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Gua de Laboratorio N1 de Biologa

Extraccin de ADN

Nombre Zabdiel Fandez, Adolfo Garrido, Antonia Oses, Martina Valenzuela, Valentina
Vera
Curso:IVC Fecha: 09/05/2017

ADN en mi comida?
Como el ADN se encuentra en todas las clulas de los seres vivos, incluyendo por supuesto los
vegetales, intentaremos extraer esta importante molcula a partir de un pltano, fruta que puedes
comprar en cualquier lugar de Chile. El proceso de extraccin de ADN desde una clula es el
primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnologa.

Los cientficos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se
encuentran en las clulas, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).

Qu necesitamos?
Tubos de ensayo.
Juguera o procesador de alimentos.
Pltano u otra fruta o verdura (kiwi,
2 vasos precipitado 250 ml.
coliflor, cebolla)
Cucharita plstica. (5 ml)
Lavalozas.
Cuchara sopera. (10 ml)
Sal de mesa
Hisopos de algodn o palitos de cctel.
Agua destilada
Ablandador de carne.
Alcohol 95 fro (guardado en el
varias capas de gasa para hacer un
freezer)
filtro.
Pipeta Pasteur plstica
Bandas elsticas.
Varilla de vidrio pequea

Qu vamos a hacer?

EXTRACCIN DE ADN

Vamos a preparar una solucin de fruta


tratada con sal, agua destilada y champ
(o lavalozas). Trataremos con pltano. Si
t quieres puedes usar otras frutas o
verduras y as comparar el resultado final.
1: En una juguera, mezcla un pltano
pelado con una taza de agua destilada.
Muele slo por 15-20 segundos, hasta que
se produzca una mezcla homognea. No
muelas ms ya que puedes romper el
ADN. Si no tienes juguera muele bien el
pltano con un tenedor junto con el agua.

Referencia: Programa Explora - CONICYT


2: En una taza prepara una solucin con
una cucharadita de champ y dos pizcas
de sal de mesa. Puedes usar champ o
lavalozas de diferentes marcas para
comparar la eficiencia de la extraccin al
final del experimento. Agrega 20 ml (4
cucharaditas) de agua destilada o llena la
taza hasta 1/3. Disuelve la sal y el champ
mezclando lentamente con la cuchara sin
producir espuma.

3. Agrega a la solucin preparada en el


paso 2, tres cucharas soperas bien llenas
de la mezcla de pltano (u otra fruta) del
paso 1. Mezcla la solucin con la cuchara
por 5 a 10 minutos sin producir espuma.

Referencia: Programa Explora - CONICYT


4. Mientras t mezclas la solucin de
pltano, un compaero(a) colocar un
trozo doble de gasa sobre un vaso de
precipitado y lo sujetar con un par de
elsticos.

5. Filtra la mezcla vertindola en el gasa y


deja pasar la solucin durante varios
minutos hasta tener aproximadamente 5
ml de filtrado para la prueba (que cubra el
fondo del vaso).

6. Agrega un pequea cantidad de


ablandador de carne al filtrado y revuelvan
lentamente por 2
minutos.

7. Llena un tubo de ensayo con el alcohol


fro que tenas guardado en el freezer. Si
no tienes freezer, mantn el alcohol en
hielo. Para mejores resultados el alcohol
debe estar lo ms fro posible.

8. Llena la pipeta plstica con la solucin


filtrada de pltano.

9. Agrega el filtrado al alcohol. Djala


reposar por 2-3 minutos sin perturbarla. Es
importante no agitar el tubo de ensayo.

O
Anlisis del experimento

1. Cul es la funcin del detergente en la experiencia?


La membrana celular est formada por una bicapa de fosfolpidos. El detergente ayuda a romper
estas capas de lpidos y/o la envoltura nuclear. Y debido a su estructura similar a la de los lpidos
permite la unin de sus extremos hidroflicos con el extremo hidroflico de los fosfolpidos y sus
partes hidrofbicas con los extremos hidrofbicos del fosfolpido, estas al interactuar entre si
disuelven la membrana.

2. Cul es la funcin de la sal en la experiencia?


La sal permite neutralizar la carga negativa de las sustancias del ADN y tambin ayuda a
separar las histonas del ADN.

3. Cul es la funcin del alcohol en la experiencia?


El ADN es polar, pero al reaccionar con el alcohol a baja temperatura el material gentico se
convierte en apolar e insoluble en el alcohol, el cual al ser ms denso que el agua del extracto
se puede observar en la parte superior del tubo de ensayo.

4. Cul es la funcin del ablandador de carne en la experiencia?


La ablandador de carne tiene la funcin de romper los enlaces peptdicos de las protenas al estar
formado por enzimas proteolticas, como la proteasa, que desdoblan la protena en sus
aminocidos

5. Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sera el ADN. Es posible que
la molcula de ADN se visualice a simple vista? Por qu?
No, ya que se necesitara de un microscopio para visualizar el ADN y sus partes debido a su
diminuto tamao, y adems, cabe destacar que el modelo que hemos estudiado (Watson y
Crick), es solamente una representacin de cmo podra ser el ADN y no la imagen fiel de
cmo es realmente.

Referencia: Programa Explora - CONICYT


6. A partir de la respuesta anterior, qu creen que contiene el ADN obtenido en la experiencia?
Contiene una cadena de cidos nucleicos (monmeros) de ADN y ARN.

7. Se podra utilizar otros alimentos para extraer ADN? En tal caso, cules podran ser esos
alimentos?
S, ya que somos consumidores de otros organismos vivos (plantas, animales hongos y los
microorganismos que ellos contienen) y estos estn hechos de clulas las cuales tienen ADN.

8. Qu ocurre con el material gentico que se consume?


El ADN ingerido es degradado durante la digestin. Las nucleasas pancreticas del intestino son
enzimas que rompen el ADN y lo convierten en muchos nucletidos, que luego son reducidos a
unidades ms pequeas, los nuclesidos (base nitrogenada+azcar). Este ltimo proceso es
llevado a cabo por enzimas de la mucosa intestinal. Los nuclesidos finalmente son desdoblados
en molculas de azcar y bases nitrogenadas.

Muchas investigaciones indican que luego del pasaje de los alimentos por el duodeno, ms del
95% del ADN ya ha sido degradado y las bases absorbidas por los enterocitos que son las clulas
epiteliales encargadas de absorber las molculas alimenticias y transportarlas al interior del
cuerpo.

Referencia: Programa Explora - CONICYT


Referencia: Programa Explora - CONICYT

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