PRODUCCIN DE PIRUVATO ACETALDEHDO Y ETANOL POR

FERMENTACIN DE LA GLUCOSA CON LAS ENZIMAS DE LA

LEVADURA
PREINFORME Nombre: Nicols Espitia Puentes Grupo: 2.1

1. Consulta

a) Qu tipo de organismos son las levaduras? y explique de acuerdo con su metabolismo si se

consideran de caracter aerobio, anaerobio, o anaerobio facultativo.

Se denomina Levadura a cualquiera de ciertos hongos normalmente unicelulares, la mayora de los

cuales se clasifican como ascomicetos. Estn distribuidas por todo el mundo en suelos y superficies
vegetales, las levaduras abundan sobre todo en medios azucarados, como el nctar floral y las frutas
(levadura, 2015).

Grupo de hongos ascomicetos, que forma junto a pirenomicetos y plectomicetos la subclase

euascomictidos. Se caracterizan por sus largas ascas agrupadas en un himenio llamado apotecio,
receptculo abierto con forma de copa o disco en las especies epigeas, o cerrado y con forma
globosa en las hipogeas. Algunos son hongos comestibles muy apreciados, como la COLMENILLA
(de apotecio abierto) y la TRUFA (de apotecio cerrado).
(Discomicetos, 2015)

Segn Louis Pasteur, la fermentacin aparece en las levaduras siempre que falta el oxgeno. En su
opinin las levaduras pueden respirar y tambin fermentar, segn las condiciones de vida
imperantes (Haehn H., 1956). La prueba ms clara que se podra aducir en favor de esta teora es
el primer hecho analizado de que los hongos usuales tomen el carcter de levadura si se les hace
vivir sin aire o con mucho menos aire del que estaban rodeados, o sea del que es indispensable
para la vida de las plantas aerobias. Las levaduras poseen especialmente slo una de las
propiedades pertenecientes a muchos, sino a todos los mohos usuales, y que poseen, en ms o
menos, todas las clulas vivas para ser, segn las condiciones existentes, simultneamente,
aerobias o anaerobias (Louis Pasteur, 1876).
De esta manera se determin el carcter anaerbico facultativo de las levaduras, el cual es usado
segn las condiciones a las que se encuentren.

a) Describa brevemente dos procesos de fermentacin industrial en los que se utilizan las
levaduras, incluyendo ejemplos de especies de estos microorganismos.

La fermentacin alcohlica, es un proceso biolgico de fermentacin en ausencia de oxgeno (O2)

que usa Saccharomyces cerevisiae, originado por la actividad de algunos microorganismos como la
levadura y bacterias, que procesan los carbohidratos como: glucosa, sacarosa, fructosa, entre otros.
Los productos finales que se obtienen de este proceso son: etanol, dixido de carbono, NAD+ y
2ATP (Mller L., 1964).

1
 La fermentacin alcohlica
produce muy poca energa
neta: 2 ATP por cada
piruvato obtenido de la
gliclisis. Como resultado se
obtiene tambin etanol
(principal producto utilizado
en las empresas productoras
de vinos, cervezas y vinagre)
y dixido de carbono (CO2).

La fermentacin lctica
ocurre en algunos organismos unicelulares y en tejidos animales. Su principal uso se da en la
obtencin de quesos, yogur, salsa de soya, y otros productos derivados de la leche. En los tejidos en
animales, se produce cido lctico (o lactato) a partir del piruvato. En clulas musculares, cuando el
suministro y las reservas de oxgeno (mioglobina) se agotan durante ejercicio fsico extenuante, el
piruvato deja de ingresar a las mitocondrias (ingresan en presencia de O2 para obtener energa) y
comienza la fermentacin lctica (anaerobia). Las grandes cantidades de lactato son las
responsables de la fatiga y dolor muscular (Berg J., Tymoczko J., Stryer L., 2007).

2. Propiedades de los reactivos a usar en el laboratorio

Nombre Frmula Aspecto Peligrosidad Primeros auxilios

En caso de prdida del conocimiento nunca
dar a beber ni provocar el vmito.: Trasladar
a la persona al aire libre. Lavar
Fosfato de
NaH2PO4 Slido blanco abundantemente con agua. Quitarse las
sodio ropas contaminadas Beber agua abundante.
Provocar el vmito. En caso de malestar,
pedir atencin mdica
Lavar abundantemente con agua. Quitarse
Hidrxido de Grnulos las ropas contaminadas Beber agua
NaOH abundante. NO Provocar el vmito. En caso
sodio blancos
de malestar, pedir atencin mdica

2
 2, 4- Polvo cristalino
Suministrar aire fres, lavar con agua y jabn
dinitrofenilhid C6H6N4O4 de color rojo o y enjuagar durante varios minutos
razina naranja

Aire limpio, reposo. Posicin de

semiincorporado. Respiracin artificial
Cristales Quitar las ropas contaminadas. Aclarar la
cido C2 HCl3
incoloros de piel con agua abundante o ducharse
tricloroactico O2 Enjuagar la boca. NO provocar el vmito.
olor acre
Dar a beber agua abundante. Reposo.
Proporcionar asistencia mdica

Retire a la vctima del lugar de

exposicin, si se ha detenido la
Vanadato de Polvo amarillo respiracin inicie la respiracin de
H4NO3V
amonio claro rescate y si se ha detenido la accin
cardiaca inicie la reanimacin
cardiopulmonar
Aire limpio, reposo, Quitar las ropas
C18H12Cu contaminadas. Aclarar la piel con agua
Oxina Polvo verde abundante o ducharse, enjuagar durante
N2O2
varios minutos la boca

3. Bibliografa

Berg J., Tymoczko J., Stryer L., (1997) Bioqumica Barcelona (Espaa): editorial revert, pg
447-448

Bohinski R., (1987) Modern concepts in biochemistry Boston (USA): Allyn and Bacon, Inc
Newton pg 497-499.

Haehn H., (1956) Bioqumica de las fermentaciones Madrid (Espaa): Aguilar s.a. pg 211.

Haehn H., (1956) Bioqumica de las fermentaciones Madrid (Espaa): Aguilar s.a. pg 344-346.

Mller L. (1964) Manual de laboratorio de fisiologa vegetal Turrialba (Costa rica): Instituto
interamericano de ciencias agrcolas de la O.E.A., pg 92

Pasteur L., (1876) tude sur la bire Pars (Francia).

Discomicetos. (2015). En enciclopedia moderna. Recuperado el 25 de octubre de 2015, de

encyclopaedia Britannica: http://www.moderna.eb.com.ezproxy.utadeo.edu.co/ee/article-9577198

Levadura. (2015). En enciclopedia moderna. Recuperado el 25 de octubre de 2015, de

encyclopaedia Britannica: http://www.moderna.eb.com.ezproxy.utadeo.edu.co/ee/article-9419715

3
4. Procedimiento

4.1 Formacin de piruvato a partir de glucosa y reconocimiento con 2,4 dinitrofenilhidrazina.

Resultado esperado: se observar la presencia de piruvato en la muestra del tubo B debido al pH

alcalino proporcionado por el hidrxido de sodio y la 2,4 dinitrofenilhidrazina que inactiva la
enzima que degrada el piruvato.

2 tubos de ensayo
2 ml de los sobrenadantes
1 ml de 2,4 dinitrofenilhidrazina

Mezclar vigorosamente

En 2 tubos de ensayo limpios, poner 5

gotas de las mezclas anteriores

1 mlNaOH 10%
2ml de agua destilada

La formacin de un color rojo es positiva a la

presencia de piruvato. Repetir usando cido pirvico.
4.2
Formacin de acetaldehdo y reconocimiento con reactivo de Schiff

Resultados esperados: se observar la aparicin de un color fucsia en el tubo 2 por la reaccin del
reactivo de schiff con el acetaldehdo cclico proveniente del sobrenadante del tubo D.

2 tubos de ensayo
(1) 6 gotas sobrenadante C
(2) 6 gotas sobrenadante D
0.5 ml reactivo de Schiff

Agitar, la aparicin de un color fucsia indica

la presencia de acetaldehdo. Repetir con
benzaldehdo y agua

4
4.3 Formacin de etanol y reconocimiento con vanadato oxina

Resultados esperados: Se evidenciar la formacin de una coloracin roja por la reaccin entre la
oxina y el etanol en presencia del vanadato de amonio. La oxina se deshidrogena y forma esa
coloracin.

En un tubo de ensayo 10 gotas de B

1 ml benceno
0.5 ml H4NO3V
3 gotas de oxina

Mezclar y dejar por 20 min. La formacin de un color rojo

es positiva para alcohol. Repetir con etanol y C