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GRENOBLE

23-24&25mar
s2016Mi
nat
ec

Organisation du Congrs 2016

Contact SFP
Gilles Dreyfuss gilles.dreyfuss@unilim.fr

Contact SFMM
Marie Elizabeth Bougnoux marie-elisabeth.bougnoux@aphp.fr

Comit dorganisation

Herv PELLOUX
Muriel CORNET
Marie-Pierre BRENIER-PINCHART
Danile MAUBON
Helene FRICKER-HIDALGO
Odile COGNET
Cline DARD
Ccile GARNAUD
Bernab CHUMPITAZI
Delphine ALDEBERT
Patricia PERROCHET
Sandra LACHENAL
Nathalie DESCHAMPS

Comit scientifique

Herv PELLOUX
Muriel CORNET
Jrme GOVIN
Carlo PETOSA
Mohamed-Ali HAKIMI
Marie-Pierre BRENIER-PINCHART
Danile MAUBON
Pascal BOIREAU
Laurence DELHAES
Jean Pierre GANGNEUX

Sponsoring

Le comit dorganisation remercie vivement tous les partenaires qui ont rendu possible
lorganisation matrielle de ce congrs conjoint SFP / SFMM 2016

ANOFEL

Congrs des Socits Franaises


de PARASITOLOGIE
&
de MYCOLOGIE Mdicale

23, 24 & 25 Mars 2016

Grenoble

Socit Franaise de Parasitologie (Prsident et Prsidente : P. Boireau, L. Delhaes)

Socit Franaise de Mycologie Mdicale (Prsident : J-P. Gangneux)

Programme SFP Mercredi 23 mars 2016

08h30 - 09h00 : Accueil des participants

09h00 - 09h15 : Discours daccueil Congrs SFP


P. Lvy - Prsident de la COMUE Grenoble Alpes
L. Delhaes - Prsidente de la SFP

09h15 - 10h45 : Session Marqueurs des protozooses


Modrateurs : L. Delhaes et MA. Hakimi
09h15 - 10h00 : Communications sur le thme
Galal L., Murat J.-B., Ajzenberg D., Dard M-L., Vignoles P., Brouat C., Granjon L., Sembne Pape M.,
Mercier A. : Phnomnes d'introgressions dans l'tude de la diversit gntique du toxoplasme entre la
France et l'Afrique de l'ouest : des influences humaines et environnementales explorer.
Diallo Mamadou A., Sausset A., Silvestre A. : Caractrisation de la kinase ROP17 d' Eimeria
tenella (protozoaire, Apicomplexe)
Bonnet J., Leger T., Garcia C., Bisser S., Courtioux B. : Identification des marqueurs de stade de la
maladie du sommeil par spectromtrie de masse

10h00 - 10h45 : Confrence : ME Grigg (NIH)


Khan A., Kennard A., Ramirez J-D., Gregg B., Barhoumi M., Zhang J., Guizani I., Lukes J., Sacks D.,
Nash T., Porcella S., Oler A., Shen K., Parkinson J-P., Grigg ME
Molecular detection and consequences of genetic exchange among the parasitic protozoa

10h45 - 11h15 : Pause-caf, Visite des posters et des stands

11h15 - 12h30 : Session Parasitologie vtrinaire


Modrateurs : M.L. Dard et P. Boireau
Baldacchino F., Jay-Robert P. : Ecologie des tabanidae en zones pastorales mditerranennes et
perspectives de lutte (prix de thse 2014)
Bentounsi B., Zouyed I., Cabaret J. : Le strongle Marshallagia marshalli des ovins : un inconnu qui
se porte bien en Algrie
Lehrter V., Patrelle C., Linard E., Jouet D., Fert H. : Etude de la diversit gntique des
Haemonchinae, parasites de ruminants en France
Zait H., Kouidri M., Larcher-Grenouillet F., Umhang G., Millon L., Hamrioui Boussad, Grenouillet F. :
Caractrisation molculaire d'Echinococcus granulosus sensu stricto et d'Echinococcus canadensis
chez l'homme et l'animal en Algrie
Bentounsi B., Meradi S. : Cestodes Anoplocephalidae et impact clinique chez les ovins aux
abattoirs de l'est algrien

12h30 - 13h00 : Visite des posters et des stands


13h00 - 14h00 : Djeuner
13h00 - 14h00 : Runion Bureau SFP
14h00 - 15h45 : Session Avances thrapeutiques contre les protozooses
Modrateurs : G. Dreyfus et P. Loiseau
14h00 - 14h45 : Confrence P. Loiseau (Chatenay-Malabry)
P. Loiseau Quinolenes anti-leishmaniennes dorigine naturelle : de la plante aux formulations

14h45 - 15h45 Communications sur le thme ou libres.


Mzabi A., Escotte-Binet S., Aubert D., Villena I. : Rsistance mdicamenteuse la sulfadiazine
chez Toxoplasma gondii : approche transcriptomique


Suyyagh-Albouz S., Al-Rifai R., Song Z., Livin Le Moal V., Bruxel F., Nicolas V., Loiseau P.,
Teixeira H., Meunier B., Tsapis N., Fattal E., Cojean S. : Atovaquone encapsulation into
nanoemulsions for better efficacy on mitochondria of resistant Plasmodium falciparum strain
Bukreyeva I., Angoulvant A., Dargere S., Bourhis J-H. , Gachot B., Gagnard J-C. , Vittecoq D.,
Wyplosz B. : Place de la fumagilline dans la microsporidiose de l'allogreff de moelle
Boudot C., Bonnet J., Pinault E., Morvan B., Courtioux B. : Identification des mtabolites du
Mgazol sur un modle animal

15h45 - 16h15 : Pause-caf, Visite des posters et des stands

16h15 - 17h15 : Session Epidmiologie


Modrateurs : G. Duvallet et I. Villena
Bastien M., Combes B., Umhang G., Gouley V., Guislain M-H., Quintaine T., Forin-Wiart M-A.,
Geers R., Villena I., Bou F., Poulle M-L. : Les terrains maraichers, lieux risque de contamination
par Echinococcus multilocularis et Toxoplasma gondii ?
Benseghier S., Harrat Z. : Facteurs climatiques et leur impact sur la leishmaniose cutane en
Algrie: le cas de Barika (Batna)
Simon J-A., Kurdzielewicz S., Jeanniot E., Dupuis E., Marnef F., Aubert D., Villena I., Poulle M-L. :
Influence de la slection des lieux de dfcation par les chats sur la contamination des sols par
Toxoplasma gondii dans les exploitations laitires
Crypto Anofel Rseau, Favennec L. : La cryptosporidiose en France en 2014- 2015: rsultats de la
surveillance du rseau national. Rseau CRYPTO-ANOFEL

17h15 - 17h45 : Session Poster en 180s (6 posters slectionns)


Modrateurs : F. Robert-Gangneux et L. Favennec
Dupont D., Conrad A., Le Marchal M., Ducastelle-Leprtre S., Balsat M., Labussire-Wallet H.,
Barraco F., Nicolini F-E., Thomas X., Gilis L., Kim Y, Chidiac C, Ferry T, Wallet F., Rabodonirina M.
: Syndrome d'activation macrophagique et Toxoplasmose en hmatologie
Houze S., Argy N., Hubert V., Marechal C., Thellier M., Correspondants CNR du Paludisme : Accs
palustres Plasmodium ovale curtisi et Plasmodium ovale wallikeri en France mtropolitaine
Bolais P., Vignoles P., Pereira P., Keim R., Amendoeira Maria R., Dard M-L. : Toxoplasma gondii
in cats of Rio de Janeiro: an eco-epidemiological survey with the use of filter-papers
Ben Abda I., Ben Abid M., Ben Sghaier I., Souissi O., Zallegua N., Aoun K., Bouratbine A. : La PCR
en temps rel dans le diagnostic de la leishmaniose cutane et l'identification des espces impliques
en Tunisie : Exprience du laboratoire de Parasitologie de l'Institut Pasteur de Tunis (IPT)
Dard C., Bailly S., Brenier-Pinchart M-P., Fricker-Hidalgo H., Clry-Barraud C., Tamisier R., Ppin
J-L., Pelloux H. : Toxoplasmose chronique et apne du sommeil : sont-elles lies?
Talarmin J-P., Plantin P., Yera H., Chrtien F., Haloun A., Staroz F., Siohan P., Hutin P. :
Infection dissmine Acanthamoeba chez une patiente transplante pulmonaire

17h45 - 18h15 : Deux communications des prix de thse 2015 de la SFP en Parasitologie et
Entomologie
Pagabeleguem S. - Prix de thse dUniversit en Entomologie
Dard C. - Prix de thse dexercice (prix Doby)

18h15 - 19h15 : Assemble Gnrale SFP

19h15 : cocktail Wine and cheese


Cocktail dnatoire avec dgustation de vins et de fromage rgionaux slectionns par un professionnel
anim par un sommelier anglophone : appellations locales et dcouverte.

Programme SFP matin Jeudi 24 mars 2016

09h00 - 10h30 : Session DPC Parasitologie Avances diagnostiques


Modrateurs : S. Houz et P. Marty

09h00 - 09h30 : Confrence E. Candolfi (Strasbourg)


E. Candolfi Quelles innovations dans le diagnostic biologique de la toxoplasmose et du
paludisme ?

09h30 - 09h45 : Retour sur les rsultats des QCM DPC


P. Flori (Saint-Etienne)

09h45 - 10h30
Doderer-Lang C., Poirier P., Atchade P., Lemoine J-P., Coquelin De Lisle M-L., Aboubacar A., Pfaff
A., Brunet J., Chabi N., Akpovi C., Anani L., Bigot A., Sanni A., Candolfi E. : Detection of cryptic
and submicroscopic Plasmodium vivax infections in a healthy population of western Africa
Le Govic Y., Guyot K., Certad G., Deschildre A., Novo R., Mary C., Sendid B., Viscogliosi E.,
Favennec L., Dei-Cas E., Fralle E., Dutoit E. : Evaluation de mthodes microscopiques et
molculaires pour le diagnostic et le suivi des cryptosporidioses chez les patients risque
Razakandrainibe R., Merat C., Kapel N., Sautour M., Guyot K., Gargala G., Dutoit E., Le Pape P.,
Dalle F., Favennec L., Crypto Anofel Members : Evaluation multicentrique d'un Elisa pour la
dtection d'antigne de Cryptosporidium spp. dans les selles humaines

10h30 - 11h00 : Pause-caf, Visite des posters et des stands

11h00 - 12h00 : Session Helminthoses


Modrateurs : M. Wallon et H. Yera
Karadjian G., Fercoq F., Pionnier N., Vallarino-Lhermitte N., Specht S., Carlin L., Martin C. :
Infection filarienne et inflammation pulmonaire dans le modle murin de filariose Litomosoides
sigmodontis (prix de thse 2014)
Caron Y., Cabaraux A., Renard E., Vanvinckenroye C., Marechal F., Deflorenne P., Losson B.: La
dermatite du nageur en Belgique: premiers cas, identification du parasite et de l'hte intermdiaire
concerns
Brunet K., Minoza A., Portet S., Beraud G., Rodier M-H., Cateau E. : Hmiparsie et hmiplgie
soudaines chez un homme de 55 ans
Dupouy-Camet J., Touabet-Azouzi N., Fralle E., Van Cauteren D., Yera H., Moneret-Vautrin A. :
Incidence de l'anisakidose en France. Enqute rtrospective 2010-2014

12h00 - 12h45 : Confrence A Palencia (Grenoble)


Palencia A., Bougdour A., Bernier-Pinchart M-P., Touquet B., Curt-Varesano R-L., Liu R., Lukarska
M., Gut J., Vollaire J., Josserand V., Wang EnDuo, Alley M.R.K., Li X., Freund Y., Rosenthal P.,
Cusack S., Hakimi M-A.
Using benzoxaborole compounds as a new approach to fight human pathogens, including
apicomplexan parasites

12h45 : Vote pour les prix du meilleur poster et de la meilleure communication orale

13h00 - 14h00 : Djeuner

Programme SFMM Aprs-midi Jeudi 24 mars 2016

14h - 14h15 : Discours daccueil Congrs SFMM


Jean-Pierre Gangneux - Prsident de la SFMM

14h15 - 16h00 : Session I


Thme : Global burden of fungal infections and new insights in therapeutic approaches
Sponsorise par le Laboratoire Gilead
Modrateurs : M. Cornet et J-P. Gangneux
14h15 - 15h00 : Confrence invite : D. Denning, (universit de Manchester, UK) Major unmet
needs in antifungal chemotherapy
15h00 - 16h00 : 4 Communications (10min+5) sur le thme de la confrence de D. Denning avec
diapositives en Anglais
15h00 : Menotti J., Alanio A., Sturny-Leclere A., Vitry S., Sauvage F., Dromer F., Barratt G.,
Bretagne S. : Comparaison de la toxicit de l'amphotricine B liposomale et dsoxycholate sur des
cellules pithliales alvolaires par mesures de l'impdance cellulaire en temps rel
15h15 : Herivaux A., Gastebois A., Bouchara J.P., Latge J.P. , Papon N. ; Les histidine kinases
chez les champignons pathognes : nouvelles cibles pour le dveloppement thrapeutique ?
15h30 : Nafis A., Azmani A., Oubaha B., Hassani L., Niedermeyer T., Barakate M. : Extraction et
purification des antifongiques non polyniques de la souche Streptomyces sp. Z26 isole des
cosystmes Marocains
15h45 : Rasamoelina T. , Rakotozandrindrainy N. , Raberahona M. , Rapelanoro Rabenja F.,
Rakoto Andrianarivelo M. , Andrianarison M. , Ranaivo I. , Ramarozatovo L. , Cornet M:
Chromoblastomycosis and sporotrichosis in Madagascar: epidemiology, molecular diagnostic and
perspectives

16h00 - 16h30 : Pause- caf, Visite des posters et des stands

16h30 - 17h40 : Session II


Thme Innovations diagnostiques - 6 Communications (10 min + 2min)
Modrateurs : L. Delhaes et F. Botterel
16h30 : Le Bihan D., Larcher-Grenouillet F., Reboux G., Richaud-Thiriez B. , Machouart M. ,
Grenouillet F. : Gnotypage d'Exophiala dermatitidis par polymorphisme des microsatellites et suivi
de la colonisation des patients atteints de mucoviscidose.
16h42 : Delhaes L., Thumerelle C., Wizla N., Turcq D., Botterel F. : Comparaison du microbiote
d'un patient atteint de mucoviscidose et de son environnement domestique par NGS
16h54 : Sabou M., Paz M., Kahn P., Denis J., Gschwend A., Degot T., Khouri T., Moulin B., Kessler R.,
Herbrecht R., Candolfi E., Letscher-Bru V.: Comment diagnostiquer des agents pathognes de classe 3
dans un laboratoire P2
17h06 : Valot S., Legouge C., Basmaciyan L., Sautour M., Favennec C., Lafon I., Millon L., Dalle F.,
Caillot D.: La prsence du signe du halo invers (SHI) au scanner thoracique est troitement associe
la prsence d'ADN circulant de mucorales dans le srum de patients prsentant des signes dinfections
fongiques invasives
17h18 : Sitterl E., Sertour N., Maufrais C., d'Enfert C., Bougnoux M.E.: Phenotypic and genomic
evolution in Candida albicans during long-term pathologic interaction in patients with chronic
mucocutaneous candidiasis.
17h30 : Morio F., Simon C., Basset D., Botterel F., Delaunay P., Guiguen C., Kauffmann-Lacroix C.,
Lachaud L., Pays J., Pihet M., Chabasse D. 1eANOFEL, un outil diconographie en Parasitologie et
Mycologie.


17h40 - 18h10 : Session jeunes chercheurs
Thme innovations diagnostiques, biotechnologiques ou informatiques ou techniques
d'imagerie pour le diagnostic ou la recherche . Prsentation en 180 sec
17h40 : Rocchi S., Valot B., Naegele A., Reboux G., Millon L.: Evaluation d'une approche
mtagnomique cible pour la caractrisation de la composition microbiologique de poussire de
logement
17h45 : Bailly S., Hamidfar-Roy R., Bouadma L., Azoulay E., Garrouste-Orgeas M., Soueine B.,
Schwebel C., Maubon D., Darmon M., Wolff M., Cornet M., Timsit J. : Etude de causalit sur
donnes observationnelles : application d'un modle structural marginal de Cox pour valuer
l'impact d'un traitement antifongique sur le pronostic des patients en ranimation
17h50 : Alanio A., Sturny-Leclre A., Bretagne S. : Utilisation de la digital PCR pour quantifier le
nombre de copies d'ADN ribosomal 28S d'Aspergillus fumigatus : impact pour le diagnostic
clinique.
17h55 : Garnaud C., Murat J. B., Maubon D.: Intrt de la plateforme BD Max pour le diagnostic au
fil de l'eau de la pneumocystose pulmonaire.
18h00 : Choteau L., Vasseur F., Lepretre F., Figeac M., Dubuquoy L. , Poulain D. , Colombel J.,
Sendid B., Jawhara S. : La Mannose-binding lectine et l'homostasie intestinale
18h05 : Faway E., Cambier L., Lambert De Rouvroit C., Mignon B., Poumay Y. : Dveloppement
d'un modle de dermatophytose sur piderme humain reconstruit

18h10 - 19h : Runion du CA de la SFMM

19h00 : Evnementiel Soire de Gala chez le PrGras


Le restaurant du PrGras est l'tape gastronomique incontournable pour dcouvrir Grenoble.
Situ au sommet de la Bastille, la terrasse du restaurant domine Grenoble et ses environs.
Rendez-vous au pied du tlphrique sur les quais de l'Isre ds 19h.

Programme SFMM Vendredi 25 mars 2016

08h30 - 09h00 : Accueil des participants

09h - 10h15 : Session III


Thme Rsistance aux antifongiques : du mcanisme molculaire la clinique
Modrateurs : D. Maubon et D. Sanglard
09h - 09h30 : Confrence invite
D. Sanglard (Universit de Lausanne, Suisse)
Rsistances aux antifongiques ou comment sonder les fonctions des cellules

09h30 - 10h15 : Communications sur le thme avec diapositives en anglais


09h30 : Healey K R., Zhao Y., Lockhart S.R., Kontoyiannis D.P., Sanglard D., Taj-Aldeen SJ.,
Alexander BD., Chowdhary A., Jimenez Ortigosa C., Shor E., Perlin DS.: Emergence of mutator
phenotype in Candida glabrata promotes multidrug resistance
09h45 : Bailly S., Maubon D., Fournier P., Pelloux H., Schwebel C., Chapuis C., Foroni L. Cornet
M., Timsit J.F: Impact des antifongiques sur la rsistance des principales espces de Candida en
ranimation - Evolution et tendances sur 10 ans
10h : Zhao Y., Garnaud C., Brenier-Pinchart M-P., Thibaut-Bertrand A., Saint-Raymond C.,
Camara B., Hamidfar R., Cognet O., Maubon D., Cornet M., Perlin DS. : Profile of Aspergillus
fumigatus and azole resistance from respiratory samples of French patients at risk for aspergillosis

10h15 - 10h45 : Pause-caf, Visite des posters et des stands avec un stand
Atelier CMI Etests & Clinical Breakpoints

10h45 - 12h00 : Symposium Astellas


Infections fongiques invasives : Quoi de neuf dans la prise en charge ?
Modrateurs : A. Thibaut-Bertrand et M. Cornet
Pr J. Chandenier : Etude MYCACAND (20min+5)
Pr J-P. Gangneux : Stratgie antifongique chez les patients allogreffs, rsultats de l'tude
AFHEM - (20min+5)
Pr H. Dupont : Dsescalade prcoce: O en sommes-nous ? (20min+5)

12h - 13h Session IV


Communications libres - 4 communications (10 min + 5)
Modrateurs : L. Millon et A. Fekkar
12h00 : Fekkar A., Castain L., Pons A., Meyer I., Palous M., Vezinet C., Mazier D., Langeron O.,
Hennequin C., Monsel A., Imbert S.: Argument clinique pour lexistence dun fitness cost li la
rsistance de Candida glabrata aux chinocandines
12h15 : Prigent G., Ait-Ammar N., Levesque E., Fekkar A., Costa J.M., El Anbassi S., Merle J. ,
Dannaoui E., Botterel F. : Emergence de Candida sp. rsistants aux chinocandines chez des
transplants hpatiques
12h30 : Dauchy C., Bautin N., Nseir S., Reboux G., Wintjens R. Le Rouzic O., Sendid B.,
Viscogliosi E., Gosset P., Dei-Cas E., Fry S., Frealle E.: Emergence de la rsistance aux azols
d'Aspergillus fumigatus chez les patients atteints de BPCO : circulation entre les rservoirs
cliniques et environnementaux.
12h45: Bretagne S., Desnos-Ollivier M., Renaudat C., Boukris-Sitbon K., Lortholary O., Dromer F.:
Striking differences in predisposing factors and outcome of uncommon yeast species-related
fungaemia based on a cohort study (2002-2014)

13h - 14 h : Djeuner

14h - 14h15 : Remise des Prix de la SFMM

14h15 - 14h45 : Assemble Gnrale de la SFMM

14h45 - 15h45 : Session V


Thme Innovations diagnostiques 5 Communications (10 min + 2).
Modrateurs : M-E. Bougnoux et E. Candolfi
14h45 : Denis J., Machouart M. Morio F., Sabou M., Kaufmann-Lacroix C. Contet-Audonneau N.,
Candolfi E., Letscher-Bru V. : Dveloppement et validation du diagnostic d'espce de Malassezia
par MALDI-TOF.
14h57: Nobrega De Almeida Jnior J., Grenfell R., Da Silva Jnior A. , Barbaro Del Negro G.,
Lopes Motta A., Botelho Munhoz R. , Rossi F., Juliano L., Benard G.: Detailed MALDI-TOF Mass
spectrometry analysis for the discrimination of Candida haemulonii complex species
15h09 : Cassagne C., Normand A., Djenad F., Gabarre A., Ranque S., Piarroux R. Dtection
directe in silico des infections mixtes levures par spectromtrie de masse de type MALDI-TOF
15h21: Dupont D., Saison J., Miailhes P., Wallon M., Persat F.: Atteinte oculaire chez un greffe
cardiaque lors d'une aspergillose dissmine : intrt des galactomannanes ?
15h33: Gangneux J-P., Belaz S., Rivier A., Le Cann P., Guillaso M., Donnio P., Blanchard O.,
Mercier F., Surget E., Baures E. Florentin A.: Analyse physicochimique et microbiologique de la
qualit de l'air intrieur dans les tablissements HOSPitaliers : l'tude QAIHOSP

15h45 - 16h45 : Session VI


Communications libres - 4 communications (10 min + 5)
Modrateurs : J-B. Murat et C. Hennequin
15h45: Alanio A., Gits-Muselli M., Calderon E., Di Cave D., Dupont D., Hamprecht A., Hauser P.,
Helweg-Larsen J., Kicia M., Lagrou K., Lengerova M., Matos O., Melchers W.: European study on
Pneumocystis jirovecii short tandem repeats genotyping reveals wide population diversity with
geographic specificities
16h00: Gits-Muselli M., Benderdouche M., Mingui A., Hamane S., Guigue N., Alanio A., Bretagne
S. Continuous increase of Trichophyton tonsurans at the expense of Microsporum audouinii var.
langeronii as a cause of tinea capitis in the urban area of Paris: a five-year long study
16h15: Durault A., Tcherakian C., Poiree S., Catherinot E., Bougnoux M.E., Coignard H., Givel C.,
Jouvion G., Garcia Hermoso D., Picard C., Chansdesris M., Lortholary O., Lanternier F.: Mold
infections in STAT 3 deficient patients: a nationwide study in France
16h30 : Senghor Y., Guitard J., Hennequin C. : Y-a-t-il un intrt doser l'antigne cryptococcique
dans les fluides biologiques autres que le LCR et le srum ?

16h45 : Discours de clture

17h00 : Fin du Congrs

Socit Franaise de PARASITOLOGIE

Communications Orales

23 et 24 mars (matin) 2016



Quelles innovations dans le diagnostic biologique de la toxoplasmose et du
paludisme ? (Confrencier Invit)
CANDOLFI E. 1,2

1 institut de parasitologie et de pathologie tropicale de l'universit de Strasbourg 2 Laboratoire de


parasitologie et de mycologie mdicale des Hpitaux Universitaires de Strasbourg

*Auteur correspondant : candolfi@unistra.fr

Les innovations diagnostiques pour ces pathognes portent tant sur le diagnostic srologique que
parasitologique mais les objectifs en sont diffrents. Pour la toxoplasme, lobjectif est de rduire les cots
des examens biologiques au regard de la baisse de la prvalence, de standardiser les outils en biologie
molculaire au regard de laccrditation, damliorer la datation de linfection et enfin daffiner le diagnostic
de la toxoplasmose oculaire et congnitale en dcouvrant de nouveaux biomarqueurs de ces formes
cliniques. Pour le paludisme il sagira damliorer la dtectabilit du diagnostic parasitologique, den
garantir sa fiabilit, de dployer sur le terrain des outils portatifs et de prciser la prvalence des espces
plasmodiales cryptiques, dans un seul et unique objectif, contribuer lradication du paludisme.
Molecular Detection and Consequences of Genetic Exchange among the
Parasitic Protozoa (Confrencier Invit)
KHAN A. 1 , KENNARD A. 1 , RAMIREZ J. 1 , GREGG B. 1 , BARHOUMI M. 1,2 , ZHANG J. 3 , GUIZANI I. 2 ,
LUKES J. 4 , SACKS D. 5 , NASH T. 6 , PORCELLA S. 7 , OLER A. 8 , SHEN K. 8 , PARKINSON J. 3 ,
GRIGG M. 1 *

1 Molecular Parasitology Section, LPD, NIAID, NIH, USA


2 Pasteur Institute at Tunis, Tunisia
3 University of Toronto, Canada
4 University of South Bohemia, Czech Republic
5 Intracellular Parasite Section, LPD, NIAID, NIH, USA
6 Clinical Parasitology Section, LPD, NIAID, NIH, USA
7 RML Genomics Unit, RTS, NIAID, NIH, USA
8 OCICB, NIAID, NIH, USA

*Auteur correspondant : griggm@niaid.nih.gov

How virulent strains emerge among protozoan populations is an important paradigm of eukaryotic
pathogenesis. Using population genetic and WGS phylogenomic methods, our work has identified extant
genetic exchange among circulating populations of natural isolates of Giardia, Leishmania and
Toxoplasma. For both Giardia and Leishmania, we developed a suite of highly sensitive MLST markers to
assess global genetic diversity among 115 Giardia positive human fecal samples and 280 old world
Leishmania isolates. We identified high levels of allelic diversity at each locus, and the inheritance pattern
of the allelic types across the genetic markers indicated extensive intra- and inter-specific recombination,
supporting high levels of genetic exchange among the natural isolates examined. To understand the
biological consequences of such genetic admixture, we investigated the genetic factors that mediate acute
virulence during murine Toxoplasma infection. Employing forward, reverse genetic, and genome-wide
association (GWAS) techniques, we show that Toxoplasma acute virulence is highly dependent on the
expression of a restricted set of polymorphic secreted pathogenesis determinants (SPDs) that are inherited
in discrete haploblocks by genetic exchange. Specifically, performing GWAS on the WGS data from 56 T.
gondii strains identified four genomic regions (Chromosome VIIa, VIIb, VIII and IX) that encode novel SPDs
associated with murine virulence. SPDs discharged from parasite secretory organelles are known to target
host immune signaling pathways and facilitate infection competency. Our data has identified discrete
genomic regions within Toxoplasma population genetics that alter parasite virulence, subvert host immune
responses and maximize parasite transmissibility.
Quinolines antileishmaniennes d'origine naturelle : de la plante aux
formulations (Confrencier Invit)
LOISEAU P. 1

1 Universit Paris Sud

*Auteur correspondant : philippe.loiseau@u-psud.fr

Les tradipraticiens boliviens utilisent l'corce de Galipea longiflora (Rutaceae) en dcoction ou en


application topique pour le traitement des lsions de leishmaniose cutane. Des tudes
ethnopharmacologiques menes en Bolivie ont conduit la purification de quinolines substitues en
position 2, partir d'corce de Galipea longiflora (Rutaceae). Parmi les molcules isoles, la 2-n-propyl-
quinoline, est un compos majoritaire, considr comme "lead" qui a montr une activit in vivo sur
diffrents modles de leishmaniose exprimentale, dont la leishmaniose viscrale. Des tudes de relations
structure-activit, de pharmacocintique et d'approches du mcanisme d'action ont conduit des rsultats
encourageants au point que cette srie est entre dans le pipeline de DNDi. La dure de traitement tant
de 10 jours afin d'observer le maximum d'activit antileishmanienne sur modle animal, des stratgies
d'amlioration de la biodisponibilit de ces composs ont d tre envisages.

Parmi plusieurs formulations mises au point pour la voie orale ou intraveineuse, la formulation liposomale
de 2-n-propyl-quinoline a permis d'obtenir une activit 3 mg/kg/jour x 5 jours conscutifs par voie
intraveineuse sur le modle Leishmania donovani/souris Balb/c.

Par ailleurs, des drivs de 2-n-propyl-quinoline s'avrent prometteurs. Ces quinolines de nouvelle
gnration font leur chemin comme de possibles candidats-mdicaments dans le traitement des
leishmanioses.
Using benzoxaborole compounds as a new approach to fight human pathogens,
including apicomplexan parasites (Confrencier Invit)
PALENCIA A. 1 * , BOUGDOUR A. 1 , BERNIER-PINCHART M. 1 , TOUQUET B. 1 , CURT-VARESANO R.
1
, LIU R. 2 , LUKARSKA M. 3 , GUT J. 4 , VOLLAIRE J. 1 , JOSSERAND V. 1 , WANG E. 2 , ALLEY M. 5 , LI
X. 5 , FREUND Y. 5 , ROSENTHAL P. 4 , CUSACK S. 3 , HAKIMI M. 1

1 Institut Albert Bonniot, INSERM U1209, Grenoble, France


2 Institute of Biochemistry and Cell Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai, People's Republic of
China
3 European Molecular Biology Laboratory, Grenoble Outstation, France
4 Department of Medicine, University of California, San Francisco, CA, USA
5 Anacor Pharmaceuticals, Inc., Palo Alto, CA , USA

*Auteur correspondant : andres.palencia@ujf-grenoble.fr

The apicomplexan parasite T. gondii is a common cause of serious congenital infections, resulting in both
severe foetal disease and subsequent illnesses in children and adults. Current drugs for treating
toxoplasmosis have significant limitations such as the appearance of side-effects, low-to-medium efficacy
and lengthy treatment times. Importantly, there is no drug with efficacy against the slow-growing stages of
the parasite (bradyzoites) that forms cysts in deep-organs like the brain. In collaboration with EMBL-
Grenoble, UCSF and Anacor Pharmaceuticals we are investigating benzoxaboroles, a family of boron-
containing compounds, as a possible treatment for toxoplasmosis, as well as for other apicomplexan
parasitic diseases such as cryptosporidiosis and malaria (caused by Cryptosporidium and Plasmodium
respectively), where the need for new drugs is also pressing. Benzoxaboroles showed recently therapeutic
interest with the discovery of an antifungal that target leucyl-tRNA synthetase (LeuRS)(Rock et al., 2007),
which is now in the clinic (Elewski et al., 2015). Other benzoxaboroles targeting LeuRS are in development
as novel antibiotics for the treatment of infections by multi-drug resistance bacteria (Hernandez et al., 2013;
Palencia, submitted). The compounds act by a novel inhibition mechanism that involves formation of a
covalent adduct with the 3 terminal adenosine (Ade76) of tRNAleu, which traps the tRNA in the editing site
of LeuRS and thus blocks protein synthesis (Fig 1).

Here, two benzoxaboroles with promising activity against Toxoplasma will be presented. The first (AN6426)
was initially developed as an inhibitor of M. tuberculosis LeuRS, which suggests that LeuRS could be also
a valid target in Toxoplasma. The second compound (AN3661), despite its similarity to previous
benzoxaborole LeuRS inhibitors, unexpectedly inhibits a novel and essential target in Toxoplasma.
Resistant mutants of both T. gondii and P. falciparum were isolated and the single nucleotide variations
mapped to the same gene. Importantly, AN3661 not only had potent activity against Toxoplasma in human
cells but also excellent in vivo efficacy to protect mice from acute toxoplasmosis (comparable to
sulfadiazine, a clinically relevant drug), and without
toxic effects. The implications of these results for the
development of novel drugs for toxoplasmosis will be
discussed.

Fig1: Chemical structure of a benzoxaborole scaffold. Oxoborole-tRNA-trapping


inhibition mechanism (OBORT) via targeting of LeuRSs editing site. AN2690 is
an effective antifungal that relies on the OBORT mechanism via selective
targeting of LeuRS in the pathogen. AN2690 is now FDA approved for the
treatment of onychomycosis. AN2690 is used as 5% topical solution for the
treatment of mild-to-moderate toe-nail infections under the name of Kerydin
(www.anacor.com/an2690.php).
cologie des Tabanidae en zones pastorales mditerranennes et perspectives
de lutte

BALDACCHINO F. 1 * , JAY-ROBERT P. 2

1 Department of Biodiversity and Molecular Ecology, Research and Innovation Centre, Fondazione
Edmund Mach, San Michele all'Adige, Italy
2 CEFE UMR 5175, CNRS - Universit de Montpellier, Universit Paul-Valry Montpellier 3 - EPHE,
CNRS, Montpellier, France

*Auteur correspondant : fredericbaldacchino@yahoo.fr

Les zones pastorales mditerranennes sont favorables la diversit et labondance des Tabanidae. Or,
la rmergence de certaines maladies animales en Europe (e.g. besnoitiose bovine) a mis en avant leur
rle de vecteur mcanique. Cependant, la richesse biologique et la vulnrabilit des milieux pastoraux
impliquent de rduire lusage des insecticides contre les ectoparasites. Nous avons donc cherch mieux
connatre lactivit des taons dans les estives et rflchir des mthodes de contrle pratiques, efficaces
et slectives. Les piges attractifs ou les rpulsifs utilisables dans une stratgie push-pull impliquant de
bien connatre lolfaction des espces cibles, nous nous sommes intresss la physiologie olfactive des
taons et aux composes chimiques qui modulent les interactions avec leurs htes.

Les travaux sur lcologie des taons dans les Pyrnes ont montr que lexposition, laltitude et la structure
paysagre influenaient leur distribution spatio-temporelle, et que les conditions climatiques influenaient
lactivit de piqre des femelles. De plus, le caractre trophique opportuniste des femelles a t confirm et
le cerf est apparu comme un hte de choix. Les rponses physiologiques et comportementales de Tabanus
bromius et dAtylotus quadrifarius aux odeurs durines et de leurs constituants ont rvl des diffrences de
sensibilit olfactive entre ces deux espces, la forte attractivit de lurine de cheval sexpliquant
probablement par la prsence de composs volatiles qui agiraient en synergie. Pour conclure, nous
proposons pour les troupeaux en estives des mesures de protection contre les taons et des perspectives
de recherch pour ce groupe.

Philipomyia aprica Meigen 1820


Les terrains maraichers, lieux risque de contamination par Echinococcus
multilocularis et Toxoplasma gondii ?

BASTIEN M. 1,2,3 * , COMBES B. 3 , UMHANG G. 4 , GOULEY V. 2 , GUISLAIN M. 2 , QUINTAINE T. 1,2 ,


FORIN-WIART M. 1,2 , GEERS R. 5 , VILLENA I. 1,5 , BOUE F. 4 , POULLE M. 1,2

1 URCA, EA 3800 PROTAL, Reims, France


2 URCA, CERFE, Boult-aux-bois, France
3 ELIZ, domaine de Pixrcourt, Malzville, France
4 ANSES, SEpiAS, domaine de Pixrcourt, Malzville, France
5 Laboratoire de Parasitologie, Mycologie, CHU de Reims, Reims, France

*Auteur correspondant : bastien.matth@gmail.com

Echinococcus multilocularis (Em) est un parasite intestinal des Canids (Renard roux notamment)
responsable dune zoonose rare mais fortement invalidante : lchinococcose alvolaire. Toxoplasma
gondii (T. gondii) est, lui, un parasite des Flids (Chat domestique notamment) responsable de la
toxoplasmose, zoonose qui peut tre grave chez les personnes immunodprimes, les ftus en cas de
transmission congnitale. Les ufs dEm et les oocystes de T. gondii sont dissmins dans
lenvironnement avec les fces des carnivores parasits. La contamination des htes intermdiaires (HIs),
comme celle des humains, peut survenir suite la consommation crue de vgtaux en contact avec un sol
contamin. Le risque de contamination des HIs dpend donc de la distribution spatiale des ufs dEm et
des oocystes de T. gondii dans lenvironnement, qui elle-mme dpend de celle des fces des carnivores
parasits. Or, les fces de chats et de renards ont gnralement une distribution spatiale agrgative.

Nous avons test lhypothse selon laquelle les terrains maraichers sont des lieux dagrgation de fces de
chats et de renards. En effet, les fces de chats sont souvent concentres dans les sols meubles, comme
le sont ceux des terrains maraichers, tandis que celles de renards le sont proximit dlments du
paysage attractifs pour ce carnivore (vergers, poulaillers), qui bordent souvent les terrains maraichers.
Notre tude a t mene dans le nord-est de la France, dans les Ardennes, en zone de haute endmie
pour Em. Nous avons compar la densit de fces de chats et de renards dans et hors terrains maraichers
partir de prospections systmatiques conduites de 2005 2015 dans diffrents types de milieux (fort,
bocages, villages) et dans 45 potagers. Nous avons collect 306 fces de renards et 402 fces de chats.
La densit moyenne de fces de renards a t 3 10 fois plus leve dans les potagers que dans les
autres milieux et celle des fces de chats y a t 7 fois plus leve. Le risque de contamination des HIs par
Em ou T. gondii suite la consommation crue de vgtaux semble donc plus important proximit qu
distance des terrains maraichers.

Pour tester cette seconde hypothse, nous avons ralis des captures de rongeurs en avril-mai 2015
proximit et distance de 45 potagers pour comparer le taux dinfection des HI par T. gondii et Em. Au
total, 107 rongeurs ont t capturs (42 Arvicola terrestris, 25 Microtus sp, 40 Apodemus sp.). Pour
chacun, un chantillon sanguin a t test par la mthode dagglutination (test ADHS) pour dtecter la
prsence danticorps dirigs contre T. gondii. De plus, si le foie prsentait des lsions, un prlvement a
t effectu pour extraction dADN et dtection de la prsence dEm par PCR. Six rongeurs ont t
dtects positifs pour au moins lun des deux parasites, dont 4 capturs moins de 100 mtres dun
potager. Leffectif trop rduit de cet chantillon ne permet pas de mettre en vidence un effet significatif des
terrains maraichers sur le risque de contamination. Cependant, la concentration de fces de renards et de
chats dans ce type de terrain incite promouvoir, dans les zones dendmie dEm, des mesures
prventives de la contamination des sols dans lesquels sont cultivs des fruits et lgumes destins tre
consomms crus.
Facteurs climatiques et leur impact sur la leishmaniose cutane en Algrie: le
cas de Barika (Batna)
BENSEGHIER S. 1 , HARRAT Z. 2 *

1 Parasitologue, Matre de confrences hospitalo-universitaire, service laboratoire central, hpital militaire


universitaire Staoueli, Alger, Algerie
2 Parasitologue, chef de service dcologie parasitaire et gntique des populations, Institut pasteur
d'Alger, Algrie

*Auteur correspondant : sofianebenseghier@hotmail.com

I/ INTRODUCTION
En Algrie la leishmaniose cutane longtemps confine au foyer historique de Biskra des hauts plateaux,
elle connat depuis une vingtaine d'anne une extension en tche d'huile vers le nord partir des zones
d'endmie steppiques et semi-arides.
Les donnes tablies par l'Institut national de sant publique indiquent une augmentation de l'incidence
globale de la leishmaniose cutane zoonotique dans plusieurs rgions du pays, avec 171943 cas dclars
entre 1997 et 2014. La maladie avait connu un pic en 2005, puis diminuer pour arriver 40,17 cas pour
100000 habitants en 2012. Plusieurs facteurs pourraient tre responsables de la situation actuelle.
En effet la leishmaniose cutane zoonotique est particulirement sensible aux facteurs climatiques ayant
un impact certain sur le rservoir et le vecteur.

II/ MATERIEL ET METHODE

Dans la wilaya de Batna 39980 leishmaniose cutane ont t enregistrs de 1982 2012.
L'tude pidmiologique montre que la maladie est urbaine et priurbaine, qu'elle affecte les 2 sexes,
toutes les tranches d'ge tmoignent de la virginit immunitaire de la population. L'tude clinique des cas
de leishmaniose cutane montre qu'il s'agit de formes humides (81%) multiples (>10 lsions, 10,5%),
ulcrocrouteuses, nodulaires, verruqueuses, rysiplatodes, dissmines, rcidivantes.

III/ RESULTATS

Nous rapportons une corrlation brute de l'impact des facteurs climatiques (temprature, pluviomtrie,
vents) sur l'volution annuelle de la maladie. De plus les tempratures moyennes qui prcdent l'incidence,
contribuent crer des conditions particulires favorables au dveloppement du vecteur.

IV/ CONCLUSION

Il apparat ainsi, que les facteurs climatiques jouent un rle prpondrant dans l'mergence et l'extension
de la leishmaniose cutane vers d'autres rgions du pays.

MOTS CLES : leishmaniose cutane, extension,


facteurs climatiques, Barika, Algrie.

lsions ulcrocrouteuses du membre infrieur


Cestodes Anoplocephalidae et impact clinique chez les ovins aux abattoirs de
lest algrien

BENTOUNSI B. 1 * , MERADI S. 2

1 Institut des Sciences Vtrinaires, Universit des frres Mentouri, Constantine1.


2 Institut des Sciences Vtrinaires et Agronomiques, Universit Hadj Lakhdar, Batna1.

*Auteur correspondant : bbentounsi@umc.edu.dz

En situation de chimiorsistance aux anthelminthiques et afin de maintenir des populations parasitaires


sensibles, il est admis de contrler les infestations par les strongles gastro-intestinaux par des traitements
selectifs cibls aux seuls animaux malades. Ceci est bas sur le fait que dans un troupeau, les populations
de parasites digestifs chez les petits ruminants sont hautement agrges et disperses. Les animaux
traiter sont selectionns par des marqueurs de performances et surtout sur les scores cliniques indicateurs
physiopathologiques de lanmie (FAMACHA) ou de la diarrhe (Dag Score, DISCO...).

Aucune tude na valu limpact clinique des cestodes Anoplocephalidae pouvant par leur prsence
concomitante biaiser le tri des animaux atteints de strongyloses.

Cette valuation est notre objectif principal. Aussi la description de la faune locale des cestodes des ovins
est par ailleurs ralise dans 3 abattoirs de lest algrien situs diffrents tages bioclimatiques, second
objectif de ce travail.

La prvalence des cestodes Anoplocephalidae des ovins observe la priode automne hiver a t :
labattoir de Mila (tage bioclimatique sub humide) de 12,1%, de 13,3% labattoir de Constantine (semi-
aride) et de 13,2% El Oued (aride). Elle a t de 22,1% la priode t automne tudie seulement
Mila.

Moniezia expansa, Moniezia benedini, Avitellina centripunctata et Stilesia globipunctata ont t


rpertories dans les 4 enqutes. Thysaniezia ovilla a t retrouve en plus seulement Constantine.

Une diversit faible par dominance de A. centripunctata et M. expansa a t toujours retrouve (indice de
diversit de Shannon-Weaver a t dans tous les cas infrieur 2).

Seule Moniezia expansa a t correle (R2 de Spermann) significativement avec le reste des parasites
except avec Stilesia globipunctata.

Une diffrence significative lie au sexe a t note pour linfestation totale aussi une diffrence lie lge
a concern linfestation par A. centripunctata.

La dynamique de ces populations parasitaires a t stable durant les mois tudis sans diffrence
distinctive.

Concernant limpact clinique, par le test de (t) et lANOVA il ny a pas eu de diffrences significatives des
scores du FAMACHA et DISCO entre la population parasite et non parasite ou de diffrences lies au
poids des vers ou au nombre des parasites.

Par contre, de bonnes corrlations bivaries sont observes entre le FAMACHA et linfestation
(coefficient de Pearson : 0,26 (P=0.08)) et entre le nombre de vers et le DISCO (Coefficient de Pearson :
0,27 (P=0.06)), suggrant un impact clinique qui reste confirmer par dautres tudes.
Le strongle Marshallagia marshalli des ovins : un inconnu qui se porte bien en
Algrie
BENTOUNSI B. 1, * , ZOUYED I. 1, , CABARET J. 2,

1 Institut des Sciences Vtrinaires, Universit des frres Mentouri, Constantine1 (Algrie).
2 INRA, UMR 1282 et Universit F. Rabelais, 3780 Nouzilly (France).

*Auteur correspondant : bbentounsi@umc.edu.dz

Marshallagia marshalli est un strongle des zones steppiques (hivers frais froids et ts chauds et secs). Il
est prsent en Espagne, trs partiellement en France, au Maroc, en Algrie, en Syrie, sans que lon sache
sil est prsent dans dautres rgions du pourtour mditerranen qui prsentent des climats steppiques.
Nous ne savons pas galement quelle est la distribution saisonnire de linfestation. La diagnose du
parasite sur les ufs mis dans les matires fcales est assez aise (ufs plus grande taille que les
autres strongles). Les larves infestantes que lon rencontre dans les coprocultures nont pas t dcrites.
Cela permet dassoir le diagnostic dans tous les cas de figure et de prciser la reprsentation de cette
espce sur le terrain. Notre objectif est dassurer son diagnostic, de prciser la prvalence saisonnire de
linfestation, et de prsenter des cas dventuelle rsistance.

Lidentification de 77 larves au stade infestant (L3) de Marshallagia marshalli a t ralise en mesurant 5


paramtres diffrents : la longueur de la portion distale (port dist), la longueur anus-queue (anus-qu), la
longueur de lsophage (oeso), la distance entre le pore excrteur et la cavit buccale (por-cb) et la
longueur totale de la larve (long tot). Les rsultats font ressortir respectivement les intervalles suivants :
port dist = 15-27m, anus-qu = 51-71 m, oeso = 147-174 m, por-cb =: 98-120 m et long tot=600-690
m, ce qui permet de la distinguer de deux genres trs prsents chez la majorit des ovins : Teladorsagia,
par une plus petite taille et sans l'aspect carr de lextrmit antrieure; Trichostrongylus: par la bouche
plate, une portion distale encore plus courte et la queue de la larve ronde. Les cls de diagnose des larves
doivent tre revues dans les zones o M. marshalli est prsent.

La prvalence estime sur des autopsies dans 12 abattoirs est de 87 %, ce qui est important. Les taux
moyens de linfestation sont de 57% dans les tages arides et de 48% en semi -aride. La distribution de ce
parasite est relie de faibles pluies, linverse de ce qui tait not pour les autres strongles. Sa prsence
est particulirement forte en novembre-d2cembre dans notre tude. Une tendance similaire a t note au
Maroc, en Espagne et en Ouzbkistan. Cette saisonnalit correspond aux besoins climatiques de
Marshallagia marshalli : une relative scheresse avec un climat froid. Les donnes sur sa rsistance aux
anthelminthiques sont inexistantes et nous vrifions lefficacit des diverses molcules. Lensemble de ces
informations permettra de proposer des solutions pour adapter les traitements ce strongle emblmatique
des rgions steppiques.
Identification des marqueurs de stade de la maladie du sommeil par
spectromtrie de masse
BONNET J. 1,2 * , LEGER T. 3 , GARCIA C. 3 , BISSER S. 4 , COURTIOUX B. 1,2

1 INSERM, U1094, Neuropidmiologie Tropicale, F-87000 Limoges France


2 Univ. Limoges, UMR_S 1094, Neuropidmiologie Tropicale, Institut d'Epidmiologie Neurologique et de
Neurologie Tropicale, CNRS FR 3503 GEIST, F-87000 Limoges, France
3 Plateforme Protomique/Spectromtrie de masse de l'Institut Jacques-Monod UMR7592, Btiment
Buffon Aile B, 6e tage 15 rue Hlne Brion , 75205 Paris Cedex 13, France
4 Institut Pasteur de la Guyane, Cayenne Cedex, France

*Auteur correspondant : julien.bonnet.tlse@gmail.com

La maladie du sommeil ou Trypanosomose Humaine Africaine (THA) est une infection parasitaire due un
protozoaire flagell du genre Trypanosoma brucei (T. b.), T.b. gambiense en Afrique de l'Ouest et Centrale
et T.b. rhodesiense en Afrique de l'Est. Selon lOMS, 70 millions de personnes prsentent un risque lev
dinfection THA. Parmi eux, il est estim que 57 millions de personnes prsentent un risque de contracter
la THA T.b. gambiense. Cette infection volue classiquement en deux stades : le stade hmo-
lymphatique (Stade 1) qui correspond la multiplication des parasites dans la lymphe et le sang et le stade
neurologique (Stade 2) qui correspond au passage du parasite au travers de la barrire hmato-mninge.
Si le patient n'est pas pris en charge correctement, la mort est inluctable. Le traitement de cette maladie
est stade dpendant et le diagnostic de stade de la pathologie est donc indispensable la prise en charge
du patient. Actuellement, ce diagnostic de stade est bas sur la cytorachie des patients et la dcouverte du
parasite dans le LCR, imposant une ponction lombaire dans un environnement souvent inadapt. Il est
donc essentiel didentifier des marqueurs stades spcifiques qui sont facilement exploitables dans les
conditions de terrain.

Nous voulons dans cette tude mettre en vidence des marqueurs biologiques dans le srum ou dans le
LCR des patients atteints par la maladie afin de simplifier le diagnostic de stade, amliorant ainsi la prise
en charge.

Pour cette tude l'utilisation de la spectromtrie de masse nous a paru loutil le plus adapt aux screening
des protines dans le srum et le LCR des patients. En effet cette technologie offre une possibilit de
caractrisation plus importante que les techniques utilises jusqu' maintenant. Cette analyse a t
ralise sur un chantillonnage de patients issus dune cohorte qui a t mise en place entre 2009 et 2011
et finance par FIND (Foundation for Innovative and New Diangnostic). Grce cette bio-banque, nous
avons des chantillons de srums, de LCR, de salives, durines, de larmes et de sang de malades atteints
de THA T.b. gambiense, en stade 1 et stade 2 et leurs suivis post traitement et ce sur 24 mois. Nous
avons analys le srum et le LCR de 12 patients, 4 patients en stade 1, 4 patients en stade 2 et 4 sujets
contrles par Chromatographie Liquide couple un Spectromtre de Masse en tandem (LC-MS/MS).
Aprs dpltion et concentration des protines prsentes dans les chantillons analyser, nous avons
ralis une digestion enzymatique ainsi quune purification des peptides obtenus. L'analyse peptidique a
permis d'identifier, par comparaison avec les bases de donnes, lensemble du protome prsent sur les
chantillons de Srum et de LCR. Aprs traitement des donnes obtenues nous pourrons slectionner les
meilleurs candidats marqueurs de stade de la maladie. La finalit est de qualifier des protines stades
dpendantes pour ensuite les quantifier par ELISA sur lensemble de la cohorte afin de proposer un
nouveau test diagnostique. Il est aussi prvu dtendre lanalyse aux chantillons durines et de salives de
ces patients prsents dans la biobanque
Identification des mtabolites du Mgazol sur un modle animal.
BOUDOT C. 1,2 * , BONNET J. 1,2 , PINAULT E. 3 , MORVAN B. 4 , COURTIOUX B. 1,2

1 INSERM, U1094, Neuropidmiologie Tropicale, F-87000 Limoges, France


2 Univ. Limoges, UMR_S 1094, Neuropidmiologie Tropicale, Institut dEpidmiologie Neurologique et de
Neurologie Tropicale, CNRS FR 3503 GEIST, F-87000 Limoges, France
3 Service Commun de Recherche et dAnalyse des Biomolcules de Limoges (SCRABL), plateau de
spectromtrie de masse, FR3503 GEIST, Limoges, France
4 FlowChem, Mazre, France

*Auteur correspondant : boudot.clotilde@gmail.com

La Trypanosomose humaine africaine (THA), ou maladie du sommeil, est une parasitose vectorielle
endmique localise en Afrique sub-saharienne. Elle est cause par un parasite, Trypanosoma brucei,
transmis par la piqre dune mouche, la glossine, lors de son repas sanguin. Le parasite aprs
multiplication au niveau hmo-lympathique, est capable de franchir la barrire hmato-encphalique et
datteindre le systme nerveux central. A ce stade, en labsence de traitement, la mort est inluctable. Les
traitements proposs sont stades dpendants et reposent sur la pentamidine et la suramine pour le stade
hmo-lymphatique, le mlarsoprol, leflornithine et lassociation nifurtimox-eflornithine pour le stade
crbral. Mais lapparition de rsistance, la prsence deffets indsirables graves de certains de ces
traitements renforcent la ncessit de trouver de nouveaux mdicaments surs et efficaces la fois chez
lHomme et le btail, grand rservoir de cette zoonose. Le mgazol, de formule brute 2-amino-5-(1-mthyl-
5-nitro-2-imidazolyl)-1-3-4-thiadiazole, driv nitr, possde des proprits antiparasitaires diriges contre
ce parasite depuis longtemps dmontres, mais son intrt a t malheureusement oubli depuis quelques
annes, la suite de publications peu enclin montrer son potentiel thrapeutique rel.

Notre travail est centr sur ltude du mgazol, afin didentifier les mtabolites qui pourraient prsenter un
intrt en mdecine humaine ou vtrinaire.

Les mtabolites ont t recherchs et caractriss partir dexprimentation in vivo sur un modle murin.
Des lots de souris ont donc reu une dose de mgazol des temps donns, et un recueil des urines et de
plasma a t effectu en vue dune analyse par chromatographie liquide haute performance couple la
spectromtrie de masse (CLHP/SM), dans les diffrents chantillons biologiques des divers lots de souris
traites en utilisant la mthode GUS (General Unknown Screening) permettant de dtecter et didentifier
sans a priori, les composs prsents dans les matrices biologiques, et la mthode MRM (Multiple Reaction
Monitoring) permettant de quantifier une ou plusieurs molcules cibles dans un chantillon complexe. Les
rsultats obtenus ont permis de mettre en vidence seize ions diffrents, dont treize ont permis de
confirmer la structure propose lors dune prcdente tude.

Il reste maintenant caractriser par RMN, notamment, lensemble des mtabolites obtenus et tester in
vitro sur des cultures de souches parasitaires diffrentes leffet potentiellement trypanocide de certains
mtabolites synthtiss chimiquement, mais galement de rvaluer la toxicit du mgazol aux doses
thrapeutiques administrables lHomme et aux animaux en se basant sur la NOAEL (No Observable
Adverse Effect Level) et la LOAEL (Lowest Observed Adverse Effect Level), et aussi de composs drivs
de ce dernier pour entrevoir un nouvel avenir thrapeutique pour les trypanosoms.
Hmiparsie et hmiplgie soudaines chez un homme de 55 ans.
BRUNET K. 1 * , MINOZA A. 1 , PORTET S. 2 , BERAUD G. 3 , RODIER M. 1 , CATEAU E. 1

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie Mdicale, CHU de Poitiers


2 Service de Neurochirurgie, CHU de Poitiers
3 Service de Maladies Infectieuses, CHU de Poitiers

*Auteur correspondant : brunet.kevin.1@gmail.com

Photo quiz : Hmiparsie et hmiplgie soudaines chez un homme de 55 ans.

Brunet et al., CID, in Press.

Un homme de 55 ans a t hospitalis en 2015 au CHU de Poitiers pour hmiparsie et pisodes


dhmiplgies spontanment rsolutifs. A limagerie, on notait la prsence dune lsion circulaire au niveau
du subcortex parital droit et dun dme important associ (figure A). La srologie a exclu le diagnostic
de VIH, hpatite B, hpatite C, syphilis et toxoplasmose. A ce stade, le diagnostic de tumeur crbrale a
t envisag et compte tenu de sa localisation, une exrse de la lsion a t ralise.

Quelques jours plus tard, lexamen anatomopathologique a exclu le diagnostic de lsion maligne. Une
portion du prlvement a t envoye au laboratoire de Parasitologie/Mycologie pour recherche
mycologique et colore par calcofluor-white (MycetFluo, SR2B). De manire inattendue, cette coloration a
rvl une structure parasitaire (figure B).

Quel est votre diagnostic ?

A : IRM de la lsion crbrale. B : Coloration au


calcofluor-white du prlvement (x400).
Place de la fumagilline dans la microsporidiose de lallogreff de moelle
BUKREYEVA I. 1 , ANGOULVANT A. 2 * , DARGERE S. 3 , BOURHIS J. 4 , GACHOT B. 5 , GAGNARD J. 1
, VITTECOQ D. 1 , WYPLOSZ B. 1

1 APHP, CHU de Bictre, Services de Maladies Infectieuses et Tropicales, le Kremlin Bictre, France
2 APHP, CHU de Bictre, Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Le Kremlin Bictre, France
3 CHU de Caen, Service de Maladies Infectieuses et Tropicales, Caen, France
4 Institut gustave Roussy, Service d'hmatologie, Villejuif, France
5 Institut gustave Roussy, Service de Maladies infectieuses, Villejuif, France

*Auteur correspondant : adela.angoulvant@aphp.fr

La microsporidiose Enterocytozoon bieneusi, infection opportuniste cosmopolite, touchant principalement


les patients infects par le VIH et ceux transplants dorganes solides (TOS), est exceptionnellement
rapporte chez les patients allogreffs de cellules souches hmatopotiques (CSH). En France, la
fumagilline, seul traitement autoris par la HAS, na t value que dans le contexte de linfection par le
VIH et de la TOS. Son principal effet indsirable est une toxicit hmatologique pouvant toucher les 3
lignes.

Nous rapportons les deux premiers cas de patients allogreffs de CSH atteints de microsporidiose E.
bieneusi traits par fumagilline. Aucun des malades navait voyag ltranger. La microsoporidiose est
survenue respectivement 2 et 4 ans aprs lallogreffe alors quils taient sous immunosuppresseurs pour
une GVH cutane grave. Ils ont t hospitaliss pour une diarrhe profuse dvolution subaige
responsable de dshydratation clinique, damaigrissement > 8 kg et dasthnie profonde. Le diagnostic de
microsporidiose E. bieneusi a t tabli par lexamen microscopique des selles aprs coloration
trichromique de Weber modifie et identification despce par immunofluorescence.

Mthode : En raison dune aggravation progressive des symptmes, un traitement par fumagilline (20 mg
trois fois/jour) a t instaur dans le cadre de lATU pour une dure 14 jours. Dans un cas, le
mycophnolate moftil a t diminu transitoirement.

Rsultats : Une gurison clinique a t obtenue moins de 5 jours aprs le dbut de la fumagilline. Une
clairance dE. bieunesi dans les selles a t observe J9 et J19 aprs le dbut de la fumagilline sans
rcidive 6 mois.

Une thrombocytopnie (<150 000/mm3) transitoire attribue la fumagilline a t observe dans les deux
cas : 1) le dernier jour du traitement (J14) avec un nadir J18 40 000 /mm (grade 3 de lOMS) sans
hmorragie ; 2) J18 avec un nadir 131 000/mm (grade 0 de lOMS).

Conclusion : La microsporidiose E. bieneusi est une infection digestive pouvant tre responsable dune
forte morbidit chez les patients allogreffs de CSH. La fumagilline est rapidement efficace sur les
symptmes et permet une gurison parasitologique sans rechute. Une toxicit plaquettaire transitoire et
sans gravit clinique peut survenir aprs la fin du traitement.
La dermatite du nageur en Belgique: premiers cas, identification du parasite et
de lhte intermdiaire concerns.
CARON Y. 1 * , CABARAUX A. 2 , RENARD E. 1 , VANVINCKENROYE C. 1 , MARECHAL F. 1 ,
DEFLORENNE P. 3 , LOSSON B. 1

1 1Laboratoire de Parasitologie et Pathologies des maladies parasitaires, Recherche fondamentale et


applique pour la sant animale (FARAH), Facult de mdecine vtrinaire, Universit de Lige (Belgique).
2 2Service Environnement-Scurit - Les Lacs de lEau dHeure (ASBL) Route de la Plate Taille,
Boussu-Lez-Walcourt (Belgique).
3 3Cellule naturaliste AVES / NATAGORA Froidchapelle (Belgique).

*Auteur correspondant : ycaron@ulg.ac.be

La dermatite cercarienne est une atteinte cutane qui touche lhomme et est due la forme larvaire dun
schistosome aviaire appartenant au genre Trichobilharzia. Le cycle biologique de ces parasites requiert un
mollusque deau douce de la famille des Lymnaeidae et des oiseaux aquatiques (ansriformes
essentiellement). Cest lors dactivits aquatiques que des expositions rptes aux cercaires peuvent
mener une sensibilisation de la peau avec linduction de lsions cutanes prurigineuses. Dans certains
cas, de la fivre, des dmes et un gonflement des ganglions lymphatiques de la rgion concerne
peuvent apparaitre. Ainsi la dermatite du nageur nest pas considre comme dangereuse mais tout au
plus, trs dsagrable. Elle provoque nanmoins des pertes financires importantes pour le secteur du
tourisme.

Plusieurs pisodes de dermatites cercariennes aux Lacs de lEau dHeure (Belgique) sont dcrits. Deux
barrages (Eau dHeure et Plate Taille) ont t construits dans les annes septante. Le barrage de la Plate
Taille alimente une centrale hydrolectrique faisant ainsi varier considrablement le niveau de leau
contrairement la retenue de Falemprise. Deux zones de baignades sont disponibles la Plate Taille et
Falemprise. Le 27 juillet 2012 le temps tait chaud et ensoleill ; 78 personnes au total ont signal une
ruption cutane prurigineuse. Quelques personnes ont t transportes vers diffrents hpitaux. Au
dbut, la prolifration de cyanobactries toxiques a t suspecte comme agent causal et la zone de
baignade a t ferme. Cependant, les chantillons deau analyse se sont rvls indemnes de
cyanobactries toxiques et la zone de baignade a t r-ouverte le 2 Aot. Le 19 Aot, un deuxime
pisode avait lieu et concernait cette fois-ci 10 personnes. Aucun cas na par contre t signal la
retenue deau de Falemprise.

A partir du 21 septembre notre quipe a visit les deux zones de baignades. Plusieurs centaines de
mollusques (principalement des pulmons appartenant au genre Radix sp. et Lymnaea sp.) y ont t
rcolts. Lexcrtion de cercaires a t stimule au laboratoire par une exposition lumineuse. Une
mergence massive de cercaires appartenant plusieurs familles a t mise en vidence :
Echinostomatidae, Xiphididae, et Schistosomatidae. Les mollusques et les cercaires ont t conservs
pour identification molculaire. Nanmoins, lanalyse molculaire (PCR) na pas abouti la mise en
vidence de furcocercaires ocells zoonotiques.

Depuis 2013 un suivi de plusieurs paramtres a t mis en place : diffrents paramtres physico-chimiques
(niveau deutrophisation, temprature ), niveaux deau, et inventaire des ansriformes en hiver entre
autres. Des ramassages de macrophytes aquatiques et de mollusques ont aussi t raliss pour limiter la
pression dinfestation. Aucun cas supplmentaire na t rapport en 2013 et en 2014. Le 30 aot 2015,
quelques nouveaux cas ont t rapports la Plate Taille dans une zone o la baignade tait interdite. Des
mollusques (n=270) ont t collects le jeudi 24 septembre 2015 mais cette fois-ci en diffrents points
autour du lac. Aprs une exposition lumineuse, 7 Radix sp. (2,6%) collects dans des zones dhivernage
notoire dansriformes ont excrts des furcocercaires ocells (Fig. 1) responsables de la dermatite du
nageur. Lidentification microscopique et molculaire des parasites et des htes intermdiaires est en
cours.
La cryptosporidiose en France en 2014- 2015: rsultats de la surveillance du
rseau national. rseau CRYPTO-ANOFEL
CRYPTO ANOFEL R. 2 , FAVENNEC L. 1 *

1 EA 3800, CHU de Rouen


2 Rseau Crypto Anofel

*Auteur correspondant : loic.favennec@chu-rouen.fr

En 2004, le rseau national CryptoANOFEL a t cr par l'ANOFEL avec le soutien de l'INVS pour fournir
aux autorits de sant publique des donnes sur l'incidence et l'pidmiologie de la cryptosporidiose
humaine en France. Constitu sur la base du volontariat, le rseau comprend actuellement 41 laboratoires
(38 laboratoires hospitaliers de Parasitologie, 2 laboratoires privs de biologie mdicale spcialise et 1
laboratoire de biologie mdicale en secteur semi rural). Chaque laboratoire s'est engag notifier
annuellement les nouveaux cas humains de cryptosporidiose confirms, fournir les chantillons positifs
des fins de typage molculaire et recueillir les donnes cliniques et pidmiologiques associes ces
cas. Depuis fin 2014, une notification en ligne en temps rel est ralise.

De Janvier 2014 dcembre 2015, 292 cas de cryptosporidiose ont ainsi t notifis. (150 en 2014 dont
138 en mtropole et 142 en 2015 dont 136 en mtropole). Durant la priode tudie, les patients infects
par le VIH reprsentaient 17% des cas ; les patients transplants rnaux reprsentaient 21.5 % des cas et
20% des patients prsentaient une autre cause connue d'immunodpression. Cependant, la
cryptosporidiose n'est pas seulement une parasitose opportuniste: les patients immunocomptents
reprsentaient 31 % des cas Une tendance saisonnire marque est observe chaque anne, avec une
augmentation du nombre de cas durant les mois de aout octobre et en hivers (dcembre janvier) . Le
gnotypage de 150 isolats a permis d'identifier la prsence de C. parvum dans 64 % des cas et de C.
hominis dans 21%, ces proportions ne varient pas selon le statut immunitaire. D'autres espces
zoonotiques comme C. meleagridis, C. felis, et C. cuniculus ont galement t identifies.

Le nombre de cas apparat stable depuis 2014. Toutefois, le rseau tant constitu principalement de
laboratoires de centres Hospitalo-Universitaires, il permet de suivre l'volution de cette pathologie lourde
chez les patients immunodprims. L'largissement du rseau aux laboratoires des centres hospitaliers
gnraux est prvue et permettra de mieux pouvoir dtecter d'ventuelles pidmies.
Pharmacodynamique des ttrapeptides cycliques inhibiteurs dhistone
dactylases dans les kystes de Toxoplasma gondii et impact sur lactylation
des bradyzotes intra-kystiques.

DARD C. 2 * , DIRECTEUR DE THESE : MADAME MAUBON D. 1

1 UNIVERSIT JOSEPH FOURIER


2 FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE

*Auteur correspondant : laurence.delhaes@gmail.com

Laurat du prix Doby de Thse dExercice rcompense par la Socit Franaise de Parasitologie

Linterconversion bradyzote-tachyzote chez T. gondii est une tape cl dans la pathogense de la


toxoplasmose chez les patients immunodprims. Pourtant, les traitements anti-toxoplasmiques actuels
sont inefficaces sur les bradyzotes intra-kystiques et peu dtudes sintressent la forme kystique de T.
gondii. En inhibant TgHDAC3, un acteur central dans la diffrenciation parasitaire de T. gondii, le compos
FR235222 est actif sur les tachyzotes mais aussi sur les bradyzotes. Ainsi, le premier objectif de cette
tude tait danalyser la dynamique particulire de FR235222 vis--vis des kystes de T. gondii. Le
compos FFH1-107 un analogue fluorescent de FR235222 et dautres drivs ont t dvelopps pour
tudier la pharmacodynamique des HDACi dans les kystes et prciser la fonction des diffrentes structures
molculaires. Cette approche a permis de montrer le rle essentiel du ttrapeptide cyclique dans le
passage transmembranaire de FR235222 et dtablir que FR235222 atteignait sa cible via un mcanisme
principalement passif. Dans un second temps, limpact de FR235222 sur lactylation des formes
bradyzotes a t analys. Les histones H4 des bradyzotes affichent une forte actylation ltat basal,
renforce par un traitement par HDACi, impliquant un environnement chromatinien favorable la
transcription dans la forme quiescente du parasite. Cette tude confirme donc que cibler la dynamique de
lactylation peut affecter la forme kystique du parasite et constitue par consquent une stratgie
thrapeutique prometteuse dans la prvention des ractivations de T. gondii chez les patients
immunodprims.
Caractrisation de la kinase ROP17 dEimeria tenella (protozoaire, Apicomplexe)
DIALLO M. 1,2 * , SAUSSET A. 1,2 , SILVESTRE A. 1,2

1 Apicomplexes et Immunit Mucosale, INRA, UMR1282, Infectiologie et Sant Publique, 37380 Nouzilly,
France
2 Universit Franois Rabelais de Tours, UMR1282, Infectiologie et Sant Publique, 37000 Tours, France

*Auteur correspondant : mamadou.diallo@tours.inra.fr

Les coccidies (Eimeria, Toxoplasma, Neospora ...) sont des parasites appartenant au phylum des
apicomplexes. Les parasites apicomplexes prsentent un intrt vtrinaire et mdical. En effet Eimeria et
Neospora sont responsables de la coccidiose et de la nosporose, respectivement. Ces deux maladies ont
un fort impact conomique dans lindustrie de la volaille et dans la filire bovine. Lintrt mdical des
coccidies est surtout li la toxoplasmose cause par Toxoplasma gondii.

En levage aviaire, 7 espces dEimeria sont responsables de la coccidiose. Lune des espces les plus
frquentes sur le terrain, et les plus pathognes est Eimeria tenella, agent de la coccidiose caecale. E.
tenella envahit les cellules pithliales du ccum et entraine des diarrhes hmorragiques mortelles. Face
ce parasitisme ubiquitaire, la production aviaire se maintient grce i) aux traitements anticoccidiens
administrs quotidiennement dans lalimentation des poulets et ii) aux vaccins (rservs aux productions
haute valeur ajoute compte tenu de leur cot lev). Lusage rpt des traitements anticoccidiens a
slectionn des souches dEimeria rsistantes (voire multi-rsistantes) et il devient urgent de dvelopper
de nouveaux moyens de contrle. Eimeria, comme les autres coccidies, possde au niveau de son ple
apical divers organites scrtoires (micronmes, rhoptries). Les rhoptries contiennent des protines ROP
et RON (nommes ainsi en fonction de leur localisation dans lorganite) qui sont secrtes dans la cellule
hte au cours de linvasion. La majorit de ces protines ROP possdent un domaine kinase (ROPK) non
actif, et seules quelques ROPK sont prdites pour tre actives. Les protines kinases de la famille ROPK
sont spcifiques aux coccidies et ne peuvent tre classes dans aucune des grandes familles de kinases
connues des eucaryotes.

Des tudes ralises principalement chez Toxoplasma gondii montrent que les ROP kinases interviennent
dans la prolifration et le dveloppement du parasite dans la cellule hte. TgROP16 et TgROP18 sont des
facteurs de virulence majeurs pour T. gondii. TgROP16 est adresse au noyau de la cellule hte et
phosphoryle les facteurs de transcription STAT3 et STAT6 conduisant une rgulation ngative de la
rponse inflammatoire contre le parasite (Butcher et al., 2011). TgROP18 se localise sur la membrane de
la vacuole parasitophore (PVM) et phosphoryle les GTPases IRG empchant ainsi leur accumulation sur la
PVM et prservant la vacuole parasitophore (Steinfeldt et al., 2010).

Le gnome dE. tenella contient 27 ROP kinases putatives Talevich et al., 2013). La protomique des
rhoptries indique que seules 2 ROPK sont prsentes chez le sporozote (Oakes et al., 2012) : EtROP17 et
EtROP25. Nous prsenterons nos travaux sur la kinase EtROP17. EtROP17 est prdite pour tre une
kinase active, non-canonique. Nous avons montr que EtROP17 est une kinase active, elle est capable
dautophosphorylation sur des rsidus serine du domaine C-ter et seule sa forme plein longueur possde
une activit catalytique. Contrairement aux kinases classiques, le domaine kinase seul de EtROP17 est
inactif.
Detection of Cryptic and Submicroscopic Plasmodium Vivax Infections in a
healthy population of Western Africa
DODERER-LANG C. 1 * , POIRIER P. 3 , ATCHADE P. 4 , LEMOINE J. 1,2 , COQUELIN DE LISLE M. 1 ,
ABOUBACAR A. 1,2 , PFAFF A. 1,2 , BRUNET J. 1,2 , CHABI N. 4 , AKPOVI C. 4 , ANANI L. 5 , BIGOT A. 5 ,
SANNI A. 4 , CANDOLFI E. 1,2

1 Institut de Parasitologie et de Pathologie Tropicale Universit de Strasbourg, Strasbourg, France


2 Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Plateau Technique de Microbiologie
Hpitaux Universitaires de Strasbourg. 1 Place de l'Hpital, 67000 Strasbourg, France.
3 Laboratoire de Parasitologie Mycologie, 58 rue Montalembert, CHU Gabriel Montpied 63003 Clermont-
Ferrand Cedex 1
4 Laboratoire de Biochimie et de Biologie Molculaire, Universit dAbomey Calavi, 04 BP 0320 Cotonou,
Bnin
5 Agence Nationale pour la Transfusion Sanguine (Ministre de la Sant), 01 B.P. 511 Cotonou, Bnin

*Auteur correspondant : cecile.lang@unistra.fr

Among the pathogenic Plasmodium species for humans, Plasmodium vivax is the most geographically
widespread. It is also the Plasmodium species known to be absent from Western Africa, where the
prevalence of Duffy-negative red blood cell phenotype is high in the local population (Howes et al, 2011).
However, many studies have identified cases of parasite infection in this region raising the question of the
local transmission or via travelers. We have investigated the presence of Plasmodium vivax in a large
population of healthy blood donors in Benin by microscopy (thick and thin blood smear), serology and
molecular detection. The seroprevalence was measured with species specific ELISA using two
recombinant proteins from P.vivax, rMSP1 and rCSP1. Molecular characterization for the presence of
circulating parasite was carried out using species specific end point PCR on blood samples.

The performances of the recombinant proteins were first evaluated on patients infected with Plasmodium
vivax (n = 41) and non-exposed to malaria blood donors (n = 280) with good sensitivity and specificity.
Among 1234 Beninese blood donors, no parasites were detected by microscopy. However 28.1%
(351/1234) had antibodies against rP.vivax MSP1, 21.6% (266/1234) for CSP1 and 15.6% (187/1234) for
the both. We selected 84 samples positive for the two proteins and for circulating antigen pLDH, previously
tested by Atchade et al, 2013, for PCR analyses. We found 25 positives with pan malaria PCR. After
evaluation by species specific PCR, 13 were positive for P. vivax. Among them 10 were mixed infections
with P. falciparum and one also with P. malariae. The sequences were compared and aligned with the
strains available on databases. The sequence matches with a fragment of the 18S rRNA from a previous
case detected in Cameroon (Ngassa Mbenda et al, 2014).

Despite the belief of the absence or scarcity of P. vivax in Western Africa, we have demonstrated
serological and molecular evidences of the presence of parasites in a population of asymptomatic blood
donors in Benin. It reflects a local exposure to the parasite in these populations. While the vaccination
campaign and therapeutic efforts are focused on Plasmodium falciparum, it is essential to consider the
epidemiological impact of Plasmodium vivax.
Incidence de lanisakidose en France. Enqute rtrospective 2010-2014
DUPOUY-CAMET J. 1 * , TOUABET-AZOUZI N. 1 , FREALLE E. 2 , VAN CAUTEREN D. 3 , YERA H. 1 ,
MONERET-VAUTRIN A. 4

1 Service de Parasitologie-Mycologie, Hpital Cochin, Assistance Publique Hpitaux de Paris, Universit


Paris Descartes, Paris, France
2 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHRU de Lille, Facult de Mdecine & Univ. Lille, CNRS,
Inserm, CHU Lille, Institut Pasteur de Lille, U1019 UMR 8204 - CIIL Centre dInfection et dImmunit,
59000 Lille, France
3 Institut de Veille Sanitaire (InVS) 12 rue du Val dOsne 94415 St Maurice, France
4 Facult de Mdecine de Nancy Route de Neufchteau, 54500,Vandoeuvre les Nancy, France

*Auteur correspondant : jean.dupouy-camet@aphp.fr

Lobjectif de cette tude tait destimer lincidence de lanisakidose en France depuis l'mergence de
nouvelles habitudes culinaires telles que la consommation croissante de poisson cru (sushis). Aucune
enqute na t mene dans les laboratoires hospitalo-universitaires de Parasitologie-Mycologie de France
mtropolitaine depuis lenqute de Hubert et col (2007) qui avaient identifi 21 cas sur 33 mois. Cette
enqute rtrospective a t ralise sur les annes 2010 2014 et a consist en un recueil des cas auprs
de tous les laboratoires hospitalo-universitaires de Parasitologie-Mycologie de France. Elle a t complte
par une analyse des donnes du Rseau dAllergo-vigilance (RAV) et des donnes du Programme
Mdicalis des Systmes dInformation (PMSI). Trente-sept cas danisakidose ont pu tre rpertoris par
les laboratoires de Parasitologie : 6 cas certains avec mise en vidence du ver dans un prlvement
digestif, 13 cas possibles dfinis par des douleurs abdominales aprs consommation de poisson cru et une
recherche de prcipitines anti-Anisakis et 18 cas danisakidose allergique dfinis par des manifestations
allergiques aigues aprs consommation de poisson associes la prsence IgE spcifiques dAnisakis. Il
existe une prpondrance fminine (25 femmes contre 12 hommes). Six cas supplmentaires dallergie
svre aux anisakids ont t rapports au Rseau dAllergo-vigilance sur cette mme priode. Lanalyse
des donnes du PMSI a permis didentifier 43 patients hospitaliss avec un code danisakidose en
diagnostic principal ou en diagnostic associ. Par rapport des tudes antrieures, cette enqute rapporte
une diminution des anisakidoses mais montre que le potentiel allergisant des anisakids est en mergence
et que son importance en sant publique mriterait dtre plus investigue.

Figure 1 : Nombre de cas danisakidose (certaines,


possibles ou allergiques) identifis entre 2010 et
2014 en France mtropolitaine. Le rseau
dallergo-vigilance (RAV) rapporte sur la mme
priode 6 cas danaphylaxie grave.
Phnomnes dintrogressions dans ltude de la diversit gntique du
toxoplasme entre la France et lAfrique de lOuest : des influences humaines et
environnementales a explorer
GALAL L. 1 * , MURAT J. 1,2 , AJZENBERG D. 1,2 , DARDE M. 1,2 , VIGNOLES P. 1 , BROUAT C. 3 ,
GRANJON L. 3 , SEMBENE P. 4 , MERCIER A. 1

1 UMR Inserm 1094 Neuropidemiologie Tropicale, Universit de Limoges, France


2 Centre de ressources biologiques Toxoplasma, CHU Limoges, France
3 Centre de Biologie pour la Gestion de Populations (CBGP), UMR IRD, INRA, CIRAD, SupAgro,
Montpellier, France
4 Dpartement de Biologie Animale, Universit Cheikh Anta DIOP, Dakar, Sngal

*Auteur correspondant : lokman.galal@unilim.com

Linfection par Toxoplasma gondii est une zoonose largement rpartie travers le monde qui touche
lensemble des espces homothermes. Son pidmiologie est complexe du fait du grand nombre dhtes
et de voies de transmission. Chez lhomme, on observe une majorit dinfections asymptomatiques mais
aussi des formes oculaires, crbrales ou viscrales de la maladie. Cette variabilit semble tre en lien
avec ltat immunitaire du patient, mais galement avec la souche responsable de linfection. En Europe et
en Amrique du Nord, les souches isoles jusqu prsent appartiennent principalement deux lignes
clonales peu pathognes chez lhomme immunocomptent : les haplotypes II et III. A contrario, on observe
en Amrique du Sud, une diversit gntique beaucoup plus importante, avec des souches lorigine de
manifestations cliniques plus svres. Les dterminants de la structure spatiale de cette diversit sont
encore mal compris. Des rsultats antrieurs semblent montrer que lanthropisation du milieu modifie la
diversit gntique du toxoplasme. Lexemple de la Guyane Franaise montre qu petite chelle
gographique, une sparation spatiale nette stablit entre les gnotypes des environnements anthropis et
sauvage. Dans ce contexte, des interpntrations de gnotypes dun environnement lautre sont
nanmoins observes. A une chelle globale, la circulation des htes intermdiaires par voies naturelles
comme lors des migrations doiseaux, ou par voies anthropiques via le transport de produits carns,
danimaux domestiques ou le transport involontaire de nuisibles, pourraient galement tre des voies
dintrogression de gnotypes du toxoplasme dune rgion lautre.

Lobjectif principal de ce projet sera dexplorer les voies dintrogression de souches de toxoplasme entre la
France et l'Afrique de l'Ouest, pour comprendre linfluence des facteurs anthropiques ou environnementaux
sur la structuration gntique des populations de ce parasite, leur contribution dans lapparition de
nouveaux patterns dappariements gnomiques, et leurs consquences sur l'pidmiologie de la
toxoplasmose dans ces rgions.

Les souches de T. gondii seront isoles pour les deux rgions partir danimaux domestiques,
pridomestiques et sauvages dans lenvironnement des zones portuaires et dans les aires de
regroupement doiseaux migrateurs. La diversit gntique de T. gondii dans ces deux types
denvironnement reste trs peu explore, que ce soit en France ou en Afrique de lOuest. Ces zones
prsentent un intrt particulier car elles pourraient constituer des ponts dchanges gntiques entre
ces deux rgions. Les gnotypes des souches dfinis par analyse de marqueurs microsatellites seront
analyss en termes de gntique des populations afin dvaluer les changes gntiques de faon
spatiale. Une partie des souches isoles sera soumis squenage complet afin dexplorer les possibilits
dintrogressions gnomiques. Une tude phylogntique permettra de reconstituer lhistoire volutive du
parasite entre les deux rgions considres.

Ltude des voies de transmission du toxoplasme lchelle globale permettra douvrir de nouvelles
perspectives dans lidentification des voies dentre et des rgions potentielles dmergence des
pathognes de manire gnrale. Ce projet sinscrit dans le cadre du concept One Health , o une
approche globale et transversale dans ltude des enjeux de sant se rvle de plus en plus
incontournable.
Infection filarienne et inflammation pulmonaire dans le modle murin de filariose
Litomosoides sigmodontis
KARADJIAN G. 1, 2 (ADRESSE ACTUELLE) * , FERCOQ F. 1 , PIONNIER N. 1, 5 (ADRESSE ACTUELLE) , VALLARINO-
LHERMITTE N. 1 , SPECHT S. 3 , CARLIN L. 4 , MARTIN C. 1

1 Musum National d'Histoire Naturelle (MNHN), Paris, France


2 Agence nationale de scurit sanitaire de lalimentation, de lenvironnement et du travail (ANSES),
Maisons-Alfort, France
3 Institute for Medical Microbiology, Immunology & Parasitology (IMMIP), University Hospital of Bonn,
Bonn, Germany
4 Inflammation Repair and Development, NHLI, Imperial College London, UK
5 Parasitology Department, Liverpool School of Tropical Medicine, Liverpool, United Kingdom

*Auteur correspondant : gregory.karadjian@anses.fr

Les filarioses sont des pathologies tropicales dues des nmatodes de la famille des Onchocercidae; Plus
de 150 millions de personnes sont concernes par les filarioses lymphatiques et l'onchocercose, et les
signes cliniques dvelopps sont variables en fonction de lespce filarienne et du stade considr. Les
stades infectants filariens (L3) sont transmis par un vecteur hmatophage, variable selon l'espce
infectante. Dans le modle murin Litomosoides sigmodontis, les L3 sont transmises dans la peau des
rongeurs par l'acarien Ornithonyssus bacoti. Ces L3 migrent jusqu' la cavit pleurale o ils muent d'abord
en stade 4 vers 9 jours post-infection (p.i) chez la souris puis en adultes mles et femelles vers 30 jours p.i.
qui vont produire et librer des microfilaires (stade 1). La phase prcoce du cycle de vie du parasite, entre
l'inoculation des L3 et leur arrive dans la cavit pleurale est peu documente et reprsente une boite noire
dans la biologie de cette espce. Nos donnes rvlent une phase pulmonaire associe des dommages
pulmonaires caractrises par des hmorragies et des granulomes. En outre, en contournant la phase
cutane via une injection intraveineuse des L3 au lieu d'une injection sous-cutane, le rendement
parasitaire (i.e. le % de L3 qui atteint la cavit pleurale) est fortement augment suggrant que les L3
auraient une phase sanguine. Pour expliquer leur prsence dans la cavit pleurale et les atteintes
pulmonaires observes, les L3 entreraient dans les poumons par la circulation pulmonaire puis sortiraient
des capillaires pulmonaires pour rejoindre l'espace pleural en endommageant l'endothlium, le
parenchyme et le msothlium pulmonaire. Cette tude met aussi en vidence une inflammation transitoire
dans les poumons, caractrise par un recrutement de polynuclaires neutrophiles associs la
surexpression des molcules inflammatoires s100A8/s100A9 dans le poumon mais aussi dans le liquide
pleural et le fluide broncho-alvolaire. LIL-1 pleurale, une cytokine pro-inflammatoire, est aussi
augmente ds 2 heures p.i.
Evaluation de mthodes microscopiques et molculaires pour le diagnostic et le
suivi des cryptosporidioses chez les patients risque
LE GOVIC Y. 1 * , GUYOT K. 2 , CERTAD G. 2 , DESCHILDRE A. 3 , NOVO R. 4 , MARY C. 5 , SENDID B.
1,6
, VISCOGLIOSI E. 2 , FAVENNEC L. 7 , DEI-CAS E. 1,2 , FREALLE E. 1,2 , DUTOIT E. 1

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHRU de Lille & Facult de Mdecine de Lille, Universit de


Lille, France
2 Centre dInfection et dImmunit de Lille, Institut Pasteur de Lille, Universit de Lille, CNRS, Inserm, CHU
de Lille, U1019 UMR 8204 - CIIL, Lille, France
3 Unit de pneumologie-allergologie pdiatrique, ple enfant, clinique de pdiatrie Jeanne de Flandre,
CHRU de Lille, Universit de Lille, France
4 Unit de Nphrologie Pdiatrique, CHRU de Lille, France
5 Aix-Marseille Universit, Facult de Mdecine, UMR MD3, et APHM, Hpital de la Timone, Laboratoire
de Parasitologie-Mycologie, Marseille, France
6 Inserm U995, Universit de Lille, France
7 Laboratoire de Parasitologie, EA 3800-IRIB, CHRU de Rouen, France

*Auteur correspondant : yohann.legovic@chu-angers.fr

Introduction : La cryptosporidiose est une des infections gastro-intestinales les plus courantes. Elle est
cause par une coccidie du genre Cryptosporidium, responsable de diarrhes aussi bien chez
limmunocomptent que chez limmunodprim. La mconnaissance de cet agent contribue sous-estimer
son implication dans les pisodes diarrhiques. En France, le diagnostic de cryptosporidiose repose
encore aujourdhui sur la mise en vidence des oocystes dans les selles, mais leur recherche nest ralise
que sur prescription spcifique. De plus, les mthodes microscopiques manquent de sensibilit et
ncessitent du personnel hautement qualifi. Le dveloppement doutils molculaires et leur utilisation pour
le diagnostic de cryptosporidiose constituerait non seulement une aide pour la dtection de
Cryptosporidium, mais pourrait galement faciliter lidentification des souches au rang despce.
Mthode : Nous avons dabord valu les performances de 2 mthodes dextraction dADN, lune manuelle
(ZR Fecal DNA MiniPrep Kit (ZR)), lautre automatise (NucliSens easyMAG (EM)), partir de 4
selles de patients infectes avec 104 oocystes de Cryptosporidium et de 29 selles de la collection du
rseau national Cryptosporidium ANOFEL. Chaque extrait a t test par PCR quantitative (qPCR) ciblant
le gne de lADNr18S ou le locus LAXER. Pour les 29 selles positives, une PCR niche a galement t
utilise. Le kit ZR a t retenu afin de comparer de faon prospective la qPCR et les techniques
microscopiques (glycrine, Ziehl-Neelsen modifi (ZN) et auramine phenol (AP)) pour le diagnostic de
cryptosporidiose. Au total, 69 chantillons de selles issus de 56 patients risque ont t collects dans
notre laboratoire entre septembre 2012 et avril 2013, et tests avec ces 5 techniques. Les isolats cliniques
ont t typs par squenage et par qPCR utilisant des sondes dhybridation spcifiques (C. parvum/C.
hominis).
Rsultats : La combinaison dune extraction ZR ou EM et dune amplification par qPCR 18S a permis de
dtecter Cryptosporidium dans les 4 selles infectes ainsi que dans les 29 chantillons positifs.
Nanmoins, le kit ZR sest avr plus performant en termes de quantits dADN dceles. Par ailleurs, des
rsultats faussement ngatifs ont t observs en qPCR LAXER et PCR niche. Le diagnostic de
cryptosporidiose a t pos pour 7 patients. Toutes les techniques microscopiques ont permis le diagnostic
initial. Cryptosporidium a t retrouv dans 12, 13 et 14 prlvements par les techniques glycrine, ZN et
AP, respectivement. Parmi ces chantillons, 14 et 12 taient positifs en qPCR 18S et LAXER,
respectivement. Par ailleurs, pour 2 patients souffrant de cryptosporidiose chronique, la cintique
dexcrtion parasitaire semblait corrle lvolution bio-clinique, suggrant que cette mthode pourrait
prsenter un intrt dans le suivi de ces infections. La concordance entre squenage et PCR de typage
tait de 100%.
Conclusion : Nos rsultats montrent que la mthode la glycrine est adapte au dpistage des
cryptosporidies chez les patients risque. Lextraction ZR suivie dune qPCR 18S parat optimale pour la
dtection de Cryptosporidium dans les chantillons fcaux humains. Lintrt de cette mthode a t
confirm lors de son utilisation en routine dans notre laboratoire, qui a permis le diagnostic de cas
supplmentaires de cryptosporidiose et damliorer le suivi des patients.
Etude de la diversit gntique des Haemonchinae, parasites de ruminants en
France
LEHRTER V. 1 * , PATRELLE C. 1,2 , LIENARD E. 3 , JOUET D. 4 , FERTE H. 4

1 EA 4688 USC Anses VECPAR , SFR Cap Sant, UFR de Pharmacie, Universit de Reims
Champagne-Ardenne, 51 rue Cognacq-Jay, 51096 Reims, France
2 NaturAgora Dveloppement - Bureau d'Etudes, 1 chemin du pont de la Planche, 02000 Barenton-Bugny,
France
3 Toulouse Institut National Polytechnique (INP) Ecole Nationale Vtrinaire de Toulouse, 23 Chemin des
Capelles, 31076 Toulouse, France
4 EA 4688 VECPAR , UFR de Pharmacie, Universit de Reims Champagne-Ardenne, 51 rue
Cognacq-Jay, 51096 Reims, France

*Auteur correspondant : veronique.lehrter@univ-reims.fr

Les Haemonchinae sont les principaux nmatodes gastro-intestinaux connus en France, ayant un impact
conomique et mdical sur les ruminants domestiques, et fort pouvoir pathogne chez les ruminants
sauvages. Ils sont reprsents par deux espces : Haemonchus contortus, parasite largement rpandu
chez les ovins et caprins et Ashworthius sidemi, observ plus rcemment chez les Cervidae.

Ce dernier semble avoir t introduit sur le territoire franais par lintermdiaire de cerfs Sika dorigine
asiatique. Les mouvements des populations dhtes, grs en majeure partie par lHomme, ont entran la
rpartition et lexpansion dAshworthius sidemi en France. La comparaison de la diversit gntique de ces
deux parasites semble tre en accord avec lhypothse dintroduction rcente dAshworthius sidemi. Sa
faible diversit gntique rsulterait dun effet fondateur avec goulot dtranglement, via lintroduction dun
nombre rduit de vers issus de quelques animaux qui sont lorigine des vers actuels.

Bien que les Haemonchus soient infods aux petits ruminants domestiques et les Ashworthius aux
Cervidae, les mises en vidence rcentes de co-infestations chez des cerfs et des chevreuils en France
pourraient aussi suggrer la possibilit dinfestation des ruminants domestiques par Ashworthius sidemi.
Sur la base de nos donnes molculaires, nous proposons une diagnose diffrentielle des deux espces,
pouvant sutiliser sur les stades larvaires obtenus par coprocultures. Le caractre non invasif de cette
mthode vise pidmiologique prsente un rel avantage compar la diagnose morphologique des
vers adultes lors des examens de caillettes post mortem.

Ce travail a bnfici dun support financier dans le cadre dune collaboration de recherche avec lONCFS
(SAGIR) et du programme Franois Sommer ralis au sein du DNC (Domaine National de Chambord).
Rsistance mdicamenteuse la sulfadiazine chez Toxoplasma gondii :
approche transcriptomique
MZABI A. 1,2 * , ESCOTTE-BINET S. 1,2 , AUBERT D. 1,2 , VILLENA I. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, EA 3800, SFR CAP-Sant - Universit de Reims Champagne-


Ardenne - Reims - France
2 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Centre National de Rfrence de la Toxoplasmose, Centre de
Ressources Biologiques Toxoplasma - Hpital Maison Blanche - CHU de Reims - France

*Auteur correspondant : amzabi@chu-reims.fr

Les mdicaments actifs dans le traitement de la toxoplasmose sont lheure actuelle peu nombreux, et le
traitement le plus largement utilis associe la sulfadiazine la pyrimthamine. Cependant, des checs
thrapeutiques ont t rapports.

Afin de progresser dans la comprhension des mcanismes de rsistance la sulfadiazine chez


Toxoplasma gondii, 24 gnes potentiellement impliqus dans la rsistance ont t identifis ; puis, nous
avons ralis une analyse comparative des niveaux dexpression de ces gnes entre des souches de
rfrence sensibles la sulfadiazine (RH et ME-49), des souches rsistantes induites la sulfadiazine
(RH-RSDZ et ME-49-RSDZ) [1], et des souches naturellement rsistantes (TgH 32006 et TgA 103001) [2]. Le
niveau dexpression des gnes a t dtermin par RT-qPCR en temps rel. Notre criblage s'est centr sur
7 gnes codant pour les transporteurs de folates (famille des FBT) [3], sur 11 gnes codant pour des
transporteurs efflux de mtabolites (famille des ABC transporteurs) [4], ainsi que sur 6 gnes codant pour
des enzymes de la voie de synthse des folates.

Cette analyse transcriptomique nous a permis de mettre en vidence des niveaux dexpression accrus de
faon significative chez les souches rsistantes, pour les gnes codant pour les transporteurs de folates,
pour le gne codant pour le transporteur ABC.C2, ainsi que pour les gnes codant pour la DHFS/FPGS
(dihydrofolate synthase/folylpolyglutamate synthase) et la SHMT (srine hydromthyltransfrase).

La surexpression de ces gnes pourrait permettre au parasite dassurer sa survie, en augmentant limport
et la squestration des folates, et en favorisant lexternalisation de la sulfadiazine. Par ailleurs, le rle
potentiel des transporteurs de folates dans la rsistance mdicamenteuse pourrait, plus long terme,
reposer la question de ladministration systmatique dacide folinique lors du traitement de la
toxoplasmose, cette supplmentation pouvant peut-tre paradoxalement favoriser la survie du parasite.

[1] Doliwa, C., Escotte-Binet, S., Aubert, D., Velard, F., Schmid, A., Geers, R., Villena, I. (2013) Induction of
sulfadiazine resistance in vitro in Toxoplasma gondii. Experimental Parasitol. 133, 131-136.

[2] Meneceur, P., Bouldouyre, M.-A., Aubert, D., Villena, I., Menotti, J., Sauvage, V., Garin, J.-F., Derouin,
F. (2008) In vitro susceptibility of various genotypic strains of Toxoplasma gondii to pyrimethamine,
sulfadiazine, and atovaquone. Antimicrob. Agents Chemother. 52, 1269-1277.

[3] Massimine, K.M., Doan, L.T., Atreya, C.A., Stedman, T.T., Anderson, K.S., Joiner, K.A., Coppens, I.
(2005) Toxoplasma gondii is capable of exogenous folate transport. A likely expansion of the BT1 family of
transmembrane proteins. Mol. Biochem. Parasitol. 144, 44-54.

[4] Sauvage, V., Millot, J.M., Aubert, D., Visneux, V., Marle-Plistat, M., Pinon, J.M., Villena, I. (2006)
Identification and expression analysis of ABC protein-encoding genes in Toxoplasma gondii. Toxoplasma
gondii ATP-binding cassette superfamily. Mol. Biochem. Parasitol. 147, 177-192.
Lutte contre les mouches ts-ts en Afrique de lOuest : optimisation de
lutilisation de la technique de linsecte strile
PAGABELEGUEM S. UNIVERSITE MONTPELLIER 2 * , DIRECTEUR DE THESE : MR BOUYER J. UNIVERSITE
MONTPELLIER 2
, CO-DIRECTEUR DE THESE : SIDIBE I. PATTEC BURKINA FASO

1 UNIVERSITE MONTPELLIER 2

*Auteur correspondant : laurence.delhaes@gmail.com

Laurat du prix de Thse dEntomologie rcompense par la Socit Franaise de Parasitologie

En Afrique sub-saharienne, prs de 10 millions de km2 de terres, les plus fertiles en productions
fourragres et agricoles, sont infestes de mouches ts-ts limitant ainsi les initiatives de dveloppement
dune agriculture durable. Les ts-ts transmettent des trypanosomes qui sont responsables des
trypanosomoses animales et humaines africaines. En 2000, les Chefs dEtats et de Gouvernements
africains ont dcid de redoubler defforts pour lutter contre les mouches ts-ts et les trypanosomoses en
crant la Pan African Tsetse and Trypanosomosis Eradication Campaign (PATTEC). Dans ce contexte, le
gouvernement sngalais a initi un programme dradication des glossines dans la zone des Niayes en
utilisant une souche de Glossina palpalis gambiensis originaire du Burkina Faso. La prsente thse visait
optimiser lutilisation de la technique de linsecte strile (TIS) en Afrique de lOuest pour lutter contre les
glossines. Un dispositif de transport sur de longues distances de pupes matures a t dvelopp et valid
partir de pupes mles de G. p. gambiensis produites et irradies Bobo-Dioulasso, Burkina Faso et
Bratislava, Slovaquie (irradiation faite Seibersdorf, Autriche) et transportes par voie arienne jusqu
Dakar, Sngal. Le dispositif constitu dune bote isotherme et des packs S8 a permis de maintenir les
pupes une temprature de 10 3C et de les transporter pendant 2-3 jours jusquau centre dmergence
de lISRA, pour produire des mles striles utilisables pour la technique de linsecte strile. Un contrle
qualit a t ralis sur un chantillon de 50 pupes prlev dans chaque lot de pupes (minimum 2 lots par
envoi) pour dterminer laptitude denvol des mles striles et leur survie sous stress ( jeun). Le reste des
pupes utilis pour les lchers sur le terrain a t considr comme tmoin. Le protocole qualit dcrit
permettra un suivi prcis de la qualit des mles striles utiliss dans les programmes oprationnels
dradication dans le cadre de la PATTEC. Un outil molculaire de discrimination de mles striles lchs
et sauvages a galement t dvelopp partir du gne mitochondrial COI (cytochrome oxydase) et a
montr que les squences COI des mouches lches (produites en insectarium) sont 100% identiques
entre elles et diffrentes de celles des mouches sauvages. Par ailleurs, afin de dterminer les conditions
optimales dlevage de souches de G. p. gambiensis et de dterminer la souche qui sera la plus adapte
tel ou tel environnement ou pays dans le cadre dune lutte avec une composante lcher de mles striles,
les traits de vie (survie et fcondit) de trois souches de G. p. gambiensis (souches originaires du Burkina
Faso 7 (BKF), Sngal (SEN) et souche introgresse (SENbkf) ont t valus dans diffrentes conditions
de tempratures et dhumidits relatives. La temprature optimale dlevage en masse a t de 25 1C,
24,6 1C et 23,9 1C pour BKF, SENbkf et SEN respectivement. La variation de lhumidit relative
(entre 40 et 75%) a eu trs peu dinfluence sur la survie et la fcondit. La souche BKF a mieux rsist
de fortes tempratures que les souches SEN et SENbkf, mais la temprature limite de survie a t de 32C
pour les trois souches.
Evaluation multicentrique d'un Elisa pour la dtectiuon d'antigne de
Cryptosporidium spp. dans les selles humaines
RAZAKANDRAINIBE R. 1 , MERAT C. 2 , KAPEL N. 3 , SAUTOUR M. 4 , GUYOT K. 5 , GARGALA G. 1 ,
DUTOIT E. 6 , LE PAPE P. 2 , DALLE F. 4 , FAVENNEC L. 1 * , CRYPTO ANOFEL M. 7

1 EA 3800 CHU et Universit de Rouen


2 EA 1155 IICiMed CHU et Universit de Nantes
3 Laboratoire de Coprologie, CHU Piti Salptrire, Universit Paris Descartes Paris
4 UMR 1347 CHU et Universit de Dijon
5 U1019 - UMR 8204 - CIIL, IP Lille
6 CHU et Universit de Lille
7 Anofel

*Auteur correspondant : loic.favennec@chu-rouen.fr

Bien que la cryptosporidiose humaine soit frquente et responsable d'une diarrhe quelquefois grave, elle
est largement sous diagnostique, en partie parce que la dtection microscopique ncessite du temps et
un microscopiste expriment. La dtection rapide et prcise de Cryptosporidium spp. dans les selles est
donc d'importance clinique. Cette tude vise valuer les performances d'un kit ELISA (kit ELISA Copro
Cryptosporidium, Savyon Diagnostics) dtectant un antigne de Cryptosporidium dans les selles pour le
diagnostic de la cryptosporidiose humaine.

Des chantillons de selles contenant ou non des oocystes de Cryptosporidium spp. conserv dans du
bichromate de potassium et provenant de 39 hpitaux participant au rseau Crypto-ANOFEL ont t
utiliss au cours de cette tude. Cinquante selles contenant diffrentes espces de parasites (20 C.
hominis, 20 C. parvum, 4 C. felis, 2 C. cuniculus, 1 C. canis, 1 C. meleagridis, 1 C. tamia, et un nouveau
gnotype non dcrit) et dont la concentration en oocystes a t value, ont t analyses paralllement
par 2 laboratoires du rseau. En outre, 28 chantillons positifs (15 C. parvum et 13 C. hominis) ont t
analyss par un 3me laboratoire. Cinquante, 60, et 60 chantillons ngatifs distincts (PCR ngatif) ont t
respectivement tests dans les 3 laboratoires participants. Les tests ELISA ont t effectus et valids
selon les instructions du fabricant. Le test exact de Fisher a t utilis pour l'analyse statistique des
rsultats.

Pour 12 chantillons de selles contenant des oocystes de C. parvum, aucune diffrence de DO n'a t
trouve entre les chantillons qu'ils soient conservs dans du K2CrO4, frais et congels. La variation de la
DO des chantillons positifs n'est pas significative entre les prlvements de selles contenant de <1 76
oocystes sur 400 champs microscopiques. Sur les 50 chantillons positifs en PCR valus en double, 47
ont t retrouv positifs en ELISA par les 2 laboratoires. Les rsultats ne montrent aucune diffrence entre
les DO pour les chantillons avec C. parvum, C. hominis et C. canis. Deux chantillons C. felis et un
chantillon C. hominis ont des DO juste au-dessus du seuil de positivit. Pour 2 chantillons (1 C. hominis
et 1 gnotype non rapport), des rsultats discordants ont t trouvs par les 2 laboratoires avec des DO
proches du seuil chaque fois. Un rsultat faux ngatif a t observ pour un prlvement contenant des
oocystes de C. cuniculus. Sur les 170 chantillons ne contenant pas doocystes de Cryptosporidium
(confirm par PCR), 4 dont un prlvement infect par Strongylodes stercoralis ont t retrouvs positifs
en ELISA.

En conclusion, le Kit CoproELISA Cryptosporidium apparat trs sensible et spcifique pour le diagnostic
de la cryptosporidiose que ce soit sur des prlvements de selles fraiches ou de selles conserves dans du
bichromate de potassium. A lexception de C. cuniculus, les autres gnotypes ont pu tre dtects. Sur les
83 chantillons contenant des oocystes, 82 sont positifs, les DO sont similaires que ce soit pour les
chantillons avec une faible ou une forte concentration concentration en oocystes. Un faux ngatif a t
observ. Nous retrouvons une spcificit 97,6% et une sensibilit 98,8 %, les valeurs prdictives
positives et ngatives tant respectivement de 95,35% et 99,4%. Cette technique apparait donc plus
sensible et spcifique que les tests immunochromatographiques valus prcdemment par le rseau.
Influence de la slection des lieux de dfcation par les chats sur la
contamination des sols par Toxoplasma gondii dans les exploitations laitires
SIMON J. 1 * , KURDZIELEWICZ S. 1 , JEANNIOT E. 1 , DUPUIS E. 1,2 , MARNEF F. 2 , AUBERT D. 1,2 ,
VILLENA I. 1,2 , POULLE M. 1

1 Laboratoire de Parasitologie, EA 3800, SFR CAP-SANT, Universit de Reims Champagne-Ardenne,


France
2 Laboratoire de Parasitologie, Hpital Maison blanche, CHU Reims, France

*Auteur correspondant : julie.rabeisensimon@gmail.com

Les flins, et notamment les chats domestiques, sont responsables de la contamination environnementale
par les oocystes du parasite Toxoplasma gondii (T. gondii). Lhtrognit spatiale de la distribution de
ces oocystes explique en grande partie les variations du risque dinfection des htes intermdiaires de T.
gondii, parmi lesquels figurent notamment les hommes et les animaux de rente. En milieu urbain, la
contamination du sol par les oocystes semble strictement localise dans les zones utilises par les chats
pour dfquer. En milieu rural, les fermes ont t identifies comme des points sources pour la
contamination environnementale en raison notamment des fortes densits de chats prsents. Cependant,
aucune donne nest actuellement disponible sur la localisation des lieux de dfcation des chats dans les
fermes, ni sur la distribution de la contamination des sols par T. gondii. Notre tude, conduite au sein
dexploitations laitires, vise donc : i) identifier les zones prfrentiellement utilises par les chats pour
dfquer et ii) estimer linfluence du patron spatial de dpt des fces par les chats sur la distribution de la
contamination environnementale. Les sites de dfcations utiliss par les chats (crottiers) ont t
recherchs sur six exploitations laitires des Ardennes, toutes les six semaines, pendant un an. Un
ensemble de caractristiques descriptives du lieu (ex : type de substrat, prsence ou non du btail, etc.)
ont t releves pour chaque crottier et au niveau de localisations alatoires pour identifier, par
comparaison, les caractristiques des lieux slectionns par les chats pour dfquer. En parallle, 550
chantillons de sol ont t rcolts sur ces mmes fermes au niveau des crottiers identifis et des
localisations alatoires. Les prlvements ont t prtraits puis analyss laide de PCR en temps rel.
Lanalyse montre que les chats slectionnent des sites meubles (ex : terre, sable, bl, granuls pour btail)
et vitent les zones fortement frquentes par le btail. Cependant, il existe un fort renouvellement de ces
sites de dfcation au cours du temps, en fonction des variations de la configuration spatiale de la ferme.
En fonction de la ferme tudie, l'ADN de T. gondii a t dtect dans 36,2% 66,3% des chantillons de
sol. Sur l'ensemble des fermes, les crottiers sont significativement plus contamins que les localisations
alatoires et constituent, par consquent, des zones fort risque de contamination pour lhomme et
lanimal. Cependant, une large proportion dchantillons contamins (25% 62,5%) a galement t
trouve en dehors des crottiers. Ces prvalences dans les sols augmentent avec le nombre de jeunes
chats ns dans lanne, avec la proportion de chats infects et avec le taux de renouvellement des
crottiers. Ces rsultats offrent dintressantes perspectives en termes de gestion et de prvention des
risques dinfection pour les hommes et les animaux de rente dans les exploitations laitires.
Atovaquone encapsulation into nanoemulsions for better efficacy on
mitochondria of resistant Plasmodium falciparum strain
SUYYAGH-ALBOUZ S. 1 , AL-RIFAI R. 1 , SONG Z. 2 , LIEVIN LE MOAL V. 1 , BRUXEL F. 3 , NICOLAS V.
4
, LOISEAU P. 1 , TEIXEIRA H. 5 , MEUNIER B. 6 , TSAPIS N. 7 , FATTAL E. 7 , COJEAN S. 1 *

1 Universit Paris-Sud, UMR 8076 BioCIS CNRS, LabEx LERMIT, Chtenay-Malabry, France
2 Universit Paris-Sud, Institute for Integrative Biology of the Cell (I2BC), CEA, CNRS, Gif-sur-Yvette,
France
3 Universidade Federal do Pampa, Brsil
4 UMS-IPSIT Universit Paris-Sud Chtenay-Malabry, France
5 Universidade Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Brsil
6 Universit Paris-Sud, Institute for Integrative Biology of the Cell (I2BC), CEA, CNRS, Gif-sur-Yvette,
France
7 Institut Galien Paris-Sud, CNRS, Univ. Paris-Sud, Universit Paris-Saclay, 92296 Chtenay-Malabry,
France

*Auteur correspondant : sandrine.cojean@u-psud.fr

Background: Drug delivery systems can improve the efficacy of common antimalarial drugs by modifying
drug distribution to its target and reversing parasite resistance. We hypothesized that encapsulating
atovaquone could be used to improve its bioavailability and efficacy against cytochrome b in the parasite
mitochondria.

Materials and methods: We have reformulated atovaquone (atq) into nanoemulsions (NEatq) to enhance its
activity on P. falciparum sensitive and atq resistant strains. We have compared NEatq and atq 50%
inhibitory concentration (IC50) in vitro and have studied the parasite mitochondrial activity by confocal
microscopy. The expression of cytochrome b gene (cytb) which is the main atovaquone target was
evaluated on treated parasites. Finally, the NEatq action on cytochrome bc1 complex of isolated
mitochondria of Saccharomyces cerevisiae strains harboring main parasite cytb mutations was studied.

Results: A strong mitochondrial alteration in atq resistant strain treated with NEatq was obtained suggesting
parasite damages. After NEatq treatment, resistant parasites showed a loss of mitochondrial membrane
potential integrity. We also found that the sensitive strain increases the expression of cytochrome b gene
after stress with sub-lethal concentration (100 nM) of atq trying to bypass atq action. In contrast, this gene
is underexpressed in the resistant strain after the same atq dose trying to limit the presence of its target. In
treated sensitive and resistant parasites with the same dose of NEatq similar cytochrome b expression was
observed.

To conclude, obtained data show that yeast cytochrome bc1 complex harboring P. falciparum atq
resistance mutation is twelve-fold more sensitive to NEatq than to atq.

Conclusions: All these results show that we can overcome the atq Plasmodium falciparum resistance by
encapsulation of the drug in nanoemulsions.
Caractrisation molculaire dEchinococcus granulosus sensu stricto et
d'Echinococcus canadensis chez lhomme et lanimal en Algrie.
ZAIT H. 1 * , KOUIDRI M. 2 , LARCHER-GRENOUILLET F. 3 , UMHANG G. 4 , MILLON L. 3,5 , HAMRIOUI
B. 1 , GRENOUILLET F. 3,5

1 Parasitologie-Mycologie, CHU Mustafa, Alger, Algrie


2 Institut de Sciences Vtrinaires, Universit Ibn-khaldoun, Tiaret, Algrie
3 CNR Echinococcose alvolaire & Centre Collaborateur OMS Echinococcose, CHRU Besanon, France
4 ANSES, LRFSN - LNR Echinococcus, Malzville, France
5 UMR Chrono-environnement, Universit de Bourgogne Franche-Comt, Besanon, France

*Auteur correspondant : zaithouria@gmail.com

Lchinococcose kystique EK est une anthropozoonose endmique au Maghreb, due Echinococcus


granulosus sensu lato. En Algrie, les prcdentes tudes de gnotypage des lsions parasitaires issues
danimaux ont caractris essentiellement E. granulosus sensu stricto (s.s.), gnotypes G1 et G3, chez
lanimal. E. canadensis (genotype G6) ny a t jusquici identifi que chez le dromadaire. Les donnes de
gnotypage de lsions humaines sont jusquici limites dans ce pays. Nous avons ainsi conduit une tude
de gnotypage de lsions dEK, dorigine humaine et animale, pour prciser lpidmiologie molculaire et
la diversit gntique du parasite en Algrie.

Notre tude a inclus quarante-quatre lsions d'EK dorigine humaine, issues de patients admis
essentiellement dans les units de chirurgie du CHU Mustafa dAlger, et seize lsions dorigine animale,
collectes dans des abattoirs gographiquement distants, Tiaret et Tamanrasset. La caractrisation
molculaire a repos sur le squenage de fragments de deux gnes mitochondriaux, COI et NAD
(respectivement cytochrome c oxidase subunit I et NADH dehydrogenase subunit I).

Chez lhumain, le gnotype G1 dE. granulosus s.s. a t majoritairement retrouv (90.7%), quatre lsions
(7.4%) ont t identifis comme E. granulosus s.s. G3 et une lsion comme E. canadensis G6 (1.8%). Ce
cas d'infection humaine avre E. canadensis G6 a t observ chez une femme Touareg vivant dans
lextrme sud dsertique de lAlgrie (Tamanrasset). Parmi les lsions dorigine animale, tous les kystes
provenant de moutons, bovins et caprins ont t identifis comme E. granulosus s.s. G1 et les deux lsions
issues de dromadaires comme E. canadensis G6. Vingt haplotypes concatns (COI+NDI) ont t
caractriss. Au sein dE. granulosus s.s., un haplotype (HL1) sest rvl largement prdominant, aussi
bien chez lhomme que chez lanimal (71%).

Notre travail a montr la prdominance dE. granulosus s.s. chez lhomme et chez le btail, avec la
description dun haplotype commun partag au sein dE. granulosus s.s. G1, correspondant lhaplotype
majoritairement dcrit en Europe et au Maghreb. E. canadensis G6 semble limit lextrme sud algrien,
aussi bien chez lhomme que chez le dromadaire.

Socit Franaise de PARASITOLOGIE

Communications Affiches

23 et 24 mars (matin) 2016



Myiases nosocomiales, Lucilia sericata et Musca domestica.

ABDELOUAHED K. 1 * , ADJMI HAMOUDI H. 1 , LAZRI L. 1 , BEKHOUCHE S. 1 , ZITOUNI Z. 1 , CHERFI


L. 2 , SAHRAOUI M. 2

1 SERVICE PARASITOLOGIE-MYCOLOGIE , HCA,ALGERIE


2 SERVICE DE REANIMATION , HCA,ALGERIE

*Auteur correspondant : abdelouahedkhaled1@gmail.com

Les myiases dcrites par Hope en 1840 (du grec myia = mouches) sont des infections parasitaires
rsultant de linfestation par les larves de mouches. Celles-ci se nourrissent de tissus vivants ou ncross.
Mais leur cycle chez Ihomme aboutit une impasse, et la larve, ne pouvant voluer, sort spontanment.

Les myiases nosocomiales demeurent rares dans les hpitaux, cette entit est dfinie en fonction du sjour
des malades lhpital et de lapparition des larves.

Nous dcrivons deux cas de myiases nosocomiales. Pour le premier cas il sagit dune myiase
nasopharynge provoque par des larves de Lucilia sericata (diptre : Calliphoridae ; Meigen, 1826),
communment appele <> chez un polytraumatis g de 27 ans hospitalis au niveau de la ranimation
chirurgicale pour un traumatisme crnien suite un accident de circulation survenu en mai 2012 dans une
zone semi dsertique 130 Km du chef-lieu de la wilaya de Ouargla. Admis dabord lHMRO (hpital
rgional de larme) environ 6h aprs laccident, vacu par la suite 24h aprs lHCA (hpital central de
larme), opr 48h aprs pour un hmatome extradural, pass 72h, il y a eu apparition de larve au niveau
du naso et oropharynx.

Concernant le deuxime cas il sagit dune myiase cutane provoque par des larves de Musca domestica.
(Diptre ; Muscidae Linnaeus, 1758) chez un traumatisme balistique, aprs une amputation du membre
infrieur gauche, le patient a t hospitalis en post opratoire dans une unit de soins intensifs en
ranimation chirurgicale.

A travers ces deux observations nous rappelons lventualit de ces affections en milieu hospitalier
sachant que la dtermination de lorigine de la contamination est complexe pour affirmer le caractre
nosocomial. Penser faire le diagnostic de la myiase est dune importance capitale, en particulier dans les
services de ranimation.
Diagnostic srologique et molculaire des leishmanioses cutanes lhpital
central de larme, en Algrie.
ADJMI HAMOUDI H. 1 * , ABDELOUAHED K. 1 , LAZRI L. 1 , BEKHOUCHE S. 1 , BENAI K. 1 , LOUNI M.
1
, BOUDJARDA S. 1 , BACHI F. 2

1 Hpital central de larme, Alger, Algerie


2 Institut Pasteur Algrie

*Auteur correspondant : ahaiet@yahoo.fr

La leishmaniose est endmique en Algrie. La forme viscrale est largement dcrite chez lenfant comme
chez ladulte, mais cest la forme cutane qui est la plus frquente. Les services de sant en colligeant des
milliers de cas chaque anne sur la base des examens cliniques prouvs ou non par le frottis cutan et / ou
la culture. Dans cette tude, mene sur deux annes successives, lHpital Central des Armes (HCA),
nous effectuons plusieurs techniques de diagnostic afin de tenter leur valuation permettant
ventuellement de revoir les chiffres rapports.

MATERIEL : Anne 2012-2013 : 48 patients dont 42 hommes et 6 femmes, prsentant une ou plusieurs
lsions cutanes, dge moyen 26 ans, avec notion de sjour dans plus de 20 wilayas en particulier celle
de Biskra (25 sujets).

Anne 2012-2013 : 49 patients dont 44 hommes et 4 femmes avec les mmes caractristiques
pidmiologiques.

METHODES : pour les 91 patients, des prlvements de srosits et de sang total sont effectus dans le
but de procder des talements sur lames colores au Giemsa, des cultures sur milieux NNN et RPMI, la
technique d immunofluorescence indirecte (Ag figur, bioMerieux), le WB (LD BIO) et la PCR ciblant les
fragments de lADN kintoplastique selon les protocoles de Lachaud, 2002 et Keer, 2006, utilisant les
amorces K13A :5-GTGGGGAGGGGCGTTCT-3 et K13B :5-ATTTTACACCAACCCCCAGTT-3, mise au
point au laboratoire de parasitologie-mycologie de l HCA.

RESULTATS : lED tait positif chez 20 malades et la culture tait positive chez 13 dont 10 taient ngatifs
lED. LIFI tait positive chez 8 sujets dont 2 taient ngatifs lED et 1 ngatif en culture. Le WB tait
positif avec prsence de 2 bandes 14 et/ou 16 KDa chez 36 patients : 20 taient ngatifs lED, 25 taient
ngatifs en culture et 30 ngatifs en IFI. La PCR tait positive dans 39 cas, elle a redress le diagnostic
dans 23 cas ngatifs lED, 27 cas ngatifs en culture, 32 ngatifs en IFI et 10 ngatifs par WB.
Profil du portage parasitaire intestinal chez les cuisiniers au Laboratoire de
Parasitologie et Mycologie Mdicale de l'Hopital Militaire d'Instruction Mohamed
V - Rabat

AKEL Z. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie Mdicale de l'Hpital militaire d'instruction Mohamed V - Rabat,


Maroc
2 Facult de mdecine et de pharmacie,Universit Mohamed V - Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : zeineb.akel@gmail.com

Introduction : Le parasitisme intestinal constitue un problme de sant publique dans les pays en voie de
dveloppement. Lobjectif tait dtudier le profil pidmiologique des parasitoses digestives chez les
cuisiniers au laboratoire de Parasitologie-Mycologie de lHMIMV de Rabat lors des bilans de contrle
coprologique et dvaluer lintrt du dpistage systmatique priodique.

Matriel et mthodes : Il sagit dune tude rtrospective descriptive qui sest tale sur une priode de 3
ans : du 1er janvier 2013 au 31 dcembre 2015 ; dans laquelle nous avons inclus tous les prlvements
des selles mises par le personnel cuisinier issu des diffrentes units militaires dans le cadre dun
dpistage systmatique priodique. Les rsultats de lexamen parasitologique des selles (J1 J4 J7) ont t
recueillis partir des feuilles de paillasse du service. Tous les rsultats ont t saisis laide du
programme Microsoft Office Excel 2010 et traits par le logiciel SPSS 10.0.

Rsultats : Ltude a port sur un ensemble de 1249 prlvements dont 548 taient positifs soit un indice
parasitaire de 43,87%. Blastocystis hominis vient en tte avec une prvalence de 30,1% (n=450). Le taux
des amibes tait de 14,04% (n=210) (Endolimax nana 10%, Entamoeba coli 2,7%, Pseudolimax butschlii
1%), suivi des flagells 8,96% (n=134) (Dientamoeba fragilis 8,4%, Giardia intestinalis 0,4%, 1 seul cas de
Chilomastix mesnili et de Trichomonas intestinalis). Le sexe ratio H/F tait de 0,1 et Lge moyen tait de
34,06 8,1 [20-68] ans.

Conclusion : Le portage parasitaire intestinal chez les cuisiniers tait prdomin dans sa quasi-totalit par
des protozoaires non pathognes. Afin de faire face la propagation de linfestation par ces derniers, des
efforts doivent tre mis en place dans le but damliorer davantage le niveau dhygine alimentaire et
fcale. Cette tude nous a permis aussi de rvaluer lutilit des examens coprologiques dans le dpistage
systmatique ; de limiter ainsi la prescription de cet examen aux personnes prsentant la symptomatologie
clinique lie aux parasitoses
Association distomatose hpatique Fasciola hpatica et ascaridiose chez
lenfant. A propos dune observation.
AKHATAR B. 1,2 * , DAHRAOUI S. 1,2 , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , LAHLOU S. 3 , KHAOUDI I. 3 , AZZA
N. 3 , BENAZZOUZ M. 3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Laboratoire de biologie mdicale Genelab Oum Rabiaa, Casablanca, Maroc

*Auteur correspondant : dr.bouth@gmail.com

Les distomatoses sont des zoonoses cosmopolites dues au dveloppement accidentel chez lhomme de
parasites trmatodes. La distomatose hpatique Fasciola hepatica est la fasciolose la plus souvent
rencontre. Cest une pathologie rarement dcrite au Maroc. Nous rapportons un cas dune distomatose
hpatique Fasciola hepatica associe une ascaridiose dans un contexte de gophagie.

Cette observation prsente le cas dun enfant g de 2 ans et demi, se plaignant de douleurs abdominales
avec diarrhe dans un contexte dapyrexie. Le bilan biologique initial a objectiv une hyper osinophilie
marque associe une anmie ferriprive et un syndrome inflammatoire. Lexamen parasitologique des
selles a mis en vidence des ufs dascaris et des ufs avec une forme adulte de Fasciola hepatica. Le
diagnostic a t affin par la srologie et par le bilan radiologique.

Nous discuterons, travers ce cas clinique, lassociation de la distomatose hpatique et de lascaridiose


dans un contexte de gophagie.
Les amibes intestinales : cas du CHU Ibn Sina de rabat
ALAOUI I. 1,2 * , OUASSOU A. 1,2 , MOUSTACHI A. 1,2 , LYAGOUBI M. 1,2 , AOUFI S. 1,2

1 Laboratoire Central de parasitologie-mycologie du Centre hospitalier Ibn Sina , Rabat-Maroc


2 Facult de mdecine et de pharmacie Universit Mohammed V de Rabat .

*Auteur correspondant : imanealaoui2009@live.fr

Introduction : Les amibes sont des protozoaires constituant le sous-embranchement des Rhizopodes.
Entamoeba histolytica reste la seule amibe pathogne de lhomme responsable de lamibiase maladie,
pathologie frquente au Maroc. Dautres sont non-pathognes, tels que Entamoeba coli, Entamoeba
hartmanni, Pseudolimax butschlii et Endolimax nana. Lobjectif de notre travail est dtablir le profil
parasitologique des amibes intestinales diagnostiques au laboratoire de parasitologie du CHU Ibn Sina
Rabat.

Matriel et mthodes : Etude rtrospective tale du 1er janvier 2014 au 31 dcembre 2015 incluant
lanalyse de 6086 examens parasitologiques des selles manant de diffrents services du CHU Ibn Sina -
Rabat. Les techniques utilises sont bases sur un examen direct ltat frais et deux mthodes
denrichissement notamment les techniques de Bailenger et de Ritchie.

Rsultats : Sur 6086 chantillons, lexamen parasitologique tait positif chez 690 malades soit une
prvalence de 11,33%. Le sexe fminin tait majoritaire avec 60,52 %. 52,68 % des demandes taient
pour un bilan, la diarrhe tait le motif le plus frquent de la prescription de lexamen parasitologique des
selles (21,73 % des cas), la rectocolite hmorragique tait prsente dans 3,62 % des cas et la maladie de
Crohn dans 2,17 % des cas. Les amibes intestinales retrouves taient reprsentes majoritairement par
Entamoeba histolytica chez 510 patients soit 73,91 % , dont 21.88 % sous forme vgtative dEntamoeba
histolytica histolytica, 11.17 % pour la forme vgtative dEntamoeba histolytica minuta et 66, 95% de
formes kystiques dEntamoeba histolytica. La forme kystique d Entamoeba coli tait isole dans 14,78 %
des cas, suivi de kystes d Endolimax nana dans 10 % des cas, des kystes de Pseudolimax butschlii dans
1,01 % et des kystes dEntamoeba hartmanni dans 0,3 % des cas.

Conclusion : La prvalence des amibes intestinales diagnostiques au CHU Ibn Sina reste leve. Les
conditions de vie insalubres et la mauvaise hygine favorisent lendmicit et la prennisation de la
transmission, le meilleur moyen de lutte contre ce flau rside dans la prvention, lhygine et la
sensibilisation individuelle et collective de la population.
Kyste hydatique du muscle psoas : propos dun cas
ALAOUI I. 1,2 * , BENAISSA E. 1,2 , MOUSTACHI A. 1,2 , AOUFI S. 1,2 , LYAGOUBI M. 1,2

1 Laboratoire Central de parasitologie-mycologie du Centre hospitalier Ibn Sina , Rabat-Maroc


2 Facult de mdecine et de pharmacie Universit Mohammed V de Rabat .

*Auteur correspondant : imanealaoui2009@live.fr

Introduction : Dans les pays dendmie hydatique, certaines localisations rares du kyste hydatique ont t
rapportes. La localisation musculaire isole reste une entit exceptionnelle Sa frquence serait de 2 3 %
de toutes les localisations. Dans la littrature mondiale, quelques cas cliniques du kyste hydatique du
muscle psoas ont t dcrits. Nous rapportons une nouvelle observation dun kyste hydatique localis au
niveau du muscle psoas.

Observation : Homme g de 32 ans, se plaignait depuis quatre mois des douleurs diffuses du flanc
gauche avec sensation de pesanteurs associes une fivre sans amaigrissement ni altration de ltat
gnral. Lexamen clinique trouvait une masse au niveau de la fosse iliaque gauche, sensible la palpation
et fixe au plan profond. Lchographie abdominale avait mis en vidence une image anchogne
multiloculaire cloisonne, situe au niveau de la fosse iliaque gauche. Le scanner a confirm la prsence
dun kyste hydatique stade III au dpend du muscle psoas gauche. Le reste de lexploration ne montrait
aucune autre localisation hydatique. La srologie hydatique par test ELISA tait positive 24 UI /ml et la
raction dimmunofluorescence indirecte 80 UI/ml. Le patient a t opr par une incision para rectale
gauche dcouvrant un kyste hydatique unique retro pritonal localis sur la face antrieure du muscle
psoas gauche, constitu de plusieurs logettes spares du septum. Dans notre laboratoire, nous avons
reu la pice dexrse chirurgicale constitue dune membrane proligre du kyste hydatique et de
nombreuses vsicules filles. Lexamen microscopique du culot de centrifugation du liquide hydatique a mis
en vidence des scolex et de nombreux crochets confirmant ainsi le diagnostic.

Discussion : Lhydatidose est une anthropozoonose due la forme larvaire d'Echinococcus granulosus.
Elle est rpandue de faon endmique en Afrique du Nord et dans certains pays du pourtour du bassin
mditerranen. Toutes les localisations de lhydatidose ont t dcrites, dans 90 % des cas, elle touche le
foie et le poumon. Latteinte des tissus mous est inhabituelle (0,5 4,7 % des cas) et intresse
principalement les muscles squelettiques du cou et des membres infrieurs. Lchographie est un examen
anodin de premire intention avec une fiabilit diagnostique estime 96 %. Dans les localisations
profondes comme le psoas lintrt dune tude scanographique est ncessaire. La biologie se rsume
essentiellement la srologie hydatique. Elle est dun grand apport diagnostic lorsquelle est positive. Sa
ngativit nlimine pas le diagnostic de kyste hydatique.

Conclusion : Le kyste hydatique isol du psoas est une entit rare. Le diagnostic repose essentiellement
sur l'chographie et le scanner, la biologie apporte des lments supplmentaires. Le meilleur traitement
repose sur la prvention de lhydatidose qui, malheureusement, continue svir ltat endmique dans
notre pays.
Neurocysticercose de dcouverte fortuite au cours dune rcidive mtastatique
crbrale dun adnocarcinome du sein : le hasard fait parfois mal les choses
BADAOUI L. 1 * , SODQI M. 1 , MARIH L. 1 , OULADLAHSEN A. 1 , CHAKIB A. 1 , MARHOUM EL FILALI K.
1

1 CHU IBN RCHD

*Auteur correspondant : medecinbadaoui@gmail.com

Introduction

La neurocysticercose reste une infection frquente dans la zone tropicale. Sa symptomatologie est
polymorphe et est fonction de la localisation et de l'tat du kyste. Nous rapportons dans ce travail un cas
clinique de neurocysticercose de dcouverte fortuite lors du diagnostic d'une mtastase crbrale d'un
adnocarcinome mammaire.

Observation

Une dame de 37 ans, antcdent de thyrodectomie il y a 2 ans sous traitement substitutif base de
Levothyrox, suivie pour adnocarcinome du sein gauche depuis 2011 trait par chimio-radiothrapie avec
mastectomie et curage ganglionnaire. L'volution tait marque par une rmission complte. Le bilan
d'extension tait normal. Un suivi clinique et radiologique a t instaur avec un traitement hormonal.
Admise en mars 2014 pour une symptomatologie neurologique : cphales, vertiges, troubles de l'quilibre
voluant depuis 1 mois. L'examen clinique l'admission trouvait : un tat gnral conserv, apyrtique
37C, TA : 120/80mmHg, pouls : 86/mn, FR: 16 cycles/mn. L'examen neurologique trouvait une patiente
consciente, sans dficit neurologique avec prsence d'un largissement du polygone de sustentation. Le
scanner crbral montrait une lsion temporo-occipitale gauche avec prise de contraste en couronne. Une
origine mtastatique de la lsion a t discute. Une IRM crbrale a t ralise et montrait la lsion
unique temporo-occipitale mesurant 32mm avec dme perilesionnel. Le dosage de CA15-3 montrait un
taux lev 159UI/ml (N<30UI/ml) en faveur d'une rcidive d'adnocarcinome. Une BST a t ralise et
l'examen anatomopathologique de la pice biopsique montrait une mtastase de l'adnocarcinome et la
prsence d'un scolex vivant. Le bilan biologique tait normal. Le diagnostic de neurocysticercose de
dcouverte fortuite associe une mtastase crbrale de l'adnocarcinome mammaire a t retenu. La
patiente a t traite par corticothrapie (2mg/kg/jour), radiothrapie puis chimiothrapie. Le traitement de
la neurocysticercose a t fait base d'Albendazole (15mg/kg/jour pendant 14 jours). L'volution a t
marque par la disparition des symptmes, une nette rgression de la lsion l'IRM crbrale de contrle
(25mm versus 32mm) et la normalisation du CA15-3. Une deuxime cure d'Albendazole de 14 jours a t
prescrite 1 mois de la premire cure.

Conclusion

Le diagnostic de neurocysticercose fait partie du diagnostic diffrentiel des mtastases crbrales.


Paludisme dimportation au Maroc : Aspect pidmiologique
BADAOUI L. 1 * , MUSTAPHA S. 1 , MARIH L. 1 , OULADLAHSEN A. 1 , CHAKIB A. 1 , MARHOUM EL
FILALI K. 1

1 Chu IBN ROCHD

*Auteur correspondant : medecinbadaoui@gmail.com

Introduction :

Le paludisme ou malaria est une maladie parasitaire due Plasmodium potentiellement mortelle, transmise
par le moustique anophle femelle. Depuis 2005 aucun cas de paludisme autochtone na t dclar au
Maroc qui a t inscrit par lOMS sur la liste des pays ayant radiqu le paludisme en 2010. En dpit de
cette radication, le paludisme dimportation continue svir au Maroc.

Objectif :

Dterminer la prvalence du paludisme dimportation et les espces plasmodiales responsables dans le


service de maladies infectieuses

Mthodologie :

Il sagit dune tude rtroprospective descriptive transversale stendant sur une priode de 18 mois de
janvier 2012 juin 2013. Elle sest droule dans le service de maladies infectieuses de CHU Ibn Rochd.
Ont t inclus tous les patients prsentant un paludisme confirm. La confirmation a t faite par la goutte
paisse et frottis mince. Le recueil des donnes a t faite partir des fiches de dclaration obligatoire du
paludisme

Rsultats :

Nous avons collig 57 patients. La moyenne dge tait de 305ans. Le sexe masculin a prdomin avec
40 cas soit 70,17% et un rapport de 2,35H/1F. La prophylaxie antipalustre a t prescrite 3 patients
(5,26%) avant le dpart du Maroc. Les patients taient originaires de lAfrique subsaharienne dans 28 cas
(49%), du Maroc dans 25 cas (44%), des Etats-Unis dans 2 cas (3,50%), du Brsil dans 1 cas (1,75%) et
de la Russie dans 1 cas (1,75%). Les lieux de sjour des patients taient exclusivement les pays de
lAfrique subsaharienne. Plasmodium falciparum a t isol chez 56 patients (98,25%) et P. vivax chez un
patient (1,75%). Le seul patient qui portait le P.vivax avait sjourn au Niger. Chez 49 patients (85,96%), il
sagissait dun accs palustre simple sans vomissements dont 84,21% de cas de P. falciparum (n=48) et
1,75% de cas de P. vivax (n=1). Les cas de P. falciparum ont t traits par lassociation Arthmeter +
Lumefantrine (Coartem) dans 26 cas et par la quinine rsorcine (Quinimax) comprim dans 22 cas. Le seul
cas de P. vivax a t trait par la Chloroquine (Nivaquine). Lhospitalisation a t indique chez 8 patients
soit 14,04% dont 2 cas de neuropaludisme. Dans les 6 autres cas, lhospitalisation a t indique raison
des vomissements qui ncessitent un traitement par voie parentrale. Les 2 cas de neuropaludisme ont t
initialement hospitaliss la ranimation dont un est dcd au cours de lhospitalisation et lautre
transfr dans le service de maladies infectieuses aprs stabilisation de son tat. Tous les patients
hospitaliss ont t traits ladmission par la Quinine rsorcine injectable qui a t relay par le Coartem
par voie orale.

Conclusion :

Le paludisme dimportation reste un problme de sant publique au Maroc cause des mouvements
frquents des habitants entre le Maroc et la rgion subsaharienne. Lencadrement sanitaire des voyageurs
est un lment cl pour pallier ce problme.
Local cyclopoid copepods as biocontrol agents against invasive mosquito
species in northern Italy

BALDACCHINO F. 1 * , BRUNO C. 2 , VISENTIN P. 3 , BLONDEL K. 1 , ARNOLDI D. 1 , HAUFFE H. 1 ,


RIZZOLI A. 1

1 Department of Biodiversity and Molecular Ecology, Research and Innovation Centre, Fondazione
Edmund Mach, San Michele all'Adige, Italy
2 Department of Sustainable Ecosystems and Bioresources, Research and Innovation Centre, Fondazione
Edmund Mach, San Michele allAdige, Italy
3 Entostudio, Ponte san Nicol, Italy

*Auteur correspondant : frederic.baldacchino@fmach.it

Aedes albopictus and Aedes koreicus are invasive mosquito species that have colonized northern Italy and
are potentially zoonotic vectors. Cyclopoid copepods are natural predators of mosquito larvae and can be
useful biological control agents in artificial containers used as breeding sites by Aedes mosquitoes. In this
study, we evaluated the predation efficacy of two cyclopoid copepod species, Macrocyclops albidus and
Mesocyclops leuckarti, common in natural conditions in northern Italy, against Ae. albopictus and Ae.
koreicus larvae under laboratory conditions. In each predation test, one female adult copepod was placed
with 50 first instar larvae of a single mosquito species in a small Petri dish filled with 10 mL of water. After
24 hours, the mean number (standard error) of larvae killed by one M. albidus female was 18.6 1.3 Ae.
koreicus and 20.9 1.3 Ae. albopictus, and the mean number killed by one M. leuckarti female was 25.8
2.8 Ae. koreicus and 36.1 4.2 Ae. albopictus. Predation tests were also conducted using larger Petri
dishes filled with 30 mL of water, resulting in reduced predation rates. Our findings indicate that M. albidus
and M. leuckarti are effective larval predators of Ae. albopictus and Ae. koreicus.

An ovigerous female of Macrocyclops albidus


(Jurine, 1820)
Neurobilharziose : propos de 2 cas diagnostiqus au CHU de Rennes
BELAZ S. 1 , DEVAUX J. 1 , GROLHIER C. 2 , CHIFFOREANU D. 1 , TATTEVIN P. 1 , GANGNEUX J. 1 *

1 CHU de Rennes
2 CH de Vannes

*Auteur correspondant : jean-pierre.gangneux@univ-rennes1.fr

Nous prsentons 2 cas de bilharziose avec tropisme neurologique afin de sensibiliser ce risque possible
chez les migrants mais aussi chez le voyageur revenant de zone dendmie.

Cas n1. Il sagit dun jeune homme de 21 ans hospitalis pour troubles de la marche et troubles
sphinctriens. LIRM mdullaire est en faveur dun processus expansif dallure tumoral du cne terminal.
Linterrogatoire retrouve un sjour dun an en Afrique du Sud. Le bilan retrouve une hyperosinophilie
sanguine 1100/mm3 ainsi quune hyperosinophilie dans le LCR (20 lments nucls dont 32% de
PNE). Les examens parasitologiques retrouvent des ufs de Schistosoma hematobium et de S. mansoni
dans les urines et dans la biopsie rectale, ainsi quune srologie bilharziose positive. Le patient a t trait
par des corticodes et du Praziquantel, permettant une rsolution de la symptomatologie.

Cas n2. Il sagit dune femme de 37 ans, dorigine brsilienne vue en consultation pour des crises
dpilepsie sensitives brachio-faciales. LIRM encphalique retrouve une lsion rolandique droite avec prise
de contraste htrogne faisant voquer un aspect tumoral. Le bilan biologique ne retrouve pas
dhyperosinophilie sanguine ni danomalie du LCR. La biopsie crbrale vise diagnostique retrouve de
faon fortuite des ufs de S. mansoni (coloration de Ziehl +). La srologie bilharziose ralise a postriori
est ngative en ELISA et montre une trace de P30-34 sur le western blot. La patiente est traite par une
corticothrapie et du Praziquantel.

Conclusion. Le tableau clinique des bilharzioses S. mansoni ou S. hematobium est classiquement


digestif ou urinaire mais la prvalence des atteintes neurologiques varie de 1 5% des cas selon les
tudes (Cartod-Artal et al. 2010 ; Ross et al. 2011). Toutefois, devant des tableaux cliniques vocateurs
dune pathologie tumorale chez des patients ayant sjourns en zone dendmie bilharzienne, il est
indispensable dvoquer ce diagnostic parasitaire qui indique alors une corticothrapie associe au
Praziquantel et permet dviter lintervention chirurgicale.
Prise en charge diagnostique et thrapeutique de la toxoplasmose congnitale :
10 ans dexprience lInstitut Pasteur de Tunis
BEN ABDALLAH R. 1 * , BOUDAOUARA Y. 1 , SIALA E. 1 , BEN ABDA I. 1 , SOUISSI O. 1 , MAATOUG R. 1
, AOUN K. 1 , BOURATBINE A. 1

1 Laboratoire Parasitologie-Mycologie, Institut Pasteur Tunis, Tunis, Tunisie

*Auteur correspondant : ismail_rym@yahoo.fr

Introduction : Le diagnostic prcoce de la toxoplasmose congnitale (TC) est primordial permettant


linstauration rapide dun traitement adquat. Lobjectif de ce travail est de rapporter les particularits de la
prise en charge diagnostique et thrapeutique de la TC en Tunisie.

Matriel et mthodes : Il sagit dune tude rtrospective mene au Laboratoire de Parasitologie-


Mycologie lInstitut Pasteur de Tunis entre Janvier 2005 et Dcembre 2015. Durant cette priode, 33 cas
de TC ont t diagnostiqus. Pour 5 cas, le diagnostic a t retenu en antnatal et le reste en no et post
natal. La confirmation et la datation de linfection toxoplasmique au cours de la grossesse a t faite par les
techniques srologiques classiques. La recherche de lADN parasitaire au niveau du liquide amniotique a
t faite par la technique PCR en temps rel. A la naissance, le bilan srologique a comport la recherche
dIgG et dIgM par la technique ELISA, la recherche dIgM par la technique ISAGA et ltude des profils
compars des IgG et des IgM par western blot. Le bilan clinique a comport un fond dil et une
chographie transfontanellaire.

Rsultats : Dix-neuf parturientes ont prsent une contamination au cours du 3me trimestre (57%), 8 au
cours du 2me trimestre (24%) et 5 au cours du 1er trimestre (15%). Pour une parturiente, la srologie
toxoplasmique na pas t demande au cours de la grossesse. Parmi les 16 cas o la PCR a t
pratique, 5 taient positifs (31%). Lchographie per-gestationnelle tait normale dans tous les cas.
Toutes les femmes ont reu la spiramycine lexception de 2 qui ont t mises demble sous traitement
curatif sans passer par la PCR. Suite la positivit de la PCR, le relais par un traitement curatif a t fait
dans 3 cas, les deux autres ont gard la spiramycine jusqu laccouchement. A la naissance, parmi les 5
nouveau-n (NN) dont le diagnostic antnatal tait positif, un na pas t trait, un a t mis demble sous
traitement curatif ds le premier jour de vie alors quune confirmation srologique du diagnostic de la TC a
t demand pour les 3 derniers. La confirmation srologique a t obtenue lge de 3 mois pour un,
lge de 1 mois pour un autre et le dernier J12 de vie et par consquent la mise sous traitement a suivi
ces dates. Pour les 28 NN dont le diagnostic antnatal tait ngatif ou non pratiqu, le diagnostic de la TC
a t retenu sur la prsence dIgM par ELISA au-del du 10me jour de vie dans 4 cas, sur la stabilit du
titre dIgG au-del du 4me mois dans 2 cas et sur la positivit du western blot dans 22 cas. A la
naissance, 3 NN ont prsent une choriortinite. Au cours du suivi, un cas de thrombopnie a t dtect
et 2 cas de neutropnie. Sept enfants ont prsent un rebond srologique larrt du traitement dont deux
ont t remis sous traitement. Le fond dil de contrle na pas dcel ni au cours ni l'arrt du traitement
laggravation des lsions oculaires dj existantes pour les 3 bbs. Il tait toujours normal chez les autres
NN.
Apport de l'identification molculaire des leishmanies dans l'tude co-
pidmiologique de la leishmaniose cutane zoonotique l'est de l'Algrie
BENSEGHIER S. 1 , HARRAT Z. 2 *

1 Parasitologue Maitre de confrences hospitalo universitaire , chef du service laboratoire, hopital militaire
universitaire Staoueli, Alger , Algrie
2 Parasitologue, service ecologie parasitaire et genetique des populations, institut pasteur d'Algerie, Algris

*Auteur correspondant : sofianebenseghier@hotmail.com

I/ INTRODUCTION

La leishmaniose cutane zoonotique est une affection cutane cause par des parasites du genre
Leishmania et considre comme un rel problme de sant publique en Algrie. Ces trente dernires ont
t marques par une augmentation importante du nombre de cas, et l'apparition de nouveaux foyers dans
plusieurs rgions du pays. L'identification des souches de Leishmania qui circulent dans ces foyers
mergents est capitale pour mieux contrler la maladie ; ainsi l'identification molculaire par la technique
de PCR-RFLP permet l'identification et la diffrenciation d'espces dans les prlvements cutans.

II/ METHODE

Nous avons utilis cette technique directement sur des prlvements ou des isolats obtenus de 74 patients
tous des soldats nouvelles recrues et exerant dans l'est Algrien ; prsentant diffrentes formes cliniques
de leishmaniose : 35 prlvements proviennent des malades en poste Batna (Barika), 25 souches
obtenues de malades en mission Khenchela, et 10 souches obtenues de soldats en bivouac dans la
rgion de Tbessa atteints de leishmaniose cutane.

III/ RESULTATS

Les rsultats de digestion des produits d'amplification ITS1 par HaeIII a permis de spcifier prcisment les
espces comme tant toutes Leishmania major (74). Ces rsultats sont corrobors avec l'identification
isoenzymatique des souches retrouves.

IV/ CONCLUSION

La PCR-RFLP apparat tre une bonne technique d'identification molculaire complmentaire la


caractrisation isoenzymatique des leishmanies. De plus elle est plus rapide puisqu'elle peut diffrencier
les leishmanies directement partir des lsons sans passer par la culture.

MOTS CLES : Leishmania, PCR-RFLP, Leishmania major, Algrie


Une analyse phylogographique indique une origine sud-amricaine de la
population actuelle de Toxoplasma gondii
BERTRANPETIT E. 1 * , JOMBART T. 2 , PARADIS E. 3 , DUBEY J. 4 , PENA H. 5 , SU C. 6 , MERCIER A. 1
, DEVILLARD S. 7 , AJZENBERG D. 1,8

1 INSERM UMR_S 1094, Neuropidmiologie Tropicale, Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Facult de Mdecine, Universit
de Limoges, Limoges, 87025, France
2 MRC Centre for Outbreak Analysis and Modelling, Department of Infectious Disease Epidemiology, School of Public Health,
Imperial College London, United Kingdom
3 Institut des Sciences de l'volution, Universit Montpellier/CNRS/IRD/EPHE, Place Eugne Bataillon CC 065, 34095
Montpellier cdex 05, France
4 United States Department of Agriculture, Agricultural Research Service, Beltsville Agricultural Research Center, Animal Parasitic
Diseases Laboratory, Building 1001, Beltsville, Maryland, 20705-2350, USA
5 Departamento de Medicina Veterinria Preventiva e Sade Animal, Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia,
Universidade de So Paulo, So Paulo, Brazil
6 Department of Microbiology, University of Tennessee, Knoxville, Tennessee, 37996-0845, USA
7 UMR CNRS 5558 Laboratoire de Biomtrie et Biologie Evolutive, Universit Claude Bernard Lyon1
8 Centre National de Rfrence (CNR) Toxoplasmose / Toxoplasma Biological Resource Center (BRC), Centre Hospitalier-
Universitaire Dupuytren, Limoges, 87042, France
*Auteur correspondant : emilie.bertranpetit@etu.unilim.fr
Toxoplasma gondii est un protozoaire responsable de la toxoplasmose. On estime qu'environ un tiers de la
population mondiale serait infecte par ce parasite. Cette maladie est le plus souvent asymptomatique
chez les immunocomptents mais peut tre svre chez les patients immunodprims ainsi que lors
d'infections congnitales.

En plus du systme immunitaire de l'hte, le gnotype du parasite semble influencer l'issue de la maladie.
La structure de la population de T. gondii est en partie clonale avec 3 types clonaux principaux, le type II
tant majoritaire en Europe, en Amrique du Nord, en Afrique du Nord et de l'est et en Amrique du sud
non tropicale. Cependant, avec l'largissement des tudes de diversit gntique en zone tropicale une
diversit plus importante avec de nouveaux gnotypes a t dcouverte, en particulier en Amrique du
Sud. Les formes cliniques de toxoplasmose semblent plus svres dans cette rgion avec la description de
cas svres chez l'immunocomptent en Guyane franaise et une prvalence trs leve de formes
oculaires au Brsil. La comprhension de l'volution de ce parasite est donc importante pour tenter
d'expliquer ces diffrences dans la maladie.

Dans ce cadre, l'origine gographique de l'anctre commun des lignes actuelles du parasite fait dbat.
Deux hypothses principales s'opposent. La premire suggre une origine gographique en Amrique du
Sud, en raison de la diversit gntique plus importante dans cette rgion. La deuxime suggre une
entre du parasite en Amrique du Sud partir d'un foyer nord-amricain il y a environ 1 million d'annes,
lors de la migration de ses htes dfinitifs. L'absence de mthodologie adapte et de modlisation de la
migration des souches limite la porte de ses deux tudes seulement des hypothses. L'objectif de ce
travail est de proposer une origine phylogographique de la population actuelle des souches de T. gondii,
en adaptant une mthodologie dj applique Plasmodium falciparum. Nous avons choisi de squencer
5 fragments de gnes GRA6, GRA7, SAG3, UPRT1 et UPRT7 pour 168 souches de T. gondii se
rpartissant en 13 populations sur 5 continents. Afin de dfinir les relations de parent entre les diffrentes
souches de T. gondii et de dater le plus rcent anctre commun (MRCA) des lignes actuelles, des
analyses phylogntiques et des datations ont t effectues en prenant Hammondia hammondi comme
groupe externe. Une analyse spatiale a ensuite t effectue pour proposer une origine gographique
l'anctre commun des lignes actuelles.

Les analyses phylogntiques n'ont pas permis de dfinir avec prcision les relations de parent entre les
diffrentes souches de T. gondii. Cependant les mthodes de datation indiquent que le MRCA des lignes
actuelles daterait d'environ 1,5 2 millions d'annes, ce qui correspondrait l'arrive des Flids en
Amrique du Sud. De plus les phylognies sont concordantes pour placer les souches d'Amrique du Sud
la base par rapport au groupe externe, indiquant qu'elles auraient t les premires diverger. Ce
rsultat est appuy par l'analyse spatiale qui indique que l'origine gographique la plus probable se
situerait en Amrique du Sud tropicale. La rencontre entre la forme ancestrale de T. gondii et les flids
d'Amrique du Sud aurait alors donn naissance la forme actuelle du parasite qui se serait ensuite
rpandu au reste du monde via les migrations de ses htes dfinitifs.
Variation du taux de sroconversions toxoplasmiques chez les femmes
enceintes en limousin : tude rtrospective entre 1999 et 2014

BRANCHU A. 1 , LEDIEN J. 2 , MURAT J. 1 , DARDE M. 1 , VIGNOLES P. 1 *

1 INSERM, Univ. Limoges, CHU Limoges, UMR_S 1094, Institut dEpidmiologie Neurologique et de
Neurologie Tropicale, CNRS FR 3503 GEIST, 87000 Limoges, France
2 Unit de Sant Publique et Epidmiologie, Institut Pasteur du Cambodge, BP983, Phnom Penh,
Cambodge

*Auteur correspondant : philippe.vignoles@unilim.fr

En France, chez lHomme, linfection par Toxoplasma gondii peut prsenter un caractre de gravit,
essentiellement lors de ractivations chez les individus immunodprims, et chez les ftus et nouveau-ns
en cas de passage transplacentaire du parasite aprs contamination en cours de grossesse de la mre.

Une tude rtrospective a port sur toutes les naissances et sroconversions en cours de grossesse
survenues entre 1999 et 2014 en Limousin recenses par le CHU de Limoges. Nous avons dnombr un
total cumul de 102 921 naissances, dont 254 correspondaient des cas localisables de femmes ayant fait
une sroconversion toxoplasmique en cours de grossesse. Les donnes utilises taient proches de
lexhaustivit (quelques rares cas ont pu tre affects dans dautres centres notamment pour les habitantes
limitrophes dune autre rgion). Chaque sroconversion a t date et localise. Des donnes de
temprature, de pluviomtrie et le caractre rural ou urbain ont galement t collectes et affectes aux
communes, units gographiques retenues. La significativit des variations gographiques et temporelles
du taux de sroconversions tait dtermine par le test non paramtrique du dhomognit et par le
calcul du Ratio dIncidence Standardis (SIR) de sroconversions avec un intervalle de confiance 95%.

Le but de cette tude tait de tenter de dterminer les paramtres pouvant influencer la survenue de
sroconversions chez les femmes enceintes notamment les facteurs temporels (variation mensuelle ou
annuelle), climatiques (temprature, pluviomtrie) et gographiques (lieux de rsidence au moment de
linfection).

Nous avons cherch modliser la variation annuelle des taux de sroconversions entre 1999 et 2014. Le
modle calcul a rvl lexistence dune fluctuation cyclique des taux avec une priode denviron quatre
annes et explique 52,7 % de la variation totale. De plus, nous avons galement modlis ces fluctuations
annuelles en fonction de la pluviomtrie hivernale et de la temprature moyenne. La pluviomtrie hivernale
antrieure (anne n-2) intervient ngativement alors que la temprature moyenne intervient positivement.
Ce modle annuel explique 68,5 % des sroconversions. Enfin, une sur-incidence de la contamination
(Risque Relatif (RR) = 1,65 [1,18 ; 2,30]) a t mise en vidence dans la zone la plus pluvieuse de la
rgion (> 1200 mm par an) ainsi que dans un canton de cette zone. Aucune diffrence sur des critres de
temprature ou de ruralit nest apparue. Nous avons galement dcouvert une sur-incidence de la
contamination durant lt (en aot), une sur-incidence (non significative) en dcembre ainsi quune sous-
incidence au printemps.

Toutes les priodes de lanne nont pas le mme taux de sroconversions. Les fluctuations de
sroconversions pourraient tre dues des diffrences alimentaires et/ou une inhomognit de
lexcrtion des oocystes par les chats. Le modle que nous avons tabli montre que le climat a une action
sur la toxoplasmose : lhumidit et la chaleur favoriseraient les sroconversions alors que des prcipitations
abondantes les diminueraient (loignement des oocystes des htes potentiels ?). Le dcalage observ
entre occurrence climatique et variation des sroconversions pourrait tre li linfection dun hte
intermdiaire consomm 2 ans plus tard par lHomme.
Identification de parasites chez deux mrous (Mycteroperca spp.) de la
Mditerrane et lOcan Atlantique Est
CHAABANE A. 1 * , JUSTINE J. 2 , FRANTISEK M. 3 , GEY D. 4 , NEIFAR L. 1

1 Laboratoire de Biodiversit et cosystmes Aquatiques, Facult des Sciences de Sfax (FSS), Universit
de Sfax, Sfax, Tunisie
2 ISYEB, Institut Systmatique, volution, Biodiversit, UMR7205 CNRS, EPHE, MNHN, UPMC, Musum
National dHistoire Naturelle, Sorbonne Universits, Paris, France
3 Institut de parasitologie, Centre de biologie de l'Acadmie des sciences de la Rpublique tchque
4 Service de Systmatique molculaire, UMS 2700 CNRS, Musum National dHistoire Naturelle,
Sorbonne Universits, Paris, France

*Auteur correspondant : amirachaabane@hotmail.fr

Les mrous hbergent gnralement une richesse parasitaire exceptionnelle. Nanmoins, la parasitofaune
chez les mrous de la Mditerrane est encore mal connue. Une tude parasitaire de deux htes
congnres, savoir le mrou brun Mycteroperca marginata (Lowe) et la badche Mycteroperca costae
(Steindachner) a t ralise. Lexamen des filaments branchiaux et des lames dposes au Musum
National dHistoire Naturelle (MNHN) nous a permis didentifier trois parasites appartenant au genre
Pseudorhabdosynochus Yamaguti, 1958 (Monognes): P. sosia Neifar & Euzet, 2007 chez la badche et
P. beverleyburtonae (Oliver, 1984) Kritsky & Beverley-Burton, 1986 et une nouvelle espce chez le mrou
brun. galement, lexamen des gonades mres nous a permis de rcolter deux espces du genre
Philometra Costa, 1845 (Nmatodes) : P. tunisiensis Moravec, Chaabane, Neifar, Delphine and Justine,
2015, une nouvelle espce trouve chez la badche et P. jordanoi (Lpez-Neyra, 1951), une espce dj
signale chez le mrou brun. Lexamen morphologique des structures cls didentification montre que les
trois espces de Pseudorhabdosynochus se ressemblent, formant un groupe avec la mme structure
gnrale du vagin. Cette ressemblance pourrait tre lie au statut phylogntique du genre Mycteroperca.
Dautre part, les mles de P. jordanoi rvlent quelques nouvelles caractristiques morphologiques
importantes sur le plan taxinomique. Les mrous hbergent gnralement une richesse parasitaire
exceptionnelle. Nanmoins, la parasitofaune chez les mrous de la Mditerrane est encore mal connue.
Une tude parasitaire de deux htes congnres, savoir le mrou brun Mycteroperca marginata (Lowe)
et la badche Mycteroperca costae (Steindachner) a t ralise. Lexamen des filaments branchiaux et
des lames dposes au Musum National dHistoire Naturelle (MNHN) nous a permis didentifier trois
parasites appartenant au genre Pseudorhabdosynochus Yamaguti, 1958 (Monognes): P. sosia Neifar &
Euzet, 2007 chez la badche et P. beverleyburtonae (Oliver, 1984) Kritsky & Beverley-Burton, 1986 et une
nouvelle espce chez le mrou brun. galement, lexamen des gonades mres nous a permis de rcolter
deux espces du genre Philometra Costa, 1845 (Nmatodes) : P. tunisiensis Moravec, Chaabane, Neifar,
Delphine and Justine, 2015, une nouvelle espce trouve chez la badche et P. jordanoi (Lpez-Neyra,
1951), une espce dj signale chez le mrou brun. Lexamen morphologique des structures cls
didentification montre que les trois espces de Pseudorhabdosynochus se ressemblent, formant un
groupe avec la mme structure gnrale du vagin. Cette ressemblance pourrait tre lie au statut
phylogntique du genre Mycteroperca. Dautre part, les mles de P. jordanoi rvlent quelques nouvelles
caractristiques morphologiques importantes sur le plan taxinomique.

Remerciements: Programme BIOPARMED (ENVI-MED)


La conglation longue dure des srums naffecte pas la stabilit des anticorps
anti-Toxoplasma.
DARD C. 1,2 * , BAILLY S. 3 , DROUET T. 1 , BRENIER-PINCHART M. 1,2 , FRICKER-HIDALGO H. 1 ,
PELLOUX H. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Institut de Biologie et Pathologie, CHU de Grenoble, Grenoble,


France
2 Institut Albert Bonniot, INSERM U1209 - CNRS UMR 5309, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France
3 UMR 1137-IAME Team 5-DeSCID, Inserm/Paris Diderot, Universit Sorbonne Paris Cit, Paris, France

*Auteur correspondant : cdard@chu-grenoble.fr

Introduction: Lanalyse des taux danticorps (Ac) anti-Toxoplasma gondii fournit des rponses cruciales
aux questions poses propos de la toxoplasmose en pathologie humaine. Cependant, peu de donnes
existent sur les conditions de conservation optimales des srums ainsi que la stabilit des Ac anti-T. gondii
aprs une longue priode de conglation. Le stockage des srums est pourtant essentiel la ralisation
dtudes rtrospectives diagnostiques, pidmiologiques et analytiques. Le but de cette tude est dvaluer
limpact de la conglation court et long-terme des srums pour sassurer de la pertinence de leur analyse
aprs dconglation.

Matriel et mthodes: La stabilit des IgG et IgM anti-T. gondii a t tudie pour respectivement 243 et
245 srums. Ces srums ont t stocks -20C de 1 mois 10 ans dans la biobanque du laboratoire. Les
chantillons slectionns proviennent du reliquat de srum aprs les analyses de routine. La mme
mthode de dosage quantitatif par ELISA (Vidas, bioMrieux, France) a t utilise pour les analyses
initiales et post-conglation. Des modles linaires pour mesures rptes ont t employs pour valuer
les effets de la dure de conglation sur la stabilit des Ac. Des analyses de sous-groupes ont t menes
pour tenir compte du sexe, du volume de srum stock, des contextes cliniques et des taux dAc.

Rsultats: La principale raison dchantillonnage tait le suivi srologique de femmes enceintes (30,5%
des srums). Des effets significatifs de la conglation longue-dure pour les IgG ont t observs pour
deux sous-groupes seulement: les IgG avec une valeur initiale quivoque et le suivi srologique des
patients immunodprims (p=0,01) (Tableau). Pour les IgM, aucun effet significatif na t observ dans les
diffrents sous-groupes. Linterprtation quantitative des IgG et IgM (ngatif, quivoque, positif) a t
modifie pour respectivement 7 et 12% des srums, principalement de quivoque positif.

Conclusion: Pour une large majorit de srums, aucune variation significative du taux dAc na t
observe aprs un stockage de longue dure. Les variations significatives concernent principalement les
IgG taux quivoques ou faibles, et nauraient pas modifi la prise en charge des patients concerns. Par
consquent, les Ac anti-T.gondii peuvent tre doss de faon fiable aprs un stockage de long-terme -
20C, bien que les faibles taux dAc requirent une plus grande prcaution dans linterprtation.

Effet du stockage longue-dure sur les variations


des taux dIgG et dIgM, en fonction des diffrents
critres et analyses par un modle linaire mixte.
NS: pas de variation significative constate,
*Variation significative
Echinococcose alvolaire : Donnes actualises du registre FrancEchino et
volution vers une base de donnes europenne (EurEchino Database)

DEMONMEROT F. 1 * , GRENOUILLET F. 1,2 , KNAPP J. 1,2 , MARTIN B. 3 , RICHOU C. 1 , DAMY S. 2 ,


RAOUL F. 2 , VUITTON D. 1 , BRESSON-HADNI S. 1,2 , MILLON L. 1,2

1 Centre National de Rfrence de lEchinococcose Alvolaire, Centre Collaborateur OMS pour la


prvention et le traitement des chinococcoses, Centre Hospitalier Rgional Universitaire de Besanon,
25000 Besanon, France
2 Laboratoire Chrono-Environnement, UMR/CNRS 6249, Universit de Franche-Comt, 25000 Besanon,
France
3 Centre de Mthodologie Clinique, Centre Hospitalier Rgional Universitaire de Besanon, 25000
Besanon, France

*Auteur correspondant : fdemonmerot@chu-besancon.fr

Introduction Objectifs
Lchinococcose alvolaire (EA) est une pathologie rare mais parfois trs grave dont les caractristiques
pidmiologiques sont encore mal connues. La surveillance de cette anthropozoonose parasitaire est
assure en France par le Centre National de Rfrence de lEchinococcose Alvolaire (CNR-EA) au CHRU
de Besanon. Notre objectif est dexposer les donnes pidmiologiques sur lEA humaine en France entre
1982 et 2015, et de dcrire lvolution du registre FrancEchino vers un systme dinformation (SI)
interoprable, scuris, et qui a vocation stendre un registre europen des cas dchinococcose
alvolaire (EurEchino Database).
Matriel et Mthodes
Mise en place ds 1997, la surveillance nationale de lEA humaine est assure depuis 2003 via le rseau
FrancEchino, soutenu par lInVS, et fonctionne depuis 2012 sous lgide du CNR-EA. Les cas dEA sont
identifis par notification spontane (cliniciens et parasitologues) et par sollicitation active rgulire des
laboratoires, anatomopathologistes et pharmaciens hospitaliers. Pour chaque cas, les donnes cliniques et
pidmiologiques spcifiques cette pathologie sont colliges. Pour optimiser et scuriser leur recueil, un
nouveau SI a t dvelopp au CNR-EA, reposant sur une base de donnes (MySQL) interoprable,
couple une application de saisie en ligne par les cliniciens et parasitologues dclarant les cas
(CleanWEB). Le systme, dont les interfaces sont dveloppes en anglais, est utilisable distance par
diffrents centres impliqus dans la prise en charge de lEA en Europe (Allemagne, Autriche, Suisse,
Belgique, Pologne, Slovaquie, Lituanie, Lettonie,)
Rsultats
653 cas dEA humaine diagnostiqus entre 1982 et 2015 ont t recenss, soit une moyenne de 19,2
cas/an [7 ; 38]. Le nombre moyen de cas incidents annuel a plus que doubl entre les priodes 1996-2005
et 2006-2015 (14,4 vs 29,3). Lincidence annuelle moyenne est de 0,032/100000 habitants par an [0,012 ;
0,059]. En 2015, 48 nouveaux cas ont t notifis dont 38 diagnostiqus au cours de cette mme anne.
La proportion de patients rsidant en Franche-Comt diminue sur la priode 2011-2015 (30% vs 36%
avant 2011), contrairement celles de patients rsidant en Rhne-Alpes (22% vs 16% avant 2011),
Champagne-Ardenne (10% vs 6% avant 2011) et Bourgogne (7% vs 2% avant 2011). Les diagnostics
fortuits ont augment (24% avant 2006 vs 58% 2006-2015) et depuis 10 ans, un contexte
dimmunodpression a t plus frquemment associ lEA (5,6% avant 2006 vs 18,4% 2006-2015).
Les donnes sur les cas dEA diagnostiqus en France depuis 1982 sont en cours de transfert dans la
nouvelle base de donnes, et le systme de saisie CleanWEB est utilis en routine au CNR-EA pour
lenregistrement des diagnostics franais depuis janvier 2016. Ce dispositif, qui permet de plus une
surveillance dynamique prenant en compte les donnes de suivi, est galement mis disposition depuis
dbut 2016 dans 10 autres pays europens touchs par cette zoonose.
Conclusion
LEA est une zoonose mergente depuis quelques annes, aussi bien dans sa forme humaine que chez le
renard. Lextension vers lOuest de la zone dendmie vulpine suggre un risque de survenue de cas
humains dEA dans des rgions jusquici quasi indemnes (e.g Bretagne). La constitution dun registre
europen permettra dtendre les connaissances sur lpidmiologie de la maladie et damliorer la
prvention.
Le Paludisme dimportation au Maroc
DINIA D. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , CHEBLI H. 3 , NHAMMI H. 3 , BOUHOUT S. 3 , LMIMOUNI
B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service des maladies parasitaires, Direction de lpidmiologie et de lutte contre les maladies, Ministre
de la sant, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : doha.dinia@yahoo.fr

Introduction : Le paludisme est une maladie potentiellement mortelle. Le Maroc a beaucoup progress en
matire de lutte contre ce parasite, puisquen Mai 2010, il lui a t dlivr par lOMS un Certificat
dlimination du paludisme autochtone. Nanmoins des cas imports sont enregistrs chaque anne. Notre
tude a pour objectif dtudier la situation pidmiologique du paludisme dimportation au Maroc.

Matriel et mthodes : Il sagit dune tude rtrospective concernant lensemble des cas de paludisme
imports diagnostiqus au Maroc qui ont t colligs durant une priode de 4 ans allant de Janvier 2011
Dcembre 2014. Les donnes ont t recueillies auprs de la Direction de lpidmiologie et de lutte contre
les maladies Rabat (MAROC).

Rsultats : Durant la priode de ltude, 1483 cas de paludisme ont t notifis. Ce sont majoritairement
des adultes ayant sjourn en Afrique, en Asie ou en Amrique du sud. Les hommes reprsentent la
majorit des cas recenss avec un sex-ratio H/F de 11,2. Le nombre de cas diagnostiqu positif a
sensiblement augment entre 2011 et 2014. La majorit des cas est due Plasmodium falciparum (70%)
et sont originaires pour la plupart de Cte divoire et Guine Equatoriale. Lautre espce la plus
reprsente est Plasmodium ovale. Il a t relev 17 dcs suites un paludisme Plasmodium
falciparum compliqu.

Conclusion : Au terme de cette tude il a t constat une augmentation des cas de paludisme
dimportation au Maroc. Le diagnostic et la prise en charge prcoce sont ncessaires pour viter les
complications et les dcs.
Profil pidmiologique de la leishmaniose cutane dans la province de Sfrou
DOUMBIA M. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , CHEBLI H. 3 , NHAMMI H. 3 , BOUHOUT S. 3 ,
LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service des maladies parasitaires, Direction de lpidmiologie et de lutte contre les maladies, Ministre
de la sant, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : maria_dou73@yahoo.fr

Introduction : La leishmaniose cutane (LC), malgr les diffrentes investigations mises en place par les
autorits de sant du Maroc pose encore un problme de sant publique dans certaines rgions et entre
autres la province de Sfrou ny chappe pas. Lobjectif de cette tude a t de dterminer les donnes de
la surveillance pidmiologique dans cette province et dapprcier limpact des mesures de lutte contre
cette parasitose.

Matriel et mthodes : Il sagit dune tude rtrospective. Nous avons collig lensemble des cas de LC au
niveau du registre du centre de sant de la province stendant sur une dure de quatre ans de 2012
2015. Le diagnostic biologique sest bas sur la mise en vidence du parasite au niveau des prlvements.
Lexploitation statistique a t ralise laide du logiciel SPSS 10.

Rsultats : Notre tude a concern 278 cas positifs de LC dont seulement 1,4% tait des cas imports. La
moyenne dge tait de 15,76 ans avec un sexe ratio H/F de 0,71. Les lsions sigeaient principalement
sur trois zones : le visage, les membres suprieurs et infrieurs, avec une prdominance au niveau du
visage (249 patients soit 89,6%). La taille des lsions chez la majorit des patients tait infrieure 4 cm.

Discussion : Cette surveillance nous a permis de confirmer la persistance du foyer mergent de cette
parasitose Leishmania tropica malgr les moyens de lutte mis en place par le ministre de la sant
depuis lapparition des premiers cas en 1999.

Conclusion : La persistance de lmergence de la leishmaniose cutane dans ces provinces du Maroc


ncessite une intensification des moyens de lutte pour pallier cette parasitose.
Leishmaniose cutane Leishmania infantum rcidivant aprs 6 annes
DUPONT D. 1,2 * , PEYRON F. 1

1 Institut de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hospices Civils de Lyon, Lyon


2 Equipe WAKING Physiologie intgre du systme dveil, Centre de Recherche en Neurosciences de
Lyon Inserm U1028, CNRS UMR5292, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon

*Auteur correspondant : damien.dupont@chu-lyon.fr

Nous rapportons le cas dun patient de 75 ans ayant prsent en 2009 une lsion cutane nodulaire
rythmato-squameuse du coude gauche dun diamtre de 3 cm, voluant depuis plus dun an. Le
diagnostic de leishmaniose cutane tait port devant la prsence de formes amastigotes lexamen
direct. La PCR confirmait ce diagnostic et identifiait Leishmania infantum. Linterrogatoire ne rvlait que
des sjours rpts la Runion chez ce patient rsidant dans la priphrie de Lyon. Au plan mdical, on
retenait une surcharge pondrale avec BPCO, une hmoglobine glyque 8% et un carcinome
pidermode du visage trait chirurgicalement. Des injections intra-lsionnelles dantimoniate de
mglumine ont permis une gurison rapide. Lvolution tait alors marque par lapparition, 2 ans plus tard,
lemplacement de la lsion, dun kyste pidermode enlev chirurgicalement. Six ans aprs la fin du
traitement, le patient consultait nouveau pour une rcidive lidentique de la lsion survenue en
labsence de tout facteur de risque ou de traumatisme local. La PCR confirmait la prsence de Leishmania
infantum au niveau de la lsion, sa recherche au niveau du sang tant ngative. Il ny avait aucun signe de
viscralisation et ltat gnral tait conserv. Un traitement intraveineux par amphotricine B liposomale a
permis une gurison totale.

La notion de rcidive lidentique dune leishmaniose L. infantum dexpression strictement cutane en


dehors de notion de sjours rpts en zone endmique et de contexte dimmunodpression pose un
problme physiopathologique. Des rcidives cutanes de leishmaniose ont t dcrites suite des
traumatismes locaux de type tatouage faisant voquer la persistance de formes parasitaires dans des
cellules de la peau. Dans notre cas on ne retrouvait aucune cause. La prise en charge des localisations
cutanes de L. infantum reste codifier, en particulier faut-il utiliser des traitements par voie gnrale en
premire intention et quel est le risque de localisation viscrale secondaire ?
Llimination de la schistosomiase au Maroc: Une ralit et un succs aprs trois
dcennies de lutte
EL ALAOUI EL ABDALLAOUI M. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , CHEBLI H. 3 , HADDOU N. 3 ,
BOUHOUT S. 3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service des maladies parasitaires, Direction de lpidmiologie et de lutte contre les maladies, Ministre
de la sant, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : elalaouimyriem@gmail.com

Introduction : La schistosomiase svissait au Maroc sous la forme gnito-urinaire Schistosoma


haematobium dans des foyers d'importance variable. Cette maladie prsentait une menace srieuse pour
tout le pays en raison de laccroissement des risques lis lextension des projets de dveloppements des
ressources hydrauliques.

Nous prsentons dans ce travail le programme de lutte et les stratgies dployes pour llimination de la
bilharziose au Maroc.

Matriels et mthodes : Notre travail est une tude rtrospective portant sur les activits de lutte contre la
schistosomiase au Maroc par la mise en uvre du Programme national de lutte contre la schistosomiase
(PNLS) qui sest effectu en Quatre priodes :

1977-1981 : Phase prparatoire et de planification du programme de lutte.

1982-1993 : Phase dintervention active au niveau national.

1994-2004 : Phase de mise en uvre de la stratgie dlimination.

2005-2010 : Phase de consolidation de llimination

Rsultats : Lanalyse du nombre de cas de schistosomiase dpists montre quentre la phase pr-
oprationnelle 1960-1981 (73 441 cas) et la phase oprationnelle 1982- 1993 (52 488 cas), la rgression
na t que de 1,4 fois ; entre la phase oprationnelle 1982- 1993 et la phase d'limination 1994-2003
(3512 cas), elle tait de 14,9 fois ; entre la phase pr-oprationnelle 1960-1981 et la phase d'limination
1994-2004, de 20,9 fois ; et enfin entre la phase d'limination 1994-2003 et la phase de consolidation de
l'limination 2004- 2010 (38 cas), elle tait de 92,4 fois.

Les investigations pidmiologiques effectues auprs des 38 cas dpists pendant cette phase de
consolidation rvlent que parmi les 19 cas classs comme rsiduels, aucun navait contract la maladie
aprs 2004, le reste des cas taient imports de ltranger.

Les cas de schistosomiase dpists entre 2011 et 2014 (10 cas), taient tous imports de ltranger, ainsi
aucun cas autochtone de bilharziose na t notifi au Maroc depuis 2004.

Conclusion : Llimination de la schistosomiase au Maroc est un fait accompli, confirm en 2009 par des
tudes srologiques et malacologiques menes en collaboration avec lOMS.

Afin de prvenir sa rintroduction, une nouvelle stratgie de maintien de llimination pour la priode 2012-
2016 a t mise en uvre.
Intert de la Serologie dans le diagnositic de l'Hydatidose Osseuse ( propos
dun cas)
IKEN M. 1 * , LAMKHANTAR A. 2 , JAAFAR A. 2 , BOUSSOUGA M. 2 , LMIMOUNI B. 1

1 Service de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire d'Instruction Mohamed V, Rabat


2 Service de Traumatologie Orthopdie, Hpital Militaire d'Instruction Mohamed V, Rabat

*Auteur correspondant : bousnour@yahoo.fr

volution et sa latence clinique. Elle est souvent mconnue et peut engendrer un handicap fonctionnel
majeur suite au retard diagnostic source de difficults thrapeutiques en particulier chirurgicales vu
lextension lsionnelle. La srologie quantitative et qualitative outre son intrt dans ltablissement du
diagnostic positif, offre une ide prcieuse sur le pronostic et permet de suivre lvolution et lefficacit du
traitement mdical.

Observation : Nous rapportons le cas dun patient de 38 ans, opr dune fracture de lextrmit proximale
du fmur droit et dont lvolution tait marque par linstallation dune arthrite de hanche. Ltude
bactriologique tait ngative et lhistologie a montr la prsence de granulome pithlio-giganto-cellulaire
sans ncrose caseuse, le test au Quantiferon ainsi que les tubages gastriques et les radiographies
pulmonaires taient normaux. Devant la non amlioration sous traitement antituberculeux instaur vu le
contexte endmique au Maroc, et la prsence dune osinophilie leve, la srologie hydatique, vu lorigine
rurale du patient et le contact avec les chiens tait revenue hautement positive. Le complment IRM de
hanche a permis de mettre en vidence plusieurs localisations la hanche et endopelviennes de vsicules
hydatiques. La rsection propose tait refuse du fait de son caractre dlabrant prvisible pouvant
affecter le pronostic vital du patient. un recul de 02 ans, le traitement par Albendazole instaur pour 6
mois et le suivi par des contrles srologiques ont permis le constat dune stabilisation lsionnelle.

Conclusion : La forme ostoarticulaire de lecchinococcose est rare et gravissime sur les plans fonctionnel
et vital. Lapport de la srologie hydatique est dterminant en termes de rapidit du diagnostic devant un
contexte gographique favorisant, il permet galement de prsager du pronostic et du suivi de lefficacit
thrapeutique devant des formes inoprables.
Identification des sous-espces de Plasmodium ovale par PCR quantitative avec
rvlation High Resolution Melting (HRM)
JOSTE V. 1 , HUBERT V. 1 , MARECHAL C. 1 , HOUZE S. 1 *

1 CNR du Paludisme, APHP Hpital Bichat, Paris

*Auteur correspondant : sandrine.houze@aphp.fr

Problmatique : Le diagnostic dun accs palustre repose sur lecture dun frottis sanguin color et/ou dune
goutte paisse (gold standard de lOMS) permettant la dtection et lidentification de lespce plasmodiale.
Cependant, ces mthodes microscopiques prsentent des limites, notamment en termes de sensibilit
(pour les accs faibles parasitmies) ou de spcificit (difficult de discrimination des espces et sous-
espces dans le cas de Plasmodium ovale, ou des associations). Dans ce cadre, la recherche de nouvelles
mthodes de diagnostic de linfection par Plasmodium reste dactualit.

Matriels et mthode : La PCR quantitative avec rvlation HRM (High Resolution Melting) est une PCR
quantitative base sur lintgration dun fluorophore lADN sous forme double brin lors de la phase
damplification. Elle est suivie dune phase HRM permettant de dterminer la temprature de fusion de la
squence amplifie (Tm) (1). La variation de cette temprature permet de rvler des mutations de type
Small Nuclear Polymorphism (SNP). Nous avons valu les performances de cette mthode avec des
amorces spcifique du genre Plasmodium (2) pour la dtection et lidentification des espces plasmodiales
sur des chantillons reprsentatifs reus au CNR du Paludisme (CNRP) pour expertise par rapport la
PCR qPCR-Taqman Fast TRack (Launch Diagnostics) utilise en routine au CNRP.

Rsultats : Pour les 273 chantillons de parasitmie et despces varies inclus dans ltude, la sensibilit
de la mthode est de 97,2% (9 faux ngatifs) et la spcificit de 100% pour la dtection des chantillons
positifs. La limite de dtection a t value 39 cycles (ET = 1,247). Les possibilits de diagnostic
despce sont limites avec un couple unique damorces spcifiques du genre Plasmodium avec des
croisements entre les espces Plasmodium malariae et Plasmodium ovale, et la difficult de mettre en
vidence les associations de plusieurs espces plasmodiales. En revanche, cette mthode permet une
distinction aise des sous-espces de Plasmodium ovale : Plasmodium ovale curtisi et Plasmodium ovale
wallikeri selon leur Tm.

Discussion conclusion : Les techniques de PCR HRM se dveloppent dans les laboratoires pour
lidentification des espces de diffrents pathognes en raison de son cot modeste et de sa facilit de
mise en uvre. Cependant, les performances sont fonction des amorces utilises. Dans notre tude, les
amorces choisies ne permettent pas didentifier en une tape les diffrentes espces, mais permettent,
lidentification des deux sous-espces de P. ovale. Le choix damorces dans des rgions plus
discriminantes pourrait permettre de meilleures performances.

(1) Microbiological Applications of High-Resolution Melting Analysis, Steven Y., C.Tong and Philip
M.Giffard, JCM, November 2012, Volume 50, Number 11, 3418-3421

(2) Multiplexed real-time PCR assay for discrimination of Plasmodium species with improved sensitivity for
mixed infections, Shokoples SE, Ndao M, Kowalewska-Grochowska K, Yanow SK, J Clin Microbiol. 2009
Apr;47(4):975-80
Aspergillose Invasive dans les suites d'un Paludisme grave a P.Falciparum et
P.Vivax
KAHN P. 1 , BRUNET J. 1,2 * , SABOU M. 1,2 , DENIS J. 1,2 , ABOU BACAR A. 1 , PFAFF A. 1,2 ,
MARTZLOFF J. 3 , RHAMANI H. 3 , DELABRANCHE X. 3 , ALEMANN G. 4 , HERBRECHT R. 5 ,
LETCHER-BRU V. 1,2 , MEZIANI F. 3 , CANDOLFI E. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Mdicale,Hpitaux Universitaires de Strasbourg, France


2 Institut de Parasitologie et Pathologie Tropicale de Strasbourg, France
3 Service de Ranimation Mdicale, Hpital de Hautepierre, Hpitaux universitaire de Strasbourg, France
4 Service dImagerie et de Neuroradiologie, Hpital de Hautepierre. Hpitaux Universitaires de Strasbourg,
France
5 Service dHmatologie et dOncologie, Hpital de Hautepierre. Hpitaux Universitaires de Strasbourg,
France

*Auteur correspondant : julie.brunet@unistra.fr

Laspergillose invasive est une pathologie grave avec une mortalit leve qui survient principalement chez
des patients immunodprims. La survenue dune aspergillose invasive suite un paludisme grave est
extrmement rare, et la littrature ne rvle que cinq autres cas.

Nous prsentons le cas de Monsieur Z., 41 ans, sans antcdents particuliers, ayant effectu un sjour de
15 jours en Cte dIvoire. Il est hospitalis aux urgences des Hpitaux Universitaires de Strasbourg le 19
dcembre 2015 soit 8 jours aprs son retour dAfrique. Il est rapidement transfr en ranimation mdicale
pour des troubles de la conscience et une dfaillance multiviscrale avec insuffisance rnale aigu,
acidose svre, hyperlactatmie et CIVD suite au diagnostic (J0) dun paludisme Plasmodium falciparum
(parasitmie 12%) et Plasmodium vivax. Un traitement par quinine et doxycycline IV est dbut avec un
relais prcoce par artsunate, et J3 la parasitmie tait infrieure 0,1 %. A J3, les plaquettes restant
trs basses malgr un contrle de la CIVD, un syndrome dactivation macrophagique post-infectieux est
suspect. Il est confirm par un mdullogramme et une forte augmentation de la ferritine et des
triglycrides. Le taux de neutrophiles est modrment augment alors que les lymphocytes sont dans les
normes. Une corticothrapie (mthylprednisolone, 120 mg/j) est introduite J5 pour une dure de 4 jours.
Le patient est toujours intub et en puration extra-rnale.

Une pneumopathie sinstalle J7 et le diagnostic daspergillose invasive pulmonaire est retenu J10
devant lassociation dimages radiologiques concordantes, dantignes aspergillaires positifs dans le srum
(index : 3,89) et le LBA (index >5,0) et de cultures mycologiques des aspirations trachales et du LBA
positives Aspergillus fumigatus. Un traitement par voriconazole est dbut.

A J11, le patient reste comateux malgr larrt de la sdation. Une IRM crbrale trouve de multiples
lsions parenchymateuses principalement ischmiques avec une fine couronne hmorragique. Laspect est
compatible avec de lsions de neuropaludisme mais aussi avec une aspergillose crbrale. Lvolution a
t dfavorable avec le dcs du patient J25.

Cette observation souligne la possibilit de survenue daspergillose dans les suites dun paludisme grave.
Les facteurs favorisants linfection fongique sont certainement multiples et incluent, outre
limmunodpression imputable au paludisme, la dfaillance multiviscrale, le syndrome dactivation
macrophagique post-infectieux et son traitement par corticodes mme si la dure de ce traitement a t
trs courte.
Comparaison de trois techniques de srologie toxoplasmose IgG et IgM
(ARCHITECT Toxo ABBOTT, LIAISON Toxo DiaSorin, ENZYGNOST
Toxoplasmosis SIEMENS) lors de la grossesse
KEBBABI C. 1 , PRIN MATHIEU C. 1 , DORIN J. 1 , MACHOUART M. 1,2 , DEBOURGOGNE A. 1,2 *

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHRU de Nancy, Vandoeuvre-les-Nancy, France


2 EA 7300, Stress Immunit Pathogne, Facult de Mdecine, Universit de Lorraine, Vandoeuvre les
Nancy, France

*Auteur correspondant : a.debourgogne@chru-nancy.fr

Introduction
La srologie toxoplasmose est un examen incontournable lors de la grossesse afin de prvenir au plus tt
tout risque de transmission foetale. Malgr une proportion de plus en plus importante de patiente
srongative vis--vis de Toxoplasma gondii, les biologistes sont parfois confronts des profils
srologiques atypiques ncessitant la mise en uvre de techniques complmentaires ou lenvoi du srum
des centres experts.
Actuellement, de nombreuses techniques immuno-enzymatiques sont sur le march. Nous proposons donc
dans ce travail de comparer trois kits : ARCHITECT Toxo ABBOTT, LIAISONToxo DiaSorin et
ENZYGNOST Toxoplasmosis SIEMENS sur des profils srologiques particuliers observs chez des
femmes enceintes.
Matriel et mthodes
Trente-neuf srums prlevs chez des femmes enceintes ont t slectionns afin de reprsenter les
principaux profils observs lors des srologies toxoplasmoses : srongativit (n=2), prsence dIgM
rsiduelles (n=18), taux dIgG faible (n=4), sroconversion dbutante (n=7) et toxoplasmose rcente (n=7).
Sur lensemble de ces srums, une recherche des IgG et IgM spcifiques de la toxoplasmose a t
ralise laide des trois kits commerciaux valus : ARCHITECT Toxo ABBOTT, LIAISONToxo
DiaSorin et ENZYGNOST Toxoplasmosis SIEMENS. Dautres techniques complmentaires ont t
utilises en fonction des profils (avidit, ISAGA A et M, western blot IgG).
Des analyses de concordance ont t ralises pour la population tudie, ainsi que pour les groupes.
Rsultats
Lors de lutilisation en pratique de deux techniques distinctes pour la ralisation des srologies
toxoplasmoses dans un contexte de grossesse, linterprtation biologique reste la mme quel que soit le
couple de techniques choisi.
En considrant la population globale choisie, le taux de concordance pour les IgG est suprieur 90 %
alors que pour les IgM, il est respectivement de 70 et 81 % pour Abbott vs DiaSorin et DiaSorin vs
Siemens. Les discordances observes entre les trois techniques en IgM sont principalement observes
dans le groupe de patientes prsentant des IgM anti-Toxoplasma gondii rsiduelles.
Discussion et conclusion
Malgr une interprtation globale du dossier identique, les techniques srologiques utilises dans le
diagnostic de la toxoplasmose peuvent donner des rsultats qualitatifs diffrents, notamment pour les IgM
en raison de lantigne cible et de la valeur seuil dinterprtation dfinie par le fournisseur.
De ce fait, il est indispensable que le biologiste choisisse des techniques complmentaires pour permettre
une bonne interprtation contextuelle de la srologie et ainsi proposer une bonne prise en charge de sa
patiente.
Evaluation du dispositif Parasep pour lexamen parasitologique des selles par
mthode de concentration et de flottation

LEFAURE B. 1 , KEBBABI C. 1 , MONIN N. 1 , MACHOUART M. 1,2 , DEBOURGOGNE A. 1,2 *

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHRU de Nancy, Vandoeuvre-les-Nancy, France


2 EA 7300, Stress Immunit Pathogne, Facult de Mdecine, Universit de Lorraine, Vandoeuvre les
Nancy, France

*Auteur correspondant : a.debourgogne@chru-nancy.fr

Introduction

Lexamen parasitologique des selles est frquemment prescrit en zone tempre et en zone tropicale
devant diffrents tableaux cliniques : diarrhes aiges ou chroniques, douleurs abdominales,
hyperosinophilie. Afin daugmenter la sensibilit de lexamen microscopique, des techniques de
concentration sont recommandes et bases sur le principe de la sdimentation ou de la flottation.

Actuellement, des dispositifs clos, usage unique sont disponibles pour raliser la mthode de
sdimentation tels que Midi Parasep SF Bailanger ou Midi Parasep SF MIF (merthiolate iode formol).
Nous proposons donc dans ce travail dvaluer ce dernier kit et de proposer une technique de flottation de
type Faust en utilisant ce mme dispositif de filtration.

Matriel et mthodes

Une vingtaine de selles formoles de collection prsentant les principaux parasites (protozoaires ou
helminthes) impliqus en pathologie humaine ont t tudies ainsi que quelques selles positives fraiches.

Sur lensemble de ces chantillons, un examen parasitologique des selles a t ralis en utilisant les
techniques suivantes : examen direct ltat frais, technique MIF concentration avec la technique
habituelle du laboratoire (utilisation dune passoire fine) et le dispositif Midi Parasep SF MIF, technique de
Faust avec la technique habituelle du laboratoire et le dispositif Midi Parasep. Ces examens sont lus par
diffrentes personnes et un comptage de parasites est ralis.

Rsultats

Le dispositif Midi Parasep est adaptable pour les techniques de concentration par flottation telles que
celle de Faust en ajoutant le solvant adapt dans la partie du dispositif qui recueillera la prise dessai de
selles.

Pour lensemble des selles tudies, lexamen parasitologique des selles est positif en utilisant les
dispositifs Parasep. En termes de performance quantitative, en utilisant les volumes de selles habituels et
recommands, le systme Parasep en technique MIF montre une plus grande quantit de parasites pour
les ufs dAnkylostomatidae, dHymenolepis nana, dEnterobius vermicularis, de Schistosoma et de
Taenia et pour les kystes dEndolimax nana et de Giardia intestinalis. Lors de la technique Faust, une plus
grande quantit de parasites est observe pour les ufs dHymenolepis nana et de Taenia et pour les
kystes dEndolimax nana, dEntamoeba histolytica et de Giardia intestinalis.

Discussion et conclusion

Lexamen parasitologique des selles ralis avec le dispositif unitaire usage unique Parasep prsente
des performances quivalentes celui ralis aujourdhui dans notre laboratoire. De plus, ce dispositif
prsente de nombreux avantages en termes de scurit microbiologique du personnel et sera plus en
conformit avec les exigences lies laccrditation des laboratoires danalyses biologiques et mdicales.
Comparative evaluation of Bailenger stool concentration assays for the detection
of helminth and protozoa parasites

LEMETEIL D. 1 , GARGALA G. 1 , FAVENNEC L. 1 *

1 EA 3800, CHU et Universit de Rouen

*Auteur correspondant : loic.favennec@chu-rouen.fr

Background: Low parasite density in human stools is a common hindrance for the diagnosis of intestinal
parasite infections. The characteristics of commercially available Bailenger-type stool concentration assays
are presently not entirely documented, especially their efficacies depending on parasite. The aim of this
study was to compare the results of 3 commercial stool concentration kits with those of an optimized home-
made reference assay for the concentration of 9 helminth and 6 protozoa parasites present in clinical
stools.

Material/methods: In each stool of 77 patients, the presence of one parasite was previously established. In
43 stools, parasites consisted of helminths/helminth eggs including Strongyloides stercoralis, Schistosoma
mansoni, Ankylostomidae, Ascaris lumbricoides, Diphylobothrium latum, Hymenolepis nana, Enterobius
vermicularis, Taenia spp., and Trichuris trichiura in 5, 7, 7, 1, 4, 4, 5, and 5 stool(s), respectively, of which 9
were found parasite-positive by direct examination. In 34 stools, one protozoal parasite was detected, i.e.
Chylomastix mesnilii, Endolimax nanus, Entamoeba coli, Entamoeba hartmani, Giardia duodenalis,
Pseudolimax butschlii, in 6, 6, 8, 2, 8 and 4 stools, respectively, of which 21 were found parasite-positive by
direct examination. Commercial stool Bailenger-type parasite concentration assays were Easypara
(Servibio, Courtabeuf, France)(A), Miniparasep (Eurobio Courtabeuf, France)(B), Paraprep S (Eurobio
Courtabeuf, France)(C). The home-made Bailenger reference assay was previously validated in the clinical
Parasitology laboratory for all above stool parasites. Concentrated preparations were microscopically
examined (50 microscopic field for protozoa and all the slide for helminths), and presence (positivity) or
absence (negativity) of parasites was recorded.

Results: The corresponding numbers of post-concentration positive stools are presented in Table 1.

Conclusions: Present results reveal significant variations in efficacy depending on parasites between
commercial concentration assays. They underline the need of further evaluation and improvements of
commercial assay to be used in the context of clinical Parasitology laboratories.

Table 1 : Post stool concentration parasite


detection in stools infected parasite
Evaluation des anticorps sriques type immunoglobulines G (IgG) anti-heat
shock protein 70 (Hsp70) dans le diagnostic de rtinochorodite toxoplasmique

LESOIN A. 1 , CHUMPITAZI B. 2 * , BOUILLET L. 3,4 , FRICKER-HIDALGO H. 2 , CAMPOLMI N. 5 , FLORI


P. 6 , VASSENEIX C. 7 , LACHARME T. 1,8 , BRENIER-PINCHART M. 2,9 , CHIQUET C. 1 , PELLOUX H. 2,9

1 Service dOphtalmologie, CHU Grenoble-Alpes, France


2 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie, DAI, IBP, CHU Grenoble-Alpes, France
3 Service de Mdecine interne, CHU Grenoble-Alpes, France
4 INSERM unit 1036, CEA-Grenoble, Universit Grenoble-Alpes, Grenoble, France
5 Service dOphtalmologie, CHU Saint Etienne, France
6 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie, CHU Saint-Etienne, France
7 Service dOphtalmologie, CH Valence, France
8 Service dOphtalmologie, CH Chambry, France
9 Institut Albert Bonniot, CNRS UMR 5309, INSERM U1209, Universit Grenoble-Alpes, Grenoble, France

*Auteur correspondant : BChumpitazi@chu-grenoble.fr

La rtinochorodite toxoplasmique (RT) est la premire cause duvite postrieure dorigine infectieuse,
dont la consquence peut tre la ccit. Lobjectif de cette tude est de confirmer le diagnostic des formes
atypiques de RT grce au dosage srologique des anticorps type IgG anti-Hsp70 (Ac Anti-Hsp70)1,2.

Cette tude multicentrique, prospective et longitudinal a inclus 30 patients suspects de RT prsentant une
chorortinite (Groupe 1 dont 18 montraient une RT clinique), 21 patients atteints de RT confirms par la
biologie (Groupe 2), et 42 patients tmoins (atteints de cataracte, Groupe 3). La confirmation biologique
actuelle fait appel au coefficient de Desmonts, au Western Blot ou la PCR. Les taux danticorps sriques
anti-Hsp70 ont t doss par mthode ELISA1,2.

Les taux des Ac anti-Hsp70 taient statistiquement diffrents selon la zone de la rtine atteinte (p=0.006)
ainsi quen fonction de la taille de la lsion choriortinienne (p=0.03). Lestimation dun seuil de positivit du
dosage des Ac anti-Hsp70 par la mthode de la courbe Receiver Operating Characteristic (ROC) na pas
montr de diffrence significative entre les 3 groupes tudis (p=0.57).

Cependant dans le Groupe 1 de suspects de RT, lvaluation du taux srique des Ac anti-Hsp70 a permis
de confirmer biologiquement 10/18 patients prsentant une RT clinique (55,5 % ; Intervalle de confiance
95% [33,5-75,6]) .

En conclusion, le dosage des Ac anti-Hsp70 peut tre ajout, en complment des autres mthodes
biologiques, pour confirmer ltiologie toxoplasmique dune choriortinite. Une prochaine tude en cours
sur la synthse locale des Ac anti-Hsp70 dans lhumeur aqueuse devrait permettre damliorer encore la
performance et la spcificit du diagnostic de RT, ainsi que dvaluer la corrlation avec la taille de la
lsion au cours de la RT.

1. Chumpitazi BF, Bouillet L, Fricker-Hidalgo H, et al. Contribution of anti-Hsp70.1 IgG antibody levels to
the diagnostic certainty of clinically suspected ocular toxoplasmosis. Invest Ophthalmol Vis Sci
2010;51:5530-6.

2. Lesoin A. Intrt de lanticorps Immunoglobulines G Anti Hsp70.1 dans le diagnostic de toxoplasmose


oculaire. Thse de Mdecine, Universit Grenoble-Alpes, Facult de Mdecine de Grenoble 2013:43p.
Toxoplasmose mdullaire chez un patient immunocomptent ?
MARTINOT M. 1 , VILLARD O. 2 * , VOIRIN J. 1 , KIEFFER P. 1 , MOHSENI ZADEH M. 1 , SOUPLY L. 1 ,
FILISETTI D. 2 , AUBERT D. 3 , AJZENBERG D. 4 , FARNAVIER-SEIDEL C. 5 , VELY F. 5 , CANDOLFI E. 2

1 CHG Colmar, France


2 CHU Strasbourg, France
3 CHU Reims, France
4 CHU Limoges, France
5 CHU Marseille, France

*Auteur correspondant : ovillard@unistra.fr

La toxoplasmose est responsable dune infection en gnrale asymptomatique chez le sujet


immunocomptent. Les atteintes svres notamment neurologiques sont dcrites chez les
immunodprims notamment au cours du SIDA [1-2] ou avec des souches hyper-virulentes (Amazonie) [3].
Les atteintes mdullaires restent exceptionnelles et dcrites uniquement chez limmunodprim [4]. Nous
rapportons le premier cas survenu chez un patient sans dficit immunitaire connu.

Cas clinique.

Un patient de 31 ans, vtrinaire et chasseur, sans antcdent de voyage en zone risque de souche
virulente, est adress au service de neurochirurgie pour un syndrome de Brown Sequard (faiblesse de
lhmicorps gauche et hyperesthsie thermo-algique de la jambe D et du flanc D) survenu 2 semaines
aprs un tableau fbrile. Le patient rapporte une consommation de sanglier environ 2 mois avant
lapparition des symptmes. Une IRM mdullaire montre une tumeur cervicale paramdiane C3-C4 de
12mm avec prise de contraste en couronne. Le bilan biologique srique et lanalyse du LCR sont sans
particularit avec notamment une NFS et une CRP normales.

Les srologies virales et parasitaires sont ngatives en dehors de la srologie toxoplasmique qui rvle la
prsence dun titre faible IgG associ des IgM fortement positives. Une avidit des IgG basse fait
voquer le diagnostic de toxoplasmose volutive. Des PCR ralises dans le sang et le LCR sont
ngatives. Paralllement du toxoplasme est dtect dans la viande de sanglier par PCR. Un traitement
avec Adiazine, Malocide et Lederfoline est dbut et une disparition des symptmes neurologiques
est observe. A lIRM, les lsions mdullaires rgressent avec une diminution de la prise de contraste. Le
premier bilan immunitaire comprenant notamment une numration des LT CD4 CD8 et des cellules NK
ainsi que le dosage du complment et des immunoglobulines est normal. Un relai par une prophylaxie au
Bactrim est instaur en attendant les rsultats du test de transformation lymphocytaire.

Discussion

Il sagit dun premier cas probable de toxoplasmose mdullaire rapport chez un patient sans dficit
immunitaire connu. Une recherche dinfection T. gondii doit systmatiquement tre voque devant une
lsion neurologique, y compris spinale, inexplique.

1. Vyas R, Ebright JR: Toxoplasmosis of the spinal cord in a patient with AIDS: case report and review. Clin
Infect Dis 1996, 23(5):1061-1065.

2. Garcia-Garcia C, Castillo-Alvarez F, Azcona-Gutierrez JM, Herraiz MJ, Ibarra V, Oteo JA: Spinal cord
toxoplasmosis in human immunodeficiency virus infection/acquired immunodeficiency syndrome. Infect Dis
(Lond) 2015, 47(5):277-282.

3. Carme B, Demar M, Ajzenberg D, Darde ML: Severe acquired toxoplasmosis caused by wild cycle of
Toxoplasma gondii, French Guiana. Emerg Infect Dis 2009, 15(4):656-658.

4. Denes E, Vidal J, Monteil J. Spinal cord toxoplasmosis. Infection 2013, 41 295-296.


Rupture spontane de la rate au cours du paludisme, propos d'un cas.
MOULINE S. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , LAROUSSI M. 2,3 , ZENTAR A. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de chirurgie viscrale 2, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : mouline.souhail@gmail.com

Introduction :

La rupture spontane de la rate est une complication exceptionnelle du paludisme. Nous rapportons un cas
de rupture splnique au cours dun accs palustre Plasmodium ovale la suite dun sjour en zone
dendmie.

Observation :

Cette observation prsente le cas dun sujet de 34 ans, hospitalis pour accs palustre Plasmodium
ovale, et qui a prsent deux jours plus tard, un syndrome pritonal ncessitant une laparotomie
exploratrice. Au cours de lintervention, on a not un hmo-pritoine abondant ayant ncessit la
ralisation dune splnectomie dhmostase. La rupture spontane de la rate paludenne est une
complication exceptionnelle. Son diagnostic est souvent trompeur. Elle est surtout observe avec P. vivax
et P. falciparum.

Conclusion :

A travers cette observation et une revue de la littrature, seront discutes les particularits
physiopathologiques et diagnostiques de cette pathologie.
Les coccidioses intestinales : Cas de lhpital Ibn Sina de Rabat
RAISS C. 1,2 * , EL ANDALOUSSI K. 1,2 , EL AMIN G. 1,2 , MOUSTACHI A. 1 , LYAAGOUBI M. 1,2 , AOUFI S.
1,2

1 Laboratoire centrale de parasitologie-mycologie mdicale de l'hpital Ibn Sina de Rabat, Maroc


2 Facult de mdecine et de pharmacie de Rabat - UM5S, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : r.chaimae25@gmail.com

Les coccidioses intestinales sont des parasitoses dues des protozoaires intracellulaires parasites des
entrocytes et responsables de diarrhes et de gastroentrites bnignes chez les immunocomptents et
svres et prolonges chez les patients immunodprims.

Notre travail est une tude rtrospective mene au laboratoire central de parasitologie-mycologie mdicale
de lhpital Ibn Sina de Rabat sur une dure de 21 ans, de Janvier 1994 Dcembre 2015. Au total, 12 cas
de cryptosporidiose et 5 cas disosporose ont t recenss.

Le diagnostic sest fait par la mise en vidence doocystes de Cryptosporidium spp. et dIsospora belli sur
les frottis de selles colors par la technique de Ziehl-Neelsen modifie.

Les donnes pidmiologiques, cliniques, biologiques, thrapeutiques et volutives ont t colliges


partir des registres du laboratoire et des dossiers des patients dans leurs services respectifs.

Concernant la cryptosporidiose, la moyenne dge de nos patients tait de 38,5 ans avec un maximum de
64 ans et un minimum de 28 ans. Le sexe fminin tait prdominant avec 9 femmes pour 3 hommes. Tous
les patients taient atteints de VIH avec un taux de CD4 entre 10 et 150 lments/mm.

Les signes cliniques rapports taient: diarrhe (n=12), amaigrissement (n=9), fivre (n=3) et douleurs
abdominales (n=2). Le protocole thrapeutique tait bas sur la thrapie antirtrovirale et le traitement
symptomatique de la diarrhe. Lvolution tait marque par le dcs de 6 patients.

Concernant lisosporose, la moyenne dge tait de 44,5 ans avec un maximum de 63 ans et un minimum
de 26 ans. Le sexe fminin tait prdominant avec 4 femmes pour un homme. Tous les patients taient
immunodprims, une patiente tait sous corticothrapie et cest lisosporose qui a rvl le VIH chez les 4
autres.

Les signes cliniques rapports taient : diarrhe liquidienne et abondante motivant lexamen
parasitologique des selles o la dcouverte du parasite tait fortuite (n=5), altration de ltat gnral (n=5)
et amaigrissement important (n=2). Quatre patients ont t traits par cotrimoxazole et 1 par albendazole.
Lvolution tait marque par la gurison de 3 malades et le dcs de 2.

Les coccidioses intestinales sont des parasitoses mconnues dans notre contexte. Leur pronostic pjoratif
surtout chez les sidens devrait motiver lexamen des selles leur recherche en cas de diarrhes chez les
patients immunodprims.
Profil pidmiologique des cas chirurgicaux de lhydatidose au service de la
chirurgie viscrale de lhpital militaire dinstruction Mohammed V, Rabat, Maroc
RAR L. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , LAAROUSSI M. 2,3 , ZENTAR A. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de chirurgie viscrale 2, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : rarleila@hotmail.com

Introduction : Au Maroc, Le kyste hydatique (KH) endmique a fait lobjet dun programme de lutte
instaur par le ministre de la sant avec laboration dun guide en collaboration avec le ministre de
lintrieur, de lagriculture, de lducation et lOMS, paru en 2007. Lobjectif de notre tude est dtablir le
profil pidmiologique des cas chirurgicaux au service de chirurgie viscrale II de lhpital militaire
dinstruction Mohammed V.

Matriels et mthodes : Il sagit dune tude rtrospective et descriptive stalant du mois de Janvier 2014
Dcembre 2015, portant sur lensemble des patients hospitaliss et oprs pour KH au service de
chirurgie viscrale II de lhpital militaire dinstruction Mohammed V de Rabat.

Rsultats : Nous avons collig 27 patients dont lge moyen tait de 34 ans, et le sexe ratio H/F 0,56%.
Le bilan diagnostique comportait un bilan morphologique (chographie, TDM), et parfois une srologie
hydatique (ELISA). La localisation la plus retrouve tait hpatique (KHF), et les principales complications
taient reprsentes par les fistules biliaires et la surinfection. Au cours de lanne 2014, 14 cas
dhydatidose hpatique ont t rpertoris pour un ensemble de 798 patients hospitaliss et oprs au
service, soit 1,75% des cas. Durant lanne 2015, 13 cas ont t pris en charge pour KHF pour un
ensemble de 922 patients, soit 1,4% des cas.

Conclusion : Lhydatidose demeure au Maroc un problme de sant publique ncessitant encore


sensibilisation, ducation et dpistage pour en rduire la prvalence humaine.
Evaluation du coffret Toxoplasma ELITe MGB pour le diagnostic molculaire de
toxoplasmose
ROBERT-GANGNEUX F. 1,2,6 * , BRENIER-PINCHART M. 3,6 , YERA H. 4,6 , BELAZ S. 1,2 , VARLET-
MARIE E. 5,6 , BASTIEN P. 5,6 , GROUPE DE TRAVAIL CNR . 6

1 CHU Rennes, Rennes, France


2 INSERM U1085, Universit Rennes 1, Rennes, France
3 CHU Grenoble, Grenoble, France
4 Hpitaux Universitaires Paris Centre, Hpital Cochin, Paris, France
5 CHU Montpellier, Universit Montpellier 1, Montpellier, France
6 Ple Biologie Molculaire, CNR Toxoplasmose, France

*Auteur correspondant : florence.robert-gangneux@univ-rennes1.fr

En France, 32 CHU ralisent le diagnostic de toxoplasmose par PCR, dont 21 dans le cadre du diagnostic
prnatal (donnes du rseau CNR Toxoplasmose). A ce jour, environ des laboratoires de Parasitologie
utilisent des techniques de PCR maison , mais lutilisation de kits commerciaux est en augmentation. En
effet, bien que plus onreux, les coffrets commerciaux facilitent la traabilit en vue de laccrditation
COFRAC. Malgr la prsence de seuils de sensibilit donns par le fournisseur, lvaluation de la
performance des kits sur des prlvements de patients est indispensable pour caractriser leur sensibilit
relle en routine. Dans ce travail, nous avons valu le coffret Toxoplasma ELITe MGB (Elitech) ciblant
REP-529, au cours dune tude multicentrique.

Les trois centres (Cochin, Grenoble, Rennes) ont test la gamme de toxoplasmes lyophiliss (juillet 2011)
du CNR (Montpellier) en triplicate, des chantillons dEEQ (QCMD 2014) et des ADN de patients (positifs
ou ngatifs issus de leur DNAthque, confirms par le suivi biologique des patients). Les rsultats (Ct)
obtenus avec le coffret Elitech ont t compars ceux obtenus avec leur technique REP-529 maison .
Au total, 127 chantillons de patients ont t tests : 54 placentas, 4 humeurs aqueuses (HA), 6 couches
leucocytaires, 2 biopsies, 56 liquides amniotiques, 5 LCR, reprsentant 33 prlvements ngatifs et 94
positifs. De plus, la nouvelle gamme CNR Montpellier (juillet 2015) a t extraite en parallle avec le kit
dextraction recommand par Elitech (EXTRAblood) et avec le coffret Qiagen DNA mini-kit, puis
amplifie en triplicate avec Toxoplasma ELITe MGB ou REP-529 maison (Rennes), respectivement.
Dix chantillons QCMD 2014 ont galement t extraits avec EXTRAblood et amplifis avec Toxoplasma
ELITe MGB ou REP-529 maison (Rennes).

Globalement, la technique Toxoplasma ELITe MGB a montr, sur la gamme 2011 extraite avec Qiagen
DNA mini-kit, des performances similaires aux techniques maison des 3 centres. De mme, les
chantillons QCMD, extraits avec EXTRAblood ont donn des rsultats comparables, aprs amplification
avec Toxoplasma ELITe MGB ou avec la technique REP529 maison . Sur les 127 ADN de patients,
33/33 taient ngatifs (spcificit 100%), et 84/94 taient positifs (sensibilit relative 89%). Les faux
ngatifs observs concernaient des placentas dans 9/10 cas (Ct moyen 37.3) et un culot leucocytaire ;
aucun faux ngatif na t observ sur des liquides amniotiques. Dans 3 cas, linhibition a t leve en
retestant lextrait dADN sans contrle interne, suggrant une comptition possible de celui-ci avec la cible.
Pour confirmer cette hypothse, la gamme juillet 2015 a t extraite avec EXTRAblood, avec et sans
contrle interne dextraction puis amplifie avec Toxoplasma ELITe MGB. Les rsultats ont montr une
meilleure sensibilit sur le point de gamme 1 toxo/ml (p<0.001) en labsence du contrle interne.

En conclusion, le coffret Toxoplasma ELITe MGB a montr des performances satisfaisantes sur des
prlvements de liquide amniotique ou autres liquides (HA, LCR), mais son utilisation sur des
prlvements riches en cellules et en inhibiteurs (placenta, sang) peut exposer des faux ngatifs en cas
de faible charge parasitaire. A noter que la prise dessai (10 L) tait suprieure celle des techniques
maison , et le nombre de cycles (45 cycles) tait suprieur celui de 2 des 3 techniques maison .
Bilan rtrospectif des performances analytiques de la PCR-Toxoplasma dans 30
laboratoires franais de 2007 2015
ROUX G. 1,2 , VARLET-MARIE E. 3,4 , BASTIEN P. 1,3,4 , STERKERS Y. 1,3,4 *

1 UMR MIVEGEC (CNRS 5290 - IRD 224 - Universit Montpellier


2 Centre Hospitalier Universitaire Nmes, Laboratoire de Microbiologie
3 Centre Hospitalier Rgional Universitaire de Montpellier, Dpartement de Parasitologie-Mycologie
4 'Ple de Biologie Molculaire du Centre National de Rfrence Toxoplasmose

*Auteur correspondant : patrick.bastien@univ-montp1.fr

Depuis 2007, un certain nombre d'volution se sont produites dans l'organisation et le droulement du CQ.
Par ordre de mise en place: (i) l'augmentation progressive du nombre d'chantillons analyss par an de 5
17 et de une trois sessions par an ; (ii) lyophilisation des chantillons tester ; (iii) utilisation de
tachyzotes de culture (JF Dubremetz et S Besteiro, Universit de Montpellier) ; (iv) envoi dune souche de
type II isole d'une patiente diagnostique Montpellier (Typage : Pr. ML Dard et Dr. D Ajzenberg,
Limoges) la place de la souche RH qui tait classiquement adresse. Deux lments restent inchangs:
(i) la participation est volontaire et gratuite; (ii) la participation dune trentaine de laboratoires et de
mthodes; ce qui correspond 100% des Agrments ministriels "DPN Toxoplasmose" d'hpitaux publics
et aucun des deux centres privs. Une constante durant la priode est lvaluation des performances sur
des concentrations basses qui sont les plus discriminantes. Toutefois, les chantillons faiblement doss
envoys sont des concentrations cliniquement pertinentes pour le DPN (env. 5T/mL). De plus, cette
concentration est rpte sur plusieurs chantillons de faon liminer le risque de faux ngatifs li la
distribution statistique (Loi de Poisson). On attend d'un laboratoire expert qu'il rponde au moins deux
positifs sur trois ractions cette concentration. La sensibilit observe pour les diffrentes mthodes de
PCR durant la priode a t trs bonne. Toutefois, chaque session, au moins un laboratoire a rendu
entre 1 et 4 faux ngatifs pour les concentrations les plus basses. Il faut noter que les chantillons de
plasma ont plus souvent t rendus faussement ngatifs que ceux de LA, ce qui est probablement li un
manque doptimisation de lextraction pour une matrice qui nest pas teste en routine en France. La
recherche de faux positifs est galement un aspect important de cet EEQ, et ce titre, le nombre
dchantillons ngatifs envoys a t augment. Entre 2011 et 2015, 4 chantillons provenant de 3
laboratoires ont t rendus faussement positifs. La prsence dinhibiteurs a galement t dtecte 5
reprises durant la priode, de manire stochastique sur des chantillons ngatifs alors mme que pour un
envoi les matrices sont identiques. Il convient de rappeler que la recherche dinhibiteurs nest absolument
pas standardise. Bien que lEEQ soit qualitatif et non quantitatif, les rponses quantitatives exprimes en
Cp et en Toxoplasme/mL ont t analyses. Lutilisation dune concentration identique au cours de
plusieurs sessions ou au sein dune mme session a permis de donner une image de la reproductibilit des
mesures des diffrents centres. Ainsi, si la majorit des centres ont une bonne reproductibilit 1 Cp,
lcart entre les mesures (DCp) peut dpasser 5, et les valeurs en Toxoplasme/mL varier d'un facteur de 1
25. La principale perspective dvolution de cet EEQ est de dvelopper la production dchantillons
mimant le sang et la couche leuco-plaquettaire afin dvaluer les performances non seulement pour
lactivit de DPN, mais aussi dans le cadre du suivi des patients immunodprims.
#
Ple "Biologie Molculaire" du CNR Toxoplasmose : F. Dalle (Dijon), M.P. Brenier-Pinchart et H Pelloux
(Grenoble), H. Yera (Cochin), F. Touafek (Piti-Salpetrire), J. Menotti (Saint-Louis), D. Filisetti
(Strasbourg), S. Cassaing (Toulouse) et F. Robert-Gangneux (Rennes)
Diversit des pratiques et des mthodes de la PCR- Toxoplasma en France entre
2007 et 2015 Bilan des enqutes du Contrle Qualit national PCR Toxoplasma
ROUX G. 1,2 , VARLET-MARIE E. 3,4 , BASTIEN P. 1,3,4 , STERKERS Y. 1,3,4 *

1 UMR MIVEGEC CNRS 5290 - IRD 224 - Universit Montpellier


2 Centre Hospitalier Universitaire Nmes, Laboratoire de Microbiologie
3 Centre Hospitalier Rgional Universitaire de Montpellier, Dpartement de Parasitologie-Mycologie
4 Ple "Biologie Molculaire" du Centre National de Rfrence de la Toxoplasmose#

*Auteur correspondant : patrick.bastien@univ-montp1.fr

La biologie molculaire a une place capitale dans le diagnostic de la toxoplasmose, en particulier dans ses
formes svres (toxoplasmose congnitale, toxoplasmose de limmunodprim). Dans le cadre de
lvaluation externe de la qualit (EEQ) de la PCR-Toxoplasma organise par le Ple Biologie molculaire
du CNR Toxoplasmose, une enqute annuelle est ralise sur les pratiques des laboratoires participants.
Elle consiste en un questionnaire dtaillant les principales tapes de la ralisation de la PCR avec les
points jugs critiques qui est envoy chaque participant. L'analyse de ce questionnaire permet de donner
un panorama des volutions techniques au cours de cette priode. La prcdente enqute portait sur une
vingtaine de laboratoires durant la priode 2002-2005 et avait permis de mettre en vidence : (i) une trs
grande diversit des mthodes, puisque plus de 30 mthodes taient rapportes, ce qui correspondait
plus dune mthode par laboratoire ; (ii) lmergence rapide de la PCR en temps rel qui passait de quatre
19 laboratoires (Sterkers et al. Clin Microbiol Infect 2010). Aujourdhui une trentaine de laboratoires
participent lenqute et tous utilisent la PCR en temps rel. La diversit des mthodes aurait pu diminuer
de ce fait et de par un plus grand consensus concernant la cible ADN (lment rpt rep529). Cependant,
la multiplication des thermocycleurs, associe larrive des extracteurs automatiques, puis des kits
commerciaux, a augment encore la diversit des pratiques et des mthodes. A noter une tendance sur la
priode vers le regroupement en laboratoires de Microbiologie, ce qui permet notamment dexpliquer le
recours aux automates dextraction. Concernant les cibles, la diversit est trs importante, avec une
quinzaine de pairs damorces diffrentes, dont plus dun tiers utilises par un seul laboratoire. Un autre
champ de diversit correspond lutilisation des CIQ (tmoins dextraction, dinhibition et tmoins ngatifs).
Le point positif est que la quasi-totalit des laboratoires les ont mis en place, l'inconvnient en est l encore
le manque de standardisation, avec en particulier lirruption des contrles commerciaux pas toujours
adapts la Parasitologie. Au total, la diversit des mthodes reste trs leve et aucun signal ne suggre
quelle va tendre se rduire. Une attention particulire doit donc tre porte lhomognit des
performances de ces diffrentes mthodes, et donc leur valuation rgulire.
#
Ple "Biologie Molculaire" du Centre National de Rfrence de la Toxoplasmose : F. Dalle (Dijon), M.P.
Brenier-Pinchart et H Pelloux (Grenoble), H. Yera (Paris, Cochin), F. Touafek (Paris, Piti-Salpetrire), J.
Menotti (Paris, Saint-Louis), D. Filisetti (Strasbourg), S. Cassaing (Toulouse) et F. Robert-Gangneux
(Rennes)
Cartographie de la leishmaniose viscrale dans la province de Taza
SEBBAR E. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , CHEBLI H. 3 , NHAMMI H. 3 , BOUHOUT S. 3 ,
LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service des maladies parasitaires, Direction de lpidmiologie et de lutte contre les maladies, Ministre
de la sant, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : sebbarelhoucine@gmail.com

Introduction : La leishmaniose viscrale reste un grand problme de sant publique au Maroc et qui est
une maladie endmique infantile dclaration obligatoire depuis 1995. La province de Taza reprsente
une zone endmique dans les zones subhumides au front nord du Maroc, les cas de LV sont
vraisemblablement dus Leishmania infantum. Notre tude a pour objectif d'tudier la distribution spatiale
et temporelle des cas de la leishmaniose viscrale dans la province de Taza, avec une analyse de la
rpartition gographique des cas.

Matriels et mthodes : Les donnes qui ont servi pour raliser cette cartographie sont recueillis partir
des rapports annuels des maladies parasitaires de la dlgation du ministre de la sant de la province de
Taza, du 01 janvier 2009 au 31 dcembre 2014.

Rsultats : Durant la priode dtude nous avons enregistr 49 cas de leishmaniose viscrale dans la
province de Taza, avec un pic en 2009 avec 21 cas (42,85% des cas), lanalyse de la rpartition
gographique des cas objective une prdominance en milieu rural.

Conclusion : La gravit et limpact social et conomique de cette affection exigent un renforcement des
mesures prventives et de sensibilisation de la population en milieu rural.
Cartographie de la leishmaniose cutane dans la province de Taza (Maroc)
SEBBAR E. 1,2 * , NAOUI H. 1,2 , BOUMHIL L. 1,2 , CHEBLI H. 3 , NHAMMI H. 3 , BOUHOUT S. 3 ,
LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat,


Maroc
2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service des maladies parasitaires, Direction de lpidmiologie et de lutte contre les maladies, Ministre
de la sant, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : sebbarelhoucine@gmail.com

Introduction : Au Maroc, la leishmaniose cutane est un problme de sant publique. La province de Taza
constitue un foyer endmique Leishmania tropica. La dclaration de cette affection est obligatoire dans le
but dobtenir une cartographie de la rpartition de lendmie, de surveiller de faon documente les foyers
habituels et dalerter en cas de foyer mergent. Notre tude a pour objectif d'tudier la distribution spatiale
et temporelle des cas de leishmaniose cutane dans la province de Taza, avec une analyse de la
rpartition gographique des cas.

Matriels et mthodes : Cest une tude rtrospective avec prsentation cartographique des cas de la
Leishmaniose cutane enregistrs dans la province de Taza, depuis le 1er janvier 2011 jusquau 31 juillet
2015. Les donnes sont recueillies partir des registres de la leishmaniose cutane dans les centres de
sant de la province de Taza.

Rsultats : Durant la priode dtude, 86,5% des cas de leishmaniose cutan enregistrs dans la province
de Taza sont localiss dans la ville de Taza avec 37,5% des cas, la localit de Tahla avec 28,1% des cas
et la ville de Oued Amlil avec 20,9% des cas.

Conclusion : La cartographie de la leishmaniose cutane permet de bien comprendre la rpartition de la


pathologie et le vecteur, qui peut contribuer lamlioration des moyens de lutte et de prvention.
volution de la prvalence des parasitoses digestives dans la rgion de Tunis :
1996-2015
SIALA E. 1 * , HAKMOUNI W. 1 , BETTAIEB J. 2 , BEN ABDALLH R. 1 , BOULEHMI N. 1 , ZALLEGA N. 1 ,
AOUN K. 1 , BOURATBINE A. 1

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Institut Pasteur de Tunis


2 Laboratoire d'Epidmiologie Mdicale, Institut Pasteur de Tunis, Tunisie

*Auteur correspondant : emnasiala99@gmail.com

La prvalence des parasitoses digestives est trs diffrente selon les pays et ne cesse de se modifier en
raison des changements des conditions socio-conomiques et des habitudes culinaires. Par consquent, il
est toujours intressant dactualiser le profil pidmiologique des parasitoses en Tunisie afin de mieux
orienter les mesures de lutte. Les objectifs de cette tude taient de dterminer les prvalences des
parasitoses digestives dans la rgion de Tunis et dtudier leur volution dans le temps.

Il sagit dune tude rtrospective qui a t ralise entre 1996 et 2015 et qui a concern 23364 individus
originaires de la rgion de Tunis. Chaque sujet a eu un ou plusieurs examens parasitologiques des selles.

La prvalence des parasitoses digestives tait de 13,30%. Ce taux a augment significativement au cours
des annes avec des extrmes de 9% en 2010 et 23,03% en 2015 (P<10-2). Cette augmentation serait
due essentiellement une meilleure notification de certains protozoaires digestifs ; particulirement
Blastocystis sp. La prvalence de la giardiose a diminu de 1,9% en 1996 0,74% en 2015. Notre tude
confirme galement la diminution de la prvalence du portage dEntamoeba histolytica/dispar. En effet, ce
taux a pass de 0,6 1% dans les annes 90 des taux ne dpassant pas 0,5% depuis lanne 2004.
Hymenolepis nana a t lhelminthe prdominant avec une prvalence de 0,5%. Lvolution de ce taux
selon les annes montre que cette parasitose reste frquente en Tunisie. Seulement 4 cas
dAnkylostomoses, 5 cas de taeniasis Taenia Saginata et 8 cas danguilluloses ont t diagnostiqus.
Ces helminthioses sont devenues exceptionnelles dans notre pays.
Apport de la technique polymerase chain reaction dans le dpistage du
paludisme en Tunisie
SIALA E. 1,2 * , ESSID R. 2 , SMIRI M. 2 , BEN SGHAIER I. 1,2 , AOUN K. 1,2 , BOURATBINE A. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Biotechnologies et Biomolcules LR11-IPT-06, Institut Pasteur


de Tunis, Tunisie.
2 Laboratoire de recherche Parasitologie Mdicale, Biotechnologies et Biomolcules LR11-IPT-06, Institut
Pasteur de Tunis, Tunisie.

*Auteur correspondant : emnasiala99@gmail.com

En Tunisie, un programme de dpistage du paludisme a t mis en place pour dtecter tout portage de
Plasmodium qui pourrait tre un point de dpart une transmission autochtone. Le dpistage repose sur
lexamen microscopique de la goutte paisse et du frottis sanguin. Cependant, la performance de ce
diagnostic est troitement lie lexprience du biologiste et la parasitmie. Lobjectif de cette tude tait
dvaluer lapport de la PCR dans le cadre du dpistage du paludisme.

Cette tude prospective a concern 295 tudiants originaires de zones dendmie palustres et qui ont eu
un dpistage du paludisme entre 2012 et 2014. Chaque sujet a eu un prlvement sanguin qui a fait lobjet
dune goutte paisse, dun frottis sanguin et dune PCR niche multiplex en utilisant des amorces ciblant le
gne de la sous-unit 18S de lARN ribosomale.

La PCR a permis de dtecter la prsence du Plasmodium dans 15 prlvements sanguins (5,08%). Alors
que la microscopie ntait positive que dans dix cas (3,38%). Les discordances concernaient six
chantillons ngatifs en microscopie et qui taient positifs en PCR et un chantillon ngatif en PCR et
positif la microscopie. Une infection mixte Plasmodium falciparum et Plasmodium malariae a t
identifie par PCR. Pour ce dernier cas, la microscopie na permis de diagnostiquer que lespce
Plasmodium falciparum. La PCR est plus performante que la microscopie dans la dtection des
parasitmies faibles ; particulirement observes chez les sujets asymptomatiques. Son introduction
permet de diminuer le portage asymptomatique de Plasmodium et de rduire le risque dune reprise de la
transmission de cette parasitose dans notre pays.
BLASTOCYSTIS spp : Problmes Thrapeutiques
TRABELSI S. 1,2 * , ALOUI D. 1,2 , BOUCHEKOUA M. 1,2 , CHEIKHROUHOU S. 1,2 , KHALED S. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Charles-Nicolle, Tunis, Tunisie


2 Facult de Mdecine de Tunis, Universit Tunis El Manar, Tunisie

*Auteur correspondant : trabelsi.sonia@gmail.com

Introduction :

Blastocystis sp est un parasite intestinal connu depuis longtemps. Il est cosmopolite et vit au niveau du
colon. La contamination seffectue par voie orale. Il est toujours lobjet de controverse concernant sa
pathognicit. Par ailleurs, certaines publications ont rapport des cas de rsistance de ce parasite au
Mtronidazole. Dans ce contexte, nous rapportons deux observations.

Observations :

Observation 1 : Il sagit dun homme, g de 39 ans, atteint dune rectocolite hmorragique sous
Azathioprine. Lexamen parasitologique des selles, systmatiquement demand, avait rvl la prsence
de Blastocystis malgr 3 cures de Mtronidazole.

Observation 2 : Il sagit dune patiente ge de 50 ans, manipulateur de denres alimentaires (agent de


cuisine dun hpital public). Le contrle parasitologique des selles, systmatiquement demand, avait
rvl la prsence de Blastocystis. Bien quelle soit asymptomatique, mais au vu de la particularit de son
mtier, le Mtronidazole a t prescrit 3 reprises sans rponse favorable.

Devant labsence defficacit de cette molcule, une alternative thrapeutique a t adopte. Les deux
patients ont t traits par lassociation Sulfamthoxazole (800mg) - Trimthoprime (160mg)
(Cotrimoxazole) raison de 1cpx2/j pendant 7 jours.

Un examen parasitologique des selles de contrle a t effectu 15 jours plus tard et est revenu ngatif
pour le premier patient et positif pour la deuxime patiente. Pour cette dernire, une enqute familiale a t
mene et des examens parasitologiques des selles ont rvl la prsence de Blastocystis chez le conjoint
et un de ses enfants.

Discussion :

Le Mtronidazole est la molcule de choix, prescrite en premire intention en Tunisie pour traiter les
protozooses digestives habituelles, y compris celles dues Blastocystis. En cas de rsistance, la molcule
prescrite en deuxime intention est le cotrimoxazole. Cependant des cas de rsistance cette dernire
sont rapports.

Conclusion :

Bien que dcrit par Brumpt depuis 1912, Blastocystis demeure ce jour un protozoaire dont le cycle et la
pathognie sont en cours dtude ; sa rsistance aux anti-protozoaires digestifs usuels accentue son
caractre nigmatique.
La PCR en temps rel dans le diagnostic de la leishmaniose cutane et
lidentification des espces impliques en Tunisie : Exprience du laboratoire de
Parasitologie de lInstitut Pasteur de Tunis (IPT).

BEN ABDA I. 1,2 * , BEN ABID M. 2 , BEN SGHAIER I. 2 , SOUISSI O. 1 , ZALLEGUA N. 1 , AOUN K. 1,2 ,
BOURATBINE A. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie, Institut Pasteur de Tunis


2 Laboratoire de recherche LR11-IPT06 Parasitologie mdicale, biotechnologies et biomolcules ,
Institut Pasteur de Tunis.

*Auteur correspondant : benabda.imen@hotmail.fr

En Tunisie, la leishmaniose cutane (LC) reprsente un problme important de sant publique vu son
incidence leve et son cot de prise en charge. Elle est due 3 espces Leishmania (L.) infantum, L.
major et L. tropica. Le diagnostic clinique-pidmiologique de la LC peut tre difficile du fait des
prsentations atypiques et des extensions rcentes des aires de rpartition des 3 formes noso-
gographiques classiques (sporadique du Nord, zoonotique et chronique). Ainsi, il est ncessaire de
disposer doutils performants, aussi bien pour la dtection du parasite que pour lidentification des espces
afin damliorer la prise en charge des patients et adapter les mesures de contrle.

Lobjectif de notre travail tait de rapporter lexprience de notre laboratoire concernant la technologie PCR
en temps rel (qPCR) dans le diagnostic positif de la LC et dans lidentification des espces impliques en
Tunisie.

Ltude a port sur 76 patients suspects dune LC : 49 adresss notre laboratoire entre Juin 2015 et
Janvier 2016 pour un prlvement la recherche des leishmanies et 27 colligs suite une enqute
pidmiologique mene en dcembre 2015 aux gouvernorats de Tataouine et Kairouan. Tous les sujets
ont bnfici dune fiche de renseignements et dun examen parasitologique direct (ED) des frottis
lsionnels. Le matriel destin lextraction dADN a t rcupr, aprs scarification des lsions laide
dune brossette cervicale strile (Deltalab, Barcelona, Spain) puis lu dans 200 l de PBS. LADN total a
t extrait par Qiamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany). Une qPCR ciblant lADN
kintoplastique (k) et utilisant la chimie TaqMAN a t complte en cas de ngativit de lED.
Lidentification des espces de Leishmania a t effectue pour les patients confirms LC ayant une
prsentation atypique et pour tous les prlvements positifs effectus sur terrain. Elle a t base sur une
autre qPCR utilisant la chimie EvaGreen et ciblant le gne 7SL RNA, suivie dune analyse High
Resolution Melting (HRM).

Au total, le diagnostic de LC a t port dans 46 cas (60,5%): 28/49 des prlvements adresss par les
cliniciens et 18/27 des prlvements effectus sur terrain. La qPCR ADNk a permis de rattraper les faux
ngatifs de lED dans 12 cas (25,5%). La qPCR 7SL RNA suivie de lanalyse HRM a identifi avec succs
dans 85,7% des cas (18/21) lespce de Leishmania. L. infantum a t lespce implique dans 2 cas
cliniquement atypiques. L. major a t identifi dans tous les cas positifs sur terrain, concordant avec le
caractre pidmique de cette espce dans les 2 gouvernorats enquts.

En conclusion, la qPCR savre une alternative fortement utile et rapide, permettant, dune part grce la
sensibilit de la cible kintoplastique daider les cliniciens mieux prendre en charge les patients, et
dautre part grce la possibilit dune analyse HRM didentifier les espces de Leishmania directement
sur des prlvements lsionnels.
Toxoplasma gondii in cats of Rio de Janeiro: an eco-epidemiological survey with
the use of filter-papers
BOLAIS P. 1 * , VIGNOLES P. 1 , PEREIRA P. 2 , KEIM R. 3 , AMENDOEIRA M. 2 , DARDE M. 1

1 Parasitological Laboratory INSERM 1094, Limoges, France


2 Toxoplasmosis Laboratory of Instiut Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brazil
3 Quatro Elementos Veterinary Medecine and Consulting

*Auteur correspondant : pfbolais@yahoo.com.br

Toxoplasma gondii is a protozoan with a successful distribution worldwide and a widespread presence in
warm-blood animals, including humans. These characteristics have encouraged numerous studies to
achieve a better comprehension of its biology, genetic and transmission dynamics. Previous studies had
demonstrated that local conditions and environmental disturbances may influence the genetic composition
of a zoonotic agent (Mercier et al, 2010) or its transmission dynamics (Afonso et al, 2006). Having this in
mind, this study aimed to verify if strong environmental differences are likely to influence the epidemiology
of Toxoplasma in two populations of cats living in quite distinct conditions in the city of Rio de Janeiro.
Furthermore, we verified the accuracy of the serological testing with the use of samples previously stored
on filter papers. For sampling, two very different places in the city of Rio de Janeiro have been chosen: a
public cat shelter located downtown and a private residential area situated in the district of Barra da Tijuca.
Although both locations are currently classified as anthropic areas, their urbanization occurred at different
times and with different intensities. Taking this into account, in 2014 and 2015, a total of 372 domestic cats
from these two populations were sampled for this study: 265 from the public cat shelter and 107 from the
private residential area. Each animal from both populations has been previously identified with
subcutaneous transponders. Their blood was collected by puncture of cephalic vein and four to six drops of
the collected fluid has been used to soak two diameters circles of a Whatman903 specimen collection
papers. Sera from ordinary collection tubes and those obtained from eluted dried spots were tested for
detection of IgG antibodies against T. gondii by Modified Agglutination Test (MAT) as previously described
by Desmont and Remington (1980) and adapted to dried blood samples by Mercier et al (2013). Samples
were screened at four serial dilutions (1:20, 1:40, 1:100 and 1:400) and those with a titer 20 were referred
to as positive. Antibodies to T. gondii were detected in 4 (3,74%) of 107 cats from the residential area and
in 32 (12,08%) of 265 from the public shelter. The less significant prevalence in the residential region
seems to be related to lower density of animals and availability of diversity of prey. Samples stored in
collection papers have showed the same results from those stored in ordinary collection tubes. In such a
way filter papers accuracy provides us a reliable alternative storage when conditions of collection and
transportation of samples are unfavorable.
Toxoplasmose chronique et apne du sommeil : sont-elles lies ?
DARD C. 1,2 * , BAILLY S. 1,3 , BRENIER-PINCHART M. 1,2 , FRICKER-HIDALGO H. 1 , CLERY-BARRAUD
C. 4,5 , TAMISIER R. 4,5 , PEPIN J. 4,5 , PELLOUX H. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Institut de Biologie et Pathologie, CHU de Grenoble, Grenoble,


France
2 Institut Albert Bonniot, INSERM U1209 - CNRS UMR 5309, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France
3 UMR 1137-IAME Team 5-DeSCID, Inserm/Paris Diderot, Universit Sorbonne Paris Cit, Paris, France
4 Laboratoire HP2, INSERM, U1042, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France
5 Laboratoire du sommeil et EFCR, ple Thorax et Vaisseaux, CHU de Grenoble, Grenoble, France

*Auteur correspondant : cdard@chu-grenoble.fr

Introduction: La toxoplasmose est une maladie parasitaire cosmopolite cause par Toxoplasma gondii.
Les kystes toxoplasmiques crbraux ont longtemps t considrs comme non-pathognes pour lhte.
Cependant, des tudes rcentes suggrent leur implication dans diffrentes pathologies psychiatriques
comme la schizophrnie. Les mcanismes physiopathologiques seraient lis laltration des voies de
signalisation des neurotransmetteurs dans le systme nerveux central. Le syndrome dapne obstructive
du sommeil (SAOS) est un trouble du sommeil affectant plus de 10% de la population caractris par des
asphyxies rptes pendant le sommeil. La somnolence diurne (SD) est lun des symptmes principaux
mais nest pas corrle la svrit du SAOS. Limplication de la toxoplasmose chronique dans les
anomalies du contrle central de la respiration reste un domaine de recherche inexplor. Les objectifs de
cette tude sont donc dvaluer les liens potentiels entre la toxoplasmose chronique et la SD ou le SAOS
chez des patients obses.

Matriel et mthodes: Il sagit dune tude cas/contrle pour laquelle nous avons slectionn 107 patients
obses (IMC > 30 kg/m2), prsentant ou non une SD ou un SAOS, suivis pour suspicion de SAOS.
Chaque cas de SD ou SAOS a t appari un contrle selon les critres d'ge, de sexe et d'IMC. Le
diagnostic de toxoplasmose chronique a t valu par la ralisation de srologies toxoplasmiques, avec
titration quantitative dIgG et IgM anti-T. gondii par ELISA (Architect, Abbott, USA). Les rsultats positifs
ont t confirms par ELISA (Vidas, bioMrieux, France). La toxoplasmose chronique a t retenue
quand les IgG taient positives avec les deux mthodes. Les facteurs de comorbidit et la SD ont t
respectivement valus par des analyses biologiques adaptes et via le score dEpworth pendant
lvaluation clinico-biologique du SAOS. Des modles de rgression logistique univaris et multivaris ont
t utiliss pour identifier les facteurs de risque associs avec les rsultats. Une p-value 0.05 a t
considre comme significative.

Rsultats: Concernant la SD, 82 patients, 41 cas apparis 41 contrles, ont t considrs. L'analyse
multivarie a montr que parmi les variables slectionnes (la toxoplasmose chronique, les comorbidits
respiratoires, rnales, cardiovasculaires et lhypercholesterolmie) seules les comorbidits respiratoires et
rnales taient associes un risque accru de SD (OR= 3.62; 95% CI = [1; 13.13]; p=0.05) alors que la
toxoplasmose chronique ntait pas associe avec une SD (OR = 0.76, CI = [0.25 ; 2.33], p=0,64). Enfin
concernant le SOAS, 52 patients ont t slectionns (26 cas apparis 26 contrles). Aucune variable
ntait significativement associe la survenue d'un SAOS dans les analyses uni- et multi-varies. La
toxoplasmose chronique nest donc pas significativement associe avec le SOAS dans cette tude.

Conclusion: Dans la thmatique actuelle des troubles neurologiques associs la toxoplasmose


chronique, cette tude se distingue des autres par la collection complte des donnes concernant la
cohorte de patients et les analyses srologiques. Nous navons pas observ de lien significatif entre la
toxoplasmose chronique et la SD ou le SOAS. Cependant, cette tude prliminaire doit tre largie
dautres catgories de patients, notamment chez des patients non-obses dont lAS est davantage
dorigine centrale que chez les patients obses.
Syndrome dactivation macrophagique et Toxoplasmose en hmatologie
DUPONT D. 1,2 * , CONRAD A. 3,4 , BALSAT M. 5 , DUCASTELLE-LEPRETRE S. 5 , LABUSSIERE-
WALLET H. 5 , BARRACO F. 5 , NICOLINI F. 5 , THOMAS X. 5 , GILIS L. 5,6 , WALLET F. 7 , LE
MARECHAL M. 8 , RABODONIRINA M. 1 , WALLON M. 1,2 , SALLES G. 5 , MICHALLET M. 5 , PLESA A. 9 ,
ADER F. 3,4

1 Institut de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hospices Civils de Lyon, Lyon


2 Equipe WAKING Physiologie intgre du systme dveil, Centre de Recherche en Neurosciences de Lyon Inserm U1028,
CNRS UMR5292, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon
3 Dpartement de Maladies Infectieuses et Tropicales, Hospices Civils de Lyon, Lyon
4 Inserm U1111 Centre International de Recherche en Infectiologie CIRI, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon
5 Dpartement dHmatologie, Hospices Civils de Lyon, Pierre-Bnite
6 Dpartement dOnco-Hmatologie, Centre Lon Brard, Lyon
7 Dpartement dAnesthsie et de Ranimation du Centre Hospitalier Lyon-Sud, Hospices Civils de Lyon, Pierre-Bnite
8 Universit de Lorraine et Paris Descartes, EA 4360 APEMAC, Nancy
9 Laboratoire d'Hmatologie, Centre Hospitalier Lyon-Sud, Hospices Civils de Lyon, Pierre-Bnite

*Auteur correspondant : damien.dupont@chu-lyon.fr

La toxoplasmose est une infection svre de limmunodprim par le biais dune ractivation des formes
kystiques de T. gondii. Parmi les receveurs dallogreffe de cellules souches hmatopotiques (allo-CSH),
lincidence de la ractivation toxoplasmique en infection ou maladie selon les dfinitions en vigueur est
directement corrle la sroprvalence et a t value en Europe de lOuest 16% et 8% des
receveurs dallo-CSH, respectivement. La toxoplasmose du receveur dallo-CSH est une maladie grave
dont les principaux signes cliniques sont des manifestations respiratoires. Un seul cas de syndrome
dactivation macrophagique (SAM) associ la toxoplasmose chez lallogreff a t prcdemment
rapport. Le SAM est caractris par une hyperactivation des macrophages de la moelle osseuse rsultant
en la destruction des prcurseurs hmatopotiques. Nous rapportons ici trois cas de toxoplasmose
complique de SAM diagnostiqus chez des receveurs dallo-CSH dans le dpartement dHmatologie de
Lyon entre 2014 et 2015.

Ces trois patients taient atteints de leucmie aigu et avaient reu une allo-CSH dun donneur non
apparent (moelle osseuse HLA-compatible 10/10 n=1, moelle osseuse HLA-compatible 9/10 n=1 et deux
units de sang placentaire n=1) aprs un conditionnement mylo-ablatif (n=2) ou non-mylo-ablatif (n=1).
Les trois patients avaient une srologie toxoplasmose positive avant lallogreffe (R+) alors que la srologie
des donneurs tait ngative (D-). Aucun ne recevait de chimioprophylaxie efficace contre la toxoplasmose.
Deux patients bnficiaient dun monitoring hebdomadaire par PCR T. gondii sanguine. Les patients
recevaient une immunosuppression par ciclosporine (n=2) et ciclosporine + mycophnolate moftil (n=1).
Le dlai entre allo-CSH et toxoplasmose tait de 21, 30 (avant la prise de greffe pendant la phase
neutropnique) et 82 jours post-greffe, respectivement. Une atteinte pulmonaire tait associe au SAM
chez un patient. Les trois patients prsentaient un SAM dont les principaux signes taient une fivre leve
(n=3), une pancytopnie (n=3), une hyperferritinmie 15000 g/L (n=3), une hypertriglycridmie 1,5
g/L (n=3), une cytolyse hpatique 5N (n=2). Le mylogramme objectivait une moelle hypoplasique avec
de rares images dhmophagocytose (n=3). Le diagnostic de toxoplasmose maladie dissmine a t pos
sur la positivit des PCR dans le sang (n=3), lurine (n=3), le LBA (n=1), mais aussi dans la moelle osseuse
(n=3). Le traitement anti-toxoplasmique consistait en une association de pyrimthamine (n=3) et de
sulfadiazine (n=2) ou de clindamycine (n=1). Un patient a reu une corticothrapie systmique 2 mg/kg/j
pour une maladie du greffon contre lhte concomitante. Aucun autre traitement spcifique du SAM na t
administr. Deux dcs sont attribuables la toxoplasmose (survenus dans un dlai de 30 et 84 jours
aprs le diagnostic), lun des deux ayant prsent un rejet primaire du greffon. Le troisime patient est
vivant 1 an sous atovaquone au long cours.

Le SAM est un critre de svrit associ la mortalit de la toxoplasmose chez le receveur dallo-CSH.
Ainsi, chez lallogreff, une toxoplasmose maladie doit faire rechercher une atteinte mdullaire ; de mme,
T. gondii doit tre recherch comme agent tiologique en cas de SAM. Il est possible que T. gondii joue un
rle dans la perte du greffon, soit par un mcanisme direct, soit par un phnomne de mylotoxicit lie au
SAM.
Accs palustres Plasmodium ovale curtisi et Plasmodium ovale wallikeri en
France mtropolitaine
HOUZE S. 1 * , ARGY N. 1 , HUBERT V. 1 , MARECHAL C. 1 , THELLIER M. 2 , CORRESPONDANTS CNR
DU PALUDISME C. 1

1 CNR du Paludisme, APHP Hpital Bichat, Paris


2 CNR du Paludisme, APHP Hpital Piti Salpetrire, Paris

*Auteur correspondant : sandrine.houze@aphp.fr

Introduction : Il a t rcemment montr que le diagnostic dinfection Plasmodium ovale regroupait les
accs dus deux sous-espces, Plasmodium ovale curtisi (Po curtisi) et Plasmodium ovale wallikeri (Po
wallikeri), non morphologiquement diffrenciables. Nous avons conduit une tude rtrospective sur le
diagnostic des accs palustres associs aux deux espces, daprs les dclarations des correspondants
du Centre National de Rfrence du Paludisme.

Matriel et mthodes : A partir des chantillons sanguins reus pour expertise entre 2013 et 2015, sur
lesquels lespce Plasmodium ovale avait t identifie par microscopie et confirme par PCR temps rel
Fast Track (Launch Diagnostics), les sous espces Po curtisi et Po wallikeri ont t dtermines par
biologie molculaire. Daprs les dclarations par les correspondants sur la base scurise Voozanoo des
cas daccs palustres associs, les rsultats des tests de diagnostic rapide (TDR), les parasitmies, les
taux d'hmoglobine et les numrations plaquettaires ont t colliges et ainsi que des donnes
pidmiologiques, et analyses en fonction de la sous-espce en cause.

Rsultats : Deux cent cinquante-deux accs Plasmodium ovale diagnostiqus chez 244 patients, ont t
inclus, se rpartissant en 122 accs Po wallikeri (dont 6 reviviscences) et 130 accs Po curtisi (2
reviviscences). Le sex ratio (H/F = 1.97) et lge mdian (29 [IQ : 21 ; 47]) taient identiques pour les deux
sous-espces considres. Les patients taient majoritairement des migrants dorigine africaine, de retour
dAfrique sub-saharienne. Les principaux pays dendmie dclars o les deux sous-espces avaient t
contractes taient par ordre de frquence, la Cote dIvoire, le Cameroun, la Rpublique centrafricaine, la
Guine et le Mali; il ntait pas observ de rpartition gographique diffrente selon la sous-espce. Le
dlai entre le retour de zone dendmie et le diagnostic tait comparable pour les deux sous-espces.

Les taux moyens dhmoglobine lors du diagnostic ntaient pas significativement diffrents selon la sous-
espce en cause (130g/l [75 168] pour Po wallikeri vs 133,8 g/l [75 185] pour Po curtisi) en revanche, la
valeur moyenne de la numration plaquettaire tait significativement plus basse (102,2 G/l [13 247]) dans
le cas des accs Po wallikeri vs 120,9 G/l [13 300] pour les accs Po curtisi (p< 0.05). Les
parasitmies observes taient faibles (parasitmie moyenne : 9450 p/l 13950 p/l) et du mme ordre
de grandeur pour les deux sous-espces. La dtection de laldolase avec les TDR ntait positive que dans
33,3% des diagnostics, taux de positivit identique pour les deux sous-espces. En revanche, la dtection
de la pLDH est plus frquemment positive pour les accs Po wallikeri (33,9%) que pour les accs Po
curtisi (18%) (p=0.06) : cette observation peut sexpliquer par des diffrences dans la squence de la
protine pLDH selon la sous-espce considre.

Conclusion : Cette tude a montr que seule la biologie molculaire peut permettre lidentification des deux
sous-espces, les lments dorientation diagnostique tant peu diffrents entre Po wallikeri et Po curtisi
lexception de la thrombopnie plus svre et dun rsultat plus frquemment positif pour la dtection de la
pLDH dans les accs dus Po wallikeri.
Infection dissmine Acanthamoeba chez une patiente transplante pulmonaire
TALARMIN J. 1 , YERA H. 2 * , PLANTIN P. 3 , CHRETIEN F. 4 , HALOUN A. 5 , STAROZ F. 6 , SIOHAN P.
7
, HUTIN P. 1

1 Service de Mdecine Interne et de Maladies infectieuses, Centre Hospitalier de Cornouaille, 14bis


avenue Yves thpot, 29107 Quimper cedex, France
2 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Cochin AP-HP, Facult de Mdecine Universit Paris
Descartes, 27 Rue Fbg Saint Jacques, 75014 Paris, France
3 Service de Dermatologie, Centre Hospitalier de Cornouaille, Quimper
4 Unit dhistopathologie humaine et modles animaux, Institut Pasteur 25 rue du Dr. Roux 75774 Paris
cedex 15, France
5 Unit de transplantation dorganes thoraciques, Hpital Nord Laennec, boulevard Jacques-Monod, Saint-
Herblain 44093 Nantes Cedex 1, France
6 Laboratoire danatomie et de cytologie pathologique, 6 alle loeiz herrieu, BP 1309, 29103 quimper,
France
7 Service de nphrologie, Centre Hospitalier de Cornouaille, Quimper

*Auteur correspondant : helene.yera@aphp.fr

Objectif: Les complications infectieuses sont responsables dune morbidit et dune mortalit importante
chez les transplants pulmonaires. Cependant, les infections Acanthamoeba sont rarement dcrites dans
ce contexte [1]. Nous rapportons un cas dinfection cutano-muqueuse dissmine Acanthamoeba chez
une jeune femme transplante des deux poumons. Il sagit du quatrime cas dinfection cutane
dissmine Acanthamoeba rapport en France depuis 1999. Observation: Une jeune femme de 25 ans,
atteinte de mucoviscidose, greffe pulmonaire en 2012 et traite par tacrolimus et prednisolone, tait
hospitalise en juillet 2014 pour fivre et sinusite aige. Elle prsentait de multiples nodules sous-cutans
non inflammatoires des membres infrieurs et un nodule du palais dur. Lhistologie des biopsies cutanes
tait peu contributive. Les bilans microbiologiques sanguins, cutans, pulmonaires taient ngatifs. Malgr
un traitement probabiliste antibiotique, antifongique et antiviral, les lsions cutanes voluaient sur deux
mois avec un aspect violac puis ncrotique. Lhistologie des nouvelles biopsies cutanes montrait une
panniculite neutrophile et une vascularite ncrosante. Le bilan microbiologique cutan restait ngatif. Le
nodule du palais sulcrait. Lhistologie montrait une ncrose, de nombreuses levures compatibles avec
Candida et des inclusions osinophiles pouvant faire voquer une mycose profonde ou une parasitose. La
patiente prsentait brutalement une dtresse respiratoire aigu avec un sepsis staphylocoque dor
rsistant la mticilline et dcdait en septembre 2014. Post-mortem, une r-analyse histologique des
biopsies cutanes et muqueuses montrait la prsence de protozoaires vocateurs damibe au sein des
lsions ncrosantes suppures diffuses. Le diagnostic dinfection Acanthamoeba (gnotype T4) tait
confirm par biologie molculaire sur du tissus cutan fix et inclus en paraffine. Conclusions: Le
diagnostic dinfection dissmine Acanthamoeba doit tre voqu chez un patient immunodprim
prsentant des lsions cutanes et chez qui le bilan microbiologique est ngatif. Les infections
Acanthamoeba sont le plus souvent fatales du fait dune prise en charge tardive [2]. La clinique est non
spcifique. Le diagnostic ncessite un pathologiste expriment et des examens de biologie spcifiques.
Une meilleure connaissance de ces infections par les cliniciens, les pathologistes et les biologistes
permettrait de poser un diagnostic prcoce, dinstaurer rapidement un traitement et ainsi de diminuer leur
mauvais pronostic. Reference: [1] J.D. Christie, L.B. Edwards, P. Aurora P et al. J Heart Lung Transplant.
Vol. 28, 2009, 1031 [2] G.S. Visvesvara. Curr Opin Infect Dis. Vol. 23, 2010, 590

Socit Franaise de
MYCOLOGIE MEDICALE

Communications Orales

24 (aprs-midi) et 25 mars 2016


Dsescalade prcoce: O en sommes-nous ? (Confrencier Invit)
DUPONT H.

*Auteur correspondant :

Rsum non disponible


Profile of Aspergillus fumigatus and azole resistance from respiratory samples of
French patients at risk for aspergillosis (Confrencier Invit)
PERLIN D. 1 * , ZHAO Y. 1 , GARNAUD C. 2,3 , BRENIER-PINCHART M. 2,4 , THIEBAUT-BERTRAND A. 3,5
, SAINT-RAYMOND C. 6 , HAMIDFAR R. 7 , COGNET O. 2 , MAUBON D. 2,3 , CORNET M. 2,3

1 Public Health Research Institute, New Jersey Medical School, Rutgers Biomedical and Health Sciences,
Newark, NJ, USA
2 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Institut de Biologie et Pathologie, Centre Hospitalier Universitaire
Grenoble Alpes, Grenoble, France.
3 Laboratoire TIMC-IMAG-TheREx, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France
4 Institut Albert Bonniot, Universit Grenoble-Alpes, Grenoble
5 Clinique Universitaire dHmatologie, Centre Hospitalier Universitaire Grenoble Alpes, Grenoble, France
6 Clinique Universitaire de Pneumologie, Centre Hospitalier Universitaire Grenoble Alpes, Grenoble,
France
7 Ranimation Mdicale, Centre Hospitalier Universitaire Grenoble Alpes, Grenoble, France

*Auteur correspondant :

Background: Highly active triazoles are recommended as the first-line therapy to treat invasive
aspergillosis (IA) and chronic or allergic aspergillosis, but their effectiveness is challenged by the
emergence of drug resistance. Microbiological diagnosis of aspergillosis and triazole resistance is limited
by poor culture yield. To better estimate this shortcoming, we compared culture and molecular detection of
A. fumigatus azole resistance in respiratory samples from French patients at risk for aspergillosis.

Methods: A total of 97 respiratory samples including bronchoalveolar lavages (BAL), bronchial aspirates
(BA), tracheal aspirates, sputa, pleural fluids, and lung biopsy were collected from 33 patients having
invasive aspergillosis (n=12), chronic pulmonary aspergillosis (n=3), allergic bronchopulmonary
aspergillosis (n=7) or colonization (n=11) and 28 controls. Each specimen was evaluated by culture, pan-
Aspergillus qPCR, and CYP51A PCR and sequencing.

Results: One A. flavus and 19 A. fumigatus with one multiazole resistant strain (5.3%) were cultured from
20 samples. Culture positivity was 62.5%, 75%, 42.9%, and 15.8% in ABPA, CPA, IA and colonized
patients, respectively. Aspergillus detection rate was significantly higher by pan-Aspergillus qPCR than by
culture in IA (90.5% vs 42.9%; P<0.05) and colonization group (73.7% vs 15.8%; P<0.05). The CYP51A
PCR found one TR34/L98H along with 5 novel cyp51A mutations (4 non-synonymous and 1 promoter
mutations), among which 3 were from culture-negative samples. To investigate the diagnostic value of
different respiratory sample types for both Aspergillus and azole resistance detection, we analyzed 11
matched pairs of BAL and BA samples collected during the same bronchoscopy exam, from 11 patients
with different underlying diseases and clinical diagnosis. The analysis found that 9/11 BA carried greater
fungal load than BAL and resistance marker detection was more sensitive in BA than in BAL.

Conclusion: Direct molecular detection of resistance markers may facilitate prompt adaptation of
appropriate antifungal therapy. The novel cyp51A mutations and the observed superior diagnostic value of
BAs to BAL fluids warrants more in-depth study.
Emergence of mutator phenotype in Candida glabrata promotes multidrug
resistance (Confrencier Invit)
PERLIN D. 1 * , HEALEY K. 1 , ZHAO Y. 1 , LOCKHART S. 2 , KONTOYIANNIS D. 4 , SANGLARD D. 5 ,
TAJ-ALDEEN S. 6 , ALEXANDER B. 7 , CHOWDHARY A. 8 , JIMENEZ ORTIGOSA C. 1 , SHOR E. 1

1 Public Health Research Institute, New Jersey Medical School, Rutgers Biomedical and Health Sciences,
Newark, NJ, USA, 07103
2 Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA, 30333
3 Wayne State University School of Medicine, Detroit, MI, USA, 48201
4 The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX, USA, 77030
5 Institute of Microbiology of the University Hospital of Lausanne, Lausanne, Switzerland
6 Department of Laboratory Medicine and Pathology, Hamad Medical Corporation, Doha, Qatar
7 Duke University, Durham, NC, USA, 27710
8 Vallabhbhai Patel Chest Institute, University of Delhi, Delhi, India

*Auteur correspondant :

Methods: DNA mismatch repair genes, MSH2 and PMS1, and double-strand break repair gene, RAD50,
were disrupted and deletion strains selected on multiple antifungals to determine mutational frequencies.
Drug target genes, e.g. FKS1/2 and PDR1, were sequenced in resistant mutants. MSH2 was subsequently
sequenced in 440 diverse, clinical strains with varying susceptibility profiles. Identified mutations were
expressed in the msh2 deletion strain and frequencies of echinocandin-resistant mutants measured. A
mouse model of gastrointestinal colonization was used to measure in vivo antifungal breakthrough of an
msh2-deficient C. glabrata strain. Fitness of msh2 was assessed in mixed colonization and systemic
infection models through qPCR analysis of fecal and kidney DNA, respectively.

Results: Disruption of MSH2 or PMS1, but not RAD50, led to a hyper-mutable phenotype and a significant
increase in the emergence of echinocandin-, fluconazole-, and amphotericin B-resistant mutants. Out of the
440 clinical strains analyzed, 53% (164/307) of susceptible isolates demonstrated a nonsynonymous
mutation within Msh2, while a mutation was discovered in 65% (55/84; p < 0.05 vs. susceptible) of
fluconazole-resistant isolates and 62% (21/34; ns vs. susceptible) of multi-drug resistant isolates.
Evaluation of msh2 mutations from clinical isolates in a lab tester strain showed that they promoted the
hyper-mutable phenotype. Both fks1/2 and pdr1 mutations were identified in resistant clinical isolates. Mice
colonized with both the wild-type and msh2 strains and treated with caspofungin showed emergence of
echinocandin resistance in msh2-colonized mice with prominent Fks1 mutations (625delF; S629P)
identified. In fitness assays, the average wild type to mutant ratio in kidneys and stool of mice inoculated
with both strains was between 2:1 and 3:1, indicating a modest fitness defect of the msh2 strain.
Importantly, both models demonstrated similar levels of colonization and infection when inoculated with
either wild type or msh2 alone.

Conclusion: Loss of mismatch repair function promotes the acquisition of resistance to multiple
antifungals, at least partially explaining the elevated rates of triazole and multi-drug resistance associated
with C. glabrata. Identification of mismatch repair defects in infecting strains has implication for prophylaxis
and therapy.
Etude MYCACAND (Confrencier Invit)

CHANDENIER J.

*Auteur correspondant :

Rsum non disponible


Major unmet needs in anti fungal chemotherapy (Confrencier Invit)
DENNING D.

*Auteur correspondant :

Rsum non disponible


Argument clinique pour lexistence dun fitness cost li la rsistance de
Candida glabrata aux chinocandines
FEKKAR A. 1 * , CASTAIN L. 1 , PONS A. 2 , MEYER I. 1 , PALOUS M. 1 , VEZINET C. 2 , MAZIER D. 1 ,
LANGERON O. 2 , HENNEQUIN C. 3 , MONSEL A. 2 , IMBERT S. 1

1 AP-HP, Groupe Hospitalier La Piti-Salptrire, Service de Parasitologie Mycologie, F-75013, Paris,


France
2 AP-HP, Groupe Hospitalier La Piti-Salptrire, Service de Ranimation Chirurgicale, F-75013, Paris,
France
3?
4 AP-HP, Groupe Hospitalier Saint-Antoine, Service de Parasitologie Mycologie, F-75012, Paris, France

*Auteur correspondant

Objectif : donner des lments de preuve de lexistence dun fitness cost important confr par la
rsistance aux chinocandines et la mutation du gne FKS au cours dune candidmie Candida glabrata.

Matriel et mthodes : six isolats de C. glabrata ont t obtenus de faon squentielle partir de flacons
dhmoculture ou dun abcs hpatique chez un patient transplant de foie et de rein. Durant son
hospitalisation, le patient, atteint dune aspergillose invasive et de deux pisodes de candidmies
persistantes a reu de multiples lignes de thrapies antifongiques.

Les Concentrations Minimales Inhibitrices (CMI) ont t dtermines par Etest et mthode EUCAST. Le
mcanisme molculaire de la rsistance a t recherch par le squenage des rgions hot spots des
gnes FKS (pour les chinocandines) et de CgPDR1 (pour les azols). Lidentit gntique entre les
diffrents isolats a t value par analyse des microsatellites.

Rsultats : le premier isolat de C. glabrata prsentait un phnotype sauvage (sensibilit aux


chinocandines, rsistance intermdiaire aux azols). Aprs initiation dun traitement par voriconazole, la
levure devint rapidement rsistante tous les azols. Un traitement par micafungine a men ensuite
lmergence rapide dun isolat rsistant aux chinocandines et prsentant laltration molculaire FKS 2
S663P. Toutefois, aprs larrt de la micafungine et lintroduction damphotricine B liposomale, plusieurs
isolats ont t retrouvs en hmoculture. Une vingtaine de jour aprs larrt du traitement par
chinocandine, un C. glabrata a de nouveau t isol dune hmoculture mais, de faon frappante, il ne
prsentait plus de rsistance aux chinocandines, ni daltration S663P alors que la rsistance aux azols
tait conserve. Lanalyse par microsatellite na pas permis de distinguer les diffrents isolats, indiquant en
cela une proximit gntique trs importante.

Conclusion : nous rapportons un cas dinfection dissmine C. glabrata suggrant lexistence dun fitness
cost lev confr par la rsistance aux chinocandines puisque linterruption de la pression de slection
par le traitement a entrain la disparition rapide du clone rsistant. Cette observation suggre en outre
quune utilisation discontinue des chinocandines limiterait lmergence des rsistances cette classe
dantifongiques.
Stratgie antifongique chez les patients allogreffs, rsultats de l'tude AFHEM
(Confrencier Invit)
GANGNEUX J.

*Auteur correspondant :

Rsum non disponible


Rsistances aux antifongiques ou comment sonder les fonctions des cellules
(Confrencier Invit)
SANGLARD D. 1 *

1 Institut de Microbiologie, Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV), CH-1011 Lausanne

*Auteur correspondant :

A toutes thrapies antimicrobiennes est associ le dveloppement de rsistances. Les levures et


champignons pathognes ont une capacit plus ou moins rapide dadaptation lexposition aux
antifongiques en condition de laboratoire ou chez les patients traits.

Notre laboratoire a sond les diffrents mcanismes qui permettent aux champignons pathognes de
rsister aux antifongiques utiliss en clinique. Ltude des levures de lespce Candida (C. albicans, C.
glabrata, C. tropicalis, C. lusitaniae) a pu montrer ltendue du rpertoire des fonctions biologiques de ces
organismes.

Ces fonctions sont essentiellement contrles par des facteurs dans lesquels des gains ou des pertes de
fonctions sont dtectes. Par exemple, un des mcanismes dominant de rsistance fait appel au transport
dantifongiques (particulirement les azoles) hors de la cellule (efflux). Lefflux dazoles est assur par des
2 systmes de transport (transporteurs ABC et MFS). Les transporteurs ABC et MFS sont rguls par des
facteurs de transcription (TAC1, MRR1 chez C. albicans, CgPDR1 chez C. glabrata), dans lesquels des
mutations gain de fonction les convertissent en facteurs hyperactifs.

Hormis lacquisition de mutations affectant des gnes spcifiques, les gnomes de levures dveloppant
des rsistances connaissent des altrations notoires, dont la formation disochromosomes et des
recombinaisons mitotiques (C. albicans). La comparaison de gnomes au cours du dveloppement de la
rsistance permet dvaluer limpact de la pression dantifongiques (et de lhte) sur la trajectoire volutive
des pathognes. Ceci sera illustr par un exemple chez C. glabrata.

Le dveloppement de rsistances aux agents antimicrobiens saccompagne gnralement de cots en


termes de fitness chez lhte, et particulirement en absence de pressions antimicrobiennes. Cest
effectivement le cas lors de dveloppement de rsistances chez C. albicans. Par contre, nous avons mis
en vidence le cas de C. glabrata, chez qui la rsistance aux azoles est associe un gain de virulence et
de fitness dans des modles murins dinfection. Cet effet est associ la surexpression dau moins une
adhsine (EPA1), qui elle-mme est rgule par CgPDR1, le facteur de transcription responsable de la
rsistance aux azoles.

En conclusion, nos investigations nous ont permis de comprendre en dtails les mcanismes qui contrlent
les rsistances aux antifongiques et mettent en lumire leur diversit. Ces mcanismes permettent
dapprofondir les connaissances de certaines fonctions cellulaires.
Utilisation de la digital PCR pour quantifier le nombre de copies dADN ribosomal
28S dAspergillus fumigatus : impact pour le diagnostic clinique
ALANIO A. 1 * , STURNY-LECLERE A. 1 , BRETAGNE S. 1

1 Unit de Mycologie molculaire, CNRS Ura3012, Institut Pasteur

*Auteur correspondant : alexandre.alanio@pasteur.fr

Introduction
La PCR digitale permet une quantification absolue des acides nucliques de faon indpendante de
lefficacit de PCR. Son principe est de rpartir lADN dans plusieurs milliers gouttelettes (10000 20000)
ralisant autant de PCR indpendantes. La dtection de la raction de PCR se fait en point final, bas sur
la dtection dune fluorescence. Les rsultats sanalysent en comptant le nombre de gouttelettes positives
par rapport leur nombre total et permet ensuite de calculer un nombre de copie/L dADN dtect. Dans
le cas des cibles rptes et particulirement celles rptes en tandem, il est dusage dutiliser une
digestion enzymatique de lADN pour librer chaque copie de leurs voisines et viter que deux copies ne
soient prsentes dans une gouttelette. Le nombre de copie estime de lADN ribosomal 28S (ADNrib) a t
estim 35 lors du squenage dAspergillus fumigatus.
Objectif
Lobjectif de ltude tait de quantifier le nombre de copies dADNrib (28S) de diffrents isolats
dAspergillus fumigatus en comparaison un gne unique du gnome (FKS1) et de comparer leffet de la
digestion enzymatique sur les ADN de ces souches celui de la digestion dADNrib circulant issus de
srums de patients avec aspergillose invasive.
Mthodes
La souche de rfrence AF293 (souche squence en 2005) et 9 isolats cliniques de gnotypes et de
groupes gntiques diffrents ont t slectionns et extraits de manire standardise (MagNapure,
Roche). Le srum de dix patients atteints daspergillose invasive ont t slectionns. Chaque ADN a subit
une digestion enzymatique (EcoRI et HaeIII aprs avoir vrifier labsence de site de restriction dans la
rgion amplifie) et compar au mme ADN sans digestion. Les PCRs 28S de Challier et al. (1) et FKS1
de Herrera et al. (2) ont t utilise en duplex. Les rsultats de digitale ont t compars la PCR
quantitative classique.
Rsultat
Le nombre de copie de 28S variait de 61 86 copies (mdiane : 75) en fonction des souches cliniques.
LADN dAf293 value 35 copies a t retrouv dans nos expriences 697 copies. En absence de
traitement enzymatique, le nombre de copies tait significativement plus bas et variait de 34 76 copies
(mdiane : 57) (p=0.003). A linverse, aucun impact significatif du traitement enzymatique na t observ
pour les 10 ADN circulants avec une mdiane de 0.5 copies/L sans digestion versus 0,85 copies/L
dADNrib avec digestion (p=0,19). Ces diffrences ont t observes dans les mmes proportions en
qPCR.
Conclusion
Ces donnes gnres en digital PCR permettent de mettre en vidence que lADN circulant au cours de
laspergillose invasive serait de moins grande taille que lADN extrait de souches, renforant lhypothse
que lADN aspergillaire est circulant et libre.
1. Challier S et al. Development of a serum-based Taqman real-time PCR assay for diagnosis of invasive
aspergillosis. J Clin Microbiol. 2004 Feb;42(2):8446.

2. Herrera ML et al. . Strain-Dependent Variation in 18S Ribosomal DNA Copy Numbers in Aspergillus
fumigatus. J Clin Microbiol. 2009 Apr 29;47(5):132532.
Etude de causalit sur donnes observationnelles : application dun modle
structural marginal de Cox pour valuer limpact dun traitement antifongique sur
le pronostic des patients en ranimation
BAILLY S. 1,2 * , HAMIDFAR-ROY R. 3 , BOUADMA L. 4 , AZOULAY E. 5 , GARROUSTE-ORGEAS M. 6 ,
SOUWEINE B. 7 , SCHWEBEL C. 3 , MAUBON D. 2 , DARMON M. 8 , WOLFF M. 4 , CORNET M. 2 ,
TIMSIT J. 1,4

1 INSERM UMR1137, Paris, France


2 CHU de Grenoble Parasitologie-Mycologie , Grenoble, France
3 CHU de Grenoble Ranimation mdicale, Grenoble, France
4 Hpital Bichat Ranimation mdicale, Paris, France
5 Hpital Saint Louis Ranimation mdicale, Paris, France
6 Hpital Saint Joseph Ranimation mdicale, Paris, France
7 CHU Gabriel Montpied Ranimation mdicale, Clermont-Ferrand, France
8 CHU Saint Etienne Ranimation mdicale, Saint-Etienne, France

*Auteur correspondant : sbailly@chu-grenoble.fr

Introduction : Prs de 40% des infections fongiques invasives sont recenses dans les services de
ranimation et sont de diagnostic peu sensible et tardif. De ce fait, trois quarts des patients sont traits de
faon probabiliste. Un traitement antifongique sans preuve concerne plus de 5% des patients en
ranimation un jour donn. Son impact sur le pronostic est suggr par certaines tudes sans preuve
formelle. Les mthodes destimation utilises ne permettent cependant pas de tenir compte de lensemble
des facteurs de confusion (gravit au cours du temps et propension recevoir un traitement). L'objectif de
cette tude est destimer limpact dun traitement antifongique sur le pronostic des patients en tenant
compte des facteurs de confusion initiaux et temps dpendant et des risques comptitifs lis la sortie des
patients vivants du service de ranimation. Le critre de rsultat est la survie ou la survenue dune infection
fongique invasive prouve J30.

Matriel et mthodes : il s'agit d'une tude rtrospective multicentrique concernant 5 services de


ranimation franais collaborant une cohorte prospective. Les patients non neutropniques prsentant
une ventilation mcanique invasive de plus de 5 jours et n'ayant pas d'infection fongique invasive
documente J5 ont t inclus dans l'tude. Dans un premier temps, la propension recevoir un
traitement antifongique chaque jour a t estime par une rgression logistique poole en tenant compte
de tous les facteurs de risque connus. La pondration par linverse de la probabilit de traitement permet
de faire une pseudo-randomisation de la population tudie en fonction des facteurs de confusion initiale et
temps dpendants. Les risques comptitifs de sortie vivants du service de ranimation ont galement t
pris en compte partir du calcul d'une probabilit de recevoir un traitement antifongique en dehors du
service de ranimation recueillie grce lanalyse des prescriptions post-ranimation dun chantillon
randomis de patients. Un modle structural marginal de Cox pondr par l'inverse de la probabilit de
recevoir le traitement antifongique a t utilis pour calculer le ratio de risque de dcs ou dinfection
fongique invasive 30 jours associ ladministration dun traitement antifongique.

Rsultats : Nous avons inclus dans ltude 1491 patients de moyenne dge 65 ans (IQR : 53-76) (65%
dhomme, SAPS 2 51 (IQR : 40-63)) prsentant une ventilation mcanique invasive dau moins 5 jours. A
J5 20% prsentaient une colonisation multisites et le Candida score mdian tait de 2 (IQR= 1 ; 3). A 30
jours, 385 patients (26%) ont prsent un vnement, dont 363 dcs (25%) et 22 infections fongiques
invasives documentes (1%) (candidmies). 100 patients (7%) ont reu au moins une fois un traitement
antifongique non li une infection fongique invasive documente en cours de sjour. Le ratio de risque
(HR) de ladministration dun traitement antifongique sur le dcs ou la survenue dune infection fongique
invasive documente 30 jours est estim 1,05 (IC95% = [0,56 ; 1,96]).

Conclusion : Lutilisation dun MSM de Cox est une alternative un essai clinique randomis permettant
dobtenir une interprtation causale de leffet du traitement antifongique empirique sur le pronostic. Ces
rsultats ne mettent pas en vidence dimpact protecteur du traitement antifongique sur le pronostic des
patients de ranimation sur la survie sans infection fongique J30.
La Mannose-binding lectine et lhomostasie intestinale

CHOTEAU L. 1,2,3 * , VASSEUR F. 4 , LEPRETRE F. 5 , FIGEAC M. 5 , DUBUQUOY L. 1,2 , POULAIN D.


1,2,3
, COLOMBEL J. 6 , SENDID B. 1,2,3 , JAWHARA S. 1,2,3

1 Inserm, U995, F-59000 Lille, France


2 University Lille2, U995-LIRIC. Lille Inflammation Research International Center, F-59000 Lille, France.
3 CHU Lille, Service de Parasitologie Mycologie, Ple de Biologie Pathologie Gntique, F-59000 Lille,
France
4 Universit Lille Nord de France, Unit de Biostatistique, EA 2694, F-59000 Lille, France.
5 Genetic platform, F-59000 Lille, France.
6 Department of Gastroenterology, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, New York, NY, United States.

*Auteur correspondant : laurachoteau86@gmail.com

Introduction: La Mannose-binding Lectin (MBL) est associe des protases srine (MASP, MBL-
associated serine protease) pour former un complexe MBL-MASP. Ce complexe active la voie lectinique
du systme de complment et induit une rponse inflammatoire. Lactivit du complexe est indispensable
la dfense de lhte contre les micro-organismes. Rcemment, nous avons montr que la MBL tait
produite par les cellules pithliales intestinales et quelle tait importante pour rduire la colonisation par
Candida albicans (1). Nous avions galement observ que les taux de MBL augmentaient lors de
candidoses invasives (2). A contrario, de faibles taux de MBL sont associs la maladie de Crohn (MC),
une maladie inflammatoire chronique de lintestin, dans laquelle la colonisation par C. albicans est plus
intense et plus frquente par rapport aux sujets sains (3). Ces dficits en MBL sont corrls avec
des taux levs danticorps anti-levure (ASCA) chez les patients MC et ils sont frquemment associs
un phnotype svre de la maladie. Dans cette tude, nous avons dtermin linfluence des
polymorphismes de MBL2 sur les taux de MBL et lactivit du complexe MBL-MASP dans une cohorte de
patients atteints de MC.

Mthodes: Les taux de MBL, lactivit du complexe MBL-MASP, les taux dASCA, les marqueurs
de candidmie et les polymorphismes prsents sur les gnes MBL2 et NOD2 ont t analyss dans
une cohorte de 69 patients atteints de MC et 30 sujets sains.

Rsultats: Dans la cohorte de patients atteints de MC, le variant rs5030737 (codon 52) du gne MBL2
est associ un dficit quantitatif et qualitatif en MBL. Ce variant est galement associ des taux plus
levs dASCA (p<0.01). Cette augmentation est retrouve chez les patients aux phnotypes
pntrants ou fistulisants, respectivement 42% et 21% des patients. Enfin, nous observons une
baisse dactivit du complexe MBL-MASP chez les patients porteurs du polymorphisme rs2066844 du
gne NOD2 (p<0.05), un variant associ la MC. En termes dinfection/inflammation, nous navons pas
observ une association entre les polymorphismes du gne MBL2 et les taux des anticorps anti-C.
albicans et des -glucanes.

Conclusion: Ces donnes cliniques suggrent que la MBL joue un rle dans le dveloppement de la MC
puisque les patients prsentant une variation des gnes MBL2 et NOD2 ont un dfaut dactivit
du complexe MBL-MASP qui peut tre li un phnotype svre de la maladie. Afin dvaluer les
risque dinfections fongiques chez ces patients MC, nous envisageons dtudier lindex de colonisation
parChoteau
1. C. albicans li une
L, Parny M, variation
Franois qualitative en MBL.
N, et al. Role of mannose-binding lectin in intestinal homeostasis and
fungal elimination. Mucosal Immunol 2015.
Rfrences
2. Damiens S, Poissy J, Franois N, et al. Mannose-binding lectin levels and variation during invasive
candidiasis. J Clin Immunol 2012;32:1317-23.

3. Standaert-Vitse A, Sendid B, Joossens M, et al. Candida albicans colonization and ASCA in familial
Crohn's disease. Am J Gastroenterol 2009;104:1745-53.
Dveloppement dun modle de dermatophytose sur piderme humain
reconstruit
FAWAY E. 1 * , CAMBIER L. 2 , LAMBERT DE ROUVROIT C. 1 , MIGNON B. 2 , POUMAY Y. 1

1 URPhyM, NARILIS, Universit de Namur, Namur, Belgique


2 Facult de mdecine vtrinaire, Universit de Lige, Lige, Belgique

*Auteur correspondant : emilie.faway@unamur.be

Les dermatophytoses sont des lsions superficielles des structures kratinises de lorganisme, savoir la
couche corne de lpiderme, les cheveux et les ongles, provoques par des champignons kratinophiles
appels dermatophytes. Lincidence de cette infection est de 10% dans la population globale mais se
trouve en augmentation durant la dernire dcennie. Dailleurs, lincidence des dermatophytoses peut
dpasser les 30% dans certaines populations risque tels les sportifs ou les patients diabtiques. Lespce
anthropophile Trichophyton rubrum est responsable de 80% 90% des dermatophytoses chez lhomme.
Malgr limportance grandissante des dermatophytoses en tant que problme de sant publique, trs peu
dinformations sont connues en ce qui concerne les mcanismes biologiques mis en place lors de
linfection par les dermatophytes, ainsi qu propos de la rponse des cellules de lhte face la prsence
des champignons. Dans le but dtudier ces mcanismes, nous avons dabord dvelopp un modle
dinfection par les arthrospores de lespce T. rubrum sur des pidermes humains reconstruits (RHE) en
culture sur filtre poreux de polycarbonate et diffrencis linterface air-liquide. Les dermatophytes sont
mis en vidence par coloration histochimique lacide priodique de Schiff, et dnombrs par PCR
quantitative spcifique du gne de lactine de T. rubrum. Nos rsultats indiquent que ce modle prsente
un potentiel dtude extrmement large et permet dj dtudier la cintique dadhrence des arthrospores
la couche corne des RHE, et de mesurer la production de cytokines par les kratinocytes en rponse
linfection. De faon pertinente, lefficacit dun agent antifongique (miconazole) a pu tre dmontre avec
succs dans ce modle.

Coloration histochimique lacide priodique de


Schiff (PAS) avec prtraitement lalpha-amylase
dun RHE quatre jours aprs inoculation par 1000
arthrospores de T. rubrum.
Intrt de la plateforme BD Max pour le diagnostic au fil de leau de la
pneumocystose pulmonaire.

GARNAUD C. 1 * , MURAT J. 1 , MAUBON D. 1

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU Grenoble

*Auteur correspondant : cgarnaud@chu-grenoble.fr

Pneumocystis jirovecii est un champignon opportuniste responsable dinfections pulmonaires svres chez
les patients immunodprims. Le diagnostic biologique de ces Pneumonies P. jirovecii (PcP) repose sur
des techniques microscopiques, ou, plus sensible, sur la dtection dADN de P. jirovecii par PCR
quantitative dans les prlvements respiratoires. Le contexte clinique, lexistence de nombreux diagnostics
diffrentiels et la toxicit du traitement ncessitent une rponse la fois rapide et fiable. Dans cette
optique, nous avons adapt notre PCR maison en temps rel ciblant le gne MSG sur la plateforme de
biologie molculaire entirement automatise BD MaxTM (Becton Dickinson) qui permet l'analyse au fil de
leau des prlvements adresss pour suspicion de PcP.

La technique a t dveloppe partir de la PCR utilise au laboratoire (Chumpitazi, Med Mycol, 2011) et
des donnes de la littrature (Dalpke, JCM, 2013). L'ensemble des tapes, extraction et amplification, est
ralis automatiquement et sans interruption sur lautomate BD MaxTM et ncessite un temps technique
estim <10 minutes/chantillon. Pour lextraction, le kit BD MAX ExK DNA-1 a t utilis, soit
directement partir du prlvement respiratoire (lavage broncho-alvolaire (LBA) ou broncho-aspiration
(BA) peu visqueuse), soit aprs fluidification (Digest-EUR, Eurobio) et centrifugation du prlvement (BA
visqueuse). Le kit BD MAX DNA MMK (SPC), auquel ont t ajoutes les amorces et sonde spcifiques
du gne cible, a t utilis pour lamplification et la dtection du gne MSG et du contrle interne
dextraction et damplification. Une courbe standard de quantification a t ralise partir de dilutions
successives dun plasmide contenant le gne MSG. Les Ct et charges fongiques obtenus avec la technique
BD Max ont t compars rtrospectivement aux rsultats obtenus avec la technique utilise jusquici au
laboratoire.

La technique dveloppe sur la plateforme BD MaxTM permet lextraction dADN, lamplification et la


dtection du gne MSG et dun contrle interne, ainsi que la quantification de la charge fongique en moins
de 2 heures partir dun prlvement respiratoire, grce une automatisation quasi-complte. Les seules
tapes manuelles consistent en la prparation du mlange sondes et amorces (mais celui-ci peut tre
prpar lavance, aliquot et congel) et le prtraitement des chantillons visqueux. Les performances
analytiques (sensibilit, limite de dtection), ainsi que les Ct obtenus sur cette plateforme, sont
comparables ceux de la prcdente technique.

Par sa simplicit dutilisation, la possibilit dtre ralise la demande et un dlai de rendu de rsultat
infrieur 2 heures, cette technique rpond lurgence diagnostique de la PcP de limmunodprim, et est
voue remplacer le diagnostic microscopique. Une tude prospective, sur un plus grand nombre
dchantillons, est en cours : elle permettra notamment de dterminer les seuils de charge fongique
permettant de distinguer colonisation et infection par Pneumocystis jirovecii.
Evaluation dune approche mtagnomique cible pour la caractrisation de la
composition microbiologique de poussire de logement
ROCCHI S. 1,2 * , VALOT B. 1 , NAEGELE A. 1 , REBOUX G. 1,2 , MILLON L. 1,2

1 UMR CNRS 6249 Chrono-Environnement Universit Bourgogne Franche-Comt, Besanon, France


2 Service de parasitologie mycologie CHRU Jean Minjoz, Besanon, France

*Auteur correspondant : steffi.rocchi@univ-fcomte.fr

La mtagnomique cible ("metabarcoding") apporte de nouvelles connaissances sur les cosystmes


microbiens. Elle fournit un inventaire quasi-exhaustif des communauts prsentes. Elle est de plus en plus
utilise pour caractriser la composition microbiologique des environnements intrieurs et extrieurs de
logements. Des travaux ont ainsi valu la composition des communauts fongiques et bactriennes
travers diffrentes techniques de prlvements (couvillons, poussire aspire ou capteurs passifs de
poussires) et via diffrentes technologies de squenage haut dbit (pyrosquenage Roche 454 et/ou
technologie Illumina MiSeq ou HiSeq).

Notre tude prliminaire avait pour objectif dvaluer une technique de mtagnomique fongique cible et
lanalyse bioinformatique qui en dcoule partir dchantillons calibrs et dutiliser cette approche partir
de prlvements raliss par capteurs lectrostatiques de poussires (EDC), dans des logements ne
prsentant pas de problmes dhumidit ou dinsalubrit.

Ainsi, les communauts fongiques de 14 logements (Franche-Comt) ont t analyses aprs amplification
de la rgion ITS2 (amorces ITS3 et ITS4). Toutes les tapes damplification, dindexage des chantillons et
purifications ont t ralises dans notre laboratoire. Le squenage (Illumina MiSeq v3, 2x300 pb) a
ensuite t sous-trait chez Microsynth (Suisse). Les rsultats du squenage ont ensuite t analyss
avec le pipeline MOTHUR. Aprs les diffrentes tapes de traitement des donnes, les mlanges artificiels
et les chantillons provenant des logements reprsentaient respectivement 344 672 et 1 158 758
squences.

Lutilisation de mlanges artificiels (mlanges quimolaires pr et post PCR, et mlanges non quimolaires
de 11 espces de levures et moisissures) a permis de valider ltape de regroupement en OTUs
(Operational Taxonomic Units). Ces chantillons calibrs ont aussi montr un faible biais damplification, un
faible taux derreur de squenage, et ont permis de vrifier le caractre semi-quantitatif de la technique.
Seule une espce prsente dans les mlanges artificiels (Lichtheimia corymbifera) sest rvle sous-
amplifie. Ce dficit de performance est d la prsence de deux bases diffrentes chez cette espce par
rapport lamorce ITS3.

Lanalyse des chantillons des logements a permis didentifier 3 594 OTUs. Les 30 genres principaux
reprsentent 75% des squences obtenues ("reads"). Parmi ceux-ci figurent les genres habituellement
retrouvs par les techniques de culture (Penicillium, Aspergillus et Cladosporium) ou dautres
habituellement moins isols en culture comme Epicoccum, qui est le 4me genre dtect. Un des
avantages de cette technique est quelle permet didentifier les basidiomyctes, de culture et didentification
difficile, qui reprsentent pourtant 20% des donnes issues des logements analyss.

Des analyses sont actuellement en cours pour valuer limpact des caractristiques des logements sur ces
communauts. Ds prsent la mtagnomique applique aux EDC semble prometteuse. Elle pourra tre
utilise en parallle de la qPCR, pour avoir une vision globale de lcologie microbienne et une
quantification relative des espces au sein des communauts.
European study on Pneumocystis jirovecii short tandem repeats genotyping
reveals wide population diversity with geographic specificities
ALANIO A. 1 * , GITS-MUSELLI M. 1 , CALDERON E. 2 , DI CAVE D. 3 , DUPONT D. 4 , HAMPRECHT A. 5 ,
HAUSER P. 6 , HELWEG-LARSEN J. 7 , KICIA M. 8 , LAGROU K. 9 , LENGEROVA M. 10 , MATOS O. 11 ,
MELCHERS W. 12

1 Hpital Saint Louis, Paris, France


2 Instituto de Biomedicina de Sevilla. Hospital Universitario Virgen del Roco/CSIC/Universidad de Sevilla, Seville, Spain
3 Department of experimental medicine and surgery University of rome "tor vergata", Roma, Italy
4 Hospices Civils de Lyon, Institut de Parasitologie Mycologie Mdicale, Hpital de la Croix-Rousse, Lyon, France
5 Institut fr medizinische Mikrobiologie, Immunologie und Hygiene Universittsklinikum, Kln, Germany
6 Institute of Microbiology, Lausanne University Hospital and University of Lausanne, Switzerland
7 Department of Infectious Diseases, Rigshospitalet-Copenhagen University Hospital, Copenhagen, Denmark
8 Department of Biology and Medical Parasitology, Wroclaw Medical University, Wroclaw, Poland
9 Department of Microbiology and Immunology, Catholic University Leuven, Leuven, Belgium and National Reference Center for
Mycosis, Department of Laboratory Medicine, University Hospitals Leuven, Leuven, Belgium
10 University Hospital Brno, Brno, Czech Republic
11 Medical Parasitology Unit, Group of Opportunistic Protozoa/HIV and Other Protozoa, Global Health and Tropical Medicine,
Instituto de Higiene e Medicina Tropical, Universidade NOVA de Lisboa
12 Department of Medical Microbiology, Radboud University Medical Center, Nijmegen, The Netherlands

*Auteur correspondant : alexandre.alanio@aphp.fr

Introduction : Pneumocystis jirovecii is a human specific uncultivable ascomycetous fungus, for which the
reservoir is immunocompetent human individuals. Immunocompromised patients are at risk of developing
pneumocystis pneumonia (PCP) when exposed to P. jirovecii through their immediate environment. A
recently described short tandem repeat (STR) typing strategy was applied to a population of patients from
Paris and found a high diversity of genotypes (Gts) between the patients, but identical Gts reflecting
putative interhuman nosocomial transmission (1). In contrast, another genotyping study using a different
STR set described a limited global population of P. jirovecii testing isolates recovered from Africa (n=13),
USA (n=49) and Europe (n=29) (2). Our objective is to determine the distribution of P. jirovecii STR
genotypes across European hospitals.
Methods : We investigated a collection of 355 P. jirovecii microscopy or PCR positive respiratory samples
recovered from 355 PCP patients in 12 European countries [France (n=5), Belgium, The Netherlands,
Denmark, Germany, UK, Poland, Czech republic, Switzerland, Italy, Spain, and Portugal]. STR typing was
performed as previously described (1). Amplification failure occurred in 32% of the samples, likely a result
of insufficient P. jirovecii DNA. Therefore, 242 samples (median: 17 per center [8-24]) were further
analyzed.
Results : Mixtures of STR markers >1 allele for 1 locus) were detected in 66.7% [range : 36.4%-90.9%]
of the samples, with a trend towards a lower proportion of mixtures in France-centre 2 and Belgium.
The distribution of alleles in all six markers was significantly different according to the countries in
STRPj_138 (p=0.0002), STRPj_278 (p=0.0085), and STRPj_279 (p=0.0069).
Genotyping was analyzed only in samples harboring one allele/locus (n=87) or several alleles for one locus
only (n=56). This provided 200 analyzable combinations corresponding to 143 Gts. Of them, 123 were
found only in one country, 16 in two, 2 in three and one in 4 and 5 countries. Nine Gts were found more
than once in a given country. Gt123 was significantly associated with France (14/15, p=0.0007) and Gt132
with Belgium (5/5, p<0.0001). In details, Center 2 in France and Belgium were associated with a high
proportion of one genotype (42.8% of Gt123 and 100% of Gt132, respectively), suggesting enrichment in
one geographical area or increased interhuman transmission in the corresponding hospitals.
Conclusion : Our study of 16 European centers showed a wide population diversity across Europe.
However, focusing on centers, our results evidenced clusters of patients harboring a given genotype
suggesting nosocomial interhuman transmission and potential outbreak situations.
References
1. Gits-Muselli M et al. PLoS One. 2015;10(5):e0125763.

2. Parobek CM et al. J Clin Microbiol. 2014 May;52(5):13919.


Impact des antifongiques sur la rsistance des principales espces de Candida
en ranimation Evolution et tendances sur 10 ans

BAILLY S. 1,2 * , MAUBON D. 1 , FOURNIER P. 3 , PELLOUX H. 1 , SCHWEBEL C. 4 , CHAPUIS C. 5 ,


FORONI L. 5 , CORNET M. 1 , TIMSIT J. 2,6

1 Parasitologie-mycologie mdicale C .H.U. Grenoble, La Tronche, France


2 INSERM UMR1137, Paris, France
3 Laboratoire de bactriologie mdicale, C .H.U. Grenoble, La Tronche, France
4 Ranimation mdicale, C .H.U. Grenoble, La Tronche, France
5 Pharmacie, C .H.U. Grenoble, La Tronche, France
6 Ranimation mdicale et infectieuse, Hpital Bichat-C laude Bernard, Paris, France

*Auteur correspondant : sbailly@chu-grenoble.fr

Introduction : Les levures du genre Candida reprsentent la cause la plus frquente dinfections
fongiques humaines et lincidence des infections Candida augmente depuis plusieurs annes. Cette
tendance est dautant plus importante chez les patients critiques en ranimation qui sont haut
risque dinfection opportuniste Candida. Depuis 2003, de nouvelles molcules antifongiques ont t
introduites, notamment les chinocandines qui prsentent un spectre daction plus large pour les Candida
incluant les espces C. glabrata et C. krusei. Les pratiques de prescription des antifongiques incluant les
chinocandines ont t values en 2010 avec un faible recul et ont mis en vidence un lien entre la
prescription dantifongique et lvolution des CMI. Lobjectif de cette tude est dvaluer leffet de la
prescription dantifongiques sur la sensibilit des espces Candida au service de ranimation mdicale
de Grenoble sur une priode de 10 ans (2004 2013).

Matriel et mthode : La consommation dantifongique a t dtermine en nombre de doses


journalires pour 1000 jours dhospitalisation. La distribution des espces Candida sur une priode de 10
ans (2004 2013) et les CMI des antifongiques sur la priode 2007 2013 a t dtermine. Une analyse
des sries chronologiques a t effectue pour estimer les relations entre la consommation
dantifongiques, la distribution des Candida spp. et les changements de CMI dans le temps.

Rsultats : Sur 42873 chantillons de 5360 patients, 2403 taient positifs Candida. Candida
albicans reste lespce majoritaire (53.1%) suivie de Candida glabrata (16.2%) et Candida
parapsilosis (7.9%). Candida parapsilosis suit une augmentation significative de 5.8% en 2004 8.4%
en 2013 en prenant en compte les fluctuations temporelles (p=0.02). Lutilisation de la caspofungine
augmente significativement entre 2004 (17.9 DDDs/1000HD) et 2013 (58.8 DDDs/1000HD)
(p=0.001). Entre 2007 et 2013, laugmentation de la consommation de caspofungine est
significativement corrle laugmentation de la CMI de C. parapsilosis (p=0.01), C. glabrata
(p=0.001) et C. albicans (p=0.02). La consommation damphotricine B est significativement corrle
une augmentation de la CMI de C. glabrata (p=0.04). La consommation de caspofungine est corrle
significativement une diminution de la proportion de C. albicans et C. glabrata (p=0.03 et 0.01
respectivement) et une augmentation de la proportion de C. parapsilosis(p=0.003).

Conclusion : Cette tude confirme que ladministration dantifongique en unit de soins intensifs
influence la sensibilit aux antifongiques et la distribution des trois principales espces Candida. En
particulier la pression de slection exerce par la caspofungine et lamphotricine B sur C. glabrata
ncessite une surveillance particulire, du fait que cette espce est peu sensible au fluconazole. Il est
essentiel dviter le msusage des antifongiques en USI pour limiter la prolifration de souches
rsistantes.
Striking differences in predisposing factors and outcome of uncommon yeast
species-related fungaemia based on a cohort study (2002-2014)
BRETAGNE S. 1 * , DESNOS-OLLIVIER M. 1 , RENAUDAT C. 1 , BOUKRIS-SITBON K. 1 , LORTHOLARY
O. 1 , DROMER F. 1

1 Institut Pasteur, Molecular Mycology Unit, National Reference Center for Invasive Mycoses and
Antifungals, Paris , France

*Auteur correspondant : stephane.bretagne@aphp.fr

Background.

Comparison between uncommon yeast species (UYS)- and Candida albicans-related fungaemia can
uncover specific predisposing factors with potential impact on treatment strategies.

Methods.

Clinical data (including follow-up) and isolates responsible for fungaemia were collected prospectively from
27 hospitals (Paris, France; 01/10/2002-31/12/2014). Univariate and multivariate analyses were performed
to compare UYS with C. albicans fungaemia.

Findings

We analysed 339 episodes of UYS fungaemia. Of the 35 different UYS (27 ascomycetes, 8
basidiomycetes), 11 had caspofungin MIC50 >=05 mg/L (CAS-R), and 15 had fluconazole MIC50 >=8
mg/L (FCZ-R, EUCAST method). The incidence of UYS fungaemia was stable over time. When comparing
with 1997 single episodes of C. albicans fungaemia, haematological malignancies (OR=242[182-322])
and prior exposure to antifungal drugs (OR=186[129-267]) were independent predisposing factors for
UYS upon multivariate analysis. However, when considering the species/genera level, only infections due
to species related to C. kefyr (OR=395[240-653]) and to Trichosporon spp. (OR=542[173-1696])
remained associated with haematological malignancies, those due to Geotrichum spp. with acute
leukaemia (OR=5261[1764-15688]), and the later two with prior exposure to caspofungin (OR=156[36-
674] and OR=120[32-453], respectively) but not to fluconazole. The global mortality at day 30 of the
CAS-R and FCZ-R species was not different compared with C. albicans, (40%, 40%, and 35%
respectively), but very divergent results were observed according to the species.

Interpretation.

UYS encompass a huge diversity of species, each with its own behaviour and predisposing factors. This
underlines the need for rapid identification of isolate at the species level in order to optimize antifungal
treatment.
Dtection directe in silico des infections mixtes levures par spectromtrie de
masse de type MALDI-TOF
CASSAGNE C. 1,2 * , NORMAND A. 1 , DJENAD F. 1 , GABARRE A. 1 , RANQUE S. 1,2 , PIARROUX R. 1,2

1 Parasitology and Mycology, Assistance Publique-Hpitaux de Marseille, CHU Timone-Adultes, 13385


Marseilles CEDEX 5, FRANCE
2 Aix-Marseille University, UMR MD3 IP-TPT, 13885 Marseilles, France

*Auteur correspondant : carole.cassagne@ap-hm.fr

La spectromtrie de masse de type MALDI-TOF SM rvolutionne depuis quelques annes lidentification


des microorganismes en permettant leur identification en seulement quelques minutes. Une des principales
limitations de cette technique reste limpossibilit didentifier des mlanges de microorganismes, du moins
sur la plupart des milieux de culture. Pourtant, la dtection des infections mixtes est cruciale pour orienter
au mieux la thrapeutique. Cest le cas pour les levures dont les profils de susceptibilit diffrent selon les
espces. De ce fait, les infections levures impliquant deux espces ou plus sont parfois identifies avec
un retard dltre pour le patient.

Dans ce travail, nous avons dabord dvelopp un algorithme danalyse des spectres dtectant in silico les
infections mixtes que nous avons testes prospectivement entre novembre 2015 et janvier 2016. Ce
protocole, appliqu pour tout prlvement pour lesquels au moins 10 colonies taient obtenues aprs
ensemencement sur un milieu de Sabouraud-Chloramphnicol-Gentamycine (SCG), consistait raliser
lidentification par MALDI-TOF sur une colonie isole et sur le produit dun ratissage des colonies prsentes
sur la glose ( spot prlev dans la masse ). Dans notre protocole, une infection mixte in silico tait
dfinie par la dtection de profils protiques attribus deux espces diffrentes sur lun des deux spots
analyss, ou sur le fait que lespce reconnue diffrait entre les deux spots. En parallle, les prlvements
ont t repiqus sur milieu chromogne et analyss 48h plus tard pour dtecter les infections mixtes in
vitro.

Sur la priode dtude, 382 prlvements positifs pour la recherche de levures ont fait lobjet dune
recherche de mlange in silico et in vitro. Parmi eux, 39 (10.21%) correspondaient des infections mixtes
confirmes par lidentification des colonies partir du milieu chromogne. Vingt de ces infections mixtes
(51.28%) avaient t dtectes 48 heures auparavant par lanalyse des spectres de masse raliss sur le
milieu SCG. Les valeurs prdictives positives et ngatives et la spcificit de la dtection in silico taient
respectivement de 48.78%, 94.41%, 93.85%. Vingt-et-une autres infection mixtes ont t identifies in
silico sans tre confirmes in vitro sur milieu chromogne. Il sagissait dans dix cas dinfections mixtes
Candida albicans/Candida dubiniensis, ou Candida tropicalis/Candida sojae, trs difficilement dtectables
sur un milieu chromogne. Une r-analyse des prlvements est en cours pour les 11 cas restants.

En conclusion, lutilisation de ce protocole danalyse in silico des infections mixtes, a permis la dtection de
plus de la moiti des infections mixtes qui ont t ultrieurement confirmes sur milieu chromogne. A cela
sajoute un certain nombre dinfections mixtes, suspectes in silico bien que non dtectes sur le milieu
chromogne, pour lesquelles il est bien difficile de conclure. Cette tude dmontre la complexit de la
recherche des infections mixtes en clinique, et souligne lintrt de leur dtection in silico par analyse de
spectres obtenus par spectromtrie de masse MALDI-TOF en complment dune culture sur milieu
chromogne.
Emergence de la rsistance aux azols dAspergillus fumigatus chez les patients
atteints de BPCO : circulation entre les rservoirs cliniques et environnementaux
DAUCHY C. 1 , BAUTIN N. 2 , NSEIR S. 3 , REBOUX G. 4 , WINTJENS R. 5 , LE ROUZIC O. 2,6,7,8,9 ,
SENDID B. 10 , VISCOGLIOSI E. 6,7,8,9 , GOSSET P. 6,7,8,9 , DEI-CAS E. 1,6,7,8,9 , FRY S. 2 , FREALLE E.
1,6,7,8,9
*

1 CHU Lille, Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, F-59000 Lille, France


2 CHU Lille, Clinique des Maladies Respiratoires, F-59000 Lille, France
3 CHU Lille, Ple de Ranimation, F-59000 Lille, France
4 Chrono-Environnement UMR 6249 CNRS, Universit de Franche-Comt & Service de Parasitologie-Mycologie, CHU de
Besanon, France
5 Universit Libre de Bruxelles, Belgique
6 Univ. Lille, U1019 - UMR 8204 - CIIL - Center for Infection and Immunity of Lille, F-59000 Lille, France
7 CNRS, UMR 8204, F-59000 Lille, France
8 Inserm, U1019, F-59000 Lille, France
9 Institut Pasteur de Lille, F-59000 Lille, France
10 Inserm U995, Universit de Lille, France

*Auteur correspondant : emilie.frealle-2@univ-lille2.fr

Objectif : Lmergence de la rsistance aux azols dAspergillus fumigatus a t rapporte chez les
patients exposs aux azols, mais galement chez les patients nafs ou dans lenvironnement. Dans ce
contexte, notre tude avait pour objectif, dune part, de dterminer la prvalence de colonisation et
dexposition domestique A. fumigatus de patients atteints de BPCO nafs, et, dautre part, de dtecter et
caractriser les isolats dA. fumigatus rsistants aux azols et/ou prsentant des mutations du gne
cyp51A afin de clarifier la circulation de ces isolats entre les rservoirs cliniques et environnementaux.

Mthodes : Soixante-quinze chantillons respiratoires provenant de 41 patients atteints de BPCO, ainsi


que des chantillons environnementaux provenant des domiciles de 36 de ces patients (principalement des
capteurs lectrostatiques poussires exposs 10 semaines dans la chambre du patient) ont t collects
prospectivement au CHRU de Lille entre aot 2011 et fvrier 2015. Les isolats cliniques et
environnementaux dA. fumigatus rsistants aux azols ont t slectionns par culture sur milieu de
Sabouraud additionn ditraconazole (ITZ) et lidentification dA. fumigatus a t confirme par culture
50C, et squenage des gnes codant pour les rgions ITS des ARN ribosomaux et pour la bta-tubuline.
Puis les mutations du gne cyp51A ont t dtectes par squenage pour tous les isolats dA. fumigatus.
Enfin, les CMI de lITZ, du voriconazole et posaconazole ont t dtermines pour les isolats avec
croissance positive sur milieu ITZ et/ou mutation du gne cyp51A.

Rsultats : A. fumigatus a t dtect dans les chantillons respiratoires de 11/41 patients (26,8%) et
dans 15/36 domiciles (41,7%), permettant lisolement de 68 isolats cliniques et 48 isolats
environnementaux. La croissance sur milieu ITZ tait positive pour 4 isolats cliniques de 2/41 patients
(4,9%) et 3 isolats environnementaux de 2/36 domiciles de patients (5,6%). Parmi les isolats cliniques, 1 ne
prsentait pas de mutation du gne cyp51A et 3 autres, provenant d1 patient, prsentaient une mutation
A284T. Deux isolats environnementaux provenant de 2 patients diffrents prsentaient la mutation
TR34/L98H, et 1 isolat, la mutation H285Y. La croissance sur milieu ITZ tait ngative pour les 109 isolats
restants, mais 4 isolats environnementaux prsentaient la mutation F46Y/M172V/N248T/D255E/E427K
(n=3) ou F46Y/M172V/E427K (n=1). La coexistence de diffrents gnotypes cyp51A et/ou profils de
rsistance aux azols a t dtecte dans 3/8 chantillons respiratoires et 2/10 prlvements
environnementaux o plus d1 isolat dA. fumigatus avait t dtect (i.e. 37,5% et 20,0%, respectivement).

Conclusion : La dtection disolats dA. fumigatus dorigine environnementale rsistants aux azols
confirme le rle des pesticides azols utiliss en agriculture dans lmergence de cette rsistance. Par
ailleurs, la frquence leve de dtection de ces isolats dans les domiciles de patients atteints de BPCO
suggre que lexposition domestique pourrait avoir un rle dans la contamination des patients. Enfin, la
coexistence disolats sensibles et rsistants aux azols dans les chantillons cliniques indique que la
dtermination des CMI partir dune seule colonie, gnralement pratique en routine, nest pas suffisante
pour exclure la prsence disolats rsistants aux azols, et quun dpistage plus large est ncessaire chez
les patients qui doivent tre traits.
Comparaison du microbiote dun patient atteint de mucoviscidose et de son
environnement domestique par NGS

DELHAES L. 1 * , THUMERELLE C. 2 , WIZLA N. 2 , TURCQ D. 2 , BOTTEREL F. 1

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU de Bordeaux, Universit de Bordeaux, France


2 Service de Pdiatrie et CRCM pdiatrique de Lille, CHRU de Lille, Universit de Lille 2, France

*Auteur correspondant : laurence.delhaes@chu-bordeaux.fr

Rsum: Le microbiote pulmonaire est aujourdhui considr comme une communaut poly-microbienne
compose de bactries (bactriote), de virus et phages, mais aussi de micromyctes (mycobiote) [1-4].
Dans le cas de la mucoviscidose qui nous intresse dans ce travail la composition de ce microbiote est
corrle lvolution clinique des patients [1-4].

Nous rapportons ici la caractrisation par squenage haut-dbit, des microbiotes bactriens et fongiques
respiratoire et de lenvironnement intrieur immdiat dune patiente mucoviscidosique. Cette patiente tait
porteuse dune atteinte pulmonaire assez svre avec aspergillose bronchopulmonaire allergique (ABPA),
complique au moment de lanalyse NGS dune exacerbation pulmonaire aigue. Le recueil de la
contamination environnementale intrieure a t ralis grce au dpt dun pige poussire durant 10
semaines dans la chambre de la patiente, selon le protocole tabli en troite collaboration avec lquipe du
CHU de Besanon [5]. Les rsultats et lintrt clinique dune telle approche sont discuts, en tenant
compte des tudes rcentes [5, 6] montrant limportance de lexposition fongique comme facteur favorisant
la survenue dune ABPA dans la mucoviscidose.

Bibliographie :

1. Huang YJ, Lynch SV. The emerging relationship between the airway microbiota and chronic respiratory
disease: clinical implications. Expert Rev Respir Med. 2011; 5: 809821.

2. Delhaes L, et al. The airway microbiota in cystic fibrosis: a complex fungal and bacterial community--
implications for therapeutic management. PLoS One. 2012; 7(4):e36313.

3. Rogers GB, et al. Respiratory microbiota: addressing clinical questions, informing clinical practice.
Thorax. 2015; 70: 7481.

4. Nguyen, L. D. N., Viscogliosi, E. & Delhaes, L. The lung mycobiome: an emerging field of the human
respiratory microbiome. Front Microbiol. 2015; 6: 19.

5. Rocchi S, et al. Evaluation of mold exposure in cystic fibrosis patients' dwellings and allergic
bronchopulmonary risk. J Cyst Fibros. 2015; 14(2):242-7.

6. Sapet A, et al. Is the home environment an important factor in the occurrence of fungal events in cystic
fibrosis? J Cyst Fibros. 2015; 14(5):E16-8.
Dveloppement et validation du diagnostic despce de Malassezia par MALDI-
TOF
DENIS J. 1,2 * , MACHOUART M. 3 , MORIO F. 4 , SABOU M. 1,2 , KAUFMANN-LACROIX C. 5 , CONTET-
AUDONNEAU N. 3 , CANDOLFI E. 1,2 , LETSCHER-BRU V. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hpitaux Universitaires de Strasbourg. 1 Place


de lHpital, 67000 Strasbourg, France.
2 Institut de Parasitologie et de Pathologie Tropicale, EA 7292, Fdration de Mdecine Translationnelle,
Universit de Strasbourg, 3 rue Koeberl, 67000 Strasbourg, France.
3 Structure de Parasitologie-Mycologie, Dpartement de Microbiologie, Centre Hospitalo-Universitaire de
Nancy (CHU-Nancy), Hpitaux de Brabois, Vanduvre-les-Nancy, France.
4 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU de Nantes, Nantes, France.
5 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU de Poitiers, 2 rue de la Miltrie, 86021 Poitiers, France.

*Auteur correspondant : julie.denis@chru-strasbourg.fr

Les levures du genre Malassezia sont commensales de la peau humaine. Elles sont impliques dans des
infections dermatologiques comme le pityriasis versicolor ou la dermatite sborrhique. Elles sont
galement isoles dans des infections plus profondes comme les fongmies, particulirement chez
certains patients risque : les nouveaux ns, les porteurs de cathters de nutrition parentrale...
Lpidmiologie et la virulence de chaque espce sont peu connues ce jour. Ceci est notamment d la
difficult diffrencier les espces entre elles. Actuellement, lidentification despce est prsomptive et
repose sur des caractres morphologiques et biochimiques. Seule la biologie molculaire permet
didentifier les espces avec certitude mais cest une technique longue et coteuse.

Les objectifs de ce travail taient de permettre le diagnostic despce de ces levures par :

- une meilleure connaissance des caractres culturaux et morphologiques de ces levures ;

- le dveloppement et la validation dune base de donnes dempreintes spectrales

permettant lidentification des espces de Malassezia par spectromtrie MALDI-TOF Biflex III de Bruker
daltonics.

85 souches de Malassezia issues de patients hospitaliss Strasbourg, Nancy, Nantes et Poitiers ont t
recrutes. Chaque souche a t identifie par squenage des rgions ITS 1 et 4 et compare la base
de donnes du CBS et GenBank.

Les caractres morphologiques et culturaux de chaque souche ont t relevs et certaines caractristiques
propres chaque espce ont t mises en vidence mais restent insuffisantes pour lidentification. Une
base MALDI-TOF Malassezia a t cre. Cette base rpertorie 45 souches rparties sur 6 espces M.
furfur, M. sympodialis, M. slooffiae, M. globosa, M. restricta et M. pachydermatis. La base Malassezia
obtenue permet didentifier lespce 100 % des 40 souches de Malassezia inconnues testes (log scores
> 2,0). Les tests de rptabilit et de reproductibilit de la technique raliss ont montr des coefficients de
variation infrieurs 10 %.

Ce travail nous a permis de mettre au point une technique didentification rapide, fiable et peu coteuse de
6 espces de Malassezia au laboratoire. Un enrichissement de la base par les espces non encore
reprsentes permettra par la suite de mieux connatre lpidmiologie de ces levures.
Atteinte oculaire chez un greff cardiaque lors dune aspergillose dissmine :
intrt des galactomannanes ?
DUPONT D. 1 , SAISON J. 2 , MIAILHES P. 2 , WALLON M. 1 , PERSAT F. 1 *

1 Hospices Civils de Lyon, Institut de Parasitologie et Mycologie Mdicale, Hpital de la Croix-Rousse,


Lyon, France, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon, France
2 Hospices Civils de Lyon, Service de Maladies Infectieuses et Tropicales, Hpital de la Croix-Rousse,
Lyon, France

*Auteur correspondant : florence.persat@chu-lyon.fr

Introduction : les atteintes oculaires lors dune aspergillose invasive sont rarement dcrites. Nous
rapportons un cas daspergillose oculaire compliquant une aspergillose dissmine chez un patient greff
cardiaque.

Observation : Un homme de 56 ans, greff cardiaque le 23/04/2015, sous ciclosporine, cellcept et


cortancyl, consulte le 17/09/2015 pour dyspne sans fivre traite par Zithromax depuis une semaine. La
radiographie pulmonaire retrouve des images macronodulaires denses bilatrales. Un liquide de lavage
bronchoalvolaire (LBA) montre dassez nombreux mycliums et sa culture est positive avec de trs
nombreuses colonies dAspergillus fumigatus. Le srum prlev le jour du LBA montre la prsence
dantignes aspergillaires avec un index 4,99 (contrl, kit PlateliaTM Aspergillus de Biorad). Le patient
est mis sous voriconazole 300 mgx2/jour le 21/09/2015. Ds le 22/09/2015, il a une baisse dacuit
visuelle de lil droit et le diagnostic dendophtalmie est pos entranant une vitrectomie en urgence le
25/09/2015. Le prlvement vitren per opratoire revient positif Aspergillus fumigatus. La CMI en E-test
est de 0,125 g/mL pour le voriconazole. Le 01/10/2015, sont dbutes des injections oculaires
dAmbisome. Le 07/10/2015, le voriconazole est arrt pour cytolyse hpatique suite un surdosage (taux
rsiduel du 01/10/2015 = 10,95 mg/L), avec relais par Ambisome 3 mg/kg/jour. Le 16/10/2015, une
nouvelle vitrectomie de lil droit est ralise. Le prlvement reste ngatif en mycologie directe. La PCR
panfongique (rgions D1/D2) ralise sur le prlvement revient positive Aspergillus section fumigati. Un
dosage dantignes aspergillaires est ralis sur le prlvement du vitr, donnant un index de 5,92. Les
neuf recherches dantignes sriques ralises depuis le 24/09/2016 taient toutes restes ngatives. Ds
la normalisation hpatique, un traitement par voriconazole est rintroduit 200 mgx2/jour. Le 30/10/2015,
devant un taux srique rsiduel correct de voriconazole (3.86 mg/L), lAmbisome iv est arrte. Ce patient
a bnfici au total de trois injections dAmbisome dans lil droit, la dernire datant du 23/10/2015. Le
03/11/2015, une petite infiltration du segment antrieur, un vitr charg de fibrose et une rtine non visible
taient observs pour lil droit. A ce jour, le patient est toujours sous voriconazole posologie adapte,
sans rechute daspergillose pulmonaire ou oculaire, ni rejet de greffe cardiaque.

Discussion : La recherche dantigne aspergillaire dans le vitr nest pas valide par le fournisseur du kit.
Pour vrifier la validit de ce dosage, nous avons test quatre autres prlvements vitrens qui ont tous
t trouvs ngatifs. Ce test et la PCR taient les seuls tests biologiques trouvs positifs sur le
prlvement du 16/10/2015, motivant une nouvelle injection intraoculaire dAmbisome avec la reprise du
traitement par voriconazole.

Conclusion : Ce cas suggre que la recherche sur le vitr dantignes aspergillaires pourrait tre utile si la
mycologie standard est ngative et si la PCR nest pas disponible. Sa validation formelle est en cours.
MOLD infections in STAT 3 DEFICIENT patients: A NATIONWIDE STUDY IN
FRANCE
DUREAULT A. 1 , TCHERAKIAN C. 2 , POIREE S. 3 , CATHERINOT E. 2 , BOUGNOUX M. 4 , COIGNARD
H. 1 , GIVEL C. 2 , JOUVION G. 4 , GARCIA HERMOSO D. 6 , PICARD C. 7,8 , CHANSDESRIS M. 9 ,
LORTHOLARY O. 1,5 , LANTERNIER F. 1,5 *

1 Service des Maladies Infectieuses et Tropicales, Centre d'Infectiologie Necker Pasteur, Hpital Necker-Enfants Malades, APHP,
Universit Paris Descartes, Paris, France
2 Service de Pneumologie, Hpital Foch, Suresnes, France UPRES EA 220, Suresnes, France Facult des Sciences de la Sant
Simone Veil, Universit Versailles-Saint-Quentin-en-Yvelines, Versailles, France
3 Service de Radiologie, Hpital Necker-Enfants Malades, Assistance Publique-Hpitaux de Paris, Paris,
4 Service de microbiologie, Hpital Necker-Enfants Malades, Assistance Publique-Hpitaux de Paris, Paris, France
5 Unit d'Histopathologie humaine et modles animaux, Institut Pasteur, Paris, France
6 Unit de Mycologie Molculaire, Centre National de Rfrence Mycologie et Antifongiques, Institut Pasteur, Paris, France.
7 Centre dtude des dficits immunitaires (CEDI), Hpital Necker-Enfants Malades, Assistance Publique-Hpitaux de Paris, Paris,
France
8 CEREDIH, Centre de Rfrence des Dficits Immunitaires Hrditaires, Hpital Universitaire Necker-Enfants Malades,
Assistance Publique-Hpitaux de Paris, Paris, France
9 Service dhmatologie, Hpital Necker-Enfants Malades, Assistance Publique-Hpitaux de Paris, Paris, France

*Auteur correspondant : dureaultamelie@yahoo.fr

Autosomal dominant loss of function mutation of signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3)
gene (STAT3-deficiency) predisposes to recurrent bacterial pneumonia that are complicated in 67% of
patients with bronchiectasis, cavitations and Aspergillus infection or colonization in 22 % of patients1. We
aimed to report the prevalence, describe clinical, mycological, pathological and radiological presentation
and both medical and surgical treatment of mold infections in the National French cohort.

Methods:

Referent physicians of STAT3-deficient patients (n= 74 patients) were contacted to know if patients had
evidence of colonization or infection with molds. Clinical and mycological information were collected and
imaging was centralized. An expert committee reviewed all charts and classified the cases (EC, SP, CT,
AD, FL, OL, MOC).

Results:

Eighteen episodes of filamentous fungal infection in ten (13.5%) STAT3-deficient patients were identified.
The median age at first episode was 12 years (IQR 10.2-25). Ninety percent of patients had underlying
pulmonary disease, bronchiectasis and cavitations, usually multiple. Mold infections were classified as
follow: three aspergillomas, six Chronic Pulmonary Aspergillosis (CPA), five Allergic BronchoPulmonary
Aspergillosis (ABPA), two mixed forms ABPA and CPA, one Chronic Allergic Sinus Aspergillosis and one
Rasamsonia invasive pulmonary infection. According to EORTC/MSG definitions, no cases of invasive
aspergillosis were reported. Aspergillus fumigatus was isolated in 13 cases, Rasamsonia argillocea in one
case. Aspergillus precipitins were detectable in 86 % of cases (12/14).

Two-thirds of fungal episodes (12/18) were breakthrough infections (itraconazole prophylaxis in most
cases), and half of the cases (9/18) occurred while on immunoglobulin substitutive therapy. First line
antifungal therapy was voriconazole only (8/18) or amphotericin B alone or in association (6/18). Five
patients required surgery (4 CPA, 1 aspergilloma). One patient died from respiratory failure at 11 years old.

Conclusion:

Mold infections occurred in 13.5% of STAT3-deficient patients from the French cohort, mostly on
anatomical modification of the lung. Notably, patients developed aspergilloma, ABPA or CPA, but no
invasive aspergillosis. Despite prolonged antifungal treatment and/or surgery half of the patients (5/10)
relapsed.
Analyse physicochimique et microbiologique de la Qualit de lAir Intrieur dans
les tablissements HOSPitaliers : ltude QAIHOSP

GANGNEUX J. 1 * , BELAZ S. 1 , RIVIER A. 2 , LE CANN P. 3 , GUILLASO M. 2 , DONNIO P. 1 ,


BLANCHARD O. 3 , MERCIER F. 3 , SURGET E. 3 , BAURES E. 3 , FLORENTIN A. 2

1 CHU de Rennes
2 CHU de Nancy
3 EHESP-Ecole des Hautes Etudes en Sant Publique, Rennes

*Auteur correspondant : jean-pierre.gangneux@univ-rennes1.fr

Introduction. Lobjectif de cette tude est de disposer de donnes qualitatives et quantitatives sur la
contamination de lenvironnement intrieur hospitalier, microbiologique et chimique, afin dvaluer
l'exposition du personnel, des visiteurs et des patients et la variabilit spatio-temporelle de la
contamination.

Mthodes. Ltude sest droule dans diffrents lieux des CHU de Rennes et de Nancy : hall daccueil,
salle de soins infirmiers, salle de rveil post-opratoire, chambre dun patient, unit de dsinfection des
endoscopes, laboratoire de parasitologie et salle de dcoupe de pltres. Deux campagnes de prlvement
ont eu lieu en t 2014 et en hiver 2015. Les mthodes de prlvement taient nombreuses et
complmentaires (tableau I). Lanalyse des donnes a t ralise sous IBM SPSS grce au test de Mann-
Whitney et le coefficient de corrlation de Pearson.

Rsultats. Les concentrations daldhydes, de composs organiques volatils (COV) et semi-volatils taient
faibles trs faibles dans les 2 tablissements. Etaient dtectables, mais sans diffrences globales entre
les 2 tablissements: la contamination fongique (m=226UFC/m3 ;p=0,97) ou bactrienne (m=352UFC/m3
;p=0,14), les particules PM2,5 (m=2,1g/m3 ;p=0,97) et PM10 (m=6,6g/m3 ;p=0,84). Sur le plan
saisonnier, la contamination fongique tait plus importante en t pour les 2 tablissements (p=0,002). La
contamination bactrienne ne varie pas significativement entre les locaux (p=0,14) contrairement la
contamination fongique (p=0,02) et particulaires PM2,5 (p=0,01) ou PM10 (p=0,01). Cette dernire est plus
importante dans le hall (m=879UFC/m3), le laboratoire de parasitologie (m=333UFC/m3) et la salle de
pltre (m=310UFC/m3). Nous ne retrouvons pas de corrlation significative entre le nombre de personnes,
le taux de CO2, lhumidit relative et le dnombrement bactrien ou fongique. Nanmoins nous retrouvons
une relation forte entre la temprature du local et la contamination bactrienne (r=0,7, p=0,008) ou la
contamination fongique (r=0,56, p=0,045) dune part, et entre la contamination fongique et les PM10
(r=0,52, p=0,022) dautre part.

Conclusion. Notre tude montre une trs faible contamination par les aldhydes, COV et sCOV
comparativement dautres lieux publics. La forte variabilit spatio-temporelle de la contamination fongique
et particulaire est lie la saison, lactivit et la ventilation.

Echantillonnage et mthodes d'analyses effectus


Continuous increase of Trichophyton tonsurans at the expense of Microsporum
audouinii var. langeronii as a cause of tinea capitis in the urban area of Paris: a
five-year long study
GITS-MUSELLI M. 1,2 * , BENDERDOUCHE M. 1 , MINGUI A. 1 , HAMANE S. 1 , GUIGUE N. 1 , ALANIO A.
1,2,3
, BRETAGNE S. 1,2,3

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie AP-HP, Groupe Hospitalier Saint-Louis-Lariboisire-Fernand-


Widal, Paris, France
2 Universit Paris-Diderot, Sorbonne Paris Cit, France
3 Institut Pasteur, Unit de Mycologie Molculaire, CNRS URA3012, Paris, France

*Auteur correspondant : maudzazor@hotmail.com

Tinea capitis (TC) remains a public health in pediatric population in urban areas. The dermatophytes
responsible can be divided into three major groups : anthropophilic, zoophilic, and geophilic species. Our
objective was to analyze the recent epidemiology of TC in our hospital in Paris, France.

We included all the patients seen from October 2010 to September 2015 in our laboratory for suspicion of
TC. Suspected lesions were sampled and epidemiological data were recorded. After a direct microscopic
examination, hair samples were seeded on Sabouraud medium agar slant and kept 3 weeks at 26C. The
species identification was based on macroscopic and microscopic examination.

We obtained 3372 samples from 3090 patients (sex ratio 0.93; median age: 8 years, range: 1 month-89
years). We observed 36 % of infections, with an overrepresentation of young boys (71%) and 7,5 % of
patients were defined as carriers. Three anthropophilic species were predominant (96 %): Trichophyton
soudanense, Trichophyton tonsurans, and Microsporum langeronii. For a given family (n=233, 2 to 6
members), the same species was identified when several TCs were diagnosed except for five. Therefore,
we counted one family as one case to analyze the evolution over time. Globally, the incidence of T.
tonsurans increased over time and it was the first species isolated in 2014. When considering the
geographical origin, we observed a continuous increase of T. tonsurans in the sub-Saharan African
patients, mainly at the expense of M. langeronii, T. soudanense remaining quite stable (Figure 1). In the
Caribbean patients, T. tonsurans remained majority, although T. soudanense was present, suggesting
transmission between communities. This increase of T. tonsurans could be due to a better fitness of this
species for transmission between individuals through community contacts or by common hairdressers.
Another explanation could be the less susceptibility of T. tonsurans to griseofulvin, the main agent used in
the pediatric population to treat TC.This study showed that T. tonsurans became in 2014 the major agent of
TC in the urban area of Paris, as already reported in London. Although British and American guidelines
supporting terbinafine as the first choice to treat Trichophyton TCs, the French recommendation is
griseofulvin since terbinafine does not have governmental approval in children. These recommendations
could be challenged in case of continuous increase of T. tonsurans in TC.

Major anthropophilic specie's distribution over time


in patients from Sub-saharan african ancestry
Les histidine kinases chez les champignons pathognes : nouvelles cibles pour
le dveloppement thrapeutique ?

HERIVAUX A. 1 , GASTEBOIS A. 1 , BOUCHARA J. 1 , LATGE J. 2 , PAPON N. 1 *

1 EA3142 Groupe dtude des Interactions Hte-Pathogne , Institut de Biologie en Sant, C.H.U.
dAngers
2 Unit des Aspergillus, Institut Pasteur de Paris

*Auteur correspondant : nicolas.papon@univ-angers.fr

Les histidine kinases (HK) sont des protines senseurs impliques dans des mcanismes de
signalisation cellulaire utiliss par les bactries, les plantes et les champignons pour percevoir les signaux
environnementaux et proposer une rponse adapte. Si la fonction des HK chez les bactries et les
plantes est prsent lucide, les donnes dans ce domaine sont plus que fragmentaires pour les
champignons. Quelques travaux rcents suggrent cependant limplication des HK dans la virulence
despces pathognes de lhomme (Candida albicans, Cryptococcus neoformans et les champignons
dimorphiques) [1]. Ainsi, aucune HK n'ayant t identifie ce jour chez les animaux, ces protines
constituent de ce fait des cibles de choix pour le dveloppement de nouvelles molcules antimicrobiennes.

[1] Defosse T.A., Sharma A., Mondal A.K., Dug de Bernonville T., Latg J.P., Calderone R., Giglioli-Guivarch N., Courdavault V., Clastre M., Papon N. (2015) Hybrid
histidine kinases in pathogenic fungi. Molecular Microbiology. 95: 914924.

Structure des histidine kinases fongiques


Gnotypage d'Exophiala dermatitidis par polymorphisme des microsatellites et
suivi de la colonisation des patients atteints de mucoviscidose

LE BIHAN D. 1 , LARCHER-GRENOUILLET F. 1 , REBOUX G. 1,2 , RICHAUD-THIRIEZ B. 1 , MACHOUART


M. 3 , GRENOUILLET F. 1,2 *

1 CHRU Besanon, France


2 UMR 6249 Chrono Environnement, Universit de Bourgogne Franche-Comt, France
3 CHRU Nancy, France

*Auteur correspondant : fgrenouillet@chu-besancon.fr

De nombreux micromyctes peuvent coloniser et infecter les voies respiratoires des patients atteints de
mucoviscidose. Les levures noires du genre Exophiala sont retrouves chez 2 20 % de ces patients
et des cas d'infections pulmonaires prouves ont t dcrits. L'espce Exophiala dermatitidis reprsente
plus de 90 % des souches isoles de ces patients.

L'objectif de ce travail a t de dvelopper une technique de gnotypage d'E. dermatitidis par analyse du
polymorphisme de microsatellites, et de l'appliquer aux souches de patients atteints de mucoviscidose
suivis au CHRU de Besanon coloniss par E. dermatitidis.

Treize marqueurs microsatellites ont t identifis et tests sur un panel de cinq souches d'E. dermatitidis
sans lien pidmiologique. Les fragments obtenus aprs PCR ont t analyss en analyse de fragments
(polymorphisme de la taille des amplicons). Quatre cibles ont t slectionnes et values sur 25 souches
d'E. dermatitidis sans lien pidmiologique (isolats cliniques et environnementaux), permettant la
dtermination du pouvoir discriminant de la mthode par le calcul de l'indice de Hunter D. La spcificit des
PCR a t value avec un panel de 11 souches despces proches (Exophiala phaeomuriformis,
Exophiala jeanselmei, Rhinocladiella similis).

Le pouvoir discriminant D du panel associant les 4 microsatellites slectionns a t de 0,94. Les cibles se
sont rvles spcifiques dE. dermatitidis, sans amplification des autres espces.

L'tude sur une cohorte de 13 patients atteints de mucoviscidose avec 71 isolats d'E. dermatitidis (1 21
isolats par patient sur une priode de 70 mois) a montr que chaque patient tait colonis par un seul
clone dE. dermatitidis. Un mme clone a t identifi chez 7 patients sur 13.

La mthode de gnotypage d'E. dermatitidis par polymorphisme des microsatellites sest rvle
discriminante et a permis la caractrisation des souches colonisant les patients atteints de mucoviscidose.
L'existence d'un clone dominant commun parmi les souches isoles de patients et les souches
environnementales de Franche-Comt appelle une meilleure connaissance de l'environnement
domestique de ces patients, afin d'identifier les sources environnementales lorigine de leur colonisation
pulmonaire par E. dermatitidis.
Comparaison de la toxicit de lamphotricine B liposomale et dsoxycholate sur
des cellules pithliales alvolaires par mesures de limpdance cellulaire en
temps rel et du niveau dexpression de gnes de cytokines pro-inflammatoires

MENOTTI J. 1,2 * , ALANIO A. 1,2 , STURNY-LECLERE A. 1 , VITRY S. 3 , SAUVAGE F. 4 , DROMER F. 1 ,


BARRATT G. 4 , BRETAGNE S. 1,2

1 Unit de Mycologie Molculaire, CNRS URA3012, Institut Pasteur


2 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, hpital Saint-Louis, AP-HP et Universit Paris-Diderot
3 Unit de Neuroimmunologie Virale, Institut Pasteur
4 CNRS UMR8612, Facult de Pharmacie, Universit Paris-Sud

*Auteur correspondant : jean.menotti@aphp.fr

Introduction : Des tudes exprimentales et cliniques ont suggr lintrt de ladministration darosols
damphotricine B pour la prophylaxie de laspergillose invasive. La moindre toxicit cellulaire de
lamphotricine B liposomale (L-AmB) par rapport lamphotricine B dsoxycholate (D-AmB) a t
montre par des tests colorimtriques de viabilit cellulaire en point final. Cependant, ces tests ne peuvent
pas mesurer la viabilit de cellules adhrentes en culture cellulaire de faon non invasive et en temps rel.
Notre objectif tait donc de suivre la viabilit cellulaire en temps rel sur une ligne de cellules pithliales
alvolaires en utilisant une technologie base sur limpdance cellulaire et dtudier le niveau dexpression
de gnes de cytokines pro-inflammatoires aprs exposition L-AmB ou D-AmB.

Mthodes : Des cellules pithliales alvolaires A549 ont t cultives dans des puits contenant des
lectrodes (plaques xCELLigence, ACEA Biosciences) permettant des mesures dimpdance en continu.
Les rsultats sont exprims en index cellulaires (IC) mesurs sur une priode de 100 h, prenant en compte
ladhsion cellulaire aux lectrodes et globalisant divers tats biologiques comme la prolifration, la viabilit
et la morphologie. Les cellules A549 ont t ensemences une concentration de 18000 cellules/puits et,
aprs 23 h de culture, les antifongiques (50 400 g/ml de D-AmB ou L-AmB) ou des concentrations
quivalentes de liposomes vides ont t ajouts en quadruplicat. En parallle, 2 plaques de culture ont t
utilises pour quantifier lexpression des gnes de 2 cytokines pro-inflammatoires (TNF- et IL-8) 6h et 24h
aprs laddition des drogues par RT-PCR en temps rel sur les lysats cellulaires.

Rsultats : Une diminution de lIC a t observe avec le D-AmB partir dune concentration de 50 g/ml
avec une rcupration des cellules 60h. Avec des concentrations plus leves de D-AmB, aucune
rcupration cellulaire na t observe. Au contraire, aucune altration de lIC na t observe avec le L-
AmB ou avec les liposomes vides, mme 400 g/ml. Aucune augmentation de lexpression de gnes de
cytokines na t observe 6h, ni avec les liposomes vides, ni avec le L-AmB except une induction de 2
fois et de 6 fois de lARNm du TNF- 200 et 400 g/ml, respectivement, et une induction de 4 fois de
lARNm de lIL-8 400 g/ml. Au contraire, mme avec une faible concentration de D-AmB (50 g/ml), des
inductions de 4 fois et 7 fois du TNF- et de lIL-8, respectivement, ont t observes 6h.

Conclusions : La mesure de limpdance cellulaire en continu est un outil intressant pour suivre la toxicit
cellulaire. La cintique en temps rel de limpdance cellulaire et la mesure de lexpression de gnes de
cytokines pro-inflammatoires ont confirm la meilleure tolrance cellulaire de lamphotricine B liposomale
compar lamphotricine B dsoxycholate.
eANOFEL, un outil diconographie en Parasitologie et Mycologie
MORIO F. 2 * , SIMON C. 1 , BASSET D. 1 , BOTTEREL F. 1 , DELAUNAY P. 1 , GUIGUEN C. 1 ,
KAUFFMANN-LACROIX C. 1 , LACHAUD L. 1 , PAYS J. 1 , PIHET M. 1 , CHABASSE D. 1

1 Sous lgide de la collgiale ANOFEL


2 Parasitologie-Mycologie CHU Nantes

*Auteur correspondant : dochabasse@chu-angers.fr

Les infections parasitaires et fongiques occupent une place importante en maladies infectieuses et ce, sur
tous les continents, notamment en raison de la mortalit et morbidit associes (1). La formation initiale et
continue dans ce domaine joue donc un rle dterminant pour le diagnostic et les stratgies de prvention
de ces infections. Celle-ci constitue toutefois un rel challenge pour les tudiants, biologistes et cliniciens
du fait du caractre rare et/ou limit des zones gographiques spcifiques, de certaines de ces
pathologies infectieuses. Ce dfi npargne pas non plus les pays en voie de dveloppement o laccs
aux ressources peut tre restreint. Avec le dveloppement large et facilit de laccs internet, de
nouvelles perspectives dans ce domaine nous sont offertes, telle que la diffusion de contenus
pdagogiques susceptible de faciliter lapprentissage du diagnostic en parasitologie et mycologie.

Ds sa cration en 1988, les membres de lassociation ANOFEL (Association Franaise des Enseignants
et Praticiens Hospitaliers de Parasitologie et Mycologie) ont eu cur de promouvoir et faciliter
lapprentissage en parasitologie et mycologie. Dans ce contexte, ses membres ont dvelopp au cours de
ces dix dernires annes, diffrents supports pdagogiques parfaitement complmentaires, autant
plbiscits par les tudiants en mdecine et en pharmacie que par les praticiens en exercice : louvrage
Parasitoses et Mycoses des rgions tempres et tropicales dont la dernire dition paratra courant
2016 (Elsevier Masson), le campus de Parasitologie-Mycologie (2) de lUNF3S et le CD-Rom ANOFEL,
atlas diconographies accompagnes de textes didactiques (4me version parue en 2010). Afin de
rpondre aux nouveaux enjeux dans le domaine de l'enseignement, le CD-Rom ANOFEL va voluer en un
site internet, eANOFEL , facilement accessible et libre daccs. Grce ce nouveau format,
lactualisation des ressources et limplmentation de nouvelles illustrations seront simplifies et la lisibilit
accrue, sur le plan national comme international (interface multilingue).

Ce nouvel outil (http://www.eanofel.fr) hberge dj plus de 1600 images et 30 squences filmes de


parasites et de champignons dintrt mdical concernant aussi bien le diagnostic au laboratoire (aspect
morphologique macro- ou microscopique) que la pratique et le contexte clinique dans lequel ces infections
sont observes. Accessible librement aprs simple enregistrement, la base de donnes est structure,
comme dans les prcdents supports, en diffrentes sections thmatiques : protozoaires, helminthes,
mycologie, entomologie, pidmiologie, cycles volutifs, etc. Au sein de chaque section, le contenu est
organis par pathogne/infection. Un nouveau mode de recherche, utilisant un index, a t dvelopp. Le
site sera actualis rgulirement et pourra tre enrichi, dans lavenir, dun dispositif dautovaluation.

Ce nouveau site web ducatif eANOFEL permettra de promouvoir et faciliter l'acquisition de connaissances
dans le domaine du diagnostic des infections parasitaires et fongiques.

Rfrences

1. http://www.life-worldwide.org/fungal-diseases

2. http://campus.cerimes.fr/parasitologie
Extraction et purification des antifongiques non polyniques de la souche
Streptomyces sp. Z26 isole des cosystmes Marocains
NAFIS A. 1,2 * , AZMANI A. 1 , OUBAHA B. 1 , HASSANI L. 1 , NIEDERMEYER T. 2 , BARAKATE M. 1

1 Laboratoire de Biologie et de Biotechnologie des microorganismes, Facult des Sciences Semlalia


Marrakech, Universit Cadi Ayyad Maroc
2 Institut interfacultaire de Microbiologie et des Infections mdicales (IMIT), Universit de Tbingen,
Allemand

*Auteur correspondant : ahmed.nafis@edu.uca.ma

Les mycoses ont augment de manire leve durant la dernire dcennie, se classant au quatrime rang
des infections nosocomiales cause des insuffisances encore perceptibles constates lors des traitements
des mycoses, de la recrudescence des maladies microbiennes et la rsistance de plus en plus rapide des
microorganismes aux antibiotiques.

Par ailleurs, les molcules antifongiques polyniques disponibles lheure actuelle en thrapeutique ne
runissent pas les critres dfinissant lantibiotique idal : toxicit spcifique vis--vis du pathogne, bonne
diffusion dans lorganisme, large spectre dactivit in vivo, absence de problmes lis lapparition de
souches rsistantes et absence deffets secondaires. Cest dans ce contexte que nous avons orient en
partie nos travaux vers la recherche de nouvelles molcules antifongique non polyniques efficaces et non
toxiques produites par les actinobactries. En effet, les actinobactries, bactries mycliennes Gram
positif, sont particulirement trs intressants par leur grande capacit produire des mtabolites
secondaires avec des structures chimiques diversifies. Ils sont surtout rputs pour la production
dantibiotiques antibactriens et antifongiques avec prs de 70 % des molcules actives commercialises.

Durant le programme du screening des actinobactries isoles des cosystmes typiquement marocains
doues dactivit antifongique non polynique, 480 isolats ont t cribls dabord pour leur capacit de
produire de activits antibiotiques contre 16 champignons filamenteux et Candida agents causaux de
mycoses superficielles ou profondes. Les isolats bioactifs ont t cribl en tenant compte des proprits
biologiques et par comparaison des spectres UV-visibles avec les antifongiques polyniques connus.
Finalement, la souche la plus prometteuse; Streptomyces sp. Z26 a t retenue et a subi une fermentation
de 2 semaines dans le milieu NL 300 pour lextraction et la purification des molcules bioactives labores.

Le schma dextraction et de purification des substances bioactives a montr que Streptomyces sp. Z26
produit plusieurs nouvelles molcules activit antifongique non polynique et ceci en comparaison avec
la banque des bases des donnes des substances naturelles bioactives et qui seraient confirmes par leur
lucidation structurale.
Detailed MALDI-TOF Mass spectrometry analysis for the discrimination of
Candida haemulonii complex species
NOBREGA DE ALMEIDA JUNIOR J. 1 * , GRENFELL R. 2 , DA SILVA JUNIOR A. 1 , BARBARO DEL
NEGRO G. 3 , LOPES MOTTA A. 1 , BOTELHO MUNHOZ R. 1 , ROSSI F. 1 , JULIANO L. 2 , BENARD G. 3

1 University of So Paulo
2 Federal University of So Paulo
3 Tropical Medicine Institute of So Paulo

*Auteur correspondant : jnaj99@gmail.com

Introduction: Candida haemulonii is now considered to be a complex of two species and one variety: C.
haemulonii, Candida duobushaemulonii and the variety Candida haemulonii var. vulnera. The correct
identification (ID) of these species is clinically relevant, since resistance to azole derivatives has been
reported and amphotericin B has poor in vitro activity against C. duobushaemulonii isolates. Initial
evaluation using MALDI-TOF MS for the ID of the C. haemulonii complex species provided promising
results, but the discrimination of C. haemulonii from the variety vulnera was problematic, and the
performance of the VITEK MS remains unevaluated.

Objectives: Evaluation of the MALDI-TOF MS performance for the ID of C. haemulonii species ID with two
platforms and its databases and softwares.

Methods: 14 C. haemulonii sensu stricto, 9 C. haemulonii var. vulnera and 10 C. duobushaemulonii from
hospitals belonging to the Medical school from the University of So Paulo were analyzed (ID by ITS1
sequence analysis). A set of reference strains from the CBS-KNAW collection was also included: C.
haemulonii CBS5149T, C. duobushaemulonii CBS7798T, C. duobushaemulonii CBS7799, and for
specificity control, the close related species Candida pseudohaemulonii (CBS10004 and CBS12370). The
isolates/strains were cultured on Sabouraud plates and incubated for 48 h at 30C before MALDI-TOF MS
analysis. Protein extraction protocol with ethanol and formic acid 70% was carried out according to the
Brukers recommendations. Measurements were performed on a Microflex LT and its standard database
(database 3.3.1), and VITEK MS instrument equipped with both IVD and RUO (SARAMIS) databases. To
differentiate C. haemulonii (target group) from the variety vulnera (control group), mass spectra analysis
models were created with the ClinProTools 3.0 software (Bruker). For each model, the recognition
capability (RC) and cross validation (CV) percentage was generated. For single peak analysis, the AUC of
each peak for the discrimination of target group from control group was directly obtained from the
ClinProTools software. For the peaks with the highest AUC, the detection performances were checked
using FlexAnalysis 3.4 (Bruker Daltonics). The signal-to-noise ratios (SN) of the peaks were exported to
SPSS 18.0, ROC curves were constructed, and their optimal cut-off values were determined.

Results: All C. haemulonii sensu stricto isolates/strain had correct species assignment by both Bruker and
VITEK MS IVD databases. For the species C. duobushaemulonii, the Bruker database gave correct
species ID for 75% of the isolates/strains. VITEK MS IVD analysis misidentified all C. duobushaemulonii
and C. pseudohaemulonii isolates/strains as C. haemulonii (99% of confidence level). The VITEK MS
SARAMIS was unable to give genus/species ID for all isolates/strains. Discrimination of the isolates
belonging to the C. haemulonii sensu stricto and to the variety vulnera was not possible with all systems
and databases. The ClinProTools models showed values of CV and RC above 90% for the discrimination
of target group from control group. The most discriminative peaks were 5107, 6878 and 13750 m/z (AUC
>0.9), with sensibility and specificity of 88.6%, 80.8%, 85.8%, and 96.6%, 92.9%, 93.8%, respectively. The
SN cut-off values from the peaks 5107, 6878 and 13750 m/z for the discrimination of the target group from
the control group were 2.5, 3.9 and 6.3, respectively.
Emergence de Candida sp. rsistants aux chinocandines chez des transplants
hpatiques
PRIGENT G. 1 , AIT-AMMAR N. 1,2 * , LEVESQUE E. 3 , FEKKAR A. 4 , COSTA J. 2,5 , EL ANBASSI S. 1 ,
MERLE J. 3 , DANNAOUI E. 2,6 , BOTTEREL F. 1,2

1 Unit de Parasitologie - Mycologie, Dpartement de Virologie, Bactriologie-Hygine, Mycologie-


Parasitologie, DHU VIC, CHU Henri Mondor, AP-HP, 51 avenue du Marchal de Lattre de Tassigny, 94010
Crteil, France
2 EA Dynamyc UPEC, ENVA, Facult de Mdecine de Crteil, 8 rue du Gnral Sarrail 94010 Crteil,
France
3 Service d'Anesthsie-Ranimation, CHU Henri Mondor, AP-HP, 51 avenue du Marchal de Lattre de
Tassigny, 94010 Crteil, France
4 Service de Parasitologie-Mycologie, CHU La Piti-Salptrire, AP-HP, 47-83 Boulevard de l'Hpital,
75013 Paris, France.
5 Laboratoire Cerba, Saint Ouen Laumne, France
6 Universit Paris-Descartes, Facult de Mdecine, AP-HP, Hpital Europen Georges Pompidou, Unit
de Parasitologie-Mycologie, Service de Microbiologie, Paris, France

*Auteur correspondant : nawel.ait-ammar@aphp.fr

Objectifs : La prophylaxie antifongique avec une chinocandine1 est recommande chez les transplants
hpatiques. Celle-ci peut tre responsable de l'mergence de rsistance. Le but de ce travail tait d'valuer
la rsistance des Candida spp. aux chinocandines chez des patients transplants hpatiques, traits en
prophylactique ou en curatif par des chinocandines.

Matriel et mthodes : Deux cohortes de patients transplants hpatiques de faon conscutive au cours
des 6 premiers mois de 2013 (tude rtrospective2) et de 2015 (tude prospective) ont t incluses. Des
cartes fongiques hebdomadaires ont t ralises ainsi que des prlvements profonds en cas de
suspicion de candidose invasive. Les isolats de Candida ont t identifis par MALDI-TOF. La sensibilit
des isolats l'anidulafungine et la micafungine a t ralise par Etest. La rsistance a t confirme par
EUCAST et par le squenage des rgions hot spots des gnes FKS.

Rsultats : Quatre-vingt-quatorze transplants hpatiques (52 durant la 1re priode et 42 durant la 2me)
ont t inclus. Trente-neuf patients taient coloniss ou infects et traits par une chinocandine. La
rsistance aux chinocandines est apparue chez 3 (7.6%) patients avec un C. glabrata rsistant (patient
P1) et un C. dubliniensis (patient P2) durant la 1ere priode et un C. albicans rsistant (patient P3) durant
la 2me priode. Pour chaque patient, les isolats rsistants ont t retrouvs sur plusieurs sites et
diffrents temps. Pour P1, 22 isolats ont t retrouvs : urines (n=11), anus (n=6) et pli inguinal (n=5). Pour
P2, 5 isolats ont t retrouvs : collection abdominale (n=4) et bouche (n=1). Chez P3, 1 isolat a t
retrouv au niveau du pli inguinal. Les CMI de l'anidulafungine et de la micafungine ont t respectivement
>0,125 mg/L et >0,06 mg/L (EUCAST). La rsistance est apparue chez C. albicans, C. glabrata et C.
dubliniensis 24, 14 et 27 jours respectivement aprs l'initiation du traitement par caspofungine et a disparu
aprs l'arrt du traitement. L'analyse molculaire a retrouv 1 mutation dans la rgion HS1 fks1 (S645P) de
C. albicans et C. dubliniensis et 2 mutations successives dans la rgion HS1 fks2 (F659S and S663A) de
C. glabrata.

Conclusion : Ce travail confirme le risque d'mergence de rsistance de Candida lors de traitements par
chinocandine. La plupart des souches rsistantes ont t isoles partir de sites digestifs. La rsistance
peut apparaitre rapidement, ce qui ncessite une surveillance rapproche de la sensibilit des isolats aux
antifongiques.

1 Gavald et al. CMI 2014

2 Levesque et al. JCM 2015


Chromoblastomycosis and sporotrichosis in Madagascar: epidemiology,
molecular diagnostic and perspectives
RASAMOELINA T. 1 * , RAKOTOZANDRINDRAINY N. 1,2 , RABERAHONA M. 3 , RAPELANORO
RABENJA F. 4 , RAKOTO ANDRIANARIVELO M. 1 , ANDRIANARISON M. 4 , RANAIVO I. 4 ,
RAMAROZATOVO L. 4 , CORNET M. 5,6

1 Centre dInfectiologie Charles Mrieux, Antananarivo, Madagascar


2 UPFR Parasitologie-Mycologie, HU Joseph Ravoahangy Andrianavalona, Antananarivo, Madagascar
3 Service des Maladies Infectieuses, HU Joseph Raseta Befelatanana, Antananarivo, Madagascar
4 USFR Dermatologie-Rhumatologie, HU Joseph Raseta Befelatanana, Antananarivo, Madagascar
5 Parasitologie-Mycologie, Institut de Biologie et de Pathologie, CHU de Grenoble, France
6 TIMC-IMAG-TheREx, Universit Joseph Fourier Grenoble Alpes, Grenoble, France

*Auteur correspondant : mandranto@cicm-madagascar.com

Chromoblastomycosis (CBM) and sporotrichosis (SP) are endemic mycosis in Madagascar that occurred
following injury and telluric contamination. CBM is mostly due to Fonsecaea pedrosoi or Cladophialophora
carrionii and affects usually the subcutaneous tissue, whereas SP is caused by Sporothrix schenckii by
invading the lymphatic system of the arms and legs. These fungal infections are considered neglected
diseases because of poor resources allocated to their diagnosis, monitoring or prevention.

Objectives. The general objective was to assess the current prevalence of these mycosis in Madagascar.
The specific objectives were to characterize the causative fungal species and their habitat in order to
prevent contamination, and to set up a sustainable clinical and laboratory network to allow proper case
management and to provide a molecular-based species identification.

Methods. The study comprised a prospective clinical study that started in March 2013. Patients were
recruited during field investigations and consultations provided in a dermatology department. Pus, biopsy
and squamous were sampled from the lesions. Informed consent from the patients and ethical approval
from the Ministry of Health were obtained. Histopathological and mycological analysis (direct examination
and culture on Sabouraud-Cycloheximide) were performed. We have developed a PCR-based strategy that
was validated on reference strains provided by BCCM/IHEM (Belgian Coordinated Collections of
Microorganism). First, two sets of universal primers (NL-1/NL4 and ITS5/ITS4) were used to confirm the
fungal origin of the lesions. Then, specific primers (SSHF31/SSHR97, Fon-F/Fon-R, EdF/EdR) were used
for fungal species identification.

Results. Ninety two patients were enrolled. Mean age was 38.7 years and men were predominant with
71.7% of cases. Overall, 47.8% were farmers, 30.4% self-employed, 12.0% students and 9.8%
unemployed. Clinically, 32.6% of cases were suspected having CBM and presented with crusted,
verrucous and tumoral lesions; 34.8% of cases were suspected having SP characterized mainly by
ulcerative and nodular lesions of the lymphatic system of the lower limbs. Mycological analysis confirmed
33 cases of SP and 13 cases of CBM. The molecular diagnosis confirmed 34 Sporothrix sp, leading to a SP
prevalence of 37% and 1 Cladophialophora sp and 16 Fonsecaea sp leading to a CBM prevalence of 18.5
%. One mycetoma probably of bacterial origin was also diagnosed. CBM cases were predominant in the
north-east, east and south part of the island, whereas SP cases were located mainly in the central
highlands.

Conclusion. These results confirmed that CBM and SP persist at a high frequency in Madagascar. The
availability of a reliable PCR tool in routine and the clinical expertise gained during this study will help the
national authorities to set up a proper control and prevention program. An environmental survey is planned
to describe the spread of the causative agents in the environment in an attempt to prevent the
contamination.
Comment diagnostiquer des agents pathognes de classe 3 dans un laboratoire
P2
SABOU M. 1,2 * , PAZ M. 1 , KAHN P. 1 , DENIS J. 1,2 , GSCHWEND A. 3 , DEGOT T. 3 , KHOURI T. 4 ,
MOULIN B. 5 , KESSLER R. 3 , HERBRECHT R. 6 , CANDOLFI E. 1,2 , LETSCHER-BRU V. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, CHU de Strasbourg


2 Institut de Parasitologie et de Pathologie Tropicale, EA 7292, Strasbourg
3 Service de Pneumologie, Nouvel Hpital Civil, CHU de Strasbourg
4 Service de Ranimation Mdicale, Nouvel Hpital Civil, CHU de Strasbourg
5 Service de Nephrologie-Transplantation, Nouvel Hpital Civil, CHU de Strasbourg
6 Service dHmatologie et dOncologie, Hpital de Hautepierre, CHU de Strasbourg

*Auteur correspondant : amsabou@unistra.fr

En France, les mycoses exotiques sont des pathologies dimportation, peu frquentes. Elles sont dues
des champignons qui sont des agents pathognes de classe 3. Nous prsentons deux observations o
nous avons vit avec succs la manipulation en laboratoire P2 des cultures devenues positives.

Un homme de 66 ans, greff rnal sur nphropathie vasculaire, est admis pour anorexie et perte de poids
importante (15 kg en 2 mois). Lexamen clinique rvle une masse pseudo-tumorale ulcre du palais et
lapparition de lsions cutanes papuloncrotiques sur le visage. Le scanner thoracique rvle de multiples
micronodules, principalement centrolobulaires, au sein dun emphysme svre. Le galactomannane
aspergillaire est ngatif dans le LBA, le sang et le LCR, mais positif sur la biopsie cutane (index 4,918).
Lexamen direct des biopsies palatines et cutanes montre des macrophages contenant des levures dont
laspect est compatible avec Histoplasma capsulatum. Cette suspicion est confirme par squenage de la
rgion ITS de lADN ribosomal ralis sur lchantillon de biopsie. Lanamnse initiale ne mentionnait
aucun voyage ltranger mais la notion de voyages en Afrique Centrale est apparue aprs le diagnostic,
dont le dernier remonterait plus de 15 ans. Le patient trait par amphotricine B liposomale, samliore
transitoirement, puis dcde 25 jours aprs la biopsie diagnostique suite un choc septique Escherichia
coli.

Un homme de 63 ans, greff bi-pulmonaire dans un contexte de BPCO, est hospitalis pour des cphales
persistantes depuis plusieurs semaines. LIRM crbrale trouve des lsions frontales et temporales
gauches ainsi quune lsion occipitale droite. Lexamen direct de la biopsie crbrale montre la prsence
de filaments mycliens septs qui rappellent, par endroit, larchitecture dun champignon exotique dcrit
comme agent dabcs crbraux : Cladophialophora bantiana. Mme si lanamnse ne rvle quun seul
voyage Majorque il y a 2 ans, il est dcid de ne pas manipuler la culture devenue positive et de raliser
un squenage de la rgion ITS de lADN ribosomique sur lchantillon dabcs. Celui-ci confirme quil
sagit bien de C. bantiana. Le patient est trait par voriconazole, caspofungine et flucytosine et, pour
linstant, lvolution 8 semaines est favorable, bien quune intervention neurochirurgicale ait t exclue
devant des abcs multiples et profonds.

Les mycoses exotiques sont des pathologies rares, pas toujours voques lorsque lanamnse ne rvle
pas de voyage en zone dendmie. Leur pronostic est tributaire du statut immunitaire du patient et de la
prcocit de la prise en charge diagnostique et thrapeutique. Le squenage molculaire ralis
directement sur lchantillon peut tre utilis comme une approche diagnostique qui savre rapide, surtout
lorsque des structures de type P3 ne sont pas disponibles.
Y-a-t-il un intrt doser lantigne cryptococcique dans les fluides biologiques
autres que le LCR et le srum ?
SENGHOR Y. 1 , GUITARD J. 1 , HENNEQUIN C. 1 *

1 APHP, Hpital St Antoine, Service de Parasitologie-Mycologie

*Auteur correspondant : christophe.hennequin-sat@aphp.fr

Introduction

La recherche dantignes cryptococciques (AgCr) dans le LCR et le srum est un outil diagnostique majeur
de la cryptococcose. Par extension, cette recherche peut tre effectue dans dautres fluides biologiques.
Cependant, la validation par les fournisseurs de cette recherche nexiste pas pour la majorit des trousses,
empchant une accrditation de porte A pour cette analyse. Dans ce contexte, nous avons tudi lintrt
de cette recherche dans le liquide de Lavage Broncho-alvolaire (LBA) et les urines.

Matriels et Mthodes

Nous avons collect rtrospectivement (2007- 2013) les rsultats de la recherche dAgCr dans les urines et
le LBA. Cette recherche tait effectue laide du kit Meridian Premier EIA Cryptococcal Antigen. Le seuil
de positivit tait fix 0,1, identique celui prconis par le fournisseur pour le srum et le LCR. Nous
avons tudi paralllement les rsultats de lexamen mycologique conventionnel (encre de Chine et
culture) pratiqu sur ces chantillons ainsi que lventualit dun diagnostic final retenu de cryptococcose.

Rsultats

Durant la priode dtude, 19 cas de cryptococcose ont t diagnostiqus. La recherche de dAgCr a t


effectue partir du surnageant de 4650 LBA (3839 patients) dans le cadre dune recherche systmatique.
Elle sest avre positive dans 12 cas (10 patients). Dans 5 cas, le LBA avait t pratiqu chez un patient
dont le diagnostic de cryptococcose avait t pos antrieurement (6 jours 8 mois). Dans 1 cas, la
positivit du test antignique permettait lanticipation du diagnostic de cryptococcose tabli quelques jours
plus tard par la positivit de la culture. Enfin dans 4 cas, le test antignique tait seul positif dans le LBA de
patients chez lesquels le diagnostic de cryptococcose a t cart. Inversement dans 6 cas o une encre
de Chine et/ou une culture tait positive partir dun LBA, lAgCr tait ngatif dans 4 cas.

Dans le cadre de bilans dextension (12 cas) de linfection ou dans un contexte dimmunodpression (24
cas), la recherche dAgCr a t pratique sur 42 urines (36 patients). Elle tait positive dans 9 cas (7
patients). Il sagissait uniquement de patients pour lesquels le diagnostic de cryptococcose avait t pos
antrieurement. Dans 2 cas seulement lencre de Chine et/ou la culture tait galement positive. En
revanche, la dtection dAgCr tait ngative pour 1 patient atteint de cryptococcose alors que lEncre de
Chine et la culture tait positive.

Conclusion

La dtection dAgCr dans le LBA savre une technique peu sensible et associe la survenue de
quelques faux positifs. Il est difficile de recommander lutilisation de cette recherche que ce soit dans le
cadre dun screening ou lors dun bilan dextension. Dans les urines, la dtection pourrait savrer plus
sensible (87,5%) que le diagnostic direct (37,5%). Compte tenu de la parfaite spcificit et de la ncessit
dune ventuelle adaptation thrapeutique, cette recherche, limite aux bilans dextension de linfection,
peut tre recommande.
Phenotypic and Genomic Evolution in Candida albicans during Long-term
Pathologic Interaction in Patients with Chronic Mucocutaneous Candidiasis.
SITTERLE E. 1,2 * , SERTOUR N. 1,2 , MAUFRAIS C. 3 , D'ENFERT C. 1,2 , BOUGNOUX M. 1,2,4

1 Institut Pasteur, Unit Biologie et Pathognicit Fongiques, Dpartement Mycologie, Paris, France
2 INRA, USC 2019, Paris, France
3 Institut Pasteur, Centre dInformatique pour la Biologie, Paris, France
4 Universit Paris Descartes, Laboratoire Microbiologie, Hpital Necker-Enfants-Malades, AP-HP, Paris,
France

*Auteur correspondant : emilie.sitterle@pasteur.fr

Background: The Candida albicans genome displays a high level of plasticity. Point mutations or large-
scale genetic changes, including aneuploidies or large-range loss-of-heterozygosity (LOH) events, can
occur in vitro and in vivo under different stress conditions. Chronic Mucocutaneous Candidiasis (CMC) is a
complex and rare case of primary immunodeficiency in humans, characterized by chronic non-invasive C.
albicans infections of the skin and mucosae. CMC is an interesting model of long-term and pathologic
interactions between C. albicans and the host, possibly leading to genomic evolution.

Methods: Sixty-three C. albicans strains isolated from the mouth, skin, vagina and nails from 11 patients
with CMC and their family were studied using Multi Locus Sequence Typing (MLST) and extensive
phenotypic analysis. We sequenced the genomes of 27 isolates (Illumina Hiseq-100 bp reads) selected to
represent different patients, anatomical sites and time of sampling. SNPs were detected using GATK and
selected with the recommended filters. Post-treatment analysis was performed using dedicated scripts to
analyze Copy Number Variations (CNVs), SNP density and distal LOH per chromosome.

Results: The 63 strains were distributed within 4 clades and each patient was infected over time with
strains sharing a unique or closely related MLST patterns. These strains exhibited an extensive phenotypic
variability in terms of growth rates, filamentation, stress resistance and susceptibility to antifungal agents.
The whole genome sequencing of the 27 strains (104 X coverage on average) allowed to cover about 99.4
% of the reference SC5314 genome. While genomes are heterozygous, many LOH tracts were found in
each strain, but no aneuploidy event was detected by CNV analysis. Characterization of genetic changes in
6 strains isolated from the mouth of one patient over 7 years revealed appearance and fixation of LOH
events. Among the 38,000 SNPs shared by all the 6 strains, 74 were predicted to have a significant impact
on proteins. Furthermore, while the strains were closely related, about 5,000 transient or recurrent SNPs
were observed between the strains.

Conclusion: Altogether, these findings show extensive variations both at the genomic and phenotypic
levels in C. albicans strains during chronic infection in CMC patients and suggest that CMC could be an
interesting model for the study of C. albicans genomic evolution.
La prsence du signe du halo invers (SHI) au scanner thoracique est
troitement associe la prsence dADN circulant de mucorales dans le srum
de patients prsentant des signes dinfections fongiques invasives

VALOT S. 1 * , LEGOUGE C. 3 , BASMACIYAN L. 1 , SAUTOUR M. 1 , FAVENNEC C. 3 , LAFON I. 3 ,


MILLON L. 2 , DALLE F. 1 , CAILLOT D. 3

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie CHU de DIJON,


2 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie CHU de Besanon,
3 Service d'Hmatologie Clinique CHU de DIJON

*Auteur correspondant : stephane.valot@chu-dijon.fr

La prsence du signe du halo invers (SHI) au scanner thoracique est troitement associe la
prsence dADN circulant de mucorales dans le srum de patients prsentant des signes
dinfections fongiques invasives

Contexte : Chez les patients atteints de leucmies aiges, lincidence des mucormycoses pulmonaires
invasives (MPI) est en forte augmentation. Compte tenu (i) du fort taux de mortalit associ aux MPI, (ii)
des difficults du diagnostic biologique (ED, culture, diagnostic indirect), clinique et radiologique diffrentiel
avec laspergillose pulmonaire invasive (API) et (iii) de la rsistance des mucorales au Voriconazole utilis
en premire ligne du traitement des API, il tait urgent de disposer de nouveaux outils pour le diagnostic
prcoce de MPI. Le signe du halo invers (SHI) et la PCR en temps rel (qPCR) ciblant lADN des
principales espces de mucorales dans le srum sont 2 marqueurs ayant rcemment montr leur intrt
dans ce diagnostic (1, 2).

Objectifs : Lefficacit de ces deux marqueurs pour le diagnostic prcoce de MPI a t value
rtrospectivement chez 23 patients traits pour leucmie aige et prsentant une MPI prouve (groupe 1, n
= 16) ou une infection fongique invasive possible (IFIp, groupe 2, n = 7) selon les critres de
lEORTC/MSG.

Mthodes : Les srums encadrant (J-9 J+9) le jour (J0) de mise en vidence du SHI ont t tests par
qPCR mucorales. 3 10 srums par patients ont pu tre tests.

Rsultats : Tous les patients sauf 2 (un dans chaque groupe) ont prsent au moins une recherche de
mucorales par qPCR positive avant J0, soit une sensibilit de la qPCR de 94% et de 86% pour les groupes
1 et 2 respectivement. La PCR tait positive en moyenne 4 jours avant J0, sans diffrence significative
entre les 2 groupes. Rhyzomucor tait lagent le plus frquemment identifi dans notre srie de patients
(15/22).

Conclusions : Cette tude confirme (i) la spcificit du SHI dans le diagnostic de MPI chez les patients
atteints de leucmie aige et (ii) lintrt de la qPCR mucorale dans le diagnostic prcoce de MPI et le
monitoring des patients leucmiques risque de MPI. Lintgration des ces 2 marqueurs dans les critres
EORTC/MSG sera intressante pour le diagnostic prcoce de MPI chez les patients risque dIFI qui
pourront bnficier demble dun traitement antifongique adapt.

Rfrences

1. Legouge C, Caillot D, Chrtien ML, Lafon I, Ferrant E, Audia S, et al. The reversed halo sign:
pathognomonic pattern of pulmonary mucormycosis in leukemic patients with neutropenia? Clin Infect Dis
Off Publ Infect Dis Soc Am. 2014 Mar;58(5):6728.

2. Millon L, Larosa F, Lepiller Q, Legrand F, Rocchi S, Daguindau E, et al. Quantitative polymerase chain
reaction detection of circulating DNA in serum for early diagnosis of mucormycosis in immunocompromised
patients. Clin Infect Dis Off Publ Infect Dis Soc Am. 2013 May;56(10):e95101.
Dveloppement dun modle de dermatophytose sur piderme humain
reconstruit
FAWAY E. 1 * , CAMBIER L. 2 , LAMBERT DE ROUVROIT C. 1 , MIGNON B. 2 , POUMAY Y. 1

1 URPhyM, NARILIS, Universit de Namur, Namur, Belgique


2 Facult de mdecine vtrinaire, Universit de Lige, Lige, Belgique

*Auteur correspondant : emilie.faway@unamur.be

Les dermatophytoses sont des lsions superficielles des structures kratinises de lorganisme, savoir la
couche corne de lpiderme, les cheveux et les ongles, provoques par des champignons kratinophiles
appels dermatophytes. Lincidence de cette infection est de 10% dans la population globale mais se
trouve en augmentation durant la dernire dcennie. Dailleurs, lincidence des dermatophytoses peut
dpasser les 30% dans certaines populations risque tels les sportifs ou les patients diabtiques. Lespce
anthropophile Trichophyton rubrum est responsable de 80% 90% des dermatophytoses chez lhomme.
Malgr limportance grandissante des dermatophytoses en tant que problme de sant publique, trs peu
dinformations sont connues en ce qui concerne les mcanismes biologiques mis en place lors de
linfection par les dermatophytes, ainsi qu propos de la rponse des cellules de lhte face la prsence
des champignons. Dans le but dtudier ces mcanismes, nous avons dabord dvelopp un modle
dinfection par les arthrospores de lespce T. rubrum sur des pidermes humains reconstruits (RHE) en
culture sur filtre poreux de polycarbonate et diffrencis linterface air-liquide. Les dermatophytes sont
mis en vidence par coloration histochimique lacide priodique de Schiff, et dnombrs par PCR
quantitative spcifique du gne de lactine de T. rubrum. Nos rsultats indiquent que ce modle prsente
un potentiel dtude extrmement large et permet dj dtudier la cintique dadhrence des arthrospores
la couche corne des RHE, et de mesurer la production de cytokines par les kratinocytes en rponse
linfection. De faon pertinente, lefficacit dun agent antifongique (miconazole) a pu tre dmontre avec
succs dans ce modle.

Coloration histochimique lacide priodique de


Schiff (PAS) avec prtraitement lalpha-amylase
dun RHE quatre jours aprs inoculation par 1000
arthrospores de T. rubrum.
Apport du Western blot dans le diagnostic biologique de laspergillose
ADJMI HAMOUD H. 1 * , ABDELOUAHED K. 1 , LAZRI L. 1 , BEKHOUCHE S. 1 , GHIRIEB S. 1 , LEKHAL
AYAT A. 1 , BOUBEUKEUR R. 1 , ZITOUNI A. 2 , SAHRAOUI M. 3 , CHERFI L. 3

1 SERVICE PARASITOLOGIE-MYCOLOGIE , HCA,ALGERIE


2 SERVICE DE PNEUMOLOGIE , HCA,ALGERIE
3 SERVICE DE REANIMATION , HCA,ALGERIE

*Auteur correspondant : ahaiet@yahoo.fr

Les aspergilloses sont des mycoses opportunistes, le plus souvent broncho-pulmonaires, provoques par
des champignons saprophytes du genre Aspergillus.

Objectif:

Dans ce travail, nous tudions lapport du Western blot (Asp-WB) Kit IgG (LDBIO Dg, Lyon, France) sur
automate Euroblot Euroimmun Germany en comparant les rsultats obtenus avec le test ELISA IgG et IgM
(Serion) et la technique dimmunoprcipitation (Electrosynrse) pour le diagnostic daspergillose.

Matriel et mthodes:

Il sagit dune tude prospective au niveau de lhpital central de larme allant de janvier 2015 dcembre
2016. Quatre-vingt-deux cas de suspicions dAspergilloses (Aspergillome, ABPA, API,.) provenant
essentiellement du service de pneumologie et dhmatologie. Les 82 srums sont traits par les trois
techniques cites dans les objectifs

Rsultats :

Sur ces 82 srums lElectrosynrse est positive dans 6 cas. Les anticorps type IgG,en ELISA, sont
prsents 20 fois avec 12 srums douteux. 28 srums sont positifs en IgM avec 4 srums douteux (zone
grise IgG ou IgM = 50UI/ml 70UI/ml). Le WB montre 23 positifs.

Conclusion :

Le diagnostic des aspergilloses repose sur un faisceau darguments (cliniques radiologique et


mycologique), le WB sest montr plus sensible et plus spcifique dans la recherche des anticorps anti-
Aspergillus, il permet dune part la confirmation d'un rsultat positif par les tests classiques et dautre part
de redresser les rsultats faussement ngatifs en electrosynrse ELISA IgG ou faussement positif ELISA-
IgM.
Liquides de conservation d'organes : tude rtrospective, sur une priode de 10
ans, de la contamination Candida
AIT-AMMAR N. 1,2 * , LEVESQUE E. 3 , MATIGNON M. 4 , BONNAL C. 1 , FOULET F. 1 , SORIA A. 5 ,
GRIMBERT P. 4 , MERLE J. 3 , BOTTEREL F. 1,2

1 Unit de Parasitologie - Mycologie, Dpartement de Bactriologie Virologie Hygine Mycologie


Parasitologie, DHU VIC, AP-HP, CHU Henri Mondor, 51 avenue du Marchal de Lattre de Tassigny, 94010
Crteil, France
2 EA DYNAMYC UPEC, ENVA, Facult de Mdecine de Crteil, 8 rue du Gnral Sarrail 94010 Crteil,
France
3 Service d'Anesthsie-Ranimation, AP-HP, CHU Henri Mondor, 51 avenue du Marchal de Lattre de
Tassigny, 94010 Crteil, France
4 Service de Nphrologie, AP-HP, CHU Henri Mondor, 51 avenue du Marchal de Lattre de Tassigny,
94010 Crteil, France
5 Coordination Hospitalire de prlvements dorganes et de tissus, AP-HP, CHU Henri Mondor, 51
avenue du Marchal de Lattre de Tassigny, 94010 Crteil, France

*Auteur correspondant : nawel.ait-ammar@aphp.fr

Objectifs. La contamination par Candida des liquides de conservation (LC) d'organes peut tre
responsable de graves complications mettant en jeu le pronostic vital chez le receveur. Ces complications
consistent, principalement, en des anvrysmes mycotiques et/ou des artrites. Ces contaminations
peuvent provenir du LC contamin pendant le transport du greffon aprs une brche digestive. Le but de
cette tude tait de dterminer l'incidence de la contamination des LC par Candida, sur une priode de 10
ans, dans un grand centre franais de transplantation ainsi que les complications cliniques.

Matriel/mthode. De janvier 2004 dcembre 2013, une analyse rtrospective d'une cohorte de patients
transplants de foie, de rein et de cur, a t ralise l'hpital Henri Mondor. Les rsultats mycologiques
des LC analyss ont t collects partir de notre base de donnes. Les donnes des patients receveurs
d'organes avec un LC positif Candida ont t collectes avec, en particulier, la recherche d'une infection
distance de la greffe, le traitement reu et le devenir du patient.

Rsultat. Durant cette priode, 1584 transplantations d'organes (818 reins, 633 foies et 133 curs) ont t
ralises dans notre centre. L'examen mycologique du LC a t ralis pour 1459 (92.1%)
transplantations. Depuis les recommandations de l'Agence Franaise de Biomdecine en 2008, le
pourcentage de LC analyss a augment significativement (90,5% entre 2004 to 20081 (priode A) vs.
94,3% entre 2009 et 2013 (priode B), p<0.01). Candida a t isol partir de 33 (2.2%) LC parmi les
1459 analyss avec respectivement des incidences de 2,5%, 2,4% et 0% dans les LC de foie, de rein et de
cur. La contamination a diminu entre la priode A et la priode B (2,8% vs. 1,7%). Cette diminution est
observe pour chaque type d'organe transplant avec 3,3% vs. 1,9% et 3,1% vs. 1,8% pour le foie et le
rein respectivement. Candida albicans est l'espce la plus frquemment observe (61%), suivie de C.
glabrata (17%), C. krusei (9%) et d'autres espces (3 %). La CMI des antifongiques par Etest a t
ralise sur tous les isolats. Tous les C. albicans taient sensibles au fluconazole et aux chinocandines.
Les isolats de C. glabrata taient intermdiaires au fluconazole mais sensibles aux chinocandines.
Soixante-dix-huit pourcent des patients ont t traits. Le traitement a t maintenu au minimum 2
semaines. Trente et un patients (94%) taient en vie 1 an de suivi. Un patient transplant de foie a
dvelopp un anvrysme mycotique et est dcd 2 mois aprs la transplantation.

Conclusion. La contamination des LC d'organe peut mettre en jeu le pronostic vital. L'examen
mycologique du LC devrait tre systmatiquement ralis, comme cela est recommand, afin d'instaurer
rapidement un traitement antifongique en cas de contamination Candida et de limiter ainsi les
complications.

1.Botterel F. J Hosp Infect. 2010


Cryptococcose chez les patients non VIH : Quatre nouvelles observations sur
sarcodose, polyarthrite rhumatode, cirrhose hpatique et transplantation rnale.

ARRACHE D. 1 , ZAIT H. 1 * , BOUAHRI L. 1 , BOUHELLAL H. 1 , MADANI K. 1 , MATOUGUI S. 1 ,


HAMICHE R. 2 , HAMRIOUI B. 1

1 Laboratoire de parasitologie-mycologie CHU Mustapha dAlger Algrie ,


2 Service de maladies infectieuses EHS EL Hadi Flici Alger, Algrie

*Auteur correspondant : dalilaarrache@yahoo.fr

Introduction: La cryptococcose, mycose caractre opportuniste, affecte particulirement les sujets


infects par le VIH mais peut survenir plus rarement sur d'autres terrains d'immunodpression. Ici, nous
rapportons quatre nouvelles observations d'infection cryptococcique chez des patients algriens
immunodprims (VIH-) atteints de sarcodose (cas n1), de polyarthrite rhumatode (cas n2), de cirrhose
hpatique post hpatitique HCV(cas n3) et un transplant rnal (cas n4).L'objectif est de prciser les
circonstances de dcouverte, le diagnostic et les modalits thrapeutiques et volutives des cas.

Matriels et mthodes: Quatre patients diagnostiqus au laboratoire de parasitologie-mycologie du CHU


Mustapha d'Alger (juin-novembre 2015). Tous les patients ont bnfici d'un examen mycologique (direct
et culture) et d'une recherche d'antigne cryptococcique sur les liquides biologiques (Pastorex
Cryptococcus).

Rsultats: Les quatre patients sont des adultes avec une moyenne d'ge de 51ans et tous de sexe
masculin. Ils prsentaient tous au moment de l'infection des facteurs d'immunodpression: le patient (cas1)
tait sous corticothrapie (prednisone 40mg/j) pour le traitement de sa sarcodose et prsentait en
parallle une lymphopnie (CD4=96/mm3). Le patient (cas2) tait sous mthotrexate et corticothrapie pour
la prise en charge de sa polyarthrite rhumatode. Le patient (cas 3) prsentait une cirrhose hpatique en
dcompensation, CD4=160/mm3 et le patient (cas4) tait sous traitements immunosuppresseurs pour le
maintien du greffon.

Sur le plan clinique, la cryptococcose s'est manifeste chez les quatre patients par un syndrome neuro-
mning associ des lsions cutanes multiples pour le patient transplant rnal (cas4).

Au laboratoire, les prlvements biologiques analyss taient : LCR et srums pour les quatre patients et
urines (cas1, 3 et 4), hmocultures (cas 3 et 4), liquide d'ascite (cas 3), srosits cutanes (cas4), biopsies
cutanes (cas4) et crachats (cas4) pour certains.

Les LCR reus taient d'aspect clair. Les perturbations retrouves aprs analyse biochimique taient
essentiellement hypoglucorachie et hyperprotinorachie.

L'examen direct color l'encre de chine dilu a permis la mise en vidence des levures auroles d'un
halo clair correspondant la capsule de Cryptococcus sp. dans tous les prlvements de LCR, de crachats
(cas4) et cutans (cas 4). La coloration au mthanol-Giemsa des appositions cutanes (cas4) a permis la
visualisation en ngatif de la capsule des levures.

La culture des prlvements sur Sabouraud-chloramphnicol incub 37C a permis l'obtention de


colonies coulantes beiges crmeuse partir de tous les LCR, de la biopsie cutane (cas4),des crachats
(cas4) et des urines (cas3 et 4). L'espce identifie pour tous les patients tait C.neoformans. Les souches
isoles taient sensibles in vitro aux antifongiques tsts par (Fungitest).La recherche des antignes
cryptococciques tait positive sur tous les srums, les urines, les LCR et sur le liquide d'ascite.

La thrapeutique adopte tait l'amphotricine B en monothrapie puis relais par le fluconazole pour tous
les patients l'exception du patient transplant rnal (fluconazole isolement).

L'volution fut fatale pour le patient cirrhotique (cas3), et favorable pour les patients (cas 2 et 4). Le patient
atteint de sarcodose a bien rpondu au traitement pour sa mningite cryptococcique mais il prsente
actuellement une neutropnie fbrile qui est en cours d'exploration.
Etude rtrospective des onychomycoses retrouves chez les diabtiques sur une
priode de 04 ans (2012-2015) au laboratoire de Mycologie Linstitut Pasteur
dAlgrie.

BENELMOUFFOK A. 1 , KELLOU D. 1 , HAMROUNE Z. 1 , MAZOUZ A. 1 *

1 INSTITUT PASTEUR D'ALGERIE

*Auteur correspondant : asmamazouz@live.fr

INTRODUCTION :

Le Diabte est une endocrinopathie lie au disfonctionnement de la synthse de linsuline.

Le risque de contracter des infections fongiques, bactriennes et virales par cette catgorie de population
est lev.

Parmi les mycoses retrouves chez ces patients, les onychomycoses figurent au premier plan. En effet,
cette pathologie constitue un motif frquent de consultation en dermatologie de par le ct esthtique et
dautre part du danger encouru.

OBJECTIFS :

Le but de ce travail est de :

Etudier les aspects pidmiologiques, cliniques et diagnostiques des onychomycoses.

Rpertorier les facteurs favorisants. Identifier les agents responsables. Dmontrer lintrt du diagnostic
mycologique.

PATIENTS ET METHODES :

Notre tude est rtrospective. Elle a concern 154 patients diabtiques dont 169 prlvements ont t
raliss sur une priode de 04 ans allant du 1er janvier 2012 au 31 dcembre 2015. Les prlvements ont
t soumis un examen direct et une mise en culture sur milieux usuels et spcifiques.

RESULTAT :

Lorigine fongique a t confirme dans 97 prlvements, avec une tiologie dermatophytique dans 55 cas,
candidosique dans 14 cas, un cas de Trichosporon et 02 cas de moisissures.

CONCLUSION :

A travers notre tude, les onychomycoses occupent une place importante parmi les pathologies retrouves
chez les diabtiques.

Ces onychomycoses dpassent le problme dordre esthtique car elles peuvent tre lorigine de
complications telle que lamputation et le pied du diabtique, do lintrt de sensibiliser les patients quant
limportance de lquilibre glycmique et la ncessit de consulter au moindre signe infectieux.
Caractrisation Microbiologique et Molculaire des Candidoses Vaginales
Rsistantes aux Antifongiques Azoles
BOURA H. 1 * , SAILE R. 2 , ABIDI O. 3 , WAKRIM L. 4 , LMIMOUNI B. 5

1 Laboratoire de Mycologie mdicale, Institut Pasteur du Maroc, 1.Place Louis Pasteur-BP20100-


Casablanca, Maroc
2 Laboratoire de Biologie et Sant, URAC-34.Facult des sciences Ben Msik, Universit Hassan II,
Casablanca , Maroc)
3 Institut suprieur des professions infirmiers et techniques de sant. Filire analyse biologique de
laboratoire, Casablanca, Maroc
4 Laboratoire dImmuno-virologie. Institut Pasteur du Maroc.1. Place Louis Pasteur-BP20100-Casablanca,
Maroc
5 Service de Parasitologie et Mycologie mdicale. Hpital Militaire d'Instruction Mohammed V, BP.1018,
Hay Riad, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : hasna.boura@pasteur.ma

Introduction : Dans la pathologie vulvo-vaginale, les candidoses vaginales sont les tiologies les plus
frquentes. Candida (C.) albicans est lespce la plus implique avec une frquence de 75% contrairement
aux espces non albicans connues antrieurement. Lobjectif de notre tude est de dterminer les espces
du genre Candida responsables des candidoses vaginales chez des femmes Marocaines consultant
lInstitut Pasteur du Maroc, dtudier le profil de la rsistance de C. albicans aux antifongiques et de
dtecter les mutations du gne ERG11 des souches de C. albicans rsistantes aux azols.

Matriels et mthodes : Notre tude a t ralise sur des femmes venues pour des prlvements
vaginaux sans aucun critre de slection. Chaque patiente a bnfici dun prlvement vaginal sur lequel
ont t raliss un examen direct ltat frais et une culture sur milieu Sabouraud-Chloramphnicol avec et
sans Actidione. Les espces isoles des cultures positives ont t identifies par tudes phnotypique et
molculaire. Le deuxime volet de ltude vise valuer la sensibilit in vitro des souches de C. albicans
isoles dans le prsent travail aux antifongiques. Cette sensibilit a t value vis--vis de
lAmphotricine B (AmB), la 5-Fluorocytosine (5-FC), le Fluconazole (FCZ), lItraconazole (ITR) et le
Voriconazole (VCZ). Les isolats cliniques de C. albicans rsistants aux azols ont fait lobjet de la troisime
partie de ltude, par dtermination de leur mcanisme de rsistance, principalement le phnomne de
mutation li au gne ERG11. La rgion codante du gne ERG11 (1587pb) des isolats de C. albicans
rsistants aux azols, spcialement lItraconazole, a t amplifie par PCR et squence.

Rsultats et discussions : Sur les 311 prlvements vulvo-vaginaux, 81 souches de levures ont t isoles,
la prvalence des candidoses vaginales a t donc de 26 % (81/311). Les identifications despce ont
montr que C. albicans est la principale espce responsable des candidoses vaginales, celle-ci a t isole
dans 56 cas soit 69,1%, suivie de C. glabrata (21%), C. tropicalis (6,2%) et C. parapsilosis (3,7%). Les
symptmes cliniques associs taient essentiellement les leucorrhes, le prurit et la sensation de brulures.
La tranche dge la plus touche par les candidoses vaginales se situe entre 22 et 37 ans. Les souches de
C. albicans isoles ont prsent une sensibilit variable aux antifongiques:100% lAmB, 98% la 5-FC,
98% au VCZ, 96 % au FCZ et 89% lITR. L'analyse des squences du gne ERG11 des souches
rsistantes lItraconazole a rvl 4 types de substitutions d'acides amins : K128T (A383C), D116E
(T348A), E266D (A798C) et D153E (T459G). Nous signalons la frquence de la mutation K128T dans cette
tude, et la corrlation entre la rsistance lItraconazole et la prsence de la mutation D116E.

Conclusion : Nos rsultats suggrent que plusieurs mcanismes de rsistance distincts peuvent tre
combins chez un mme isolat clinique, tel que la surexpression du gne ERG11 ; l'efflux des pompes et
les mutations du gne ERG3 doivent tre aussi tudis.

Socit Franaise de
MYCOLOGIE MEDICALE

Communications Affiches

24 (aprs-midi) et 25 mars 2016


Dveloppement d'un modle de dermatophytose sur souris

CAMBIER L. 1 * , HEINEN M. 1 , ANTOINE N. 2 , MIGNON B. 1

1 Service de Mycologie vtrinaire, FARAH-Facult de Mdecine vtrinaire, Universit de Lige


2 Service d'Histologie animale, FARAH-Facult de Mdecine vtrinaire, Universit de Lige

*Auteur correspondant : ludivine.cambier@ulg.ac.be

Les dermatophytoses sont des mycoses cutanes superficielles frquentes provoques par des
champignons filamenteux nomms dermatophytes. La plupart des tudes in vivo menes sur ces maladies
fongiques ont t ralises chez le cobaye. Ce modle animal est frquemment utilis dans ltude des
dermatophytoses, mais prsente plusieurs dsavantages, notamment un cot lev et labsence doutils
gntiques et immunologiques disponibles chez cette espce. Lutilisation de la souris comme modle
exprimental dans ltude des dermatophytoses permettrait de pallier ces inconvnients.

Lobjectif de cette prsente recherche est de dvelopper un modle murin de dermatophytose


reproductible, reprsentatif dune infection naturelle et adapt ltude de la pathogense de cette
maladie.

Trois espces de dermatophytes, Microsporum canis dont lhte naturel est le chat, Arthroderma
benhamiae infod au cobaye et Arthroderma vanbreuseghemii infectant principalement les rongeurs dont
la souris, ont t utilises pour linoculation picutane des animaux. Tout au long de linfection, un suivi
clinique et mycologique a t ralis. Des biopsies ont t prleves diffrents jours cls de linfection
pour les analyses histopathologiques et la mise en vidence par des techniques immunocytochimiques des
principales cellules inflammatoires recrutes au site lsionnel.

Les rsultats obtenus montrent que 100 % des souris inocules par A. vanbreuseghemii et 80 % des souris
inocules par A. benhamiae ont dvelopp des lsions typiques de dermatophytose telles que lapparition
de squames et de crotes suivie dalopcie. Seulement 40 % des souris infectes par M. canis
prsentaient des symptmes de dermatophytose. De plus, les lsions cutanes dveloppes taient trs
discrtes.

Les dermatophytes ont colonis les structures kratinises telles que la couche corne et les poils. Les
principales lsions histopathologiques consistaient en une infiltration cellulaire massive du derme, de
lhyperkratose, de lacanthose, de la spongiose ainsi que la prsence de crotes sro-cellulaires au
niveau de lpiderme. Un recrutement important de polymorphonuclaires neutrophiles, de macrophages
et, dans une moindre mesure, de cellules dendritiques a t observ chez les souris infectes par A.
benhamiae et A. vanbreuseghemii. La prsence de cellules surexprimant des molcules du complexe
majeur dhistocompatibilit de type II a galement t mise en vidence.

En conclusion, cette recherche a permis la mise au point dun modle murin de dermatophytose permettant
ltude de la pathogense de linfection. Les lsions dveloppes par les animaux infects par A.
vanbreuseghemii et A. benhamiae sont comparables des lsions naturelles et gurissent spontanment.
Cependant, ce modle murin, tel quel, nest pas adapt pour une infection M. canis et ncessite quelques
adaptations.
Etude rtrospective nationale sur les infections du systme nerveux central
Candida
CHAUSSADE H. 1,2 * , CHANDENIER J. 3 , BERNARD L. 2 , GRUSON B. 5 , BOUGNOUX M. 6 , JOUVION
G. 7 , LORTHOLARY O. 1, 8, 9 , LANTERNIER F. 1, 8, 9

1 Service de maladies infectieuses et tropicales, Necker, Paris, France


2 Service de mdecine interne et maladies, infectieuses, Tours, France
3 Laboratoire de mycologie et parasitologie, Tours, France
4 Service de neuroradiologie, Tours, France
5 Service dhmatologie, Amiens, France
6 Laboratoire de mycologie, Necker, France
7 Unit dHistopathologie Humaine et Modles Animaux, Institut Pasteur, Paris, France
8 Centre National de Rfrence Mycoses invasives et Antifongique, Institut Pasteur, Paris, France
9 Unite de Mycologie Molculaire, CNRS URA3012, Institut Pasteur Paris, France

*Auteur correspondant : helene.chaussade@aphp.fr

Introduction
Les infections du systme nerveux central (SNC) Candida sont rares mais graves, dcrites chez des
patients immunodprims par des thrapies immunosuppressives, une infection par le VIH, lutilisation de
drogues intraveineuses ou en nonatologie. Lobjectif de notre tude est de dcrire les facteurs de risque,
la prsentation clinique et radiologique, les mthodes diagnostiques, les traitements et le pronostic de ces
infections.
Matriel et mthodes
Etude rtrospective nationale ralise en France entre janvier 2007 et janvier 2016 incluant les patients
gs de plus de 28 jours ayant une infection du CNS Candida prouve ou probable selon la classification
EORTC/MSG. Nous avons collect les lments cliniques et thrapeutiques et ralis une relecture
centralise des imageries crbrales ainsi que des coupes histologiques.
Rsultats
Nous avons inclus 18 patients dont 9 hommes, avec une mdiane dge de 52 ans (6-75). Les facteurs de
risque incluaient la neurochirurgie (n=2), une hmopathie maligne (n=9), une noplasie digestive (n=1),
lutilisation de drogue intraveineuse (n=2), un dficit en CARD9 (n=2) et un diabte (n=2). Huit infections
taient secondaires une fongmie, dont 5 endocardites. En cas dendocardite, 4 patients avaient une
localisation extra crbrale : abcs splniques (n=3), spondylodiscite (n=1) ; les lsions du SNC taient
secondaires des emboles (micro-abcs (n=3) ou hmatomes (n=2)). Les 3 patients avec une fongmie
sans endocardite prsentaient une mningite et/ou des abcs crbraux et pour 2 patients des
localisations extra neurologiques (cutane, hpatosplnique). Les facteurs de risque de candidmie taient
une pathologie hmatologique maligne (n=6), une noplasie digestive (n=1) ou lutilisation de drogue
intraveineuse (n=1). Trois patients suivis pour une pathologie hmatologique maligne avaient une infection
dissmine sans fongmie identifie, avec localisations multiples (cutanes, pulmonaires,
hpatosplniques, rnales, thyrodiennes, sophagiennes, coliques, pancratiques, surrnaliennes ou
myocardiques). Cinq patients avaient une infection du SNC isole: ils prsentaient une mningite, 1 macro-
abcs crbral et 3 mningites associes un abcs crbral. Parmi ces patients, 2 avaient un dficit en
CARD9, 1 tait usager de drogue intraveineuse et 2 taient diabtiques. Deux autres patients
dveloppaient des abcs aprs une neurochirurgie. Candida albicans tait identifi dans 14 cas. Les autres
espces taient Candida kefyr, parapsilosis ou tropicalis.
Au niveau du SNC, Candida tait isol de biopsies crbrales (n=4) et/ou ponctions lombaires (n=6).
Lexamen direct du LCR tait positif dans 2 cas/6. Le dosage de DGlucan dans le LCR tait positif pour
4/5 patients (390 pg/ml en moyenne). Les patients taient traits en premire ligne par L-AMB (11), 5 FC
(8), fluconazole (2), caspofungine (n=3) pour une dure mdiane de 101 jours. Le taux de mortalit tait de
44%.
Conclusion
Moins de la moiti (8/18) des patients avec une infection du SNC Candida avaient une fongmie.
Lhmopathie maligne semble prdisposer aux infections dissmines alors que le diabte et le dficit en
CARD9 aux infections isoles au SNC. Il faut voquer ce diagnostic mme en labsence dhmocultures
positives (10/18 patients). La recherche de DGlucan dans le LCR peut aider au diagnostic.
Dtection dAspergillus dans le liquide bronchiolo-alvolaire pour le diagnostic
de laspergillose invasive : comparaison des performances de 2 mthodes PCR
COMACLE P. 1 , BELAZ S. 1 , ROBERT-GANGNEUX F. 1 , CHEVRIER S. 1 , GANGNEUX J. 1 *

1 CHU de Rennes

*Auteur correspondant : jean-pierre.gangneux@univ-rennes1.fr

La dtection dAspergillus dans le liquide bronchiolo-alvolaire (LBA) est un des critres du diagnostic
probable ou prouv de laspergillose invasive (AI). Paralllement lexamen mycologique (ED et/ou
culture) et la dtection de lantigne galactomannane (GM) identifis comme critres EORTC/MSG du
diagnostic dAI probable (de Pauw 2008), la PCR sur prlvements pulmonaires est devenue un argument
majeur du diagnostic de routine. Plusieurs mthodes damplification ont t publies et lobjectif de ce
travail tait dvaluer les performances de 2 cibles damplification : le gne mitochondrial dA. fumigatus
(AFmito) et lARN ribosomal 28S.

Entre 01/2012 et 10/2015, 324 LBA ont t prospectivement collects et analyss sur le plan mycologique
(ED et culture) et ont bnfici dune dtermination du GM (EIA Platelia assay Biorad, seuil 1,0 si mesure
isole dans le LBA, ou 0,8 si associe une mesure dans le serum > 0,5) et dune PCR AFmito. Puis
rtrospectivement, un test PCR 28S a t effectu sur les ADN extraits disponibles (312/324).

Selon les critres EORTC/MSG modifis de 2008, les patients tests taient classs comme suit : 1 AI
prouve, 47 AI probables et 11 AI possibles. Les autres patients taient considrs comme 11 coloniss, et
256 non infects. Les sensibilits du GM dans le LBA, de la PCR 28S et de la PCR AFmito taient de 58%,
61% et 50%, respectivement. La sensibilit de lexamen mycologique (ED +/- culture) tait de 33%.

La spcificit du GM dans le LBA, des PCR 28S et AFmito PCR et de la culture taient de 94%, 97%, 97%
et 98%, respectivement. Les valeurs predictives ngatives taient de 93%, 95%, 92% et 89%,
respectivement. La concordance entre les 2 PCR tait de 97% (coefficient kappa 0,84), alors quelle tait
de 88% (kappa 0,40) entre la PCR 28S et le GM dans le LBA, et de 88% (kappa 0,43) entre la PCR AFmito
PCR et le GM dans le LBA.

En conclusion, la PCR 28S a prsent la meilleure performance pour la dtection molculaire dAspergillus
dans le LBA comparativement la PCR AFmito. La combinaison de la PCR 28S et de la dtection du GM
dans le LBA permet datteindre une sensibilit de 80% tout en conservant une excellente spcificit (91%).
Communaut microbienne des lignes deaux dunits de soins dentaires et
activit des dsinfectants
COSTA D. 1,5 * , MERCIER A. 1,3 , GRAVOUIL K. 2 , LESOBRE J. 3 , GIRARDOT M. 1,4 , VERDON J. 1 ,
IMBERT C. 1,4

1 Equipe Microbiologie de lEau, Ecologie et Biologie des Interactions, Centre National de la Recherche
Scientifique UMR 7267, Universit de Poitiers, Poitiers, France
2 Laboratoire coopratif ThanaplastSP-EBI-Carbios Bioplastics, Ecologie et Biologie des Interactions,
Centre National de la Recherche Scientifique UMR 7267, Universit de Poitiers, Poitiers, France
3 Universit Blaise Pascal, UMR CNRS 6023, Laboratoire Microorganismes : Gnome et Environnement,
24 avenue des Landais, Aubire, France
4 Facult de Mdecine et de Pharmacie de Poitiers, Poitiers, France

*Auteur correspondant : damien.costa@univ-poitiers.fr

Lors des soins dentaires, les patients et les soignants peuvent tre exposs un risque infectieux li
l'inhalation ou la projection d'eau issue des units de soins dentaires (USD). En effet, leau ncessaire au
refroidissement des porte-instruments rotatifs peut tre contamine par divers microorganismes : bactries,
champignons, amibes libres, virus (Coleman 2014). Les caractristiques des lignes deau des units de
soins dentaires (LUSD) (ratio volume/surface, priodes de stagnation deau, longues tubulures) sont
favorables au dveloppement d'un biofilm. Ainsi, des microorganismes peuvent se dtacher du biofilm
prsent dans les LUSD et tre lorigine dune contamination priodique ou continue de leau de sortie des
USD.

La contamination bactrienne des LUSD reste la mieux dcrite. Afin d'valuer le risque fongique associ,
deux approches ont t dveloppes. Dune part, par pyrosquenage, la communaut fongique des
LUSD a t identifie de manire la plus exhaustive possible. Dautre part, nous avons valu lactivit de
plusieurs traitements dsinfectants des LUSD communment utiliss en Europe (Oxygenal, Calbenium
et Sterispray). Cette tude a t ralise la fois en conditions relles dutilisation des USD mais aussi
par modlisation en laboratoire et dans le contexte des LUSD dun biofilm polymicrobien incluant bactries
(Pseudomonas aeruginosa), champignons (Candida albicans) et amibes libres (Vermamoeba vermiformis).

Les rsultats ont montr une contamination fongique des LUSD non ngligeable y compris dans des USD
pourtant exposes un traitement dsinfectant en continu depuis au moins 8 ans. La communaut
fongique des LUSD apparait influence par plusieurs paramtres parmi lesquels la stagnation de leau, le
protocole de dsinfection utilis ou encore la qualit de leau alimentant lUSD. Parmi les principaux genres
observs, les genres Candida et Mrakia semblent majoritairement retrouvs dans les LUSD.

Lefficacit des agents dsinfectants varie selon les produits mais, dune manire gnrale, l'tude sur
modle de laboratoire montre que C. albicans est plus sensible que P. aeruginosa ou V. vermiformis.

En conclusion, la communaut microbienne contaminant les LUSD investigues est complexe et prsente
en quantit suprieure au seuil recommand par lAmerican dental Association (American Dental
Association 2012). La contamination fongique semble plus facilement maitrisable que la contamination
bactrienne ou amibienne dans ce contexte. Enfin, nos rsultats suggrent qu'un traitement dsinfectant
en continu instaur ds linstallation dune nouvelle USD, associ une qualit satisfaisante de leau
alimentant lUSD et une dsinfection choc complmentaire avant une priode de stagnation prolonge
contribueraient limiter la contamination microbienne.

American Dental Association. (2012). Statement on Dental Unit Waterlines. Available from:
http://www.ada.org/1856.aspx (accessed August 2014).

Coleman, D.C., ODonnell, M.J., Miller, A.S., Boyle M.A. (2014) Minimising microbial contamination in
dental unit water systems and microbial control in dental hospitals., pp. 166-207.
Comparative study of PCR, microscopic examination and culture-based methods
for detection and identification of fungi in onychomycosis.
DA CUNHA K. 1 * , FONTAO L. 1

1 Department of Dermatology and of Laboratory Medicine, Geneva University Hospital, Rue Gabrielle
Perret-Gentil, 4, 1211, GENEVA, CH

*Auteur correspondant : keithcassa.dacunha@hcuge.ch

This work was supported by a grant from the Swiss Government Excellence Scholarships for Foreign
Students to da Cunha KC

Onychomycosis is the most common disease of the nails and represents about a half of all nail
abnormalities worldwide. It affects, in particular, males, the elderly, diabetics, and immune-compromised
individuals, with toenails being affected to a greater extent than fingernails. The diagnosis of
onychomycosis cannot be done only based on clinical presentation, due to the similarity with other
onychopathies. Traditionally, fungi identification is based on direct microscopic examination of clinical
samples as well as microscopic and macroscopic examination of cultures, and when needed in metabolism
tests. But, it is time-consuming, laborious, costly, and requires a certain level of morphological and
taxonomical expertise. Furthermore in the case of onychomycosis the culture sensitivity is only about 50%.
Moreover, the identification of cultured isolates is sometime challenging especially when strains do not
produce typical characteristics or when Non Dermatophytes Molds (NDM) are the causative agent. With the
growing number of organisms recognized as possible fungal pathogens in nails, it is becoming important to
ensure the accurate identification of the causative organism. This will help clinicians in selecting the most
appropriate therapy. Indeed antifungal agents, such as terbinafine, itraconazole, and fluconazole have a
broad spectrum with activity against fungi but some NDM may be poorly responsive or unresponsive to
systemic treatments.

We have introduced the identification based on DNA extraction directly from human nail samples. We use
PCR amplification of DNA coding nuclear ribosomal internal transcribed spacer (ITS). The clinical specimen
consisted of 80 nails samples with 60 being positives under microscope using blankophor and 20 were
negative. As expected PCR allows detection of fungi in all nail specimen that were positive by microscopy
and culture. Moreover, PCR also allows detection of fungal DNA in nails with negative culture but with
positive microscopy. In some sample PCR lead to the amplification of more than one amplicon which
suggest mixed infection. Sequencing of purified amplicons permitted identification of the implcatited fungi in
the vast mojority of case.

The results of the present study indicated that PCR is highly advantageous as a diagnostic tool for
detection and identification of fungi on direct application to nail specimens. Because during the last decade,
cost for DNA sequencing have been dramatically reduced and given the poor sensitivity of culture in
onychomycosis, it is becoming reasonable to use PCR/sequencing as a first line method for the diagnosis
of onychomycose. This will provide a quick identification of the implicated fungi and will help clinicians in
making rational and effective therapeutic decisions. This will be a direct benefit to patients with
dermatophytosis.
Evaluation in vitro de lactivit anticandidosique des huiles essentielles de
cannelle, de girofle et darbre a th
DAHRAOUI S. 1,2,3 * , EL ABBASSI S. 1,2 , KABBAGE S. 1,2 , HAJJAJI C. 1,2 , IKEN M. 1,2 , LMIMOUNI B. 1,2,3

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Equipe de recherche en pathologie parasitaire, tropicale et fongique

*Auteur correspondant : souhail.dahraoui@gmail.com

INTRODUCTION : Lobjectif de notre travail est de tester in vitro lactivit antifongique de 3 huiles
essentielles [HE] (lHE darbre th, de cannelle et de clou de girofle) lgard de certaines levures du
genre Candida : Candida albicans (C.a), Candida krusei (C.k), Candida glabrata (C.g), Candida tropicalis
(C.t).

MATERIELS ET METHODES : Il sagit dune tude stendant sur une dure de cinq mois, ralise au sein
du Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie lhpital militaire dinstruction Mohammed V de Rabat.
Des tests antifongiques in vitro de trois HE extraites par entrainement la vapeur deau, ont t raliss
par 2 mthodes. La mthode des puits dans la glose : laide dun emporte-pice strile on a creus 4
puits de 6mm par boite de culture (en utilisant la technique des tracs 4 compartiments), dans lesquels
nous avons dispos 4 charges diffrentes (8 l, 16 l, 32 l, 64 l) pour chacune des souches. Avec la
mthode de dilution en glose, les HE sont incorpores chacune dans le milieu de culture en cours de
refroidissement afin dobtenir des dilutions allant de 64l/ml 0,062l/ml dans un volume final de 20ml
dans les boites de ptri. Nous avons utilis le milieu Sabouraud-chloramphnicol 2% de Tween 80 pour
la recherche de lactivit antifongique sur milieu solide. Quel que soit la souche de Candida teste, la
prparation des suspensions est ajuste une valeur comprise entre 1,5 et 2 106 levures/ml.

RESULTATS : Selon les diamtres dinhibition (en mm) obtenus par la mthode des puits, on constate un
effet inhibiteur pour les 3 HE utilises la plus petite charge (8l) sur les 4 espces du genre Candida. Ce
rsultat a t confirm par laugmentation du pouvoir inhibiteur des HE dune manire proportionnelle
lorsque nous avons augment la charge des puits 16 l, 32 l puis 64 l. La concentration minimale de
lHE qui inhibe totalement la croissance des souches de Candida avec la mthode de dilution en glose,
tait de lordre de 8l/ml pour lHE darbre th, 2 l/ml pour lHE du clou de girofle et 0,5 ml pour lHE de
cannelle.

DISCUSSION : LHE de cannelle a montr lefficacit la plus leve par rapport aux autres HE tudies par
les deux mthodes utilises. Les rsultats obtenus dans cette tude corroborent ceux trouvs dans de
nombreux travaux. En effet, leffet antifongique des HE est le sujet de plusieurs tudes scientifiques in vitro
; Cependant les mthodes utilises pour valuer cette activit sont nombreuses et donnent parfois des
rsultats diffrents.

CONCLUSION : Les 3 HE testes ont prsent un fort pouvoir antifongique et une activit inhibitrice
significative sur la croissance des levures testes, et pourraient donc constituer une solution alternative
intressante dans les traitements antifongiques.
Candidurie Candida lusitaniae : propos de deux observations
DAHRAOUI S. 1,2 * , KABBAGE S. 1,2 , EL ABBASSI S. 1,2 , IKEN M. 1,2 , BAITE A. 2,3 , ABOUELALAA K. 2,4 ,
HAIMEUR C. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de ranimation mdicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat, Maroc
4 Service de ranimation chirurgicale, Hpital Militaire dinstruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : souhail.dahraoui@gmail.com

INTRODUCTION : Candida lusitaniae rcemment t identifi comme un agent pathogne nosocomial


mergent, particulirement chez les sujets immunodprims, quand il est isol il est lorigine dune
infection grave et souvent mortelle. Nous rapportons deux observations de candidurie Candida lusitaniae
diagnostiques au laboratoire de parasitologie-mycologie de lHMIMV de Rabat.

OBSERVATION 1 : Mr A.M g de 67 ans, admis en ranimation pour prise en charge dun tat de choc
cardiognique sur un syndrome coronarien ST positif. Dans ces antcdents mdicaux, on note une
dysglobulinmie monoclonale, un diabte sous antidiabtique oraux et un tabagisme chronique sevr il y a
19 ans. Au cours de son hospitalisation le patient a prsent un tat de choc septique point de dpart
urinaire. Lexamen cytobactriologique des urines a objectiv la prsence de levures lexamen
microscopique. Ltude des caractres biochimiques des colonies de levures par la galerie didentification
API 20C a permis lidentification de Candida lusitaniae, qui a t confirm sur un nouveau prlvement. Le
patient est dcd avant le dbut du traitement.

OBSERVATION 2 : Mme E.Z ge de 61 ans, admise en ranimation pour trouble de conscience sur
acidoctose diabtique svre. Dans ses antcdents mdicaux on note un diabte type 2 voluant depuis
10 ans sous insulinothrapie. A son admission, la patiente prsentait un syndrome fbrile associ des
signes urinaires : brlures mictionnelles, pollakiurie et polyurie, avec une ruption cutane rythmato-
papuleuse au niveau des membres inferieurs. Malgr une antibiothrapie large spectre, aucune
amlioration clinique na t observe, ce qui a justifi la ralisation dun bilan mycologique. En effet,
lexamen cytobactriologique des urines a permis de mettre en vidence la prsence de levures lexamen
direct et lisolement de nombreuses colonies de Candida lusitaniae. La patiente a bien volu sous
traitement antifongique spcifique.

CONCLUSION : Candida lusitaniae est une levure mergente responsable, chez les patients risque,
dinfections nosocomiales systmiques qui restent rares mais de pronostic fcheux. Ces observations
soulignent la ralit de la circulation de Candida lusitaniae chez les patients hospitaliss lHMIMV de
Rabat.
Aspergillose dissemine chez un patient Leucmique atteint de raction du
Greffon contre l'hte : Intert diagnostique des antignes fongiques
DARAGON M. 1 , PLUCHART C. 2 , HUGUENIN A. 1 , POCHON C. 3 , VILLENA I. 1 , BOUGNOUX M. 4 ,
GORDES S. 2 , TOUBAS D. 1 *

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Maison-Blanche, Reims, France


2 Service dOnco-Hmatologie Pdiatrique, Hpital des Enfants, CHU de Reims, Reims, France
3 Service dOnco-Hmatologie Pdiatrique, Hpital Brabois, Vandoeuvre-ls-Nancy, France
4 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Necker Enfants Malades, Paris, France

*Auteur correspondant : dtoubas@chu-reims.fr

Les Infections Fongiques Invasives (IFI) sont une proccupation majeure dans les services dHmatologie.
Elles peuvent tre dorigine nosocomiale et sont de mauvais pronostic. Le diagnostic est difficile et repose
sur un faisceau darguments cliniques, radiologiques et biologiques.

Nous rapportons un cas daspergillose invasive probable survenue chez un patient de 15 ans atteint de
leucmie aigu lymphoblastique allogreff de moelle osseuse en 2014 pour rechute et suivi pour une
raction du greffon contre lhte (GVH) chronique digestive svre.

Le patient est admis le 28 aout 2015 pour pousse de GVH et septicmie Pseudomonas aeruginosa. Son
traitement comportait une corticothrapie forte dose et du tacrolimus ainsi quune antibiothrapie par
ceftazidime et amiklin. A lentre, le patient est en aplasie et un traitement prophylactique par caspofungine
est prescrit en relai du posaconazole en raison dune impossibilit de prise orale. Au cours de
lhospitalisation, il prsente une septicmie Staphylococcus epidermidis mi-novembre ainsi quune
ractivation Cytomegalovirus.

Devant la survenue de convulsions le 13 dcembre, une IRM crbrale est ralise, mettant en vidence
de multiples lsions cortico-sous-corticales avec remaniements hmorragiques voquant des embols
septiques. Un scanner thoraco-abdomino-pelvien retrouve plusieurs opacits nodulaires pulmonaires et
des hypodensits nodulaires splniques. Lantigne aspergillaire galactomannane et le taux de -D-
glucane sriques du 15/12/2015 sont trs fortement positifs (respectivement index suprieur 6 et taux
suprieur 5000 pg/mL). Dans le LCR prlev le 15 dcembre, les antignes fongiques sont galement
trs fortement positifs (galactomannane suprieur 6 et -D-glucane 402 pg/mL) alors que la culture
mycologique est ngative. La recherche dADN dAspergillus fumigatus et de Mucorales dans le LCR est
ngative. Le diagnostic daspergillose crbrale est alors discut. Un traitement antifongique par
amphotricine B liposomale (Ambisome) la posologie de 3 mg/kg/j est instaur le 15 dcembre puis
remplac le 20 dcembre en raison dune toxicit rnale par du voriconazole (Vfend) la posologie de 8
mg/kg/12h en entretien. La posologie des traitements immunosuppresseurs est diminue. Malgr le
traitement, les lsions crbrales, pulmonaires et splniques se majorent. La recherche dADN
dAspergillus fumigatus et de Mucorales dans le srum du 1er Janvier 2016 est ngative. Les prlvements
mycologiques respiratoires (LBA ou biopsie pulmonaire) en vue de documenter linfection nont pu tre
raliss en raison de la dgradation rapide de ltat clinique du patient. Il dcde le 19 janvier 2016 dans
un tableau de diarrhe trs svre lie la GVH digestive.

Ce cas illustre les difficults diagnostiques et thrapeutiques des IFI chez les patients atteints de GVH.
Celle-ci constitue un facteur majeur de risque aspergillaire et compromet le pronostic vital, en raison soit de
lvolutivit de linfection fongique soit dune aggravation de la GHV en cas darrt des
immunosuppresseurs. Le dosage du -D-glucane dans le LCR peut contribuer au diagnostic dune
localisation crbrale dune IFI, le champignon tant rarement isol dans cette localisation. Enfin, la PCR
Aspergillus fumigatus peut manquer de sensibilit. La possibilit dune infection par une espce autre que
fumigatus doit galement tre discute. Il est donc essentiel dassocier la recherche des marqueurs dIFI.
Candidoses Urinaires : Epidmiologie, Facteurs de risque et difficults
d'interprtation
DHRAIEF S. 1,2 , TRABELSI S. 1,2 * , SELLEM M. 1 , ALOUI D. 1,2 , ISMAIL S. 1 , KHALED S. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Charles Nicolle, Tunis, Tunisie


2 Facult de mdecine de Tunis, Universit Tunis El Manar, Tunisie

*Auteur correspondant : trabelsi.sonia@gmail.com

Introduction : Les candiduries sont en recrudescence ces dernires annes en particulier en milieu
hospitalier. La rsistance des levures du genre Candida (C.) aux antifongiques est de plus en plus
observe. La distinction entre colonisation et infection urinaire (IU) est parfois difficile. En effet, malgr des
dcennies de publication, aucun consensus ne sest dgag sur la signification diagnostique et pronostique
des candiduries. Lobjectif de notre travail tait didentifier les caractristiques pidmiologiques, les
facteurs de risque (FR) ainsi que la sensibilit aux antifongiques des levures du genre Candida incrimines
dans les IU.

Matriel et mthodes : Notre tude tait transversale mene sur une priode de six ans (2010-2015)
portant sur des patients hospitaliss prsentant une candidurie. Le diagnostic mycologique reposait sur
lexamen direct des urines et leur culture sur milieu Sabouraud, incube 27C en arobiose. Etait
considre une numration faible de moins de 102 units formant colonies (UFC), modre entre 103 et
104 UFC/ml et leve suprieure 104 UFC/ml. La sensibilit aux antifongiques a t ralise sur les
souches donnant une numration modre leve ou lorsque les souches sont risoles sur un
prlvement de contrle. Pour cela, deux mthodes ont t utilises selon la disponibilit des tests : le test
colorimtrique par la mthode de dilution en bouillon (Fungitest) et la mthode de microdilution en milieu
liquide avec dtermination de la CMI (Sensititre Yeastone).

Rsultats : Les levures du genre Candida ont t identifies dans 67 cas sur 138, soit dans 48.5% des cas.
Lge moyen des patients tait de 47,3 ans avec des extrmes allant de 1 mois 87 ans. Une
prdominance fminine a t note (sex-ratio de 0,45). Plus de 50% des patients taient hospitaliss en
ranimation (30%) ou en nphrologie (23,3%). Les FR taient essentiellement les ges extrmes (22,5%),
le diabte (20%), la transplantation rnale (20%) et lantibiothrapie large spectre (17,5%). Candida
albicans tait la levure la plus frquemment isole (46,3%), suivi de C. glabrata (31,3%) et de C. tropicalis
(10,4%). La numration des levures tait faible dans 13 cas (19,4%) ; un antifongigramme a t ralis
pour un de ces cas car il sagissait dun contrle dun examen mycologique des urines isolant pour la
deuxime fois C. albicans. Dans 54 cas, la numration tait modre leve, mais un antifongigramme
na pu tre ralis que dans 45 cas. Une sensibilit intermdiaire absente vis--vis du fluconazole tait
note dans 7 cas dont 1 seul C. krusei, celle vis--vis de lamphotricine B et la 5-fluorocytosine tait de
4,4% respectivement. Vis--vis de litraconazole, le miconazole et le ktoconazole, la sensibilit tait
intermdiaire absente dans respectivement 56,6%, 31% et 19,5% des cas. Toutes les souches testes (6
souches) la caspofungine taient sensibles.
Sensibilit de levures aux antifongiques : valuation des souches isoles de
prlvements profonds
DHRAIEF S. 1,2 , TRABELSI S. 1,2 * , SELLEM M. 1 , BOUCHEKOUA M. 1,2 , BOUHLEL S. 1,2 , ALOUI D. 1,2 ,
KHALED S. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital Charles Nicolle, Tunis, Tunisie


2 Facult de mdecine de Tunis, Universit Tunis El Manar, Tunisie

*Auteur correspondant : trabelsi.sonia@gmail.com

Introduction : Les infections fongiques profondes, surtout levures, sont greves dune morbi- mortalit
leve surtout en milieu de ranimation. Lmergence despces de Candida (C.) non albicans et
lutilisation empirique des antifongiques ont contribu la slection de souches prsentant des rsistances
aux antifongiques, do la ncessit de la ralisation de lantifongigramme, en cas de mycose profonde. Le
but de ce travail a t dvaluer la sensibilit des levures, isoles de prlvements profonds, aux
antifongiques.

Mthodes : Notre tude a t transversale et mene sur une priode de six ans (2010-2015) au
Laboratoire de Mycologie de lHpital Charles Nicolle de Tunis. Elle a port sur les souches de levures
isoles partir de prlvements profonds.

La sensibilit aux antifongiques a t value par lune des deux mthodes, selon la disponibilit des tests
:

La mthode de dilution en bouillon (Fungitest) (Fungitest), testant la 5-fluorocytosine, lamphotricine B,


le miconazole, le ktoconazole, litraconazole et le fluconazole, a t utilise pour 69 souches.

La mthode de microdilution en milieu liquide avec dtermination de la CMI (Sensititre Yeastone), testant
la 5-fluorocytosine, lamphotricine B, le ktoconazole, litraconazole, le fluconazole, la caspofungine, le
voriconazole et le posaconazole, a t utilise pour 26 souches.

Rsultats : Durant la priode dtude, 95 souches de levures ont t isoles chez des patients hospitaliss,
essentiellement dans les services de ranimation mdicale (31,8%), de chirurgie digestive (16,5%) et de
lunit de greffe rnale (14,1%). Il sagissait essentiellement de prlvements durines (48,4%) et
dhmocultures (33,7%). Candida albicans tait la levure la plus frquemment isole (48,4%), suivi de C.
glabrata (18,9%) et de C. tropicalis (12,6%). Les autres levures taient reprsentes par Trichosporon
asahii (4 cas), Geotrichum capitatum (1 cas) et Cryptococcus neoformans (1 cas). Concernant le
fluconazole, toutes les souches de C. tropicalis et C. parapsilosis taient sensibles. Par contre, une
rsistance cet antifongique a t retrouve pour C. glabrata et C. albicans respectivement dans 17,6% et
13% des cas. Pour lamphotricine B et la 5-Fluorocytosine, aucune rsistance na t note. Un seul cas
de rsistance au miconazole a t not correspondant une souche de C. glabrata. Par contre, des
sensibilits intermdiaires cet antifongique ont t retrouves pour toutes les souches de C. tropicalis et
C. parapsilosis. Concernant la caspofungine, aucune rsistance na t retrouve mise part une seule
souche de C. tropicalis et de Cryptococcus neoformans. Pour litraconazole, les rsistances ont t plus
leves par rapport aux autres antifongiques (observes pour 11 souches).

Conclusion : Le but de la ralisation des antifongigrammes au cours des infections fongiques profondes est
double : adapter le traitement et surveiller lmergence de souches rsistantes.
Recherche de seuils dinterprtation de la PCR Pneumocystis sur LBA chez les
patients VIH(-), base sur la mise en vidence de facteurs de risque discriminant
la pneumocystose classique des formes pauci ou asymptomatiques

DUBOUIL B. 1,3 , LE BOUAR M. 1,2,3 , MENARD S. 1,2 , FILLAUX J. 1 , VALENTIN A. 1 , CHAUVIN P. 1 ,


CASSAING S. 1 , BERRY A. 1,2 , IRIART X. 1,2 *

1 Service de Parasitologie-Mycologie, CHU de Toulouse, France


2 INSERM U1043, CNRS UMR5282 - CPTP, UPS Toulouse, France
3 Co-premiers auteurs

*Auteur correspondant : iriart.x@chu-toulouse.fr

Pneumocystis jirovecii (Pj) est un champignon responsable de la pneumocystose pulmonaire (PCP),


pneumopathie interstitielle touchant frquemment les patients immunodprims. La PCR spcifique de Pj a
permis une augmentation considrable de la sensibilit diagnostique en comparaison avec les techniques
de microscopie mais a aussi fait merger le concept de colonisation ou de formes pauci-symptomatiques.
La distinction entre ces diffrentes formes dinfection Pj est difficile, et influence de manire importante la
mise sous traitement. La PCR quantitative peut permettre dorienter vers lune de ces entits en se basant
sur la charge fongique mais il est ncessaire de valider prcisment des seuils quantitatifs discriminants.
Dans cette dmarche, le principal cueil est de constituer les 2 groupes de rfrence PCP et pauci ou
asymptomatique . Si lon se base sur la mthode microscopique de rfrence (Immuno-fluorescence)
pour dfinir ces groupes, on se heurte au manque de sensibilit de cette technique par rapport la PCR,
qui entraine le classement inadquat des patients atteints de pneumocystose mais prsentant une faible
charge fongique. Dautre part, lorsque lon se base sur les critres cliniques classiquement prsents au
cours de la PCP pour constituer les groupes PCP et pauci ou asymptomatique , on peut observer
des biais de slection, la clinique et le contexte vocateurs tant eux-mmes des motivations la
recherche de Pj.

A la diffrence des deux approches prcdentes, la mthodologie dveloppe ici est base sur une tude
de facteurs de risque sans priori, et permet donc de lever ces cueils.

322 immunodprims VIH(-), avec un LBA positif en PCR Pj [1] ont t inclus. Ils prsentaient une
distribution homogne des charges fongiques, quel que soit le type dimmunodpression identifi,
permettant une analyse commune de ces patients.

Afin de constituer 2 groupes de comparaison dont le statut PCP ou pauci ou asymptomatique tait
trs probable, les patients prsentant des charges fongiques extrmes (Ct <25me ou >75me percentile),
ont t slectionns puis compars sans priori sur 85 critres diffrents. 9 facteurs de risque cliniques
(dyspne, LLC ou LNH, greffe cardiaque), thrapeutiques (corticodes, ciclosporine, rituximab), biologiques
(LDH, lymphocytes totaux) et radiologiques (syndrome interstitiel bilatral), ont t identifis, permettant de
diffrencier les patients pauci ou asymptomatiques des patients atteints de PCP. Un score prenant en
compte le poids relatif de chacun de ces facteurs de risque a t calcul, permettant de classer dans des
groupes dfinitifs pauci ou asymptomatique ou PCP , des patients dont le statut navait pu tre
dtermin prcdemment. A partir de ces groupes dfinitifs, un seuil de Ct de PCR 27,5 a t tabli
(spcificit : 98% ; VPP : 97%), permettant de classer les patients en PCP probable ou PCP possible
, uniquement grce au rsultat de la PCR diagnostique.

En conclusion, il est possible dtablir des seuils de PCR en limitant les biais lis ltablissement des
groupes PCP et pauci ou asymptomatique , grce une dmarche base sur la recherche de
facteurs de risque sans priori pour discriminer les 2 entits.

1. Fillaux J et al. Accuracy of a routine real-time PCR assay for the diagnosis of Pneumocystis jirovecii
pneumonia. J Microbiol Methods. 2008;75(2):258-61.
Evaluation prospective d'un nouveau kit ELISA pour la dtection des IgG anti-
Aspergillus dans le diagnostic des aspergilloses pulmonaires chroniques et
allergiques

DUMOLLARD C. 1 , BAILLY S. 1,2,3 , PERRIOT S. 1 , BRENIER-PINCHART M. 1,4 , SAINT-RAYMOND C. 5 ,


CAMARA B. 5 , GANGNEUX J. 6 , PERSAT F. 7 , VALOT S. 8 , GRENOUILLET F. 9 , PELLOUX H. 1 ,
PINEL C. 1 , CORNET M. 1,10

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU Grenoble Alpes


2 U823, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France
3 UMR 1137-IAME Team 5-DeSCID, Inserm/Paris Diderot, Sorbonne Paris Cit University, Paris, France.
4 UMR 5163 CNRS, Universit Grenoble Alpes, Saint Martin d'Hres, France.
5 Clinique Universitaire de Pneumologie, CHU Grenoble, Grenoble, France
6 Universit Joseph Fourier, Grenoble, France.
7 Mycologie, Hpital Universitaire de Rennes, Rennes, France.
8 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital de la Croix-Rousse, Hospices Civils de Lyon, Lyon,
France.
9 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hpital du Bocage, Dijon, France
10 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, CHU de Besanon, Besanon, France.
11 Laboratoire TIMC-IMAG-TheREx, UMR 5525 CNRS-UJF, Universit Grenoble Alpes, Grenoble, France

*Auteur correspondant : carine.dumollard@gmail.com

Les IgG anti-Aspergillus sont d'importants biomarqueurs pour le diagnostic des aspergilloses pulmonaires
chroniques (APC) et des aspergilloses broncho-pulmonaires allergiques (ABPA). Cette tude compare un
nouveau kit ELISA (Bordier affinity products) aux kits Bio-Rad et Virion\Serion. Dans cette tude
prospective et multicentrique, 436 srums provenant de 352 patients, incluant 136 APC, 94 ABPA et 206
contrles, ont t tests. Les sensibilits taient de 97%, 91.7%, et 86.1%, et les spcificits de 90.3%,
91.3%, and 81.5% pour les kits Bordier, Bio-Rad and Virion\Serion, respectivement. Une analyse de
McNemar confirme la sensibilit suprieure de Bordier par rapport Bio-Rad (p<0.01) et Serion (p=0.04).
Les ELISA Bordier et Bio-Rad ont montr des spcificits comparables (p=0.8), qui sont suprieures celle
de Serion (p=0.02 pour chaque test). Les aires sous les courbes ROC montrent galement la supriorit du
kit Bordier par rapport aux deux autres kits Bio-Rad et Virion\Serion kits (0.977, 0.951 et 0.897,
respectivement; p<0.01 pour chaque comparaison). Dans une analyse secondaire incluant 279 srums et
comparant Bordier et Bio-Rad l'immunolectrophorse (IEP) maison, la sensibilit de Bordier reste
suprieure celles de Bio-Rad et de l'IEP (97.7%, 93.2% et 89.1% respectivement, p=0.03 et p<0.01). La
spcificit de lIEP (84.7%) tait toutefois sensiblement suprieure celle du kit Bordier (71.2 %); p=0.10.

L'association de recombinants avec des antignes somatiques et mtaboliques dans un mme ELISA
(Bordier) aboutit un excellent compromis entre sensibilit et spcificit, conduisant un test performant
pour le diagnostic des aspergilloses chroniques et allergiques.
Mylite Cladophialophora bantiana
DUPONT D. 1,2 * , NOVE JOSSERAND R. 3 , REYNAUD Q. 3 , PERSAT F. 1 , WALLON M. 1,2 , DURIEU I. 3

1 Institut de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hospices Civils de Lyon, Lyon


2 Equipe WAKING Physiologie intgre du systme dveil, Centre de Recherche en Neurosciences de
Lyon Inserm U1028, CNRS UMR5292, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon
3 Service de Mdecine Interne et Pathologie Vasculaire, Centre de Rfrence National pour la
Mucoviscidose, Hpital Lyon Sud, Hospices Civils de Lyon, Pierre-Bnite

*Auteur correspondant : damien.dupont@chu-lyon.fr

Nous rapportons le cas dune mylite Cladophialophora bantiana chez une patiente transplante
pulmonaire.

Il sagit dune patiente de 35 ans, suivie aux Hospices Civils de Lyon pour une mucoviscidose, diabtique
insulino-dpendante, greffe bipulmonaire en 2003 avec insuffisance rnale post-tranplantation. Ses
antcdents infectieux rcents comportent un pisode de grippe svre en mars 2013 avec complications
pulmonaires (notamment infection Absidia sp., trait par Ambisome), rnales et hpatiques dvolution
favorable aprs 4 mois de Ranimation.

Une paraplgie progressivement complte apparat en automne 2013, avec dcouverte lIRM dune
lsion expansive situe en regard de T10, T11, T12 mesure 40 x 10 mm et dune lsion crbelleuse
gauche. Finalement une biopsie mdullaire sur la lsion mdullaire identifie rvlera de trs nombreux
mycliums septs lexamen direct. Les cultures sur milieu de Sabouraud montraient des colonies noires
floconeuses. Laspect microscopique tait compatible avec Cladophialophora sp, lespce bantiana tant
suspecte du fait de la localisation. Le squenage confirmait lidentification de Cladophialophora bantiana.

Dans ce contexte dimmunodpression le traitement antifongique instaur reposait sur une triple
association dAncotil, dAmbisome et de Noxafil longue dure. Malgr une diminution de la lsion
lIRM, aucune rcupration ntait observe. La bonne tolrance au traitement et la stabilit de ltat de la
patiente permit nanmoins une hospitalisation domicile. La patiente dcdera un an plus tard des suites
dun accident vasculaire crbral.

Cladophialophora bantiana est classiquement associ des abcs crbraux mais nous rapportons ici,
notre connaissance le deuxime cas de mylite. Prs de 80% des cas surviennent chez des patients
immunocomptents, majoritairement en zones subtropicales. La patiente ne prsentait aucune notion de
voyage, suggrant une acquisition en France. Avec un taux de survie infrieur 30%, les
Phaeohyphomycoses C. bantiana sont mortelles, le cas rapport ici est exceptionnel de par la survie
prolonge de la patiente sous triple association dantifongiques mais aussi de par sa localisation.
Epidmiologie des sinusites fongiques au CHU de Lyon entre 2014 et 2015
DUPONT D. 1,2 * , BLANC M. 1 , WALLON M. 1,2

1 Institut de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hospices Civils de Lyon, Lyon


2 Equipe WAKING Physiologie intgre du systme dveil, Centre de Recherche en Neurosciences de
Lyon Inserm U1028, CNRS UMR5292, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon

*Auteur correspondant : damien.dupont@chu-lyon.fr

Les sinusites sont des pathologies frquemment rencontres dans la population gnrale sous des
prsentations cliniques varies. Elles correspondent une inflammation des muqueuses recouvrant les
sinus. Evoluant sur un mode aigu ou chronique, elles sont souvent accompagnes de congestion nasale et
de douleurs associes des coulements muco-purulents et un dme. Le signe radiologique
classiquement observ est un comblement des sinus. Plus de quatre-vingt pourcents des sinusites sont
chroniques, ltiologie fongique tant majoritaire.

Nous nous sommes intresss lpidmiologie des sinusites fongiques aux Hospices Civils de Lyon entre
janvier 2014 et dcembre 2015. Pour cela, nous avons combin les techniques de mycologie classique
(examen direct avec coloration de Gomori-Grocott, culture sur Sabouraud pendant 7 jours) et la PCR
panfongique (cible domaine D1/D2 de lADN 28S), en partant du postulat que dans les formes invasives,
une identification prcise du pathogne tait ncessaire afin dadapter le traitement antifongique et que la
culture classique sur Sabouraud tait ngative dans plus de 50% des cas. Les objectifs de ltude taient
donc dinvestiguer lpidmiologie actuelle des sinusites fongiques aux Hospices Civils de Lyon mais aussi
de comparer les diffrents outils diagnostiques notre disposition en terme de sensibilit et de dlai de
rendu dune identification lespce.

Au total, 102 prlvements ont t raliss avant tout traitement, correspondant 63 patients avec
suspicion clinique de sinusite. Les techniques de mycologie classique ont t positives dans 39.2%
(40/102) des cas pour la microscopie et dans 16.7% (17/102) pour la culture. La recherche par PCR tait
plus sensible, avec une positivit retrouve dans 44.1% des cas (45/102). Lexamen direct est la technique
assurant un rendu dans les dlais les plus courts (<24H). Le dlai moyen dune identification par culture
conventionnel est identique celui dune identification par PCR squenage (3.6 jours). Il est noter que
parmi les 17 cultures positives, une culture tait discordante avec la PCR et six ne permettaient pas
lidentification du champignon. Lensemble des rsultats nous a donc permis didentifier 30 patients ayant
prsent une sinusite fongique prouve microbiologiquement et dont le pathogne a pu tre identifi.
Aspergillus fumigatus reste le pathogne principal (n=11 ; 36.7%), suivi par Aspergillus flavus (n=8 ;
26.7%), Schizophyllum commune (n=4 ; 13.3%), Aspergillus autres (n=2 ; 6.7%), Rhizopus (n=1 ; 3.3%),
Paecilomyces (n=1 ; 3.3%), Cladosporium (n=1 ; 3.3%), Metarhizium anisopliae (n=1 ; 3.3%) et
Pseudallescheria sp (n=1 ; 3.3%).

Il ressort de cette tude que Schizophyllum commune est considrer comme un pathogne mergent
dans le cadre des sinusites fongiques, alors que jusqu rcemment, il tait confin quelques descriptions
de cas cliniques.

Cette tude a galement confirm la simplicit et la rapidit de lexamen direct pour confirmer la prsence
de champignons. De plus, la PCR offre lavantage par rapport la culture didentifier un plus grand nombre
de pathogne de faon prcise et sans perte de temps, ce qui pourrait justifier son utilisation en routine.
Sinusite fongique due Metarhizium anisopliae chez un transplant
monopulmonaire
DUPONT D. 1,2 * , ROUX S. 3 , BENAM G. 4 , SENECHAL A. 5 , WALLON M. 1,2

1 Institut de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, Hospices Civils de Lyon, Lyon


2 Equipe WAKING Physiologie intgre du systme dveil, Centre de Recherche en Neurosciences de
Lyon Inserm U1028, CNRS UMR5292, Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon
3 Dpartement de Maladies Infectieuses et Tropicales, Hospices Civils de Lyon, Lyon
4 Service d'Anatomie et Cytologie Pathologique, Hospices Civils de Lyon, Lyon
5 Service de Pneumologie, Hpital Louis Pradel, Hospices Civils de Lyon, Lyon

*Auteur correspondant : damien.dupont@chu-lyon.fr

Nous rapportons ici un nouveau cas de sinusite fongique due un pathogne des insectes, Metarhizium
anisopliae. Principalement connu comme pathogne pour son utilisation dans le contrle des populations
dinsectes, il est nanmoins rencontr en pathologie humaine. Les rares cas dcrits dans la littrature se
confinent quelques descriptions de kratites ou de sinusites chez les patients immunocomptents.

Notre patient a donc bnfici dune transplantation monopulmonaire droite pour emphysme en fvrier
2013. Dans le cadre de son suivi, et devant un tableau de pneumopathie basale droite avec VEMS
diminu, le patient est mis sous Augmentin. Malgr une amlioration clinique un scanner thoracique et
sinusien va mettre en vidence un comblement du sinus frontal droit et ethmodal droit. Les examens
directs (coloration de Grocott) de plusieurs prlvements sinusiens rvlaient de nombreux myclium
septs. Les cultures mettront en vidence aprs plusieurs jours des colonies vert olive, identifies dans un
deuxime temps par PCR comme une souche de Metarhizium anisopliae. Ceci a ensuite t confirm par
PCR panfungique ralise directement sur la biopsie de sinus. Lexamen anatomo-pathologique de cette
dernire objectivait un aspect de sinusite aigue ulcre inflammatoire. Ce patient immunodprim, et
initialement suspect de mucormycose a t trait avec succs par une association damphotricine B
liposomale (5mg/kg/j) puis relais J5 par du posaconazole doses standards, et a bnfici dune
diminution de posologie de ses immunosuppresseurs. Il a ensuite prsent une bonne volution sous
traitement avec nette amlioration des lsions.

Ceci est donc, notre connaissance le deuxime cas dinfection humaine Metarhizium anisopliae en
Europe et le premier chez un patient immunodprim. Il tmoigne de lefficacit dune prise en charge
associant exrse chirurgicale et traitement antifongique systmique.
Antignes aspergillaires chez les patients sous chimiothrapie pour leucmie
mylode aigue ou allogreffe de cellules souches hmatopotiques : rle dans la
prdiction daspergillose invasive et dans la modification de la stratgie
thrapeutique
DUPONT D. 1 , TRAN V. 2 , GARDES S. 3 , MONFRAY J. 4 , DUCASTELLE-LEPRETRE S. 4 , SOBH M. 4 ,
NICOLINI F. 4 , ECOCHARD R. 2 , MICHALLET M. 4 , PERSAT F. 1 *

1 Hospices Civils de Lyon, Institut de Parasitologie et Mycologie Mdicale, Centre de Biologie Nord,
Universit Claude Bernard Lyon I, Lyon, France
2 Universit Claude Bernard Lyon I, CNRS, Unit Mixte de Recherche 5558, Equipe Biostatistique Sant,
Laboratoire de Biomtrie et Biologie volutive, Villeurbanne, Hospices Civils de Lyon, Service de
Biostatistique, Centre Hospitalier Lyon Sud, Pierre Bnite, France
3 Hospices Civils de Lyon, Service d'Hygine Hospitalire, Centre Hospitalier Lyon Sud, Pierre Bnite,
France
4 Hospices Civils de Lyon, Service d'Hmatologie, Centre Hospitalier Lyon Sud, Pierre Bnite, France

*Auteur correspondant : florence.persat@chu-lyon.fr

Introduction : Un diagnostic prcoce de laspergillose invasive (AI) peut reposer sur la dtection des
antignes galactomannanes (GM) dAspergillus dans le srum des patients. Nous avons valu les
performances de cette dtection chez les patients immunodprims avec leucmie mylode aigue (LAM)
et chez les patients allogreffs de cellules souches hmatopotiques (allo-GCSH) ainsi que lintrt de
diffrents facteurs issus de ce test comme prdicteurs dune AI.

Mthodes : Tous les patients LAM avec chimiothrapie dinduction ainsi que les patients allogreffs pour
maladies hmatologiques suivis en GM sriques dans notre centre entre avril 2006 et avril 2014, ont t
inclus sils avaient au moins trois rsultats de GM. Les donnes des GM ont t analyses durant 100 jours
suivant le premier jour de chimiothrapie dinduction ou partir de la date dallogreffe. Le test GM tait
ralis en routine donnant des rsultats en index. Les cas dAI ont t classs selon les critres de
lEORTC. Lindex du premier GM positif, le dlai de positivit par rapport au J0 et la pente entre deux index
partir du premier index positif, ont t tests comme prdicteurs dune AI. Ces prdicteurs seuls ou
associs ont t valus laide de courbes ROC et un score pronostic a t test.

Rsultats : Un total de 775 patients a t inclus : 1) 292 LAM (52% de mles; ge mdian=62 ans) dont
15% avaient un pronostic de LAM favorable, 8% un pronostic intermdiaire I, 18% un pronostic
intermdiaire II et 59% un pronostic dfavorable; 2) 483 allo-GCSH (61% de mles, ge mdian=48 ans
dont 234 LAM (48%), 66 mylomes multiples (14%), 46 mylodysplasie (10%), 38 lymphomes non-
Hodgkinien (8%). 233 dentre eux (48%) ont reu un conditionnement dintensit rduite, et 250 un
conditionnement myloablatif (52%). Un total de 877 pisodes de 100 jours de suivis en GM a t tudi.
Parmi ces suivis, 121 pisodes ont prsent au moins un test GM positif avec une incidence cumule de
13,8%. Quarante-huit AI prouves ou probables ont t diagnostiques avec une incidence cumule de
5,5% pour tous les patients. Les pisodes avec au moins un GM positif ont t classs en faux positifs
pour 82 dentre eux (68%) et en vrais positifs pour 39 cas dAI (32%). La sensibilit du test tait de 81%
pour une spcificit de 90%. La valeur prdictive ngative tait de 99% mais la valeur prdictive positive de
32%. Les trois facteurs prdictifs dAI tests ont des effets similaires indpendants et leur association a
permis dobtenir une aire sous la courbe ROC de 0,79% (IC95% de 0,70 0,89). Les valeurs seuils de ces
facteurs ont pu tre tablies: 1,04 pour lindex du premier GM positif, 0,04 pour la pente et infrieur ou gal
15 jours pour le dlai du premier GM positif. Un score pronostic dfinissant la probabilit davoir une AI a
t tabli en fonction du nombre de prdicteur prsent (de 0 3). Ce score suprieur ou gal 2 tait
indicateur dune AI dans 62% des cas.

Conclusion : Comme lAI a un impact significatif sur la survie des patients dhmatologie, ce GM-score
combinant trois facteurs propres aux GM (index du premier positif, dlai de positivit et pente avec lindex
suivant) peut aider les cliniciens face un rsultat GM positif dans la dcision de commencer ou non un
traitement premptif prcoce de lAI.
Fongmie Candida tropicalis porte dentre une chambre implantable
EL ABBASSI S. 1,2 * , DAHRAOUI S. 1,2 , KABBAGE S. 1,2 , IKEN M. 1,2 , DOGHMI K. 2,3 , MIQDAME M. 2,3 ,
LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service d'hmatologie clinique, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : dr.soukainaelabbassi@gmail.com

Introduction : Nous rapportons le cas dune fongmie Candida tropicalis chez un patient atteint dune
hmopathie maligne gurie uniquement aprs suppression de la porte dentre.

Observation : Mr I.A g de 32 ans, hospitalis en hmatologie clinique pour prise en charge dun
lymphome B grandes cellules. Aucun antcdent mdical ou chirurgical na t not. Au cours de son
hospitalisation, le patient a prsent une fivre prolonge rsistante une antibiothrapie large spectre,
raison pour laquelle il a bnfici dun bilan mycologique. Lexamen direct de la fongiculture ralise sur
milieu mycosis a objectiv la prsence de nombreuses levures. La culture sur milieu sabouraud
chloramphnicol a permis lisolement de nombreuses colonies, dont lidentification par galerie API 20C a
rvl un Candida tropicalis. Par ailleurs, la culture de la chambre implantable a galement rvl la
prsence de Candida tropicalis. Lvolution a t marque par lamlioration clinique et biologique du
patient aprs lablation de la chambre dimplantation, sans avoir recours un traitement antifongique
spcifique.

Conclusion : Le cathter vasculaire est un facteur de risque indpendant de candidmie. Le diagnostic


dinfection du cathter chambre implantable associe la candidmie est difficile prouver avant son
ablation, car actuellement il nexiste pas de techniques fiables valides pour identifier une infection
fongique du cathter avant son ablation. Celle-ci est nanmoins habituellement recommande de manire
thrapeutique, en association avec les antifongiques par voie systmique
Les candidmies en ranimation
EL ABBASSI S. 1,2 * , KABBAGE S. 1,2 , DAHRAOUI S. 1,2 , EL JAOUHARI S. 2,4 , ACHICH S. 1,2 , IKEN M.
1,2
, BAITE A. 2,3 , ABOUELALAA K. 2,4 , HAIMEUR C. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de ranimation mdicale, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc
4 Service de ranimation chirurgicale, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : dr.soukainaelabbassi@gmail.com

Introduction : Lobjectif de notre travail est dvaluer lincidence des candidmies dans deux services de
ranimation (mdicale et chirurgicale) de lHpital militaire dinstruction Mohammed V de Rabat et de
dcrire le profil pidmiologique, les facteurs de risques et les diffrentes mthodes de diagnostic
biologique des candidmies.

Matriel et mthodes : Il sagit dune tude prospective descriptive stalant sur 9 mois (Mai 2015 -
Janvier 2016), ralise au sein du laboratoire de parasitologie et de mycologie de lHMIMV-Rabat en
collaboration avec les services de ranimation mdicale et chirurgicale de lHMIMV-Rabat.

Les hmocultures des patients hospitaliss ont t collectes selon le critre dinclusion : hospitalisation de
plus de 48h, fivre rsistant lantibiothrapie pendant 3 jours. Un index de colonisation de Pittet et une
recherche dantigne mannane sont galement raliss. Lanalyse statistique a t faite en utilisant le
logiciel SPSS 10.0. Les tests utiliss taient le test Khi-2 pour les variables qualitatives et le test de Student
pour les variables quantitatives.

Rsultats : Durant la priode dtude, 140 patients ont t inclus dont 9 patients soit 6,42% ont prsent
une candidmie. Lge moyen de nos patients est de 64,5 ans [32 90 ans] et un sexe ratio H/F de 3,5.
Candida albicans est lespce la plus frquente dans notre srie, isole dans 55,6% des cas, suivie de
Candida tropicalis dans 22,2% des cas puis Candida glabrata et Candida lusitaniae dans 11,1% des cas
chacune. La dtection de lantigne mannane tait positive chez tous nos patients. Sur le plan
thrapeutique, 6 patients ont bnfici dun traitement curatif base de Fluconazole (66,6% des cas) et
dAmphotricine B (33,4% des cas), alors que les autres patients sont dcds avant la positivation des
cultures.

Conclusion : La part des candidmies parmi les septicmies nest pas ngligeable, Candida albicans reste
majoritairement isol et sensible tous les antifongiques le souvent. Le diagnostic des candidoses
systmiques est difficile tablir vu la non-spcificit des signes cliniques et les difficults du diagnostic
biologique. Malgr le dveloppement de nouvelles mthodes, le diagnostic se fait gnralement dune
faon tardive aggravant le pronostic de la maladie qui est dj sombre. Lhmoculture reste lexamen de
rfrence, malgr sa faible sensibilit et son rsultat le plus souvent tardif.
Les onychomycoses moisissure : cas de lhpital Ibn Sina De Rabat (Maroc)
EL AMIN G. 1,2 * , RAISS C. 1,2 , EL ANDALOUSSI K. 1,2 , MOUSTACHI A. 1,2 , LYAAGOUBI M. 1,2 , AOUFI
S. 1,2

1 LABORATOIRE CENTRAL DE PARASITOLOGIE-MYCOLOGIE DE CHU-IBN SINA-RABAT,MAROC


2 FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE UNIVERSITE MOHAMED V -RABAT,MAROC

*Auteur correspondant : ghizlane.elamin@live.fr

Introduction :

Les onychomycoses sont des mycoses frquentes des ongles secondaires leffet pathogne de trois
agents fongiques : les dermatophytes, les levures et les moisissures. Ces dernires sont rarement
incrimines dans les onychomycoses, cependant, une augmentation de leur prvalence au cours des
dernires annes a t enregistre.

Objectif de travail :

Le but de ce travail est dvaluer la frquence des moisissures impliques dans les onychomycoses sur
une priode de 24 ans au niveau du laboratoire de parasitologie-mycologie de lhpital Ibn Sina de Rabat.

Matriel et mthodes :

Il sagit dune tude rtrospective stalant sur une priode de 24 ans allant de janvier 1992 dcembre
2015. Les prlvements tudis provenaient de patients adresss par des dermatologues ou des mdecins
gnralistes au laboratoire de parasitologie-mycologie de lhpital Ibn Sina de Rabat.

Les prlvements ont t tudis selon les bonnes rgles dexcution danalyse mycologique.

Les chantillons, ainsi obtenus par raclage des ongles laide dune lame de Bistouri, ont t tudis au
microscope optique aprs claircissement dans une solution de KOH 30 %, puis ensemencs dans les
diffrents milieux (Sabouraud simple, Sabouraud chloramphenicol et Sabouraud actidione) et incubs 27
et 37C pendant trois semaines. Une moisissure est incrimine si elle est isole en culture pure sur deux
prlvements successifs avec, dans les deux cas, un examen direct positif montrant des filaments
mycliens.

Rsultats :

Parmi les patients qui ont prsent des atteintes unguales diverses, touchant les ongles des doigts et ou
des orteils, 7021 avaient une onychomycose confirme.

173 cas donychomycose moisissure ont t diagnostiqus avec une prvalence de 2.5 %. Elles
concernent essentiellement les orteils 6670 des cas soit 95% avec une lgre prdominance fminine
4213 des cas soit 60 %.

La dystrophie totale de longle tait la reprsentation clinique prpondrante dans 6200 des cas (88,3 %).

Les moisissures isoles taient les Aspergillus sp. dans 69 cas (39,8 %), puis Fusarium sp. dans 47 cas
(27,2 %), 20 cas (11.5 %) de Scopulariopsis brevicaulis, 19 cas (11,1 %) de Penicillium sp., 16 cas (9,2%)
dAcremonium sp., un cas dOnychocola canadensis (0,6 %) et un cas de Scytalidium dimitiatum (0,6 %).

Conclusion :

Bien qutant moins frquentes, les onychomycoses moisissures posent de rels problmes la fois
didentification prcise des espces (selon les critres morphologiques), de traitement, et surtout
dinterprtation.
Phaeohyphomycose Roussoella percutanea

EL KHALFI A. 1 * , BIAU D. 2 , AUDARD V. 3 , HEISSE C. 4 , PAUGAM A. 1

1 service de Mycologie-parasitologie ,Hpital Cochin,Universite Paris Descartes


2 Chirurgie Orthopdique,,Hpital Cochin
3 Anatomopathologie,,Hpital Cochin
4 Service de Nphrologie, Hpital Foch

*Auteur correspondant : drelkhalfiamine@gmail.com

Les phaeohyphomycoses sont des mycoses profondes opportunistes dues des champignons pigments
du groupe des dmatis. Bien quubiquitaires, ces infections sont plus frquentes dans les pays tropicaux.
R. percutanea est une espce rcemment dcrite (1). A notre connaissance il sagit du troisime cas.

Un homme de 65ans dorigine congolaise, en France depuis 40 ans consultait pour une tumfaction en
retro-mallolaire latral gauche voluant depuis 4 mois, sans signes clinique locaux ni gnraux. Dans ces
antcdents on notait une transplantation rnale pour cancer il y a un an. LIRM du pied rvlait une masse
latrale de 3 cm de diamtre, bien limite, sans atteinte osseuse. Lexamen histopathologiquement tait en
vidence des filaments fongiques septs. Labsence de fistules et de grains permettait dcarter le
diagnostic de myctome et de poser le diagnostic de phaeohyphomycose. En labsence de mise en culture
de la biopsie (pas de prlvement adress en Mycologie), un fragment de biopsie congele tait rcupr
en anatomopathologie afin de raliser une PCR pan fongique. Le squenage permettait didentifier de R.
percutanea. Une chographie cardiaque et une exploration par PET Scan permettaient dliminer une autre
localisation fongique. Compte-tenu de la gravit potentielle de ce foyer infectieux chez ce patient
immunodprim la lsion a t extirpe chirurgicalement sous couverture dun traitement antifongique par
posaconazole.

Apparent aux pleosporales, saprophytes des eaux et vgtaux, R. percutanea a pu tre confondu avec
Madurella mycetomatis (2). Ce filamenteux a une croissance lente, il peut produire des pycnides aprs plus
de 2 mois de culture. In vitro il est rsistant lamphotricine B et aux chinocandines, il est de sensibilit
variable pour les azols.

1. Ahmed S et al. Roussoella percutanea, a novel opportunistic pathogen causing subcutaneous mycoses.
Med Mycol 2014; 52: 689-698.

2. Meis J et al. Atypical presentation of Madurella mycetomatis mycetoma in a renal transplant. Transplant
Infect Dis 2000; 2: 9698.
Les teignes du cuir chevelu: profil pidmiologique actuel travers les cas
diagnostiqus l'hpital Ibn Sina de Rabat (1997-2015)
ELANDALOUSSI K. 1 * , RAISS C. 2 , EL AMIN G. 3 , MOUSTACHI A. 4 , LYAAGOUBI M. 5 , AOUFI S. 6

1 Elandaloussi kenza, Rabat, Maroc


2 Raiss chaimae, Rabat, Maroc
3 El amin ghizlaine, Rabat, Maroc
4 Moustachi aziza, Rabat, Maroc
5 Lyaagoubi Mohamed , Rabat, Maroc
6 Aoufi Sarah, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : elandaloussi-kenza@hotmail.com

Au Maroc, les teignes du cuir chevelu constituent lune des mycoses les plus frquentes, particulirement
chez les enfants dge scolaire, sans pargner les adultes pour lesquels nous avons pu montrer travers
ce travail que leurs atteintes ne sont pas exceptionnelles.

Lobjectif de ce travail est de dgager le profil pidmiologique et mycologique des teignes du cuir chevelu
diagnostiques au laboratoire de Parasitologie-Mycologie lhpital Ibn Sina de Rabat.

Nous avons men une tude rtrospective tale sur une priode de 19 ans entre 1 er janvier 1997 et le 30
dcembre 2015. Elle porte sur 203 cas de teigne du cuir chevelu diagnostiqus au laboratoire de
Parasitologie-Mycologie du centre hospitalier et Universitaire (CHU) Ibn Sina de Rabat.

Pour chaque malade, nous avons recueilli partir des registres du laboratoire, les donnes
pidmiologiques et mycologiques.

Les cheveux et les squames ont t prlevs et examins au microscope optique et cultivs sur diffrents
milieux de Sabouraud puis incubs 27C. Les espces ont t identifies selon les caractres
macroscopiques et microscopiques des cultures.

Sur 203 cas, lge moyen des patients tait de 9,6 ans avec des extrmes allant de 30 mois 90 ans.

Le sexe masculin tait plus touch, avec 123 cas (60,5%) contre 80 cas (39,4%) pour le sexe fminin.

Nous avons collig 152 cas (74%) de teigne du cuir chevelu chez les enfants et 27 cas (13,3 %) chez les
adultes.

7 espces de dermatophytes ont t isoles : Trichophyton violaceum 113 cas (55,6%), Microsporum canis
66 cas (32,5%), Trichophyton schoenleinii 9 cas (4,4%), Trichophyton rubrum 6 cas (2,9%), Trichophyton
soudanense 3 cas (1,4%), Trichophyton verrucosum 3 cas (1,4%), Trichophyton mentagrophytes 3 cas
(1,4%).

Lanalyse de la frquence des diffrentes espces isoles au cours des annes tudies montre une
tendance la baisse de T. violaceum, une recrudescence de M. canis et une rgression de T. schoenleinii.
Ainsi les dermatophytes zoophiles deviennent de plus en plus frquents au profit des espces
anthropophiles.
Contamination de bandages par Lichteimia associe 2 cas de zygomycose
cutane chez des patients brls
FREALLE E. 1,2,3,4,5 * , ROCCHI S. 6 , BACHELET H. 7 , TAVERNIER B. 8 , MATHIEU D. 9 , MILLON L. 6 ,
JEANNE M. 8

1 Univ. Lille, U1019 - UMR 8204 - CIIL - Center for Infection and Immunity of Lille, F-59000 Lille, France
2 CNRS, UMR 8204, F-59000 Lille, France
3 Inserm, U1019, F-59000 Lille, France
4 CHU Lille, Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, F-59000 Lille, France
5 Institut Pasteur de Lille, F-59000 Lille, France
6 Chrono-Environnement UMR 6249 CNRS, Universit de Franche-Comt & Service de Parasitologie-
Mycologie, CHU de Besanon, France
7 CHU Lille, Pharmacie Centrale, F-59000 Lille, France
8 CHU Lille, Centre de Traitement des Brls, F-59000 Lille, France
9 CHU Lille, Ple de Ranimation, F-59000 Lille, France

*Auteur correspondant : emilie.frealle-2@univ-lille2.fr

Problmatique : Les bandages non striles, utiliss autour des compresses et bandes striles au contact
de la plaie, ont t dcrits comme source de contamination lors de plusieurs pidmies de zygomycoses
en pdiatrie, chez des brls, ou lors de suites opratoires.

Mthode : Afin dinvestiguer leur rle dans 2 cas de zygomycose cutane Lichteimia (Absidia)
corymbifera survenus chez 2 patients brls en 2013 et 2014 au sein du Centre de Traitement des Brls
du CHRU de Lille, nous avons analys par culture et par PCR en temps rel ciblant Mucor/Rhizopus,
L.corymbifera et Rhizomucor diffrents lots de bandes de crpes et lastoplastes utiliss pour les
pansements des patients.

Rsultats : La prsence de moisissures a t dtecte par culture sur 5/5 (100%) et 9/11 (82%) lots de
bandes de crpes ainsi que sur 3/3 (100%) et 3/3 (100%) lots dlastoplastes analyss en 2013 et 2014,
respectivement. Les espces les plus frquemment isoles taient, pour les bandes de crpe, Penicillium
et Aspergillus versicolor (retrouvs dans 60% des chantillons en 2013 et, respectivement, 36% et 18%
des chantillons en 2014), et Aspergillus fumigatus (dtect dans 20% des chantillons en 2013, et 55%
2014). Pour les lastoplastes, A. fumigatus et Fusarium taient les micromyctes les plus frquents,
prsents dans 1/3 et 3/3 chantillons en 2013 et 2/3 et 1/3 chantillons en 2014. La prsence de mucorales
tait dtecte sur 1 lastoplaste en 2013 (1 colonie de Rhizopus) et 1 bande de crpe en 2014 (1 colonie
dAbsidia). Par ailleurs, la recherche dADN de Mucor/Rhizopus et L. corymbifera effectue sur 5 bandes
de crpe chantillonnes en 2014 tait positive dans 80% des cas, avec des quantits variant de 5,2
40,7 fg/l, et 2,9 103,5 fg/l, respectivement, et, de faon intressante, pour L. corymbifera, la quantit la
plus leve retrouve dans lchantillon positif en culture. Pour les 3 lastoplastes analyss, la qPCR
Mucor/Rhizopus tait positive pour tous les chantillons, avec des quantits variant de 12,6 31,4 fg/l, et
la qPCR L. corymbifera ngative pour les 3 chantillons. Enfin, la qPCR Rhizomucor ntait positive que
pour 1 des 5 bandes de crpe et 1 des 3 lastoplastes analyss (avec des quantits faibles, de 5 et 1,9
fg/l, respectivement).

Conclusion : La prsence de L. corymbifera dans les bandes de crpe, dtecte par culture et par qPCR,
suggre que ces bandages pourraient avoir t lorigine des zygomycoses cutanes survenues chez les
patients brls dans notre centre. Par ailleurs, la dtection dA. fumigatus, ou de mucorales appartenant au
genre Rhizopus indique que ces bandages non striles, mme sans contact direct avec la plaie,
reprsentent une source dinfection potentielle par de nombreux pathognes fongiques, et que leur
utilisation devrait tre exclue pour les pansements des brlures tendues.
Ingnierie dinhibiteurs de protases impliques dans ladhrence des
dermatophytes
FREICHELS A. 1 * , CAMBIER L. 2 , BALDO A. 2 , MIGNON B. 2 , GALLENI M. 1

1 Centre d'Ingnierie des Protines, Macromolcules Biologiques, Universit de Lige, Belgique


2 Dpartement des maladies infectieuses et parasitaires, Service de Mycologie Vtrinaire, Facult de
Mdecine Vtrinaire, Universit de Lige, Belgique

*Auteur correspondant : a.freichels@ulg.ac.be

Les dermatophytes sont des champignons filamenteux kratinophiles et kratinolytiques responsables de


mycoses cutanes superficielles et contagieuses appeles dermatophytoses.

Actuellement, le traitement des dermatophytoses ncessite laction prolonge dantifongiques par voie
topique et/ou orale ce qui engendre des cots importants ainsi que des nuisances cologiques. De plus,
aucun produit prventif nest disponible sur le march en cas de rcidives infectieuses.

Ladhrence des champignons aux tissus de lhte est un processus complexe qui fait intervenir de
nombreuses protines telles que les adhsines et des protases. Il a t montr quune endoprotase de
type subtilisine (Sub3) est implique dans le mcanisme dadhrence du dermatophyte lpiderme.
Linhibition de cette protase pourrait tre une premire alternative pour la prvention des
dermatophytoses.

Le Centre dIngnierie des Protines (CIP) est une unit disposant dun centre de recherche acadmique
et de deux plateformes : Roboprotein et Protein Factory. Notre centre a dvelopp de nombreuses
comptences comme lisolement et clonage de gnes codant pour des protines dintrts, production et
purification de protines recombinantes varies, caractrisations biochimiques, cristallographie, tests
enzymatiques, tudes interactions et dinhibitions, screening de nouvelles molcules et modlisation
molculaire.

Notre unit a particip la production, purification et caractrisation de la Subtilisine 3 recombinante de


Trichophyton rubrum ainsi que de son propeptide. Ceci a permis de montrer que le propeptide de Sub 3 est
un inhibiteur puissant de la protase mature. Le propeptide pourrait tre un premier candidat utilis dans la
prvention des dermatophytoses.

Ces rsultats montrent que les recherches visant identifier, produire et caractriser des protines
impliques dans les mcanismes dadhrence sont ncessaires pour in fine dvelopper des produits
efficaces dans la protection contre les dermatophytoses.
Comparison of a new commercial real-time PCR assay (RealCycler PJIR kit,
Progenie Molecular) to an in-house real-time PCR assay for the diagnosis of
Pneumocystis jirovecii infections

GUILLAUD-SAUMUR T. 1,2 , LE GAL S. 1,2 * , NEVEZ G. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et Mycologie, CHRU de Brest


2 Universit de Bretagne Occidentale

*Auteur correspondant : solene.legal@univ-brest.fr

The atypical fungus Pneumocystis jirovecii (P. jirovecii) is the causative agent of a life threatening
pneumonia [Pneumocystis pneumonia (PCP)] in immunosuppressed patients. PCP diagnosis is essentially
based on the detection of the fungus in pulmonary specimens using microscopic examination and
polymerase chain reaction (PCR). For the past 20 years, the use of PCR assays has improved the
sensitivity of P. jirovecii detection.

The main objective of the present study was to compare the efficiency of the RealCycler PJIR kit (Progenie
Molecular; pmPCR), to an in-house PCR assay (ihPCR), both assays targeting the mitochondrial large
subunit ribosomal rRNA gene.

Thirty-four patients were retrospectively enrolled in the study. Fourteen patients were initially diagnosed
with PCP, 15 were considered to be pulmonary colonized by the fungus, and 5 were negative for P. jirovecii
detection (negative control group). Archival DNA specimens (extracted from the patient's pulmonary
specimens) were examined with ihPCR and pmPCR on the same day using the same real-time PCR
instrument (Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR system). The ihPCR assay was performed as
described elsewhere by Meliani et al. and Totet et al. (1,2). The pmPCR assay was performed according to
the manufacturers recommendations.

Concordant results were obtained with the two PCR assays for all DNA specimens but one (33/34). Thus,
the concordance rate between the two methods was evaluated at 97% (Cohens kappa, 0.905). The
discrepant result concerned one specimen from a colonized patient previously known to have a cycle
threshold (Ct) value35 using ihPCR. This specimen was confirmed to be positive with ihPCR and was
negative with pmPCR. Taking into account Ct values for positive samples, the correlation factor between
the two PCR methods has been evaluated at 0.97 (R2=0.9481).

Taking into account the cohen's kappa>0.8, the RealCycler PJIR kit (Progenie Molecular) appears to be an
efficient technique to detect P.jirovecii in patients with PCP and in patients colonized by P. jirovecii.

1. Meliani L, Develoux M, Marteau-Miltgen M et al. Real time quantitative PCR assay for Pneumocystis
jirovecii detection. J Eukaryot Microbiol 2003; 50 Suppl:651.

2. Totet A, Meliani L, Lacube P et al. Immunocompetent infants as a human reservoir for Pneumocystis
jirovecii: rapid screening by non-invasive sampling and real-time PCR at the mitochondrial large subunit
rRNA gene. J Eukaryot Microbiol 2003; 50 Suppl:668-669.
Dtermination de lactivit fongicide du dtergent ANIOS SURFASAFE Premium
HOINARD D. 1 , BOULLIE A. 1 , DESNOS-OLLIVIER M. 1 * , GARCIA-HERMOSO D. 1 , ALANIO A. 1 ,
DROMER F. 1

1 CNR Mycoses Invasives et Antifongiques, Institut Pasteur, Paris

*Auteur correspondant : mdesnos@pasteur.fr

Problmatique

Lefficacit des dtergents pour le nettoyage des surfaces de laboratoire contamines (laboratoire P2, P3)
par des agents pathognes fongiques nest pas bien caractrise. Les principaux champignons utiliss
pour tester lactivit fongicide des dtergents sont Candida albicans et Aspergillus niger.

Objectif

Lobjectif est de dterminer si le dtergent ANIOS SURFASAFE Premium, recommand par le service
Hygine et Scurit de lInstitut Pasteur de Paris, a une activit fongicide pour les agents pathognes
fongiques de classe de risque 2 et 3, ainsi que le temps de contact ncessaire pour une activit optimale.

Matriels et Mthodes

Dix-huit espces de champignons pathognes de classe 2 et 3 ont t testes (6 espces de champignons


filamenteux ascomyctes, 3 espces de champignons dimorphiques, 5 espces de Mucorales, 3 espces
de levures ascomyctes et une levure basidiomycte). Pour chaque espce, la croissance rsiduelle a t
dtermine aprs plusieurs temps de contact avec le dtergent (5, 15, 30, 60 mn et 24h).

Rsultat

Pour les principales espces de levures, aucune croissance rsiduelle na t observe mme aprs un
temps de contact de seulement 5 minutes. Pour les principales espces de champignons filamenteux, une
croissance rsiduelle infrieure denviron 1% de l'inoculum initial a t observe aprs un temps de contact
de 15 minutes. Pour les agents fongiques de classe 3, aucune croissance n'tait dtecte aprs un temps
de contact de 30 minutes lexception de lespce Cladophialophora bantiana.

Conclusion

En conclusion, nous prconisons un temps de contact de 30 minutes pour une dcontamination totale,
tendue au minimum 1h et au mieux 24h pour lespce Cladophialophora bantiana. Ce travail pourra
contribuer la mise en place dune procdure de nettoyage des locaux hospitaliers garantissant labsence
de contamination par les diffrents pathognes fongiques.
Les onychomycoses moisissures et pseudodermatophytes lhpital
militaire dinstruction Mohammed V de Rabat (Maroc)
IKEN M. 1 * , LEMKHENTE Z. 1 , NAOUI H. 1 , BOUMHIL L. 1 , LMIMOUNI B. 1

1 HOPITAL MILITAIRE D'INSTRUCTION MOHAMEDV RABAT MAROC

*Auteur correspondant : bousnour@yahoo.fr

Introduction- Les onychomycoses reprsentent ltiologie la plus frquente des onychopathies Leur
prvalence dans la population gnrale varie de 2 13 % selon les sries. Les dermatophytes et les
levures ne sont pas les seuls agents fongiques en cause. Dautres champignons filamenteux appels
moisissures sont aussi impliqus dans la pathologie fongique unguale.

Objectifs- Evaluer la frquence relative des moisissures incrimines dans les onychomycoses, rpertorier
les principales espces engendrant ces onychomycoses diagnostiques au service de parasitologie-
mycologie de lHpital Militaire dInstruction Mohamed V de Rabat.

Patients et mthodes- Il sagit dune tude prospective descriptive ralise au sein du laboratoire de
Parasitologie-Mycologie mdicale de lHpital Militaire dInstruction Mohammed V de Rabat, sur une dure
de 3 ans (2010-2013). Elle inclut tous les patients consultants en dermatologie et adresss au laboratoire
de parasitologie mycologie lHMIMV pour un examen mycologique dune lsion unguale suspecte
donychomycose des mains et /ou des pieds.

Rsultats : Durant la priode dtude, 924 prlvements mycologiques au niveau des ongles ont t
effectus dans le but de dterminer lorigine mycosique de linfection. Ainsi, 396 patients ont prsent une
onychomycose. Les moisissures reprsentent environ 21% de lensemble des champignons isols et
identifis. Aspergillus spp. est le genre majoritaire avec un taux de 32,7%, suivi du genre Scopulariopsis
brevicaulis avec un taux de 30,8% des cas, et le genre Fusarium spp. reprsentant 11,53% des cas. Les
autres moisissures de cette mme famille ainsi que les pseudodermatophyes ne sont que rarement
isoles.

Conclusion : Les onychomycoses moisissures ne sont pas rares. Leur prise en charge adquate passe
obligatoirement par lanalyse mycologique ainsi que llimination des facteurs favorisant les rcidives.
Infection de ncrose pancratique Candida parapsilosis ( propos dun cas)
IKEN M. 1 * , EL ABBASSI S. 1 , KABBAGE S. 1 , BOUMHIL L. 1 , NAOUI H. 1 , LMIMOUNI B. 1

1 HOPITAL MILITAIRE D'INSTRUCTION MOHAMED V RABAT MAROC

*Auteur correspondant : bousnour@yahoo.fr

Introduction -La pancratite aigue est une entit clinique dont la pathognie fait intervenir une activation
intracellulaire des enzymes protolytiques et lipolytiques du pancras. Les lsions de ncrose pancratique
et pri-pancratique ont t attribues une auto digestion de la glande et de ses tissus avoisinants par
ses propres enzymes. Au cours des pancratites aigues, les infections pancratiques sont des
complications frquentes. Parmi ces complications, linfection des coules de ncrose revt un aspect
particulier et une gravit marque. Ces infections sont surtout dorigine bactrienne. Ltiologie
candidosique reste rare mais importante reconnaitre pour une prise en charge thrapeutique prcoce et
adquate. Nous rapportons par le prsent travail un cas dinfection de ncrose pancratique Candida
parapsilosis associ une fungmie.

Observation -Patient g de 53 ans, tait hospitalis pour douleurs abdominales transfixiantes lancinantes
irradiant dans lpaule droite avec pyrosis et dyspepsie. Dans ses antcdents, on ne notait ni un
traitement mdical au long cours, ni une intoxication alcoolo tabagique. Un bilan radiologique a objectiv
une pancratite ague ncrosante stade E (score de Ranson et Balthazar) avec infiltrats des fascias para
rnales antrieures droit et gauche ainsi que microlithiases dans la vsicule biliaire. Le bilan biologique a
montr une hyperleucocytose 29400 lments /mm3, Hmoglobine 12,7g/dl, une lipasmie 212 UI/L,
une amylasmie 127 UI/L. Une sphincterotomie endoscopique a t ralise avec une CPRE mais sans
amlioration. Un bilan radiologique de contrle (TDM thoraco abdominale) a montr une persistance de la
coule de ncrose pri pancratique ainsi que lapparition dune pneumopathie basale et panchement
pleural gauches. Une ponction-drainage guide dune coule de ncrose pancratique sous contrle
tomodensitomtrique a t effectue. La culture sur milieu de Sabouraud Chloramphnicol avec ou sans
actidione, du pus de la coule de ncrose a permis lisolement de colonies de levures, identifies ensuite
Candida parapsilosis. Une fungmie Candida parapsilosis a t mise en vidence sur une hmoculture.

Conclusion -Au cours des pancratites agues, linfection de la ncrose pancratique par Candida
parapsilosis est rare. Ce type dinfection doit tre voqu en prsence de facteurs favorisants et impose un
traitement prcoce et adapt dont le but est lamlioration de la survie des malades.
Infection de ncrose pancratique Candida parapsilosis ( propos dun cas)
IKEN M. 1 * , EL ABBASSI S. 1 , KABBAGE S. 1 , BOUMHIL L. 1 , NAOUI H. 1 , LMIMOUNI B. 1

1 Hpital Militaire D'instruction Med V, Rabat, maroc

*Auteur correspondant : bousnour@yahoo.fr

Introduction : La pancratite aige est une entit clinique dont la pathognie fait intervenir une activation
intracellulaire des enzymes protolytiques et lipolytiques du pancras. Les lsions de ncrose pancratique
et pri-pancratique ont t attribues une auto digestion de la glande et de ses tissus avoisinants par
ses propres enzymes. Au cours des pancratites aiges, les infections pancratiques sont des
complications frquentes. Parmi ces complications, linfection des coules de ncrose revt un aspect
particulier et une gravit marque. Ces infections sont surtout dorigine bactrienne. Ltiologie
candidosique reste rare mais importante reconnaitre pour une prise en charge thrapeutique prcoce et
adquate. Nous rapportons par le prsent travail un cas dinfection de ncrose pancratique Candida
parapsilosis associ une fungmie.

Observation : Patient g de 53 ans, tait hospitalis pour douleurs abdominales transfixiantes


lancinantes irradiant dans lpaule droite avec pyrosis et dyspepsie. Dans ses antcdents, on ne notait ni
un traitement mdical au long cours, ni une intoxication alcoolo tabagique. Un bilan radiologique a objectiv
une pancratite aige ncrosante stade E (score de Ranson et Balthazar) avec infiltrats des fascias para-
rnal antrieurs droit et gauche ainsi que microlithiases dans la vsicule biliaire. Le bilan biologique a
montr une hyperleucocytose 29400 lments /mm3, Hmoglobine 12,7g/dl, une lipasmie 212 UI/L,
une amylasmie 127 UI/L. Une sphincterotomie endoscopique a t ralise avec une CPRE mais sans
amlioration. Un bilan radiologique de contrle (TDM thoraco abdominale) a montr une persistance de la
coule de ncrose pri pancratique ainsi que lapparition dune pneumopathie basale et panchement
pleural gauches. Une ponction-drainage guide dune coule de ncrose pancratique sous contrle
tomodensitomtrique a t effectue. La culture sur milieu de Sabouraud Chloramphnicol avec ou sans
actidione, du pus de la coule de ncrose a permis lisolement de colonies de levures, identifies ensuite
Candida parapsilosis. Une fungmie Candida parapsilosis a t mise en vidence sur une hmoculture.

Conclusion : Au cours des pancratites aiges, linfection de la ncrose pancratique par Candida
parapsilosis est rare. Ce type dinfection doit tre voqu en prsence de facteurs favorisants et impose un
traitement prcoce et adapt dont le but est lamlioration de la survie des malades.
Infection urinaire a trichosporon asahii : propos dun cas
KABBAGE S. 1,2 * , DAHRAOUI S. 1,2 , EL ABBASSI S. 1,2 , IKEN M. 1,2 , ER-RAHALI Y. 2,4 , BELMEJDOUB
G. 2,4 , BAITE A. 2,3 , HAIMEUR C. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de ranimation mdicale, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc
4 Service d'endocrinologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : samiakabbage@gmail.com

Introduction : La trichosporonose est une infection mergente cause principalement par Trichosporon
asahii. Cette espce est la plus frquemment retrouve au sein des lsions cutanes superficielles mais
est rarement responsable dinfection invasive. Les candiduries Trichosporon asahii sont inhabituelles et
restent insuffisamment signales. Nous rapportons le cas dune infection urinaire Trichosporon asahii.

Observation :Mr K.R g de 71 ans, admis en ranimation mdicale pour prise en charge dun trouble de
conscience apyrtique sur hypernatrmie et hypercalcmie majeure. Dans ses antcdents mdico-
chirurgicaux on note une noplasie de la prostate pour laquelle il a bnfici dune prostatectomie totale en
2003. Le dbut de la symptomatologie clinique remonte une semaine de son admission, par linstallation
progressive dun trouble de conscience avec altration de ltat gnral le tout voluant dans un contexte
dapyrexie. Lexamen ladmission trouve un patient agit, GCS 10, sans dficit sensitivo-moteur. Aprs
mise en condition, le patient a bnfici dexamens para cliniques objectivant la prsence dune
hyperleucocytose prdominance de neutrophiles, un syndrome inflammatoire modr ainsi quune
insuffisance rnale dallure fonctionnelle. Lexamen cytobactriologique des urines a objectiv la prsence
de levures lexamen microscopique. Ltude des caractres biochimiques des colonies de levures par la
galerie didentification API 20C a permis lidentification du Trichosporon asahii, qui a t confirm sur un
nouveau prlvement.

Conclusion : Bien que rares, de plus en plus dinfections Trichosporon asahii sont rapportes,
principalement chez les sujets immunodprims. Malgr le faible nombre de donnes pidmiologiques,
biologiques et clinique ainsi que la difficult du diagnostic, linstauration rapide dun traitement efficace
amliore le pronostic.
Les candiduries en milieu de ranimation
KABBAGE S. 1,2 * , EL ABBASSI S. 1,2 , DAHRAOUI S. 1,2 , SALOMON A. 2,3 , IKEN M. 1,2 , BERRAHO H. 1,2
, BAIT A. 2,3 , ABOUELALAA K. 2,4 , CHARKI H. 2,3 , LMIMOUNI B. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et mycologie, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc


2 Facult de Mdecine et de Pharmacie, Universit Mohamed V, Rabat, Maroc
3 Service de ranimation mdicale, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc
4 Service de ranimation chirurgicale, Hpital Militaire d'instruction Mohamed V, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : samiakabbage@gmail.com

INTRODUCTION : Lobjectif de notre travail est de dcrire le profil pidmiologique et clinique, de


dterminer les facteurs de risques et les mthodes de diagnostic biologique des candiduries.

MATERIELS ET METHODES : Il sagit dune tude prospective descriptive ralise sur une priode de 9
mois allant de Mai 2015 Janvier 2016 au sein du laboratoire de parasitologie et de mycologie de
LHMIMV de Rabat, et en collaboration avec le service de la ranimation mdicale et de la ranimation
chirurgicale de LHMIMV de Rabat. Dans notre tude nous avons retenu tous les patients admis en
ranimation pour une pathologie mdicale ou chirurgicale, hospitaliss avec ou sans sonde urinaire
demeure pendant une dure de plus de 48 heures et prsentant un syndrome infectieux clinique ou
biologique ou des signes cliniques voquant une infection urinaire Candida sp, et ayant un facteur de
risque de dveloppement dune infection fongique. Lanalyse statistique a t faite en utilisant le logiciel
SPSS 10.0. Les tests utiliss taient le test Khi-2 pour les variables qualitatives et le test de Student pour
les variables quantitatives.

RESULTATS : 30 cas de candidurie (21,5%) ont t dcels parmi les 140 patients hospitaliss durant
notre priode dtude en unit de soins intensifs. Lge moyen de nos patients tait de 64,5 ans [44 90
ans]. Par ailleurs une nette prdominance masculine a t observe avec un sexe ratio H/F de 1,3.

Candida albicans a t isol dans 54 % des cas, suivi de Candida tropicalis dans 14% des cas, alors que
Candida lusitaniae, Candida parapsilosis et Candida glabrata ont t retrouvs dans 6% des cas chacun.
Lindex de colonisation de Pittet a diffr significativement entre les malades ayant une candidurie isole et
ceux prsentant une candidose invasive.

CONCLUSION : Surtout frquentes en milieu hospitalier, les candiduries ralisent des tableaux trs divers,
de la colonisation banale au sepsis grave, dpendant largement du terrain sous-jacent. Comparativement
aux infections bactriennes, la littrature est beaucoup plus pauvre, de sorte que lpidmiologie de ces
infections et les critres diagnostiques ainsi que les indications et modalits optimales du traitement
persistent inconnus.
Les teignes du cuir chevelu en Tunisie : Problme toujours d'actualit.
KALLEL A. 1 , HDIDER A. 1 , FAKHFAKH N. 1 , BELHADJ-SALAH N. 1 , BADA N. 1 , BELHADJ S. 1 * ,
KALLEL K. 1

1 Laboratoire de Parasitologie-Mycologie,CHU la Rabta,Tunis,Tunisie.

*Auteur correspondant : slaheddine.belhadj@rns.tn

Malgr l'amlioration du niveau d'hygine de la population tunisienne, les teignes du cuir chevelu
constituent encore un motif de consultation frquent en dermatologie. C'est la principale mycose
superficielle de l'enfant ncessitant une prise en charge adapte.

Le but de notre travail tait de dgager les caractristiques pidmiologiques des teignes du cuir chevelu
de l'enfant dans la rgion de Tunis.

Il s'agit d'une tude rtrospective ayant port sur 1600 prlvements mycologiques du cuir chevelu raliss
au laboratoire de Parasitologie-Mycologie du CHU la Rabta de Tunis chez des enfants ags de 6 mois 15
ans, durant une priode de 10 ans (2005-2014). Pour chaque prlvement de cheveux ont t raliss de
faon systmatique un examen direct la potasse 30% et une culture sur milieu Sabouraud.
L'identification des dematophytes isols a repos sur des critres macroscopiques et microscopiques des
colonies. Le diagnostic mycologique a t considr positif lorsque l'examen direct et/ou la culture taient
positifs. Parmi nos patients, nous avons collig 947 cas de teignes (59,18%). Le sexe ratio tait de 2,61 et
l'ge moyen de 6,28 ans. L'aspect clinique le plus frquent tait la teigne tondante (87,65%). L'examen
direct tait positif dans 884 cas (93,35%), il avait montr un parasitisme pilaire ectothrix microsporique
dans 63,25% des cas et endothrix trichophytique dans 29,78% des cas. La culture, positive dans 912 cas
(96,30%), a permis d'isoler les espces de dermatophytes suivants: Microsporum canis (67%),
Trichophyton violaceum (31,68%), Trichophyton mentagrophytes (0,66%), Microsporum audouinii (0,22%),
Trichophyton schoenleinii (0,22%) et Microsporum gypseum (0,22%). Nos patients avaient une
dermatophytie associe de la peau glabre dans 11 cas.

Microsporum canis, inconnu en Tunisie jusqu'en 1950 est actuellement l'espce la plus frquemment
incrimine dans les teignes du cuir chevelu dans notre pays. Ce changement serait en rapport avec une
modification du comportement de notre population, en effet le chat; principal rservoir de Microsporum
canis cohabite de plus en plus avec les familles tunisiennes.
Evaluation de larocontamination A. fumigatus pendant des travaux de large
ampleur lhpital : Suivi de la surveillance environnementale mise en place
LOEFFERT S. 1 * , GUSTIN M. 2 , SIDIBE M. 3 , CASSIER P. 3 , DANANCHE C. 1, 4 , BENET T. 1,4 ,
PERRAUD M. 3 , VANHEMS P. 1,4

1 Laboratoire des Pathognes Emergents - Fondation Mrieux, Centre International de Recherche en


Infectiologie (CIRI), Inserm U1111, CNRS UMR5308, ENS de Lyon, UCBL1, Lyon, France.
2 Institut des Sciences Pharmaceutiques et Biologiques (ISPB), Universit Claude Bernard 1, Lyon,
France.
3 Laboratoire de Biologie et Scurit Environnementale, Hpital Edouard Herriot, Lyon, France
4 Unit Hygine, Epidmiologie et Prvention, Hpital Edouard Herriot, Lyon, France.

*Auteur correspondant : sophie.loeffert01@chu-lyon.fr

Introduction : En labsence de solution chimioprophylaxique efficace, lvaluation de la charge fongique


retrouve est un outil essentiel pour la prvention et la surveillance environnementale des colonisations
lhpital. Un pavillon central de lhpital est en train dtre entirement dconstruit sans arrt des activits
de soins. Les objectifs de cette tude sont 1) dvaluer linfluence des conditions mtorologique (CM) sur
la colonisation extrieure et intrieure A. fumigatus (AF), 2) dterminer la diversit dAF, 3) valuer les
corrlations pouvant exister entre les souches cliniques et environnementales collectes.

Matriel et mthode : Depuis fvrier 2015, une surveillance environnementale quotidienne de la charge
fongique a t mise en place dans 4 services de ranimations, le service des greffs reins-foie et 3 autres
services de soins. Des prlvements dair sont raliss lextrieur et lintrieur des pavillons par
impaction sur glose Sabouraud Chloramphenicol laide dun arobiocollecteur (Air-Ideal, Biomrieux).
Pour chaque point, 2 gloses sont impactes et incubes respectivement 30C pendant 5 jours afin de
permettre lanalyse de la charge fongique totale (CFT) et 37C pendant 48 heures pour slectionner le
type Aspergillus. Des prlvements extrieurs continus sont galement raliss au moyen dun capteur
volumtrique de type Lanzoni VPPS-2000 (Bologne, Italie, Analyzair) de dbit moyen 10L.min-1. Les
spores Aspergillaceae impactes sur une bande adhsive sont identifies au microscope puis exprimes
en spore/m3/jour. La variabilit gnomique des souches dAF de lenvironnement et clinique seront
values par la technique Multi-Locus Variable-number tandem reapeat Analysis (MLVA). La
Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) aux antifongiques sera dtermine.

Rsultats : Plus de 3800 prlvements dair ont t raliss. Les rsultats collects lextrieur par
larobiocollecteur seront compars ceux obtenus par le capteur volumtrique afin de voir si ce dernier
pourrait remplacer les prlvements manuels. Lvaluation de limpact des CM sur la colonisation fongique
extrieure et intrieure permettra daider actualiser les recommandations lors de travaux. Le gnotypage
des souches pourrait ventuellement identifier les transmissions croises. La CMI permettra destimer la
proportion des souches environnementales rsistantes aux azols.

Conclusion : Lincidence croissante des infections fongiques et le cot supplmentaire engendr par des
thrapies antifongiques ncessite lvaluation de ladquation des techniques de surveillance
environnementale. Les premiers rsultats ont dj permis damliorer les mesures de protection et les
pratiques professionnelles au sein de notre tablissement.
Impact des paramtres mtorologiques sur la dispersion dAspergillus spp.
lextrieur et lintrieur des units de soins lors de travaux majeurs lhpital
LOEFFERT S. 1 * , VANHEMS P. 1, 2 , JANEZ M. 3 , CASSIER P. 3 , DANANCHE C. 1.2 , BENET T. 1,2 ,
PERRAUD M. 3 , GUSTIN M. 4

1 Laboratoire des Pathognes Emergents - Fondation Mrieux, Centre International de Recherche en


Infectiologie (CIRI), Inserm U1111, CNRS UMR5308, ENS de Lyon, UCBL1, Lyon, France.
2 Unit Hygine, Epidmiologie et Prvention, Hpital Edouard Herriot, Lyon, France.
3 Laboratoire de Biologie et Scurit Environnementale, Hpital Edouard Herriot, Lyon, France.
4 Institut des Sciences Pharmaceutiques et Biologiques (ISPB), Universit Claude Bernard 1, Lyon,
France.

*Auteur correspondant : sophie.loeffert01@chu-lyon.fr

Introduction: Les Aspergillus sont des champignons filamenteux responsables dinfections invasives chez
les patients immunodprims. Les recommandations actuelles concernant la prvention du risque
aspergillaire lors de travaux lhpital sont principalement bases sur une surveillance environnementale
adquate et la mise en place de mesures protectives. Les Aspergillus sont prsents chaque saison et
semblent ainsi lis aux paramtres mtorologiques. Lobjectif de cette tude est dvaluer linfluence de
certains paramtres mtorologiques sur la colonisation Aspergillus extrieure et intrieure des pavillons
lors dune priode de travaux majeurs.

Matriel et mthode: Depuis fvrier 2015, une surveillance environnementale de la charge fongique a t
mise en place dans 4 services de ranimation, le service des greffs reins-foie (GRF) et 3 autres services
de soins. Un service de ranimation (G0), le service des GRF (G1) et 3 autres services mdicaux (G2, G3
et G4) sont localiss au nord du chantier. Les prlvements dair sont raliss lextrieur et lintrieur
de ces pavillons par impaction sur glose Sabouraud Chloramphenicol laide dun arobiocollecteur (Air-
Ideal 90 mm, Biomrieux) et incubs 48h 37C. La temprature, lhumidit relative et la vitesse du vent
ainsi que sa direction sont releves chaque jour sur le site Meteociel. Leffet des paramtres
mtorologiques sur la prsence dAspergillus a t ralis laide dune rgression logistique (P-values
<0.05).

Rsultats: Lanalyse univarie des prlvements extrieurs (n=204) montre que seule la direction du vent
et lhumidit relative ont un effet significatifs (p<10-4) sur la colonisation Aspergillus. Lanalyse bivarie
confirme que leffet du vent et de lhumidit relative restent importants avec 1) un Odd Ratio (OR) de la
colonisation Aspergillus =4.1 (p=0.001) IC95% [1.7;10] pour une direction du vent Sud 2) un OR=1.5
(p<10-3) pour toute augmentation de 10% dhumidit relative. Pour ces 5 services (G0 -> G4) tudis des
rsultats similaires ont t obtenus avec les prlvements intrieurs (n=384). Lanalyse multiple ajuste sur
les services a montr un OR de la colonisation Aspergillus intrieure qui diminue (OR=3, (p<10-3) IC95%
[1.7; 5.4]) pour un vent du nord et un OR inchang pour lhumidit relative. Avec G4 comme rfrence,
lOR de la colonisation Aspergillus intrieure est de 0.27 (p=0.01) IC95% [0.12; 0.56] pour G1 et de 0.39
(p=0.02) IC95% [0.17; 0.88] pour G0. LOR de la colonisation Aspergillus intrieure (OR=0.79) nest pas
significativement diffrent de lOR de G4 (OR=1.9).

Conclusion: Certains paramtres mtorologiques semblent avoir un impact sur la colonisation


Aspergillus extrieure et intrieure. Ces rsultats permettront daider actualiser les recommandations lors
de travaux de dconstruction.
Les otomycoses dermatophytiques: tude rtrospective de 2010 2015
MERAD Y. 1,2,3,4,5 , ADJMI-HAMOUDI H. 1,2,3,4,5 , LANSARI T. 1,2,3,4,5 , CASSAING S. 1,2,3,4,5

1 Unit de Parasitologie-Mycologie CHU Hassani Abdelkader, Sidi Bel Abbes, Algrie


2 Facult des sciences mdicales, Alger, Algrie
3 service de dermatologie CHU Hassani Abdelkader, Sidi Bel Abbes, Algrie
4 service d'ORL, CHU Hassani Abdelkader, Sidi Bel Abbes, Algrie
5 Service de Parasitologie-Mycologie Hpital Purpan, Toulouse, France

*Auteur correspondant : yassinemerad8@gmail.com

Lotite dermatophytique est une entit clinique assez rare, elle se manifeste parfois par une simple
desquamation visible l'embouchure du conduit auditif, ou une sensation rcurrente doreille bouche, le
diagnostic sera plus vocateur quand une lsion circine intresse une partie du pavillon.

Lexamen mycologique de 3124 patients prsentant des signes auriculaire, nous a permis disoler 52
dermatophytes, avec un sexe ratio de 3,9.

Deux de nos patients avaient une otite moyenne chronique, on compte parmi les sujets atteints: des
enfants, des maons, des agriculteurs, des leveurs et des mnagres.

Le prurit auriculaire constitue le maitre symptme (63,46%), suivi par la sensation de bouchon (23,07%),
lotorrhe (7,69%), le bourdonnement (1,92%) et lotalgie (1,92%).

Lexamen otoscopique rvle le plus souvent un rythme et/ou des squames.

Un couvillonnage ou un raclage des squames du conduit auditif externe a t effectu pour chaque
patient, suivi d'un examen mycologique direct, d'une culture sur Sabouraud-Chloramphnicol et
Sabouraud-Chloramphnicol-Actidione, puis d'une incubation pour une dure dau moins 6 semaines.

69,23% des patients sont issus dun milieu rural et 30,76% dun milieu urbain, trois dentre eux portaient
des aides auditives, deux avaient un psoriasis gnralis, deux autres une maladie de Behet, et lun tait
trait pour un cancer colorectal, on compte aussi un sujet HIV positif.

Les espces retrouves sont: Microsporum canis (48,07%), Trichophyton rubrum, (42,3%), Trichophyton
violaceum (9,61%) et Trichophyton mentagrophytes (3,84 %).

On retrouve 21,15% datteintes primitives de loreille sans lsions distance, 50% dotomycoses avec
teigne du cuir chevelu, 28,84% de cas avec dermatophyties de la peau glabre, 9,61% avec onyxis, 11,53%
avec intertrigo, 1,92% avec hyperkratose palmaire et 1,92% avec folliculite dermatophytique du dos.

On conclue que lotomycose dermatophytique est plus frquente en milieu rural, avec une nette
prdominance masculine, Microsporum canis est majoritaire chez lenfant, et Trichophyton rubrum chez
ladulte, cela suppose un contact masculin plus troit avec les animaux ainsi qu'une hygine prcaire.

Lotomycose dermatophytique a t primitive surtout chez ladulte, ou associe d'autres localisations


chez l'enfant.

Les signes auriculaires sont minimes voire mme occults par un tableau de teigne plus bruyant chez
lenfant, ou une atteinte unguale ou cutane plus proccupante pour ladulte.

Ainsi, laffection doit tre envisage chez l'enfant, chez l'adulte, chez limmunodprim et le sujet atteint de
psoriasis, notre rflexe en tant que mycologues est d'essayer dintgrer le prlvement auriculaire dans
notre pratique courante.
A propos dun cas d'infection pulmonaire Magnusiomyces capitatus associ
Geotrichum candidum chez une patiente immunodprime
NGUYEN D. 1,2,3 * , MIOSSEC C. 1 , CABIE A. 2 , DESBOIS N. 1

1 Laboratoire de parasitologie-mycologie, CHU Martinique, Fort de France, France


2 Service de maladies infectieuses et tropicales, CHU Martinique, Fort de France, France
3 EA3593, Ecosystmes amazoniens et Pathologie Tropicale, Universit de la Guyane, Cayenne, France

*Auteur correspondant : duc1520@yahoo.fr

Introduction

Les infections Magnusiomyces capitatus (anciennement Geotrichum capitatum) et Geotrichum


candidum sont rares. M. capitatus et G. candidum sont des levures cosmopolites. M. capitatus est
considr comme pathogne mergent opportuniste chez les patients immunodprims. Nous dcrivons le
premier cas de co-infection pulmonaire M. capitatus et G. candidum chez une patiente prsentant un
adnocarcinome mammaire.

Observation
Une patiente de 65 ans tait hospitalise pour un bilan de dyspne dapparition rcente dans un contexte
daltration de ltat gnral. Cette patiente avait bnfici dune mastectomie en 2012 pour un carcinome
canalaire in situ droit.
Lexamen clinique rvlait un syndrome cave suprieur. Le scanner thoracique montrait des plages de
condensation des lobes suprieurs et moyens droits associes une lymphangite carcinomateuse avec
des polyadnopathies mdiastinales et hilaires ainsi que des mtastases hpatiques. Des panchements
pricardiques et pleuraux de grande abondance taient galement objectivs. Les rsultats anatomo-
pathologiques de la biopsie ganglionnaire au niveau mdiastinal confirmaient un adnocarcinome
moyennement diffrenci en faveur dune origine mammaire. Les bilans bactriologiques et virologiques
taient ngatifs.
Lexamen mycologique du lavage broncho-alvolaire a permis la visualisation de filaments mycliens
arthrospors et de rares levures bourgeonnantes, lexamen direct (coloration May-Grnwald Giemsa) et
lisolement en culture, sur Sabouraud chloramphnicole +/- actidione, 30C et 37C de M. capitatus et G.
candidum.
Un traitement antifongique na pas t initi devant le refus de la patiente. Aprs concertation
pluridisciplinaire, la patiente a bnfici dune prise en charge palliative. Lvolution tait rapidement
dfavorable conduisant au dcs de la patiente 4 jours aprs le diagnostic mycologique.

Discussion
Il existe moins de 100 cas rapports dinfections dissmines M. capitatus et G. candidum. Ces
champignons sont des levures ascomyctes pour lesquelles un portage pulmonaire est souvent retrouv.
Leur pathognicit dans les infections survient souvent sur un terrain dimmunodpression li une
hmopathie pour les quelques cas dcrits.
Le diagnostic mycologique de ces deux levures est bas sur la prsence commune de filaments et
darthrospores lexamen direct. Lisolement en culture sur milieu de Sabouraud 30C et 37C permet
lisolement de colonies blanches avec prsence de filaments arthrospors de grand diamtre, des
arthrospores +/- blastospores en fonction de lespce. Le traitement antifongique repose gnralement sur
une association damphotericine B et de 5-fluorocytosine.
Le rle de la pathologie noplasique sous-jacente et des pathognes opportunistes dans lvolution fatale
de ce cas sont discuter et renvoient au bnfice dune thrapeutique antifongique systmique.

Conclusion

La co-infection M. capitatus et G. candidum sur un terrain noplasique est exceptionnelle et permet de


nous sensibiliser sur lmergence de mycoses profondes atypiques.
Fast and accurate identification of molds and yeast-like fungi directly from
positive blood cultures by MALDI-TOF mass spectrometry
NOBREGA DE ALMEIDA JUNIOR J. 1 * , SZTAJNBOK J. 1 , DA SILVA JUNIOR A. 1 , GALASTRI A. 1 ,
BISSOLI L. 1 , BARBARO DEL NEGRO G. 2 , LOPES MOTTA A. 1 , ROSSI F. 1 , BENARD G. 2

1 University of So Paulo, So Paulo, Brazil


2 Tropical Medicine Institute of So Paulo, So Paulo, Brazil

*Auteur correspondant : jnaj99@gmail.com

Introduction: Molds and yeast-like fungi are potential life-threatening agents of fungemia in
immunocompromised patients. Fast and accurate identification (ID) of these pathogens helps to hasten the
best-targeted antifungal therapy, improving the patients prognosis. We describe a new strategy that
enabled the identification of molds or yeast-like fungi directly from positive blood culture (BC) by MALDI-
TOF mass spectrometry (MS).

Methods: BCs with Gram staining revealing arthroconidia and/or hyphae suggestive of fungemia by genera
other than Candida were prospectively selected from January to December 2015. Blood aliquots were
submitted to an in-house protein extraction protocol. Briefly, 4 ml aliquot was submitted to a lysis
centrifugation step (step a) followed by protein extraction with ethanol and 70% formic acid (step b). One
microliter of the supernatant was spotted in quadruplicate in MALDI-TOF MS target and overlaid with 1l of
-cyano-4-hydroxycinnamic acid matrix. The pathogens that grew on Sabouraud dextrose agar (SDA) after
72 hours incubation at 30C (standard procedure) were also analyzed by MALDI-TOF MS. A loop full of
conidia was suspended in 300l of deionized water and processed as in step b above. Protein mass
fingerprints were obtained using the MALDI-TOF Vitek MS system (bioMrieux) and processed by the
research use only (RUO) mode using an extended database [SARAMIS (v.4.12) plus in-house
database]. ID was valid when a spectrum matched with a SuperSpectrum with a confidence level 75%, as
defined by the manufacturer. The final IDs were confirmed by PCR and sequence analyses of either the
ITS/IGS regions of the ribosomal DNA, or the elongation factor-1 alpha gene.

Results: Until December 2015, seven potential non-Candida fungi were identified in blood cultures from six
immunocompromised patients and an additional patient under intensive care treatment due to thoracic
aortic dissection. In all cases, MALDI-TOF MS gave correct genus ID directly from positive BCs (confidence
levels 80-99.9%). Species ID was achieved in the cases of fungemia by Fusarium solani (n=2),
Trichosporon asahii (n=2) and Geotrichum clavatum (Saprochaete clavata), being the identification of
Exophiala dermatitidis and Fusarium verticillioides restricted to genus level. Identical ID results were
obtained from the isolates grown on SDA, but with higher confidence levels (96-99.9%). Five patients (#1-4
and #7) had targeted antifungal therapy guided by the MALDI-TOF MS species ID directly from positive
BCs; four of them survived (80%). Of these patients, four had risk factors of poor prognosis such as severe
neutropenia (neutrophils <100 cells/mm3) and/or renal failure; the remaining (#4) was under chemotherapy
and systemic corticosteroids at the moment of the catheter related bloodstream infection. Patient #2 had
persistent neutropenia and several positive BCs for Saprochaete clavata, and despite targeted dual
antifungal therapy with amphotericin B deoxycholate plus voriconazole promptly introduced after fungal ID,
deceased 18 days after the first positive BC. Patients #5 and #6 had Fusarium solani fungemia but MALDI-
TOF guided targeted antifungal therapy could not be prescribed in one (#5) because he died before final ID
of the fungemia and in the other (#6) because the patient was under palliative treatment; this patient died
subsequently due to a polymicrobial bloodstream infection.
Identification en ligne des moisissures et des dermatophytes
NORMAND A. 1 * , DJENAD F. 1 , BECKER P. 2 , GABRIEL F. 4 , GARY-TOUSSAINT M. 3 , CASSAGNE C.
1
, GAUTIER M. 1 , RANQUE S. 1 , ACCOCEBERRY I. 4 , MARTY P. 3 , HENDRICKX M. 2 , PIARROUX R. 1

1 Assistance Publique des Hpitaux de Marseille, Laboratoire de Parasitologie/Mycologie, Marseille,


France
2 Service of Mycology and Aerobiology, BCCM/IHEM Fungal Collection, Scientific Institute of Public Health,
Brussels, Belgium
3 Parasitologie/Mycologie, Centre Hospitalier Universitaire de Nice Hpital de LArchet, France
4 Centre Hospitalier Universitaire de Bordeaux, Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, F-33000
Bordeaux, France

*Auteur correspondant : anne-cecile.normand@ap-hm.fr

Lidentification des champignons filamenteux, pose de nombreux problmes. Elle requiert lintervention de
mycologues expriments qui, parfois, nauront dautre solution que de recourir une confirmation ou une
identification par biologie molculaire. En fait, les systmes commercialiss permettant une identification
extemporane des levures et des bactries par la technologie MALDI-TOF ne proposent pas de bases de
spectres de rfrence suffisamment toffes pour couvrir la diversit des moisissures et des
dermatophytes. Internet pourrait en partie rsoudre de problme en permettant aux quipes qui ont dj
constitu des banques de spectres de les mettre disposition, tout en conservant un contrle sur
lutilisation qui en est faite, et en facilitant la constitution de rseaux dutilisateurs pour dvelopper des
recherches communes.

Aprs avoir constitu, en collaboration avec la collection du BCCM (Belgian Coordinated Collections of
Microorganisms) une base de donnes de spectres issus de 2055 souches reprsentant 611 espces de
filamenteux et 190 espces de levures, nous avons dvelopp un portail web et un logiciel original
didentification des spectres. En parallle, une banque de spectres de rfrence comprenant les mmes
souches a t construite avec le logiciel MALDI Biotyper. Dans cette tude nous avons valu
lidentification de spectres obtenus partir de trois panels disolats de champignons filamenteux cultivs,
extraits et soumis une spectromtrie de masse dans trois sites diffrents (Bruxelles, Bordeaux et Nice).
Le panel belge tait constitu de 217 souches issues alatoirement de leur collection. Le panel bordelais
(164 souches) refltait lactivit dun laboratoire recevant des prlvements dorigines diverses, tandis que
le panel niois (124 souches) tait plus centr sur les dermatophytes. Pris ensemble ces trois panels
rassemblaient 146 espces et 48 genres diffrents. Les spectres obtenus ont t identifis avec le logiciel
MALDI Biotyper et, via internet, avec notre logiciel et la banque en ligne. Lexactitude de chacune des
identifications a t contrle par squenage de cibles ADN informatives (ITS, Beta-tubuline,
Calmoduline, Elongating factor). Selon les cas, ce squenage autorisait une identification lespce ou au
complexe despce.

Au total, 91.6% des souches ont t correctement identifies par le logiciel en ligne. Les erreurs
didentification taient exceptionnelles (0.6%). En revanche, dans 7.8% des cas, le seuil requis ntait pas
atteint. Les checs didentification taient plus frquents en cas de mycliums striles (21/31) alors que le
taux de russite atteignait 95.6% pour les colonies correctement dveloppes. Bien que les mmes
souches aient t utilises pour constituer la banque de rfrences avec le MALDI Biotyper, seulement
51.3% des isolats des trois panels ont pu tre identifis avec le seuil recommand par le fournisseur
(Logscore>=2). En abaissant ce seuil 1.7, le taux didentification progressait 74.8% mais il restait 23,6%
dchec didentification et 1,6 % derreurs. Par ailleurs, le temps danalyse pour une plaque de 96
chantillons tait de 90 secondes sur internet pour 58 minutes avec le MALDI Biotyper.

Ces rsultats, acquis avec un panel disolats particulirement vari et complexe, montrent que des progrs
considrables sont esprer en mycologie mdicale grce la constitution de bases de donnes de plus
en plus exhaustives et lutilisation des ressources internet.
Lsions cutanes monstrueuses au cours dune cryptococcose dissmine
RAISS C. 1,2 * , ELKHIHEL B. 1,2 , AOUFI S. 1,2 , LYAAGOUBI M. 1,2

1 Laboratoire centrale de parasitologie-mycologie mdicale de l'hpital Ibn Sina de Rabat, Maroc


2 Facult de mdecine et de pharmacie de Rabat - UM5S, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : r.chaimae25@gmail.com

La cryptococcose Cryptococcus neoformans est une levurose grave chez les patients immunodprims
en particulier ceux porteurs de VIH. Elle atteint volontiers le systme nerveux central sous forme dune
mningo encphalite mais peut atteindre dautres organes en particulier la peau et les poumons.

Nous rapportons le cas dune cryptococcose dissmine chez un patient o aucune tiologie dune
immunodpression na t retrouve.

Il sagit dun homme de 40 ans, leveur de pigeons, adress aux urgences pour altration de ltat gnral
et multiples nodules cutans. La maladie a dbut par des lsions cutanes multiples, violaces,
ombiliques et volumineuses au niveau du visage, de laine, de lavant bras et de la jambe qui ont
augment progressivement de volume, le tout dans un contexte damaigrissement et daltration de ltat
gnral. La prsence de levures encapsules de Cryptococcus neoformans dans la biopsie cutane et
dans le liquide cphalo rachidien a pos le diagnostic de cryptococcose dissmine. La srologie VIH est
revenue ngative deux reprises et le taux de CD4 tait de 317 lments/mm. La recherche
dhmopathies malignes et de tumeurs solides tait galement ngative. Le traitement instaur tait base
damphotricine B pendant 40 jours sans amlioration notable avec dcs du patient dans un contexte de
sepsis et daltration de ltat gnral.

La cryptococcose dissmine chez un patient immunocomptent est une situation rare en particulier le
caractre rapidement invasif des lsions cutanes. Une contamination massive en relation avec une
exposition continue une source dinfestation pourrait expliquer le phnomne.
Quand le cryptocoque colonise le tube digestif : A propos de 3 cas
RAISS C. 1,2 * , EL AMIN G. 1,2 , EL ANDALOUSSI K. 1,2 , MOUSTACHI A. 1 , LYAAGOUBI M. 1,2 , AOUFI S.
1,2

1 Laboratoire centrale de parasitologie-mycologie mdicale de l'hpital Ibn Sina de Rabat, Maroc


2 facult de mdecine et de pharmacie de Rabat- UM5S, Rabat, Maroc

*Auteur correspondant : r.chaimae25@gmail.com

La cryptococcose est une infection fongique cause par une levure capsule, Cryptococcus neoformans,
qui touche le plus souvent le systme nerveux central. Cest une infection opportuniste qui survient un
stade de dficit immunitaire profond surtout en cas datteinte par le VIH. La prsence de levures de
Cryptococcus neoformans dans les selles est exceptionnelle et trs rarement dcrite.

Notre travail est une tude rtrospective mene au laboratoire central de Parasitologie-Mycologie mdicale
de lhpital Ibn Sina de Rabat. Nous rapportons 3 cas rares de cryptococcose dissmine avec dtection
de levures de Cryptococcus neoformans dans les matires fcales.

Le diagnostic sest fait aprs examen direct lencre de chine, culture sur milieux Sabouraud, identification
sur Auxanogramme et recherche dantignes solubles de Cryptococcus neoformans dans les liquides
biologiques.

Les donnes pidmiologiques, diagnostiques, thrapeutiques et volutives ont t colliges partir des
registres du laboratoire et des dossiers mdicaux des patients.

Nos patients taient dorigine marocaine. Lge moyen tait de 31,6 ans. Le sexe fminin tait prdominant
avec 2 femmes pour 1 homme. Le tableau clinique a t domin par la fivre, les cphales et la diarrhe
et cest le diagnostic de cryptococcose dissmine qui rvla le dficit immunitaire chez les 3 patients.

La dtection de levures de Cryptococcus neoformans dans les matires fcales des patients sest faite de
manire fortuite lexamen parasitologique des selles la dcouverte de grosses levures encapsules. Un
bilan dextension la recherche dautres localisations sest rvl positif chez tous nos patients avec
dtection du cryptocoque dans le liquide cphalorachidien, le liquide bronchoalvolaire, le sang et aussi les
urines. Nos malades avaient bnfici dun traitement mdical lamphotricine B et au fluconazole.
Lvolution tait marque par le dcs de tous les patients.

La cryptococcose est une mycose opportuniste trs grave et la prsence de levures de Cryptococcus
neoformans dans les selles est une localisation rare et exceptionnelle, elle peut rvler la maladie. Elle ne
doit pas tre sous-estime et doit faire systmatiquement partie du bilan dextension aprs diagnostic dune
cryptococcose neuromninge.
Aspergillose invasive simultane point de dpart ombilical chez deux jumeaux
prmaturs
SABOU M. 1,2 * , GALLAIS F. 1 , DENIS J. 1,2 , KOOBAR O. 3 , DILLENSEGER L. 3 , ASTRUC D. 3 ,
HERBRECHT R. 4 , CANDOLFI E. 1,2 , LETSCHER-BRU V. 1,2

1 Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Mdicale, CHU de Strasbourg


2 Institut de Parasitologie et de Pathologie Tropicale, EA 7292, Strasbourg
3 Service de Ranimation Nonatale, Hpital de Hautepierre, CHU de Strasbourg
4 Service dHmatologie et dOncologie, Hpital de Hautepierre, CHU de Strasbourg

*Auteur correspondant : amsabou@unistra.fr

Laspergillose cutane primitive est une infection fongique rare qui survient la plupart du temps chez des
patients immunodprims. Les nouveau-ns de trs faible poids de naissance prsentent un risque lev
pour ce type d'infection en raison dune immaturit de la barrire cutane et du systme immunitaire. Nous
dcrivons ici un cas d'aspergillose invasive simultane point de dpart cutane chez deux jumeaux
prmaturs.

Deux jumeaux (A et B) issus dune grossesse bichoriale biamniotique obtenue par FIV sont ns (Jour 0)
24 semaines et 6 jours de gestation aux Hpitaux Civils de Colmar. Leur taux de polynuclaires
neutrophiles est normal alors que les lymphocytes sont modrment abaisss. Ds leur naissance ils sont
transfrs aux Hpitaux Universitaires de Strasbourg o ils reoivent du surfactant (maladie des
membranes hyalines), des antibiotiques (suspicion de chorioamniotite) et de lhydrocortisone (prvention
dune dysplasie bronchopulmonaire). Six jours aprs la naissance, le jumeau B prsente des lsions
verdtres dans la rgion ombilicale. Le spectre de lantibiothrapie est largi et le fluconazole est rajout.
Les cathters ombilicaux des deux jumeaux sont retirs et remplacs par des cathters veineux
picutano-caves. A J8 les cultures des deux cathters ombilicaux sont positives Staphylococcus
epidermidis et Aspergillus fumigatus (> 20 colonies). Le fluconazole est remplac par de lamphotricine
B liposomale (5 mg/kg/j) et les incubateurs sont changs. Le mme jour le galactomannane aspergillaire
srique est positif (index > 5,0) pour les deux jumeaux. Des lsions ombilicales apparaissent J10 chez le
jumeau A et stendent lensemble de labdomen. Malgr le traitement antibiotique et antifongique, il
dcde J18 suite des complications lies sa prmaturit. Pour le jumeau B, linfection cutane ne
stend pas et le galactomannane aspergillaire srique se ngative J30. Lamphotricine B liposomale est
arrte une semaine plus tard, avec un relai local par conazole (crme). Malgr la survenue dun sepsis
S. haemolyticus et dune dysplasie bronchopulmonaire, son tat samliore et il est transfr pour suivi aux
Hpitaux Civils de Colmar J66.

La source de contamination na pas t identifie, mais dautres cas similaires trouvs dans la littrature
citent les attelles utilises pour la fixation de voies veineuses, les couveuses, les capteurs des oxymtres
de pouls, les gants non striles en latex ou encore des bandes adhsives. La fragilit cutane des
nouveaux ns prmaturs constitue une excellente porte dentre potentielle pour les infections
champignons environnementaux, suspecter malgr le tableau clinique souvent atypique.
Etude de dermatophytes isols dans les services de revalidation et
physiothrapie dune structure hospitalire en rgion Ligeoise (Belgique)
SACHELI R. 1 * , UTRI T. 2 , HIDJABABDOULAYE A. 2 , ALFAGEME-GONZALEZ J. 3 , ADJETEY C. 2 ,
HAYETTE M. 1

1 Centre Hospitalier Universitaire de Lige, Service de Microbiologie Clinique-Centre National de


Rfrence pour les Mycoses, Lige, Belgique
2 Centre Hospitalier Universitaire de Lige, Service de Microbiologie Clinique, Lige, Belgique
3 Centre Hospitalier Universitaire de Lige, Service d'Hygine Hospitalire, Lige, Belgique

*Auteur correspondant : R.sacheli@chu.ulg.ac.be

Objectifs : Les dermatophytes sont responsables dinfections de la peau, des ongles et du cuir chevelu.
Les espces anthropophiles peuvent se transmettre dune personne une autre par un simple contact.
Leur prsence en milieu sportif a t largement dcrite (salles de sport, piscines, tatamis, douches
collectives, vestiaires des coles). Par contre, il existe peu d'articles dans la littrature concernant les
tablissements de soins. Cest pourquoi, nous nous sommes intresss au risque potentiel dinfection par
des dermatophytes en milieu hospitalier et particulirement dans les salles de kinsithrapie et de
revalidation ainsi que dans une piscine du Centre Hospitalier Universitaire (CHU) de Lige.

Matriel et mthodes :Trois sites du CHU de Lige ont t investigus: le site du Sart Tilman (ST), le site
Ourthe Amblve (OA) et le site Notre-Dame des Bruyres (NDB). Les prlvements ont t effectus en
salle de revalidation et kinsithrapie ainsi qu la piscine de revalidation. Ces prlvements ont t
raliss sur les surfaces laide de gloses de contact (milieu de
Sabouraud/chloramphnicol/actidione/gentamicine, Tritium Microbiologie, Pays-Bas). Lidentification des
espces fongiques a t ralise par observation macro-microscopique des cultures, spectromtrie de
masse (Maldi-Tof) et squenage molculaire.

Rsultats : Au total, 552 prlvements ont t raliss, parmi lesquels 15 dermatophytes ont t recenss
(2,72%). On retrouve les espces suivantes: 7 Trichophyton (T.) rubrum, 7 T. interdigitale, 1 T.
mentagrophytes var. mentagrophytes. Sur le site ST, 207 prlvements ont t effectus, parmi lesquels 4
T. rubrum, 1 T. interdigitale et 1 T. mentagrophytes var. mentagrophytes (zoophile). Sur le site OA, parmi
les 226 prlvements effectus, 4 Trichophyton interdigitale et 3 T. rubrum ont t retrouvs. Aucun
dermatophyte na t isol de leau de piscine ou pdiluve. Sur le site de NDB, parmi 119 prlvements,
seuls 2 isolats de T. interdigitale ont t identifis. Les prlvements positifs pour les dermatophytes
concernent des tapis de gymnastique, vlos, rameurs, balances, trampolines, demi-sphres dquilibre,
table de kinsithrapie, sols de douches et vestiaires de la piscine.

Conclusion: Grce ces investigations, nous avons pu mettre en vidence sur le matriel de revalidation
et les sols des vestiaires, la prsence de deux espces anthropophiles, T. rubrum et T. interdigitale,
frquemment impliques dans les cas donychomycoses et atteintes cutanes. Une souche zoophile de T.
mentagrophytes a galement t mise en vidence. Cette tude dmontre quun renforcement de la
frquence de nettoyage des sols et des instruments utiliss dans les salles de sport du CHU de Lige est
ncessaire de faon minimaliser les risques de contamination de patients et du personnel mdical.
Onychomycose Aspergillus flavus rsistant au cycloheximide: A propos d'un
cas
TLAMCANI Z. 1,2 * , LEMKHENTE Z. 3

1 Laboratoire de parasitologie mycologie CHU hassan II Fes Maroc


2 Facult de mdecine et de pharmacie de Fes
3 Facult de mdecine et de pharmacie de Oujda Maroc

*Auteur correspondant : tzineb81@gmail.com

Les onychomycoses sont des infections frquentes souvent dues des dermatophytes. Autres
champignons non dermatophytiques comme les Aspergillus sont devenus de plus en plus frquents.
Aspergillus flavus est un saprophyte des sols, des graines, des fruits et des vgtaux en dcomposition.
Nous rapportons un cas d'onychomycose Aspergillus flavus rsistant l'actidione chez une femme de 55
ans non immunodprime. Le diagnostic a t retenu sur examen direct et culture pure trois reprises les
colonies ont pouss sur les 2 milieux sabouraud chloranphenicol et sabouraud actidione. Le patient est mis
sous traitement antifongique.

aspect microscopique de la tte aspergillaire (bleu


lactophenol 400)
Liste des participants
Version au 16/03/2016

NOM Prnom Ville Pays Email


ABDELOUAHED Khaled Alger Algeria khaledabdelouahed1@gmail.com
ABOU BACAR Ahmed Strasbourg France aboubacar@unistra.fr
AKEL Zeineb Kenitra Morocco Zeineb.akel@gmail.com
AKHATAR Bouthaina Rabat Morocco dr.bouth@gmail.com
ALANIO Alexandre Paris France alexandre.alanio@pasteur.fr
ALAOUI Imane Rabat Morocco imanealaoui2009@live.fr
ALDEBERT Delphine La Tronche France delphine.aldebert@ujf-grenoble.fr
ALEPEE-FLEURET Andre Meylan France alepeera@free.fr
ALLAVOINE Thierry Courbevoie France thierry.allavoine@merck.com
ALLOUACHE Badreddine Constantine Algeria badallouache@yahoo.fr
ANGEBAULT Ccile Crteil France cecile.angebault@aphp.fr
ANGOULVANT Adela Le Kremlin Bictre France adela.angoulvant@aphp.fr
AOUN Karim Tunis Tunisia karim.aoun@pasteur.rns.tn
ARBAB Ahmadreza La Tronche France aarbab@chu-grenoble.fr
ARRACHE Dalila Alger Algeria dalilaarrache@yahoo.fr
AUBERT Dominique Reims France daubert@chu-reims.fr
AUBERT Brigitte baubert@gilson.com
BAILLY Sbastien Paris France sbailly@chu-grenoble.fr
BAILLY Eric Tours Cedex 9 France e.bailly@chu-tours.fr
BALDACCHINO Frdric San Michele All'adige Italy fredericbaldacchino@yahoo.fr
BASTIEN Matthieu Boult-Aux-Bois France bastien.matth@gmail.com
BASTIEN Patrick Montpellier France patrick.bastien@univ-montp1.fr
BELHADJ Slaheddine Tunis Tunisia slah.belhadj@topnet.tn
BEN ABDALLAH Rym Tunis Tunisia ismail_rym@yahoo.fr
BENSEGHIER Sofiane Staoueli Algeria sofianebenseghier@hotmail.com
BENTOUNSI Bourhane Constantine Algeria bbentounsi@umc.edu.dz
BERGER Guillaume Bry-Sur-Marne France contact@bio-evolution.fr
BERRY Antoine Toulouse France berry.a@chu-toulouse.fr
BERTRANPETIT Emilie Limoges France emilie.bertranpetit@etu.unilim.fr
BEYLS Nicolas Crissier Switzerland cb@bordier.ch
BLANCHARD Alexandra Nouzilly France alexandra.blanchard-letort@tours.inra.fr
BOIREAU Pascal Maisons Alfort France pboireau@vet-alfort.fr
BOIS SALVARO Guillaume Wissembourg France G.Bois-Salvaro@bruker.com
BOLAIS Paula Limoges France pfbolais@yahoo.com.br
BONHOMME Elodie Paris France elodie.bonhomme@meridianbioscience.eu
BONNET Pierre Nantes France pierre2bonnet@gmail.com
BONNET Julien Limoges France julien.bonnet.tlse@gmail.com
BORDIER Clment Crissier Switzerland cb@bordier.ch
BOTTEREL Franoise Crteil France francoise.botterel@aphp.fr
BOUDHANE Mohamed Lamine Alger Algeria mboudhane@yahoo.fr
BOUDOT Clotilde Limoges France boudot.clotilde@gmail.com
BOUE Franck Malzeville France franck.boue@anses.fr
BOUGDOUR Alexandre La Tronche France alexandre.bougdour@ujf-grenoble.fr
BOUGNOUX Marie-Elisabeth Paris Cedex 15 France marie-elisabeth.bougnoux@aphp.fr
BOUHRICHE Samir Courbevoie France samir.bouhriche@merck.com
BOUNIORT Fabrice Rotkreuz Switzerland Fabrice.bouniort@roche.com
BOURA Hasna Casablanca Morocco hasna.boura@pasteur.ma
BOURATBINE Aida Tunis Tunisia aida.bouratbine@pasteur.rns.tn
BRAHAMI Mohand Oukaci Tizi Ouzou Algeria brahamimohand@yahoo.fr
BRANCHU Arthur Limoges France arthur.branchu@gmail.com
BRAUN Laurence La Tronche France laurence.braun@ujf-grenoble.fr
BRENIER PINCHART M.pierre Grenoble France mpbrenierpinchart@chu-grenoble.fr
BRETAGNE Stphane Paris France stephane.bretagne@aphp.fr
BRUN Sophie Bobigny France sophie.brun@aphp.fr
BRUNET Kvin Poitiers France brunet.kevin.1@gmail.com
BRUNET Julie Strasbourg France julie.brunet@unistra.fr
CAMBIER Ludivine Lige Belgium ludivine.cambier@ulg.ac.be
CANCALON Franois Boulogne Billancourt France fcancalon@gilead.com
CANDOLFI Ermanno Strasbourg France candolfi@unistra.fr
CANNELLA Dominique Grenoble France dominique.cannella@ujf-grenoble.fr
CARGNELLO Raffaella raffaella.cargnello@roche.com
CARON Yannick Lige Belgium ycaron@ulg.ac.be
CASSAGNE Carole Marseille France carole.cassagne@ap-hm.fr
CASSAING Sophie Toulouse Cedex 9 France cassaing.s@chu-toulouse.fr
CAULE William w.caule@eurobio.fr
CHABASSE Dominique Angers France dochabasse@chu-angers.fr
CHAICHAN Patcharee Limoges France ben_patcharee@yahoo.fr
CHALABI Asma Annaba Algeria chalabiasma@live.fr
CHAMPLEVOUX Morgane Grenoble France Morgane.CHAMPLEBOUX@cea.fr
CHANDENIER Jacques Tours France jacques.chandenier@univ-tours.fr
CHARPENTIER Elena Grenoble France echarpentier2@chu-grenoble.fr
CHEHBOUB Selma Magda Alger Algeria magdanade@yahoo.fr
CHUMPITAZI Bernab La Tronche France bchumpitazi@chu-grenoble.fr
CLISSON Laetitia l.clisson@eurobio.fr
COGNET Odile Grenoble France ofaure@chu-grenoble.fr
COJEAN Sandrine Chatenay-Malabry France sandrine.cojean@u-psud.fr
COMPTOUR Marie Christine Lyon France marie-christine.comptour@astellas.com
CORNET Muriel Grenoble France mcornet@chu-grenoble.fr
COXAM Denis Courbevoie France denis.coxam@merck.com
CURAT Christine CCurat@accifr.com
DHUBERT Franois dhubert@ademtech.com
DA CUNHA Keith Genve Switzerland keithcassa.dacunha@hcuge.ch
DAHRAOUI Souhail Rabat Morocco souhail.dahraoui@gmail.com
DALLE Frderic Dijon France frederic.dalle@chu-dijon.fr
DANNAOUI Eric Paris Cedex 15 France eric.dannaoui@aphp.fr
DARD Cline Grenoble France cdard@chu-grenoble.fr
DARDE Marie-Laure Limoges Cedex 1 France darde@unilim.fr
DEBOURGOGNE Anne Nancy France annedebourgogne81@gmail.com
DECHENAUD Ludivine Le Pont De Claix France ludivine.dechenaud@bd.com
DELHAES Laurence Bordeaux France laurence.delhaes@chu-bordeaux.fr
DEMIANOZUCK Nadya-Alexanna Courbevoie France nadya-alexanna.demianozuck@merck.com
DENIS Julie Strasbourg France julie.denis@chru-strasbourg.fr
DENNING David Manchester United Kingdom mcornet@chu-grenoble.fr
DESBOIS Nicole Fort-De-France France nicole.desbois@chu-fortdefrance.fr
DESCHAMPS Nathalie La Tronche France nathalie.deschamps@ujf-grenoble.fr
DIALLO Mamadou Amadou Nouzilly France mamadou.diallo@tours.inra.fr
DINIA Doha Rabat Morocco doha.dinia@yahoo.fr
DORBANI Soror 16000 Algeria s.dorbani23@gmail.com
DOUMBIA Mariam Rabat Morocco maria_dou73@yahoo.fr
DREYFUSS Gilles Limoges France gilles.dreyfuss@unilim.fr
DUPONT Herv Amiens France Dupont.Herve@chu-amiens.fr
DUPONT Damien Lyon Cedex 04 France damien.dupont@chu-lyon.fr
DUVALLET Grard Montpellier France gerard.duvallet@univ-montp3.fr
EL ABBASSI Soukaina Rabat Morocco dr.soukainaelabbassi@gmail.com
EL ALAOUI EL ABDALLAOUI Myriem Rabat Morocco elalaouimyriem@gmail.com
EL AMIN Ghizlane Rabat Morocco ghizlane.elamin@live.fr
EL ANDALOUSSI Kenza Rabat Morocco elandaloussi-kenza@hotmail.com
ELOY Odile Le Chesnay France eloyodile98@gmail.com
FALABREGUES Amlie Courbevoie France amelie.falabregues@merck.com
FANNAN Yacir Coubevoie France yacir.fannan@merck.com
FAVENNEC Loc Rouen France loic.favennec@chu-rouen.fr
FAWAY Emilie Namur Belgium emilie.faway@unamur.be
FEKKAR Arnaud Paris Cedex 13 France arnaud.fekkar@aphp.fr
FOUSSADIER Agnes Marcy L'etoile France agnes.foussadier@biomerieux.com
FREALLE Emilie Lille France emilie.frealle-2@univ-lille2.fr
FREICHELS Astrid Lige Belgium a.freichels@ulg.ac.be
FRICKER HIDALGO Hlne Grenoble France HFricker-Hidalgo@chu-grenoble.fr
GABRIEL Frdric Bordeaux Cedex France frederic.gabriel@chu-bordeaux.fr
GANGNEUX Jean-Pierre Rennes France jean-pierre.gangneux@univ-rennes1.fr
GARI-TOUSSAINT Martine Nice Cedex 3 France gari-toussaint.m@chu-nice.fr
GARNAUD Ccile Grenoble Cedex 9 France cgarnaud@chu-grenoble.fr
GAY-ANDRIEU Franoise Marcy L'etoile France francoise.gay-andrieu@biomerieux.com
GENOUX Florent Crissier Switzerland cb@bordier.ch
GODICHAUD Sandrine Pessac France godichaud@ademtech.com
GOURDON Magali Levallois-Perret Cedex France magali.gourdon@astellas.com
GOVIN Jrme Grenoble France jerome.govin@cea.fr
GREIGERT Valentin Strasbourg France valentin.greigert@gmail.com
GRENOUILLET Frdric Besancon France fgrenouillet@chu-besancon.fr
GRIGG Michael E. Bethesda MD USA griggm@niaid.nih.gov
GRILLOT Rene La Tronche France renee.grillot@ujf-grenoble.fr
GUDER Franois Rungis France francois.guder@abbott.com
GUIGUEN Claude Rennes France claude.guiguen@univ-rennes1.fr
GUILLAUD-SAUMUR Thibaud Brest France thibaud.guillaud-saumur@chu-brest.fr
GUY David dguy@acciuk.co.uk
GUZZO Marjolaine mguzzo@gilead.com
HAKIMI Mohamed-Ali Grenoble France Mohamed-Ali.HAKIMI@ujf-grenoble.fr
HAMOUDI-ADJMI Haiete Alger Algeria ahaiet@yahoo.fr
HASSEINE Lilia Nice France HASSEINE.L@CHU-NICE.FR
HAYETTE Marie-Pierre Lige Belgium mphayette@chu.ulg.ac.be
HENNEQUIN Christophe Paris France christophe.hennequin-sat@aphp.fr
HOMMEL Benjamin Paris France benjamin.hommel@pasteur.fr
HOUZE Sandrine Paris France sandrine.houze@aphp.fr
IKEN Maryem Rabat Morocco bousnour@yahoo.fr
IMBERT Christine Poitiers Cedex 9 France christine.imbert@univ-poitiers.fr
IRIART Xavier Toulouse Cedex 9 France iriart.x@chu-toulouse.fr
IZRI Arezki Bobigny Cedex France arezki.izri@aphp.fr
JENSEN Ccile Avignon France cjensen@ch-avignon.fr
JOLLY Jrome jolly@ademtech.com
JOLY Renaud Wissembourg France Renaud.Joly@bruker.com
KABBAGE Samia Rabat Morocco samiakabbage@gmail.com
KAHN Philippe Strasbourg France philippe.kahn@chru-strasbourg.fr
KARADJIAN Grgory Maisons Alfort Cedex France gregory.karadjian@anses.fr
KARAOUZENE Mouna Alger Algeria mkaraouzene@yahoo.fr
KAUFFMANN-LACROIX Catherine Poitiers France catherine.kauffmann-lacroix@chu-poitiers.fr
KNOERR Caroline Levallois Perret France caroline.knoerr@astellas.com
LABBE Franck Montivilliers France franck.labbe@ch-havre.fr
LACHAUD Laurence Montpellier Cedex 5 France llachaud@gmail.com
LACROIX Claire Thiers France clacroix.myco@gmail.com
LANG Ccile Strasbourg France cecile.lang@unistra.fr
LANTERNIER Fanny Paris France fanny.lanternier@aphp.fr
LE BOUAR Marine Toulouse France marine.le-bouar@inserm.fr
LE GAL Solne Brest France solene.legal@univ-brest.fr
LE GOUELLEC Audrey audrey.legouellec@gmail.com
LE GOVIC Yohann Angers Cedex 9 France yohann.legovic@chu-angers.fr
LEAU Jrme Paris France Jerome.Leau@pfizer.com
LEBEAU Bernadette jgrlebeau@gmail.com
LECHAT Sylvie Charleville-Mzires France slechat@ch-charleville-mezieres.fr
LEHRTER Vronique Reims France veronique.lehrter@univ-reims.fr
LENORMAND Jean-Luc jllenormand@chu-grenoble.fr
LEPOUTRE Xavier Roubaix France xavier.lepoutre@ch-roubaix.fr
LEVAST Marion Chambery Cedex France marion.levast@ch-metropole-savoie.fr
LIMONNE Denis Lyon France Dlimonne@ldbiodiag.com
LMIMOUNI Badre Eddine Rabat Morocco b.lmimouni@um5s.net.ma
LOEFFERT Sophie Lyon France sophie.loeffert01@chu-lyon.fr
LOISEAU Philippe Chtenay-Malabry France philippe.loiseau@u-psud.fr
MADIGOU Erwann Bry-Sur-Marne France contact@bio-evolution.fr
MAIRET Mlissa Toulouse France melissa.ma-kh@live.fr
MANDRAN Vronique veronique.mandran@roche.com
MANGANI Fabrice fmangani@gilson.com
MARTIN Coralie Paris France cmartin@mnhn.fr
MARTY Pierre Nice Cedex 3 France marty.p@chu-nice.fr
MAUBON Danile Grenoble France dmaubon@chu-grenoble.fr
MAZOUZ Asma Alger Algeria asmamazouz@live.fr
MENARD Sandie Toulouse France sandie.menard@inserm.fr
MENOTTI Jean Paris France jean.menotti@aphp.fr
MIETTON Flore Grenoble France flore.mietton@ibs.fr
MILLET Aurlien Levallois Perret France aurelien.millet@astellas.com
MILLION ASFELD Laurence Besancon France lmillon@chu-besancon.fr
MIREMONT Louis Courbevoie France louis.miremont@merck.com
MOULINE Souhail Rabat Morocco mouline.souhail@gmail.com
MURAT Jean-Benjamin Limoges Cedex France jean-benjamin.murat@chu-limoges.fr
MZABI Alexandre Reims France amzabi@chu-reims.fr
NAFIS Ahmed Marrakech Morocco ahmed.nafis@edu.uca.ma
NAPOLI Sandrine sandrine.napoli@abbott.com
NGABA Guy Pascal Douala Cameroon pascalngaba1974@gmail.com
NOBREGA DE ALMEIDA JR Joo So Paulo Brazil jnaj99@gmail.com
NOURRISSON Cline Clermont-Ferrand France c_nourrisson@chu-clermontferrand.fr
NUNES Anne Marie anne-marie.nunes@astellas.com
PAGABELEGUEM Soumala Bordeaux France laurence.delhaes@gmail.com
PALENCIA Andres La Tronche France andres.palencia@ujf-grenoble.fr
PAPON Nicolas Angers France nicolas.papon@univ-angers.fr
PECOUT Marjorie marjorie.pecout@bd.com
PELLOUX Herv Grenoble France hpelloux@chu-grenoble.fr
PERLIN David Newark United States mcornet@chu-grenoble.fr
PERROCHET Patricia La Tronche France Patricia.perrochet@ujf-grenoble.fr
PERSAT Florence Lyon Cedex 04 France florence.persat@chu-lyon.fr
PETOSA Carlo Grenoble France carlo.petosa@ibs.fr
PINEL Claudine Montbonnot France claudine.pinel@orange.fr
PODAC Bianca Chalon-Sur-Saone France bianca.podac@ch-chalon71.fr
POIRIER Philippe Clermont-Ferrand France ppoirier@chu-clermontferrand.fr
PRUDENT Eric Courbevoie France eric.prudent@merck.com
RAISS Chaimae Rabat Morocco r.chaimae25@gmail.com
RAR Layla Rabat Morocco rarleila@hotmail.com
RASAMOELINA Tahinamandranto Antananarivo Madagascar mandranto@cicm-madagascar.com
RAZAKANDRAINIBE Romy Rouen France romy.razakandrainibe@univ-rouen.fr
REBOUX Gabriel Besanon greboux@chu-besancon.fr
RICHARME Claire La Tronche France cricharme@chu-grenoble.fr
RIOU Mickal Nouzilly France mickael.riou@tours.inra.fr
ROBERT Raymond Avrill France raymond.robert@sr2b.fr
ROBERT Gladys La Tronche France mrobert2@chu-grenoble.fr
ROBERT-GANGNEUX Florence Rennes France florence.robert.gangneux@chu-rennes1.fr
RUIZ Christelle Courbevoie France christelle.ruiz@merck.com
SABOU Marcela Strasbourg France amsabou@unistra.fr
SACHELI Rosalie Lige Belgium R.sacheli@chu.ulg.ac.be
SANGLARD Dominique Lausanne Switzerland Dominique.Sanglard@chuv.ch
SASSO Milne Nimes France milene.sasso@chu-nimes.fr
SCHUTTLER Christine Courbevoie France c.schuttler@bioparisouest.fr
SEBBAR El-Houcine Rabat Morocco sebbarelhoucine@gmail.com
SEMMANI Malika Alger Algeria hanine1980@yahoo.fr
SIALA Emna Tunis Tunisia emnasiala99@gmail.com
SIMON Julie Reims France julie.rabeisensimon@gmail.com
SITTERL Emilie Paris France emilie.sitterle@pasteur.fr
SOUSSI ABDALLAOUI Maha Casablanca Morocco maha.soussi@yahoo.fr
STARCHIK Olga Saint Ouen France olga.starchik@quintiles.com
TARDIEUX Isabelle isabelle.tardieux@gmail.com
TELLIER Sandrine Marcy L 'etoile France Sandrine.TELLIER@biomerieux.com
THIEBAUT BERTRAND Anne Grenoble France AThiebautbertrand@chu-grenoble.fr
TLAMCANI Zineb Fes Morocco tzineb81@gmail.com
TOUBAS Dominique Reims Cedex France dtoubas@chu-reims.fr
TOUSSAINT Bertrand btoussaint@chu-grenoble.fr
TRABELSI Sonia Tunis Tunisia trabelsi.sonia@gmail.com
VALOT Stphane Dijon France stephane.valot@chu-dijon.fr
VILLARD Odile Strasbourg France ovillard@unistra.fr
VILLENA Isabelle Reims France ivillena@chu-reims.fr
VINCENDEAU Philippe Bordeaux France philippe.vincendeau@u-bordeaux.fr
YERA Helene Paris France helene.yera@aphp.fr
ZAIT Houria Alger Algeria houria.zait@yahoo.fr