AISLAMIENTO DEL ALCALOIDE LUPANINA DEL CHOCHO O TARWI
Gustavo Balarezo Inuma, Carlos Morales Bravo, Jhon Orrego Jesus, Nancy Parvina Moreno
Asignatura: Qumica Orgnica II
Escuela Profesional de Ingeniera Qumica
Facultad de Ingeniera Qumica y Textil
Universidad Nacional de Ingeniera
RESUMEN:
En el presente estudio se realiz la extraccin
de los alcaloides del chocho o tarwi con el
principal objetivo de aislar la lupanina, el
alcaloide en mayor proporcin. Se realiz para
ello, la preparacin del agua de desamargado
de chocho, a partir de lixiviacin del chocho
con agua destilada.
Obtenido los alcaloides en solucin acuosa, se
procedi la extraccin lquido-lquido usando
diclorometano como disolvente orgnico. La
extraccin se realiz tanto en medio neutro
como en medio cido. Realizada la extraccin
se concentr la solucin de alcaloides
mediante destilacin simple, eliminando de
esta forma el diclorometano en exceso, para
obtener una solucin concentrada en
alcaloides de diclorometano.
Para evidenciar la presencia de alcaloides en
la solucin concentrada se us el reactivo de
dragendorff y la espectrometra UV. El
aislamiento de la lupanina fue realizado
mediante la tcnica de Cromatografa de capa
fina, usando como capa estacionaria la slica
gel adherida a placas.
El resultado obtenido indica la presencia de
alcaloides en el agua de desamargado de
chocho, evidenciado mediante el reactivo de
Dragendorff, al formarse precipitado naranja,
asimismo la prueba de espectrometra UV
mostr espectros que evidencia la presencia
de alcaloides.
INTRODUCCIN
Esta pre-investigacin naci como inquietud de
conocer y aplicar las tcnicas ya conocidas en
el laboratorio en la caracterizacin de una
sustancia y Por qu el tarwi? Debido a que
queramos comprender los motivos de los
agricultores en utilizar el agua de
desamargado del tarwi en sus cosechas.
La presente investigacin se refiere al
aislamiento del alcaloide Lupanina proveniente
del Chocho, La lupanina tiene una actividad
antibacteriana y puede utilizarse como
insecticida adems inhibe la sntesis de
protenas. Lupinus mutabilis Sweet planta
conocida comnmente como ullush, talwish,
tauri, tarwi, chocho, lupino o ccquella
(Jacobsen y Mujica, 2006), pertenece a la
divisin Magnolio- phyta, clase Magnoliopsida,
orden Fabales, familia Fabaceae, subfamilia
Papilionoideae (Ceroni, 2003; Varshney et al.,
2005; Sbabou, 2010) siendo su gnero
Lupinus el ms abundante de la familia
(Sbabou, 2010).
El lupinus mutabilis sweet (CHOCHO), es una
leguminosa oriunda de los Andes
Sudamericanos, las semillas desamargadas y
en cocimiento son utilizadas por el poblador
andino de nuestro pas como alimento y
medicina. Los alcaloides son sustancias
orgnicas de origen vegetal que se encuentran
presentes mayormente en el reino vegetal,
especial en las leguminosas. Las plantas
utilizan estos metabolitos secundarios como
mecanismos de defensa ante la presencia de
depredadores
Algunas tcnicas para la identificacin de los
alcaloides presentes en el tarwi que usaremos
en este proyecto son la identificacin mediante
la reaccin (formacin de precipitado
anaranjado) con el reactivo de dragendorff, la
prueba con uv-visible; as como tambin el
aislamiento de la lupanina mediante la tcnica
de cromatografa con capa fina. Y por ltimo la
verificacin del espectro de la lupanina.
PRESENTACIN DEL PROBLEMA
En los ltimos aos la contaminacin de los
mares por petrleo o metales pesados se ha
incrementado por la irresponsabilidad de las
grandes empresas extractoras. Es por ello la
necesidad de la bsqueda de compuestos que
pueden formar complejos y luego precipitar.
Entonces mediante el tarwi que es una muestra de agua de desamargado. Esta
leguminosa de origen andino el cual contiene vez la fase acuosa presento un color
alcaloides con propiedades de formar amarillo menos intenso.
complejos con los metales pesados buscamos Nuevamente se realiz el mismo
reducir esta contaminacin. procedimiento dos veces ms pero ahora
solo en agua durante 12 horas, estas
Para la mayora de pueblos la agricultura seran la tercera y cuarta muestra de
significa el sustento de sus hogares, sin extracto de chocho. Estas fases acuosas
embargo se reportan casos de enfermedades presentaron el mismo color pero menos
en algunos de estos pueblos debido a sus intenso.
propias cosechas que son consumidas, Cada una de estas fases se guardaron en
contaminadas por las plagas que abundan en la refrigeradora en recipientes previamente
los lugares .Con la utilizacin de los alcaloides rotulados.
del tarwi se disminuiran o eliminaran estas
enfermedades de los pobladores debido a su
capacidad de defensas en las plantas.
AGUA AGUA
Tabla
Como en esta investigacin se espera dar un 5.1.
+
valor agregado al cultivo del chocho, mediante Compone CHOCHO EX1
el desarrollo de fitofrmacos y la posibilidad
de incorporar a un mayor nmero de
ntes CHOCHO EXHCl2
usados
agricultores a los procesos de produccin y en cada CHOCHO EX3
agroindustria, adems de impulsar la extracci CHOCHO EX4
seguridad alimentaria en las zonas andinas. n slido-
lquidos
OBJETIVOS EX: fase acuosa

OBJETIVO GENERAL

Aislar el alcaloide que se encuentra en mayor

concentracin en el chocho o Tarwi (nombre
cientfico: lupinus mutabilis sweet) llamado
LUPANINA.

OBJETIVO ESPECFICO

Extraer los alcaloides presentes en el chocho o

tarwi usando tcnicas de extraccin slido-
lquido y lquido-lquido.

DESCRIPCIN DE LA SOLUCIN

EXTRACCIN SLIDO-LIQUIDO (AGUA DE

DESAMARGADO)

Se pes 500g de chocho seco, y se dej

remojar en suficiente agua (por encima del
nivel del chocho y teniendo en cuenta que
este absorbe el agua en su totalidad)
durante 12 horas aproximadamente,
siendo esta la primera muestra de agua de
desamargado. Esta primera fase acuosa
presenta un color amarillo intenso
Se dej remojar nuevamente el chocho
pero esta vez en agua y cido clorhdrico
diluido durante 12 horas
aproximadamente, siendo esta la segunda
A la fase segunda acuosa (EXHCl2) se le aadi
poco a poco hasta la ligera neutralizacin
EXTRACCIN LIQUIDO-LIQUIDO (CLORURO DE
METILENO)
Se Tom 200 de agua de desamargado de
chocho de EX1 y se aadi a la pera de
decantacin, luego se agreg 15 de
 cloruro de metileno y se Agit lentamente. Se
obtuvo dos fases inmiscibles.
Se Recibi la fase diclorometnica, fase
incolora que es la que contiene los alcaloides,
en un erlenmeyer perfectamente limpio
provisto de un embudo con algodn en la
base del cono, se repiti las extracciones 3
veces con 15 de cloruro de metileno en
cada extraccin. Esta fase diclorometnica se
guard en Erlenmeyer con tapa de vidrio
rotulado (FD1).La fase acuosa se almacen
en un recipiente.
El mismo procedimiento se realiz con
EXHCl2, EX3 y EX4.
+ DICLOROMETANO
EX1 FD1
EXHCl2 FD2
EX3 FD3
EX4 FD4
Tabla 5.2. Fases diclorometnicas obtenidas de cada
muestra de agua de desamargado
FD1: Fase diclorometnica
IDENTIFICACIN DE ALCALOIDES
Imagen 6.1.Extraccin lquido-lquido usando
diclorometano
CONCENTRACCION DE CADA FASE
DICLOROMETNICA POR DESTILACIN
Se arm el equipo de destilacin simple y se
coloc 100 de FD1 en el baln y se
concentr a menos de la mitad y as con las
proporciones correctas hasta terminar con todo
FD1. Se dej enfriar el residuo del baln, el
cual sera la fase diclorometnica concentrado.
El diclorometano obtenido en la destilacin se
guard en un recipiente cerrado. El mismo
procedimiento se realiza para FD2, FD2 y FD3.
+ DESTILACIN
FD1 AC1
FD2 AC2
FD3 AC3
FD4 AC4
Tabla 5.2. Concentrado obtenido en la
destilacin
Imagen 6.2. Equipo de destilacin simple usado
A todos estos estos concentrados de alcaloide
(AC1) se le realiz la prueba de
DRAGENDORFF.
Luego todos estos concentrados se les hace
pasar por la prueba de UV-VISIBLE
Una vez que se termin la prueba UV-VISIBLE
se mezcl todos los concentrados en un
mismo recipiente, luego se concentr esta
solucin mediante una destilacin simple.
Se prepar las placas para las cromatografa
en capa fina, luego se activ las placas a una
temperatura aproximada de 105C.Se coloc
gotas consecutivas a 1 de la parte inferior
de la placa y se deja en el tanque
desarrollador que contiende el diclorometano a
0.5 de su base hasta observar que el
diclorometano fluy a travs de la placa
llegando a la parte superior.
 Imagen 6.5. Proceso de cromatografa para separar
Imagen 6.3. Precipitado formado en la identificacin
alcaloides
de alcaloides con el reactivo de dragendorf

Imagen 6.6. Placas usadas en la cromatografa

Despus del aislamiento de los alcaloides por

cromatografa en capa fina se someti a la
prueba de UV-VISIBLE cada una de las
placas.

Se llev una pequea muestra de solucin

concentrada (AC) de alcaloides al
espectrofotmetro UV-VISIBLE.

Imagen 6.4.Prueba con UV-VISIBLE

RESULTADOS

+ REACTIVO DE DRAGENDORFF
AC1 precipitado anaranjado intenso
AC2 precipitado anaranjado intenso
AC3 precipitado anaranjado intenso
AC4 precipitado anaranjado intenso
 Mediante tcnicas de extraccin L/L y S/L
fue posible extraer la lupanina y otros
alcaloides del agua de desamargado del
chocho.
El disolvente usado en la extraccin fue el
diclorometano, ya que este es no polar y
es un buen disolvente para los alcaloides
que el agua.

BIBLIOGRAFA

Imagen 6.7.Prueba de UV-VISIBLE

ANEXOS
Imagen 6.8. Espectro UV-VISIBlE obtenido

CONCLUSIONES
En el espectro obtenido de la lupanina se
mostr algunas irregularidades en los 200
a 225 debido a los contaminantes de la
misma pre-investigacin. El espectro
muestra 2 saltos resaltantes de max de
235 y en 272 aproxmiadamemte.La
teoria nos dice que este deberia mostrar 3
saltos sin embargo no se aprecian ya que
el ltimo salto que estaria en 315 aprox
tiene un muy bajo comparado con los
otros 2.