Un anticuerpo monoclonal IgG producido en clulas de ratn, se encuentra contaminado por tres

protenas de carga similar pero diferente tamao por lo que puede ser purificado por
cromatografa de exclusin. A pequea escala, con una columna de 16 mm de dimetro y 60 mm
de longitud empacada con partculas de un gel de 47 m, tras inyectar una muestra de 50 m y
eluyendo con un buffer de fosfatos a 0.8 mL/min, el anticuerpo eluy a los 5.7 mL, los
contaminantes a los 7 mL, 7.6 mL 7 9.6 mL. La concentracin del anticuerpo en el caldo es de 3
mg/mL, y de 1.4 mg/mL y 2.7 mg/mL para los contaminantes.

Defina un proceso que le permita purificar 2000 L de solucin, especificando las dimensiones y
condiciones de operacin de la columna, as como los tiempos de pulso, elucin y cosecha y el
tiempo total que le llevara purificar los 2000 L. Adems de las partculas de 47 m, el fabricante
ofrece de 100 m y 200 m; el gel posee una gran resistencia mecnica y soporta hasta 5 bar. La
difusividad de las protenas es: 3.8x10-11 m2/s para IgG, y 6.7x10-11 m2/s, 9x10-11 m2/s y 12.6x10-11
m2/s para los contaminantes.

Note que el tiempo de elucin refleja la porosidad de la partcula accesible a cada protena y
puede asumir que la tortuosidad es despreciable, note tambin que el volumen de la elucin est
directamente relacionado con el tiempo de elucin a travs del caudal. La longitud mxima que se
considera conveniente para la columna es de 2 m, de manera que la contribucin de la columna de
agua a la p no sea mayor de 0.2 bar. Se desea procesar el lote en un mximo de 8 h.

(*Los datos a pequea escala permiten calcular las Ks de las protenas, esto es la porosidad
aparente para cada una de ellas en este caso. Rodo en SI*)

Z1 = 0.06; (*m*)

D1 = 0.016; (*m*)

dp = : 47x10-6 (*m*)

1 3
1 = 0.8 ; ( )
60 106

5.7 106 7 106 7.6 106 9.6 106

1 = ; 1 = ; 2 = ; 3 = ;
1 1 1 1

= 0.4;

1
= 2 ; = ;
1
4
1
=
;

(1)
(* tR = (1 +
) )

Kj [tR _ ] : = ( 1) ;
H 1

(1.6)2
{ = 6 }
4

Puede hacerse un diseo preliminar asegurndose que la presin no sea demasiado elevada.
Conviene considerar tambin la columna de lquido. En este contexto, puede manejarse

1 2
1
[, , ] = (150 ( ) + 1.75 ( )) ;
2