2]. Deux mthodes sont disponibles pour la sparation des nantiomres par
la chromatographie sur couche mince. Une mthode comporte l'utilisation des phases
stationnaires chirales (CSPs), alors que l'autre ncessite l'utilisation des additifs chiraux de
phase mobile (CMAs) [3]. Cette dernire nous lavons applique pour la sparation des
imino-4-Hespridines, synthtises.

Nous avons utilis la technique TLC pour sparer les diasterioisomeres des huit drives
imino-4-hespridines synthtiss par usage de deux slecteur chiraux le D(+) saccharose et le
D(-) Mannitol.

La sparation chirale est base sur le mlange des quantits quimolaires des imino-
hespridines et de slecteur chirale, ainsi les nantiomres sont pralablement transformes en
diastreoisomres. Aprs on passe lanalyse par CCM, sur plaque de gel de silice.

IV.2 Choix de slecteur chiral :


De nombreux composs optiquement actifs (naturels, semi-synthtiques ou synthtiques)
ont t dvelopps en tant que slecteur chiral pour la sparation stroslective
dnantiomres[4,5]. Cyclodextrines, Antibiotiques MacrocycliPc, Protines, et les
Polysaccharides sont les principes chirals de sparation les plus utilise dans la
chromatographie chirale sur couche mince [6]

Alors, le slecteur chiral efficace doit remplir les conditions :

1. Possde suffisamment de groupes, datomes et de cavits pour lui permettre de former


des complexes diastroisomres avec les nantiomres du solut.

2. Soluble et stable chimiquement dans la phase mobile.

3. Ne doit pas interfrer avec la dtection des analyses sil est utilis comme additif.

65
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

4. Commercialement disponible (ou facilement synthtisable ou extractible ) et peu


coteux [7].

Citons parmi les slecteurs chiraux de bon march et trs utiliss au laboratoire :

Le mannitol (1, 2, 3, 4, 5,6-hexane-hexol (C6H14O6)) [8] et Le saccharose (-D-


fructofuranosyl-(21)--D-glucopyranoside) [9].

Tableau (IV.1) : Proprits physico-chimique des slecteurs chiraux [10].

Slecteur Structure Masse []20D TF


Molaire C
D(-)- OH OH
Mannitol OH 182 g/mol C=10, borate 166
HO +23 _ +24,5
OH OH
D(+)- H
CH2 OH
O H CH2OHO H
Saccharose OH H H OH 342,30 g/mol C=20, H2O 185,5
+66,2_ +66,8
OH O CH2 OH
OH H
H OH

IV.3 Mode opratoire :

Les manipulations sont effectues dans les conditions du laboratoire (1 atmosphre et


temprature 25-30C). Aprs le calcul des quantits quimolaires des imines et des agents
chiraux, on dissous ces quantits dans le Mthanol (Tableau IV.2).

On met sous agitation le mlange pendant 20min, et on suit par ccm (des plaques de gel de
silice) tous les 5min. en rvlation par une lampe UV (Ultra Violet) pour la rvlation des
tches invisibles, ces manipulations sont rptes avec le deuxime slecteur chiral. chaque
compos est dfini par son Rf .

66
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

Tableau (IV.2) : masse de slecteur chiral quivalant au nombre de mole dimine.

Masse de Nombre Masse de


Saccharose Nombre de Mannito
produit produit de Produit
(g) mole l (mg)
(mg) mole (mg)

P01 3 4.3710-6 1 6 8.7510-6 1

P02 2 2.5110-6 0.9 6 7.5310-6 1

P03 6 9.3810-6 3 6 9.3810-6 1

P04 1 1.5310-6 1 6 9.1810-6 1

P05 6 7.4810-6 2 6 7.4810-6 1

P06 3 410-6 1 6 810-6 1

P07 2.4 3.6010-6 1 6 9.0210-6 1

P08 3 4.1710-6 1 6 8.3510-6 1

Il ya dautre facteur caractristique quon peu calcule pour chaque spot.

IV.4 Calcule des paramtres de chiralit :

a) facteur de capacit :

Valeur facilement mesure peut tre directement li la constante d'quilibre de coefficient


de cloison ou d'change ionique. [11]

t1t0 ts tm d1
K = = tm Et = tm +ts = 100
t0 d

5
= 5

K : facteur de capacit.

tm : temps mort de la colonne.

ts : temps de rtention du solut.

HRf : pourcentage du facteur de rtention (Rf).

67
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

b) Slectivit :

Pour caractriser la distance sparant les sommets de deux pics conscutifs 1 et 2, on utilise le
facteur de slectivit (ou rtention relative) dfini par la relation:

2 0 2 1 5
= = =
1 0 1 2 5

t1 : temps de rtention du solut 1.

t2 : temps de rtention du solut 2.

K1 et K2 : coefficients de partage des soluts 1 et 2 entre les phases stationnaire et mobile.

Si = 1 : Les pics concident ; Si = 1.05 : La sparation est possible [11].

c) Rsolution :

La rsolution R entre deux spots est dfinie par la relation:

(21) 2[ 10.05 20.005 ]


= 2 (1+2) = 12

W1 : La largeur spot 1.
W2 : La largeur de spot 2.

- lorsque R> 1 la sparation est pratiquement complte .


- Pour R< 0,8 la sparation est gnralement insuffisante [11].

Nous avons, calcule les paramtres de chiralit, a partir des quations prcdente. Les valeurs
de calcul sont consignes dans le tableau (IV.3).

68
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

Tableau (IV.3) : les paramtres de chiralit des imino-hespridines avec les deux slecteurs.
Les facteurs
Imine Eluant Saccharose Mannitol
(t=20min)
Rf1 0.72 0.75
Rf2 0.91 0.88
K1 13,4 14
P1 MeOH K2 17,2 16,6
R 1.09 1.11
1,28 1,18
Rf1 0.69 0.7
Rf2 0.94 0.87
MeOH, K1 12,8 13
DCM ; 5/5 K2 17,8 16,4
R 1.4 1.75
1,39 1,26
P2 DCM Rf 0 -
Rf1 0.4 -
Rf2 0.4 -
MeOH,Ether ; K1 7 -
4/6 K2 7 -
R 0 -
1 -
P3 MeOH Rf - 0.82
DCM,
P4 Rf - -
MeOH ; 8/2
DCM Rf - 0.15
MeOH Rf - 0.78
-
Rf1 0.61
Rf2 0.82 -
MeOH,
K1 11,2 -
DCM ; 6/4
K2 15,4 -
P5 R 3.33 -
1,375 -
Rf1 - 0.21
Rf2 - 0.32
MeOH, K1 - 3,2
DCM ; 5/5 K2 - 5,4
R - 1.5
- 1.68
P6 CHCl3 Rf - -
P7 CHCl3 Rf 0.19 -
CHCl3,MeOH
P8 Rf 0.73 -
8/2

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Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

IV.5 Analyse par vido-densitomtre :


Le Sorbflil TLC Videodensitometer est un logiciel destin l'valuation quantitative de
Chromatographie en couche mince (CCM). Il permet d'valuer les zones plac dans les pistes
dune image de plaque CCM avec la construction d'un chromatogramme (courbe
analogique).L'valuation repose sur l'hypothse que la taille et l'intensit d'un spot par rapport
l'intensit de fond plat. Pratiquement, nous avons analyse le produit P2 par cette technique
(schma IV.1).

OH
O

O O
Rut

OH N R ( %)

PHOTOGRAPHIE
Sorbflil TLC Videodensitometer
OH
O
O O
R ut
S (%)
OH N

Schma (IV.1) : technique du logiciel Sorbflil, utilise pour le produit P2.


Les rsultats sont rsums dans le tableau suivant :
Tableau(IV.4) : rsultat obtenu daprs le logiciel Sorbflil.

Produit Rf S% H%
Rf1=0.10 53.0 44.2
P2
avec le saccharose Rf2=0.79 47.0 55.8

Avec :

S % : Zones de pics en pourcentage.


H % : Hauteur de pics en pourcentage.

70
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

IV.6 Sparation par chromatographie sur couche mince bidimensionnelle :

Cette technique est souvent utilise dans le cas dun mlange sparer contenant un grand
nombre de composs.
La CCM bidimensionnelle effectue sur le compose P2, dans lluant (MeOH /Ether, 4/6) nous
a permis de rvler quatre spots avec diffrant valeur de Rf (figure IV.1).

Figure (IV.1): Plaque CCM bidimensionnelle de produit P2.


IV.7 Discussion :

a) Des rsultats rsums dans le tableau des paramtres de chiralit (tableau IV.3), nous
signalons les points suivants :
- Les produits P3, P3, P6, P7 et P8 ne sont pas sparables aprs 20 min avec
les deux slecteur chiraux le D(+) saccharose et le D(-) Mannitol.
- P2 et P5 ne prsente aucune sparation avec le slecteur chiral Mannitol , en mme
temps la bonne sparation du produit P5 avec le D(+)-saccharose dans les mmes
conditions pour cela on fait un changement de polarit de solvant, On utilise le solvant
DCM pour les deux produits pour diminu la polarit car les valeurs de Rf pour les
deux sont assai leves Rf2=0.83 et Rf5=0.85.
- Aprs 20min dagitation et avec les mme conditions on observe que le produit P2
dans le mlange de deux solvant mthanol et ther (4/6) donne deux spots en mme
ligne perpendiculaire laxe de migration, donc les deux spots apparaissent avec le
mme Rf =0.4 (R=0 mauvaise rsolution).
- Le saccharose et le Mannitol prsente une faible rsolution avec les produits P1, P2.
- Le D(+) saccharose donne une meilleure rsolution avec le produit P5.

71
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

b) Dautre part les valeurs obtenus du produit P2 (tableau IV.4) indique quil existe un
excs nontiomrique avec le pourcentage de 55.8 %.
c) Notons que la molcule dhespridine est une molcule chiraux contenons plusieurs
centre chirale ; dans la parte glucoside sont fix par une seul forme mais il y un
carbonne asymtrie on position 2 dans le cycle C prsent deux diastroisomres S et
R; et de mme la molcule imino-hespridine possde un carbonne asymtrique et on
plus la fonction imine et leurs drivs. Notons que les composs substitus
prsentent l'isomrie Z, E existant sous deux formes diastroisomres Z et E, par
exemple le groupe qui migre de faon prfrentielle est celui situ en anti du groupe
OH pour l'oxime dans le cas la plus simple ; pour la molcule dimino-Hespridine
est situ en anti de la partie glucoside. (Schma IV.2).
d) Lusage de la CCM bidimensionnelle nous a permis dobtenir de bonnes sparations
des composs de structures trs proches.

OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O O CH3 O O
OH O OH O

OHOH OH OHOH OH
OH OH
S-E OH N R-Z OH N
R R

OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O O CH3 O O
OH O OH O

OHOH OH OHOH OH
OH OH
R-E OH N OH N
R R-Z
R

Schma (IV.2): Diastroisomres des imino-4-Hespridines.

72
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

e) Limino-hespridine prsente des interactions intermolculaire par des liaisons


hydrogne avec le slecteur chiral D-(-) Mannitol. Do le changement de sens de
migration dun des deux diasteroisomres peut tre d cette interaction, nous
schmatisons ces interactions comme suite :

OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O CH3 O
OH O O OH O O
OH OH OH OH OH OH
OH OH
OH N OH N
R R
HO OH
HO O O
OH
HO OH
HO OH HO OH

Schma(IV.3): Formation de liaison hydrogne entre limino-Hespridine et le Mannitol

IV.8 Sparation quantitative des deux diastroisomres de P1 par CLC :

Nous avons procd la sparation de produit P1en mlange avec le slecteur chirale
saccharose par chromatographie CLC (colonne 24.51 cm ; masse de gel de silice m=5g ;
lluant le mthanol).
Lanalyse par CCM chirale des produits obtenus aprs sparation indique des Rf diffrentes
Rf1= 0.86 etRf2= 0.89. Ils sont trs proche aux valeurs dj calcul de produit P1 avec le
slecteur chiral saccharose. Lanalyse UV-visible des composes spar sur CLC du produit P1
(Tableau IV.5).
Tableau (IV.5) : Valeurs de max pour les deux daistroisomiare de P1.

Produit max (nm) max (nm)

P1 1er diastroisomres 284 300

P1 2eme diastroisomres 295 300

73
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

Nous avons tir les observations suivantes dans lintervalle 250-300 nm :

La transition n* Cette transition rsulte du passage d'un lectron d'une OM non-liante n


*
une OM anti-liante . Ce type de transition est rencontr, dans le cas des molcules
comportent un htroatome doublets lectroniques libres appartenant un systme insatur
(les bandes carbonyle C=O et C=N, facilement observable, situe entre 270 et 280 nm).

Et la transition n*(entre 300-350 nm) ; rsulte du passage lectronique dune OM non-


liante n une OM anti-liante *. Ce type de transition donne des informations sur la forme
gomtrique de la molcule.

Les deux valeurs de max=280 nm et max = 295nm dans la transition n* correspondes au


double libre de latome dazote.

Pour la deuxime transition n*les deux valeurs de max sont gaux ce qui indique les
deux diastroisomres ayant la mme forme gomtrique la plus stable E (Schma IV.3).

OH
OH O O OMe
CH3 O
OH O O
OH OH OH
OH
OH N

Schma (IV.4) : la forme la plus stable de la molcule P1.

Ces rsultats nous ne donnent aucune information importante pour diffrencier entre
les deux diastroisomres, pour cela nous avons pass lidentification par IR
Schma (IV.5).

74
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

Ainsi nous remarquons :


- Labsorption vers 1618.12 cm-1 prsente les vibrations de valence de liaison C=N
imine des deux diastroisomres ; cette valeur est trs proche de celle dj signale
pour le produit P1. Ce qui confirme lexistence de la fonction imine C=N pour les
deux diastroisomres.

- La deuxime bande qui stendre entre 3400-3500cm-1 dues aux vibrations de


-1
dformation des liaisons OH, -NH et celle des C-H stendent entre 2900 cm et 2929
cm-1 ; dans cette zone on voie une diffrence entre les deux spectres. Ce rsultat
confirme lhypothse de formations des liaisons hydrogne entre le slecteur chiral et
un des deux diastroisomres.

- Des vibrations de dformation des liaisons (-CH=CH-) de forme gomtrique (E) vers
929 et 1000 cm-1, ce quil confirme la forme (E) pour les deux diastroisomres.

- Les autres zones labsorption dans les spectres IR des deux diastroisomres sont
presque identiques celle du produit P1.

- Do les deux produits qui sont spar par CLC possdent deux diastroisomres
drives imino-4-Hespridine possdent la fonction imine (max=280nm ; C=N
1618cm-1). Les deux diastroisomres ayant la mme forme gomtrique (E) (la plus
stable). Aussi nous proposons les deux configurations S et R (schma IV.6).

75
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

OH OH
OCH 3 OC H3

O O O O
Rut R ut
* *

OH N
OH N

R -Z S -Z

OH OH
OC H3 OC H3

O O O O
R ut R ut
* *

OH N OH N
R -E
S -E

Schma(IV.5): les spectres des deux diastroisomres par IR de produit P1.

76
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

OH
OH
OC H3
OCH 3
O O
O O R ut
Rut *
*

OH N
OH N

R -E
S -E

Schma (IV.6): structure de deux diastroisomres rcuprs.

IV.13 Conclusion :

Dans cette partie nous avons tudi la sparation chirale des drives imino-4-Hespridines
par CCM avec deux slecteurs chiraux (le Saccharose et le Mannitol).

La sparation par TLC chirale est possible, pour les produits ayant une slectivit et
rsolution moyenne comme P1et P5.

Nous avons effectue la sparation des deux diastroisomres par CLC du produit P1, et
lidentification par UV visible montre que les deux diastroisomres possde la mme forme
gomtrique (la forme la plus stable trans E), mais les spectres IR des deux composs sont
diffrents, ce qui explique leffet de la rotation du carbonne asymtrique qui donne deux
configurations R, S (deux diastroisomres trans R et trans S).

77
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines

Rfrence :

[1]Mabry T.J, Markham K.R, Thomas M.B; The System-aticIdentication of Flavonoids:


Springer Verlag, Berlin; 1970, pp. 20 22.M.J. Planar Chromatogram. (1997) 10 p 182 187.

[2]Antonot E, Marchal R; Chromatographie. Journal of Chemical Education; Dcembre


1998; p 877-978.

[3]Aboul-Enein H.Y, El-Awady M.I, Heard C.M et Nicholls P.J; Application of thin-layer
chromatography in enantiomeric chiral analysisan overview: Biomed. Chromatogr. Vol 13:
1999, p531.

[4] Maier N.M, Franco P, Lindner W, J. Chromatogr: (2001) A 906, 3.

[5] Gbitz G, Schmid M.G, Drug Dispos : (2001) Biopharm; 22 , 291.

[6] Gustaf G.T, Fornstedt T et Guiochon G; Apparent and True Enantioselectivity in


Enantioseparations; Chirality: 2000, Vol 12.

[7]Gubitz G, Schmid M.G ; Chiral Separation Principles : Illustrated edition; 2004, p 1.

[8]Haroun M; Phases stationnaires chirales base de teicoplanine et daminoglycosides


pour la sparation dnantiomres dacides amins : thse doctorat 2007 p139.

[9] Collins P.M; Dictionary of carbohydrates : 2005 CRC Press, p1282.

[10]Mimouni F ; mmoire ingniorat ; 2009, universit de Bchar, Algrie.

[11]Rohrbasser C; Les chromatographies liquides : Ecole dingnieurs et darchitectes de


Fribourg, 2006 : p61.

78
Conclusion gnrale

Conclusion Gnrale

Conclusion Gnrale :

Les substances naturelles issues des vgtaux prsentent de multiples intrts qui sont mis
profit dans lindustrie : alimentation, cosmtologie et dermopharmacie. Un nombre important de
mdicaments sont dorigine naturelles, obtenus directement de la biomasse naturelle ou par
hmisynthse. Notre travail cadre dans la valorisation des mtabolites secondaires par la synthse de
drives partir de molcules extraite des peaux dorange savoir lhespridine.

Une recherche bibliographique sur les diffrentes mthodes de synthse dimine plus
prcisment la raction de condensation damine avec les carbonyles nous a aids choisir une
mthode de synthse des imino-4-hespridines.

Dans ce travail, nous avons synthtis et identifie une srie de huit nouveaux drivs imino-
hespridine par raction de condensation non catalytique entre lhespridine et des amines primaires.
Les molcules synthtis porte plusieurs centres chiraux, ce qui nous a conduit effectu la
sparation des diastroisomres avec deux slecteurs chiraux D(+) Saccharose et D(-) Mannitol.
La sparation chirale est russie pour deux produits P1 et P2 ; prsentant de bonne rsolution.

Dans ces expriences, nous avons analys le rle des slecteurs chiraux le Saccharose et
Mannitol sur les proprits de reconnaissance chirale de diffrente drive des imino-4-hespridine, et
on a pu sparer les deux diastroisomres (E) S et R [N-phnyle-imine-4-hespridine] par TLC
chiral dans les conditions de laboratoire.

En fin ce travail peut tre considr comme tant le premier pas vers dautres recherches en
perspective, telles que :

o Loptimisation de conditions ractionnelles de synthse et de sparation.


o Ltude de leffet biologique et thrapeutique des diastroisomres spares.
o La recherche sur dautres composs chiraux.
o Des tudes de Relation Structure et Activit des produits synthtiss et leurs
diastroisomres.

80


Annexes


%Transmittance

10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65

5
4000
3546,59

3500
3470,11
3420,94
3317,15
Rut

3082,25

3000
2934,75 2983,92
O

2918,36
OH

2500
O
O
ANNEXE(A)

2000
OH

Spectre IR dhespridine.
Wavenumbers (cm-1)
1650,99
OCH 3

1607,28

1500
1514,42
1465,25
1443,40
1355,99

1000
973,60
886,19
847,95
815,17
673,14 744,16
634,90 613,05

500
580,27

82
AN
NNEXE((A)

OH
O CH 3
R utO O

OH N

Spectre IR
I du N-phnyle-imine-4-hespridine (P1).

83

ANNEXE(B)

Spectre RMN H1 du produit (P1).

84

Rsum :
Ces dernires annes ont vu de rapides progrs dans l'hmisynthse,
des produits diversit structurale, avec des centres de chiralit. Ainsi
la chiralit est devenue un sujet majeur dans la synthse, la dcouverte
et le dveloppement de principe actif des mdicaments. Le
dveloppement d'un nantiomre isol offre des avantages thoriques
et cliniques et deux stratgies sont possibles : soit le dvelopper
initialement, soit sparer le racmat en ses deux nantiomres.
Huit imino-4-hespridine drivs ont t synthtiss par
condensation de lhespridine (extrait de peau dorange) et plusieurs
amines temprature ambiante avec de bons rendements. Les
diastroisomres de ces composs ont t facilement spars par
CCM sur gel de silice optiquement pur. En utilisant les slecteurs
chiraux D (+) saccharose et le D (-) manitol temprature et pression
atmosphrique 254 nm.

Mots-cls : Hmisynthse; Enantiomre; Racmat; Chiralit;


Sparation; Diastroisomres; TLC chiral; Imino-4-hespridine;
CCM; Slecteur Chiral.