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INDICE
Pgs.

Introduccin. 3
Objetivos.. 4
I PARTE: verificacin de Ca en muestra de complemento nutricional en polvo
Marco Terico 5
Procedimiento.8
Clculos9
Resultados.. 9-10
II PARTE: Determinacin del tamao de la molcula de Verde Bromocresol
Marco Terico 11
Clculos12
Resultados . 12-13.

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INTRODUCCION
La determinacin de calcio se puede llevar a cabo mediante espectrofotometra de
absorcin atmica (AAS) empleando una llama de aire/acetileno. La presencia de
fosfatos, Al, Si y Ti en el agua constituye una interferencia qumica, pues la
formacin en la llama de compuestos refractarios como oxisales estables, fosfato
clcico o fosfato magnsico, impide la atomizacin de ambos elementos, dando
lugar a un descenso en la seal. Para evitar este problema se aade a las
muestras que se van a medir una disolucin de lantano, el cual reacciona con el
fosfato dejando libre al calcio y al magnesio
La espectroscopia de absorcin atmica de llama es en la actualidad el mtodo
atmico ms utilizado de entre los mtodos espectrales atmicos comunes, por su
simplicidad, efectividad y costo relativamente bajo.
Tpicamente, la absorcin de la radiacin procedente de una fuente externa por las
especies atmicas existentes en una llama presenta la forma de una serie de
picos estrechos (lneas o rayas) que resultan de transiciones de un electrn desde
el estado fundamental a un nivel energtico superior. Es importante subrayar que
la longitud de onda de una raya absorbida es igual a la longitud de onda de la raya
emitida cuando el electrn vuelve del estado excitado al estado fundamental. Es
decir, la absorcin atmica utiliza rayas de resonancia.
Se usan dos tipos de lmparas en instrumentos de absorcin atmica: lmparas
de ctodo hueco y lmparas de descarga sin electrodos. La fuente de radiacin
ms til en espectroscopia de absorcin atmica es la lmpara de ctodo hueco,
cuyo esquema se muestra en la figura 2. Consta de un nodo de wolframio y un
ctodo cilndrico, soldados en un tubo de vidrio que contiene un gas inerte como
argn, a una presin de 1 a 5 torr. El ctodo se fabrica o con el mismo metal del
analito o con un soporte recubierto de ese metal.

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OBJETIVOS
Objetivos Generales
Verificar la presencia de Calcio presente en una muestra de 2g de
complemento nutricional en polvo.
Determinar el rea de la molcula presente en el verde bromocresol.

Objetivos Especficos

Validar el mtodo de determinacin de Calcio por espectroscopia de

absorcin atmica de llama en una matriz de Lantano
Lograr la construccin de la curva de calibracin a partir de una solucin
estndar de 1001 ppm de Calcio.
As mismo preparar unas soluciones de blanco de reactivos.
Calibrar todo el material volumtrico usado en la validacin del mtodo.

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I PARTE: Verificacin de Calcio en muestra de complemento nutricional en
polvo

MARCO TERICO
Calcio:
Es un elemento qumico muy abundante en la naturaleza y, de hecho, su
presencia es imprescindible para la vida humana. La importancia de este elemento
qumico en aguas de abastecimiento pblico, est ligada a la dureza de las aguas
y sus posibles incrustaciones en mquinas y conductos. De forma normal entra en
la composicin de numerosas aguas naturales como cloruros y bicarbonatos.
El calcio es el mineral ms abundante en el cuerpo humano y se necesita en
cantidades importantes. Desempea mltiples funciones fisiolgicas. La funcin
ms importante del calcio es la construccin de los huesos. Junto con el fosforo y
el magnesio, los huesos crecen, se mantiene y son fuertes. Los huesos estn
compuestos principalmente de calcio y fsforo.

Espectroscopia de Absorcin Atmica:

En la espectroscopia de absorcin de llama, una muestra es aspirada en una
llama y es atomizada. Un haz de luz dirigido a travs de la llama, en un mono
cromato, y en un detector que mide la cantidad de luz absorbida por el elemento
atomizado en la llama. Para algunos metales, la absorcin atmica presenta una
sensibilidad superior sobre emisin de la llama. Debido a que cada metal tiene su
propia longitud de onda de absorcin caracterstica, una lmpara de fuente, de
compuestos de este elemento se utiliza, lo que hace que al mtodo relativamente
libre de interferencias espectrales o la radiacin. La cantidad de energa en la
longitud de onda caracterstica absorbida en la llama es proporcional a la
concentracin del elemento en la muestra en un rango de concentracin limitada.
De los Instrumentos de absorcin atmica la mayora tambin estn equipados
para operar en un modo de emisin, que puede proporcionar una mejor linealidad
para algunos elementos.
Pero en el caso del calcio se debe operar en modo de absorcin, ya que
proporciona una mejor linealidad para estos elementos.
A continuacin, se muestra el diseo de los espectrofotmetros de absorcin
atmica tpicos de un solo haz y de doble haz

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Figura N1: Espectrofotmetro de llama, diseo de un solo haz.

Figura N2: Espectrofotmetro de llama, diseo de doble haz.

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Foto N3: espectrofotmetro de absorcin atmica marca Varian AA 240 (Foto del
espectrofotmetro de absorcin atmica de la sala de Espectrofotometra)

Materiales
8 matraces Erlenmeyer de 50 ml
1 pisceta
Pipetas de aforo de 1,2,3,5 ml
Propipeta
Micropipeta
1 bureta clase A de 50 ml
Argolla para bureta
Muestra de complemento
nutricional en polvo (2g).

Reactivos
Solucin de Ca 1001 ppm
Solucin de HCl 1% (v/v)
Solucion de HCl 3M
Lantano
Equipos
Espectrofotmetro de absorcin atmica marca Varian AA 240

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Procedimiento operatorio

A.- Determinacin de Ca
- Preparar varias disoluciones de Ca, entre 1 y 5 ppm, en matraces de 50 ml,
conteniendo todas ellas un 0.25% de La y 1%(v/v) de HCl. Para este fin utilizar
una disolucin intermedia de calcio de 50 ppm, preparada a partir de la de 500
ppm. Enrasar con agua milli-Q. Preparar un blanco de la misma forma.
- En un matraz de 50 ml pipetear 4 ml de agua del grifo, los volmenes necesarios
de disolucin de La y de HCl 3M para que al final la concentracin de los mismos
sea la misma que en los patrones y completar hasta el enrase con agua. Preparar
tres rplicas.
Para la muestra:
- Se pesaron 0.4 gramos de muestra y se prepar una solucin en un vaso
100 ml.
- Se preparan tres muestras, agregndoles las curvas.

En el equipo de AA:

- Encender el espectrofotmetro de AA e introducir los parmetros de trabajo para

medir en condiciones ptimas, ajustar el cero de absorbancia con agua. Aspirar
las disoluciones patrn y la muestra problema, y medir sus absorbancias

- Se procedi a realizar la curva de calibracin

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Clculos
Para llevar mi solucin estndar de Ca de 1001 ppm a 50 ppm
C1 * V1 = C2 * V2
1001 ppm * V1 = 50 ppm * 100 ml
Despejando V1:
V1= 5 ml
Entonces, debemos tomar una alcuota de 5 ml de la solucin de Ca de 1001 ppm,
para la dilucin de Ca 50 ppm y as realizar nuestra curva de calibracin.
Luego realizamos nuestra curva con los datos de la tabla.
Resultados

Estndar Abs
Rplica Abs
Cero cal -0,0336
1 -0,0441
Patrn 1 0,0141
2 -0,0443
Patrn 2 0,0396
3 -0,0431
Patrn 3 0,0669

Patrn 4 0,1054

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 Grfico de obtenido Origin :

0,12

0,10

0,08
Absorbancia

0,06

0,04

0,02

0,00

1 2 3 4
Concentracin

Se determina el valor de Epsilon:

Segn la ecuacin de la recta:
m(pendiente) = 0.03308
por lo tanto,
: 0.03308

Para calcular la concentracin de Calcio en nuestra muestra problema

complemento nutricional en polvo, se procedi a utilizar la ley de Lambert Beer:
A=C* *l

Despejamos C:
A = Abs. promedio obtenidas de las rplicas,
0.043833
C = l = = -1,325060..
0.033081

La concentracin final nos dice que no hay presencia de Calcio en la

muestra de complemento nutricional en polvo VIVACTIV.

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II PARTE: Determinacin del tamao de la molcula de Verde Bromocresol

MARCO TERICO
ESPECTROSCOPIA UV- VISIBLE
La espectroscopia visible es una de las tcnicas ms ampliamente y ms
frecuentemente empleadas en el anlisis qumico. Para que una substancia sea
activa en el visible debe ser colorida: el que una substancia tenga color, es debido
a que absorbe ciertas frecuencias o longitudes de onda del espectro visible y
transmite otras ms.
Por ejemplo: una solucin es amarilla debido a que dentro de la regin visible
absorbe radiacin en el rango de 435 a 480 nm.
En este rango de longitud de onda se encuentra el color azul del visible, por lo
que este compuesto absorbe el color azul y transmite los colores complementarios
que dan origen al color amarillo de la solucin mencionada. La absorcin y
transmisin de las longitudes de onda de la regin visible de esta parte del
espectro no es la misma en substancias que den diferentes tonalidades de
amarillo, por lo que podemos tener una gama diferente de tonalidades como:
amarillo canario, amarillo limn, amarillo plido, etc.
Procedimiento
- Se tom una alcuota de 1 ml del indicador, la cual se llev a un volumen de aforo
de 100 ml con un tampn ph 7, se agit y se llev al espectrofotmetro.

- Se registraron los datos, obteniendo la siguiente grfica

Materiales
1 matraz de aforo de 100 ml
1 pisceta
1 pipeta de aforo 1 ml

Reactivos
Verde de Bromocresol 0,04 % p/v
Tampn ph = 7

Equipos

Espectrofotmetro Genesys 6

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Clculos y Resultados
Para obtener el rea de una molcula:
A partir de la concentracin del indicador:
0,04 % p/v, es decir por cada 100 ml de solucin hay 0,04 gramos de verde
de bromocresol.

0,04 g 100 ml de solucin

X 1000 ml de solucin
X = 0,4 gramos/litro

A partir del peso molecular (698,01 g/mol) se calcul la concentracin

molar:
Moles= gramos/ peso molcular = 0,4/698,01= 5,73x10-4 moles
C= moles/litro= 5,73x10-4 M

Aplicando la ley de Lambert Beer:

A=lC

0,7123
= = = 1243,106 (1000 cm3/mol x cm)= 1,24 x 106 cm2/mol
lC 1 x 5,73x104
1 mol 6,02x1023 molculas 1cm2
1 molcula X
1,24 x10^6
X= = 2,06 x10-18 cm2/molec.
6,02 x10^23

Por lo tanto, el rea de la molcula es de 2,06 x10-18 cm2/molec.

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Resultado obtenido desde Origin:

Solucion de Verde Bromocresol, Resultado al mirar en el equipo, la

aforado con tampn ph 7 Longitud de onda = 617.0 nm
Abs = 0.717

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