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Artigo Original

Influncias de Dietas Ricas em cidos Graxos Saturados e


Insaturados sobre o Miocrdio de Ratos
Influences of Rich in Saturated and Unsaturated Fatty Acids Diets in Rat Myocardium

Matheus Fcchio Pinotti, Maeli Dal-Pai Silva, Mrio Mateus Sugizaki, Yeda Santana Diniz Novelli, Lea Slvia Santana,
Flvio Ferrari Aragon, Carlos Roberto Padovani, Ethel Lourenzi Barbosa Novelli, Antonio Carlos Cicogna
Faculdade Mdica da Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP Botucatu, SP

Resumo
Objetivos: O estudo avaliou a influncia de dietas ricas em cidos graxos saturados (AGS) e cidos graxos insaturados
(AGI) sobre a funo mecnica, a morfologia e o estresse oxidativo do miocrdio de ratos.

Mtodos: Ratos Wistar com 60 dias de idade foram alimentados com dieta padro (n = 8) ou dietas ricas em AGS
(n = 8) ou AGI (n = 8) durante 60 dias. A funo mecnica foi avaliada em msculo papilar isolado do ventrculo
esquerdo (VE) por meio de contraes isomtrica e isotnica, em condio basal (1,25 mM de clcio), aps elevao da
concentrao extracelular de clcio para 5,2 mM e estimulao -adrenrgica com isoproterenol 1,0 M. Fragmentos
do VE foram usados para estudo de estresse oxidativo e microscopias ptica e eletrnica.

Resultados: As dietas suplementadas com AGS e AGI no alteraram a funo mecnica do msculo cardaco. Entretanto,
ambas provocaram estresse oxidativo, com aumento do hidroperxido de lipdio e reduo da concentrao de superxido
dismutase. A dieta AGI diminuiu a expresso da catalase e a AGS reduziu a quantidade de glutationa peroxidase
miocrdica. Ambas as dietas promoveram discretas alteraes morfolgicas visualizadas ultra-estruturalmente, como
depsitos lipdicos e leses das membranas celulares.

Concluso: Os resultados sugerem que dietas enriquecidas com AGS e AGI no acarretam alterao da funo mecnica
do msculo cardaco isolado, mas causam discretas leses estruturais e estresse oxidativo no miocrdio.

Palavras-chave: Dieta, cidos graxos, miocrdio, ratos, estresse oxidativo.

Summary
Objectives: To study the influence of saturated (SFA) and unsaturated fatty acid (UFA) rich diets on mechanical function, morphology and
oxidative stress in rat myocardium.
Methods: Male, 60-day-old Wistar rats were fed a control (n=8), a SFA (n=8), or a UFA-rich diet (n=8) for sixty days. Mechanical function was
studied in isolated left ventricle papillary muscle under isometric and isotonic contractions, in basal conditions (1.25mM calcium chloride) and
after 5.2mM calcium chloride and beta-adrenergic stimuli with 1.0M isoproterenol. Left ventricle fragments were used to study oxidative stress
and morphology under light and electron microscopy.
Results: SFA and UFA-rich diets did not change myocardium mechanical function. Both diets caused oxidative stress, with high lipid hydroperoxide
and low superoxide-dismutase concentrations. UFA rich diet decreased catalase expression and SFA rich diet decreased the amount of myocardial
glutathione-peroxidase. Both diets promoted light ultrastructural injuries such as lipid deposits and cell membrane injuries.

Conclusion: Results suggest that SFA and UFA rich diets do not alter isolated muscle mechanical function, but promote light myocardial
morphological injuries and oxidative stress.
Key words: Diet; fatty acids; myocardium; rats; oxidative stress.

Introduo graxos trans e aumento da ingesto de leo de peixe, rico


Estudos recentes relatam as influncias benficas da em cidos graxos insaturados (AGI), sobre a morbidade e a
mudana do estilo de vida e das alteraes dietticas, como mortalidade de portadores de doena arterial coronariana1,2.
menor consumo de cidos graxos saturados (AGS) e cidos Enquanto alimentos ricos em AGS so aterognicos e
diminuem a reserva coronariana1,3,4, os AGI apresentam efeito
antiaterognico1,5 e protegem o corao contra os efeitos
adversos da fase aguda do infarto do miocrdio5,6.
Correspondncia: Matheus Fcchio Pinotti
Rua Dr. Jos Adriano Marrey Jr., 796 ap. 101 Embora os estudos relacionados aos AGI tenham
18603-610 Botucatu, SP demonstrado resultados benficos no aparelho
E-mail: mpinotti@uol.com.br
Artigo recebido em 09/05/06; revisado recebido em 09/05/06; cardiovascular1,5,6, trabalhos experimentais evidenciaram
aceito em 22/06/06. que dietas ricas em AGI e AGS promovem danos estruturais

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Dietas ricas em cidos graxos e alteraes miocrdicas em ratos

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e metablicos no miocrdio6-10. Enquanto ambas as dietas minerais, aminocidos essenciais e lipdios. A fonte de AGI
acarretaram desorganizaes do sarcolema, depsitos de foi o leo de milho e a fonte de AGS foi o leo de coco. Para
lipdios9,10 e estresse oxidativo miocrdico6,10, a dieta rica a dieta rica em AGI foi utilizada uma proporo de 220 ml
em AGI tambm promove necrose7 e estriao muscular de leo de milho com 30 ml de leo de coco para 1.000
anormal8. g de rao comercial. A dieta rica em AGS foi preparada
Apesar de a literatura demonstrar que a dieta rica em AGI utilizando-se uma mistura de 110 ml de leo de milho e 140
acarretou alteraes morfometablicas6-10, h informaes ml de leo de coco para 1.000 g de rao comercial. Depois
contraditrias referentes a seus efeitos sobre a funo mecnica de processadas, as misturas passaram por mquina especfica
do miocrdio7,9,11-15. Enquanto estudos prvios demonstraram para formao de pellets, os quais foram secos em estufa com
que a dieta acarretou depresso da funo cardaca em ar circulante durante 24 horas, em temperatura inferior a
msculo papilar isolado de coelhos12 e ratos13, dados recentes 70oC. Depois da secagem, foram mantidos em ar ambiente
de nosso laboratrio15 demonstraram, em concordncia com para resfriamento e armazenados em cmara fria a 6oC. A
outros autores7,9,11,14, que a dieta AGI no altera o desempenho validade da rao preparada de trs meses.
funcional do msculo cardaco. Por outro lado, h escassos A composio nutricional das raes foi estabelecida
registros sobre a relao entre dieta rica em AGS e funo no Laboratrio de Tecnologia dos Produtos Agropecurios
cardaca. Pepe e McLennan4 demonstraram que os AGS de da Faculdade de Cincias Agronmicas (FCA-UNESP). Para
origem animal causaram disfuno ventricular em corao anlise do teor de gordura foi utilizada a extrao em ter
isolado de ratos, que s foi evidenciada aps importante em aparelho de Soxhlet16. A anlise dos cidos graxos foi
aumento da pr-carga e do processo de isquemia-reperfuso realizada por extrao segundo o mtodo de Folch e cols.17:
miocrdica. Os autores demonstraram que essa alterao a esterificao foi realizada com cido sulfrico metanol em
funcional conseqncia da incapacidade de o corao frasco de transesterificao e a separao dos cidos graxos foi
aumentar o fluxo coronariano e utilizar adequadamente o realizada em cromatgrafo CG 17 A, utilizando uma coluna
oxignio necessrio para a produo de energia4. DB-Wax com aproximadamente 35 m de comprimento e
Este trabalho teve como objetivo avaliar as influncias programao de temperatura.
de dietas suplementadas com AGS e AGI sobre a funo Estudo funcional - O desempenho mecnico dos msculos
mecnica do msculo papilar isolado, e foi complementado papilares isolados foi avaliado de acordo com a tcnica utilizada
pelas anlises do estresse tanto oxidativo como morfolgico no laboratrio em que foi realizado este estudo. Ao trmino
do miocrdio de ratos. do perodo experimental, os animais foram anestesiados com
pentobarbitol sdico, na razo de 1 ml da droga por 1.000 g
de peso do animal, e, posteriormente, decapitados. Depois de
Mtodos aberto o trax, o corao foi removido rapidamente e colocado
Grupos animais e protocolo experimental - Foram utilizados em soluo de Krebs-Henseleit previamente oxigenada (10
ratos Wistar, machos, com 60 dias de idade, provenientes do minutos) com 95% de oxignio (O2) e 5% de dixido de carbono
Biotrio do Laboratrio Experimental do Departamento de (CO2). Aps remover o corao da soluo, o ventrculo direito foi
Clnica Mdica da Faculdade de Medicina de Botucatu (FMB- dissecado com a finalidade de se expor o septo interventricular.
UNESP) e alimentados com rao comercial (C, n = 8) e dietas Este foi dividido ao meio, permitindo a exposio adequada
ricas em AGI (LI, n = 8) e AGS (LS, n = 8) e gua ad libitum. dos dois msculos papilares do ventrculo esquerdo, anterior
A rao comercial Labina (Purina Paulnia, Brasil) continha e posterior. O ventrculo esquerdo foi separado em duas
2,30% de gordura (58,52% de AGI e 41,38% de AGS). A partes, cada uma contendo seu msculo papilar. A seguir, um
dieta rica em AGI continha 19,39% de gordura (73,57% de dos msculos foi cuidadosamente dissecado numa cmara
AGI e 26,43% de AGS). Por outro lado, a dieta rica em AGS contendo soluo de Krebs-Henseleit, adequadamente
apresentava 20,02% de gordura (37,45% de AGI e 62,55% de oxigenada e aquecida a 28oC. Durante a disseco, foram
AGS). A preparao das dietas est descrita a seguir. mantidos segmentos da parede livre e do septo interventricular
Os animais, submetidos ao protocolo durante 60 dias nas extremidades dos msculos, em que foram presos anis de
e sacrificados posteriormente, foram mantidos em gaiolas ao inoxidvel, evitando leses das extremidades do msculo
individuais, em ambiente com temperatura controlada papilar. Depois disso, o msculo foi rapidamente transferido
(24oC + 2oC), ciclo claro-escuro (12:12 horas), e pesados para uma cmara de acrlico contendo 100 ml de soluo
semanalmente. O peso corpreo tanto inicial (PCI) como de Krebs-Henseleit, constantemente oxigenada e mantida
final (PCF), o peso do ventrculo esquerdo (VE) e do temperatura de 28oC com uso de banho circulante. O msculo
ventrculo direito (VD), e as relaes VE/PCF e VD/PCF foram papilar foi suspenso verticalmente na cmara, e a extremidade
medidos nos ratos submetidos a estudo funcional. A ingesto tendinosa superior foi conectada, por meio de anel e fio de ao
alimentar foi medida pelo consumo de cada semana. Todos inoxidvel de 0,038 cm de dimetro, extremidade do brao
os procedimentos esto de acordo com o Guide for the Care de um motor DC de baixa inrcia (G100-PD, General Scaning,
and Use of Laboratory Animals, publicado pelo US National Watertown, MA, Estados Unidos). A extremidade inferior do
Institute of Health e aprovados pelo Comit de tica e msculo foi fixada a um gancho preso ao fundo da cmara por
Experimentao Animal da FMB-UNESP. meio de anel de ao.
Preparo das dietas - As dietas ricas em AGI e AGS Para controlar a fora e/ou o comprimento da preparao
foram preparadas a partir do farelo da rao comercial muscular foi utilizado um sistema servoeletrnico. O motor
e proporcionaram quantidades suficientes de vitaminas, DC contendo transdutores de fora e comprimento foi

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conectado a um microcomputador com interface digital- A fim de poder comparar o desempenho de msculos de
analgica, o que permitiu controlar a tenso e o comprimento tamanhos diferentes, os parmetros isomtricos e isotnicos
da preparao. As variaes de tenso e comprimento foram foram normalizados, respectivamente, pela AS e pelo Lmx.
registradas velocidade de 1 kHz e armazenadas em disquete Estudo bioqumico - Cinco animais de cada grupo foram
para anlise posterior. utilizados para o estudo do estresse oxidativo. Os coraes
Os msculos foram estimulados por um estimulador foram removidos e o tecido adiposo cardaco foi desprezado.
Grass (DS9J, W. Warwick, RI, Estados Unidos) 12 vezes por Fragmentos de VE pesando 200 mg foram homogeneizados em
minuto por meio de eletrodos de platina, com pulsos eltricos 5 ml de fosfato de sdio tampo a 0,1 M, pH de 7,4, contendo
regulares de 5 ms de durao. A voltagem utilizada foi 10% 1 mM de cido etilenodiaminotetractico (EDTA). O tecido
maior que o valor mnimo necessrio para provocar resposta homogeneizado foi preparado em um homogeneizador Teflon
mecnica mxima do msculo. A seguir est apresentada Glass Potter Elvehjem (Piracicaba, SP, Brasil) por 1 minuto a
a composio da soluo de Krebs-Henseleit, expressa em 100 rpm, imerso em gua gelada. O produto foi centrifugado
milimol por litro: 118,5 NaCl; 4,69 KCl; 1,25 CaCl2; 1,16 a 10.000 rpm por 15 minutos e o sobrenadante foi usado para
MgSO4; 1,18 KH2PO4; 5,5 glicose; e 25,88 NaHCO3. determinar: protena total (PS), hidroperxido de lipdio (HL),
Aps perodo de 30 minutos, os msculos foram antioxidantes totais (TAS), glutationa-peroxidase (GSH-Px),
isotonicamente contrados contra leve carga (0,4 g) e, a seguir, superxido dismutase (SOD) e catalase (CAT).
colocados em contrao isomtrica e medidos. Nessa situao, O HL foi medido pela oxidao do hidroperxido pelo
foram estirados gradualmente at a tenso desenvolvida Fe2+ em meio cido. Amostras foram adicionadas a misturas
atingir seu valor mximo. O comprimento diastlico da fibra contendo 100 M de alaranjado de xilenol, 250 M de FeSO4,
muscular associado tenso mxima desenvolvida denomina-se 25 M de H2SO4, e 4 mM de butilato de hidroxitolueno em
Lmx. Aps atingir Lmx, o msculo foi colocado em contrao metanol 90%. As misturas foram incubadas por 30 minutos
isotnica fisiolgica contra ps-carga (pr-carga igual a 50% em temperatura ambiente para leitura a 560 nM.
da pr-carga em Lmx e ps-carga equivalente a 25% da tenso
GSH-Px foi quantificada usando 0,15 M de tampo de
mxima desenvolvida) durante 15 minutos. A seguir, trs novas
fosfato de sdio, pH de 7,0 contendo 5 mM de EDTA, 0,1
determinaes de Lmx foram realizadas. Aps verificao da
ml de NADPH a 0,0084 M e 0,005 ml de GSSG-redutase
estabilizao de Lmx, os msculos permaneceram em contrao
(Sigma, St. Louis, MO, Estados Unidos), 0,01 ml de NaN3 a
isomtrica, sendo analisados os seguintes parmetros: tenso
1,125 M e 0,1 ml de GSH a 0,15 M. A atividade da SOD foi
mxima desenvolvida (TD, g/mm2), tenso de repouso (TR,
determinada pela habilidade da enzima de inibir a reduo
g/mm2), tempo para atingir o pico da tenso desenvolvida (TPT,
do nitroazul de tetrazlio (Sigma). A taxa de reduo do
ms), velocidade mxima de variao temporal da TD (+dT/dt,
nitroazul de tetrazlio na ausncia de tecido foi usada
g/mm2/s), velocidade mxima de variao do decrscimo da
como referncia. Uma unidade de SOD foi definida como
TD (-dT/dt, g/mm2/s), e tempo para TD decrescer 50% de seu
a quantidade de protena necessria para diminuir a taxa
valor mximo (TR50, ms).
de referncia para 50%. Todos os dados foram expressos
Aps o trmino do registro isomtrico, o msculo foi como unidades de SOD por mg de protena. A atividade
colocado em contrao isotnica, contraindo contra uma da CAT foi determinada a 240 nm, com tampo de fosfato
pequena carga capaz de manter o msculo com comprimento de sdio (pH 7,0).
de repouso igual a Lmx. Os seguintes parmetros isotnicos
As atividades enzimticas foram determinadas com a
foram medidos: velocidade mxima de encurtamento (-dl/dT,
utilizao de leitor de microplacas (Bio-Tech Instruments
Ml/s) e velocidade mxima de relaxamento (+dl/dT, Ml/s). A
Inc., Winooski, VT, Estados Unidos), e as determinaes
constante de rigidez do msculo foi calculada pela relao
log(Sm) = B + KmEm, em que Sm o estresse calculado a partir espectrofotomtricas foram feitas com espectrofotmetro
da TR observada nos diferentes comprimentos do msculo Pharmacia Biotech (974213, Cambridge, Inglaterra).
normalizada para as respectivas reas de seco transversa, e Estudo morfolgico - Aps a retirada do corao,
Em a deformao (strain) natural do msculo (Em = 1 n[Lm/ um fragmento do msculo papilar de cinco animais de
L0,1], em que Lm o comprimento instantneo do msculo cada grupo foi submetido a tratamento criobiolgico.
e L0,1 o comprimento no estresse igual a 0,1 g/mm2). Esses fragmentos foram imersos em N-Hexana a -70oC,
Essas anlises foram realizadas em situao basal ([Ca2+] = previamente resfriada em nitrognio lquido a -196 oC.
1,25 mM), com aumento da concentrao extracelular de Decorridos dois minutos, o material congelado foi
Ca2+ para 5,2 mM e estmulo beta-adrenrgico (1 M de transferido para a cmara de um micrtomo criostato
isoproterenol). (Leica CM 1800 Leica Inst., Nussloch, Alemanha), a -
Os parmetros usados para caracterizar os msculos 20oC. Estabelecido o equilbrio trmico, cada fragmento
papilares foram: comprimento (mm) e rea seccional (AS, congelado foi fixado aos suportes metlicos do criostato,
mm2). O comprimento in vitro, em Lmx, foi obtido com com adesivo especial Yung Tissue Freezing Medium. Cortes
catetmetro Gartner (Chicago, IL, Estados Unidos). A poro histolgicos, com 8-10 m de espessura obtidos em
do msculo entre os anis de ao foi cortada, submetida criostato a -20C, foram submetidos a colorao HE, para
a secagem em papel filtro e pesada. A AS foi calculada a avaliao da morfologia geral do msculo.
dividindo-se o peso do msculo pelo seu comprimento, Para o estudo ultra-estrutural, pequenos fragmentos do
considerando-se que o msculo papilar tem forma cilndrica, msculo papilar de VE foram fixados em soluo de Karnowsky
uniforme, e peso especfico aproximadamente unitrio. (0,12 M de fosfato, pH de 7,2), por uma a duas horas, e ps-

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fixados em tetrxido de smio a 1% em tampo de fosfato Resultados


(0,1 M) por duas horas. Aps desidratao em etanol, amostras
As caractersticas gerais dos animais desse experimento
foram embebidas em resina para realizao dos cortes.
so apresentadas na tabela 1. Os animais submetidos a dieta
Seces ultrafinas foram realizadas com uma faca de diamante
AGS apresentaram VD maior que os animais controle e os
e coradas com acetato de uranil e citrato de chumbo, as quais
foram examinadas em microscpio eletrnico de transmisso com dieta AGI. A mdia de ingesto alimentar foi diferente
(Philips EM 301). entre os trs grupos, sendo maior nos ratos controle e menor
nos do grupo LI.
Anlise estatstica - Dados referentes aos parmetros
morfolgicos, aos parmetros funcionais em situao basal e A tabela 2 apresenta os dados referentes ao estudo funcional
aos lipdios sricos foram estudados pela anlise de varincia, do msculo papilar isolado em situao basal na concentrao
complementada com o teste de Tukey. Dados funcionais extracelular de clcio de 1,25 mM. No foram observadas
com aumento das concentraes de clcio e isoproterenol diferenas estatsticas entre os trs grupos. Os resultados
foram submetidos a anlise de varincia para o modelo de mecnicos com aumento da concentrao extracelular de clcio
medidas repetidas em trs grupos independentes. O nvel de esto apresentados na tabela 3. A variao da TR foi menor nos
significncia foi de 5% (p < 0,05). animais com dietas hiperlipdicas que no grupo controle. Os

Tabela 1 - Caractersticas gerais dos grupos experimentais

C (n = 8) LI (n = 8) LS (n = 8)
PI (g) 256 + 46 223 + 20 238 + 27
PF (g) 434 + 32 418 + 48 419 + 36
VE (g) 0,85 + 0,07 0,84 + 0,11 0,94 + 0,08
VD (g) 0,25 + 0,03 0,25 + 0,02 0,28 + 0,02b
VE/PF (mg/g) 1,96 + 0,07 2,02 + 0,23 ab
2,25 + 0,25b
VD/PF (mg/g) 0,57 + 0,05 0,60 + 0,05a 0,68 + 0,08b
AS (mm2) 1,06 + 0,31 1,04 + 0,19 1,09 + 0,26
Lmx (mm) 6,85 + 0,87 6,58 + 1,10 7,59 + 0,99
MIA (g/semana) 162 + 12c 130 + 12a 149 + 3b
Mdia desvio padro; n - nmero de animais; C - grupo controle; LI - grupo alimentado com dieta rica em cidos graxos insaturados; LS - grupo alimentado
com dieta rica em cidos graxos saturados; PI - peso corpreo inicial; PF - peso corpreo final; VE - peso do ventrculo esquerdo; VD - peso do ventrculo
direito; AS - rea seccional do msculo papilar; Lmx - comprimento muscular associado tenso mxima desenvolvida; MIA - mdia de ingesto alimentar.
Variveis com diferenas estatisticamente significantes so assinaladas por letras minsculas diferentes (p < 0,05).

Tabela 2 - Parmetros funcionais em situao basal

C (n = 8) LI (n = 8) LS (n = 8)
TD (g/mm2) 5,39 + 1,27 4,58 + 0,86 4,12 + 1,02
TR (g/mm ) 2
1,52 + 0,59 1,58 + 0,25 1,28 + 0,32
TPT (ms) 159 + 14 162 + 12 147 + 12
+dT/dt (g/mm2/s) 59 + 16 50 + 11 49 + 13
-dT/dt (g/mm2/s) 18 + 6 16 + 3 14 + 3
TR50 (ms) 218 + 33 213 + 23 198 + 21
km 19 + 3 19 + 2 19 + 3
-dL/dT (ML/s) 1,24 + 0,21 1,06 + 0,20 1,22 + 0,25
+dL/dT (ML/s) 2,02 + 0,38 1,78 + 0,58 2,22 + 0,66

Mdia desvio padro; situao basal = concentrao de clcio na soluo nutriente 1,25 mM; n - nmero de animais; C grupo controle; LI - grupo alimentado
com dieta rica em cidos graxos insaturados; LS - grupo alimentado com dieta rica em cidos graxos saturados; TD - tenso desenvolvida; TR - tenso de
repouso; TPT - tempo para atingir o pico da TD; +dT/dt - velocidade de variao da TD; -dT/dt - velocidade de variao do decrscimo da TD; TR50 - tempo
para TD decrescer 50% de seu valor mximo; km - constante de rigidez do msculo; -dL/dT - velocidade mxima de encurtamento; +dL/dT - velocidade
mxima de relaxamento; ML/s - comprimento muscular por segundo. No houve diferena estatisticamente significante entre os grupos (p < 0,05).

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Tabela 3 - Efeitos do aumento de clcio extracelular sobre parmetros funcionais

C (n = 8) LI (n = 8) LS (n = 8)
TD 21,75 + 19,17 32,88 + 11,56 31,73 + 44,87
TR -3,21 + 3,37b -6,40 + 4,62a -8,16 + 3,93a
TPT -12,57 + 5,71 -14,33 + 6,04 -10,76 + 4,40
+dT/dt 44,99 + 41,92 58,79 + 17,16 51,56 + 67,66
-dT/dt 55,26 + 24,91 63,80 + 24,35 64,97 + 30,82
TR50 -17,13 + 8,99 -15,98 + 13,21 -16,93 + 7,01
km -7,33 + 10,31 -5,26 + 9,96 -4,22 + 7,34
-dL/dT 45,29 + 28,38 57,69 + 15,21 42,32 + 57,22
+dL/dT 35,51 + 29,26 63,42 + 64,42 48,11 + 66,01

Mediana semi-amplitude dos valores expressos em porcentagem; n - nmero de animais; C - grupo controle; LI - grupo alimentado com dieta rica em
cidos graxos insaturados; LS - grupo alimentado com dieta rica em cidos graxos saturados; TD - tenso desenvolvida; TR - tenso de repouso; TPT - tempo
para atingir o pico da TD; +dT/dt - velocidade de variao da TD; -dT/dt - velocidade de variao do decrscimo da TD; TR50 - tempo para TD decrescer
50% de seu valor mximo; km - constante de rigidez do msculo; -dL/dT - velocidade mxima de encurtamento; +dL/dT - velocidade mxima de relaxamento.
Variveis com diferenas estatisticamente significantes so assinaladas por letras minsculas diferentes (p < 0,05).

demais parmetros no foram estatisticamente diferentes entre semelhante nos trs grupos (tab. 5).
os grupos. Quando submetidos ao estmulo com isoproterenol, As figuras 1 e 2 demonstram, respectivamente, a anlise
a constante de rigidez do miocrdio do grupo LS apresentou ultra-estrutural dos msculos papilares de animais submetidos
resposta menor que nos demais grupos. No houve diferena a dietas ricas em AGI e AGS. Em ambos os grupos foram
estatstica nas outras variveis analisadas (tab. 4). observadas discretas alteraes, como pequenos depsitos
A anlise bioqumica do miocrdio demonstrou que animais de gordura entre os micitos e leses focais na membrana
dos grupos LI e LS apresentaram aumento do hidroperxido de plasmtica e nas cristas mitocondriais. microscopia ptica
lipdio e diminuio dos antioxidantes totais e da superxido- no foram encontradas alteraes morfolgicas.
dismutase em relao ao controle. As substncias antioxidantes
totais foram menores no grupo LI em relao ao grupo LS.
A dieta AGI promoveu diminuio da atividade da catalase Discusso
e a AGS, diminuio de glutationa peroxidase em relao O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos de dietas
aos outros dois grupos. A protena solvel do miocrdio foi ricas em AGI e AGS sobre a funo mecnica do msculo

Tabela 4 - Efeitos do isoproterenol sobre parmetros funcionais

C (n = 8) LI (n = 8) LS (n = 8)
TD 12,67 + 10,38 15,82 + 7,54 15,46 + 18,14
TR 0,00 + 2,53 0,86 + 2,14 0,45 + 4,13
TPT -25,02 + 7,58 -22,43 + 5,49 -22,28 + 7,59
+dT/dt 46,53 + 28,01 55,41 + 21,28 46,45 + 33,82
-dT/dt 69,68 + 26,70 62,21 + 26,09 67,79 + 41,59
TR50 -34,82 + 8,04 -33,11 + 7,15 -33,45 + 11,59
km 9,08 + 7,34b 8,44 + 4,76b 3,53 + 2,20a
-dL/dT 38,32 + 21,15 43,57 + 20,91 40,47 + 26,95
+dL/dT 67,89 + 16,89 62,93 + 12,26 65,89 + 50,20

Mediana semi-amplitude dos valores expressos em porcentagem; n - nmero de animais; C - grupo controle; LI - grupo alimentado com dieta rica em
cidos graxos insaturados; LS - grupo alimentado com dieta rica em cidos graxos saturados; TD - tenso desenvolvida; TR - tenso de repouso; TPT - tempo
para atingir o pico da TD; +dT/dt - velocidade de variao da TD; -dT/dt - velocidade de variao do decrscimo da TD; TR50 - tempo para TD decrescer
50% de seu valor mximo; km - constante de rigidez do msculo; -dL/dT - velocidade mxima de encurtamento; +dL/dT - velocidade mxima de relaxamento.
Variveis com diferenas estatisticamente significantes so assinaladas por letras minsculas diferentes (p < 0,05).

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Dietas ricas em cidos graxos e alteraes miocrdicas em ratos

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Tabela 5 - Estresse oxidativo miocrdico

C (n = 5) LI (n = 5) LS (n = 5)
PS (g%) 21 + 3 24 + 1 24 + 1
HL (nmol/g de tecido) 158 + 5 a
176 + 5 b
187 + 14b
TAS (g%) 35 + 6c 15 + 2a 24 + 4b
SOD (U/mg de protena) 27 + 5 b
18 + 2 a
17 + 2a
GSH-Px (U/mg de tecido) 22 + 2b 22 + 1b 16 + 2a
CAT (kat.f) 9+1 b
7+1 a
9 + 1b

Mdia desvio padro; n = nmero de animais; C = grupo controle; LI = grupo alimentado com dieta rica em cidos graxos insaturados; LS = grupo
alimentado com dieta rica em cidos graxos saturados; PS = protena solvel; HL = hidroperxido de lipdio; TAS = substncias antioxidantes totais; SOD
= superxido-dismutase; GSH-Px = glutationa peroxidase; CAT = catalase. Variveis com diferenas estatisticamente significantes so assinaladas por letras
minsculas diferentes (p < 0,05).

Fig. 2 Msculo estriado cardaco. Grupo com cido graxo saturado. A, B e


Fig. 1 Msculo estriado cardaco. Grupo com cido graxo insaturado. A, B C: Miofibrilas (mi). Mitocndrias normais (M). Ncleo do micito em B (N).
e C: Miofibrilas (mi). Mitocndrias normais (M). Mitocndria com perda de Mitocndria com cristas irregulares em B (cabea de seta). Gotculas de gordura
cristas em A (seta). Gotculas de gordura em A e C (*). Figura de mielina em C em A e C (*). Sarcolema irregular em C (seta). A: 13.250 X; B e C: 17.000 X.
(cabea de seta). A: 4.600 X; B: 3.400 X; C: 2.650 X.

papilar isolado do ventrculo esquerdo, o estresse oxidativo e a modificar o desempenho miocrdico in vivo. A estimulao
morfologia do miocrdio. Preparaes com msculos isolados inotrpica permite a identificao de alteraes nas fases de
permitem medir a capacidade do miocrdio de desenvolver contrao e relaxamento, que podem no ser observadas em
tenso e encurtamento, independentemente das alteraes da condies basais e auxiliam no entendimento de mecanismos
pr-carga, da ps-carga e da freqncia cardaca, que podem envolvidos nas alteraes da funo cardaca.

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Este trabalho demonstrou que animais alimentados com dietas Embora trabalhos anteriores tenham associado estresse
AGI ou AGS tiveram o mesmo peso corpreo que os controles. oxidativo e disfuno cardaca6,20-22, neste trabalho no foram
A menor ingesto alimentar dos ratos com dietas hipercalricas observadas alteraes da funo mecnica em situao basal.
em relao aos controles igualou o aporte calrico entre os trs Os resultados observados, como variaes porcentuais isoladas
grupos, o que resultou em peso corporal final semelhante. Esses da TR com aumento da concentrao extracelular de clcio
dados esto de acordo com os resultados de experimentos e a constante de rigidez do msculo com isoproterenol no
anteriores que usaram dietas ricas em AGI ou AGS8-10,13-15. A grupo LS, permitem concluir que as dietas no provocaram
anlise das relaes entre os pesos dos ventrculos e o peso alteraes funcionais miocrdicas significantes. Os achados
corporal final dos ratos demonstrou que os animais submetidos deste estudo esto de acordo com os resultados de estudos
a dieta AGS apresentaram hipertrofia biventricular em relao que demonstraram que dietas AGI no modificam a funo
ao grupo controle e hipertrofia de ventrculo direito quando mecnica do miocrdio7,9,11,14,15, embora discordem de outros
comparados aos animais do grupo que recebeu dieta AGI. autores que relataram depresso da funo miocrdica com
No presente estudo, as alteraes morfolgicas do miocrdio dietas AGI12,13 e AGS4.
detectadas, como pequenos depsitos de gordura entre os
micitos e leses focais na membrana plasmtica e nas cristas
mitocondriais, foram apenas ultra-estruturais. As modificaes Concluses
observadas com dieta AGI so menos relevantes que as Em concluso, este experimento demonstra que dietas
relatadas em pesquisas anteriores, que demonstraram necrose7 e ricas em AGI ou AGS provocam estresse oxidativo e leses
desorganizao do aparelho contrtil do micito8. O mecanismo ultra-estruturais miocrdicas discretas, e no acarretam
das leses miocrdicas produzidas pelo aumento da ingesto de comprometimento da funo mecnica do miocrdio.
cidos graxos desconhecido7. Acredita-se que seja conseqncia
do estresse oxidativo induzido por esse tipo de dieta10,18,19. Os
lipdios ingeridos so incorporados em maior quantidade aos Agradecimentos
fosfolpides de membrana, tornando-os mais suscetveis Nossos sinceros agradecimentos a J. C. Georgette, M.
agresso dos radicais livres. Isso ocorre principalmente em relao Bruno e C. E. Knaggs, pela assistncia tcnica, e FAPESP
aos AGI, que possuem em sua estrutura molecular ligaes (02/02704-0), por acreditar em nosso trabalho.
instveis e, portanto, mais suscetveis ao estresse oxidativo10,18,19.
Essa hiptese encontra suporte neste experimento, no qual foram
observados estresse oxidativo e discretas leses ultra-estruturais Potencial Conflito de Interesses
provocados por dietas ricas em AGI e AGS. Declaro no haver conflitos de interesses pertinentes.

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