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Productions végétales et valorisation pharmaceutique

Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Productions végétales et valorisation pharmaceutique
Le marché pharmaceutique mondial # 300 Milliard d’€ 50% USA, 30% UE, 20% Japon 2%

Le marché pharmaceutique mondial

Le marché pharmaceutique mondial # 300 Milliard d’€ 50% USA, 30% UE, 20% Japon 2% du

# 300 Milliard d’€

50% USA, 30% UE, 20% Japon

2% du CA de l’industrie globale 7,6% du PIB pour OCDE 20% des pays bénéficient de 85% du budget santé Des marges importantes (80%)

Les dans l’industrie pharmaceutique substances naturelles végétales Grande diversité de molécules Structures

Les

dans l’industrie pharmaceutique

substances naturelles végétales

pharmaceutique substances naturelles végétales Grande diversité de molécules Structures chimiques connues

Grande diversité de molécules

Structures chimiques connues :

Végétaux = 4 X Microorganismes

Des molécules actives :

75% de la population mondiale se soigne avec des plantes. 25% du marché USA des produits pharmaceutiques repose sur des actifs végétaux Activités anticancéreuse, anti-virales…

marché USA des produits pharmaceutiques repose sur des actifs végétaux Activités anticancéreuse, anti-virales…
Nature végétales à intérêt pharmaceutique chimique des substances Métabolites primaires Sucres (polysaccharides,

Nature

végétales à intérêt pharmaceutique

chimique des substances

à intérêt pharmaceutique chimique des substances Métabolites primaires Sucres (polysaccharides,

Métabolites primaires

Sucres (polysaccharides, hétérosides) Lipides (simples) Amino-acides et protéines…(hétérosides cyanogénétiques)

Sucres (polysaccharides, hétérosides) Lipides (simples) Amino-acides et protéines…(hétérosides cyanogénétiques)
Sucres (polysaccharides, hétérosides) Lipides (simples) Amino-acides et protéines…(hétérosides cyanogénétiques)

Métabolites secondaires

Les plus développés dans l’industrie pharmaceutique

aux métabolites
aux métabolites

Introduction

aux métabolites Introduction secondaires végétaux Définition, exemples Aspects historiques Principales classes

secondaires végétaux

aux métabolites Introduction secondaires végétaux Définition, exemples Aspects historiques Principales classes
aux métabolites Introduction secondaires végétaux Définition, exemples Aspects historiques Principales classes

Définition, exemples Aspects historiques Principales classes de métabolites secondaires Principales fonctions connues chez les végétaux Intérêt économique

Chimie

Cosmétique

introduction
introduction
Chimie Cosmétique introduction Définition, exemples Un composé qui est • présent à faible concentrati on chez

Définition, exemples

Chimie Cosmétique introduction Définition, exemples Un composé qui est • présent à faible concentrati on chez
Chimie Cosmétique introduction Définition, exemples Un composé qui est • présent à faible concentrati on chez

Un composé qui est

présent à faible concentration chez les plantes (mg.g -1 MS)

historiquement supposé être non essentiel pour la vie de la plante (ce qui est faux…)

Exemples :

• Colorants naturels végétaux

• Fragrances végétales

• Actifs pharmaceutiques et cosmétiques

• Additifs et arômes alimentaires

Pharmacie

Alimentaire

Glucose (C6) Glycosides Derived Glucosinolates Cyanogenic glucosidess
Glucose
(C6)
Glycosides
Derived
Glucosinolates
Cyanogenic glucosidess
Glycosides Derived Glucosinolates Cyanogenic glucosidess Nucléoside Derived Pyrimidine Nicotine Purine Caffeine

Nucléoside Derived

Pyrimidine

Nicotine

Purine

Caffeine

Théobromine

Derived Pyrimidine Nicotine Purine Caffeine Théobromine Shikimic Acid Derived Quinones Flavonoids Tannins Coumarins

Shikimic Acid DerivedDerived Pyrimidine Nicotine Purine Caffeine Théobromine Quinones Flavonoids Tannins Coumarins Betalains Malonate

Quinones

Flavonoids

Tannins

Coumarins

Betalains

Acid Derived Quinones Flavonoids Tannins Coumarins Betalains Malonate (C3) Polyketides Anthraquinones Naphtoquinones

Malonate (C3)

Polyketides

Anthraquinones

Naphtoquinones

Cannabinols

(C3) Polyketides Anthraquinones Naphtoquinones Cannabinols Acetate (C2) TCA Cycle Arginine Polyamines Tropane

Acetate (C2)

Anthraquinones Naphtoquinones Cannabinols Acetate (C2) TCA Cycle Arginine Polyamines Tropane alkaloids Mevalonate

TCA Cycle

Naphtoquinones Cannabinols Acetate (C2) TCA Cycle Arginine Polyamines Tropane alkaloids Mevalonate (C6)

Arginine

Polyamines Tropane alkaloids

Mevalonate (C6)

Terpenes et sterols

Pyrethrum

Azadirachtin

Caroténoïdes

Menthol

Pinene

Principaux groupes de métabolites secondaires végétaux

introduction
introduction
introduction Aspects historiques Partie prenante de l’histoire des Hommes et des civilisations Découvertes

Aspects historiques

introduction Aspects historiques Partie prenante de l’histoire des Hommes et des civilisations Découvertes
introduction Aspects historiques Partie prenante de l’histoire des Hommes et des civilisations Découvertes

Partie prenante de l’histoire des Hommes et des civilisations Découvertes contemporaines de l’avènement de la chimie Quelques avancées récentes

Phytochimie (depuis 1950)

Chemotaxonomie

introduction classes de métabolites
introduction
classes de métabolites

Principales

introduction classes de métabolites Principales secondaires végétaux Terpènes Huiles essentielles, caroténoïdes,

secondaires végétaux

classes de métabolites Principales secondaires végétaux Terpènes Huiles essentielles, caroténoïdes, stéroïdes
classes de métabolites Principales secondaires végétaux Terpènes Huiles essentielles, caroténoïdes, stéroïdes

Terpènes

Huiles essentielles, caroténoïdes, stéroïdes

Alcaloïdes

Nicotinique, morphinique…

Phénoliques

Lignines, flavonoïdes, coumarines

introduction
introduction

Principales

II aires chez les végétaux

fonctions des métabolites

i r e s chez les végétaux fonctions des métabolites Pigmentation Action anti-herbivore (insectes/mammifères)
i r e s chez les végétaux fonctions des métabolites Pigmentation Action anti-herbivore (insectes/mammifères)
i r e s chez les végétaux fonctions des métabolites Pigmentation Action anti-herbivore (insectes/mammifères)

Pigmentation Action anti-herbivore (insectes/mammifères) Composés antifongiques & antibactériens (phytoalexines) Signalisation chimique (symbioses) Substances de croissance ….

Essentiel pour l’adaptation des plantes au milieu naturel…

introduction Exemple d’une graine bien défendue… Psoralea cinerea (Légumineuse) Allelopathie (inhibition de
introduction Exemple d’une graine bien défendue…
introduction
Exemple
d’une
graine bien défendue…
introduction Exemple d’une graine bien défendue… Psoralea cinerea (Légumineuse) Allelopathie (inhibition de

Psoralea cinerea (Légumineuse)

Allelopathie (inhibition de germination)

Phytoalexines (racines, tiges)

Signalisation chimique (flavonoïdes, Rhizobium)

Intérêt économique 1/ Molécules à activité thérapeutique remarquable Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus
Intérêt économique 1/ Molécules à activité thérapeutique remarquable Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus

Intérêt économique

Intérêt économique 1/ Molécules à activité thérapeutique remarquable Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus
Intérêt économique 1/ Molécules à activité thérapeutique remarquable Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus

1/ Molécules à activité thérapeutique remarquable

Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus roseus) ou If (taxus sp.) pour la production de d’anticancéreux

ou If (taxus sp.) pour la production de d’anticancéreux Impossibilité de produire par chimie de synthèse

Impossibilité de produire par chimie de synthèse

2/ Molécules bénéficiant d ’une excellente image

Image « naturelle », engouement pour la phytothérapie, ou comment faire de la transgenèse sans le dire…

Comment produire ? des Le problème métabolites II a i r e s de la
Comment produire ? des
Comment
produire
?
des

Le problème

métabolites II aires

de la production

Le problème métabolites II a i r e s de la production Synthèse organique Culture de
Le problème métabolites II a i r e s de la production Synthèse organique Culture de

Synthèse organique

Culture de plantes au champ Culture de plantes au champ

Approches biotechnologiques : cultures cellulaires végétales Approches biotechnologiques : cultures cellulaires végétales

Production par génie génétique ? Production par génie génétique ?

Comment produire ? Synthèse organique : les plantes comme modèle • Souvent possible, à bas
Comment produire ?
Comment
produire
?

Synthèse

organique : les plantes comme

modèle

produire ? Synthèse organique : les plantes comme modèle • Souvent possible, à bas prix Ex
produire ? Synthèse organique : les plantes comme modèle • Souvent possible, à bas prix Ex

Souvent possible, à bas prix

Ex : aspirine

modèle • Souvent possible, à bas prix Ex : aspirine OH CO 2 H OCOCH 3

OH

CO 2 H

Souvent possible, à bas prix Ex : aspirine OH CO 2 H OCOCH 3 CO 2
Souvent possible, à bas prix Ex : aspirine OH CO 2 H OCOCH 3 CO 2

OCOCH 3

CO 2 H

Acide salicylique

Acide acétyl-Salicylique (50 000 t/an)

• Mais, ce n’est pas toujours possible…

Comment produire ?
Comment
produire
?

de

plantes au champ

Comment produire ? de plantes au champ Culture Plantes médicinales ~8000 ha en France Culture peu

Culture

Comment produire ? de plantes au champ Culture Plantes médicinales ~8000 ha en France Culture peu
Comment produire ? de plantes au champ Culture Plantes médicinales ~8000 ha en France Culture peu

Plantes médicinales

~8000 ha en France Culture peu coûteuse

~8000 ha en France Culture peu coûteuse

Mais, ce n’est pas toujours possible…

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Organisation de la vente Pharmacopée : 1200 plantes Vente libre : 34 plantes C

Organisation de la vente

Pharmacopée : 1200 plantes

Vente libre : 34 plantes

Consommées en létat (plantes condimentaires, herbes

aromatiques comme thym, laurier, estragon, persil et épices comme le

cumin, coriandre, genièvre

),

Utilisées/transformées par les industrie s alimentaires, pharmaceutiques, cosmétiques

(bouleau, marron d’Inde, millepertuis, henné, etc.)

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Le marché français Importation : 70 à 80 % des volumes utilisés Volumes importés

Le marché français

Importation : 70 à 80 % des volumes utilisés

Volumes importés : 19 000 t/an

Balance commerciale 1998

En l’état : - 212 MF

Transformées : - 642 MF

Plantes médicinales Production française Cueillette Régions de montagne myrtilles : 5 à 10 000 t/an
Plantes médicinales
Plantes
médicinales

Production française

Cueillette

Régions de montagne

myrtilles : 5 à 10 000 t/an Gentiane Cynorhodon

Production française Cueillette Régions de montagne myrtilles : 5 à 10 000 t/an Gentiane Cynorhodon …
Production française Cueillette Régions de montagne myrtilles : 5 à 10 000 t/an Gentiane Cynorhodon …
Plantes médicinales 2000 t/an
Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales 2000 t/an
Plantes médicinales 2000 t/an

2000 t/an

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Production française Culture 12 000 t/an, # 8 000 ha, environ 100 plantes Production

Production française

Culture

12 000 t/an, # 8 000 ha, environ 100 plantes

Production souvent très morcelée, et de quelques ha

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Structuration de la filière Office : ONIPPAM Institut technique : ITEIPMAI

Structuration de la filière

Office : ONIPPAM

Institut technique : ITEIPMAI

Plantes médicinales
Plantes
médicinales

française

Plantes médicinales française Production Anjou : 200 ha Menthe poivrée, camomille, sauge Région Parisienne 450 ha

Production

Anjou : 200 ha

Menthe poivrée, camomille, sauge

Région Parisienne 450 ha

Menthe, bardane, mélisse

Champagne-Ardennes 3500 ha

Œillette

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales
Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Production française Sud Est : 1000 ha Haute Provence : menthe poivrée, thym, fenouil

Production française

Sud Est : 1000 ha

Haute Provence : menthe poivrée, thym, fenouil Var : anis, Carvi, coriandre Vaucluse : thym, sauge, hysope Drôme : Thym, romarin, tilleul, marjolaine

thym, fenouil Var : anis, Carvi, coriandre Vaucluse : thym, sauge, hysope Drôme : Thym, romarin,
thym, fenouil Var : anis, Carvi, coriandre Vaucluse : thym, sauge, hysope Drôme : Thym, romarin,
thym, fenouil Var : anis, Carvi, coriandre Vaucluse : thym, sauge, hysope Drôme : Thym, romarin,
Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Concurrence Europe méridionale Balkans Afrique septentrionale Ex : cynar, prix 1999 Maroc :

Concurrence

Europe méridionale Balkans Afrique septentrionale

Ex : cynar, prix 1999

Maroc : 4à 6 F/kg (suivant qualité) Bulgarie-Hongrie : 5 à 7 F/kg Roumanie : 9 à 12 F/kg France : 8 à 22 F/kg

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Concurrence Marché mondial Fluctuation des cours : Ex : camomille romaine 1998 : 80

Concurrence

Marché mondial

Fluctuation des cours :

Ex : camomille romaine

1998 : 80 à 90 F/kg 1999 : 60-80 F/kg

Les PAM produits de consommation courante

Prévoir de vendre avant de produire

Plantes médicinales d’une culture
Plantes
médicinales
d’une culture
Plantes médicinales d’une culture Conduite Temps de travail : Camomille romaine : heures/ha Pépinière : 130

Conduite

Temps de travail :

Camomille romaine : heures/ha Pépinière : 130 Préparation du sol : 10 Installation de la culture : 45 Entretien mécanique : 40 Entretien manuel : 160 Traitements/fertilisation : 15 Récolte manuelle : 1800 Séchage : 225

TOTAL : 2385

Plantes médicinales
Plantes
médicinales
Plantes médicinales Conduite d’une culture Objectifs majeurs : Mécanisation de la récolte Mécanisation du

Conduite d’une culture

Objectifs majeurs :

Mécanisation de la récolte

Mécanisation du séchage

Qualité de la production

Plantes médicinales
Plantes
médicinales

de la qualité

Plantes médicinales de la qualité Le problème Quelques critères de qualité Pharmacologique (teneur en principes

Le problème

Quelques critères de qualité

Pharmacologique (teneur en principes actifs) Géographique (terroir, date de récolte Pureté

Chimique : herbicides, métaux lourds, radioéléments Bactériologique

Fraudes

Essences frelatées Substitutions : Ginseng/gingembre, gélules…

Production in vitro in vitro pour la
Production
in
vitro
in
vitro pour la

Cultures

Production in vitro in vitro pour la Cultures production de métabolites II a i r e

production de métabolites II aires

la Cultures production de métabolites II a i r e s Quelques rappels Principes de base
la Cultures production de métabolites II a i r e s Quelques rappels Principes de base

Quelques rappels Principes de base pour la production à partir de suspensions de cellules végétales

Croissance, biomasse

Production de molécules actives

Production in vitro Quelques rappels • Matériel végétal stérile et conditions aseptiques • Milieu de
Production in vitro
Production
in
vitro

Quelques rappels

Production in vitro Quelques rappels • Matériel végétal stérile et conditions aseptiques • Milieu de
Production in vitro Quelques rappels • Matériel végétal stérile et conditions aseptiques • Milieu de

Matériel végétal stérile et conditions aseptiques

• Matériel végétal stérile et conditions aseptiques • Milieu de culture adapté (source de carbone,

Milieu de culture adapté (source de carbone, macroéléments, microélémentss, vitamines, autres…)

Equilibre hormonal adéquat pour l ’organogenèse végétale

e. i.

Auxines (AIA, acide naphtalène acétique, 2. 4. D., Cytokinines (Zéatine, Kinétine, BAP…)

)

Production in vitro Comment obtenir un cal et des cellules indifférenciées ? Coupure Cellules indifférenciées
Production in vitro
Production
in
vitro

Comment obtenir un cal et des cellules indifférenciées ?

Coupure

Production in vitro Comment obtenir un cal et des cellules indifférenciées ? Coupure Cellules indifférenciées

Cellules indifférenciées

Production in vitro Comment des contrôler le développement végétaux in vitro ? Skoog et Miller
Production in vitro Comment des
Production
in
vitro
Comment
des

contrôler le développement végétaux in vitro ?

Skoog et Miller (1957) [Cytokinine]

végétaux in vitro ? Skoog et Miller (1957) [Cytokinine] Callogenèse Rhizogenèse Caulogenèse [Auxine]
végétaux in vitro ? Skoog et Miller (1957) [Cytokinine] Callogenèse Rhizogenèse Caulogenèse [Auxine]
Callogenèse Rhizogenèse Caulogenèse
Callogenèse
Rhizogenèse
Caulogenèse
végétaux in vitro ? Skoog et Miller (1957) [Cytokinine] Callogenèse Rhizogenèse Caulogenèse [Auxine]

[Auxine]

Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro Milieu Solide Voie directe en milieu liquide Cal Suspension de cellules Obtention
Production in vitro Milieu Solide Voie directe en milieu liquide Cal Suspension de cellules Obtention
Production
in
vitro
Milieu
Solide
Voie directe
en milieu liquide
Cal
Suspension
de cellules
Obtention de suspensions
cellulaires
Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production in vitro
Production
in
vitro
Production in vitro Principes de base La plupart des métabolites secondaires sont intracellulaires, intravacuolaires

Principes de base

Production in vitro Principes de base La plupart des métabolites secondaires sont intracellulaires, intravacuolaires
Production in vitro Principes de base La plupart des métabolites secondaires sont intracellulaires, intravacuolaires

La plupart des métabolites secondaires sont intracellulaires, intravacuolaires

Quantité produite = biomasse produite X concentration

Production in vitro • Biomasse Alors : dX = µ dt Nombre de cellules X
Production in vitro • Biomasse
Production
in
vitro
• Biomasse

Alors : dX = µ dt

Nombre

de cellules

X 0

X et ln X = µ (t-t 0 ) X 0 temps t 0 3
X
et
ln X
= µ (t-t 0 )
X 0
temps
t 0
3 semaines

Croissance exponentielle

Production in vitro • Biomasse Quelques facteurs limitants : • Transferts de masse gaz-liquide (oxygène)
Production in vitro • Biomasse
Production
in
vitro
• Biomasse

Quelques facteurs limitants :

• Transferts de masse gaz-liquide (oxygène)

• Sensibilité au cisaillement (100 t/min)

• Homogénéisation du milieu :

Sédimentation

• Attachement

• Contact cellules-liquide

Espèce végétale (cals)

Temps de doublement (en jours)

Nicotiana tabacum

0,63

Nicotiana tabacum

1,7

Catharanthus roseus

2,2

Quassia amara

5,2

Psoralea cinerea

16

Production in vitro • Production de métabolites Quantité de cellules Quantité de métabolites secondaires
Production in vitro • Production de métabolites
Production
in
vitro
• Production
de
métabolites

Quantité de cellules

Quantité de métabolites secondaires temps
Quantité de métabolites
secondaires
temps
de cellules Quantité de métabolites secondaires temps Découplage croissance/synthèse de Métabolites Ii a i r
de cellules Quantité de métabolites secondaires temps Découplage croissance/synthèse de Métabolites Ii a i r

Découplage croissance/synthèse de Métabolites Ii aires

Criblage des plantes et évaluation de la production ……. screening des plantes initiation des cals
Criblage des plantes et évaluation de la production
Criblage
des
plantes
et
évaluation de
la
production
…….
…….

screening des plantes

initiation des cals

…….
…….
……. screening des plantes initiation des cals ……. Stabilisation génétique Criblage des lignées cellulaires

Stabilisation

génétique

Criblage des lignées cellulaires

Production in vitro • Production de métabolites Concentration en isoflavones (Daidzeine) 10000 9000 8000 7000
Production in vitro • Production de métabolites
Production
in
vitro
• Production
de métabolites

Concentration en isoflavones (Daidzeine)

10000 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 Espèces du genre Psoralea
10000
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
Espèces du genre
Psoralea
P. cinerea
P.tenax
P.obtusifolia
P.macrostachya
42 lignées
P.bituminosa
104 lignées
14 lignées
17 lignées
40 lignées

Criblage des lignées cellulaires

Bouque et al., 1998

Production in vitro • Production de métabolites Courbe modèle pour la variabilité génétique des lignées
Production in vitro • Production de métabolites
Production
in
vitro
• Production
de
métabolites

Courbe modèle pour la variabilité génétique des lignées cellulaires (population de 217 lignées issues de plusieurs espèces de Psoralées)

Fréquence (%)

de 217 lignées issues de plusieurs espèces de Psoralées ) Fréquence (%) Concentration en métabolite Bouque

Concentration en métabolite

Bouque 1997

Amélioration in vitro de
Amélioration
in
vitro
de

Amélioration de la production métabolites secondaires

de Amélioration de la production métabolites secondaires Elicitation Immobilisation de cellules Utilisation de
de Amélioration de la production métabolites secondaires Elicitation Immobilisation de cellules Utilisation de
de Amélioration de la production métabolites secondaires Elicitation Immobilisation de cellules Utilisation de

Elicitation Immobilisation de cellules Utilisation de précurseurs Perméabilisation de cellules

Amélioration in vitro Elicitation Pour les produits de type phytoalexines Éliciteurs biotiques (champignons
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Elicitation

Amélioration in vitro Elicitation Pour les produits de type phytoalexines Éliciteurs biotiques (champignons
Amélioration in vitro Elicitation Pour les produits de type phytoalexines Éliciteurs biotiques (champignons

Pour les produits de type phytoalexines

Éliciteurs biotiques (champignons inactivés…)

Eliciteurs abiotiques (UV, froid, minéraux…)

biotiques (champignons inactivés…) Eliciteurs abiotiques (UV, froid, minéraux…) Production X 10, 100, etc…

Production X 10, 100, etc…

Amélioration in vitro Immobilisation de cellules Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Immobilisation de cellules

Amélioration in vitro Immobilisation de cellules Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère
Amélioration in vitro Immobilisation de cellules Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère

Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère

Amélioration in vitro Immobilisation de cellules Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère
Amélioration in vitro Immobilisation de cellules Encapsulation de cellules dans une matrice de polymère
Amélioration in vitro Environnement matriciel Possibilité d’ajout cellules pseudo-organisées d’éliciteurs
Amélioration in vitro Environnement matriciel Possibilité d’ajout cellules pseudo-organisées d’éliciteurs
Amélioration
in
vitro
Environnement matriciel
Possibilité
d’ajout
cellules pseudo-organisées
d’éliciteurs
d’ajout cellules pseudo-organisées d’éliciteurs Bille d’alginate vide Excrétion Bille d’alginate avec

Bille d’alginate vide

Excrétion

pseudo-organisées d’éliciteurs Bille d’alginate vide Excrétion Bille d’alginate avec cellules encapsulées
pseudo-organisées d’éliciteurs Bille d’alginate vide Excrétion Bille d’alginate avec cellules encapsulées
pseudo-organisées d’éliciteurs Bille d’alginate vide Excrétion Bille d’alginate avec cellules encapsulées
pseudo-organisées d’éliciteurs Bille d’alginate vide Excrétion Bille d’alginate avec cellules encapsulées

Bille d’alginate avec cellules encapsulées

Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Utilisation de précurseurs

Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A
Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A
COOH H 2 N PAL A
COOH
H 2 N
PAL
A

Flavonoïdes in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL A COOH C A 4 H

COOH

de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate

CA4H

de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate

+NADPH

Cinnamate

COOH

de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate

OH

LignineUtilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH

p-coumarate

B

de précurseurs COOH H 2 N PAL A Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate

C

Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Utilisation de précurseurs

Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4
Amélioration in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4
COOH H 2 N PAL
COOH
H 2 N
PAL

Flavonoïdes in vitro Utilisation de précurseurs COOH H 2 N PAL COOH C A 4 H +NADPH

COOH

de précurseurs COOH H 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH

CA4H

précurseurs COOH H 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH OH

+NADPH

Cinnamate

COOH

2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH OH Lignine p- coumarate

OH

LignineH 2 N PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH OH p- coumarate

p-coumarate

A

B

PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH OH Lignine p- coumarate A B
PAL Flavonoïdes COOH C A 4 H +NADPH Cinnamate COOH OH Lignine p- coumarate A B

C

effets feedback

coût B / coût C ?

Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Perméabilisation de cellules

Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille
Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille
Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille
Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille
Amélioration in vitro Perméabilisation de cellules Faire sortir les produits intracellulaires Petite taille

Faire sortir les produits intracellulaires

Petite taille moléculaire des métabolites secondaires

perméabilisation des membranes phospholipidiques

Amélioration in vitro Perméabilisation des cellules 100 90 80 Chitosan 70 60 Control 50 40
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Perméabilisation des cellules

Amélioration in vitro Perméabilisation des cellules 100 90 80 Chitosan 70 60 Control 50 40 30
Amélioration in vitro Perméabilisation des cellules 100 90 80 Chitosan 70 60 Control 50 40 30
100 90 80 Chitosan 70 60 Control 50 40 30 20 10 0 0 20
100
90
80
Chitosan
70
60
Control
50
40
30
20
10
0
0
20
40
60
80
100
120
Coum
estrol
concentration
in the
medium
(mg/kgDM/L)

Hoursafterchitosan addition

Amélioration in vitro alternatives aux
Amélioration
in
vitro
alternatives aux

Stratégies

suspensions cellulaires

vitro alternatives aux Stratégies suspensions cellulaires Racines transformées (hairy roots) Croissance
vitro alternatives aux Stratégies suspensions cellulaires Racines transformées (hairy roots) Croissance
vitro alternatives aux Stratégies suspensions cellulaires Racines transformées (hairy roots) Croissance

Racines transformées (hairy roots)

Croissance

Production de molécules

Stabilité génétique

Cultures de tiges feuillées Co-cultures d’organes et/ou cellules

Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

Hairy roots

Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture

Principe de la culture

Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro Hairy roots Principe de la culture
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro
Amélioration in vitro Hairy roots de Psoralea lachnostachys
Amélioration in vitro Hairy roots de Psoralea lachnostachys
Amélioration in vitro Hairy roots de Psoralea lachnostachys
Amélioration in vitro Hairy roots de Psoralea lachnostachys
Amélioration in vitro Hairy roots de Psoralea lachnostachys

Hairy roots de Psoralea lachnostachys

Amélioration in vitro La croissance 10000 1000 100 10 1 Matière sèche (mg/flask) 0 5
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration
in
vitro
La croissance

10000

1000

100

10

1

Matière sèche (mg/flask) 0 5 10 15 20 25 30
Matière sèche
(mg/flask)
0
5
10
15
20
25
30

900

800

sèche (mg/flask) 0 5 10 15 20 25 30 900 800 700 600 500 400 300

700

600

500

400

300

200

100

0

Jours de culture (Bouque et al., 1999)

Modèle de croissance exponentiel,

Pourtant la croissance

racinaire est linéaire

Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro

La croissance

Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro La croissance
Amélioration in vitro Production de métabolites secondaires 100000 10000 1000 100 10 1 Daidzéine (µg/g
Amélioration in vitro Production de métabolites secondaires
Amélioration
in
vitro
Production
de
métabolites secondaires

100000

10000

1000

100

10

1

Daidzéine (µg/g DW) Coumestrol (µg/g DW) 0 5 10 15 20 25 30
Daidzéine
(µg/g DW)
Coumestrol
(µg/g DW)
0
5
10
15
20
25
30

900

800

700

Matière sèche (mg/flask)

600

500

400

300

200

100

0

Jours de culture

Bouque 1997

Amélioration in vitro Stabilité génétique • Bonne • Risques de dérive sans pression de sélection
Amélioration in vitro Stabilité génétique
Amélioration
in
vitro
Stabilité
génétique

• Bonne

• Risques de dérive sans pression de sélection

Amélioration in vitro Stabilité génétique • Bonne • Risques de dérive sans pression de sélection
Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro
Amélioration in vitro Cultures de tiges feuillées Shoots Shooty teratoma ( Agrobacterium tumefaciens )

Cultures de tiges feuillées

Amélioration in vitro Cultures de tiges feuillées Shoots Shooty teratoma ( Agrobacterium tumefaciens )
Amélioration in vitro Cultures de tiges feuillées Shoots Shooty teratoma ( Agrobacterium tumefaciens )

Shoots

Shooty teratoma (Agrobacterium tumefaciens)

Amélioration in vitro
Amélioration
in
vitro
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens
Amélioration in vitro Tiges feuillées de Ruta graveolens

Tiges feuillées de Ruta graveolens

Production à un stade industriel Les facteurs critiques de la montée en échelle Transferts de
Production à un stade industriel Les facteurs critiques de la montée en échelle Transferts de

Production à un stade industriel

Production à un stade industriel Les facteurs critiques de la montée en échelle Transferts de masses
Production à un stade industriel Les facteurs critiques de la montée en échelle Transferts de masses

Les facteurs critiques de la montée en échelle

Transferts de masses

Sensibilité au cisaillement

Homogénéisation du milieu

Les bioréacteurs

Procédés de fermentation exemple

Procédés de fermentation exemple
Production industrielle
Production
industrielle
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Transfert de masse (oxygène) Demande 10 X plus faible

Montée en échelle (scale up)

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Transfert de masse (oxygène) Demande 10 X plus faible
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Transfert de masse (oxygène) Demande 10 X plus faible

Transfert de masse (oxygène)

Demande 10 X plus faible que pour des microorganismes

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Sensibilité au cisaillement (shear stress) Agitation pneumatique
Production industrielle
Production
industrielle

Montée en échelle (scale up)

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Sensibilité au cisaillement (shear stress) Agitation pneumatique
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Sensibilité au cisaillement (shear stress) Agitation pneumatique

Sensibilité au cisaillement (shear stress)

Agitation pneumatique

Air-lift
Air-lift

Colonne à bulles

Production industrielle
Production
industrielle
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Homogénéisation Sédimentation cellulaire PO 2 limitante

Montée en échelle (scale up)

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Homogénéisation Sédimentation cellulaire PO 2 limitante
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Homogénéisation Sédimentation cellulaire PO 2 limitante

Homogénéisation

Sédimentation cellulaire

PO 2 limitante dans les zones de sédimentation

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Facteurs critiques Agitation mécanique Colonne à bulles Air-lift
Production industrielle
Production
industrielle

Montée en échelle (scale up)

Production industrielle Montée en échelle (scale up) Facteurs critiques Agitation mécanique Colonne à bulles Air-lift
Production industrielle Montée en échelle (scale up) Facteurs critiques Agitation mécanique Colonne à bulles Air-lift

Facteurs critiques

Agitation

mécanique

Colonne à bulles

Air-lift

Transfert

d’oxygène

+++

++

+

Faible

cisaillement

+

++

+++

Homogénéisatio n du milieu

+++

+

++

Production industrielle
Production
industrielle
Production industrielle Les types de bioréacteurs Procédés de fermentation Procédés discontinus : batch / fed batch

Les types de bioréacteurs

Production industrielle Les types de bioréacteurs Procédés de fermentation Procédés discontinus : batch / fed batch
Production industrielle Les types de bioréacteurs Procédés de fermentation Procédés discontinus : batch / fed batch

Procédés de fermentation

Procédés discontinus : batch / fed batch Procédés continus : chemostat / perfusion

Procédés discontinus : batch / fed batch Procédés continus : chemostat / perfusion

exemples

Fermenteur pilote
Fermenteur pilote
Fermenteur pilote
Fermenteur pilote
Fermenteur pilote
Fermenteur pilote
Fermenteur pilote

Fermenteur pilote

Bubble flask « maison »

Bubble flask « maison »

Bubble flask « maison »
Production industrielle Les types de bioréacteurs Le procédé à shikonine O OH O OH •
Production industrielle
Production
industrielle

Les types de bioréacteurs

Production industrielle Les types de bioréacteurs Le procédé à shikonine O OH O OH • Colorant
Production industrielle Les types de bioréacteurs Le procédé à shikonine O OH O OH • Colorant

Le procédé à shikonine

O OH O OH
O
OH
O
OH

• Colorant

• Actif dermatologique

Production industrielle M9 Production M G 5 Croissance Inoculum 200 L . 9 j .
Production industrielle M9 Production
Production
industrielle
M9
Production

MG5

Croissance

Inoculum

industrielle M9 Production M G 5 Croissance Inoculum 200 L . 9 j . . .
200 L . 9 j . . . .
200 L
.
9 j
.
.
.
.
M G 5 Croissance Inoculum 200 L . 9 j . . . . . 750

.

750 L

14 j

.

.

.

.

Shikonine

Air

Filtration

Air

Filtration

4 g/L

Procédé de production de shikonine

Tabata et al. Mitsui Corp.

Production industrielle
Production
industrielle
Production industrielle Conclusions Culture in vitro ou culture au champ ? Espèces Produit Ratio in vitro

Conclusions

Production industrielle Conclusions Culture in vitro ou culture au champ ? Espèces Produit Ratio in vitro
Production industrielle Conclusions Culture in vitro ou culture au champ ? Espèces Produit Ratio in vitro

Culture in vitro ou culture au champ ?

Espèces

Produit

Ratio in vitro/in planta

Nicotiana tabacum

Nicotine

2

Coleus blumei

Ac. Rosmarinic

5

Lithospermum

Shikonine

5

Papaver somniferum

Morphine

<<1

Atropa belladonna

Atropine

<<1

Catharanthus roseus

Vinblastine

0

Production industrielle
Production
industrielle
Production industrielle Production industrielle Société Produit Plante Année Japan Tobacco Ubiquinone

Production industrielle

Production industrielle Production industrielle Société Produit Plante Année Japan Tobacco Ubiquinone
Production industrielle Production industrielle Société Produit Plante Année Japan Tobacco Ubiquinone

Société

Produit

Plante

Année

Japan Tobacco

Ubiquinone

N. tabacum

1976

Svoboda Moscou

Ginseng

Panax ginseng

1979

Mitsui Petrochem

Shikonine

Lithospermum 1983

Nitto Denko

Ginseng

P. ginseng

1985

Natterdam All.

Ac. Rosm.

Coleus blumei

1986

Escargenics USA

Vanilline

???

1989

Bethesda Research

Phosphodiesterase

???

1985

Coût minimum pour la production en bioréacteur : 1500 € /kg

Génie métabolique des végétaux

Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique des végétaux
Génie métabolique
Génie
métabolique
Génie métabolique Génie métabolique : définition « It’s the improvement of cellular activities by manipulation

Génie métabolique : définition

Génie métabolique Génie métabolique : définition « It’s the improvement of cellular activities by manipulation
Génie métabolique Génie métabolique : définition « It’s the improvement of cellular activities by manipulation

« It’s the improvement of cellular activities by manipulation of enzymatic, transport, and regulatory functions of the cell with the use of recombinant DNA technology » (J.E. Bailey, 1991)

Génie métabolique
Génie
métabolique
Génie métabolique Génie métabolique : notions Approche multidisciplinaire Biologie moléculaire (gènes codant des

Génie métabolique : notions

Génie métabolique Génie métabolique : notions Approche multidisciplinaire Biologie moléculaire (gènes codant des
Génie métabolique Génie métabolique : notions Approche multidisciplinaire Biologie moléculaire (gènes codant des

Approche multidisciplinaire

Biologie moléculaire (gènes codant des activités enzymatiques limitantes) Biochimie (voies de biosynthèse) Biotechnologie (cultures cellulaires, bioréacteurs)

Objectif : contrôler le métabolisme des cellules pour la production de composés valorisables

Génie métabolique
Génie
métabolique
Génie métabolique Génie métabolique : notions Les technologies d’ADN recombinant sont un outil essentiel pour le

Génie métabolique : notions

Génie métabolique Génie métabolique : notions Les technologies d’ADN recombinant sont un outil essentiel pour le
Génie métabolique Génie métabolique : notions Les technologies d’ADN recombinant sont un outil essentiel pour le

Les technologies d’ADN recombinant sont un outil essentiel pour le génie métabolique mais ne sont pas tout…

Génie métabolique
Génie
métabolique
Génie métabolique Génie métabolique : notions L’ expression d’un gène hétérologue ne suffit pas pour obtenir

Génie métabolique : notions

Génie métabolique Génie métabolique : notions L’ expression d’un gène hétérologue ne suffit pas pour obtenir
Génie métabolique Génie métabolique : notions L’ expression d’un gène hétérologue ne suffit pas pour obtenir

L’ expression d’un gène hétérologue ne suffit pas pour obtenir une protéine fonctionnelle :

Proteolyse (gênes antisens ) Competitive pathways (gênes antisens) postmaturation, structure 3D localisation cellulaire ( channeling : membrane associated multienzyme complexes)

postmaturation, structure 3D localisation cellulaire ( channeling : membrane associated multienzyme complexes)
postmaturation, structure 3D localisation cellulaire ( channeling : membrane associated multienzyme complexes)
postmaturation, structure 3D localisation cellulaire ( channeling : membrane associated multienzyme complexes)
Génie métabolique Intérêt du modèle végétal • Production de composés « homologues » (métabolites
Génie métabolique
Génie
métabolique

Intérêt du modèle végétal

Génie métabolique Intérêt du modèle végétal • Production de composés « homologues » (métabolites
Génie métabolique Intérêt du modèle végétal • Production de composés « homologues » (métabolites

Production de composés « homologues » (métabolites secondaires synthétisés naturellement par les végétaux)

secondaires synthétisés naturellement par les végétaux) • Production de composés « hétérologues » (non

Production de composés « hétérologues » (non synthétisés naturellement par les végétaux)

Composés homologues
Composés
homologues

Composés produire ?

homologues : comment

homologues Composés produire ? homologues : comment Production difficile Ex : pervenche de Madagascar (
homologues Composés produire ? homologues : comment Production difficile Ex : pervenche de Madagascar (
homologues Composés produire ? homologues : comment Production difficile Ex : pervenche de Madagascar (

Production difficile

Ex : pervenche de Madagascar ( Catharanthus roseus)

Alcaloïdes indoliques :

anticancéreux

1 M $ /kg Production faible, in planta ou in vitro

Possibilité de produire plus en modifiant génétiquement les espèces végétales correspondantes ?

Composés homologues Liaisons & métabolisme primaire secondaire Métabolisme primaire sucres respiration
Composés homologues Liaisons &
Composés
homologues
Liaisons
&

métabolisme primaire

secondaire

homologues Liaisons & métabolisme primaire secondaire Métabolisme primaire sucres respiration croissance
homologues Liaisons & métabolisme primaire secondaire Métabolisme primaire sucres respiration croissance

Métabolisme primaire

& métabolisme primaire secondaire Métabolisme primaire sucres respiration croissance réserves Photosynthèse

sucres

respiration

croissance

réserves

Photosynthèse

REGULATION

Métabolisme

(enzymes,gènes)

secondaire

Composés homologues Modification des voies de biosynthèse Cas de la voie des phénylpropanoides Comme à
Composés homologues Modification des voies de
Composés
homologues
Modification
des voies de

biosynthèse

homologues Modification des voies de biosynthèse Cas de la voie des phénylpropanoides Comme à tous les
homologues Modification des voies de biosynthèse Cas de la voie des phénylpropanoides Comme à tous les

Cas de la voie des phénylpropanoides

Comme à tous les végétaux supérieurs car permet la synthèse de la lignine

Métabolite d ’intérêt = psoralènes

O O O
O O
O

Psoralène

Composés homologues Cas de la voie des furocoumarines COOH COOH H 2 N PAL C4H
Composés homologues
Composés
homologues

Cas de

la

voie des furocoumarines

COOH COOH H 2 N PAL C4H +NADPH
COOH
COOH
H 2 N
PAL
C4H
+NADPH

Phénylalanine

Cinnamate

20H COOH
20H
COOH

OH

HO O O
HO
O
O

Umbelliférone

O O O
O O
O

Psoralène

Composés homologues Cas de la voie des furocoumarines HO O O Umbelliférone COSCoA O O
Composés homologues
Composés
homologues

Cas de

la

voie des furocoumarines

HO O O
HO
O
O

Umbelliférone

COSCoA

de la voie des furocoumarines HO O O Umbelliférone COSCoA O O O Psoralène 20H COOH
de la voie des furocoumarines HO O O Umbelliférone COSCoA O O O Psoralène 20H COOH
O O O
O O
O

Psoralène

20H COOH 4CL OH
20H
COOH
4CL
OH
COOH COOH H 2 N PAL C4H +NADPH
COOH
COOH
H 2 N
PAL
C4H
+NADPH

Cinnamate

Phénylalanine

p-coumarate

Flavonoïdes

OH p-coumaroyl-CoA Roténoides Stilbènes
OH
p-coumaroyl-CoA
Roténoides
Stilbènes

Lignine

coumarate Flavonoïdes OH p-coumaroyl-CoA Roténoides Stilbènes Lignine Ptérocarpanes C o u m e s t a

Ptérocarpanes

Coumestanes

Composés homologues Métabolisme primaire Flavonoïdes COOH H 2 N PAL COOH COOH CA4H +NADPH Cinnamate
Composés homologues Métabolisme primaire
Composés
homologues
Métabolisme primaire
Composés homologues Métabolisme primaire Flavonoïdes COOH H 2 N PAL COOH COOH CA4H +NADPH Cinnamate OH

Flavonoïdes

Composés homologues Métabolisme primaire Flavonoïdes COOH H 2 N PAL COOH COOH CA4H +NADPH Cinnamate OH
COOH H 2 N PAL
COOH
H 2 N
PAL
COOH COOH CA4H +NADPH Cinnamate OH
COOH
COOH
CA4H
+NADPH
Cinnamate
OH

LignineCOOH H 2 N PAL COOH COOH CA4H +NADPH Cinnamate OH p- coumarate Liaisons métabolisme primaire

p-coumarate

Liaisons métabolisme primaire et secondaire

Composés homologues stratégies possibles O HO O O O 20H O COOH COOH COOH H
Composés homologues stratégies possibles O HO O O O 20H O COOH COOH COOH H
Composés
homologues
stratégies
possibles
O
HO
O
O
O
20H
O
COOH
COOH
COOH
H 2 N
Umbelliférone
Psoralène
PAL
C4H
COSCoA
4CL
+NADPH
Cinnamate
OH
Phénylalanine
p-coumarate
Flavonoïdes
OH
p-coumaroyl-CoA
Lignine
Roténoides
Stilbènes

Ptérocarpanes

Coumestanes

Composés homologues de Exemple la cinnamate 4 hydroxylase (C4H) Ac. cinnamique C4H + NADPH acide
Composés homologues de
Composés
homologues
de

Exemple

la cinnamate 4 hydroxylase (C4H)

Ac. cinnamique

C4H

Exemple la cinnamate 4 hydroxylase (C4H) Ac. cinnamique C4H + NADPH acide coumarique C4H = monooxygénase

+ NADPH

acide coumarique

C4H = monooxygénase de la classe P-450 Localisation subcellulaire : membranaire

Composés homologues
Composés
homologues
Composés homologues L ’expression des gènes codant pour la C4H est fortement régulée dans le temps

L ’expression des gènes codant pour la C4H est fortement régulée dans le temps de l ’espace (gène reporteur GUS dans les cellules qui lignifient)

Eliciteurs : blessure, ions metalliques

Composés homologues
Composés
homologues
Composés homologues Modification génétique de l ’activité C4H , par introduction du gène C4H de la

Modification génétique de l ’activité C4H, par introduction du gène C4H de la luzerne (sens ou antisens) chez le tabac (Sewalt et al., 1997)

Sens : activité enzymatique X 2

Pas d ’effet sur le contenu en lignine, sur la qualité de la lignine

Antisens : activité enzymatique - 80%

Contenu en lignine/5 qualité de lignine différente

Composés homologues Problème de l’expression coordonnée de plusieurs gènes Première construction polygénique
Composés homologues Problème de l’expression coordonnée de plusieurs
Composés
homologues
Problème
de
l’expression coordonnée de plusieurs

gènes

Première construction polygénique pour agir sur le métabolisme secondaire (Beck von Bodman et al., 1995)

3 gènes eucaryotiques exprimés par un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle

un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a
un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a
un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a
un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a
un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a
un seul promoteur végétal et couplés de manière translationnelle 5 ’ Mas 2 N l a

5 ’

Mas 2

Nla

Mas 1

3 ’

7-peptide

7-peptide

Composés homologues
Composés
homologues
Composés homologues Conclusions « composés homologues » L’approche « génie métabolique » est complexe mais

Conclusions « composés homologues »

Composés homologues Conclusions « composés homologues » L’approche « génie métabolique » est complexe mais
Composés homologues Conclusions « composés homologues » L’approche « génie métabolique » est complexe mais

L’approche « génie métabolique » est complexe mais constitue une voie d’avenir

Composés hétérologues
Composés
hétérologues
Composés hétérologues Composés hétérologues La plante = bioréacteur, hôte de gènes « exogènes »,

Composés hétérologues

Composés hétérologues Composés hétérologues La plante = bioréacteur, hôte de gènes « exogènes »,
Composés hétérologues Composés hétérologues La plante = bioréacteur, hôte de gènes « exogènes »,

La plante = bioréacteur, hôte de gènes « exogènes », neométabolisme

Intérêts du modèle plante : culture au champ peu coûteuse, absence de risque de contamination plante/Homme

Inconvénients : problème de la maturation des protéines, compétition avec d ’autres organismes hôtes (levures…), acceptation de la plante transgénique comme source de médicament ?

Composés hétérologues
Composés
hétérologues
Composés hétérologues 1/ Planticorps • Anti - herpes (HSV) de la souris (produit chez le soja)

1/ Planticorps

Composés hétérologues 1/ Planticorps • Anti - herpes (HSV) de la souris (produit chez le soja)
Composés hétérologues 1/ Planticorps • Anti - herpes (HSV) de la souris (produit chez le soja)

Anti - herpes (HSV) de la souris (produit chez le soja)

Anti Streptoccocus mutans (produit chez le tabac) Protection contre la carie

Composés hétérologues
Composés
hétérologues
Composés hétérologues 2/ Plantigènes • Vaccins oraux, à partir de végétaux comestibles plates hôtes : PdT,

2/ Plantigènes

Composés hétérologues 2/ Plantigènes • Vaccins oraux, à partir de végétaux comestibles plates hôtes : PdT,
Composés hétérologues 2/ Plantigènes • Vaccins oraux, à partir de végétaux comestibles plates hôtes : PdT,

Vaccins oraux, à partir de végétaux comestibles plates hôtes : PdT, bananes

Composés hétérologues 3/ Autres protéines thérapeutiques • Lipase gastrique (gène du chien, maïs transgénique,
Composés hétérologues
Composés
hétérologues

3/ Autres protéines thérapeutiques

hétérologues 3/ Autres protéines thérapeutiques • Lipase gastrique (gène du chien, maïs transgénique,
hétérologues 3/ Autres protéines thérapeutiques • Lipase gastrique (gène du chien, maïs transgénique,

Lipase gastrique (gène du chien, maïs transgénique,

mucoviscidose)

Meristem Therapeutic (limagrain-RP)

Lipase gastrique (gène du chien, maïs transgénique, mucoviscidose) Meristem Therapeutic (limagrain-RP) vfintegrale.rm

vfintegrale.rm

Composés hétérologues
Composés
hétérologues
Composés hétérologues Conclusion « composés hétérologues » Conclusion : fonctionne, plusieurs produits en

Conclusion « composés hétérologues »

hétérologues Conclusion « composés hétérologues » Conclusion : fonctionne, plusieurs produits en
hétérologues Conclusion « composés hétérologues » Conclusion : fonctionne, plusieurs produits en

Conclusion : fonctionne, plusieurs produits en développement

Mais, si pas d ’acceptation des plantes transgéniques en Europe ?