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*******Cambios morfolgicos producidos por el Cadmio en meristemos radiculares de cebolla

(Allium cepa L.)
Efecto mitotoxico del Cadmio en clulas meristematicas de la cebolla Allium cepa L.
Mitotoxic effect of Cadmium on meristematic cell of the onion Allium cepa L.
David Ariza D.; Angie Pinilla R.
davida.arizad@utadeo.edu.co; angiec.pinillar@utadeo.edu.co
Universidad de Bogot Jorge Tadeo Lozano
Resumen.
El cadmio es un metal pesado que se encuentra a lo largo de la corteza terrestre, en la actualidad es
ampliamente utilizado en la industria y es considerado como un contaminante ambiental por sus efectos
txicos debido a su acumulacin en los organismos principalmente por la ingesta de alimentos, agua y aire
contaminados y en altas concentraciones provoca alteraciones estructurales a nivel celular. En el presente
informe se realiz una comparacin detallada de los cambios morfolgicos en clulas vegetales producidos
por el cadmio, as como los principales estadios mitticos presentes en las clulas expuestas al metal en
meristemos radiculares de cebolla (Allium cepa L). A objetivo de esclarecer y comprobar los principales
efectos estructurales del cadmio propuestos por otros autores. Las cebollas se cultivaron en agua destilada
y desionisada con el fin de promover el crecimiento radicular, algunas de las races desarrolladas se trataron
con una solucin de cloruro de cadmio 0.1M (CdCl2) y otras se dejaron reposar en agua durante
aproximadamente 1 hora en ambos casos. El anlisis microscpico revelo variaciones en estadios mitticos
en clulas expuestas al cadmio con respecto al control en agua, se observaron cambios en la estructura
celular tales como vacuolas de diferentes tamaos y deformacin de la pared celular. Los resultados
obtenidos indican que el cadmio produce un efecto citotxico y mitotoxico en las clulas induciendo
posibles alteraciones en el funcionamiento ptimo de la clula.
Palabras clave: Cadmio. Citotoxicidad. Alteraciones morfolgicas. Mitosis.
Abstract.
Cadmium is a heavy metal that is found along the Earth's crust, nowadays it is widely used in the industry
and is considered as an environmental contaminant by its toxic effects due to its accumulation in organisms
mainly by the Ingestion of contaminated food, water and air and in high concentrations causes structural
alterations at the cellular level. In the present report, a detailed comparison of the morphological changes in
plant cells produced by cadmium, as well as the main mitotic stages present in the cells exposed to the metal
in meristems root onions (Allium cepa L). A objective of clarifying and verifying the main structural effects
of cadmium proposed by other authors. The onions were cultivated in distilled and deionized water in order
to promote root growth, some of the roots developed were treated with a solution of cadmium chloride 0.1M
(CdCl2) and others were allowed to rest in water for approximately 1 hour in both cases. The microscopic
analysis revealed variations in mitotic stages in cadmium-exposed cells with respect to water control,
changes in cell structure such as vacuoles of different sizes and deformation of the cell wall were observed.
The results obtained indicate that cadmium produces a cytotoxic and mitotoxic effect in cells inducing
possible alterations in the optimal functioning of the cell.
Key words: Cadmium. Cytotoxicity. Morphological alterations. Mitosis.
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Introduccin.
El cadmio (Cd), es un metal pesado que se obtiene como subproducto del procesamiento de metales como
el zinc (Zn) y el cobre (Cu), con alto potencial contaminante y toxicidad. El metal se acumula en el ambiente
como resultado de las actividades industriales (Farkas y col. 2007; Pan y col. 2009), La exposicin crnica
al Cd puede causar efectos adversos en rin, hgado, pulmn y pncreas (Satarug y col. 2010); de forma
que una exposicin prolongada puede causar dao en el tbulo renal y alteraciones en el metabolismo de la
vitamina D (20). Cuando se alcanzan niveles crticos del metal en sangre (> 100 mg/g de tejido en humanos),
se producen nefropatas, proteinurias y glucosurias (6).
Los ros contaminados con Cd pueden irrigar tierras de cultivos, adems de que el Cd es capaz de combinarse
con otros elementos y formar compuestos tales como cloruros, xidos, sulfuros y de esta manera unirse
fuertemente a las partculas del suelo. Se considera que la mayor cantidad de Cd en el suelo proviene del
uso de fertilizantes de fosfatos para la agricultura, lo cual produce que se acumule a lo largo de la cadena
alimenticia en plantas y animales. En la planta, el cadmio se acumula preferentemente en la raz retenido en
la vacuola de las clulas, y solo una pequea parte es transportada a la parte area de la planta
concentrndose en orden decreciente en tallos, hojas, frutos y semillas (Chan y Hale 2004). En las cebollas
A. cepa la exposicin a cadmio produce reduccin de la actividad ATPasa de la membrana plasmtica,
(Astolfi et al. 2005), alteraciones en la funcionalidad de la membrana plasmtica (Fodor et al. 1995; Sandalio
et al. 2001) y desequilibrios en el metabolismo del cloroplasto, inhibiendo la sntesis de clorofila y
reduciendo la actividad de enzimas implicadas en la fijacin de CO2 (Ali et al. 2000; Maksymiec et al.
2007).
Investigaciones previas han sugerido que el estudio de las alteraciones en el Indice Mittico (IM), bloqueo
del crecimiento e induccin de aberraciones cromosmicas (AC), son dosmetros biolgicos para el estudio
potencial de sustancias mutagnicas y carcinognicas como el cadmio, presentes en el ambiente como
contaminantes (6; 17;), varios estudios previos tambin resaltan toxicidad a otros metales pesados tales
como el plomo, arsnico, zinc y aluminio, lo cual indica la susceptibilidad de las plantas a la toxicidad en
el suelo, agua y aire (citar articulo).
El objetivo del presente informe es evidenciar los posibles cambios morfolgicos inducidos por el cadmio
en las clulas radiculares de A. cepa, a fin de identificar cules son los efectos de una exposicin a una
concentracin determinada de cadmio en las clulas vegetales.
Materiales y Mtodos
Como material de estudio se utiliz meristemos radiculares de A. cepa, debido a que como las estructuras
radiculares se encuentran en constante crecimiento se hallan clulas en mitosis continua, este organismo se
considera uno de los mejores modelos biolgicos para el estudio del efecto de contaminantes ambientales
por ser de bajo costo, fcil manipulacin y tener cromosomas fciles de observar. (cita bibliogrfica) (12-
14).
Se utilizaron 15 bulbos de cebolla y se mantuvieron en agua destilada y desionisada por aproximadamente
10 das, una vez que las races alcanzaron una longitud optima, se retiraron los meristemos apicales y se
coloraron algunos en agua (control) y otros en una solucin acuosa de cloruro de cadmio 0.1M (CdCl2)
durante aproximadamente 1 hora, el anlisis se llev a cabo con un meristemo de aproximadamente 4mm
por procedimiento, para cada control se realiz con 5 repeticiones y un solo procedimiento para el
meristemo con cloruro de cadmio.
Posteriormente, se procedi a realizar el montaje de las placas. Se coloc cada meristemo en un portaobjetos
de vidrio de 8cm * 2.5cm, A cada meristemo se le adiciono inicialmente una gota de cido clorhdrico 0.2N
(HCl) y se dej en reposo por 3 minutos, luego de este tiempo se procedi a eliminar el exceso y se le
adiciono una gota de Orceina A y se dej reposar nuevamente durante 5 minutos, al cabo de este tiempo se
retir el exceso y se adiciono una gota de Orceina B al cabo de 1 minuto se lav el exceso. Finalmente se
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coloc el cubreobjetos sobre cada meristemo y se presion hasta el punto de dejar una capa uniforme de
masa celular. Se procedi a realizar el anlisis microscpico por medio de un microscopio Primo Star marca
Carl Ceiss.