3.5.1.

Cromatografa con fase invertida

Procedimiento de elucin empleado en cromatografa lquida en el cual la fase mvil es
significativamente ms polar que la estacionaria; por ejemplo, un material microporoso
de base silcea con cadenas alquilo unidas qumicamente.
La cromatografa en fase reversa (RPC) permite separar molculas en base a su
polaridad. El principio de la cromatografa en fase reversa es semejante al de la
cromatografa en capa fina. Sin embargo, aqu la fase estacionaria es de patculas de
slica qumicamente modificadas con hidrocarburos saturados, insaturados o aromticos
de diferentes tipos. Esto convierte a la fase estacionaria en una matrz apolar. Por lo
tanto, para este tipo de cromatografas se emplean mezclas de solventes polares, tales
como agua, acetonitrilo, acetato de etilo, acetona y alcoles alifticos.

3.5.2. Cromatografa con Fase Normal

Procedimiento de elucin en el que la fase estacionaria es ms polar que la fase mvil.
Este trmino se usa en cromatografa lquida para resaltar el contraste con la
cromatografa con fase invertida.
fue el primer tipo de sistema HPLC utilizado en elcampo de la qumica, y se caracteriza
por separar los compuestos en base asu polaridad. Esta tcnica utiliza una fase
estacionaria polar y una fase mvilapolar, y se utiliza cuando el compuesto de inters es
bastante polar. Elcompuesto polar se asocia y es retenido por la fase estacionaria. La
fuerza deabsorcin aumenta a medida que aumenta la polaridad del compuesto y
lainteraccin entre el compuesto polar y la fase estacionaria polar (encomparacin a la
fase mvil) aumenta el tiempo de retencin.La fuerza deinteraccin no slo depende de
los grupos funcionales del compuesto deinters, sino tambin en factores estericos de
forma que los ismerosestructurales a menudo se pueden diferenciar el uno del otro. La
utilizacinde disolventes ms polares en la fase mvil disminuye el tiempo de
retencinde los compuestos mientras que los disolventes ms hidrofbicos tienden
aaumentar el tiempo de retencin.

3.5.3. Anlisis Isocrtico

Procedimiento en el que la composicin de la fase mvil permanece constante a lo largo
del proceso de elucin.

3.5.4. Elucin con Gradiente

Procedimiento en el que la composicin de la fase mvil cambia, de forma continua o
en etapas, a lo largo del proceso de elucin.

3.5.5. Cromatografa Bidimensional

Procedimiento en el que parte o todos los componentes de la muestra se someten, una
vez separados, a etapas adicionales de separacin. Esto se puede hacer, por ejemplo,
conduciendo a una fraccin en particular que eluye de la columna hacia otra columna (o
sistema) que tenga diferentes caractersticas de separacin. Cuando se combina con
etapas de separacin adicionales, se puede hablar de cromatografa multidimensional.
En la cromatografa plana, cromatografa bidimensional se refiere al proceso
cromatogrfico que hace que los componentes migren primero en una direccin y luego
en otra perpendicular a ella; las dos eluciones se llevan a cabo con eluyentes diferentes.