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Introduccin.
En el siguiente trabajo se evalu la produccin de biomasa tanto de Escherichia coli como tambin
de saccharomyces cerevisiae por medio del mtodo gravimtrico, bajo diferentes fuentes de
carbono y concentracin de sacarosa; se us la glucosa, importante monosacrido de seis carbonos
que es degradada por los organismos para ser aprovechada en forma de ATP, la galactosa y dos
disacridos tales como la sacarosa y la lactosa.
Objetivos
Materiales y mtodos
Se inoculo 10 mL de E.coli y S.cerevisiae en medios que contenan glucosa 20g/L (medio A), sacarosa
20g/L (medio B), lactosa20g/L (medio C), galactosa 20g/L (medio D); cada medio adems contena:
extracto de levadura 10g/L y peptona 20g/L. los inculos se incubaron a 30 0C por ocho das
Se inocularon 10mL de E.coli y S.cerevisiae en caldos de cultivo que contenan extracto de levadura
10g/L, peptona20g/L y sacarosa al 10%, 20%, 30% y 40% respectivamente; posteriormente se
dejaron ocho das en incubacin a 300C.
Determinacin de biomasa
Se pesaron 48 tubos eppendorf vacos y se rotularon, se transfirieron 20mL de los caldos en tubos
falcn de 50mL haciendo tres replicas, se centrifugaron por 5 minutos a 5000rpm, se elimin el
sobrenadante y se agreg 1mL de agua destilada al pellet se agit hasta desprender el botn y se
transfiri el contenido en cada tubo eppendorf, se centrifugaron a 5000 rpm por 5 minutos en
microcentrfuga se elimin el sobrenadante y el pellet se pes en hmedo; se realiz la diferencia
en cuanto el peso del tubo ms biomasa y tubo vaci, se promediaron las rplicas y se procedi a
realizar grficas para su posterior discusin.
Resultados y discusin
E.coli S. cerevisiae
Medio Prod. biomasa Medio Prod. biomasa
Glucosa 0,136g Glucosa 0,142g
Sacarosa 0,077g Sacarosa 0,071g
Lactosa 0,143g Lactosa 0,125g
Galactosa 0,071g Galactosa 0,087g
E. coli S. sereviciae
Tabla 1.1 Composicin elemental de Escherichia coli en base seca. Tomado de (Cuellas, 2007)
Como se puede observar el carbono es el elemento que representa el mayor porcentaje en peso de
una clula base seca y los elementos que constituyen su fuente de obtencin de energa para
cumplir sus funciones vitales de crecimiento (bajo la perspectiva del metabolismo) y reproduccin
estn compuestos de carbono principalmente, como es el caso de los medios con azucares utilizados
en este laboratorio; Aunque los valores observados en la anterior tabla corresponden solamente a
E. coli la composicin elemental de las bacterias no difieren mucho, como se indica a continuacin:
Tabla 1.2. Composicin elemental de biomasa para E.coli y S. cerevisiae.
Microorganismo Composicin elemental
SACCHAROMYCES CEREVISIAE CH1.82O0.58N0.16
ESCHERICHIA COLI CH1.94O0.52N0.25P0.025
Por lo anterior expuesto en trminos de composicin elemental de biomasa, se puede decir que
esta puede ser una causa del por qu los valores obtenidos en los 4 medios no distan mucho unos
de otros, as como tambin se tiene en cuenta que las rutas metablicas que puedan tomar ambos
microorganismos para el aprovechamiento de estos azucares puede diferir, por ejemplo, la sacarosa
es la fuente disacrida que menor biomasa produjo, segn Varela (2009) La habilidad para utilizar
sacarosa como nica fuente de carbono es un fenmeno altamente variable en diferentes bacterias
entricas. Ms del 90% de las cepas tipo silvestre de Klebsiella spp pero menos del 50% de E. coli.
E.coli S. cerevisiae
concentracin Prod. biomasa Medio Prod. biomasa
Sacarosa 10% 0,191g Sacarosa 10% 0,212g
Sacarosa 20% 0,147g Sacarosa 20% 0,168g
Sacarosa 30% 0,256g Sacarosa 30% 0,195g
Sacarosa 40% 0,302g Sacarosa 40% 0,147g
Por otra parte la ruta metablica que sigue S. cerevisiae corresponde a un tipo de fermentacin
alcohlica que produce etanol y CO2. Cuando hay oxigeno las levaduras realizan la respiracin,
crecen, oxidan completamente la glucosa y as obtienen el ATP, pero en condiciones de anaerobiosis
estos microorganismos fermentan azucares, como la glucosa y algunas la lactosa mayormente; as
la glucosa se transforma en acido pirvico, siguiendo la secuencia de reacciones de la glucolisis.
(Puerta, 2010) Desde el punto de vista funcional algunas caractersticas importantes en las cepas de
levadura son: capacidad de flocular, capacidad de producir alcohol, tolerancia al alcohol, tolerancia
a las altas temperaturas, capacidad y vigor en la fermentacin de azucares, esto se ve evidenciado
en la poca produccin de biomasa en contraste con E. coli.
Finalmente para que una poblacin bacteriana crezca en un determinado medio, se debe dar
nutrientes al sistema que respeten las frmulas promedio de las bacterias. Los elementos traza son
tambin necesarios, por esta razn suele agregarse al medio de cultivo extracto de levadura
(bacterias muertas que contienen todos los elementos que garantizan el crecimiento celular), tal
como ocurri en este laboratorio al lado de la pectona. (Cuellas, 2007)
Conclusiones.
Bibliografa.