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UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ

GALLO
Facultad De Ciencias Biolgicas

rea de Microbiologa y Parasitologa

MICROBIOLOGA DEL SUELO

BACTERIAS ENDFITAS FIJADORAS DE NITRGENO

Alumna
Ravines Arriaga C. Alejandra

Lambayeque, noviembre del 2017


BACTERIAS ENDOFTICAS FIJADORAS
DE NITRGENO
Prctica 3

1. Introduccin
El nitrgeno es el constituyente esencial de las molculas fundamentales en todos los seres vivos y es
el macronutriente ms limitante en el crecimiento de las plantas, porque en el suelo, el 98% est como
formas orgnicas no disponibles para la nutricin vegetal y solo 1-3% es mineralizado en 1 ao, por los
procesos de amonificacin y nitrificacin (Frioni, 2011). El resto es inmovilizado temporalmente por los
microorganismos, se volatiliza como amoniaco o como xidos ntrico y nitroso durante la desnitrificacin,
as como tambin se lixivia en forma de nitratos o aniones que se escurren, porque no son retenidos por
el suelo. A su vez, los nitratos originan eutrofizacin de aguas superficiales y contaminan los mantos
freticos, generando enfermedades a los seres vivos (Menezes, 2009; Pedraza et al., 2010; Salhia, 2010).
Segn su localizacin las bacterias diazotrficas son rizosfricas y endfitas. Las bacterias endfitas
deben encontrarse dentro del tejido vegetal, es decir, traspasar la barrera epidrmica y no causar dao
aparente a las plantas (Aguado, 2012). Segn su estrategia de vida, las bacterias endfitas pueden ser
obligadas y facultativas. Las obligadas dependen del hospedero para su crecimiento, sobrevivencia y
dispersin, mientras que las facultativas cumplen una etapa de su ciclo fuera del hospedero,
generalmente en el suelo Los endfitos pueden ser pasajeros, oportunistas y competentes. Con
frecuencia se limitan al tejido cortical de la raz. Los endfitos oportunistas, muestran caractersticas
particulares en la colonizacin de la raz, por ejemplo, una respuesta quimiotctica, que les permite
colonizar el rizoplano y despus invadir los tejidos vegetales, a travs de grietas formadas en los lugares
de emergencia de las races laterales y puntas de las races; sin embargo, al igual que las endfitas
pasajeras se limitan al cortex radicular.
La colonizacin activa involucra tres pasos. El primero es el acercamiento espacial de la bacteria a la
superficie de la raz a travs del movimiento por quimiotaxis (cidos orgnicos, carbohidratos y
aminocidos excretados por la raz). Luego que la bacteria entra en contacto con la raz, se adhiere y se
ancla en la superficie, multiplicndose y formando microcolonias. Desde este lugar, comienza el segundo
paso o invasin de los tejidos internos, penetrando por las aberturas naturales o por liberacin de enzimas
hidrolticas. Una vez dentro, en el tercer paso, los endfitos se multiplican, colonizando los espacios
intercelulares y pueden permanecer en un determinado sitio o realizar una colonizacin sistemtica por
el sistema vascular o el apoplasto (Beracochea, 2011). En gramneas se han aislado las bacterias endfitas
diazotrficas Gluconacetobacter, Azoarcus, Azospirillum, Enterobacter, Herbaspirillum, Klebsiella,
Burkholderia, Bacillus, Rhizobium, Agrobacterium, Pantoea y Rhanella.
2. Objetivos

Aislar bacterias endfitas fijadoras de nitrgeno en races de cultivos de maz.


Identificar fenotpicamente las bacterias endofticas fijadoras de nitrgeno.
OBTENCIN Y PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA |

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Imgenes. 1) Races obtenidas de un cultivo de Maz. 2) Fragmentar las races en tamaos de 5 cm. 3) Se
depositarn en frascos y sern lavados con 50 mL de agua destilada. 4) Se enjuagaron 4 veces consecutivas
y se sometieron por 1 min a una solucin de alcohol. 5) Se deposit en papel secante para eliminar todo
residuo de solucin y se coloc en bolsas plsticas. 6) El tejido vegetal fue macerado y de l se extrajo 1 mL
con una jeringa para su posterior siembra.

SIEMBRA Y AISLAMIENTO |

1 2 3

Imgenes. 1) Medios LGI, JNFb, LGI-P, JMV. 2) Fueron sembrados con el mililitro de macerado de las races,
slo una gota por tubo. 3) Posteriormente se observ el crecimiento y se hicieron varias resiembras,
repitiendo el proceso.
CONSERVACIN DE CEPAS AISLADAS |

Imagenes. Finalmente se logr aislar una cepa en el agar semi-slido JMV que
presentaban caractersticas tpicas de Burkholderia spp.