Gentica

Bacteriana

Prof. Thiago Maniglia

 Caractersticas Gerais
Genoma:
nico Cromossomo circular
Minicromossomos plasmdeos 5-11 por clula
Epissomos
Monoplide multinucleada
Herana:
Transferncia de Genes Unidirecional
Reproduo assexuada por diviso simples sem mitose e meiose
Recombinao bacteriana
Variabilidade Gentica por mutao e processos parassexuais
Cromossomo Bacteriano

Plasmdeo
 Variabilidade Gentica em Bactrias
Tamanho, cor e textura da colnia; e metabolismo (fonte de carbono,
sntese de metablicos essenciais e resistncia a drogas)
Colnia normal e petite
Coloridas
Lisa e Rugosa
Lac+ e Lac- (lac+ e lac-)
Trp+ e Trp- (trp+ e trp-)
amps e tets ; ampr e tetr
Recombinao Bacteriana
 Mecanismos de Troca Gentica em Bactrias
3 processos parassexuais
Transformao

Conjugao

Transduo
Como determinar qual processo est ocorrendo
1 passo: adio de Dnase
2 passo: Contato Celular Necessrio
Experimento de Recombinao por contato
 Transformao
Experimento de Griffith 1928 Streptococcus pneumoniae
Tipo S produz capsula e virulento
Tipo R no produz capsula e no virulento
Ex:IR,IS, IIR, IIS, IIIR, IIIS
Sistema imune reconhece a capsula e produz anti-corpos especfico para
aquele tipo.
Griffith injetou pneumococcus tipo IIIS mortos pelo calor e IIR em
camundongos.
Comundongos morriam e era recuperado pneumococcus tipo IIIS
Infectados apenas com IIIS mortos por calor no morria
 A transformao s ocorre em bactrias competentes!!!
E. coli no capaz de fazer transformao normalmente.
Recombinao por Transformao
Conjugao
Conjugao por
Fator F Autnomo
Conjugao por Fator F integrado
Hfr (alta frequncia de recombinao)
Experimentos com a bactria Hfr H (William Hayes)
Hfr H gentipo: thr+ leu+ azis tons lac+ gal+ strs
x
F- - gentipo: thr- leu- azir tonr lac- gal- strr

Treonina
Leucina
Azida de sdio
Bacterifogo T1
Lactose
galactose
Estreptomicina
Experimentos com a bactria Hfr H (Wollman e Jacob, 1957)
Aps reproduo retirou amostras em tempos diferentes e agitou
vigorosamente
Plaqueadas em meio contendo estreptomicina e sem treonina e leucina
Apenas as clulas recombinantes com gentipos thr+ leu+ do genitor Hfr e strs
do genitor F- sobreviveram.
As clulas Hfr morriam por falta de resistncia a estreptomicina e as clulas F-
por no conseguirem sintetizar treonina e leucina.

Hfr H gentipo: thr+ leu+ azis tons lac+ gal+ strs

x
F- - gentipo: thr- leu- azir tonr lac- gal- strr
A partir do experimento de Wollman e Jacob foi possvel fazer uma mapa
genmico de bactria atravs do tempo de recombinao
Transduo
Experimento de Zinder e Lederberg (1952)
Salmonella typhimurium auxotrfica dependente de fenilalanina,
triptofano e tirosina. E Salmonella typhimurium dependente de
metionina e histidina.
Quando cultivadas juntas produziu linhagens prototrficas mesmo em
meio com DNAse e separadas em dois braos de tubo em U.
Estudos posteriores mostraram que uma das linhagens foi infectada
com o bacterifago P22.
O vrus levou os genes de sntese de aminocidos de uma bactria
para a outra por recombinao.
Transduo
Proliferao dos Vrus (T4 de E. coli)
Ciclo ou multiplicao Ltica
Ciclo ou multiplicao Lisognica
Multiplicao Ltica
Provoca a lise celular e morte da bactria.
Fases:
Adsoro: Reconhecimento entre as partculas virais e receptores
celulares
Penetrao: Injeo do DNA do fago no interior da bactria, o
restante permanece preso a superfcie celular
Eclipse: Sntese de RNA e protenas virais e duplicao do DNA viral
Liberao: Montagem dos vrus e lise celular
 Multiplicao Lisognica
No acarreta destruio da clula hospedeira
O DNA do vrus liga-se ao cromossomo bacteriano e se multiplica
juntamente com ele
Nesse estado o vrus denomina-se provrus (profago)
O hospedeiro denominado de bactria lisognica, pois o DNA do vrus
passa para as descendentes e em um determinado momento pode
entrar em ciclo ltico novamente.
Transduo
2 Tipos:
Transduo Generalista: Um fragmento aleatrio do cromossomo da
bactria encapsulado na cabea do bacterifago.
Transduo Especializada: Gene especfico da bactria faz
recombinao com o DNA do fago, formando um cromossomo com
DNA da bactria e do fago. (Partculas de transduo)
Transduo Generalista
Apenas 1 a 2% das partculas de fago produzidas por bactrias
infectadas contm DNA bacteriano.
Apenas 1 a 2% do DNA transferido incorporado ao cromossomo da
receptora por recombinao.
A frequncia de transduo para qualquer gene bacteriano de 1
por 1.000.000 partculas de fago.
Transduo Especializada
(Bacterifago )
Faz a transduo dos gene galactose
e biotina de uma E. coli para outra

Bacterifago 80 faz a transduo

do gene da treonina
Possibilidades no processo da transduo
Fator F
O Fator F pode atuar como o DNA do vrus
O fator F integrado pode ser excisado do Cromossomo da bactria e
levar junto um pedao do DNA bacteriano
Entretanto como no precisa ser encapsulado pode levar vrios genes