EVALUANDO EL SISTEMA INMUNE EN LAS DIFERENTES

ESTRATEGIAS DE MANEJO

Autor: Luis Felipe Caron (lfcaron@ufpr.br)

Traducción: Alindor Atahopilco Otolea

En la avicultura industrial actualmente, la presión por resultados denota la excelencia que

debe ser alcanzada en todos los compartimentos de la explotación, sean estos nutricionales,
sanitarios, ambientales, etc. La importancia de la capacidad de respuesta a los desafíos, por
medio del sistema inmune, y su correlación negativa con los parámetros zootécnicos, se
torna en uno de los principales valores en el desarrollo de estrategias que busca la
generación de nuevos productos, como por ejemplo las vacunas y los llamados “inmuno
estimulantes”. La eficacia de estos productos y la determinación del mejor momento de
uso, vienen como una necesidad de ser medidos sus efectos, exige de otro lado la
implementación de herramientas útiles en el campo.

En este sentido la posibilidad de evaluación del sistema inmune y del efecto de las
diferentes drogas, ha permitido el uso de la citometría de flujo para la generación de
protocolos confiables y para la determinación de demandas futuras con la finalidad de
explorar de mejor forma la capacidad de respuesta inmune de las aves, aliada a la mejor
utilización de protocolos preventivos, curativos o incluso de suplementación, determinando
un punto fundamental en la avicultura, principalmente de corte, que es el costo beneficio.

Los momentos de éxito o falla en la capacidad de luchas contra los desafíos en campo son,
en última instancia, evaluados por la propia sobrevivencia de las aves a lo largo del tiempo.
Superada esta condición, sin la cual obviamente, no hubieran otras demandas, que tiene que
ser la de buscar ganancias. En esta balanza las estrategias mas impactantes en la actualidad
han surgido, al final comparándose dos explotaciones donde todas las aves llegan a edad de
beneficio, el mercado dará oportunidad a aquella que analizo mejor sus riesgos, gerenció
los mismos y dio mas ganancia. A pesar de las particularidades de cada región del país, la
avicultura brasilera enfrenta en diferentes grados, desafíos comunes relacionados a
enfermedades en campo, la calidad de materia prima para la alimentación y el ambiente.

De manera general estas situaciones son controladas con diferentes protocolos de

vacunación, manejo de ambiente, implementación en la calidad de alimentación, que
involucra el uso de diferentes suplementos alimentarios, pasando por los pre y probióticos,
los absorbentes, ácidos orgánicos, entre otras tantas posibilidades. Los monitoreos para el
aislamiento de agentes infecciosos o incluso por PCR deben permitir una inferencia directa
de la situación de la realidad analizada y direccionar las medidas necesarias. De una manera
más actual muchas veces el análisis serológico de lotes y consecuente medición de
anticuerpos permite configurar panoramas de desafíos en campo, capacidad de respuesta
inmune y efecto de las vacunaciones.

El uso de la citometría de flujo deberá ser mas una estrategia para orientar el manejo de
lotes y principalmente ratificar el efecto de las nuevas medidas que buscaran fomentar la
capacidad de respuesta inmune. En la práctica se puede vislumbrar su uso de diferentes
maneras. Al principio es necesaria la creación de los modelos de resultados, dependiendo
de las células que se quieren evaluar. Como existen pocas referencias sobre el tema, es
natural que la determinación de estos modelos encuentre situaciones de alta variabilidad.
De cualquier forma lo que se encuentran son tendencias comunes en diferentes situaciones,
cuando se analizan aves SPF, o incluso aves de campo (Figura 2). En los valores absolutos
la determinación de la tendencia en el modelo de las células inmune permite ya una
conclusión interesante, porque puede inferir la inmuno-competencia de las aves o incluso
indicar algún desequilibrio, sin necesariamente apuntar la causa del mismo.

Es en este punto que se busca evaluar el efecto que diferentes enfermedades podrían tener
en estas tendencias asociadas a las células analizadas. Las células escogidas para analizar
en citometría incluirán los marcadores de linfocitos T, de tipo CD4, CD8, CD28, MHC-I,
MHC-II, TRC-1 y TRC-2. Resumidamente se podría justificar la importancia de estas
células de la siguiente manera: Después de la entrada de un antígeno en un animal la
respuesta al mismo debe ser equilibrada en humoral y celular, principalmente contra los
virus. Para bacterias extracelulares y toxinas, principalmente humoral y bacterias intra-
celulares igual como para los virus, con algunas diferencias en respuesta celular. El inicio
de la respuesta inmune no se da por reconocimiento de un antígeno soluble libre, pero si de
un complejo antígeno-MHC en la superficie de las células presentadoras profesionales de
antígeno (macrófagos y células dendríticas). Dependiendo del tipo de MHC ligado, se tiene
la dirección de la respuesta.

Antígenos generados dentro de las células ligadas al MHC-I, o sea, vacunas con virus
atenuados que se replican permiten la unión a este MHC. Antígenos extra-celulares que son
fagocitados por los macrófagos o células dendríticas, se unen al MHC-II, o sea, vacunas
con virus inactivados o toxinas se unen a este MHC. Significa que toda vez que el MHC-I
sea utilizado (vacuna replicante) la presentación del antígeno será hecha al linfocito T CD8
que desarrolla a Linfocito T citotóxico, y de esta forma vacunas vivas incitan clásicamente
la respuesta celular. Al mismo tiempo los restos de antígenos liberados de las células
infectadas muertas y antígenos extracelulares al unirse al MHC-II serán presentados al
Linfocito T CD4, que se diferencia en Linfocito T auxiliar, pudiendo generar dos tipos de
respuesta: a TH1 (activación de macrófagos y auxilio al CD8) y a TH2 (activación de
Linfocitos B que desarrollan a plasmocitos culminando con producción de anticuerpos). La
medición de estos receptores de forma conjunta o aislada, puede indicar que tipo de
respuesta el organismos esta buscando y principalmente apuntar el porque de algunas fallas
en los protocolos utilizados no son percibidas con el uso de técnicas tradicionales.

Se puede evaluar en los gráficos abajo, los resultados obtenidos en pruebas de desafío con
virus de Bronquitis infecciosa, Gumboro, Salmonella y coccidiosis (figura 1). Otra forma
de usar esta herramienta, en valores relativos, que puede observarse cuando se prueba la
acción de productos diferentes “inmuno-estimulantes” en la presencia de un desafío como
Salmonella (Figura 3). ±
 Interaccion Bar Plot para CD8 alfa
Efecto: Colum na 1
Error de barras: ±1 desv estd
25
20

Prom edio
15
Celular 10
5
0
Control G8 G9 G10 G11
Celulas

Figura 1: Dinámica de células citotóxicas después de diferentes desafíos en relación al control

Interaccion Bar Plot para MHC

Efecto: Grupos
18
16
14
12
Prom edio
Celular

10
8
6
4
2
0
Aves comunes SPF
Celulas

Figura 2: Diferencia en la expresión de MHC-I en aves SPF y comunes

Interaccion Bar Plot para CD8 alfa alto

Efecto: Colum na 1
2.25
2.00
1.75
1.50
Prom edio

1.25
Celular

1.00
0.75
0.50
0.25
0.00
T1 T2 T3 T4 T5 T6
Celulas

Figura 3: Efecto del uso de “inmuno-estimulantes” en desafíos con Salmonella

La evaluación de la dinámica de estas células puede ser, en la práctica una medida muy
sensible cuando se compara con las herramientas actuales de sero-conversión e incluso la
presencia de lesiones actuales por acción del agente en estudio. Además de la simple
presencia o del aspecto morfológico de la célula, la medida de estos marcadores dará un
panorama funcional de respuesta, cuando se permite evaluar que tipo de célula se esta
midiendo, como por ejemplo, células vírgenes (ingenuo), células activas, o de memoria. La
comprensión cada vez más clara de los resultados y el afianzamiento del uso de estas
técnicas, podrá contribuir para el mejoramiento necesario en la avicultura. Son
consecuencias de las demandas hechas y de la modernización cada vez mas apremiante de
este tipo de actividades, donde la presencia de profesionales cada vez mas capacitados y de
empresas cada vez mas comprometidas, pudieron garantizar la posición y el desarrollo del
país.