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Odontol.

Sanmarquina 2016; 19(2): 5- 8 ODONTOLOGA SANMARQUINA


DOI: http://dx.doi.org/10.15381/os.v19i2.12907
ISSN: 1560-9111

Artculo Original
Efecto Antimictico in vitro de
Origanum vulgare sobre cepas
de Candida albicans Jorge Eleodoro Villavicencio Gastel,1
Hilda Moromi Nakata,3 Doris Salcedo-
Moncada,2 Martha Pineda-Meja,2
Donald Ramos Perfecto,3 Livia Sonia
Zambrano de la Pea,1 Elba Estefana
Antifungal effect in vitro of Origanum Vulgare in Candida Albicans Martnez Cadillo,3 Gilberto Alejandro
strains Mendoza Rojas,3 Marieta Petkova-
Gueorguieva,3 Roxana Margarita
Bardales lvarez4.
Resumen
Objetivo: Evaluar el efecto antimictico in vitro de aceite esencial de Origanum vulgare, sobre cepa de 1. Departamento Mdico Quirrgico
Candida albicans ATCC 10231 Material y mtodo: Se efectu la seleccin de cuatro de diferentes geoti-
pos de organo, se obtuvo los aceites esenciales mediante proceso de destilacin por arrastre con vapor de 2. Departamento de Estomatologa Rehabilitadora
agua; se determin su composicin qumica cuantitativa por Cromatografa de Gases, Espectrometra de 3. Departamento de Ciencias Bsicas de la Facul-
Masas (CG/EM). Se evalu in vitro la actividad antimictica de los aceites esenciales a travs de pruebas tad de Odontologa de la Universidad Nacional
de sensibilidad con el mtodo de difusin por discos en cultivo de agar frente a C. albicans. Mayor de San Marcos
Resultados: Los resultados mostraron alta actividad antimictica de todas los aceites a partir de las
concentracin de 12,5 %. Conclusiones: Los aceites esenciales del Origanum vulgare de los diversos 4. De la Universidad Nacional San Agustn de
geotipos presentan diferencias en sus efectos antimicticos. El aceite esencial de Origanum vulgare puede Arequipa
ser es una alternativa farmacolgica para el tratamiento de infecciones micticas en boca.
Palabras clave: Origanum vulgare, Candida albicans, antimictico.
Correspondencia:
Abstract * Villavicencio Gastel, Jorge Eleodoro
Objective: To evaluate the in vitro antimycotic effect of Origanum vulgare essential oil on Candida albi- Correo electrnico: jvillavicenciog@unmsm.edu.pe
cans strain ATCC 10231 Material and method: Selection of four different oregano geotypes was carried Facultad de Odontologa de UNMSM Av. Ger-
out, the essential oils were obtained by distillation by Drag with steam; Its quantitative chemical com- mn Amezaga 675. Lima 1, Per
position was determined by Gas Chromatography, Mass Spectrometry (GC / MS). The antimicrotic
activity of essential oils was evaluated in vitro through sensitivity tests with the disk diffusion method in Coautores:
agar culture against C. albicans. Results: The results showed high antimycotic activity of all oils from the Hilda Moromi Nakata
concentration of 12.5%. Conclusions: Essential oils of Origanum vulgare from different geotypes show hmnbio@hotmail.com
differences in their antifungal effects. The essential oil of Origanum vulgare may be is a pharmacological Doris Salcedo-Moncada
alternative for the treatment of fungal infections in the mouth. dsalcedom@unmsm.edu.pe
Keywords: Origanum vulgare, Candida albicans,Antifungal Agents. Martha Pineda-Meja
mpinedam@unmsm.edu.pe
Donald Ramos Perfecto
dramos_37@hotmail.com
Livia Sonia Zambrano de la Pea
facedent@hotmail.com
Elba Estefana Martnez Cadillo
emartinezc@unmsm.edu.pe
Gilberto Alejandro Mendoza Rojas
amen807@hotmail.com
Marieta Petkova Guergoguieva
mpgueorguieva@hotmail.com
Roxana Margarita Bardales lvarez
roxbaral@hotmail.com

Introduccin inmunitario se altera, stos se desarro- grupos de mayor riesgo. La resistencia


llan y provocan enfermedades oportu- de Candida sp. representa un reto te-
La candidiasis es una infeccin causada nistas, se instalan principalmente en las raputico que deja un menor nmero
por hongos levaduriformes, de diferen- superficies de las mucosas de la boca o de posibilidades para el tratamiento de
tes especies de este gnero. En el orga- vagina.1 Entre las levaduras del gnero
nismo se encuentra una gran variedad estas infecciones que se caracterizan, a
Candida, Candida albicans, es la espe-
de microorganismos como bacterias y cie que comnmente produce infec- su vez, por una alta morbimortalidad.3
hongos, algunos son tiles y otros viven ciones orales, comprendiendo hasta el El aumento de infecciones oportunistas
como saprofitos; sin embargo cuando el 70 % de los aislados,2 stas son cada en la estomatitis subprotsica (ESP),
ecosistema del organismo o el sistema vez ms prevalentes, especialmente en principalmente en pacientes inmuno-
Los autores. Este artculo es publicado por la Revista Odontologa Sanmarquina de la Facultad de Odontologa, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Este es un artculo de acceso abierto, distribuido
bajo los trminos de la licencia Creative Commons Atribucion - No Comercia_Compartir Igual 4.0 Internacional. (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/) que permite el uso no comercial, distribu-
cin y reproduccin en cualquier medio, siempre que la obra original sea debidamente citada. Para uso comercial, por favor pngase en contacto con revista.odontologia@gmail.com

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Jorge Eleodoro Villavicencio Gastel et al.

comprometidos, la aparicin de algunas 23,5 % y 24,70% respectivamente, Marcos (USM) del Museo de Historia
cepas de microorganismos resistentes a utilizado como alimento para ceba Natural, de la Universidad Nacional
los antimicrobianos y antimicticos de conejos, sealan su accin bacte- Mayor de San Marcos
usualmente utilizados ha generado el ricida y bacteriosttica. No mencio-
El proceso de extraccin de aceites esen-
inters en investigaciones dirigidas a na haber encontrado timol.9
los agentes fitoteraputicos por las m- ciales de organo, se realiz utilizando
nimas reacciones farmacolgicas que
Otro estudio evalu la actividad in la tcnica de destilacin por arrastre
presenta, teniendo incluso mayor po-
vitro de los aceites esenciales extra- con vapor de agua, a partir de las hojas
tencial farmacolgico que los productos
dos de canela, organo mexicano, y flores de plantas frescas y semides-
de origen sinttico.4
tomillo y jengibre contra algunas hidratadas; el aceite fue recolectado y
especies de Candida resistentes y decantado en un vaso florentino; la des-
El organo es una planta aromtica susceptibles a fluconazol que fue- hidratacin del aceite obtenido se efec-
originaria de Asia, muy utilizado ron aislados de pacientes con VIH tu utilizando sulfato de sodio anhidro
en la actividad culinaria, cosmti- avanzado y afectados por resistencia (SO4Na2) y se obtuvo un rendimiento
ca y farmacutica, contiene aceites al fluconazol o inmunocomprome- promedio de 0,546 mL de aceite/100 g
esenciales, cuyos metabolitos se- tidos con infecciones fngicas dise- de hojas y flores.
cundarios como carvacrol y timol, minadas. Los resultados mostraron
tienen altos niveles de actividad an- que el aceite esencial de organo Composicin qumica de los aceites
timicrobiana y antimictica, siendo tuvo mayor actividad antifngica esenciales
el timol el ms activo.5,6 La compo- en todas las cepas de Candida in-
sicin qumica de los aceites esen- cluyendo la Candida tropicalis y El estudio de la composicin qu-
ciales y sus propiedades, estn suje- Candida krusei. El aceite de organo mica del aceite esencial de organo
tos a variaciones debido a factores mexicano en casi todas las cepas a se realiz sometiendo a la muestra
como el quimiotipo y el geotipo de excepcin de la Candida tropicalis y a un anlisis por Cromatografa de
la planta, por lo que es necesario su el aceite esencial de jengibre fue el Gases/ Espectrometra de masas
estudio para su correcta aplicacin de ms baja actividad antifngica. (CG/EM). La muestra: se diluy
teraputica.7 La Candidiasis orofarngea se desa- 20 L de aceite esencial en 1 ml de
rrolla en 80 y 95 % de los pacientes diclorometano. La identificacin de
Estudiando diferentes especies de con SIDA. Entre los componentes los compuestos se realiz utilizan-
organo nativos de Europa y Mji- qumicos encontrados por (CG/ do los ndices de retencin de Ko-
co, encontraron que los rendimientos EM) el organo mexicano mostr vats, usando una serie de n-alcanos
de extraccin por el mtodo de destila- timol 20,17 % y carvacrol 56.8 %.10 (C6-C32) y mediante comparacin
cin con arrastre de vapor van desde el de los espectros de masas obteni-
1,8 al 5,6 %.8 Las propiedades antimicrobianas del dos con aquellos de la librera de
aceite esencial de organo in vitro fue-
Un estudio de la eficacia de aceites espectros Wiley. La cuantificacin
ron estudiados para determinar su efi-
esenciales contra diferentes micetos se realiz mediante el clculo del
cacia en la inhibicin del crecimiento
patognicos evaluando in-vitro la de levaduras: Candida albicans, Crypto-
porcentaje relativo de reas de cada
inhibicin de la actividad de alguno coccus albidus, Cryptococcus neoformans y
compuesto.
de estos y sus componentes princi- Rhodotorula rubrum; mediante medios Para el anlisis estadstico se tuvo
pales fue realizado en contra de una lquido suplementado con 200 y 400 en cuenta nicamente el porcentaje
cepa de Candida albicans. Dieci- g/mL de aceite esencial de organo a relativo de timol como componente
sis aceites esenciales comerciales, 37 C durante 24, 40, 60 y 85 horas; el mayoritario y de inters para el pre-
cuarenta y dos componentes puros efecto inhibidor del aceite esencial del sente estudio por sus propiedades
(alcoholes, aldehdos, cetonas, fe- organo por el mtodo de difusin en antioxidantes y antimicrobianas.12
noles e hidrocarburos), fueron pro- disco, fue de un dimetro de 27 mm del
bados mediante el uso de un agar crecimiento de las levaduras. La mayor Efecto antimictico de los aceites
semislido. Los aceites esenciales de duracin de incubacin resulto en un esenciales sobre C. albicans cepa ATCC
Origanum vulgare, Satureja monta- mayor porcentaje de inhibicin del cre- 10231
na, Mentha piperita, Cinnamomum cimiento de las cepas, concluyendo que
verum, Cymbopogon flexuosus mos- El estudio fue experimental in vitro,
la actividad antimicrobiana del aceite
traron actividad inhibitoria mxi- esencial del organo es fungisttico y prospectivo, transversal, se analiz en
ma (CMI = 500 ppm) despus de fungicida; as mismo, encontr que la cultivos de la cepa ATCC de Candida,
7 das. De acuerdo con los resulta- CMI es 20 g/mL.7 en Agar Sabouraud Glucosado y some-
dos del examen de los componentes tidas a la accin de cuatro tipos de acei-
puros, -felandreno demostr ser el Materiales y mtodo: te esencial de organo por el mtodo
componente ms interesante entre de difusin mediante discos de papel
los hidrocarburos cclicos monoter- Extraccin de aceites esenciales: Whatman n1 de 6 mm de dimetros,
pnicos, ya que mostr fuerte activi- embebidos en concentraciones de 12,5
dad (CMI = 50 ppm). El ms activo Se recolect de distintos lugares del %, 25 %, 50 % y 100 %, utilizndose
de los fenoles fue carvacrol (CMI Per, cuatro muestras de diferentes es- como control positivo Miconazol
100 ppm).5 pecies de organo, considerando que (Daktarin gel oral 20 mg/g), como
por el geotipo, presentaran diferente control Dimetilsulfxido (DMSO).
En un estudio de organo a partir de quimiotipo:8,11 el Origanum vulgare L
dos temperaturas de secado, 26 y 60 (Jauja y Tacna), Origanum x intercedens Para el anlisis de los resultados se con-
0
C; mencionan que en la composi- y Origanum x majoricum (Arequipa). sider los valores de sensibilidad segn
cin qumica de los aceites esencia- La clasificacin taxonmica fue realiza- el mtodo de aromatograma de Dura-
les, encontr presencia de carvacrol da en el Laboratorio del Herbario San ffoourd13,14 : 1S. nula: < 8mm, 2S. lmite

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Efecto Antimictico in vitro de Origanum vulgare sobre cepas de Candida albicans

9-14 mm, 3S. media 15-19 mm y 4S. Sabineno (1), terpineno (2), Tabla 3. Efectividad antimictica
sumamente sensible > 20 mm. -terpineno (3) cis- -terpineol (4), determinados por promedio de halo
4-terpineol (5), timol (6), carvacrol (7), de inhibicin de aceites esenciales de
RESULTADOS cariofileno (8) organo, control C (+) Miconazol 20
mg/g, sobre Candida albicans ATCC
Rendimiento de aceite essencial por 10231
especie
Halo de inhibicin (mm
Tabla 1. Rendimiento de aceite Concentracin Organo
del dimetro)
esencial media D.E. P. Valor
p valor
Hojas Rendi- Volu- 100% Origanum vulgare L (Tacna) 24,86 6,67 0,000
Rendi-
Proce- Muestra y flores miento men/
miento
dencia (estado) (peso en (mL/ Peso Figura 4. Cromatograma de gases de acei- Origanum x intercedens
total (mL) 22,57 2,94
Kg.) Kg ) (%) (Arequipa)
Origanum te esencial Origanum vulgare L (Jauja) Origanum x majoricum
vulgare L Fresco 1,600 Kg 5,3 mL 3.31 0,22 20,86 5,11
(Arequipa)
(Jauja)
Origanum
Sabineno (1), terpineno y p-cimeno Origanum vulgare L (Jauja) 12,00 1,63
50% Origanum vulgare L (Tacna) 16,71 4,23 0,001
vulgare L Fresco 3,100 Kg 15 mL 4,83 0,48 (2), -terpineno (3) cis- -terpineol
(Tacna)
(4), 4-terpineol (5), timol (6), carvacrol Origanum x intercedens
13,57 1,51
Origanum x (Arequipa)
intercedens Deshidra-
(no figura), cariofileno (7), cube- Origanum x majoricum
1,955 kg 30 mL 15.34 1.53 13,71 1,50
(Arequipa)
tado beno (8) y -elemeno (9). (Arequipa)
Origanum vulgare L (Jauja) 10,29 1,25
Origanum x 25% Origanum vulgare L (Tacna) 11,43 1,13 0,000
majoricum Deshidra- 1,985 Kg
Actividad antimictica
45 mL 22.67 2.27 Origanum x intercedens
tado 10,29 0,49
(Arequipa) (Arequipa)
La actividad antimictica de los aceites Origanum x majoricum
10,86 1,34
Composicin qumica
esencial del organo sobre Cndida al- (Arequipa)
Origanum vulgare L (Jauja) 8,43 1,81
bicans ATCC, se determin en funcin 12.5% Origanum vulgare L (Tacna) 8,00 0,82 0,005
La composicin qumica del aceite al dimetro de halo de inhibicin y los
Origanum x intercedens
esencial, al anlisis por Cromatogra- criterios del mtodo de arotmatorgrama (Arequipa)
8,14 1,22

fa de Gases/ Espectrometra de masas de Duraffoourd as como de la concen- Origanum x majoricum


9,71 1,11
(Arequipa)
(CG/EM) de cada especie de organo tracin mnima inhibitoria (HCMI).13 Origanum vulgare L (Jauja) 7,29 1,38
estudiado: Tabla 2, 3 y 4. A la concentracin de Origanum vulgare L (Tacna) 38,57
Origanum x intercedens
12,5 %, Origanum x majoricum (Are- Miconazol
(Arequipa)
38,00

quipa), presenta mayor actividad anti- 20mg/g


Origanum x majoricum
(Arequipa)
27,43
mictica sobre Candida albicans ATCC. Origanum vulgare L (Jauja) 41,29

Tabla 4. Actividad antimictica de


aceites esenciales de organo, control
C (+) Miconazol, sobre Candida
Figura 1. Cromatograma de gases de
albicans ATCC 10231. (Prueba
aceite esencial Origanum x intercedens ANOVA)
(Arequipa).- Figura 5. Actividad antimictica de los aceites Concentracin Aceite esencial P valor DHS Tukey
Origanum vulgare L (Tacna)
esencial del organo sobre Cndida albicans 0,781
o-cimeno (1), -terpineno (2), cis- ATCC.
Origanum x intercedens (Arequipa)
Origanum vulgare L (Tacna)
0,369
Origanum x majoricum (Arequipa)
terpineol (3), timol (4), carvacrol (5), Origanum vulgare L (Tacna)
0,000
cariofileno (6) y elixeno (7). Tabla 2. Sensibilidad antimictica 100 %
Origanum vulgare L (Jauja)
Origanum x intercedens (Arequipa)
0,893
Origanum x majoricum (Arequipa)
de los aceites esenciales de cuatro Origanum x intercedens (Arequipa)
0,001
Origanum vulgare L (Jauja)
especies de Organo sobre Candida Origanum x majoricum (Arequipa)
0,006
Origanum vulgare L (Jauja)
albicans cepa ATCC 10231 Origanum vulgare L (Tacna)
0,104
Origanum x intercedens (Arequipa)
Origanum Origanum vulgare L (Tacna)
Origanum Micona- 0,128
Origanum x majoricum (Arequipa)
Origanum x majori- Origanum Origanum vulgare L (Tacna)
Concen- x interce- zol 20 0,000
vulgare L cum vulgare L Origanum vulgare L (Jauja)
tracin dens mg/g
(Tacna) (Arequi- (Jauja) Origanum x intercedens (Arequipa)
1,000
(Arequipa) (C+) Origanum x majoricum (Arequipa)
pa)
Figura 2. Cromatograma de gases de 50 %
Origanum x intercedens (Arequipa)
0,084
Origanum vulgare L (Jauja)
aceite esencial Origanum x majoricum 100 % 24,864 22,0574 20,864 12,002 36,294 Origanum x majoricum (Arequipa)
0,067
Origanum vulgare L (Jauja)
(Arequipa) Origanum vulgare L (Tacna)
0,293
50 % 16,713 13,572 13,712 10,292 36,004 Origanum x intercedens (Arequipa)
sabineno (1), terpineno y o-cimeno Origanum vulgare L (Tacna)
Origanum x majoricum (Arequipa)
0,802

se ubican antes del terpineno (2), cis- 25 % 11,432 10,291 10,862 8,291 34,294
Origanum vulgare L (Tacna)
Origanum vulgare L (Jauja)
0,000
-terpineol (3), acetato de linalol (4), Origanum x intercedens (Arequipa)
Origanum x majoricum (Arequipa)
0,802
timol (5), carvacrol (6), cariofileno 12.5 % 8,002 8,141 9,712 7,291 40,144
Origanum x intercedens (Arequipa)
Origanum vulgare L (Jauja)
0,020
(7) y -elemeno (8). 25 %
Origanum x majoricum (Arequipa)
Origanum vulgare L (Jauja)
0,802
Origanum vulgare L (Tacna)
Valores de sensibilidad en el aromato- Origanum x intercedens (Arequipa)
0,995
Origanum vulgare L (Tacna)
grama segn Duraffourd13 Origanum x majoricum (Arequipa)
0,047
Origanum vulgare L (Tacna)
0,656
Origanum vulgare L (Jauja)
1
S. nula: 8 mm; 2S. lmite: 9-14 mm; Origanum x intercedens (Arequipa)
0,076
Origanum x majoricum (Arequipa)
3
S. media: 15-19 mm; 4Sumamente 12,5 %
Origanum x intercedens (Arequipa)
0,514
Origanum vulgare L (Jauja)
sensible: 20 mm. Origanum x majoricum (Arequipa)
0,003
Origanum vulgare L (Jauja)
Figura 3. Cromatograma de gases de acei-
te essencial Origanum vulgare L (Tacna).

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Jorge Eleodoro Villavicencio Gastel et al.

DISCUSIN 2. Los aceites esenciales del Origa- nic yeasts. Adv Biosci Biotechnol.
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La obtencin del de aceite esencial geotipos presentan diferencias en
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cin por arrastre con vapor de agua de Origanum vulgare L (Tacna) el G, Lecona-Uribe S, Gonzlez de
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