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FICHE TECHNIQUE GALERIE API 20E MICRO-GALERIE

PRINCIPE :
Le systme API BioMrieux (Appareillage et Procd dIdentification) est une version miniaturise et standardise
des techniques biochimiques conventionnelles pour lidentification des bactries.

Lorquune suspension bactrienne de densit convenable est rpartie dans les diffrentes alvoles qui composent la
microgalerie (contenant de substrats dshydrats), les mtabolites produits durant la priode dincubation se
traduisent par des changements de couleur spontans ou rvls par addition de ractifs.

Elle permet lidentification dune centaine de bacilles Gram ngatif dont les Entrobactries.
Elle comprend 20 tests biochimiques.

TECHNIQUE :

Prparation de la galerie
Runir fond et couvercle dune bote dincubation et rpartir de leau dans les alvoles pour crer une
atmosphre humide.
Dposer strilement la galerie dans la bote dincubation

Prparation de linoculum
Ouvrir une ampoule de Suspension Medium (ou un tube deau distille strile)
Prlever une seule colonie bien isole sur milieu glos
Raliser une suspension bactrienne faible (opacit 0,5 sur lchelle Mc Farland)

Inoculation de la galerie

Remplissage des tubes :


Remplir les tubules et les cupules des tests du type CIT
Pipette Pasteur

Cupule
Remplir les tubules des tests du type ADH et remplir la cupule
avec de lhuile de paraffine, pour crer lanarobiose.
Tubule

Remplir uniquement les tubules des tests restants Remplir en posant la pipette
contre la paroi de la cupule.

Remarque : il est important de veiller ne pas crer de bulles lors de linoculation qui pourraient fausser le
rsultat. De plus lapparition de bulles aprs incubation apportera un caractre didentification supplmentaire
(GAZ+)

RESULTATS :
Noter sur la fiche de rsultats toutes les ractions spontanes.
Raliser les tests ncessitant laddition de ractifs : Test VP, TDA, IND, Nitrate rductase

IDENTIFICATION :
Avec le tableau didentification : comparer les ractions notes sur la fiche de rsultats avec celle du
tableau : chaque cellule de ce tableau contient les pourcentages de positivit
Avec le catalogue analytique : Les tests sont regroups en groupe de 3, et une valeur (1, 2 ou 4) est
indique pour chacun. Additionner lintrieur de chaque groupe les nombres correspondants aux tests positifs.
On obtient un nombre 7 chiffres qui sert de code didentification
Avec un logiciel didentification
TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISEE API 20E
Microtube Substrat Caractre recherch Lecture directe ou indirecte (Test si ncessaire) Rsultat + Rsultat -

ONPG Ortho-Nitro-Phnyl-Galactoside -galactosidase Lecture directe

ADH Arginine Arginine dihydrolase


LDC Lysine Lysine dcarboxylase Lecture directe
ODH Ornithine Ornithine dcarboxylase

CIT Citrate Utilisation du citrate Lecture directe

H2S Thiosulfate de sodium Production dH2S Lecture directe

URE Ure Urase Lecture directe

Lecture indirecte
TDA Tryptophane Tryptophane dsaminase
Test : ajouter 1 goutte de Perchlorure de Fer

Lecture indirecte
IND Tryptophane Production dindole
Test : ajouter 1 goutte de ractif de Kovacs

Lecture indirecte (Attendre 10 minutes)


VP Pyruvate de sodium Production dactone
Test : ajouter 1 goutte de KOH et d-napthol

Glatine emprisonnant des


GEL Glatinase Lecture directe
particules de charbon

GLU ARA Substrat carbon Utilisation de substrat carbon Lecture directe

Lecture indirecte dans la cupule GLU


NO2 N2
-/ Nitrates (NO3) Nitrate rductase Test : ajouter 1 goutte de ractif de Griess
Ajouter de la poudre zinc en cas de rsultat ngatif
TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISEE API 20E
Microtube Substrat Caractre recherch Lecture directe ou indirecte (Test si ncessaire) Rsultat + Rsultat -

ONPG Ortho-Nitro-Phnyl-Galactoside -galactosidase Lecture directe

ADH Arginine Arginine dihydrolase


LDC Lysine Lysine dcarboxylase Lecture directe
ODH Ornithine Ornithine dcarboxylase

CIT Citrate Utilisation du citrate Lecture directe

H2S Thiosulfate de sodium Production dH2S Lecture directe

URE Ure Urase Lecture directe

Lecture indirecte
TDA Tryptophane Tryptophane dsaminase
Test : ajouter 1 goutte de Perchlorure de Fer

Lecture indirecte
IND Tryptophane Production dindole
Test : ajouter 1 goutte de ractif de Kovacs

Lecture indirecte (Attendre 10 minutes)


VP Pyruvate de sodium Production dactone
Test : ajouter 1 goutte de KOH et d-napthol

Glatine emprisonnant des


GEL Glatinase Lecture directe
particules de charbon

GLU ARA Substrat carbon Utilisation de substrat carbon Lecture directe

Lecture indirecte dans la cupule GLU


NO2 N2
-/ Nitrates (NO3) Nitrate rductase Test : ajouter 1 goutte de ractif de Griess
Ajouter de la poudre zinc en cas de rsultat ngatif

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