ESTERILIZACION

M. ALVARADO, E. RUIZ, M. SAYRE

Facultad de Ingeniera Qumica y Textil, Universidad Nacional
de Ingeniera16 de Setiembre, 2009
RESUMEN
Mediante el presente informe daremos a co
n o c e r t o d o a l p r o c e s o d e esterilizacin; el cual es
una tcnica que nos permite que un material est librede
contaminacin tanto biolgica como contaminacin
por agentes qumicos.El proceso de Esterilizacin requiere
seguir pasos muy estrictos y manteniendolos cuidados y
precauciones debidas ya que de ello depende de que
nuestroc ul tiv o este total men te es tril para poder as
cultiv ar sol o la es pecie quedeseamos y no tener
agentes contaminantes que malogren
nuestra experiencia.Debemos recordar que cada tipo de
material tiene sus propios pasos para laesterilizacin
siendo distinto los pasos para esterilizar una placa Petri y
un tubode ensayo.Primero realizamos la esterilizacin de
la placa petri: realizaremos dos formas deesterilizacin
Esterilizacin de placa petri con residuos slidos y placa
petri sin residuosslidos.
Para esterilizar la placa petri sin residuos slidos que se dio
en la mayora de losgrupos de laboratorio, lo hici mos
de una forma ms rpi da por cues tin detiempo en
el laboratorio, ya que no utilizamos el autoclave , sino
que hicimoshervir agua en una olla, metimos las placas petri
en una bolsa de plstico (estopara que no ingresara agua
en las placas) y las colocamos dentro de la olladurante
unos 15 minutos, luego sacamos las placas petri y las
lavamos con aguay lava vajilla para eliminar todos los restos
de suciedad que haban en la placapetri, luego enjuagar con
agua de cao, despus enjuagara con agua destilada y
dejar boca abajo sobre la franela y dejar escurrir el agua
durante 5 minutos, unavez seca enjuagar la caja petri con
unas cuantas gotas de alcohol y secar , unavez seco se
envolvi con papel kraft ; el papel Kraft posee una zona lisa y
otrarugosa se debe poner la parte lisa por dentro y
envolver la caja petri; luego semarco el papel con los
respectivos datos como nombre de equipo de
trabajo,fecha de trabajo; esto es para evitar posibles
confusiones con otras placas deesterilizacin; luego
se introdujo la placa a la estufa (Figura N 5) por 45 minutosa
180 C (pero solo llego a 138C).Para esterilizar las placas petri
con residuos slidos se coloca las placas en unabolsa de
plstico (para evitar que el vapor de agua ingrese en la placa
petri y sellene de agua) para luego colocarlas en el
autoclave durante unos 15 minutossacarla y proceder a
separar los residuos solidos de los liquidos,hechando
losresi duos s li dos en una bols a (para desecharl as )
y hecha r los li quidos al lavadero,una ves realizado esto
se prosiguio de manera similar a la esterilizacionde placa
petri sin residuos slidos, lavando,secando y colocando las
placas petrien la estufa a las mismas condiciones.
Esterilizacin de otros materiales de vidrio.
Para la esterilizacin de los tubos de ensayo tambin lo
hicimos de una formarapida tapando los tubos con las
tapas roscas pero dejando un poco floja la tapapara ecitar
que estos revienten al colocar en la autoclave (colocar los
tubos enuna gradilla o en un lata de leche), a una
temperatura de 120 C durante 15minutos y despues
retirar los tubos y lavar con lava vajilla enjuagar con agua
dec ao y fi n almente agua destilad a,para ponerlosa
s ec ar boca abajo en l agradilla,sin necesidad de
colocarlos en la estufa. En el caso de las probetas y
laspipetas deben ser lavadas con agua y detergente y al final
con uan solucion dehipocorito de sodio 5% por 24horas.
Manejo del Autoclave
Tambien aprendimos a como utilizar la autoclave,
primero verificamos que
lal l a v e d e p u r g a e s t e c e r r a d a p a r a p o d e r
a g r e g a r l e 4 l i t r o s d e a g u a aproxi madamente,
c ol ocam os la c anas till a(donde s e c ol oc an los objet
os aesterilizar),cerramos la tapa y aseguramos las llaves
,esperamos a que el aguahierva colocando el controlador de
nivel de temperatura en el as alto nivel,luego

observamos a que salga vapor y cerramos la llave de

vapor y verificar que lapresion no suba a ms de 10 psia.
MATERIALES Y METODO
Los materiales empleados en la prctica de laboratorio de
esterilizacin
fueronl a s p l a c a s p e t r i q u e p u e d e n s e r d e m a t e r i
a l d e p r e x o d e p l s t i c o s l a s descartables, los
tubos de ensayo de vidrio al igual que la probeta,
algunosmateriales adicionales utilizados fueron unas
bolsas de plstico y papel kraft.Tambin se nos
proporciona un asa de siembra de material de nicrom
por lacaracterstica de enfriar y calentar rpidamente.
Los equipos con los cualesrealizamos la prctica de
laboratorio fueron la estufa (Figura N 4) en la cual
secalentaron las placas petri, el autoclave (Figura
N 1).L a e s t e r i l i z a c i n s e c o n s i d e r a c o m o u n a o p
e r a c i n i n d i s p e n s a b l e e n e l laboratorio debido a los
microorganismos que forman colonias en los mediosms
apropiados, estos puedes ser patgenos (que producen
enfermedades) obanales (que son encontrados en el medio
ambiente comn y no hacen dao
alhombre). El hec ho que estos mic roorganis mos c o
exis tan en el medi o dellaboratorio hace que haya u
na difi cul tad al tratar de es tudi ar una bacte riaespeci
fica ya que ser vera contaminada por estos
microorganismos, en estoscasos la esterilizacin se har en
los objetos donde se quiera estar libre
de estosmicroorganismos.En conclusin la esterilizacin
comprende mtodos, procedimientos ya seanfsicos,
mecnicos y qumicos que se emplean para desactivar,
destruir losmicroorganismos ya mencionados con nfasis al
inicio.E x i s t e n t r e s m t o d o s p r c t i c o s p a r a e l t r a t
a m i e n t o d e l o s m a t e r i a l e s d e laboratorio desechados
y de los desechos contaminados:

La esterilizacin por autoclave.

La incineracin.

La desinfeccin
qumica.La elecci n s e realiza atendien do a l a natur
aleza de los materi al es ; si es desechable o recuperable
y, en este ltimo caso, si se ve afectado por el calor.