Aislamiento e identificacin de la bacteria del gnero Erwinia a partir del

Pseudotallo de pltano (Musa paradisiaca) en la universidad de los Llanos.

METODOLOGA

Se inici observando el sntoma en el Pseudotallo, se cortaron dos pequeos

trozos de la parte afectada se incubaron en un tubo de ensayo con agua estril y
se agitaron por un minuto, con un Asa debidamente flameada o estril se tom
una pequea gota de agua y se sembr por agotamiento en medio PDA; despus
de ocho das de la siembra se realizaron pruebas bioqumicas pero no se lograron
buenos resultados, as que, se repiti la siembra 24 horas antes de realizar las
pruebas bioqumicas, en donde se realiz prueba de confirmacin con KOH-
tomando una pequea parte de las colonias observadas colocndola en un porta
objetos, seguidamente se adicion una gota de KOH - y se realiz pequeos
movimientos en forma de circulo con el Asa, de manera que se observara un
pequeo hilo transparente. Tambin se realiz prueba de catalasa donde se tom
una pequea porcin de las colonias y se coloc en una gota de perxido de
hidrogeno sobre un portaobjetos, donde se observ el resultado siendo positivo si
en la colonia haba efervescencia. Se realiz la prueba de oxidasa, en la cual se
tom una tirilla (test) y se aadi una pequea parte de las colonias y se observ
la reaccin siendo positivo indicando un color prpura y negativo la ausencia del
mismo. Por ltimo se realiz la prueba de O/F donde se usa el medio bsico de
Hugh y Leisfon donde se tomaron dos tubos con un medio semislido de color
verde los cuales de inocularon por picadura, dejando uno sin cera y otro
debidamente sellado con cera. Observando cambio de color del medio. Y se
realiz siembra en medios diferenciales como YDC (Extracto de levadura
dextrosa-carbonato de calcio.) para observar fluorescencia de las colonias, para
esto se utiliz la cmara UV y en KB (Agar King B), para observar coloracin
amarilla de las mismas.

RESULTADOS

PRUEBA DE CONFIRMACIN KOH-

En esta prueba bioqumica dio como resultado un pequeo hilo de color

transparente lo que confirmaba positivo para bacterias (Gram -) como lo muestra

la imagen 1.
 Img.1 Prueba de confirmacin KOH-
positiva para bacterias Gram Negativas.

PRUEBA OXIDASA

Como resultado de esta prueba fue positivo ya que, se observ en la

tirilla un cambio de color notorio en menos de 5 minutos, siendo prpura

para oxidasa como se observa en la imagen 2. En caso de ser negativa no se

observa cambios de color.

Img 2. Prueba oxidasa positiva color

prpura para bacterias Gram+

PRUEBA DE CATALASA

En esta prueba se observ la efervescencia al momento de aplicar sobre las

colonias de bacterias el

Perxido de Hidrogeno, cmo se logra ver en la imagen 3 dentro de la

circunferencia.
 Img 3. Prueba catalasa positiva con
reaccin de efervescencia

PRUEBA O/F

En esta prueba se utiliz el medio bsico de Hugh y Leisfon, donde se obtuvo

como resultado en los casos tanto aerobio como anaerobio (sin presencia de
oxgeno) una coloracin verde, y en la superficie una coloracin amarillosa muy
carente como se ve en el tubo con presencia de oxgeno (aerobio). Cmo se logra
observar en la imagen 4.

cera

Img 4. Prueba de O/F en medio bsico de

Hugh y Leisfon.

PRUEBA DE FLUORESCENCIA

En esta prueba el medio que se utilizo fue YDC, en el cual si hubo crecimiento de
las colonias de la bacteria pero al observarla en la cmara UV no se logro ver la
fluorescencia que se esperaba para este caso fue negativo como se logra ver en
la imagen 5.

Img 5. Prueba de fluorescencia en medio

YDC.

PRUEBA DE COLORACIN AMARILLA

Esta se hizo en medio KB para observar si las colonias que se desarrollaron eran
de color amarillo o de otro color como blancas o crema, en tal caso sera negativo,
tal y como lo obtuvimos en nuestra prueba. Esto lo podemos observar en la
imagen 6.

Img 6. Prueba de coloracin amarilla de las

colonias en medio KB.