FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE FITOPATOGENOS

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE

HUNUCO FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
FILIAL
MONZN

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA

AGRONMICA

GUA DE PRCTICA
N 3
ENFERMEDAD, SINTOMA Y SIGNO, PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO
RECONOCER LOS SNTOMAS, SIGNOS Y AISLAR HONGOS.

ASIGNATURA : FITOPATOLOGA GENERAL

DOCENTE : Ing. M sc . Luisa Madolyn Alvarez Benaute

INTEGRANTES : ROMERO TRUJILLO, Rayna

: VALDIVIA OCHOA, Luceli

: GONSALO CASTILLO, Andi

: JAIMES TRUJILLO, Juan Daniel

FECHA DE LA PRCTICA : desde el inicio hasta el final

: 31/10/17

MONZN 2017

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 1

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

I. INTRODUCCION

Los medios de cultivo son soluciones estriles que tienen macro y

micronutrientes, sustancia que permite el crecimiento de rganos.

Un medio de cultivo es un sustrato o solucin de nutrientes que permite el

desarrollo de microrganismos. En las condiciones de laboratorio para
realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las
muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse
para dar colonia.

El origen diverso de una enfermedad, est por lo general representada

por sntomas, los cuales son manifestaciones morfolgicas, histolgicas
o fisiolgicas de una planta enferma. Algunos de estos sntomas son
externos y fciles de observar, mientras que otros, por estar en los
tejidos internos, son ms difciles de detectar. Aunque los sntomas
son una excelente gua para reconocer las enfermedades, tienen
inconvenientes a la hora de usarlos como diagnstico. Jugando un
papel importante los factores climticos al igual que las caractersticas
genticas de la planta y del mismo agente causal. Segn (Rivera,
2007) una forma de clasificar los sntomas se agrupa en tres
c a t e g o r a s , a) morfolgicos o externos, b) histolgicos o internos y c)
fisiolgicos

II. OBJETIVO

- Conocer su uso del medio de cultivo.

- Preparacin de medio de cultivo de PDA.
- aislar las enfermedades en medio de cultivo que se va a estudiar
posteriormente.
- Clasificar las enfermedades para llevar a cabo su desarrollo en un
medio de cultivo.

- Reconocer sus caractersticas de cada enfermedad con el equipo de

microscopio.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 2

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

III. MARCO TEORICO

TIPOS DE SNTOMAS EN
1) NECROTICOS: en estos casos se produce la muerte rpida de los
tejidos y segn el rgano afectado y la forma de presentarse el sntoma
tendremos:

a) MANCHAS: son lesiones frecuentes en hojas y tallos, tal es el

caso de la mancha de la hoja del eucaliptus (Mycosphaerella
nubilosa), viruela del apio (Septoria apiicola), viruela de la acelga
y de la remolacha (Cercospora beticola), mancha amarilla del trigo
(Drechslera tritici-repentis), viruela del tomate (Septoria lycopersici),
mancha en hojas de lamo (Septoria musiva).

b) PODREDUMBRES: es una desorganizacin de los tejidos y

posterior muerte de las clulas por despolimerizacin de los
componentes de la laminilla media y paredes celulares.

1) SECAS: se produce la muerte por deshidratacin de los tejidos.

Este tipo de podredumbre se da generalmente en rganos o tejidos con
bajo contenido de agua.

2) HUMEDAS: en los tejidos afectados se produce una considerable

acumulacin de agua. En estos casos generalmente hay infecciones
secundarias por parte de bacterias saprfitas que completan la
desintegracin y originan olores desagradables.

c) CANCROS: generalmente se producen sobre tejidos lignificados o

algo suculentos y configuran lesiones de tipo crnico, de lento progreso,
con tendencia a extenderse por ser heridas que no logran cicatrizar.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 3

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

d) MARCHITAMIENTOS: prdida de turgencia de los tejidos en toda

la planta que, como su nombre lo indica, se manifiesta por dficit en el
contenido de agua.

3) HIPOPLASICOS: En estos casos se observa una disminucin

del tamao del rgano (atrofia) o del individuo (enanismo).
4) METAPLASICOS: son cambios que se producen en el contenido
celular y generalmente se manifiestan por la aparicin de
coloraciones atpicas en la planta. Se produce la sntesis o aparicin
de sustancias que normalmente no existen o se hallan
enmascaradas.
SIGNOS
Son las estructuras del patgeno que suelen aparecer sobre la
superficie de las plantas. Algunos signos son visibles a simple vista,
mientras que otros se deben observar con lente de aumento. Entre
los signos ms frecuentes se pueden mencionar:
CULTIVO
Es el producto del crecimiento de organismos o grupos de organismos,
e s t a b l e c i d o s con fines experimentales o industriales.

LOS MICROORGANISMOS
Son los seres ms abundantes de la tierra, pueden vivir en
condiciones extremas de pH, temperatura y tensin de oxgeno,
colonizando una amplia diversidad de nichos ecolgicos. Entre los
requerimientos ms importantes para su desarrollo estn el carbono,
el oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono e hidrgeno. Muchas
bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de
crecimiento especficos en forma de suero, sangre y extracto de
levadura entre otros

CULTIVO PURO
Es la presencia de una sola especie de microrganismo libre de
todo contaminante, a esto que tambin se le denomina AXENICO.

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVOS POR SU

CONSISTENCIA:

1. Lquidos

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 4

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

(Eduardo y Teddy 1980: 35) indican que los medios lquidos se usan
en principalmente en el incremento de bacterias, en la determinacin
de sus propiedades fisiolgicas, para el incremento masivo de
bacterias y hongos con fines de experimentales (generalmente bajo
agitacin) y para estudios de crecimiento de microorganismos.
Industrialmente tienen uso en la preparacin de productos accesorios
al crecimiento los microorganismos, (cidos orgnicos, antibiticos,
etc.).

2.Slidos
(Eduardo y Teddy 1980: 35) tambin sostiene que el uso de principal
de medios solidos es para el aislamiento de hongos y bacterias, y para
su mantenimiento. Se prepara en frascos, placas Petri y tubos de
prueba.

Esquema de las principales sntomas de enfermedades en plantas

Marchites
Muerte descendente
Manchas necrticas
Pudriciones
Cancros
Pudricin del tallo
Morfolgicos o Necrticos
externos Gomosis
Enanismo
Crecimiento en roseta
Clorosis
Mosaico
Moteado
Hipoplsticos Tumores
Callos
Enrollamiento

Citlisis

Cavidades lisognicas

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 5

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

Hiperplasia
Histolgicos o Necrticos Hipertrofia
internos
Reduccin
Plsticos Incremento
Incremento

Descripcin de algunos de los sntomas ms comunes que ocasionan los

agentes Fito patgenos.
Signo Agente causal Nombre de Cultivo
la
Exudados Pseudomonas syringae enfermeda
Mancha angular Pepino
d
Exudados p.v. lacrymans
Pseudomonas Maya Tomate
solanacearum
Rizomorfos Rosellinia bunodes Turb Papa
Rizomorfos Corticium koleroga Mal de hilachas Caf
Estromas Moniliophthora roreri Monillia Cacao
Estromas Phyllachora sp. Mancha de ame
Esclerocios Sclerotinia sclerotiorum asfalto
Podredumbr Repollo
e blanca
Esclerocios Sclerotium rolfsii Pudricin de tallo Frijol
Micelio Capnodium sp. Fumagina Ctricos
Micelio Rhizoctonia solani Telaraa Frijol
Esporodoquios Cercospora coffeicola Chasparria Caf
Esporodoquios Phacocercospora Mancha foliar Man
arachidicola
Acrvulos Colletotrichum Antracnosis Ctricos
gloeosporoides
Muchos de los agentes causales de enfermedades infecciosas producen en
las partes lesionadas de la planta, estructuras caractersticas que permiten
reconocerlos, siendo algunas de ellas partes vegetativas y otras estructuras
reproductivas.

Fuente. Tomado de Rivera, (1991). Conceptos introductorios a la

fitopatologa.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 6

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

IV. METODOS Y MATERIALES

3.1 Mtodos
- El docente explico a cada grupo la importancia de la prctica.
- Los estudiantes en coordinacin con el docente seleccionaron
los reactivos y materiales a usar.
- Los alumnos realizaran la identificacin de los sntomas y signos

3.2 Materiales
- Cmara Fotogrficas
- Taper transparente
- Medios de cultivo
- Baln de gas
- Olla de presin
- Matraz
- Vaso precipitado
- Balanza electrnica
- Papel toalla
- Algodn
- Gaza
- Agua destilada
- Alcohol
- Olla
- Bolsas de plstico.
- Lupa
- Papel parafina
- Cinta masking
- Plumn indeleble
- Papa
- Agar-agar
- Hipoclorito de sodio
- Agua potable
- Cter
- Mechero
- Material vegetal enferma
- Frutos sanos y enfermos.
- Pinzas
- Fosforo
- detergente

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 7

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

V. PROCEDIMIENTO

1. limpieza general de todos los materiales y supervisar su estado de

funcionamiento de los equipos de laboratorio y seguidamente se
llev a esterilizar los materiales y para ello se utiliz detergentes,
leja, alcohol y para la esterilizacin se utiliz bao de mara y
autoclave.

2. PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO

1.proporciones que se utiliz para su preparacin
A. PDA (PAPA AGAR DEXTROSA)
PAPA: 200 gramos.
DEXTROSA: 10 gramos.
AGAR - AGAR: 15-18 gramos.
EXTRACTO DE CARNE: 5 gramos.
AGUA DESTILADA: 1000 ml/ 1lt.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 8

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

PASOS DE PREPARACION
1 pesado de los nutrientes de agar-agar, papa y dextrosa segn
proporcin

2 medicion de agua.

3. Lajado de papa para poder hervir y cocinarlo

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina 9

 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

4. Se puso el agua con la cantidad mencionada para poder hervirla

juntamente se incorpor la papa para cocinarlo y aplastarlo bien
hasta poder llegar en una sustancia como la gelatina y hacerlo
enfriar e incorporar los nutrientes para homogenizar y obtener el
medio
5. Aislamiento de una enfermedad en PDA y OMA

6. El aislamiento de las partes

enfermas de las hojas en una
placa Petri despus de haberlas
desesterilizado para observar la
presencia de signo en diferentes
cultivos con sntomas de
enfermedad.

7. observar los signos expresados en nuestra cmara hmeda aislar

correctamente en un tubo de ensay0.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina

10
 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

VI. CONCLUSION

Esta prctica quedo por concluido reconociendo las diferentes

tipos de sntomas y signos que hay en partes de la planta como
en la hoja tallo y raz

Tambin se realiz la preparacin de medios de cultivo con

dextrosa y PDA con los materiales dado por la ing. del curso
fitopatologa general.

Se realiz el aislamiento de los hongos en las placas PETRI y en

el matraz elemnmeyer para observar que tipo de hongos hay que
formas existen tanto en las plantas.

Los correctos procedimientos de elaboracin proporcionaron

resultados ptimos que permitieron el crecimiento de los Fito
patgenos y su posterior reconocimiento.

En algunos cultivos no se diferenci las caractersticas del

patgeno puesto que hubo contaminacin al momento de realizar
la inoculacin, presentando como resultado final un grupo de
patgenos en desarrollo alrededor del patgeno inoculado.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina

11
 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

VII. ANEXO

Figura 1: Procedo de tabulado de los medios de cultivo inoculado

Figura 2: Observacin e identificacin de patgenos.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina

12
 FITOPATOLOGIA GENERAL MEDIO DE CULTICO, INOCULACION Y RECONOCIMIENTO DE
FITOPATOGENOS

Figura 3: Instrumentos de desinfeccin y tincin de patgenos.

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN DE HUNUCO/UNHEVAL MONZN 2017-II Pgina

13